KR0178794B1

KR0178794B1 - 산화형 글루타티온 알킬 에스테르

Info

Publication number: KR0178794B1
Application number: KR1019910024588A
Authority: KR
Inventors: 가즈미 오가다; 다까히로 사까가미; 유우이찌 이소와끼; 히데끼 쓰루오까
Original assignee: 요시다 쇼오지; 센쥬 세이야꾸 가부시끼가이샤
Priority date: 1990-12-28
Filing date: 1991-12-27
Publication date: 1999-04-01
Also published as: DE69125360D1; RU2043994C1; ATE150764T1; EP0497001A2; CA2057734A1; JPH04230698A; CA2057734C; EP0497001A3; ES2099125T3; US5223488A; KR920012110A; JP2921124B2; EP0497001B1; DE69125360T2

Abstract

식 (I) :

(식중, R은 저급 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 산화형 글루타티온 알킬 에스테르 또는 그의 염,

식 (II) :

(식중, R은 상기와 같다)로 표시되는 환원형 글루타티온 모노알킬 에스테르를 수용액중에서 공기, 과산화수소 또는 요오드로 산화시켜 이루어지는, 상기 에스테르의 제조방법, 및 상기 에스테르 또는 그것의 약학적 허용염을 유효성분으로서 함유하는 것을 특징으로 하는 간질환 억제 약학적 조성물 또는 그 방법이 개시된다.

Description

산화형 글루타티온 알킬 에스테르

제1도는 본 발명에 관한 산화형 글루타티온 이소프로필 에스테르의 IR 스펙트럼을 나타낸다.

본 발명은 신규의 산화형 글루타티온 유도체, 더욱 상세히는 산화형 글루타티온 알킬 에스테르 및 그것의 약학적 허용염, 이들의 제조방법 및 이들의 하나를 유효성분으로서 함유하는 간질환억제 약학적 조성물에 관한 것이다.

글루타티온 알킬 에스테르 (환원형) 은 글루타티온에 비하여 생체내, 예를들면 간장이나 신장 등으로의 이행성이 우수하고, 이행후에 가수분해를 받아 글루타티온이 생긴다는 것이 알려져 있다. 글루타티온 모노에스테르 (환원형)에 대하여는 특개소 No. 15870/1986에 기재되어 있지만 산화형 글루타티온 알킬 에스테르, 그 제조방법 및 그 이용에 대하여는 기재되어 있지 않다.

본 발명자 등은 조직 흡수성이 우수할 뿐만 아니라 충분한 안정성을 가지는 글루타티온 유도체를 구하는 많은 연구를 행하였다. 그 결과, 글루타티온 모노알킬 에스테르를 간편한 방법 즉 공기, 과산화수소 또는 요오드로 산화함으로써 안정성이 우수한 산화형 글루타티온 알킬 에스테르가 얻어지며, 이들 화합물이 우수한 약학적 작용을 가지는 것을 발견하였다. 더욱 연구를 거듭함으로써 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 하기의 식 (I) :

(식중, R은 저급 알킬기를 표시한다.)로 표시되는 산화형 글루타티온 알킬에스테르 또는 그것의 약학적 허용염, 이들의 제조방법 및 이들을 함유하는 간질환 억제 약학적 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 있어서 저급 알킬은 1 내지 10 탄소원자의 알킬기가 바람직하다. 그 알킬기로서 직쇄형, 분지쇄형 또는 환상 알킬기의 어느 것도 바람직하게 선택되고, 이들의 조합으로 구성되는 알킬기도 역시 마찬가지로 바람직하게 사용된다.

특히 바람직한 저급 알킬기의 예로서는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, 시클로프로필, n-부틸, t-부틸, sec-부틸, n-펜틸, 1-에틸프로필, 이소펜틸, 벤질 등을 들 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조방법은 이하와 같다.

우선, 알코올중에서 산의 존재하에 글루타티온을 식 (II):

로 표시되는 글루타티온 모노에스테르의 산성염으로 전환시킨다. 그 다음 이것을 알칼리로 중화하고, 얻어진 중성의 수용액에 공기를 주입하거나 또는 과산화수소 또는 요오드 알코올 용액을 교반하에 적하하여 글루타티온 모노에스테르를 산화시킨다. 여기서 글루타티온 모노에스테르의 산성염은 예를들면 염산염, 황산염 또는 p-톨루엔 술폰산염 등을 들 수 있지만 그 범위는 이에 한정되는 것은 아니다. 상기의 반응은 간단한 공정에 의해 용이하게 이루어지며 얻어진 반응 혼합물 용액을 크로마토그래피하여 정제하든가 또는 재결정시켜 목적 화합물을 얻을 수가 있다.

본 발명의 화합물은 GOT, GPT 수준의 상승을 억제하고, 급성 및 만성의 간질환의 발생을 효과적으로 저지하는 작용을 갖는다. 따라서 급성 또는 만성간염의 예방 및 치료에 사용할 수가 있다. 또 예를들면 아세트아미노펜과 같은 약물에 의해 유도되는 기타 간질환에도 유용하게 사용할 수가 있다. 또 더욱 백내장의 진행방지 및 치료에도 사용할 수 있는 것으로 기대된다.

본 발명의 화합물은 경구적으로 또는 비경구적 경로를 통하여 적당히 사용할 수 있다. 약학적 조성물은 질환의 종류 및 부위에 따라 예를들면, 정제, 과립제, 분말 또는 캡슐제, 또는 주사제 또는 점안제 등의 액체 제제로, 또는 다른 어떤 형태로도 공지의 방법에 의하여 제조할 수가 있다.

이들 제제에는 통상 함유되는 성분들이 적당하게 사용되며 이들로서는 결합제, 붕괴제, 중점제, 분산제, 재흡수촉진제, 향미제, 완충제, 계면활성제, 용해보조제, 보존제, 유화제, 등장화제, 안정화제 또는 pH 조정제 등이 있다.

활성성분의 적당한 용량은 통상 질환의 종류, 중증도, 환자의 연령, 체중 및 제제의 특정 형태 등에 따라 다양할 수 있지만, 예를들면, 주사제의 경우는, 성인 1일 1 내지 1000mg 정도의 범위, 경구투여의 경우는 성인 1일 수회 투여로 1회당 10 내지 2000mg 정도의 범위이다.

본 발명의 화합물을 유효성분으로 하는 간질환 억제 약학적 조성물은 본 발명의 화합물중 1종 또는 2종 이상을 적당히 조합시켜 함유할 수도 있고, 또 본 발명의 목적에 반하지 않는 한 동종 또는 이종의 약학적 작용을 갖는 타성분을 적당히 함유할 수도 있다.

[실시예]

이하 실시예를 들어 본 발명을 설명한다.

[실시예 1]

γ-L-글루타밀-L-시스테인일글리신 이소프로필 에스테르 디설파이드 (산화형 글루타티온 이소프로필 에스테르)

(A 법)

γ-L-글루타밀-L-시스테인일글리신 이소프로필 에스테르 황산염 (GSH 이소프로필 에스테르 황산염)10g을 물 200ml에 현탁하였다. 그 다음 탄산칼슘 3.0g을 서서히 가하여 이 현탁액을 중화하였다. 이에 의해 GSH 이소프로필 에스테르가 유리·용해되고, 한편 황산칼슘이 침전되었다. 그 다음 이 혼합물을 여과하고, 냉각하면서 여과물에 5% 과산화수소수 14ml를 적가하였다. 3시간 교반후, 반응혼합물을 40℃ 이하의 온도의 진공에서 농축하였다. 농축물에 아세토니트릴을 가하고 침전된 결정을 여과로 모아 6g의 조 결정을 얻었다. 조 결정을 컬럼 크로마토그래피 (컬럼; YMC ODS 120A S-50, 용리액 ; 아세토니트릴: 물 = 1:4)에 의하여 정제하고, 얻어진 분획으로부터 용매를 진공에서 증발시켰다. 잔류물에 아세토니트릴을 첨가하여 결정화시키고 물-아세토니트릴로부터 재결정하여 무색무정형의 결정 2.5g을 얻었다.

TLC (실리카겔) : Rf = 0.26 (n-부탄올 : 아세트산 : 물 = 4:1:1)

원소분석치 : C₂₆H₄₄O₁₂N₆S₂·2H₂O로서

이론치(%) : C;42.61, H;6.60, N;11.47

실측치(%) : C;42.84, H;6.50, N;11.52

IR 스펙트럼을 제1도에 제시했다.

(B법)

GSH 이소프로필 에스테르 황산염 10g을 사용하여 A법과 유사하게 GSH 이소프로필 에스테르 용액을 얻었다. 여기에 반응 혼합물 용액이 엷은 황색을 띨 때까지 실온에서 2w/v%의 요오드-메탄올 용액을 적가하였다. 혼합물을 40℃에서 2시간 더 교반후, 탄산칼슘으로 중화하였다. 석출된 무기결정을 여과하여 제거하고 여과물을 진공하에서 농축하였다. 농축물에 아세토니트릴을 첨가하고 석출된 결정을 여과하여 모아 조 결정 5g을 얻었다. A법과 유사하게 컬럼 크로마토그래피에 의하여 정제하여, 정제 생성물 1.9g을 얻었다.

(C법)

GSH 이소프로필 에스테르 황산염 10g을 사용하여 A 법과 마찬가지0로 하여 얻은 GSH 이소프로필 에스테르 용액을 실온에서 공기를 주입하면서 24시간 심하게 교반하였다.

혼합물을 A 법과 유사하게 처리하여 정제 생성물 2.3g을 얻었다.

[실시예 2]

γ-L-글루타밀-L-시스테인일글리신 에틸 에스테르 디설파이드 (산화형 글루타티온 이소프로필 에틸 에스테르)

실시예 1의 A법과 마찬가지로 γ-L-글루타밀-L-시스테인일글리신 에틸에스테르 염산염 10g 및 탄산칼슘 3.0g을 사용하고 5% 과산화수소수로 산화시켰다. 마찬가지의 컬럼(YMC, ODS 120A S-50) 및 용리액 (아세토니트릴 : 물=7:43)을 사용하여 분리정제하였다. 얻어진 결정을 물-아세토니트릴로부터 재결정시켜 무색 무정형의 결정 1.5g을 얻었다.

TLC (실리카겔) : Rf = 0.16 (n-부탄올 : 아세트산 : 물 = 4:1:1)

원소분석치 : C₂₄H₄₀O₁₂N₆S₂·2H₂O로서

이론치(%) : C;40.90, H;6.29, N;11.92

실측치(%) : C;40,62, H;6.41, N;11.62

[약리학적 실험]

(방법) 체중 약 180g의 수컷 Wistar 쥐를 24시간 절식시킨후, 경구용 케뉼레를 통하여 본 발명 화합물의 하나인 산화형 글루타티온 이소프로필 에스테르 (이하, 「GSSG 이소프로필」로 언급함.) 87∼349mg, 환원형 글루타티온 이소프로필 에스테르 1/2 H₂SO₄·1/2 H₂O 102mg (환원형 글루타티온 이소프로필 에스테르 (이하 「GSH 이소프로필」로 언급함.)로서 87mg) 및 대조로서 5% 아라비아검 용액을 각각 경구 투여하였다. 1시간후에 간에 질환을 야기시키는 물질인 아세트아미노펜 400mg/kg을 복강내 투여하였다. 24시간후 쥐를 펜토바르비탈로 마취시키고 복부대동맥으로부터 혈액을 채취하고 s-GOT, s-GPT를 측정하여, GSSG 이소프로필의 간질환 억제효과를 GSH 이소프로필의 효과와 비교하였다.

(결과) 그 결과 표 1에 표시하는 바와 같이, GSSG 이소프로필 87∼349mg/kg의 투여에 의하여 s-GOT, s-GPT의 상승이 투여량 의존적으로 상당하게 억제되었다는 사실을 알 수 있었다. 또 GSH 이소프로필 황산염 102mg/kg의 투여도 s-GOT, s-GPT의 상승을 상당히 억제하고, GSSG 이소프로필 87mg/kg의 투여는 GSH 이소프로필 황산염 102mg/kg의 투여와 거의 동등의 간질환 억제효과를 나타낸다는 사실을 알 수 있었다.

표중 각 수치는 평균 ±S.E.(n=4∼8), [ ]내의 수치는 시험물질의 투여량의 몰수 환산치 (mmol/kg), ( )내의 수치는 억제율을 나타낸다.

5% 아라비아검 용액에 대한 유의차:1; p 0.05,2; p 0.01

[제제실시예 1]

[경구용 정제]

상기 성분을 종래의 방법에 따라 정제로 제형하였다.

당코딩이 선택적으로 이루어질 수 있다.

[제제실시예 2]

[주사제]

상기 성분을 혼합하여 여과멸균하였다.

여과물을 무균적으로 2㎖씩 유리 바이엘에 충전하고 열로 밀폐하여 주사제를 형성하였다.

[제제실시예 3]

[점안제]

상기 성분을 종래의 방법에 따라 혼합하였다.

그 다음 용액을 여과멸균하여 무균의 점안용기에 충전하였다.

Claims

식 (I) :

(식중, R은 저급 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 산화형 글루타티온 알킬 에스테르 또는 그것의 약학적 허용염.
식 (II) :

(식중, R은 저급 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 환원형 글루타티온 모노알킬 에스테르를 물 또는 수용액에서 공기, 과산화수소 또는 요오드로 산화시키는 것을 특징으로 하는 제1항의 산화형 글루타티온 알킬 에스테르의 제조방법.
식 (I) :

(식중, R은 저급 알킬기를 나타낸다)로 표시되는 산화형 글루타티온 알킬 에스테르 또는 이것의 약학적 허용 염을 약학적 허용 담체와 함께 혼합한 혼합물로서 함유하는 약학적 조성물.
제3항에 있어서, 정제, 과립, 파우더, 캡슐 또는 주사액 형태인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.