JPH02115193A - ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法 - Google Patents
ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法Info
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- JPH02115193A JPH02115193A JP26876788A JP26876788A JPH02115193A JP H02115193 A JPH02115193 A JP H02115193A JP 26876788 A JP26876788 A JP 26876788A JP 26876788 A JP26876788 A JP 26876788A JP H02115193 A JPH02115193 A JP H02115193A
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- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
〔産業上の利用分野〕
本発明は、ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法
に関する。
に関する。
ジフルクトース・ジアンヒドリド（ｒＤＦＡＪと略す）
は動物体内では代謝されない非醗酵性の糖であるため一
ノンカロリー甘味剤として注目をあびている。
は動物体内では代謝されない非醗酵性の糖であるため一
ノンカロリー甘味剤として注目をあびている。
ＤＦＡには７種類の異性体が存在し、そのうち、ジフル
クトースｉ 、 ２Ｌ ： ２． ｉｌジアンヒドリド
（ｒＤＦＡ［Ｉと略す）、ジフルクトースｌ、２′二コ
、３′ジアンヒドリド（ｒＤＦＡＩ［［Ｊと略す）及ヒ
ジフルクトースλ、６’ ： ４，２’ジアンヒドリド
（ｒＤＦＡＩＶＪと略す）の３種のＤＦＡが、イヌリン
又はレヴアン等の多糖類を原料として微生物の産生ずる
酵素の作用により製造されることが知られている。
クトースｉ 、 ２Ｌ ： ２． ｉｌジアンヒドリド
（ｒＤＦＡ［Ｉと略す）、ジフルクトースｌ、２′二コ
、３′ジアンヒドリド（ｒＤＦＡＩ［［Ｊと略す）及ヒ
ジフルクトースλ、６’ ： ４，２’ジアンヒドリド
（ｒＤＦＡＩＶＪと略す）の３種のＤＦＡが、イヌリン
又はレヴアン等の多糖類を原料として微生物の産生ずる
酵素の作用により製造されることが知られている。
例えば、ＤＦＡｌはイヌリンを原料としアーの
スロバクターグロビフォルミスに属する細コイ生する酵
素の作用により、又ＤＦＡ ｌは同様にイヌリンを原
料としてアースロバフタ−・ウレアファシェンスに属す
る細菌等の産、生ずる酵素により製造されることが知ら
れている。一方ＤＦＡ ■はレヴアンを原料としアー
スロバフタ−・ウレアファシェンスに属する細菌等の産
生する酵素により、製造されることが知られている。
素の作用により、又ＤＦＡ ｌは同様にイヌリンを原
料としてアースロバフタ−・ウレアファシェンスに属す
る細菌等の産、生ずる酵素により製造されることが知ら
れている。一方ＤＦＡ ■はレヴアンを原料としアー
スロバフタ−・ウレアファシェンスに属する細菌等の産
生する酵素により、製造されることが知られている。
これらの菌の産生ずる酵素を含有する液をイヌリン又は
レヴアンを含む水溶液に直接加えるか−もしくはかかる
酵素を多孔質の陰イオン変換樹脂等に吸着固定化させた
のち、塔に充填し。
レヴアンを含む水溶液に直接加えるか−もしくはかかる
酵素を多孔質の陰イオン変換樹脂等に吸着固定化させた
のち、塔に充填し。
イヌリン等を含有する原料液を通液することによりＤＦ
Ａ含有液を得ることが出来る。
Ａ含有液を得ることが出来る。
しかしかかる方法で得られたＤＦＡ＠液はオリゴ糖を含
むため純度は、約ｇＯ％〜ｇｓ％と低い。
むため純度は、約ｇＯ％〜ｇｓ％と低い。
従来はクロマト分離剤として、活性炭単独又は活性炭と
セライトの混合物を用い、エタノール水溶液を溶離剤と
する逆相クロマト法によりオリゴ糖の分離が行われてい
る。
セライトの混合物を用い、エタノール水溶液を溶離剤と
する逆相クロマト法によりオリゴ糖の分離が行われてい
る。
しかしかかるクロマト法では有機溶媒であるエタノール
を使用しなければならないこと、ＤＦＡ含有液中の蛋白
質高分子物質等の疏水性の大きな化合物の脱離７５：困
難なため分離剤を繰り返し使用すると１分離性能が急激
に低下するという問題があった。
を使用しなければならないこと、ＤＦＡ含有液中の蛋白
質高分子物質等の疏水性の大きな化合物の脱離７５：困
難なため分離剤を繰り返し使用すると１分離性能が急激
に低下するという問題があった。
本発明は、水で溶離が可能であり１分離剤の分離性能の
急激な低下をひきおこすことなく。
急激な低下をひきおこすことなく。
安定的に高純度のＤＦＡを分離精製する方法を提供する
ことを目的とするものである。
ことを目的とするものである。
即ち１本発明は、ジフルクトース・ジアンヒドリドを含
む水溶液を、アルカリ金属型の強酸性カチオン交換樹脂
塔に通液し１次いで水を溶離剤として、ジフルクトース
・ジアンヒドリド画分を分取することを特徴とするジフ
ルクトース・ジアンヒドリドの精製方法を要旨とする。
む水溶液を、アルカリ金属型の強酸性カチオン交換樹脂
塔に通液し１次いで水を溶離剤として、ジフルクトース
・ジアンヒドリド画分を分取することを特徴とするジフ
ルクトース・ジアンヒドリドの精製方法を要旨とする。
ＤＦＡは下記の微生物の産生ずる酵素をイヌリン又はレ
ヴアンを含む水溶液に作用させることにより製造される
。
ヴアンを含む水溶液に作用させることにより製造される
。
ＤＦＡ Ｉはイヌリンを原料としアースロバフタ−・
グロビフォルミスに属する細菌の産生ずる酵素（特開昭
６２−２ｑｓｂｑ３）又はアスペルギルス・フミガタス
の産生ずる酵素（Ｃａｎｂｏｈｙ−ｄｒａｔｅ Ｒｅ５
ｅａｒｃｈ、 ’）ｓｃｔｑｑｑ）３ｔｔｏ−、ｙａｔ
ａ ）を作用させることＡ造することが出来る。
グロビフォルミスに属する細菌の産生ずる酵素（特開昭
６２−２ｑｓｂｑ３）又はアスペルギルス・フミガタス
の産生ずる酵素（Ｃａｎｂｏｈｙ−ｄｒａｔｅ Ｒｅ５
ｅａｒｃｈ、 ’）ｓｃｔｑｑｑ）３ｔｔｏ−、ｙａｔ
ａ ）を作用させることＡ造することが出来る。
ＤＦＡ ｌは同様にイヌリンを原料とし、アースロハ
クター・ウレアファシェンスＫＭする細菌の産する酵素
（特開昭ダｑ−１ｌｑ６ｇｒ ）、アースロバフタ−・
グロビフォルミスに属する細菌の産する酵素（％開昭乙
コー２ｑｓｂｑｑ ）を作用させる事により製造される
。
クター・ウレアファシェンスＫＭする細菌の産する酵素
（特開昭ダｑ−１ｌｑ６ｇｒ ）、アースロバフタ−・
グロビフォルミスに属する細菌の産する酵素（％開昭乙
コー２ｑｓｂｑｑ ）を作用させる事により製造される
。
ＤＦＡ ＩＶはレヴアンを原料とし、アースロバフタ
−・ウレアファシェンスに属する細菌（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｑｏ 、 １ｓｔ
ａｓ〜ｔｓｑｇ（７９ｇｌ））％ シュードモナス フ
ルオレッセンスに属する細菌（６３年度日本農芸化学大
会講演番号２０ａ／３）の産生ずる酵素により製造する
ことが出来る。
−・ウレアファシェンスに属する細菌（Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｑｏ 、 １ｓｔ
ａｓ〜ｔｓｑｇ（７９ｇｌ））％ シュードモナス フ
ルオレッセンスに属する細菌（６３年度日本農芸化学大
会講演番号２０ａ／３）の産生ずる酵素により製造する
ことが出来る。
これらの酵素を原料に作用させる方法としては一菌体培
養液から菌体を分離し得られる上澄液を直接Ｓ−９０重
量％の原料溶液中に原料溶液に対して／−／ ０重量％
添加し個々の酵素にとって適する条件下で１例えば−／
Ｑ〜７０℃。
養液から菌体を分離し得られる上澄液を直接Ｓ−９０重
量％の原料溶液中に原料溶液に対して／−／ ０重量％
添加し個々の酵素にとって適する条件下で１例えば−／
Ｑ〜７０℃。
ｐ）（ｌＩ−／／−要すればリン酸塩、酢酸塩特のｐＨ
緩衡剤、各種の酵素安定剤の添加のもと攪拌を行う方法
、もしくは、これらの酵素をグルタルアルデヒド等によ
り架橋固定化及びゼラチンやカラギーナン等のゲル秋物
質又は多孔質の陰イオン交換樹脂に固定化させ塔に充填
し原料水溶液をこれに通す方法を挙げることができる。
緩衡剤、各種の酵素安定剤の添加のもと攪拌を行う方法
、もしくは、これらの酵素をグルタルアルデヒド等によ
り架橋固定化及びゼラチンやカラギーナン等のゲル秋物
質又は多孔質の陰イオン交換樹脂に固定化させ塔に充填
し原料水溶液をこれに通す方法を挙げることができる。
このようにして得られたＤＦＡ溶液はオリゴ糖を含むた
め純度は約ｇθ〜ｇｓ％程度である。
め純度は約ｇθ〜ｇｓ％程度である。
本発明に使用するアルカリ金属型強酸性カチオン交換樹
脂としては、ジビニルベンゼン架橋ポリスチレンスルホ
ン酸型の強酸性カチオン交換樹脂のアルカリ金属型、特
にＮａ型のものを挙げることができる。
脂としては、ジビニルベンゼン架橋ポリスチレンスルホ
ン酸型の強酸性カチオン交換樹脂のアルカリ金属型、特
にＮａ型のものを挙げることができる。
かかる、アルカリ金属型の強酸性カチオン交換樹脂を分
離剤として充填した分離塔に溶存物質濃度が３０〜７０
重量％になるまで濃縮した溶液を分離剤体積に対して３
〜２０容量多量供給し１次いで水で溶離流出させ、その
流出液からＤＦＡを主成分とする画分を分取する。その
際の分離塔温度及び溶離水の温度はＳＯ〜９０℃、好ま
しくは４０−１０℃に保持する。
離剤として充填した分離塔に溶存物質濃度が３０〜７０
重量％になるまで濃縮した溶液を分離剤体積に対して３
〜２０容量多量供給し１次いで水で溶離流出させ、その
流出液からＤＦＡを主成分とする画分を分取する。その
際の分離塔温度及び溶離水の温度はＳＯ〜９０℃、好ま
しくは４０−１０℃に保持する。
分離塔に供給する濃縮液の濃度が上記範囲より高すぎる
と、液粘度が上昇して分離性能が低下する。また、その
液濃度が低くすぎると１分離塔に供給すべき液体積が増
大し、それにともない溶離液としての水の使用量が増大
する。
と、液粘度が上昇して分離性能が低下する。また、その
液濃度が低くすぎると１分離塔に供給すべき液体積が増
大し、それにともない溶離液としての水の使用量が増大
する。
分離塔に供給する濃縮液量が上記範囲より少ないと分離
性能は向上するが分離剤当りの分離の生産性が低下して
くるし、その濃縮液量が多すぎると分離性能が低下して
くるので１分離塔へ供給する１回当りの濃縮液量は分離
剤体積に対して上述のように３〜２０容ｔ％とするのが
望ましい。
性能は向上するが分離剤当りの分離の生産性が低下して
くるし、その濃縮液量が多すぎると分離性能が低下して
くるので１分離塔へ供給する１回当りの濃縮液量は分離
剤体積に対して上述のように３〜２０容ｔ％とするのが
望ましい。
分離塔湯度及び溶離水温度が上記範囲より低すぎると分
離塔内で倣生物が増殖し通液の圧力損失が増大し、かつ
チャネリングの原因となり分離能力が低下する。またそ
の温度が高すぎるとＤＦＡ含有液中のオリゴ糖の熱分解
を起し液の着色が著しくなる。
離塔内で倣生物が増殖し通液の圧力損失が増大し、かつ
チャネリングの原因となり分離能力が低下する。またそ
の温度が高すぎるとＤＦＡ含有液中のオリゴ糖の熱分解
を起し液の着色が著しくなる。
ＤＦＡ水溶液中に懸濁物質が存在する場合は分離塔の閉
塞をさけるためプレコート濾過遠心分離等の方法で懸濁
物質を除去しておく必要がある。
塞をさけるためプレコート濾過遠心分離等の方法で懸濁
物質を除去しておく必要がある。
なおイヌリン又はレヴアンを含む水溶液に酵素を作用さ
せることにより得られるＤＦＡ含有液中には、原料中の
灰分由来の硬度成分や酵素反応時に培養液とともに添加
される硬度成分。
せることにより得られるＤＦＡ含有液中には、原料中の
灰分由来の硬度成分や酵素反応時に培養液とともに添加
される硬度成分。
ｐＨ・緩衝剤、酵素安定剤等として添加される薬剤中に
硬度成分が通常含まれており、これらの硬度成分を含む
ＤＦＡ含有液の濃縮液をそのまま分離塔に通液するとイ
オン交換がおこり１分離剤がアルカリ金属型からアルカ
リ土類型に変りオリゴ糖とＤＦＡの分離が出来なくなる
ので、ＤＦＡ含有液中に硬度成分が存在する場合は軟化
処理し硬度成分を除去するのが望ましい。
硬度成分が通常含まれており、これらの硬度成分を含む
ＤＦＡ含有液の濃縮液をそのまま分離塔に通液するとイ
オン交換がおこり１分離剤がアルカリ金属型からアルカ
リ土類型に変りオリゴ糖とＤＦＡの分離が出来なくなる
ので、ＤＦＡ含有液中に硬度成分が存在する場合は軟化
処理し硬度成分を除去するのが望ましい。
ＤＦＡ含有液中の硬度成分の除去法（軟化処理法）とし
ては、通常、ジビニルベンゼン架橋ポリスチレンスルホ
ン酸型の強酸性カチオン交換樹脂のＮａ型のものを用い
、このカチオン交換樹脂を充填した塔にＤＦＡ含有液を
通して。
ては、通常、ジビニルベンゼン架橋ポリスチレンスルホ
ン酸型の強酸性カチオン交換樹脂のＮａ型のものを用い
、このカチオン交換樹脂を充填した塔にＤＦＡ含有液を
通して。
含有液中のＣａイオンや鳩イオンをＮａイオンと交換さ
せて除き、 Ｃａ型又はＭｇ型に変ったカチオン交換樹
脂をＮａＣ１水溶液でＮａ型に再生させて繰返し使用す
る方法と、カルボン酸型の弱酸性カチオン交換樹脂のＮ
ａ型のものを用い。
せて除き、 Ｃａ型又はＭｇ型に変ったカチオン交換樹
脂をＮａＣ１水溶液でＮａ型に再生させて繰返し使用す
る方法と、カルボン酸型の弱酸性カチオン交換樹脂のＮ
ａ型のものを用い。
このカチオン交換樹脂を充填した塔に含有液を通して含
有液中の硬度成分を同様にイオン交換させて除き＋ Ｃ
ａ又は陶型に変った同樹脂をＨＣＩ又はＨ２ＳＯ４等の
強酸で再生してＨ型にしたのち、 ＮａＯＨ水溶液を流
してＮａ型に戻してから繰返し再使用する方法等がある
。含有液中の全塩濃度が低い場合はスルホン酸型の強酸
性カチオン交換樹脂のＮａ型を用いるのが好ましく。
有液中の硬度成分を同様にイオン交換させて除き＋ Ｃ
ａ又は陶型に変った同樹脂をＨＣＩ又はＨ２ＳＯ４等の
強酸で再生してＨ型にしたのち、 ＮａＯＨ水溶液を流
してＮａ型に戻してから繰返し再使用する方法等がある
。含有液中の全塩濃度が低い場合はスルホン酸型の強酸
性カチオン交換樹脂のＮａ型を用いるのが好ましく。
全塩濃度が高い場合はカルボン酸型の弱酸性カチオン交
換樹脂のＮａ型のものを用いるのが望ましい。
換樹脂のＮａ型のものを用いるのが望ましい。
このようにして硬度成分を除去したＤＦＡ含有濃縮液を
分離塔に供給し、溶離水で分離操作を繰り返すと分離塔
内でＤＦＡ含有液中のオリゴ糖の熱分解により生成する
酸によりアルカリ金属型の強酸性カチオン樹脂の一部が
Ｈ型に変り固体酸触媒として作用し、ＤＦＡを加水分解
し、果糖とする。かかる不都合を防ぐため分離塔内液の
アルカリ金属イオン濃度に対する水素イオン濃度のモル
比率をＯ，ＯＳ以下望ましくはｏ、ｏｉ以下とし１分離
塔内液と平衡状態にあるＨ型強酸性カチオン樹脂の割合
を低くおさえる必要がある。
分離塔に供給し、溶離水で分離操作を繰り返すと分離塔
内でＤＦＡ含有液中のオリゴ糖の熱分解により生成する
酸によりアルカリ金属型の強酸性カチオン樹脂の一部が
Ｈ型に変り固体酸触媒として作用し、ＤＦＡを加水分解
し、果糖とする。かかる不都合を防ぐため分離塔内液の
アルカリ金属イオン濃度に対する水素イオン濃度のモル
比率をＯ，ＯＳ以下望ましくはｏ、ｏｉ以下とし１分離
塔内液と平衡状態にあるＨ型強酸性カチオン樹脂の割合
を低くおさえる必要がある。
分離塔内液のアルカリ金属イオン濃度に対する水素イオ
ン濃度のモル比率を低くおさえる手段としては、直性Ｄ
ＦＡ含有濃縮液に苛性アルカリを添加し ｐＨを上げて
供給することも可能であるが共存する不純物によっては
著しく着色えおこすこともあるので、必ずしも良い方法
とは言えない。このような場合には多塩基酸のナトリウ
ム塩１例えばリン酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、シュウ酸
塩等のナトリウム塩の添加が望ましい。添加方法として
は濃縮液又は溶離水に直接混合してもよく、またこれら
の多塩基酸のＮａ塩水溶液を直接分離塔て供給しても良
い。
ン濃度のモル比率を低くおさえる手段としては、直性Ｄ
ＦＡ含有濃縮液に苛性アルカリを添加し ｐＨを上げて
供給することも可能であるが共存する不純物によっては
著しく着色えおこすこともあるので、必ずしも良い方法
とは言えない。このような場合には多塩基酸のナトリウ
ム塩１例えばリン酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、シュウ酸
塩等のナトリウム塩の添加が望ましい。添加方法として
は濃縮液又は溶離水に直接混合してもよく、またこれら
の多塩基酸のＮａ塩水溶液を直接分離塔て供給しても良
い。
このようにしてＤＦＡＩＩｋ縮液な分離塔に供給し分離
を行うが、上記分離操作の一例として回分分離法につい
てくわしく説明する。まずＤＦＡ含有濃縮液の一定量を
分離塔に供給し次いで溶離水を供給すると第１図に示す
とと＜−ＤＦＡ含有液中のＤＦＡより分子量の大きなオ
リゴ糖その他の不純物が流出し１次いでＤＦＡが流出し
てくるのでＤＦＡ流出画分を分取することにより、高純
度のＤＦＡを得ることが可能となり、この両分をイオン
交換樹脂や活性炭で脱塩や脱色することにより容易に水
溶液からＤＦＡを晶析させることが可能となる。分離方
法としてはＤＦＡ含有液中のオリゴ糖その他を含む画分
とＤＦＡを主成分として含む画分に分離すれば良い。
を行うが、上記分離操作の一例として回分分離法につい
てくわしく説明する。まずＤＦＡ含有濃縮液の一定量を
分離塔に供給し次いで溶離水を供給すると第１図に示す
とと＜−ＤＦＡ含有液中のＤＦＡより分子量の大きなオ
リゴ糖その他の不純物が流出し１次いでＤＦＡが流出し
てくるのでＤＦＡ流出画分を分取することにより、高純
度のＤＦＡを得ることが可能となり、この両分をイオン
交換樹脂や活性炭で脱塩や脱色することにより容易に水
溶液からＤＦＡを晶析させることが可能となる。分離方
法としてはＤＦＡ含有液中のオリゴ糖その他を含む画分
とＤＦＡを主成分として含む画分に分離すれば良い。
たとえば回分分離法（特開昭グ！ｆ−２’１ｇ０７号公
報、特開昭３３−／ｅ９ｇ’１０号公報、特開昭Ｓ、！
ｉ−４／９０３号公報等）や擬似移動床方式による連続
分離法（米国特許第２９ｇｊｔ！１９号明細書）等のよ
うな分離操作法を採用することができる。
報、特開昭３３−／ｅ９ｇ’１０号公報、特開昭Ｓ、！
ｉ−４／９０３号公報等）や擬似移動床方式による連続
分離法（米国特許第２９ｇｊｔ！１９号明細書）等のよ
うな分離操作法を採用することができる。
次に本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが本発
明は下記実施例に限定されるものではない。
明は下記実施例に限定されるものではない。
実施例１
アースロバフタ・イリミスＭＣ１，２，２９７号菌（Ｆ
ＥＲＭ Ｐ−ｑｇｑ、ｙ ）を、ｓｔのジャーに仕込ん
だ下記組成の培地３ｔに接種し１通気量ｏ、ｓ Ｖ／Ｖ
／Ｍ （空気の体積／培地の体積７分）攪拌速度！；
００ ｒｐｍの好気性条件下で、３０Ｃの温度で２ｑ時
間培養した。
ＥＲＭ Ｐ−ｑｇｑ、ｙ ）を、ｓｔのジャーに仕込ん
だ下記組成の培地３ｔに接種し１通気量ｏ、ｓ Ｖ／Ｖ
／Ｍ （空気の体積／培地の体積７分）攪拌速度！；
００ ｒｐｍの好気性条件下で、３０Ｃの温度で２ｑ時
間培養した。
培地：イヌリン ｓｏ ｙ−硝
酸ナトリウム ２ ？硫酸マグネシ
ウム・り水塩ｏ、ｓ ｙ−塩化カリウム
ＯＪ ｆリン酸二水素カリウム
ＯＪ ９−塩化鉄（ｌ［） ｏ
、ｏｏｔｇ−酵母エキス ０．２１
水 ｌｔ培養後、遠心
分離により除菌し、この上澄液３ｔをダイヤイオン［Ｆ
］ＨＰＡ７ｊ （三菱化成株式会社製リン酸型多孔質陰
イオン交換樹脂）１００−が充填されたカラム（内径コ
ー、充填層高３２ ｃｍ ）に通液し、培養液中のイヌ
リン−Ｄ −フラクトトランスフェラーゼを吸滑固定化
させ。
酸ナトリウム ２ ？硫酸マグネシ
ウム・り水塩ｏ、ｓ ｙ−塩化カリウム
ＯＪ ｆリン酸二水素カリウム
ＯＪ ９−塩化鉄（ｌ［） ｏ
、ｏｏｔｇ−酵母エキス ０．２１
水 ｌｔ培養後、遠心
分離により除菌し、この上澄液３ｔをダイヤイオン［Ｆ
］ＨＰＡ７ｊ （三菱化成株式会社製リン酸型多孔質陰
イオン交換樹脂）１００−が充填されたカラム（内径コ
ー、充填層高３２ ｃｍ ）に通液し、培養液中のイヌ
リン−Ｄ −フラクトトランスフェラーゼを吸滑固定化
させ。
さらに／Ａの純水で充分に洗浄することにより酵素固定
化カラムを得た。
化カラムを得た。
次いでこの酵素固定化カラムに、脱塩水で調整した／
００ ｆ／を濃度のイヌリン水溶液（ｐＨ６，０）を３
θ℃で３００ｍ１／ｈｒ の速度で通液することによ
り−ＤＦＡｌｌｌ＠度ｇｏ、ｓｙ−／ｌ−オリゴ抛その
他１９，５ψ／ｌのＤＦＡ含有液を得た。この液を７．
２謙重量％まで濃縮し、析出する白色沈殿物質を、ケイ
ソウ±（ハイフロー・スーパーセル）によりプレコート
した濾過により除去し、清澄液を得た。 ゛
′鱒得られた清澄液にＮａ２ＨＰＯ，を／ ＯＴ）
ｌ）ｍとなるように添加することにより＋ ｐＨを７
．５としたのち、その７．５ツをＩＩ ２．２ ｄ／
ｈの速度で。
００ ｆ／を濃度のイヌリン水溶液（ｐＨ６，０）を３
θ℃で３００ｍ１／ｈｒ の速度で通液することによ
り−ＤＦＡｌｌｌ＠度ｇｏ、ｓｙ−／ｌ−オリゴ抛その
他１９，５ψ／ｌのＤＦＡ含有液を得た。この液を７．
２謙重量％まで濃縮し、析出する白色沈殿物質を、ケイ
ソウ±（ハイフロー・スーパーセル）によりプレコート
した濾過により除去し、清澄液を得た。 ゛
′鱒得られた清澄液にＮａ２ＨＰＯ，を／ ＯＴ）
ｌ）ｍとなるように添加することにより＋ ｐＨを７
．５としたのち、その７．５ツをＩＩ ２．２ ｄ／
ｈの速度で。
Ｎａ 型の強酸性カチオン交換樹脂ダイヤイオンＵＢＫ
ｓ、ｙｏ （三菱化成株式会社製）ｉｓｏｍｔ、を充填
したカラム（内径”％−充填層高７３ ｏｎ ）Ｋ６θ
℃で供給し、ひきつづき水（溶離水）を同一速度同一温
度で供給した。分離塔塔底からの流出液のフラクション
をさらにクロマトグライー（充填剤：ＭＣＩ Ｇｅｌ
ＣＫＯｇｓ＋検出器：屈折計）により分析し、第１
図に示す結果を得た。第７図の横軸は分離塔充填樹脂体
積に対する流出液の体積比（床容量）を示し、縦軸は流
出成分の濃度を示す。オリゴ糖その他の不純物は床容量
０．３５から流出し始め、床容ｇｏ、ｓｔ。
ｓ、ｙｏ （三菱化成株式会社製）ｉｓｏｍｔ、を充填
したカラム（内径”％−充填層高７３ ｏｎ ）Ｋ６θ
℃で供給し、ひきつづき水（溶離水）を同一速度同一温
度で供給した。分離塔塔底からの流出液のフラクション
をさらにクロマトグライー（充填剤：ＭＣＩ Ｇｅｌ
ＣＫＯｇｓ＋検出器：屈折計）により分析し、第１
図に示す結果を得た。第７図の横軸は分離塔充填樹脂体
積に対する流出液の体積比（床容量）を示し、縦軸は流
出成分の濃度を示す。オリゴ糖その他の不純物は床容量
０．３５から流出し始め、床容ｇｏ、ｓｔ。
で流出し終るので床容量Ｏ，Ｓ６で前半と後半のλつの
両分に分けることにより後半画分としてＤＦＡ Ｉを
主成分とする画分をうることが出来た。
両分に分けることにより後半画分としてＤＦＡ Ｉを
主成分とする画分をうることが出来た。
実施例コ
実施例１と同一組成の培地３ｔの入った５Ｌジャーヲ用
いアースロバクターウレアファシエン、ｘ、（ＦＥＲＭ
Ｐ−ｔｑｂｑｓ ）を１通気量ｏ、ｓＶ／Ｖ／Ｍ、攪
拌速度５００ ｒｐｍの条件下、３θＣで２９時間培養
した。培養後遠心分離により除菌し、この上澄液３ｔを
リン酸型多孔質陰イオン交換樹脂、ダイヤイオン［Ｆ］
ＨＰｋ７ｊ （三菱化成株式会社製造）１００−を充填
したカラム（内径２σ充填層高３２Ｃ′ｒｎ）に通液し
、培養液中のイヌリン−Ｄ・フラクトトランスフェラー
ゼを吸着固定化させ、さらに／ｌの純水で充分に洗浄す
ることにより酵素固定化カラムを得た。
いアースロバクターウレアファシエン、ｘ、（ＦＥＲＭ
Ｐ−ｔｑｂｑｓ ）を１通気量ｏ、ｓＶ／Ｖ／Ｍ、攪
拌速度５００ ｒｐｍの条件下、３θＣで２９時間培養
した。培養後遠心分離により除菌し、この上澄液３ｔを
リン酸型多孔質陰イオン交換樹脂、ダイヤイオン［Ｆ］
ＨＰｋ７ｊ （三菱化成株式会社製造）１００−を充填
したカラム（内径２σ充填層高３２Ｃ′ｒｎ）に通液し
、培養液中のイヌリン−Ｄ・フラクトトランスフェラー
ゼを吸着固定化させ、さらに／ｌの純水で充分に洗浄す
ることにより酵素固定化カラムを得た。
次いで、水道水で１００ｆ／を濃度に調製したイヌリン
水溶液を、塩酸でｐＨＡ、０に調整後。
水溶液を、塩酸でｐＨＡ、０に調整後。
３０℃でＡ Ｏｍｅ ／ ｈｒ の速度で上記固定化
酵素カラムに通液１．− ＤＦＡ Ｉ［濃度７ｇ、２
’ｉ−／ｌ（オリゴ糖その他２ ／、ｇ ｙ−／ ｔ
）のＤＦ’Ａ含有液を得た。次いでＮａ型陽イオン交換
樹脂ダイヤイオン■５ＫＩＢ（三菱化成株式会社製造）
に通液速度（ＳＶ）３１７ｈで通液することによりＤＦ
Ａ含有液中の硬度成分を除去し、この液をダλ、０重量
係まで濃縮し、析出する白色沈殿物質をケイソー土（ハ
イフロー・スーパーセル）によるプレコート濾過により
除去し清澄液を得た。この清澄液にＮａ２ｌ−（Ｐｏ４
を２０ ｐＴ）ｍとなるよう添加することによりｐＨ７
，３としたのち。
酵素カラムに通液１．− ＤＦＡ Ｉ［濃度７ｇ、２
’ｉ−／ｌ（オリゴ糖その他２ ／、ｇ ｙ−／ ｔ
）のＤＦ’Ａ含有液を得た。次いでＮａ型陽イオン交換
樹脂ダイヤイオン■５ＫＩＢ（三菱化成株式会社製造）
に通液速度（ＳＶ）３１７ｈで通液することによりＤＦ
Ａ含有液中の硬度成分を除去し、この液をダλ、０重量
係まで濃縮し、析出する白色沈殿物質をケイソー土（ハ
イフロー・スーパーセル）によるプレコート濾過により
除去し清澄液を得た。この清澄液にＮａ２ｌ−（Ｐｏ４
を２０ ｐＴ）ｍとなるよう添加することによりｐＨ７
，３としたのち。
７．５艷をダニ、２ｍｔ／ｈの速度でＮａ型強酸性カチ
オン交換樹脂ダイヤイオンＴＪＢＫｓ３ｏ （三菱化
成株式会社製造）１３０ｍ１を充填したカラム（内径／
Ａ％、充填層高７ ｓ ｃｍ ）にｂｏｃで供給し、ひ
きつづき溶離水を同一速度同一温度で供給した。分離塔
塔底からの流出液組成は実施例／と同様の結果であった
ので、床容量。、ｓ乙がらｏ、ｔ、ｓ４での液を分取し
、ｑｐｒ％以上の純度のＤＦＡ Ｉ含有量を取得する
ことが出来た。
オン交換樹脂ダイヤイオンＴＪＢＫｓ３ｏ （三菱化
成株式会社製造）１３０ｍ１を充填したカラム（内径／
Ａ％、充填層高７ ｓ ｃｍ ）にｂｏｃで供給し、ひ
きつづき溶離水を同一速度同一温度で供給した。分離塔
塔底からの流出液組成は実施例／と同様の結果であった
ので、床容量。、ｓ乙がらｏ、ｔ、ｓ４での液を分取し
、ｑｐｒ％以上の純度のＤＦＡ Ｉ含有量を取得する
ことが出来た。
本発明方法によれば、水で溶離が可能であり。
分離剤の分離性能の澹激な低下をひきおこすことなく、
安定的に高純度のＤＦＡを分離精製することができる。
安定的に高純度のＤＦＡを分離精製することができる。
第１図は実施例／における分離塔塔底からの流出液の床
容量に対する流出成分の濃度を作図した図である。
容量に対する流出成分の濃度を作図した図である。
Claims (1)
- （１）ジフルクトース・ジアンヒドリドを含む水溶液を
、アルカリ金属型の強酸性カチオン交換樹脂塔に通液し
、次いで水を溶離剤としてジフルクトース・ジアンヒド
リド画分を分取することを特徴とするジフルクトース・
ジアンヒドリドの精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26876788A JPH02115193A (ja) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26876788A JPH02115193A (ja) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02115193A true JPH02115193A (ja) | 1990-04-27 |
Family
ID=17463025
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26876788A Pending JPH02115193A (ja) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | ジフルクトース・ジアンヒドリドの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02115193A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2004078989A1 (ja) * | 2003-03-05 | 2004-09-16 | Nippon Beet Sugar Mfg. Co., Ltd. | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| JP2005132774A (ja) * | 2003-10-30 | 2005-05-26 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| WO2006070483A1 (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-06 | Nippon Beet Sugar Manufacturing Co., Ltd. | ジフラクトース ジアンヒドリドｉｉｉ結晶の製造方法 |
| EP2138048A4 (en) * | 2007-03-08 | 2014-09-17 | Univ Sevilla | NOVEL CARAMELS WITH HIGH PREBIOTIC OLIGOSACCHARIDE CONTENT, PREPARATION METHOD AND USE |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55135600A (en) * | 1979-04-04 | 1980-10-22 | Nippon Beet Sugar Mfg | Separating of sugar and reduced sugar by ion exhausion method |
-
1988
- 1988-10-25 JP JP26876788A patent/JPH02115193A/ja active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55135600A (en) * | 1979-04-04 | 1980-10-22 | Nippon Beet Sugar Mfg | Separating of sugar and reduced sugar by ion exhausion method |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010233576A (ja) * | 2003-03-05 | 2010-10-21 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉ結晶の製造方法 |
| WO2004078989A1 (ja) * | 2003-03-05 | 2004-09-16 | Nippon Beet Sugar Mfg. Co., Ltd. | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| EP1612274A1 (en) * | 2003-03-05 | 2006-01-04 | Nippon Beet Sugar Mfg. Co., Ltd. | Process for purifying difructose-dianhydride iii |
| JPWO2004078989A1 (ja) * | 2003-03-05 | 2006-06-08 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| KR101132994B1 (ko) * | 2003-03-05 | 2012-04-09 | 니혼 텐사이 세이토 가부시키가이샤 | 디프룩토오스-디안히드리드 ⅲ 의 정제 방법 |
| US7998710B2 (en) | 2003-03-05 | 2011-08-16 | Nippon Beet Sugar Mfg., Co., Ltd. | Process for purifying difructose dianhydride III |
| EP1612274A4 (en) * | 2003-03-05 | 2011-05-11 | Nippon Beet Sugar Mfg | PROCESS FOR PURIFYING DIFRUCTOSE-DIANHYDRIDE III |
| JP4572167B2 (ja) * | 2003-03-05 | 2010-10-27 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| JP4617077B2 (ja) * | 2003-10-30 | 2011-01-19 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| JP2005132774A (ja) * | 2003-10-30 | 2005-05-26 | Nippon Beet Sugar Mfg Co Ltd | ジフルクトース・ジアンヒドリドｉｉｉの精製方法 |
| JPWO2006070483A1 (ja) * | 2004-12-28 | 2008-06-12 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフラクトースジアンヒドリドｉｉｉ結晶の製造方法 |
| US8039615B2 (en) | 2004-12-28 | 2011-10-18 | Nippon Beet Sugar Manufacturing Co., Ltd. | Process for producing difructose dianhydride III crystals |
| WO2006070483A1 (ja) * | 2004-12-28 | 2006-07-06 | Nippon Beet Sugar Manufacturing Co., Ltd. | ジフラクトース ジアンヒドリドｉｉｉ結晶の製造方法 |
| JP5367948B2 (ja) * | 2004-12-28 | 2013-12-11 | 日本甜菜製糖株式会社 | ジフラクトースジアンヒドリドｉｉｉ結晶の製造方法 |
| EP2138048A4 (en) * | 2007-03-08 | 2014-09-17 | Univ Sevilla | NOVEL CARAMELS WITH HIGH PREBIOTIC OLIGOSACCHARIDE CONTENT, PREPARATION METHOD AND USE |
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