JP7161302B2 - Wnt10b産生促進剤、及びそれを含有する頭皮頭髪用化粧料 - Google Patents
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Description
すなわち、本発明は、チンピ抽出物、セイヨウイラクサ抽出物、ボタン抽出物、センキ
ュウ抽出物、ウメ抽出物、ステビア抽出物からなる群より選ばれる少なくとも1種の植物抽出物を含有することを特徴とするWnt10b産生促進剤を提供するものである。
でいてもよい。
本発明の頭皮頭髪用化粧料における上記植物抽出物の総含有量は、特に限定されないが、製剤化する場合、剤形や使用回数、配合する賦形剤や添加剤の種類などに応じて適宜選択され得る。
(原料製造例1)チンピ抽出物
ウンシュウミカンの果皮を50g採取し、375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥しチンピ抽出物14.3g得た。
セイヨウイラクサの葉を50g採取し、375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥しセイヨウイラクサ抽出物4.8g得た。
ボタンの根を50g採取し、375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥しボタン抽出物6.5g得た。
センキュウの根茎を50g採取し375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥センキュウ抽出物7.4g得た。
ウメの果実を50g採取し375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥ウメ抽出物10.3g得た。
ステビアの葉、茎を50g採取し、375mlの50質量%エタノール水溶液に室温(約25℃)下で浸漬した。24時間後これをろ過し、得られた抽出液から水、エタノールを減圧留去後、凍結乾燥しステビア抽出物17.2g得た。
(2-1)細胞培養
細胞はヒト頭髪毛乳頭細胞(東洋紡(株))を使用した。サブコンフルエント状態の毛乳頭細胞をトリプシン処理で剥離し、24ウェルプレートの各ウェルに播種し、10%胎仔ウシ血清含有ダルベッコ改変イーグル培地で、37℃、5%CO2条件下でサブコンフ
ルエントになるまで培養した。乾燥物換算で表2に記載の濃度となるように原料製造例1~6の各植物抽出物、比較成分であるカルシトリオール(Cayman CHEMICAL製)を同培地にそれぞれ添加し48時間培養した。培養後、培地を除去し毛乳頭細胞にISOGEN-II((株)ニッポンジーン製)を添加し付属のプロトコルに従って、トータルRNAを得た。
精製したトータルRNAを元に、PrimeScript RT Master Mix(タカラバイオ(株)製)を用い、付属のプロトコルに従ってcDNAを合成した。
PCR用の96ウェルプレートの各ウェルへ、SYBR Premix Ex TaqII(タカラバイオ(株)製)12.5μL、フォワードプライマー(0.4μM)1μL、リバースプライマー(0.4μM)1μL、cDNA(20ng/μL)2μL、RNaseフリー水8.5μLを加え、Thermal Cycler Dice Real Time System Software(タカラバイオ(株)製)用いてリアルタイムRT-PCRを行った。リアルタイムRT-PCRの反応は、95℃で30秒の初期変性、95℃で5秒の変性、60℃で30秒のアニーリング・伸長反応からなるサイクルを40回行った。表1にWnt10b増幅用プライマー及びハウスキーピング遺伝子として使用したグリセルアルデヒド3リン酸脱水素酵素(GAPDH)の増幅用プライマー(インビトロジェン社製)の配列を示す。
本発明のWnt10b産生促進剤としてチンピ抽出物、セイヨウイラクサ抽出物、ボタン抽出物、センキュウ抽出物、ウメ抽出物、ステビア抽出物を頭皮頭髪用化粧料(シャンプー、コンディショナー、ヘアトニック)に配合して育毛効果を評価した。
試験用頭皮頭髪用化粧料として、シャンプー、コンディショナー及びヘアトニックを以下の組成で調製した。なお、配合量の単位は質量部で、精製水の「残量」とは全量を100質量部とするのに要する量である。また、シャンプーにおけるクエン酸25質量%水溶液の適量とはpHを4~6に調整するのに要する量、塩化ナトリウム10質量%水溶液の適量とは粘度を1000~3000mPa・sに調製するのに要する量である。コンディショナーにおけるクエン酸25質量%水溶液の適量とは、pHを3~6に調製するのに要する量である。
ポリクオタニウム-10 0.3
コカミドプロピルベタイン 10
ココイルメチルタウリンナトリウム 5
コカミドモノエタノールアミド 1
メチルパラベン 0.2
クエン酸25質量%水溶液 適量
塩化ナトリウム10質量%水溶液 適量
香料 0.4
精製水 残量
Wnt10b産生促進剤 表4に記載の量
比較成分 表4に記載の量
────────────────────────────────────
合計 100
(ii) コンディショナー
ジメチコン 3
セタノール 4
パルミチン酸イソプロピル 1
ステアルトリモニウムクロリド 2.5
メチルパラベン 0.2
クエン酸25質量%水溶液 適量
香料 0.4
精製水 残量
Wnt10b産生促進剤 表4に記載の量
比較成分 表4に記載の量
────────────────────────────────────
合計 100
(iii)ヘアトニック
エタノール 40
ポリオキシエチレン(40モル)硬化ヒマシ油 1
メチルパラベン 0.2
香料 0.1
精製水 残量
Wnt10b産生促進剤 表4に記載の量
比較成分 表4に記載の量
────────────────────────────────────
合計 100
実施例37~42、比較例3~4の頭皮頭髪用化粧料組成物(シャンプー、コンディショナー、ヘアトニック)について、それぞれ30~60歳代の男女5名8グループを被験者とした。
5点:40%以上の減少
4点:30%以上から40%未満の減少
3点:20%以上から30%未満の減少
2点:10%以上から20%未満の減少
1点:1%以上から10%未満の減少
0点:1%未満の減少、変化なし、抜け毛が増加した
Claims (3)
- チンピ抽出物およびセイヨウイラクサ抽出物を含有し、両者の配合比率が抽出物の乾燥物の重量比で25:75~75:25であることを特徴とするWnt10b産生促進剤。
- センキュウ抽出物、ウメ抽出物、ステビア抽出物からなる群より選ばれる少なくとも1種の植物抽出物をさらに含有することを特徴とする請求項1に記載のWnt10b産生促進剤。
- 請求項1または2に記載のWnt10b産生促進剤を含有する頭皮頭髪用化粧料。
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