JPH0348626A - 抗炎症および／または抗アレルギー剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、有用な非ステロイド系抗炎症および／または
抗アレルギー剤に関する。さらに詳しくは、生体内物質
であるＳ−（α、β−ジカルボキシエチル）グルタチオ
ンまたはそのエステル誘導体もしくはこれらの薬理学的
に許容で入る塩を含有してなる有用な抗炎症および／ま
たは抗アレルギー剤に関する。

〔従来の技術〕

従来、種々のステロイド系抗炎症剤および抗アレルギー
剤が知られている。これらステロイド剤は強力な抗炎症
作用または抗アレルギー作用を示すが、長期間多量に投
与すると、感染抵抗力の低下や糖尿病を悪化させ、とき
に予期せぬ生命の危機を招くなど重篤な副作用を引き起
こすことがある。このため、これらステロイド系の抗炎
症剤または抗アレルギー剤を長期間にわたって連続投与
する場合、患者の経過観察をしながら慎重に行う必要が
あるという欠点を有している。

これに対し、強力な抗炎症作用または抗アレルギー作用
を有しかつ上記のような副作用のない非ステロイド系抗
炎症剤および抗アレルギー剤を求めて広範囲に研究開発
がなされているが、これら非ステロイド製剤も潰瘍等の
胃腸障害を引き起こすなどの副作用を示すことがあり、
しかもその薬効がステロイド系薬剤に比べ不充分である
という問題点があり、未だ充分満足すべきものではない
。

〔発明が解決しようとする問題点〕

そこで、本発明者らは、上記のような欠点のない強力な
抗炎症作用および抗アレルギー作用を有する化合物を求
めて、鋭意検索した結果、生体内化合物であるＳ−（α
、β−ジカルボキシエチル）グルタチオンおよびそのエ
ステル誘導体が意外にも極めて強力な抗炎症作用および
抗アレルギー作用を示しかつ安全性が高いことを見出し
、これらの新知見に基づいて本発明を完成するに至った
。

〔課題を解決するための手段〕

すなわち、本発明は、 次の式 ％式％ 〔式中、Ｒは同一または異なって水素または低級アルキ
ル基を示す。〕で表される化合物またはその薬理学的に
許容できる塩を有効成分として含有することを特徴とす
る抗炎症および／または抗アレルギー剤に関する。

本発明製剤の有効成分のうちＳ−（α、β−ジカルボキ
シエチル）グルタチオンはり、　Ｈ，Ｃａｌａｍおよび
Ｓ、　Ｇ、　Ｗａｌｅｙ　（Ｂｉｏｃｈｅｍ、　Ｊ、　
　８６　２２６（１９６３））によって牛水晶体から発
見された生体内化合物であるが、その薬理作用について
は殆ど知られていないのが現状である。本発明者らは、
さきに本化合物が血液凝固阻止作用並びに血小板凝集抑
制作用があることを見出している（特開昭６３−８３３
７、特願平１−７９９５６）。

式中のＲは同一または異なって水素または低級アルキル
基を示し、アルキル基の炭素数としては１ないし１０が
好ましい。アルキル基における炭素鎖は直鎖でも分岐鎖
でも環状でもよくさらに環状部分を含んでいてもよい。

すなわちアルキル基としては、メチル、エチル、ｎ−プ
ロピル、ｉプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、５ｅｃ
−ブチル、ｎ−ペンチル、■−エチルプロピル、ｉ−ペ
ンチルなどが挙げられる。

本化合物は遊離酸として、あるいは薬理学的に無毒性の
塩、たとえば、ナトリウム塩、カリウム塩などのアルカ
リ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩などのアルカ
リ土類金属塩として種々の用途に供することができる。

本化合物中に存在するカルボキシル基のうち全部または
その一部が塩型となっているものを本製剤調製のため適
宜使用することができる。

本製剤には、目的と必要に応じて、本活性成分のうち１
種または２種以上を適宜組み合わせて含有させてもよい
。

本化合物はたとえば次のようにして得ることができる。

Ｓ−（α、β−ジカルボキシエチル）グルタチオンは酵
母や牛水晶体等に存在するので、それらから公知の方法
で抽出、単離精製することにより得ることができる。合
成的手段としては、たとえば、原料化合物であるグルタ
チオンとマレイン酸各々等モルを水溶液またはアルコー
ル性水溶液中加温または室温下で１〜２日間放置するこ
とによりＳ−（α、β−ジカルボキシエチル）グルタチ
オンが得られる。同様にして、マレイン酸モノエステル
またはマレイン酸ジエステルを使用するとそれぞれ対応
するＳ−（α、β−ジカルボキシエチル）グルタチオン
エステル誘導体が得られる。このようにして得られるこ
れら化合物はいずれも分子中に不斉炭素原子を有するの
で、光学異性体が存在する。

本製剤の活性成分として使用される本化合物は後記の実
施例１〜３から明らかなように低濃度で強力な抗炎症作
用および抗アレルギー作用を示す。

しかも本化合物は生体内物質およびそのエステル誘導体
であるため、後記の実施例４から明らかなように極めて
毒性が低く、安全性に侵れ、各種の投与形態で種々の炎
症性疾患やアレルギー性疾患に有利に使用することがで
きる。

本製剤によって治療されうる炎症性疾患としては、たと
えば慢性関節リウマチ、変形性を椎症、変形性関節症、
腰痛症、痛風発作、急性中耳炎、膀胱炎、前立腺炎、歯
痛、葡萄膜炎や副鼻腔炎などが挙げられる。また、本発
明の製剤を適用しつるアレルギー性疾患としては、たと
えば気管支性喘息、花粉症、アレルギー性鼻炎、食事性
アレルギー性胃炎、アレルギー性下痢、潰瘍性大腸炎、
口内炎、結節性動脈周囲炎、閉塞性動脈内膜炎、心内膜
炎、尋麻疹、湿疹、接触性皮膚炎、フリクテン、交感性
眼炎、アレルギー性結膜炎およびアレルギー性角膜炎な
どの各種疾患があり、それらの疾患の治療に有利に使用
することができる。

本発明の製剤は前記したような炎症性疾患、アレルギー
性疾患の治療のため、経口的にあるいは非経口的に疾患
に応じて適宜に使用される。製剤の形態としてはたとえ
ば塗布剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、軟膏、クリーム剤
、湿布剤、散布剤、噴霧剤、リニメント剤、座薬等の外
用剤、液剤、散剤、カプセル剤、錠剤、細粒剤、顆粒剤
等の内服剤および注射剤などいずれの形にも公知の方法
により適宜調製することができる。これらの製剤には通
常用いられる結合剤、崩壊剤、潤沢剤、増粘剤、再吸収
促進剤、界面活性剤、等張化剤、安定化剤、保存剤、乳
化剤やｐＨ調整剤等の賦形剤を適宜使用してもよい。

本活性成分の用量はその化合物の種類、患者の年令、体
重、その剤型や適応症状等によって異なるが、たとえば
注射剤の場合成人１日１回１〜１００　ｍｇ程度、内服
剤の場合は、成人１日数回、１回量約ｌＯ〜１０００ｍ
ｇ、外用剤の場合は、たとえば約０、１〜５（Ｗ／Ｗ）
Ｘの濃度として必要に応じて１日数回程度投与するのが
よい。

本発明の薬剤には本発明の目的に反しないかぎり、その
他の抗炎症成分や抗アレルギー成分および別種の薬効を
奏する成分を適宜含有させてもよい。

以下、実施例および製剤実施例を挙げて本発明の詳細な
説明する。

〔実施例１〕 ラットカラゲニン結膜浮腫に対する効果本実験には体重
約１３０ｇのウィスター系雄性ラットを用いた。Ｓ−（
α、β−ジカルボキシエチル）グルタチオン（以下ＤＣ
Ｅ−ＧＳと略称する。

）を生理食塩液に溶解し水酸化ナトリウムによりｐＨ７
に調整したものをラット尾静脈より３．１０．３０ｍｇ
／ｋｇを投与（対照には生理食塩液）　、ＤＣＥＧＳジ
エチルエステル体、ＤＣＥ−ＧＳモノエチルエステルナ
トリウム、ＤＣＥ−ＧＳ：）ｎ−ブチルエステルナおリ
ウム及びグルタチオン（以下ＧＳＨと略称する。）をそ
れぞれ３０ｍｇ／ｋｇを投与（対照には生理食塩液）し
、１後目ベンドパルビタール麻酔下１％カラゲニン溶液
をラット眼瞼結膜下に５０μｌ注射した。その３時間後
ラットを屠殺して結膜浮腫を採取し、重ｉを測定した。

結果： ＤＣＥ−ＧＳはラットカラゲニン結膜浮腫を用量依存的
に抑制し、強力な抗炎症効果が認められた。また他のＤ
ＣＥ−ＧＳエステル誘導体３種も有意に浮腫重量を抑制
し、抗炎症効果が認められた。しかしながらＧＳＨには
抗炎症効果は認められなかった。

第１表 生理食塩液 ７１．７±３．６ 第２表 生理食塩液 ７３．７±２．９ ｎ・１０、生理食塩液に対する有意差：　＊　ｐ＜０．
０１、＊専ｐ＜Ｑ、００１゜ 〔実施例２〕 ラット腹腔浸　細胞からのヒスタミン遊　抑制用 （１）　　ラット腹腔細胞浮遊液の・。製体重２５０〜
２８０ｇのＳＤ系雌雄性ラット使用して、５ｕｌｌｉｖ
ａｎらの方法に従ってラット腹腔細胞を採取、分離した
。まず、ラットを断頭放血致死させた後、直ちに腹部の
毛を剃り、皮膚を数ｃｍ切開し、筋肉をピンセットで持
ち上げながら、マストセルメディウム（ＭＣＭ）ｌｏｍ
ｌを１８Ｇ針を用いて腹腔内に注入し、９０秒間軽くマ
ツサージした。その後、開腹してテルモシリンジにて腹
腔液をできるだけ採取した。この時、腹腔液に血液が混
ざったものは試験には使用しなかった。腹腔液はＭＣＭ
に溶解した４０Ｘフイコール（Ｆ　ｉｃｏ　ｌ　ｌ　）
４００（ファルマシア）が２ｍｌ入ったポリカーボネー
ト製チューブに重層し、３０分間室温放置し、４°Ｃで
７０Ｏｒｐｍで１０分間遠心分離し、その後フィコール
（Ｆｉｃｏｌｌ）４００の土石にくる沈査を分取し、Ｍ
ＣＭ約７約７マｌ回洗浄して、ＢＵｒｋｅｒ−Ｔｕｒｋ
計算盤を用いて細胞数を測定し、約１０５個／ｒｎｌに
なるようにＭＣＭで希釈調製した（ラット腹腔細胞浮遊
液）。マストセルの同定は０．０５Ｘ　ｌ−ルイジンブ
ルーで細胞内顆粒を染色することにより行った。

（２）マストセルからのヒスタミン遊離ラット腹腔細胞
浮遊液０．８ｍｌを３７℃、１０分間ブレインキュベー
トした後、試験薬物０．１ｍｌを添加し、さらに５分間
インキュベートして、生理食塩液に溶解したＩＯμｇ　
／ｍｌのコンパウンド４８／８０（シグマ社）０゜１ｍ
ｌを添加した。１０分間インキュベートした後、反応を
停止するため１０分間氷水中で冷却し、４℃、７００ｒ
ｐｒｎ、５分間遠心分離した。そして上清のヒスタミン
の定員は５ｈｏｒｅらの方法を一部変えてＨＰＬＣによ
り行った。

結果： 対照においてヒスタミンの遊離率は７５．　ＯＮでＤＣ
Ｅ−ＧＳは濃度依存的にヒスタミンの遊離を抑制した。

このことからＤＣＥ−ＧＳは強力な脱顆粒抑制作用を有
することが認められた。

第３表 群　　　濃度（Ｍ）　　　遊離率（Ｘ）”　抑制率（Ｘ
）対照 ７５．０±６．７ Ｍｅａｎ　＋　Ｓ、　Ｅ、　（標準誤差）　、ｎ＝３°
対照の試料を煮沸、除蛋白しヒスタミンを完全遊離した
ものを１００Ｘとして求めた。

〔実施例３〕 ラット背部受動　アナフィラキシ−反応に　する作用 本実験には体重約１３０ｇのウィスター系雄性ラットを
用いた。ラットを背部の毛をバリカンにより剃り落とし
、ラット抗血清をラット背部樹内へ注射した。３日後、
ＤＣＥ−ＧＳを尾静派内より３．１０．３０ｍｇ　／ｋ
ｇを投与しく対照には生理食塩液）、１後目抗原である
ＩＮ卵白アルブミンと２ｘエバンスブルーの等量混合液
を１＋′Ｉｌｌ静脈内投与し、受動的アナフィラキシ−
反応を惹起した。３０分後目ットを層殺し、ラット背部
の色素量面積を測定した。

またその部位を採取し、２０ｍ１のホルムアミドで色素
を抽出し、色素量を求めた。

結果： ＤＣＥ−ＧＳはラット背部の色素面積値および色素量を
用量依存的に抑制した。ＤＣＥ−ＧＳは受動的アナフィ
ラキシ−反応を抑制したことから強力な抗アレルギー作
用を有することが認められた。

第４表 Ｍｅａｎ＋：Ｓ、Ｅ、　（標準誤差）、ｎ＝４〜５、　
〈　〉内は抑制率（％）を示す。

生理食塩液に対する有意差；　　＊　ｐ＜０．０５　、
本＊　ｐ＜０゜０１、　＊ネ＊　　ｐ＜０．００１゜ 〔実験例４〕 派内　　による急性毒性試験 体重約２０ｇの雄性ｄｄＹ系マウマウス各群５匹用し、
ＤＣＥ−ＧＳの静脈内注射による急性毒性試験を行った
。投与量は１００．２００．４００．８００．１６００
ｍｇ／ｋｇ（公比２）とした。注射液はＩＮ水酸化ナト
リウムでｐＨを７に調整したものを使用した。その結果
、７２時間の観察において死亡例はなくまた異常行動も
認められなかった。

〔合成例１〕 グルタチオン９．２ｇおよびマレイン酸ジエチルエステ
ル５．６ｇを３０（Ｖ／Ｖ）Ｘエタ／　−１ｕ１５０ｍ
ｌ　ｌ：溶かし、これを２Ｎ水酸化ナトリウム液でｐＨ
６に調整したのち、５０°、約５時間攪拌後、反応液２
滴を取り出し０．０１Ｎ沃素試液１滴を加えて沃素の色
が消えなくなってから硫化水素ガスを導入して一夜放置
する。次に反応液を濃縮して硫化水素ガスを留去したの
ち、水１５０ｍ１を加えて溶かし、これに酢酸銅（ｌ水
塩）６．６ｇを加えて溶かすと徐々に銅塩を析出する。

これを濾取、水洗抜水１５０ｍ１に懸濁して置き、攪拌
下に硫化水素ガスを導入して硫化銅とする。これを濾別
し、濾液を濃縮後、エタノール２００ｍ１を加えて溶か
し、さらに水酸化ナトリウム−エタノール液を徐々に加
えてｐＨ６に調整すると白色結晶が析出する。これを濾
取しエタノールで洗浄、さらに再結晶のため水に溶解し
できるだけ濃縮し、エタノールを加えて析出する結晶を
濾取乾燥する。このようにして、８．５ｇのＳ−（ジエ
チルα、β−ジカルボキシエチル）グルタチオンナトリ
ウム塩を得る。ＴＬＣシリカゲル、Ｒｆ＝０．２８（ｎ
ブタノールニ酢酸；水工４＝１：ｌ）。ＩＲを第１図に
示す。

〔合成例２〕 グルタチオン９．２ｇおよびマレイン酸ジｎ−ブチルエ
ステル７．５ｇを５０（Ｖ／Ｖ）Ｘ−ｒ−タ／　−ル１
５０ｍ１　ｌ：溶かし、合成例１と同様にして反応させ
る。溶媒留去復水１５０ｍ１に溶かし、これに３．３ｘ
酢酸銅水溶液２００ｍ１を加えると水に不溶性の銅塩が
析出する。

これを濾取し水洗後、５０（Ｖ／Ｖ）Ｘエタノール３０
０ｍ　ｌに懸濁して置き、攪拌下に硫化水素を通じて硫
化銅とする。これを濾別した後濾液を濃縮して硫化水素
を除く。再度５０（Ｖ／Ｖ）Ｘエタノール１５０ｍ１に
溶かし、これに２Ｎ＝水酸化ナトリウム液を加えてｐＨ
を約６に調整して濃縮する。これにエタノール、アセト
ンおよびイソプロピルエーテルを加え、析出する白色結
晶を濾取し、アセトンで洗浄し乾燥させる。このように
して、吸湿性結晶のＳ−（ジｎ−ブチルα、β−ジカル
ボキシエチル）グルタチオンナトリウム塩９．７ｇが得
られる。ＴＬＣシリカゲル、Ｒｆ’０．４０（ｎ−ブタ
ノール：酢酸：水＝４：ｌ：ｌ）〔合成例３〕 合成例２と同様にして、反応処理した。２Ｎ−水酸化ナ
トリウムの代わりに炭酸カルシウムを用いて行い、濃縮
残査にアセトンを加えて白色結晶を得る。これをエタノ
ール−アセトンから再結晶して７．５ｇのＳ−（ジｎ−
ブチルα、β−ジカルボキシエチル）グルタチオンカル
シウム塩を得る。ＩＲを第２図に示す。

〔合成例４〕 グルタチオン９．２ｇおよびマレイン酸モノエチルエス
テル４．５ｇを水１５０ｍ１に溶かし、２Ｎ−水酸化ナ
トリウムでｐＨを６．０として合成例１と同様に反応さ
せた後、反応液を濃縮し残査にエタノールを加えて析出
する白色結晶を濾取し再結晶のため水に溶かし濃縮して
エタノールを加えて結晶化させる。

収量８゜０ｇ０ＴＬＣシリカゲル、Ｒｆ＝０．１７（ｎ
−ブタツル・酢酸：水：４・ｌ：１）。

〔製剤実施例１〕　内服錠 ＤＣＥ−ＧＳ　　　　　　　　　　　　　１００ｍｇ乳
糖　　　　　　　　　　　　　　　　　８０　ｍｇデン
プン　　　　　　　　　　　　　　　１７　ｍｇステア
リン酸マグネシウム　　　　　　　３　ｍｇ以上を１錠
分として常法により製造する。必要に応じて糖衣を付し
てもよい。

〔製剤実施例２〕　注射剤 ＤＣＥ−ＧＳ　　　　　　　　　　　　　　　　　　１
　ｇブドウ糖　　　　　　　　　　　　　　　　　　５
ｇ炭酸ナトリウム　　　　　　　　　　　　適量注射用
蒸留水　　　　　　　　　　　　１００　ｍｌＤＣＥ−
ＧＳｌｇを予め注射用蒸留本釣７０ｍ１に溶かし、これ
に炭酸ナトリウムを徐々に加えて溶かし、ｐ［（を６．
５とした後、さらにブドウ糖を加えて溶か化、全量１０
０ｍ１として無菌濾過する。濾液を無菌的に２ｍｌずつ
ガラスアンプルに充填し、溶閉して注射剤とする。

〔製剤実施例３〕　軟膏 ＤＣＥ−ＧＳジエチルエステル ナトリウム　　　　　　　　　　　　　　２０　ｇ白色
ワセリン　　　　　　　　　　　　　２５０ｇステアリ
ルアルコール　　　　　　　　２００ｇプロピレングリ
コール　　　　　　　　１２０　ｇポリオキシエチレン
硬化ヒマシ油６０　　４０．ｇモノステアリン酸グリセ
リン　　　　　　１０　、ｇパラオキシ安息香酸メチル
　　　　　　　１ｇパラオキシ安息香酸プロピル　　　
　　　Ｉｇ製　　　　　　　　　　　　　　　　適量全
　　　量　　　　　　　　　　　　１０００　ｇ〔製剤
実施例４〕　点眼側 Ｄ　ＣＥ−Ｇ　Ｓ　　　　　　　　　　　１．０（Ｗ／
Ｖ）Ｘホウ酸　　　　　　　　　　　　　０．７　　”
酢酸ナトリウム　　　　　　　　　０．２７！塩化ナト
リウム　　　　　　　　　０．５　　ノ／ｐ−オキシ安
息香酸メチル　　　　０．０２ノｌクロロブタノール　
　　　　　　　０．３　　”１０（Ｗ／Ｖ）Ｘ水酸化ナ
トリウム液　　　適量滅菌精製水　　　　　　　　　　
全、１１００ｍｌｐＨ６，５ 以上を混和溶解し無菌濾過して１５ｍ１ずつ点眼液を得
る。

【図面の簡単な説明】

第１図は、Ｓ−（ジエチルα、β−ジカルボキシエチル
）グルタチオンナトリウム塩の赤外線吸収スペクトルを
示す。 第２図は、Ｓ−（ジｎ−ブチルα、β−ンカルボキシエ
チル）グルタチオン力ルンウム塩の赤外線吸収スペクト
ルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １　次の式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒは同一または異なって水素または低級アルキ
   ル基を示す。〕で表される化合物またはその薬理学的に
   許容できる塩を有効成分として含有することを特徴とす
   る抗炎症および／または抗アレルギー剤。