JP7013619B2 - 多価不飽和脂肪酸が結合したリン脂質を含む魚卵脂質組成物 - Google Patents

Description

本発明は、多価不飽和脂肪酸が結合したリン脂質を含む、魚卵から得られる脂質組成物に関する。

ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）などの多価不飽和脂肪酸が結合したリン脂質は、トリグリセリド（ＴＧ）型である場合とは異なる優れた機能を有していることが解明されつつある。また、多価不飽和脂肪酸が結合したリン脂質は、化学的に大量に合成することが難しく、天然物原料から抽出することが検討されている。

例えば特許文献１には、オキアミ由来のリン脂質の分取方法として、生オキアミを真空凍結乾燥法により脱水したうえ、エタノールで総脂質を抽出し、得られた総脂質を、エタノール系溶媒、アセトン系溶媒、またはヘキサン系溶媒のいずれかを溶離液となし、シリカゲルを充填剤として、吸着カラムクロマトグラフィーを用いてホスファチジルコリン（ＰＣ）とホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）を分画し、これをフラクションコレクターにより単離するようにしたことを特徴とするオキアミリン脂質の分取方法が記載されている。ここでは乾燥オキアミ由来の脂質には、ＰＣが３１．１％、ＰＥが７．５％、ＴＧが４３．２％、遊離脂肪酸が６．５％、その他が５．７％と分析されている。また特許文献２には、海洋または水生バイオマス源（marine or aquatic biomass sources）の抽出物、好ましくはオキアミ（Krill）の抽出物には、種々のリン脂質が存在しているであろうこと、そのようなリン脂質には、ＰＥ、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ＰＣ、およびスフィンゴミエリンが含まれることが記載されている。また、オキアミ抽出物に関し、リン脂質中の構成脂肪酸において、ＥＰＡが２７．３５％、ＤＨＡが２４．９％であったこと、また総脂質中の構成脂肪酸はＥＰＡが≧２５．００％、ＤＨＡが≧１０．００％であったことが記載されている。

また特許文献３－５は、イカの皮から抽出したリン脂質に関するものであり、これらの文献には、イカの皮から得られた脂質分のヘキサンに溶解しアセトン不溶分として得られる画分において、ＰＣは４５％、ＰＥは１１％であり、また構成脂肪酸組成をガスクロマトグラフィーで求めたところ、ＤＨＡが３８％、ＥＰＡが１２％、パルミチン酸が２９％であったこと、あるいはイカの皮から抽出したリン脂質の主な組成はＰＣ６３．１％、ＰＥ２１．２％、ＰＳ９．１％であり、また各々の構成脂肪酸に占めるＤＨＡはＰＣが４４．４％、ＰＥが１８．０％、ＰＳが２４．５％であり、総リン脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡは３３．４％であったことが記載されている。また特許文献６には、イカの肉質から得たミールを溶剤抽出して、高度不飽和脂肪酸を多量に含有する高品質リン脂質を製造する方法が記載されており、実施例として得たイカミール抽出物を分析したところ、ＤＨＡ含有量３３．０％、ＥＰＡ含有量１４．４％、リン脂質含有量６５％であり、さらにリン脂質を分析したところ、ＤＨＡ含有量４０．０％、ＥＰＡ含有量１３．０％、ＰＣ６５％、ＰＥ２０％であったことが記載されており、また比較例としてイクラ凍結乾燥品からの抽出物は、ＤＨＡ含有量１９．０％、ＥＰＡ含有量１５．１％、リン脂質含有量２５％であり、リン脂質を分析したところ、ＤＨＡ含有量２５．０％、ＥＰＡ含有量１３．０％、ＰＣ８０％、ＰＥ１０％であったことが記載されている。

さらに非特許文献１は、ＤＨＡ結合リン脂質の製造とその生理活性に関するものであり、工業的生産のための原料として可能性のあるイカ皮、鰹卵、および鮪卵に含まれるＤＨＡ結合リン脂質について検討されている。ここでは、各種素材の８０％エタノール抽出物の分析結果として、イカ皮について、ＤＨＡ４０．３％、ＥＰＡ１６．６％、ＰＬ２３．５％、鰹卵について、ＤＨＡ３６．４％、ＥＰＡ５．９％、ＰＬ３５．５％、鮪卵について、ＤＨＡ３２．８％、ＥＰＡ４．６％、ＰＬ５２．７％であったことが記載されている。また特許文献７には、高純度のリン脂質を製造する方法として、（ａ）油脂成分と極性の低い有機溶媒を混合する工程；（ｂ）該混合物をシリカゲルに添加する工程；および（ｃ）該極性の低い有機溶媒を該シリカゲルに添加して、シリカゲルからリン脂質を溶出する工程、を包含する、方法が記載されている。ここでは、リン脂質の好ましい供給源として、魚介類が挙げられており、その具体例として、カツオ、マグロ、イワシ等の魚類の組織が挙げられ、魚類の組織の例として、精巣および卵巣が挙げられている。また実施例では、生の鰹の卵巣から、高純度のリン脂質（８％、９５％、または１００％）を得たことが記載されている。

さらに特許文献８には、ＤＨＡ、ＤＨＡの塩、ＤＨＡのエステル、ＤＨＡのグリセリド、ＤＨＡから誘導されるリン脂質、およびＤＨＡから誘導されるコリン化合物からなる群より選択される１以上の化合物を有効成分とする動体視力改善剤が記載されている。ここでは、ＤＨＡ摂取群においては、ＤＨＡ服用後において、静止視力には殆ど変化がないにもかかわらず、動体視力に改善が認められ、特に両眼での動体視力は、有意に改善されたことが報告されている。また特許文献９には、第１の成分として、長鎖高度不飽和脂肪酸（ＬＣＰＵＦＡ）を構造中に含んでおり、加水分解によりＬＣＰＵＦＡを分離可能とするＬＣＰＵＦＡ供給化合物と、第２の成分としてリン脂質とを含有する油脂組成物であって、上記ＬＣＰＵＦＡ供給化合物が、脂肪酸アルコールエステル、トリグリセリド、ジグリセリド、モノグリセリド、グリセロ糖脂質、スフィンゴ脂質、糖エステル、およびカロテノイドエステルから選択される少なくとも１種であり、上記ＬＣＰＵＦＡ供給化合物から供給されるＬＣＰＵＦＡは、(a)アラキドン酸（ＡＡ）およびＤＨＡを含むか、あるいは(b)ＡＡのみを含み、上記第１の成分と上記第２の成分との配合比は、第２の成分であるリン脂質の全重量に対して供給されるＬＣＰＵＦＡの全重量の比が０．５以上となるように決定されており、第１の成分の全量から供給可能となっている全ての脂肪酸のうち、ＡＡの比率は２０．５重量％以上で、かつ、上記ＬＣＰＵＦＡ供給化合物から供給されるＬＣＰＵＦＡがＤＨＡを含む場合、第１の成分の全量から供給可能となっている全ての脂肪酸のうち、ＤＨＡの比率は２２．５重量％以上であることを特徴とする油脂組成物が記載されている。また特許文献１０には、スキゾキトリウム属F26-b株の微生物（FERM AP-20727）が生産する、ＰＣのグリセロールの1位にC15:0の脂肪酸が、2位にC22:6の脂肪酸がそれぞれエステル結合した、新規なＤＨＡ結合リン脂質が記載されている。さらに特許文献１１には、構成脂肪酸中にドコサヘキサエン酸を１５質量％ 以上含むリン脂質を有効成分とする筋タンパク質増強剤が記載されている。ここでは、イクラから抽出した脂質含有魚卵油（商品名：サンオメガＰＣ－ＤＨＡ（日油株式会社製））が用いられ、その組成として、リン脂質含量２７．８％、リン脂質を構成する脂肪酸組成のうちＤＨＡの割合は２８．１％、Ｃ２２：５の脂肪酸の割合は１２％であり、リン脂質を構成する極性基の種類は、７３．７％がＰＣであったことが記載されている。

一方、エーテル型リン脂質の一種であるプラズマローゲンは、生体内においては脳の髄鞘、心臓、骨格筋に存在していることが知られ、近年は疾患との関連等について着目されている。親鶏がプラズマローゲンの有用な供給源であることが報告され（非特許文献２）、またオキアミから１－アルキルエーテル型リン脂質含有画分を得たことが報告されている（特許文献１２）。

特開平２－２１５３５１号公報（特許第２９０９５０８号） 国際公開ＷＯ０３／０１１８７３号公報（米国特許８０３０３４８号公報） 特開平６－３２１９７０号公報（特許第３５３１８７６号） 特開平９－７７７８２号公報（特許第３５５８４２３号） 特開平１０－１７４７５号公報（特許第３６６４８１４号） 特開２０００－６０４３２号公報 特開２００８－３８０１１号公報 特開平１０－２８７５６３号公報（特許第４０２８０２０号） 国際公開ＷＯ２００５／０５４４１５号公報（特許第４７７３８２７号） 特開２００７－１４３４７９号公報（特許第４３４４８２７号） 特開２０１０－１０５９４６号公報 特開２０１７－１５５０２５号公報

オレオサイエンス 第２巻 第２号、６７－７４頁 日本畜産学会報, 2014, 85(2), 153-161.

高度不飽和脂肪酸のうち、ＤＨＡは特に多くの生理活性が知られている。そのため、リン脂質含量が高く、かつＤＨＡが結合したリン脂質が多く含まれる組成物があれば、有効な成分を、組成物としてはより少ない量で摂取することができ、望ましい。

本発明は、以下を提供する。
［１］ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）結合リン脂質を含む魚卵脂質組成物であって、
リン脂質を２６％以上含み、
脂質の構成脂肪酸に占めるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の組成比が１５％以上である、魚卵脂質組成物。
［２］α－グリセロホスホコリン、スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を含む、1に記載の魚卵脂質組成物。
［３］リン脂質が、ホスファチジルコリンを７４％以上含む、１または２に記載の組成物。
［４］脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡ組成比が１５％以上であり、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の組成比が５～２５％である、１～３のいずれか１項に記載の組成物。
［５］１００ｇ中、パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリンを３５００ｍｇ以上含む、１～４のいずれか１項に記載の組成物。
［６］１００ｇ中、エーテル型リン脂質を２５０ｍｇ含み、かつＤＨＡ結合エーテル型リン脂質、およびＥＰＡ結合エーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含む、１～５のいずれか１項に記載の組成物。
［７］α－グリセロホスホコリン、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を機能性成分として利用するための、１～６のいずれか１項に記載の組成物。
［８］皮膚の保湿機能の向上、メタボリックシンドロームの改善、脂質代謝の改善、糖代謝の改善、および認知機能の向上からなる群より選択されるいずれかのための、１～６のいずれか１項に記載の組成物。
［９］以下の工程を含む、α－グリセロホスホコリン、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含有する食品素材、医薬品素材、または化粧品素材の製造方法：
魚卵またはその加工品である原材料から、α－グリセロホスホコリン、スフィンゴミエリン、ジヒドロスフィンゴミエリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含む画分を得る工程。
［１０］原材料が、筋子、イクラ、数の子、助子、筋子抽出物、イクラ抽出物、数の子抽出物、助子抽出物、魚卵油、または魚卵油精製物である、９に記載の製造方法。
［１１］食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、リン脂質を２６％以上含む、９または１０に記載の製造方法。
［１２］食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、ＤＨＡ結合リン脂質を含み、
脂質の構成脂肪酸に占める、ＤＨＡの組成比が１５％以上、およびＥＰＡの組成比が５％以上である、９～１１のいずれか１項に記載の製造方法。

本発明はまた、以下を提供する。
［１］ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）結合リン脂質を含む魚卵脂質組成物であって、
リン脂質を３０％以上含み、
脂質の構成脂肪酸に占めるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の組成比が１５％以上である、魚卵脂質組成物。
［２］スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を含む、１または２に記載の魚卵脂質組成物。
［３］リン脂質が、ホスファチジルコリン（ＰＣ）を７４％以上含む、１または２に記載の組成物。
［４］脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡ組成比が１５％以上であり、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の組成比が６～２５％である、１～３のいずれか１項に記載の組成物。
［５］１００ｇ中、パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリンを７００～１５００ｍｇ含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の組成物。
［６］スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を機能性成分として利用するための、１～５のいずれか１項に記載の組成物。
［７］皮膚の保湿機能の向上、メタボリックシンドロームの改善、脂質代謝の改善、糖代謝の改善、および認知機能の向上からなる群より選択されるいずれかのための、１～５のいずれか１項に記載の組成物。
［８］以下の工程を含む、スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を含有する食品素材、医薬品素材、または化粧品素材の製造方法：
魚卵またはその加工品である原材料から、スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を含む画分を得る工程。
［９］原材料が、筋子、イクラ、筋子抽出物、イクラ抽出物、魚卵油、または魚卵油精製物である、８に記載の製造方法
［１０］食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、リン脂質を３０％以上含む、８または９に記載の製造方法。
［１１］食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、ＤＨＡ結合リン脂質を含み、
脂質の構成脂肪酸に占める、ＤＨＡの組成比が１５％以上、およびＥＰＡの組成比が６％以上である、８～１０のいずれか１項に記載の製造方法。

本発明により提供される組成物は、脂質中の有効成分の量が多いので、有効な成分を、組成物としてはより少ない量で摂取することができる。

本発明の組成物には、スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種が含有される。

本発明により、スフィンゴミエリンおよびジヒドロスフィンゴミエリンからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、新規な食品素材、化粧品素材、または医薬品素材の製造方法が提供される。

＜組成物＞
本発明は、リン脂質の含量を高め、かつリン脂質中のＤＨＡの組成比を高めた、ＤＨＡ結合リン脂質を含む魚卵脂質組成物に関する。

（リン脂質）
リン脂質とはリン酸の形でリンをもつ脂質をいい、グリセロリン脂質とスフィンゴシンリン脂質とがある。グリセロリン脂質の代表的なものは、ホスファチジルコリン（ＰＣ）、α－グリセロホスホコリン（α－ＧＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、１－リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ－１）、２－リゾホスファチジルコリン（ＬＰＣ－２）、２－リゾホスファチジルエタノールアミン（ＬＰＥ－２）であり、スフィンゴシンリン脂質の代表的なものは、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、ジヒドロスフィンゴミエリン（ＤＨＳＭ）である。

ＤＨＡ結合リン脂質とは、構成脂肪酸（結合脂肪酸ということもある。）の少なくとも一つがＤＨＡであるリン脂質をいう。

本発明の組成物においてはリン脂質の含量が高められている。本発明の組成物のリン脂質の含量は、例えば２６％以上であり、３０％以上であってもよく、好ましくは３５％以上であり、より好ましくは３７．５％以上であり、さらに好ましくは４０％以上である。本発明の組成物におけるリン脂質含量の上限は特に限定されないが、リン脂質含量が高くなると粘度が高くなり、粘度が一定以上となると製造上、扱いにくくなるため、例えば５０％以下であり、好ましくは４８％以下であり、より好ましくは４６％以下であり、さらに好ましくは４５％以下である。
なお、本発明において組成物に含まれる成分の含量に関して％で表示するときは、特に記載した場合を除き、重量に基づく。

本発明の組成物は、α－ＧＰＣ、ＳＭおよびＤＨＳＭからなる群より選択される少なくとも一種を含み、好ましい態様においては、ＳＭおよびＤＨＳＭを含む。α－ＧＰＣ、ＳＭおよびＤＨＳＭの含量は、特に限定されない。組成物中のα－ＧＰＣの含量は、例えば０．０５０％以上であり、好ましくは０．０７０％以上であり、より好ましくは０．１０％以上であり、さらに好ましくは０．１５％以上である。また組成物中のα－ＧＰＣの含量は、例えば０．６０％以下であり、０．４０％以下であってもよく、好ましくは０．３８％以下であり、より好ましくは０．３５％以下であり、さらに好ましくは０．３０％以下である。組成物中のＳＭの含量は、例えば０．８％以上であり、好ましくは０．９％以上であり、より好ましくは１．０％以上であり、さらに好ましくは１．１％以上である。また組成物中のＳＭの含量は、例えば２．３％以下であり、好ましくは２．２％以下であり、より好ましくは２．１％以下であり、さらに好ましくは２．０％以下である。組成物中のＤＨＳＭの含量は、例えば０．０５０％以上であり、好ましくは０．０７０％以上であり、より好ましくは０．１０％以上であり、さらに好ましくは０．１５％以上である。また組成物中のＤＨＳＭの含量は、例えば０．４０％以下であり、好ましくは０．３８％以下であり、より好ましくは０．３５％以下であり、さらに好ましくは０．３０％以下である。

従来、魚卵を原料とする脂質で構成される組成物に関する検討がされたことはあったが（前掲特許文献１１、および非特許文献１等）、魚卵脂質組成物中に、α－ＧＰＣ、ＳＭやＤＨＳＭが含まれることを開示するのは本願が初めてである。

α－ＧＰＣ、ＳＭおよびＤＨＳＭ以外の本発明の組成物に含まれるリン脂質は、特に限定されず、ＰＣ、ＰＥ、ＰＩ、ＬＰＣ－２等が多いことが好ましい。組成物中のＰＣの含量は、例えば２４～４５％であり、好ましくは２６～４３％であり、より好ましくは２８～４１％であり、さらに好ましくは３０～３９％である。組成物中のＰＥの含量は、例えば０．９０～２．３％であり、好ましくは１．１～２．２％であり、より好ましくは１．３～２．１％であり、さらに好ましくは１．５～２．０％である。組成物中のＰＩの含量は、例えば０．８０～１．８％であり、好ましくは０．９０～１．７％であり、より好ましくは１．０～１．６％であり、さらに好ましくは１．１～１．５％である。組成物中のＬＰＣ－２の含量は、例えば０．６０～１．８％であり、好ましくは０．７０～１．７％であり、より好ましくは０．８～１．６％であり、さらに好ましくは１．０～１．５％である。

本発明の組成物においてＰＣは、リン脂質中の含量としても比較的多く含まれる。リン脂質中のＰＣの含量は、例えば７４％以上であり、好ましくは８０％以上であり、より好ましくは８３％以上であり、さらに好ましくは８５％以上である。また９５％以下であり、好ましくは９４％以下であり、より好ましくは９３％以下であり、さらに好ましくは９２％以下である。リン脂質含量を高めた組成物においては、リン脂質中のＰＣの含量はより多い。したがって、好ましい態様においては、組成物中のリン脂質の含量は３５％以上であり、このときリン脂質中のＰＣの含量は、８３％以上であり、より好ましくは８５％以上であり、さらに好ましくは８７％である。

（脂肪酸組成）
本発明の組成物においては脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比が比較的高い。魚卵は、リン脂質の形態で、またＴＧの形態で、ＤＨＡを含むことが知られている。具体的には、本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比は、例えば１５％以上であり、好ましくは１８％以上であり、より好ましくは２２％以上であり、さらに好ましくは２４％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比の上限は特に限定されないが、例えば４６％以下であり、好ましくは４０％以下であり、より好ましくは３５％以下であり、さらに好ましくは３０％以下である。
なお、本発明において脂質の構成脂肪酸に占める、特定の脂肪酸の組成比に関して％で表示するときは、特に記載した場合を除き、脂肪酸組成をガスクロマトグラフ法で分析した際のチャートの面積に基づく。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸に占めるＥＰＡの組成比は比較的低く、例えば２５％以下であり、好ましくは２３％以下であり、より好ましくは２１％以下であり、さらに好ましくは１９％以下である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるＥＰＡの組成比の下限は特に限定されないが、例えば５．０％以上であり、６．０％以上であってもよく、好ましくは８．０％以上であり、より好ましくは１０％以上であり、さらに好ましくは１２％以上である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはミリスチン酸（Ｃ１４：０）が含まれる。その組成比は、例えば１．２％以上であり、１．５％以上であってもよく、好ましくは２．０％以上であり、より好ましくは２．５％以上であり、さらに好ましくは３．０％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるミリスチン酸の組成比の上限は特に限定されないが、例えば１０％以下であり、好ましくは８．０％以下であり、より好ましくは６．０％以下であり、さらに好ましくは５．０％以下である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはパルミチン酸（Ｃ１６：０）が含まれる。その組成比は比較的低く、例えば２５％以下であり、好ましくは２２％以下であり、より好ましくは２０％以下であり、さらに好ましくは１８％以下である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるパルミチン酸の組成比の下限は特に限定されないが、例えば８．０％以上であり、好ましくは１０％以上であり、より好ましくは１２％以上であり、さらに好ましくは１４％以上である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはステアリン酸（Ｃ１８：０）が含まれる。その組成比は、例えば１．３％以上であり、好ましくは２．２％以上であり、より好ましくは３．０％以上であり、さらに好ましくは３．５％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるステアリン酸の組成比の上限は特に限定されないが、例えば１０％以下であり、好ましくは８．０％以下であり、より好ましくは６．０％以下であり、さらに好ましくは５．０％以下である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはオレイン酸（Ｃ１８：１、ｎ９ｃ）が含まれる。その組成比は、例えば９．０％以上であり、１２％以上であってもよく、好ましくは１３％以上であり、より好ましくは１４％以上であり、さらに好ましくは１５％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるオレイン酸の組成比の上限は特に限定されないが、例えば２８％以下であり、２５％以下であってもよく、好ましくは２３％以下であり、より好ましくは２０％以下であり、さらに好ましくは１９％以下である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはエイコセン酸（Ｃ２０：１）が含まれる。その組成比は、例えば１．３％以上であり、１．５％以上であってもよく、好ましくは２．０％以上であり、より好ましくは２．５％以上であり、さらに好ましくは３．３％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるエイコセン酸の組成比の上限は特に限定されないが、例えば１０％以下であり、好ましくは８．０％以下であり、より好ましくは６．０％以下であり、さらに好ましくは５．０％以下である。

本発明の組成物の脂質の構成脂肪酸にはドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）（Ｃ２２：５）が含まれる。その組成比は、例えば０．５０％以上であり、好ましくは２．０％以上であり、より好ましくは２．５％以上であり、さらに好ましくは３．５％以上である。本発明の組成物における脂質の構成脂肪酸に占めるＤＰＡの組成比の上限は特に限定されないが、例えば１０％以下であり、好ましくは８．０％以下であり、より好ましくは６．０％以下であり、さらに好ましくは５．０％以下である。

好ましい態様においては、組成物はＤＨＡ結合リン脂質を含む脂質組成物であって、リン脂質を３０％以上含み、脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比が１５％以上、ＥＰＡの組成比が６％～２５％、およびパルミチン酸の組成比が２０％以下である。より好ましい態様においては、さらにミリスチン酸の組成比が３．７％以下であるか、またはＤＰＡの組成比が５．５％以下である。ＤＰＡの組成比は、さらに好ましくは５．０％以下である。

別の好ましい態様においては、組成物は、ＤＨＡ結合リン脂質を含む脂質組成物であって、リン脂質を３０％以上含み、脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比がＥＰＡの組成比より大きい。より好ましい態様においては、脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡ組成比が１５％以上であり、ＥＰＡの組成比が６～２５％である。より好ましい態様においては、さらにミリスチン酸の組成比が３．７％以下であるか、またはＤＰＡの組成比が５．５％以下である。ＤＰＡの組成比は、さらに好ましくは５．０％以下である。

本発明の組成物には、他の構成脂肪酸として、Ｃ１４：１（ミリストレイン酸）、Ｃ１５：１（ペンタデセン酸）、Ｃ１７：１（ヘプタデセン酸）、Ｃ２２：１（ドコセン酸）、Ｃ２４：１（テトラコセン酸）、Ｃ１８：２ ｎ－６（リノール酸）、Ｃ１８：３ ｎ－３（α‐リノレン酸）、Ｃ１８：３ ｎ－６（γ‐リノレン酸）、Ｃ２０：２ ｎ－６（エイコサジエン酸）、Ｃ２０：３ ｎ－６（エイコサトリエン酸）、Ｃ２０：４ ｎ－６（アラキドン酸）、Ｃ２２：２（ドコサジエン酸）等が含まれていてもよい。

（ＤＨＡ結合リン脂質）
本発明の組成物には、ＤＨＡが結合したリン脂質が多く含まれる。詳細には、本発明の組成物におけるリン脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量は、例えば１０ｇ以上であり、好ましくは１２ｇ以上であり、より好ましくは１４ｇ以上であり、さらに好ましくは１６ｇ以上である。本発明の組成物におけるリン脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量の上限は特に限定されないが、例えば３０ｇ以下であり、好ましくは２５ｇ以下であり、より好ましくは２２ｇ以下であり、さらに好ましくは２０ｇ以下である。一方、本発明の組成物における中性脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量は、例えば８．０ｇ以上であり、好ましくは１０ｇ以上であり、より好ましくは１２ｇ以上であり、さらに好ましくは１４ｇ以上である。本発明の組成物における中性脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量の上限は特に限定されないが、例えば２０ｇ以下であり、好ましくは１８ｇ以下であり、より好ましくは１７ｇ以下であり、さらに好ましくは１６ｇ以下である。
なお、脂質に含まれる中性脂質またはリン脂質１００ｇ当たりの構成脂肪酸の重量は、対象となる脂質からシリカゲルカラムを用いて中性脂質画分、極性リン脂質画分を得て、得られた画分について常法に従って構成脂肪酸量を測定することにより、求めることができる。

好ましい態様においては、組成物中のリン脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量が中性脂質１００ｇ当たりのＤＨＡの重量よりも大きい。

本発明の組成物におけるリン脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量は、例えば５．０ｇ以上であり、好ましくは６．０ｇ以上であり、より好ましくは７．０ｇ以上であり、さらに好ましくは８．０ｇ以上である。本発明の組成物におけるリン脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量の上限は特に限定されないが、例えば１２ｇ以下であり、好ましくは１２ｇ以下であり、より好ましくは１１ｇ以下であり、さらに好ましくは１０ｇ以下である。一方、本発明の組成物における中性脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量は、例えば１０ｇ以上であり、好ましくは１１ｇ以上であり、より好ましくは１２ｇ以上であり、さらに好ましくは１３ｇ以上である。本発明の組成物における中性脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量の上限は特に限定されないが、例えば１８ｇ以下であり、好ましくは１６ｇ以下であり、より好ましくは１５ｇ以下であり、さらに好ましくは１４ｇ以下である。

好ましい態様においては、組成物中のリン脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量が中性脂質１００ｇ当たりのＥＰＡの重量よりも小さい。

（パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン等）
本発明の組成物に含まれるＤＨＡ結合リン脂質の一つは、パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン（ＰＤＰＣ）である。ＰＤＰＣは、ホスファチジルコリン（３８：６）において、Ｃ－１およびＣ－２のアシル基のいずれか一方がヘキサデカノイル（１６：０）であり、他方がドコサヘキサエノイル（２２：６）であるものをいう。本発明の組成物１００ｇ中の含量は、例えば５５０ｍｇ以上であり、好ましくは７００ｍｇ以上であり、より好ましくは８００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは１，０００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは３，５００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは３，８００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは６，０００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは１０，０００ｍｇ以上である。本発明の組成物１００ｇ中のＰＤＰＣの上限は特に限定されないが、例えば５０，０００ｍｇ以下であり、好ましくは３０，０００ｍｇ以下であり、より好ましくは１２，０００ｍｇ以下であり、１５００ｍｇ以下であり、好ましくは１４００ｍｇ以下であり、より好ましくは１３００ｍｇ以下であり、さらに好ましくは１２００ｍｇ以下である。

本発明の組成物に含まれるリン脂質中でのＰＤＰＣの組成比は、例えば１２．０％以上であり、好ましくは１６．０％以上であり、より好ましくは１９．０％以上であり、さらに好ましくは２２．０％以上である。本発明の組成物に含まれるリン脂質中でのＰＤＰＣの組成比の上限は特に限定されないが、例えば４５．０％以下であり、好ましくは４０．０％以下であり、より好ましくは３５．０％以下であり、さらに好ましくは３０．０％以下である。

本発明の組成物に含まれるＤＨＡ結合リン脂質の他の一つは、ステアロイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン（ＳＤＰＣ）である。ＳＤＰＣは、ホスファチジルコリン（４０：６）において、Ｃ－１およびＣ－２のアシル基のいずれか一方がステアロイル（１８：０）であり、他方がドコサヘキサエノイル（２２：６）であるものをいう。本発明の組成物１００ｇ中の含量は、例えば７００ｍｇ以上であり、好ましくは１０００ｍｇ以上であり、より好ましくは２０００ｍｇ以上であり、さらに好ましくは２５００ｍｇ以上である。本発明の組成物１００ｇ中のＳＤＰＣの上限は特に限定されないが、例えば６０００ｍｇ以下であり、好ましくは５０００ｍｇ以下であり、より好ましくは４０００ｍｇ以下であり、さらに好ましくは３０００ｍｇ以下である。

本発明の組成物に含まれるリン脂質中でのＳＤＰＣの組成比は、例えば３．０％以上であり、好ましくは６．０％以上であり、より好ましくは７．０％以上であり、さらに好ましくは８．０％以上である。本発明の組成物に含まれるリン脂質中でのＳＤＰＣの組成比の上限は特に限定されないが、例えば２０．０％以下であり、好ましくは１７．０％以下であり、より好ましくは１３．０％以下であり、さらに好ましくは１０．０％以下である。

なお、組成物１００ｇ当たりのＰＤＰＣ及びＳＤＰＣの含量は、必要に応じ市販の標準品で検量線を作成し、液体クロマトグラフィー質量分析（Liquid Chromatography/Mass Spectrometry：ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）法により、求めることができる。また本発明の組成物に関し、リン脂質中での特定のリン脂質の組成比を示すときは、特に記載した場合を除き、PC(16:0,16:0)、PC(16:0,18:0)、PC(18:1,16:0)、PC(18:0,18:0)、PC(18:1,18:0)、PC(18:1,18:1)、PC(16:0,20:4)、PC(20:5,16:0)、PC(18:0,20:4)、PC(20:4,18:1)、PC(20:5,18:0)、PC(20:5,18:1)、PC(22:6,16:0)、PC(20:5,20:5)、PC(22:6,18:0)、PC(22:6,18:1)、PC(20:5,20:4)、PC(20:4,22:6)、PC(20:5,22:6)、およびPC(22:6,22:6)の総量をリン脂質全体として計算した値である。

（エーテル型リン脂質）
本発明の組成物に含まれるリン脂質の一つは、エーテル型リン脂質である。エーテル型リン脂質とは、エーテル結合による炭化水素鎖を有するリン脂質をいい、特に、ｓｎ－１位にビニルエーテル結合による炭化水素鎖を有し、ｓｎ－２位に脂肪酸が結合しているグリセロリン脂質を、プラズマローゲンという。プラズマローゲンは、血液又はリンパ液中のプラスマローゲンが加齢と共に減少すること、アルツハイマー病患者では脳のプラスマローゲンが減少していること、プラスマローゲンがＬＤＬコレステロールの酸化を抑制すること等、プラスマローゲンが加齢や酸化ストレスが関与する疾病と関係していることが知られている（Oleoscience, 2, 27-36(2002) 、Oleoscience, 5, 405-415(2005))。

本発明の組成物には、より特定するとＤＨＡ結合エーテル型リン脂質、およびＥＰＡ結合エーテル型リン脂質からなる群より選択されるいずれかが含まれる。

本発明の組成物１００ｇ中のエーテル型リン脂質、の含量（複数のエーテル型リン脂質が含まれる場合はその総量）は、例えば５０ｍｇ以上であり、好ましくは１００ｍｇ以上であり、より好ましくは２５０ｍｇ以上であり、さらに好ましくは３００ｍｇ以上である。本発明の組成物１００ｇ中のエーテル型リン脂質の含量（複数のエーテル型リン脂質が含まれる場合はその総量）の上限は特に限定されないが、例えば１３００ｍｇ以下であり、好ましくは１２００ｍｇ以下であり、より好ましくは１１００ｍｇ以下であり、さらに好ましくは１０００ｍｇ以下である。

なお、組成物１００ｇ当たりのエーテル型リン脂質、の含量（複数のエーテル型リン脂質が含まれる場合はその総量）は、必要に応じ市販の標準品で検量線を作成し、液体クロマトグラフィー質量分析（Liquid Chromatography/Mass Spectrometry：ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）法により、求めることができる。このとき、リン脂質のｓｎ－１位のエステル結合を選択的に分解できる酵素（例えば、ホスホリパーゼＡ１）で前処理することにより、ＰＣやＰＥを分解し、エーテル型リン脂質を測定することができる（非特許文献２参照）。

魚卵脂質組成物中にエーテル型リン脂質が含まれることを開示するのは本願が初めてである。また魚卵脂質組成物中にＤＨＡ結合エーテル型リン脂質、およびＥＰＡ結合エーテル型リン脂質からなる群より選択されるいずれかが含まれることを開示するのは本願が初めてである。

（脂質以外の成分）
本発明の組成物は脂質以外の成分を含んでいてもよい。脂質以外の成分としては、たんぱく質、アスタキサンチン、ナトリウム、カリウム、リン等の無機物である。なお脂質とは、非極性溶媒に可溶である、生物由来の物質をいい、これには単純脂質、複合脂質、誘導脂質（脂肪酸、テルペノイド、ステロイド、カロテノイド等）が含まれる。

本発明の組成物における脂質以外の成分の含量は、例えば１０．０％以下であり、好ましくは８.０％以下であり、より好ましくは７．５％以下であり、さらに好ましくは７．０％以下である。

本発明の組成物はアスタキサンチンを含んでいてもよい。本発明の組成物１００ｇ中のその含量は、例えば０．７ｍｇ以上であり、好ましくは１．０ｍｇ以上であり、より好ましくは１．２ｍｇ以上であり、さらに好ましくは１．５ｍｇ以上である。本発明の組成物１００ｇ中のアスタキサンチンの含量の上限は特に限定されないが、例えば２３ｍｇ以下であり、好ましくは２０ｍｇ以下であり、より好ましくは１０ｍｇ％以下であり、さらに好ましくは５．０ｍｇ以下である。

（原料）
脂質により構成された本発明の組成物は、魚卵から調製される。魚の種類は特に限定されないが、サケ科、ニシン科、またはタラ科の魚であることが好ましい。サケ科には、タイヘイヨウサケ属、タイセイヨウサケ属、イワナ属、イトウ属が含まれるが、タイヘイヨウサケ属またはタイセイヨウサケ属の魚であることがより好ましい。タイヘイヨウサケ属の魚の例として、シロザケ、ギンザケ（コーホーサーモン、シルバーサーモン）、カラフトマス（ピンクサーモン）、サクラマス、ヤマメ、タイワンマス、サツキマス、アマゴ、ビワマス（アメノウオ）、ニジマス（スチールヘッド）、マスノスケ（キングサーモン）、ベニザケ、ヒメマス、クニマスが挙げられる。タイセイヨウサケ属の魚の例として、タイセイヨウサケ（アトランティックサーモン）、ブラウントラウトが挙げられる。ニシン科には、ニシン亜科、ニシンダマシ亜科、コノシロ亜科、Ehiravinae亜科が含まれるが、ニシン亜科、ニシン属の魚であることが好ましい。ニシン属の魚の例として、ニシン、タイセイヨウニシンが挙げられる。タラ科には、Gadus（マダラ）属、Micromesistius（ミナミダラ）属、Gadiculus属、Trisopterus属、Microgadus属、Eleginusコマイ属、Merlangius属、Melanogrammus属、Pollachius属、Boreogadus属、Arctogadus属が含まれるが、マダラ属の魚であることが好ましい。マダラ属の魚の例として、スケソウダラ、マダラ、タイヘイヨウダラ、グリーンランドダラが挙げられる。魚卵は、天然のものであってもよく、養殖のものであってもよい。

本発明で魚卵というときは、特に記載した場合を除き、加工の程度は問わない。したがって、本発明に関し、魚卵脂質組成物というときは、魚卵抽出物、魚卵油、魚卵油精製物、それらのいずれかの乾燥物等を原料とする脂質組成物も含まれる。

特に好ましい態様においては、本発明の組成物は、筋子、イクラ、数の子、助子、またはそれらのいずれかの加工品から調製される。

本発明の組成物は魚卵を原料とするため、イカの皮、イカの肉、オキアミ等を原料とする脂質組成物とは脂質組成が異なることは明らかである。

＜製造方法＞
前述のとおり、魚卵脂質組成物中に、α－ＧＰＣ、ＳＭ、ＤＨＳＭ、およびエーテル型リン脂質が含まれることを開示するのは本願が初めてである。したがって、本発明はＳＭおよびＤＨＳＭからなる群より選択される少なくとも一種を含有する、食品素材、医薬品素材、または化粧品素材の製造方法を提供するものでもある。この製造方法は、下記の工程を含む。
魚卵またはその加工品である原材料から、α－ＧＰＣ、ＳＭ、ＤＨＳＭ、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含む画分を得る工程。

また本発明はＰＤＰＣを豊富に含有する、食品素材、医薬品素材、または化粧品素材の製造方法を提供するものでもある。この製造方法は、下記の工程を含む。
魚卵またはその加工品である原材料から、ＰＤＰＣを含む画分を得る工程。
豊富に含有するとは、素材１００ｇあたり、ＰＤＰＣを少なくとも５５０ｍｇ以上、好ましくは７００ｍｇ以上、より好ましくは８００ｍｇ以上、さらに好ましくは１０００ｍｇ以上含むことをいう。

原材料となる魚卵については、上で説明したとおりである。好ましい態様においては、原材料は、筋子、イクラ、数の子、助子、筋子抽出物、イクラ抽出物、数の子抽出物、助子抽出物、魚卵油、または魚卵油精製物である。この方法により製造される食品素材は、上で説明したリン脂質の含量を高め、かつリン脂質中のＤＨＡの組成比を高めた、ＤＨＡ結合リン脂質を含む魚卵脂質組成物であり得る。好ましい態様においては、食品素材は、ＤＨＡ結合リン脂質を含み、脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡの組成比が１５％以上であり、およびＥＰＡの組成比が５％以上である。

本発明の製造方法における、魚卵またはその加工品である原材料からＳＭおよびＤＨＳＭからなる群より選択される少なくとも一種を含む画分を得る工程は、天然物からリン脂質を抽出する従来技術が利用できる。従来技術としては、前掲特許文献１～１１および非特許文献１に記載された方法のほか、特開昭６４－５０８９０号公報、特開平１－１９９５８８号公報、特開平７－９５８７５号公報、特公平７－５９５８６９号公報、特開平１１－１２３０５２号公報、特開２００６－９６６７４号公報に記載された方法等が挙げられる。当業者であれば、これらの公知の方法を、原材料に応じて適宜改変して本発明のために適用できる。

魚卵またはその加工品である原材料からのリン脂質の抽出は、具体的には、原材料と極性の低い有機溶媒を混合することにより実施できる。極性の低い溶媒の例は、６０～９９％含水エタノール、エタノール、ヘキサン、イソプロピルアルコール、酢酸エチル、アセトン、エーテル、クロロホルム、メタノールからなる群より選択される１種または２種以上の有機溶剤が挙げられるが、これらに限定されない。有機溶剤による抽出温度は０～９０℃、好ましくは３０～７０℃である。含水エタノールの水分含量を操作することで、得られる抽出物におけるリン脂質の含量を増やすことができることが知られている（前掲非特許文献１参照）。また、魚卵またはその加工品である原材料からのリン脂質の抽出は、二酸化炭素を用いた超臨界流体抽出法によっても実施できる。

＜用途＞
本発明の組成物は、ＤＨＡ結合リン脂質の機能に基づく様々な用途に、使用することができる。ＤＨＡ結合リン脂質の機能としては、アレルギー抑制、肝機能向上、赤血球変形機能向上、脳卒中抑制、美白、認知機能の向上等が知られている。また、ＰＤＰＣに代表されるＤＨＡ結合リン脂質が、HL-60ヒト前骨髄性白血病細胞の分化と増殖に影響を及ぼすとの報告がある（J. Jpn. Oil Chem. Soc. 46(4), 1997）。

本発明の組成物は、ＤＨＡの機能に基づく様々な用途にも使用することができる。ＤＨＡの機能としては、血小板凝集抑制、血中中性脂肪値低下、血中コレステロール低下、脳機能向上、記憶力の維持、睡眠の質改善等が知られている。

好ましい態様においては、本発明の組成物は、メタボリックシンドロームの改善のため、脂質代謝の改善ため、糖代謝の改善のため、および認知機能の向上のために用いることができる。メタボリックシンドロームとは、内臓肥満に高血圧、高血糖、または脂質代謝異常が組み合わさることにより、心臓病や脳卒中などになりやすい病態をいい、ウエスト周囲径が男性の場合は８５ｃｍ以上であり、女性の場合は９０ｃｍ以上であり、かつ血圧、血糖、および脂質の３つのうち２つ以上が基準値から外れる場合にこの病態であると診断される。基準値から外れるとは、血圧については、収縮期（最大）血圧が≧１３０ｍｍＨｇ、かつ／または拡張期（最小）血圧が≧８５ｍｍＨｇであること、血糖については、空腹時血糖が≧１１０ｍｇ／ｄＬであること、脂質については、高トリグリセリド血症、すなわち血液中のトリグリセリドが≧１５０ｍｇ／ｄＬ、かつ／または低ＨＤＬコレステロール血症、すなわち血中のＨＤＬが<４０ｍｇ／ｄＬであることをいう。認知機能の向上の対象には、アルツハイマー病の患者が含まれる。

本発明の組成物はまた、ＳＭまたはＤＨＳＭの機能に基づく様々な用途にも使用することができる。ＳＭ等のスフィンゴ脂質の骨格部分であるセラミドは表皮層の細胞間脂質の主要な成分であり、皮膚のバリア機能や保湿機能において重要である。したがって、本発明の組成物は、皮膚のバリア機能や保湿機能のために用いることができる。

＜その他＞
（形態）
本発明の組成物は、一般食品、保健機能食品、医薬品、医薬部外品の形態とすることができる。これらは、特に記載した場合を除き、ヒトのためのもののみならず、ヒト以外の動物のためのものを含む。保健機能食品は、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品を含む。食品は、特に記載した場合を除き、固形物のみならず、液状のもの、例えば飲料、ドリンク剤、流動食、およびスープを含む。食品は、特別用途食品、栄養補助食品、健康補助食品、サプリメント（例えば、カプセル、錠剤等の各種の剤型のもの）、美容食品（例えば、ダイエット食品）等の、健康食品の全般を包含する。

（対象）
本発明の組成物は、リン脂質やＤＨＡを、対象に摂取させる、または投与するのに適している。このような対象には、乳幼児、子ども、成人（１５歳以上）、中高年者、高齢者（６５歳以上）、病中病後の者、妊婦、産婦、男性、女性が含まれる。

（投与経路等）
本発明の組成物は、経口的に摂取させ、または投与するのに適している。

（用量）
本発明の組成物の摂取量・投与量は、一日当たり、１００ｍｇ～１００００ｍｇとすることができ、好ましくは３００ｍｇ～５０００ｍｇであり、より好ましくは５００ｍｇ～２５００ｍｇである。厚生労働省の「日本人の食事摂取基準（２０１５年版）」によると、ｎ－３系脂肪酸の食事摂取基準は、１５歳以上の男性では２．１～２．４ｇ／日、１５歳以上の女性では１．６～２．０ｇ／日、妊婦および授乳婦では１．８ｇ／日が目安量とされている。本発明の組成物もこの範囲で用いることができる。

本発明の組成物は、一日１回の投与・摂取としてもよいし、一日複数回、例えば食事毎の３回の投与としてもよい。組成物は、食経験豊富な魚卵由来の有効成分を用いているため、長期間の摂取に適している。そのため繰り返し、または長期間にわたって摂取してもよく、例えば３日以上、好ましくは１週間以上、より好ましくは４週間以上、特に好ましくは１カ月以上、続けて投与・摂取することができる。

（他の成分、添加剤）
本発明の組成物は、魚卵由来の脂質以外に、食品または医薬品として許容可能な他の有効成分や栄養成分を含んでいてもよい。そのような成分の例は、ビタミン（例えば、ビタミンＡ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ビオチン、葉酸、パントテン酸およびニコチン酸類）、ミネラル（例えば、銅、亜鉛、鉄、コバルト、マンガン）、アミノ酸類（例えば、リジン、アルギニン、グリシン、アラニン、グルタミン酸、ロイシン、イソロイシン、バリン）、糖質（グルコース、ショ糖、果糖、麦芽糖、トレハロース、エリスリトール、マルチトール、パラチノース、キシリトール、デキストリン）、食物繊維、タンパク質、脂質等である。

また組成物は、食品または医薬として許容される添加物をさらに含んでいてもよい。そのような添加物の例は、酸化防止剤、安定剤、安定化剤、着色剤、保存剤、不活性担体（固体や液体担体）、賦形剤、界面活性剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、溶解補助剤、懸濁化剤、コーティング剤、緩衝剤、pH調整剤、乳化剤、甘味料、香料、酸味料、天然物である。

（その他）
本発明の組成物には、リン脂質、ＤＨＡ、およびＤＨＡ結合リン脂質が含まれていること、またそれらの成分の機能や、それらの成分の摂取のために用いることができる旨を表示することができ、また摂取を勧める特定の対象（例えば、中性脂肪が気になる方、ＤＨＡを摂りたい方、等）を表示することができる。表示は、直接的にまたは間接的にすることができる。直接的な表示の例は、製品自体、パッケージ、容器、ラベル、タグ等の有体物への記載であり、間接的な表示の例は、チラシ、パンフレット、展示会、店頭、ウェブサイト、書籍、新聞、雑誌、テレビ、ラジオ、郵送物、電子メール、音声等の、場所または手段による、広告・宣伝活動を含む。

以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されない。

＜筋子、数の子、助子からの組成物の製造＞
凍結粉砕した生筋子(15 kg)に含水エタノール(150 L) を加えて 抽出し、ろ過により残渣を濾別した。また、残渣を抽出器に戻し、再度エタノール (75 L)を加えて抽出した。得られたろ液を減圧下、溶媒を留去し、赤色油状物質の約３０％のリン脂質を含む組成物（３０ＰＬ）（実施例1）、約４０％のリン脂質を含む組成物（４０ＰＬ）（実施例2-1、および実施例2-2）を製造した。また同様に、数の子、養殖サケからの筋子、助子を原料とし、リン脂質を含む組成物を製造した。

＜組成物の分析＞
１．材料・方法
以下の方法で、得られた組成物について分析した。

（リン脂質含量測定のためのＪＦＲＬ法）
試料濃度が1.5%となるように、試料(200 mg)を0.5% EDTA2Na含有10%コール酸ナトリウム水溶液(pH6.9)に希釈して、測定溶液とした。また内部標準にはホスホセリン(traceable reference material)を用いた。NMRの測定条件は、下記の通り。
NMR装置: JNM-ECA 500(日本電子株式会社)
31P共鳴周波数: 202 MHz、待ち時間: 20秒、取り込み時間: 4.0秒、パルス核90°
積算回数: 2048回、 測定温度:30℃

（脂肪酸測定のためのガスクロマトグラフ法）
試料100 mgをねじ口試験管に精秤し、0.5 M水酸化ナトリウム溶液を1.5 mL加え、窒素封入した後、100℃のブロックヒーターで9分間加熱した。ブロックヒーターから試験管を取り出し、放冷した後、三フッ化ホウ素メタノール錯体溶液(Sigma,B1252-100ML)(2 mL)加え、窒素封入した後、100℃のブロックヒーターで7分間加熱した。ブロックヒーターから試験管を取り出し、放冷した後、ヘキサンを3 mL加え、3分間ボルテックスした。蒸留水を3 mL加え、30秒間手で激しく撹拌した後、試験管立てに静置し、水層とヘキサン層に分離した。硫酸ナトリウムで脱水した後、ガスクロマトグラフィー(Plus/GC-2010：島津製作所)に供した。

（比較品）
また比較のため、以下の従来品を用いた。
市販品A（クリルオイル、AkerBiomarine製 Lot.160512）
市販品B（クリルオイル AkerBiomarine製 Lot.170818）
市販品C（サンオメガDHA-PC 日油製 Lot. 160512）

２．結果
（組成）

（リン脂質クラスの分析）

（脂肪酸組成（全体） 組成比％）
組成比を、自動積分で取得された面積値のうち、溶媒ピークのみを除外し、算出した面積の割合として求めた。結果を下表に示した。

＜ＤＨＡが結合している脂質の分析＞
試料を(約700mg)クロロホルム(4mL)に溶解し、シリカゲルカラム(SepPakVac12cc(2g）SilicaCartridge（MERCK）)にアプライした。クロロホルム(30mL)、クロロホルム-メタノール(9：1）(50mL)を順次通液し、溶出した溶液を中性脂質画分（NL画分）とした。つぎに、メタノール(60mL)を通液して溶出した溶液を極性リン脂質画分（PL画分）とした。NL画分、PL画分それぞれを濃縮し、定法に従いDHA、EPA含量(100g当たりの重量)を測定した。

結果を下表に示した。

＜パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリンの分析＞
DHA結合リン脂質のうち、パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリン（PC38:6(PC-16:0-22:6)）をLC-MS/MSで定量した。

（標準溶液の調製）
Avanti社製1-Palmitoyl-2-docosahexaenoyl-sn-glycero-3-phosphocholine(25mg/2.5 mL Chloroform Solution, Lot:850461C-25MG-J-053)を用いた。原液(104.0 mg)を秤量し、そこに0.1%ギ酸＋5mMギ酸アンモニウム含有メタノール(900 uL)を加えた(1000ppm溶液)。次に、1000ppm溶液(100 uL)に0.1%ギ酸＋5mMギ酸アンモニウム含有メタノール(900 uL)を加え、100ppm溶液を調製した。同様の操作を繰り返し、10000ppb, 1000ppb, 100ppb溶液をそれぞれ調製した。得られた希釈液を外部標準サンプルとした。

（分析サンプル調製）
サンプル(5-10 mg)を精秤し、クロロホルム(5-10 mL)をホールピペットにて加えた(1000ppm溶液)。次に、1000ppm溶液(0.1 g)を精秤し、0.1%ギ酸＋5mMギ酸アンモニウム含有メタノール(900 uL)を加えた(100ppm溶液)。さらに、100ppm溶液(100 uL)に対し0.1%ギ酸＋5mMギ酸アンモニウム含有メタノール(900 uL)を加えた(10ppm溶液)。得られた希釈液を分析サンプルとした。

（LC基本条件）
流速：0.35ml/min
Column Oven Temp：50℃
Injection Volume:1uL
Column：Triart C18 (2.1×150mm, 粒径3μm) YMC社

（グラジエント条件）
・移動相A：0.1%ギ酸＋10mMギ酸アンモニウム含有60%アセトニトリル
・移動相B：0.1%ギ酸＋10mMギ酸アンモニウム含有2-プロパノール：アセトニトリル＝9:1

（MS条件）
質量分析装置: QTRAP6500+ (SCIEX)
Polarity: Negative、Curtain Gas:20.0[psi]、IonSpray Voltage:-5500.0[V]
Temperature:350.0℃、Ion Source Gas 1:40.0、Ion Source Gas 2:50.0
CAD: 11.0、EP:-10.0
Q1: 850.56, Q3:255.233, 327.233, DP voltage: -50, CE voltage:-46, CXP voltage:-13
定量には、保持時間9.78 分、Q1: 850.56、Q3 327.233を用いた。

定量結果を下表に示した。

＜エーテルリン脂質画分の分析＞
エーテルリン脂質画分の定量分析
（分析サンプルの前処理）
試料を(約150 mg)クロロホルム-メタノール(9 : 1)(500 μL)に溶解し、シリカゲルカラム(Bond Elut(5 g）（Agilent）)にアプライした。溶出した溶液を中性脂質画分（NL画分）とした。つぎに、クロロホルム:メタノール：水(65：25：4)(100 mL)を通液して溶出した溶液を極性リン脂質画分（PL画分）とした。PL画分それぞれを濃縮、凍結乾燥した。

PL画分(約10 mg)をエタノール(150μL)に溶解し、次いでホスホリパーゼA1水溶液(三菱ケミカルフーズ, 9000U, 0.1 mol/L クエン酸ナトリウム/塩酸緩衝液，pH 4.4, 3 mL）中で加水分解した(反応温度50℃, 30時間)。反応液に対しクロロホルム-メタノール(1:1)(6.66 mL)を加え、攪拌した後に遠心分離(3500rpm×15min)し、下層を採取した。無水硫酸ナトリウムで脱水した後、濃縮乾固および真空乾固により抽出油を得た。なお、本酵素分解条件は三明らの方法を参考に実施した(非特許文献２）。

（分析サンプルの調製）
PL画分の前処理は前項の方法に従って実施した。表1の抽出油に対してメタノール(1.4～3.9g)を加えて希釈し、1000ppmメタノール溶液を得た。その溶液(100 μL)に対してメタノール(900 μL)を加えた。当該希釈液をメンブレンフィルター(0.20 μm, DISMIC-13HP)に通液させ、測定サンプルとした。

（検量線用標準液の調製）
Avanti社製1-(1Z-octadecenyl)-2-oleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine(1 mg/mL Chloroform Solution, Lot: 852467C-5MG-D-021)を用いた。原液(100 μL)にメタノール(900 μL)を加えた(100ppm溶液)。次に、100ppm溶液(500 μL)にメタノール(500 μL)を加えて50ppm溶液を調製した。さらに、100ppm溶液(150 μL)にメタノール(1350 μL)を加えて10ppm溶液を調製した。50ppm溶液(100 μL)にメタノール(900 μL)を加えて5ppm溶液を調製した。10ppm溶液(200 μL)にメタノール(800 μL)を加えて2ppm溶液を調製した。得られた希釈液を外部標準サンプルとした。

（LC基本条件）
流速：0.30ml/min
Column Oven Temp：50℃
Injection Volume:10μL
Column：ACQUITY UPLC BEH Amide 1.7um 2.1 x 100mm Column(Waters社)

（グラジエント条件）
・移動相A：2mM 酢酸アンモニウム含有 水：アセトニトリル＝5：95
・移動相B：2mM 酢酸アンモニウム含有 水：アセトニトリル＝50：50

（荷電化粒子検出器の設定条件）
・荷電化粒子検出器：Corona Veo RS(ThermoFisher)
・フィルター定数：5.0 sec
・パワーファンクション：1.00
・電流範囲：100 pA
・ドライングチューブ温度：35℃

（定量結果）
定量結果を下表に示す。

エーテルリン脂質画分の定性分析
LC-MS測定により、当該エーテルリン脂質画分中に含まれる化合物を定性した。

（分析サンプルの調製）
酵素分解後の抽出油1重量あたりに対してメタノール1000倍容を加えて希釈し、1000 ppmメタノール溶液を得た。その溶液(100 μL)に対して0.1 %ギ酸および5 mMギ酸アンモニウム含有メタノール(900 μL)を加えた。当該希釈液をメンブレンフィルター(0.20 μm, DISMIC-13HP)に通液し、測定サンプルとした。

（LC基本条件）
流速：0.30 mL/min
Column Oven Temp：50℃
Injection Volume:10μL
Column：ACQUITY UPLC BEH Amide 1.7um 2.1 x 100mm Column(Waters社)

（グラジエント条件）
・移動相A：2 mM 酢酸アンモニウム含有 水：アセトニトリル＝5：95
・移動相B：2 mM 酢酸アンモニウム含有 水：アセトニトリル＝50：50

（ＭＳの設定条件）
質量分析装置: Q-Exactive (Thermo Fisher)
<General>
Polarity: Negative
Default charge state: 2
<Full MS>
Resolution: 70,000
AGC target: 3e6
Maximum IT: 100 ms
Scan Range: 200 to 2000 m/z
<dd-MS2 / dd-SIM>
Resolution: 17,500
AGC target: 1e5
Maximum IT: 50 ms
Loop count: 5
TopN: 5
Isolation window: 4.0 m/z
Stepped NCE: 25, 35, 45

（定性方法）
上記質量分析装置で得たデータの専用解析ソフトウェアであるFree Style(Thermo Fisher)およびLipid Search (Ver 4.2.23, 三井情報株式会社)により解析した。

（Lipid Searchの設定パラメーター）
・Search type: product
・Precursor Tolerance: 5.0ppm
・Product Tolerance: 8.0ppm
・m-Score threshold: 2.0
・Adducts: -H, +COOH

（定性結果）
代表例として、筋子オイル40PLの解析について記載する。
Lipid Searchの解析結果より、主として、PC(14:0e_20:5) 、PC(14:0e_22:6)、PC(14:1e_22:6)、PC(16:1e_22:6)、PC(18:1e_22:6)を含むことを認めた。すなわち、DHA、EPAが結合したことを特徴とするエーテルリン脂質をであった。これらエーテルリン脂質(プラズマローゲン等)には、一般に認知機能改善に効果があることが知られている。

Claims (11)

1. α－グリセロホスホコリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を機能性成分として利用するための、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）結合リン脂質を含む魚卵脂質組成物。
2. リン脂質を２６％以上含み、
   脂質の構成脂肪酸に占めるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の組成比が１５％以上である、請求項１に記載の魚卵脂質組成物。
3. α－グリセロホスホコリンを含む、請求項1または２に記載の魚卵脂質組成物。
4. リン脂質が、ホスファチジルコリンを７４％以上含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の魚卵脂質組成物。
5. 脂質の構成脂肪酸に占めるＤＨＡ組成比が１５％以上であり、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の組成比が５～２５％である、請求項１～４のいずれか１項に記載の魚卵脂質組成物。
6. １００ｇ中、パルミトイルドコサヘキサエノイルホスファチジルコリンを３５００ｍｇ以上含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の魚卵脂質組成物。
7. １００ｇ中、エーテル型リン脂質を２５０ｍｇ以上含み、かつＤＨＡ結合エーテル型リン脂質、およびＥＰＡ結合エーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の魚卵脂質組成物。
8. 以下の工程を含む、α－グリセロホスホコリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含有する食品素材、医薬品素材、または化粧品素材の製造方法：
   魚卵またはその加工品である原材料から、α－グリセロホスホコリン、およびエーテル型リン脂質からなる群より選択される少なくとも一種を含む画分を得る工程。
9. 原材料が、筋子、イクラ、数の子、助子、筋子抽出物、イクラ抽出物、数の子抽出物、助子抽出物、魚卵油、または魚卵油精製物である、請求項８に記載の製造方法。
10. 食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、リン脂質を２６％以上含む、請求項８または９に記載の製造方法。
11. 食品素材、医薬品素材、または化粧品素材が、ＤＨＡ結合リン脂質を含み、
    脂質の構成脂肪酸に占める、ＤＨＡの組成比が１５％以上、およびＥＰＡの組成比が５％以上である、請求項８～１０のいずれか１項に記載の製造方法。