JPH0373158A - 哺乳動物に対する臓器又は組織の移植の拒絶を禁止する組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は、哺乳動物において臓器又は組織の移植を禁止
するための組成物に関する。より詳しくは、本発明は、
移植拒絶禁止量のラパマイシンから成る、移植拒絶の禁
止が必要な哺乳動物に投与される、哺乳動物の臓器又は
組織の移植の拒絶を禁止するための組成物に関する。

〈従来の技術〉 免疫抑制処置に由来する拒絶及び感染性合併症は、ヒト
の臓器の同種移植、即ち、同一のホモサピエンス種の２
つの遺伝的に異なった個体の間に行なわれる臓器移植の
主要な原因となっている。

臨床処置に用いられている３つの有効な薬剤即ちアザチ
オプリン、フルチコステロイド及びシクロスポリンの個
別の特異な副作用を最小にするために、これらの各々の
薬剤の少量ずつが、「トリプル療法」として、組合せて
使用されている。このトリプル療法に現用きれている３
て）（１）薬剤のうもで、シフロス氷すンは、最も強力
であるが１．ヒトにおいて構造的な町損壊をもたらすこ
ヒ的ある賢毒症という好ましくない副作用ももっている
。大用量のコルチコステロイド及び抗ｊＪンバ球抗体調
製物（ボリク臼、−ナル又はモノクＤ−ナル）は、拒絶
反応の危機を処置するために用いられる。免疫抑制剤及
び移植拒絶禁止剤ヒして使用するための他の潜在的に有
効な化合物を開発するための多くの研究がこれまでにな
されでいるが、毒性、効力の不足又はこれらの組合せな
どの副作用のたぬ、臨床的な設定においてイｆ用な知の
は未だ見出さ」、１゜ていない。

臓器移植を行なった動物について、菌生成物ＦＫ５０６
が免疫抑制活性を示すことが報告されている（落合等、
移植手法、ｖｏｌ、　ＸＸ、第１珍、２０９〜２１４貞
、１９８８年）、ＦＸ５０６の免疫抑制活性は確認され
ているとしても、晴乳動物例えばネズミ、豚又は犬、及
び霊長類、例えばヒヒにおいての毒性が強すぎるため、
臨床段階の試験に通むまでに業っていない（ｒｉ、　ｓ
ｉ。。Ｊ、コリエ等、移植手法、ｖｏｗ、、　Ｘ、　Ｘ
、　Ｎａ　１．２２．６−２２８頁、１９８８年、）。

前述した慣用の免疫抑制療法に通常附随し尤いる重大な
毒性の副作用なし２に１．受容体においてσ）移植の受
容作を高ぬるために使用可能な、免疫抑制活性を示す化
合物を見出だすことは、非常し、コイ１゛用であるう。

ラパマイシンは、抗菌性及び抗膝瘍性を共１．．゛備え
たストレブｈマイセス・ヒグロスコピクス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｅｅｓ　ｈｙｇｒｏｓｅｏｐｊ、ｃｕｓ）によ
１て産生される、ＦＫ５０６に対する多少のｉ造作の類
似を示す好脂性のマクロライド系抗生物質である（ゼー
ガルＳ、Ｎ、他、抗生物質ジャーナル、ｖｏｌ、。

２Ｂ、７２′７〜７３２頁、１９７５作及びエング、Ｃ
ｐ等、抗生物質ジャーナル、ｖｏｗ、、　３７．１２３
１〜１２３７頁、１９８４年）。

ラパマイシンが２つの実験的なイムノパシー即ち実験的
なアレルギー性脳炎及びアジュバント関節炎並びに液性
の（ＩｇＥ状の）抗体の形成を禁止することが報告され
ている（マーチルＲ，，Ｒ，。

等、Ｃａｎ、　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏ、　Ｐｈａｍａｅｏ
ｌ、　５５．４８〜５１．１９７７年）。ラパマイシン
がおそらく、は。

ＦＫ５０６及びシフ目スポリンからの異なった機構を介
して、ネズミのＴ細胞の活性化を禁止することも最近報
告されている。従って、ＦＫ５０６とシクロスポリンＡ
の両方は、ＩＬ−２の形成を阻止するこ辷によって、免
疫反応の初期の段階において作用することが見出されて
いる。他方では、ラパマイシンは、ＩＬ−２の形成を阻
止しないが。

成長促進リンフ才力インに対する■細胞の応答を禁止す
るこヒによって、免疫反応の後期の段階において作用す
る（スタルッヒＭ、、Ｊ’、等、ＦＡＳＥＢジャーナル
、ｖｏｌ、　３．　　＆３、アブストラクト３４１１．
１９８９年）、更に、ラパマイシンは、ＦＫ５０６の免
疫抑制効果を阻止するが、シクロスポリンＡの免疫抑制
効果は阻止しないこヒも見出された（デュモンＦ、Ｊ、
等、ＦＡＳＥＢジャーナル、ｖｏｌ、　３、　恥４、ア
ブストラクト５２５６．１９８９年）、シかしこれらの
報告には、哺乳動物においての臓器又は組織の移植の拒
絶を有効に禁止するためにラパマイシンを使用しうろこ
とについて、他の教示も示唆もない５３更に、これらの
報告には、ＦＫ５０６及び他の免疫抑制剤に附随する毒
性の副作用が、移植手術において移植の拒絶を禁止する
ための薬剤としてラパマイシンを投与することによって
は、多充分ひき趙こきれないこ辷についての開示も推測
もなされていない。

〈発明が解決しようとする課題〉 本発明の目的は、低毒性の有用な化合物の投与によって
、同種移植受容性を高める（又は、臓器又は組織の移植
の拒絶を禁止する）ことにある６本発明の別の目的は、
移植の拒絶を禁止するための他の慣用の化学療法薬の毒
性を、低毒性の有用な化合物との組合せた投与によって
低減させることにある。

く課題を解決するための手段〉 この課題は、本発明によれば、移植拒絶禁止量のラパマ
イシンから成る、移植拒絶の禁止が必要な哺乳動物に投
与される。哺乳動物の臓器又は組織の移植の拒絶を禁止
するための組成物によって解決される。

〈実施例〉 本明細書において引用された全ての特許及び文献は、援
用によって１本明細書の一部分となる。

本明細書中に使用されている「臓器又は組織の移植拒絶
を禁止する」及びｒ移植拒絶の禁止を持続させる」とい
う表現は、同種移植即ち供給体から受容体（どちらも同
じ種例えばホモサピエンスである）への、即ち種内の、
臓器又は組織の移植において、臓器又は組織の移植の受
容性を高くする（即ち、臓器又は組織の移植拒絶の可能
性を低くする）ことを意味している。

ラパマイシンは、ストレプトミセス属の菌例えばス　レ
プ　ミセス・ヒグロスコピクスから抽出可能な抗菌性抗
生物質である。ラパマイシンの調製法は、ゼーガル等の
米国特許第３９２９９９２号及び第３９９３７４９号に
開示されている。ラパマイシンのモノアシルおよびジア
シル誘導体とその製法は、ラキットの米国特許第４３１
６８８５号に開示されている。更に、ステラ等の米国特
許第４６５０８０３号には、ラパマイシンの水溶性のプ
ロドラッグ、即ちラパマイシン誘導体（ラパマイシンプ
ロドラッグ即ちグリシンプロドラッグ、プロピオネート
プロドラッグ、及びピロリジノブチレートプロドラッグ
を含む）が開示されている。

本発明による組成物においては、前出の米国特許第３９
２９９９２号、第３９９３７４９号、第４３１６８８５
号及び第４６５０８０３号（これらは、引用によって本
明細書の一部分となる）に記載されている、天然及び合
成のラパマイシン、遺伝子工学によるラパマイシン並び
にラパマイシンの全ての誘導体及びプロドラッグが用い
られる。

本発明者は、他の慣用の免疫抑制剤例えばアザチオプリ
ン、コルチコステロイド及びシクロスポリンに附随する
毒性の副作用なしに哺乳動物においての免疫機構を抑制
するなどによって、移植拒絶を禁止する上の、ラパマイ
シンの効力を確めることができた。これらの毒性の副作
用には、腎毒症、重症の白血球減少症、血小板減少症、
クッシング症候群及び糖尿病が含まれる。

ラパマイシンが、哺乳動物においての同種移植拒絶即ち
同じ種の供給体から受容体への臓器又は組織の移植にお
いて同種移植拒絶を低減させもしくは禁止することが見
出された。移植される内蔵及び組織の例には、心臓、肝
臓、腎臓、ひ臓、肺、小腸、すい臓、皮膚骨髄並びにこ
れらの組合せが含まれる。

本明細書中に使用されているｒ移植拒絶禁止量」という
表現は、重い毒性の副作用例えば腎毒症又は腎不全等を
ひき起こすことなしに哺乳動物の移植拒絶を禁止しかつ
移植拒絶禁止を持続させるために投与可能なラパマイシ
ンの量（又は、移植拒絶を禁止するために１以上の他の
化学療法薬と組合されるラパマイシンの量）を意味する
。当業者には明らかなように、臓器又は組織の移植をこ
れから受けるか、又は既に受けた人に投与される移植拒
絶禁止化合物の用量は、体重、年令などの個体の特性並
びに移植される臓器又は皮膚の種類などの他の要因を含
めた種々の要因によって変動する。

本発明の一局面によれば、ラパマイシンの移植拒絶禁止
量は、約０．５〜約５０■／ｋｇ／日、好ましくは、約
１〜約５■／ｋｇ／日である。別の研究によれば、拒絶
禁止のためのラパマイシンの有効な治療用量は、約０．
０１〜約１０ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、約０．０２
５〜約５■／ｋｇ／日である。この用量は、間欠的に、
例えば隔日又は３日おきに与えてもよい１ｍ器又は組織
の移植拒絶を禁止するための１以上の他の化学療法薬と
組合せて投与する場合のラパマイシンの有効治療量は。

前記の値よりも少なくてよい１本発明の別の局面によれ
ば、ラパマイシンの移植拒絶禁止量は、必要に応じて約
１日ないし約１８０日又はそれ以上の期間中投与する。

当業者には明らかなように。

移植拒絶を禁止するための化合物、ドラッグ、薬剤その
他は、移植後の不特定の期間中、場合によっては、移植
対象の哺乳動物例えばヒトの一生に亘って投ｌテしても
よいが、それはもちろん哺乳動物が重大な副作用なしに
、化合物、ドラッグ、薬剤その他に１分によく耐えられ
ることが条件である。

ラパマイシンは、経口的にか又は非経同的に、例えば筋
肉注射、蝮腔内注射、皮下注射又は静脈注射によって、
哺乳動物の移植対象に投与７することができる。好まし
い投与経路は経［、」的な経銘である。

本発明によれば、ラパマイシンは、無菌の水溶液又は水
性０分散体及び注射可能な無菌の溶液又は分散体を調製
するための無菌の粉末のような、非経口的な注射用に適
した薬学的形態を含めて、神々の薬学的形態において投
与することができる。

更に、ラパマイシンは、経１．１投与に便利なように、
錠剤、キャブレット、カプセルその他として投与するこ
とかできる。ラパマイシンは、限定的でない例として、
油例えばオリーブ油、アルコ・−ル、プロピレンゲｉ」
コール及びポリエチレングリコール並びにケモフオーＥ
Ｌ（ＢＡ、ＳＦ）もしくはポリソルベーｈ８０のような
界面活性剤を含む薬学的に相容性又は受容性をもったキ
ャリヤ中において投与してもよい。

本発明の更に別の有用な特徴は、他の慣用されるドラッ
グ療法例えばｌ−リプル療法、アザチオプリン（米国エ
ヌ・シー・リサーチ・トライアングル・パーク、バ０−
ズ・ウェルカム社、登録商標名イムラン）、コルチコス
テロイド（米国ミシガン州力うマズー、アップジョン社
、商標名ソルーメドロール）、シクロスポリン及びシフ
臼スポリンＡ（米国＝ニーシャーシー州イースト・ハノ
バ、サントス・ファーマス−・テイカルズ社、１商標名
サンデイミューン）及びＦＫ５０６（大阪府、藤沢薬品
（株）、商標名フジマイシン）と組合せてラパマイシン
を投与するこεに存する。移植拒絶を禁止するためのこ
れらの他の慣用される化学療法薬にラパマイシンを組合
せる場合には、移植前又は移植後に哺乳動物の移植対象
においての移植拒絶を禁止し、更に移植拒絶の禁止を持
続させるために、これらの毒性のドラッグ又は薬剤を比
較的少ない量使用するだけでよいので、化学療法薬の毒
性を有利に低減させることができる。

本発明は、ｂ）移植禁止のための１以上の化学療法薬の
成る量と組合されたａ）ラパマイシンの成る量ヒから成
り、ａ）、ｂ）の巻量の合計量が移植拒絶を禁止しかつ
移植拒絶を持続させるのに有効な量となるようにした、
移植拒絶の禁止及びセの持続を必要εする哺乳動物に投
与される哺乳動物の臓器又は組織の移植の拒絶を禁止す
るための組成物を提供する。ここで、成分ａ）、ｂ）単
独では、移植拒絶を禁止したりその禁止を持続したりす
るのに有効でないことがあるとしても、成分ａ）、ｂ）
の組合せは、移植拒絶を禁止したりその禁止を持続した
りするのに有効である。

従って、本明細書中において使用されるこれらの他の化
学療法薬には、アザチオプリン、コルチコステロイド、
シクロスポリン（及びシクロスポリンＡ）ポリクローナ
ル及びモノクローナル抗リンパ球抗体（ＯＫＴ３）並び
にＦＫ５０６又はこれらのものの任意の組合せが含まれ
る。

本発明の前述した挿々の特徴は、移植される臓器又は組
織の種類、移植拒絶を禁止したりその禁止を持続させた
りするための有効量、投与モードもしくは投与経路並び
に処置の期間などは、移植拒絶を禁止して移植拒絶の禁
止を持続させるための１以上の他の化学療法薬ヒ組合せ
てラパマイシンを投与することによる臓器又は組織の移
植拒絶の禁止方法に適用される。

なお、これらの他の化学療法薬は、ラパマイシンＬ共に
、連続的又は間欠的に投与することができる。また投与
経路もラパマイシンのために用いられるものヒ相違させ
てもよい。即ち、これらの他の化学療法薬は、移植対象
の哺乳動物にラパマイシンを経口的に投与する際に、非
経口的に投−午するこヒができる。

次に本発明をい（つかの限定的でない実施例によって一
層詳細に説明する。

実施例１　獲塁史−期Ｅ目触１Ｌ量−究一互工＆　　Ｄ
Ａ供給体からＰＶＧ受容体に、異所性心臓同種移植を行
なった。ＤＡ、ＰＶＧはラツトの特別の血統である。ラ
パマイシンは、術後３〜６日の間のみドラッグを受けた
第６群を除いて術後最初の１０日間オリーブ油中におい
て筋肉注射によって投与した。移植生存を日々の触診に
よって評価した。

大象立　　最初の毒性の研究に基づいて、ラパマイシン
が免疫抑制性か否かを試験する上に、２つの実験、即ち
、腎移植後の犬に短期間投与する実験又はやはり腎移植
後の豚に不特定期間投与する実験が適切と考えられた。

見　豚の場合、異所性の腎移植モデルを使用し、供給体
と受容体との間の組織不適合性を確めるための混合リン
パ球培養（ＭＬＣ）を行なった。無処置の対照平均生存
時間は１０日よりも短かい。

ラパマイシンは、術後の第１日に始まって毎日経口的に
２■／ｋｇの用量において投与した。

Ｕ　且盈蔓藍立亙久 ΣｘＪ＝　　ラットについての同種移植生存を表工に示
す。

注・・・ラパマイシンはオリーブ油中筋肉注側によって
投与した（　］、、　８　ｍｇ／　ｍＱ及び１０ＩＩＩ
ｇ／ｌ１ｌＩＱ懸濁を使用した）。

使用したラットの血統（ＤＡ供給体、Ｐ、ＶＧ受容体）
。

対照拒絶時間（ｎ＝１０）＝７’、４目表≦Ｌｐ説−明
− 前述の外科的技術を用いて、ＤＡ供給体からＩ）　Ｖ　
Ｇ受容体に、異所性の心臓同種移植をラットのくびに行
なった（１．ヘロン著、　Ａｅｔａ　Ｐａｔｈｏｌ。

Ｍｊ、ｅｒｏｂ、ｉｏ、　５ｅａｎｄ、　７９　：　３
６６、１９７１年）。

ラパマイシンを最大濃度１゜５Ｂ／ＩＩＩＱにおいて、
オリーブ油中に溶解させ、０．５山／ｋｇから５０ｍｇ
／ｋｇの範囲で変化する投与スケジュールに従って。

１０日間つづけＣ（最後の群については３〜６Ｂについ
て１０！１ｇ／ｋｇの投’ｉｌｋにおいて）毎日筋肉注
射によって投与した。移植の生存は、心臓の毎日の触診
によって評価した。

ラパマイシンは、試験された全ての用量について、同種
移植の生存を長くした。体重は多少減少したが、これは
ＦＫ５０６をラットに投与した場合に見られるほど顕著
ではなかった。

火 犬の場合、全ての用量レベルにおいて肪管炎がひき起こ
され、０．２５Ｂ／ｋｇより多い用量の場合、非常に重
い症状が発現されたため、２８日間の研列の終了前に殺
した。このように用量を多くすると１、豚管炎は、消化
系を胃し、興味あることに、血小板減少症をひ含起こし
た。リンパ球組織の細胞、特にＢ細胞の著しい減少を生
じた。犬の場合、消化系に特別の好みを示すε思われる
詠管炎による毒性は、この特別のモデルにおいてドラッ
グの免疫抑制効果を評価するこεを不可能にした。ラパ
マイシンに対するこの抽特異な応答は、本発明者及び協
力者の同様の未刊の論文の論旨を確認するものであった
。

界 生存及び死因を現在のクレアチニン値と共に表２に示す
。

巴しな□−説−朝− 垂直位の腎移植を反対側の腎創出辷共に、前述したよう
に〔カルネＲ，Ｙ、等、Ｂｒｊ、ｔ、　ｊ’、　Ｓｕｒ
ｇ。

５９　：　９６９〜９７７　（１９７２））豚について
行なった。供給体及び受容体の対を、親の異なる量産群
から得て、混合リンパ球反応（ブラッドレーＢ、Ａ等、
組織抗原、４８２８３〜２９０゜１９７４年）によって
、主要組織適合性コンプレックス（ＭＩｉＣ）において
不適合性を確認した。

ラパマイシンは、濃度１０＋＋＋ｇ／ｍＱにおいて、オ
リーブ油に溶解させ、２＋ａｇ／ｋｇ／日において経「
１投与した。

豚の場合、１頭は加速された急性の拒絶によって死Ｔ１
．別の１頭は、技術的な失敗によって死ｔした。残りの
８頭は、Ｒ初の約１０％の体重の損失後に良好な回復を
示した。その後、約５０日日に５頭は、食欲欠乏を示し
、下痢により不健康となったため殺すことになった。こ
れらの豚は、組織検査により、多分過度な免疫抑制のた
め間質性肺炎にかかっていることが示され、これが不健
康の原因とされた。更に腎組織の検査は、４日間ドラッ
グを受けなかった１頭がわずかな拒絶を示したことを除
いては、拒絶の証左を示さなかった。

これらの動物の結腸の組織学的な検査は、粘膜及び粘膜
下組織の浮腫を示したが、詠管炎又は潰瘍化は示さなか
った。従って、これは肺炎の系統的効果に対して２次的
なものと考えられた。残りの３頭は全て生存し、全ての
投与は表２に示すように中止された。

羞来 ラパマイシンは、免疫抑制性であり、より大きな用量で
より有効であっても、ラットの場合。

０．５ｍｇ／ｋｇの用量まで無毒性であった。

豚の場合、毒性の研究の結果は、両方の豚共体重が増し
たので、１ｍｇ／ｋｇの用量では、ドラッグに対する耐
容性が認められた。組織検査によって、結腸炎が見られ
たが、詠管炎は認められず、その兆候もなかった。ラパ
マイシンは、免疫抑制剤として有効であったが、２ａ＋
ｇ／ｋＨの５０日間の連続投与の後、５０％の動物は過
度な免疫抑制のため、間質性肺炎を起こしたので殺され
た。しかし、どの動物にも結腸の潰瘍形成又は味管炎の
証左は見られなかった。従って、将来の研究では、血液
ドラッグレベルのモニターが有用となろう。

要約するとラパマイシンは、哺乳動物の移植対象におい
ての同種移植拒絶を禁止するために使用可能な、非常に
有効な免疫抑制剤である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）移植拒絶禁止量のラパマイシンから成る、移植拒絶
   の禁止が必要な哺乳動物に投与される、哺乳動物の臓器
   又は組織の移植の拒絶を禁止するための組成物。 ２）移植拒絶を禁止しかつ移植拒絶の禁止を持続させる
   のに有効な量のラパマイシンから成る、移植拒絶の禁止
   及びその持続が必要な哺乳動物に投与される、哺乳動物
   の臓器又は組織の移植の拒絶を禁止するための組成物。 ３）ｂ）移植禁止のための１以上の他の化学療法薬の或
   る量と組合されたａ）ラパマイシンの或る量から成り、
   ａ）、ｂ）の各量の合計量が移植拒絶を禁止しかつ移植
   拒絶を持続させるのに有効な量となるようにした、移植
   拒絶の禁止及びその持続が必要な哺乳動物に投与される
   。哺乳動物の臓器又は組織の移植の拒絶を禁止するため
   の組成物。