JP5548616B2 - Vegfr−1/nrp−1標的化ペプチド - Google Patents
Vegfr−1/nrp−1標的化ペプチド Download PDFInfo
- Publication number
- JP5548616B2 JP5548616B2 JP2010520333A JP2010520333A JP5548616B2 JP 5548616 B2 JP5548616 B2 JP 5548616B2 JP 2010520333 A JP2010520333 A JP 2010520333A JP 2010520333 A JP2010520333 A JP 2010520333A JP 5548616 B2 JP5548616 B2 JP 5548616B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- peptide
- amino acid
- composition
- acid residues
- protein
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/66—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid the modifying agent being a pre-targeting system involving a peptide or protein for targeting specific cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/001—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof by chemical synthesis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0815—Tripeptides with the first amino acid being basic
- C07K5/0817—Tripeptides with the first amino acid being basic the first amino acid being Arg
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
Description
(1.発明の分野)
本発明は、分子薬物の分野および治療剤の標的化された送達に関する。より具体的には、本発明は、VEGFR−1およびNRP−1を、新生血管のもしくは血管新生のVEGF関連障害(癌、肥満、糖尿病、喘息、関節炎、肝硬変および眼の疾患が挙げられるが、これらに限定されない)の処置および検出のための治療標的として、選択的に標的とする新規なペプチド配列の同定に関する。
血管は、酸素および栄養素をほぼ全ての器官および組織に送達する、必須の身体構成要素である。大部分の血管は、胚の発生の間に形成され、成人では、新たな血管の形成(血管新生といわれるプロセス)は、主に、創傷治癒および正常女性の生殖周期の間に制限されている。このことは、治療のための機会を引き起こす。なぜなら、いくつかの疾患は、それらが新たな血管の形成を誘導する場合にのみ進行し得るからである;癌、肥満、糖尿病、喘息、関節炎、肝硬変および眼の疾患は、おそらく、血管新生インヒビターの発生によって遅らせられるかもしくはブロックされる多くの病気の間に存在する。
本発明は、VEGFR−1およびNRP−1(本明細書中以降、「VEGFR−1/NRP−1」といわれる)を、標的化モチーフLPR(Leu−Pro−Arg)、およびより好ましくは、D(LPR)の使用を介して、選択的に標的とするための方法および組成物を提供することによって、先行技術における欠陥を克服する。LPRモチーフの使用を介するVEGFR−1/NRP−1の選択的標的化は、例えば、癌、または血管新生もしくは血管増殖と関連する他の疾患状態(例えば、肥満、糖尿病、喘息、関節炎、肝硬変および眼の疾患)の処置において有用である。
本発明の好ましい実施形態では、例えば以下が提供される:
(項目1)
10アミノ酸以下の大きさの、少なくとも連続するアミノ酸配列Leu Pro Argを含む、単離されたペプチド。
(項目2)
前記ペプチドは、7アミノ酸以下の大きさである、項目1に記載の単離されたペプチド。
(項目3)
前記ペプチドは、5アミノ酸以下の大きさである、項目2に記載の単離されたペプチド。
(項目4)
Cys Leu Pro Arg Cys(配列番号1)を含むとしてさらに定義される、項目1に記載の単離されたペプチド。
(項目5)
配列番号1からなるとしてさらに定義される、項目4に記載の単離されたペプチド。
(項目6)
環状ペプチドとしてさらに定義される、項目5に記載の単離されたペプチド。
(項目7)
前記ペプチドは、配列Leu Pro Argからなる、項目1に記載の単離されたペプチド。
(項目8)
前記ペプチドは、 D (Leu Pro Arg)からなる、項目7に記載の単離されたペプチド。
(項目9)
1個以上のDアミノ酸を含むとしてさらに定義される、項目1に記載の単離されたペプチド。
(項目10)
前記ペプチドは、Dアミノ酸からなる、項目9に記載の単離されたペプチド。
(項目11)
前記ペプチドは、ある分子に結合される、項目1〜10のいずれか1項に記載の単離されたペプチド。
(項目12)
前記分子はタンパク質であり、前記ペプチドは、タンパク質結合体を形成するために、該タンパク質に結合体化される、項目11に記載の単離されたペプチド。
(項目13)
前記ペプチドは、前記タンパク質の末端に位置する、項目12に記載の単離されたペプチド。
(項目14)
前記分子は薬物、化学療法剤、診断剤、放射性同位体、アポトーシス促進剤、抗血管新生薬剤、ホルモン、サイトカイン、増殖因子、細胞傷害性薬剤、ペプチド、タンパク質、抗生物質、抗体またはそのフラグメントもしくは一本鎖抗体、画像化剤、生存因子、抗アポトーシス剤、ホルモンアンタゴニスト、抗原である、項目11〜13のいずれか1項に記載の単離されたペプチド。
(項目15)
前記分子は、グラミシジン;マガイニン;メリチン;ディフェンシン;セクロピン;(KLAKLAK) 2 (配列番号2);(KLAKKLA) 2 (配列番号3);(KAAKKAA) 2 (配列番号4);(KLGKKLG) 3 (配列番号5);Bcl−2;Bad;Bak;Bax;およびBikからなる群より選択されるアポトーシス促進剤である、項目14に記載の単離されたペプチド。
(項目16)
前記分子は、トロンボスポンジン、アンジオスタチン、色素上皮由来因子、アンジオテンシン、ラミニンペプチド、フィブロネクチンペプチド、プラスミノゲンアクチベーターインヒビター、組織メタロプロテイナーゼインヒビター、インターフェロン、インターロイキン12、血小板因子4、IP−10、Gro−β、トロンボスポンジン、2−メトキシエストラジオール、プロリフェリン関連タンパク質、カルボキサミドトリアゾール、CM101、Marimastat、ペントサンポリスルフェート、アンジオポイエチン2、ハービマイシン A、PNU145156E、16Kプロラクチンフラグメント、リノマイド、サリドマイド、ペントキシフィリン、ゲニステイン、TNP−470、エンドスタチン、パクリタキセル、ドセタキセル、ポリアミン、プロテアソームインヒビター、キナーゼインヒビター、シグナル伝達ペプチド、アキュチン、シドフォビル、ビンクリスチン、ブレオマイシン、AGM−1470、血小板因子4、ミノサイクリン、エンドスタチンXVIII、エンドスタチンXV、マトリクスメタロプロテイナーゼ−2のC末端ヘモペキシンドメイン、ヒトプラスミノゲンのkringle 5ドメイン、エンドスタチンとアンジオスタチンとの融合タンパク質、エンドスタチンとヒトプラスミノゲンのkringle 5ドメインとの融合タンパク質、インターフェロン−γによって誘導されるモノカイン(Mig)、MigとIP10との融合タンパク質、可溶性FLT−1(fins様チロシンキナーゼ1レセプター)、およびキナーゼ挿入ドメインレセプター(KDR)からなる群より選択される抗血管新生薬剤である、項目14に記載の単離されたペプチド。
(項目17)
前記分子は、インターロイキン1(IL−1)、IL−2、IL−5、IL−10、IL−11、IL−12、IL−18、インターフェロン−γ(IF−γ)、IF−α、IF−β、腫瘍壊死因子、およびGM−CSF(顆粒球マクロファージコロニー刺激因子)からなる群より選択されるサイトカインである、項目14に記載の単離されたペプチド。
(項目18)
前記ペプチドは、高分子複合体に結合される、項目11に記載の単離されたペプチド。
(項目19)
前記複合体は、ウイルス、バクテリオファージ、細菌、リポソーム、微粒子、磁性ビーズ、酵母細胞、もしくは哺乳動物細胞である、項目18に記載の単離されたペプチド。
(項目20)
前記ペプチドは、ウイルスに結合される、項目19に記載の単離されたペプチド。
(項目21)
前記ウイルスは、レンチウイルス、パポバウイルス、アデノウイルス、レトロウイルス、AAV、ワクシニアウイルスもしくはヘルペスウイルスである、項目20に記載の単離されたペプチド。
(項目22)
前記ペプチドは、固体支持体に結合される、項目1〜21のいずれか1項に記載の単離されたペプチド。
(項目23)
前記固体支持体は、マイクロタイターディッシュもしくはマイクロチップである、項目22に記載の単離されたペプチド。
(項目24)
選択されたタンパク質に融合して、タンパク質融合構築物を形成する項目1〜10のいずれか1項に記載の単離されたペプチドを含む、タンパク質融合構築物であって、ここで該タンパク質融合構築物は、天然に存在するタンパク質ではない、タンパク質融合構築物。
(項目25)
前記選択されたタンパク質は、アポトーシス促進剤、抗血管新生薬剤、ホルモン、サイトカイン、増殖因子、細胞傷害性薬剤、タンパク質抗生物質、抗体またはそのフラグメントもしくは一本鎖、抗アポトーシス剤、ホルモンアンタゴニスト、あるいは抗原である、項目24に記載の融合構築物。
(項目26)
前記選択されたタンパク質は、グラミシジン;マガイニン;メリチン;ディフェンシン;セクロピン;(KLAKLAK) 2 (配列番号2);(KLAKKLA) 2 (配列番号3);(KAAKKAA) 2 (配列番号4);(KLGKKLG) 3 (配列番号5);Bcl−2;Bad;Bak;Bax;およびBikからなる群より選択されるアポトーシス促進剤である、項目25に記載の融合構築物。
(項目27)
前記選択されたタンパク質は、トロンボスポンジン、アンジオスタチン、色素上皮由来因子、アンジオテンシン、ラミニンペプチド、フィブロネクチンペプチド、プラスミノゲンアクチベーターインヒビター、組織メタロプロテイナーゼインヒビター、インターフェロン、インターロイキン12、血小板因子 4、IP−10、2−メトキシエストラジオール、プロリフェリン関連タンパク質、アンジオポイエチン 2、16K プロラクチンフラグメント、エンドスタチン、エンドスタチン XVIII、エンドスタチン XV、マトリクスメタロプロテイナーゼ−2のC末端ヘモペキシンドメイン、ヒトプラスミノゲンのkringle 5ドメイン、エンドスタチンとアンジオスタチンとの融合タンパク質、エンドスタチンとヒトプラスミノゲンのkringle 5ドメインとの融合タンパク質、インターフェロン−γによって誘導されるモノカイン(Mig)、MigとIP10との融合タンパク質、可溶性FLT−1(fins様チロシンキナーゼ1レセプター)、キナーゼ挿入ドメインレセプター(KDR)からなる群より選択される抗血管新生薬剤である、項目25に記載の融合構築物。
(項目28)
前記選択されたタンパク質は、インターロイキン1(IL−1)、IL−2、IL−5、IL−10、IL−11、IL−12、IL−18、インターフェロン−γ(IF−γ)、IF−α、IF−β、腫瘍壊死因子、およびGM−CSF(顆粒球マクロファージコロニー刺激因子)からなる群より選択されるサイトカインである、項目25に記載の融合構築物。
(項目29)
VEGFR−1/NRP−1標的化構築物を調製するための方法であって、該方法は、項目1〜10のいずれか1項に記載のペプチドを得る工程、および該ペプチドをある分子に結合させて、該構築物を調製する工程、を包含する、方法。
(項目30)
ある分子もしくはタンパク質の、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞への送達を標的化するための方法であって、該方法は、
(a)項目11〜21のいずれか1項に記載のペプチド、項目24〜28のいずれか1項に記載のタンパク質融合構築物または項目29に記載の方法によって調製された標的化構築物を得る工程;ならびに
(b)該ペプチドもしくはタンパク質融合構築物を細胞集団に投与する工程であって、ここで該集団は、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞を含み、それによって、該分子もしくはタンパク質を該細胞に送達する、工程、
を包含する、方法。
(項目31)
前記VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞は、被験体に存在し、該ペプチドもしくはタンパク質融合構築物は、薬学的に受容可能な組成物中に処方され、該組成物は、該被験体に投与される、項目30に記載の方法。
(項目32)
前記被験体は、ヒト被験体である、項目31に記載の方法。
(項目33)
前記方法は、検出方法としてさらに定義され、該方法は、前記細胞に送達された前記ペプチドもしくはタンパク質を検出する工程をさらに包含する、項目30に記載の方法。
(項目34)
前記被験体は、疾患もしくは障害を有し、前記方法は、治療方法としてさらに定義される、項目31に記載の方法。
(項目35)
前記被験体は、血管新生成分を伴う疾患もしくは障害を有し、該被験体は、抗血管新生治療の必要がある、項目34に記載の方法。
(項目36)
前記疾患もしくは障害は、過剰増殖疾患、体重障害、肥満、糖尿病、喘息、関節炎、肝硬変、もしくは眼の疾患である、項目35に記載の方法。
(項目37)
前記被験体は、過剰増殖疾患を有する、項目36に記載の方法。
(項目38)
前記過剰増殖疾患は、関節リウマチ、炎症性腸疾患、変形性関節症、平滑筋腫、腺腫、脂肪腫、血管腫、線維腫、脈管閉塞、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、前癌病変(例えば、腺腫様過形成および前立腺上皮内腫瘍)、上皮内癌、口腔毛髪状白斑、もしくは乾癬である、項目37に記載の方法。
(項目39)
前記過剰増殖疾患は癌である、項目37に記載の方法。
(項目40)
前記癌は、歯肉、舌、肺、皮膚、肝臓、腎臓、眼、脳、白血病、中皮腫、神経芽細胞腫、頭部、頸部、乳房、膵臓、前立腺、腎臓、骨、精巣、卵巣、中皮腫、子宮頸部、胃腸、リンパ腫、脳、結腸、肉腫および膀胱の癌の群から選択される、項目39に記載の方法。
(項目41)
前記被験体は、眼内細胞増殖もしくは新生血管形成によって特徴づけられる眼の疾患もしくは障害を有する、項目36に記載の方法。
(項目42)
前記眼の疾患は、加齢性黄斑変性、増殖性糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、緑内障、および増殖性硝子体性網膜症(proliferative vitreoretiriopathy)からなる群より選択される、項目41に記載の方法。
(項目43)
前記被験体は、体重障害を有する、項目34に記載の方法。
(1.概説)
コンビナトリアルライブラリーによって同定されるペプチドは、薬物発見および設計に関して重要な手がかりである。それらは、容易に合成され得、かつ種々の官能基で容易に改変され得、このことは、科学および医療に、合理的薬物設計および選択的標的化の強力なツールを提供する。抗体のような高分子と比較して上記ペプチドのより小さな分子量が原因で、ペプチドは、組織透過性および生体分布において利点を有し、このことによって、上記ペプチドは、薬物発見および開発のための優れたリード化合物になる(Falcianiら,2005によって総説される)。実際に、ファージディスプレイによって同定されたペプチドは、化学療法剤(Arap,1998 #10)、アポトーシス促進性ペプチド(Ellerby,1999 #69)を送達するため、または画像化および遺伝子治療のためのウイルス(Hajitou,2006 #6744)を送達するために、標的化治療においてインビボで成功裏に使用されてきた。しかし、薬物開発におけるれらの適用可能性は、困難によって妨げられてきた。
本明細書において使用される場合、「a」もしくは「an」は、1つ以上を意味し得る。特許請求の範囲において使用される場合、語句「含む」に関連して、語句「a」もしくは「an」は、1つもしくは1つより大きいを意味し得る。本明細書において使用される場合、「別の、もう一方の」とは、少なくとも第2のもしくはある項目の他を意味し得る。
特定の実施形態において、本発明は、少なくとも1つのタンパク質もしくはペプチドを含む新規な組成物に関する。本明細書において使用される場合、タンパク質もしくはペプチドは、一般に、約200アミノ酸より大きく、最大遺伝子から翻訳される全長配列までのタンパク質;約100アミノ酸より大きいポリペプチド;および/もしくは約3〜約100アミノ酸のペプチドをいうが、これらに限定されない。便宜上、用語「タンパク質」、「ポリペプチド」および「ペプチド」は、本明細書において交換可能に使用される。
タンパク質結合体の他の実施形態は、融合タンパク質に関する。これら分子は、一般に、N末端もしくはC末端において、第2のポリペプチドもしくはタンパク質の全てもしくは一部に連結された、標的化ペプチド(例えば、LPR標的化ペプチド)の全てもしくは実質的な部分を有する。例えば、融合物は、他の種からのリーダー配列を使用して、異種宿主におけるタンパク質の組換え発現を可能にし得る。別の有用な融合物は、例えば、上記融合タンパク質の精製を容易にするために、免疫学的に活性なドメイン(例えば、抗体エピトープ、)の付加を含む。上記融合接合部にもしくはその付近に切断部位を含めると、精製後に、外来ポリペプチドの除去が容易になる。他の有用な融合物は、機能的ドメイン(例えば、酵素の活性部位、グリコシル化ドメイン、細胞標的化シグナルもしくは膜貫通領域)の連結を含む。好ましい実施形態において、本発明の融合タンパク質は、治療的タンパク質もしくはペプチドに連結されたLPR標的化ペプチドを含む。融合タンパク質に組み込まれ得るタンパク質もしくはペプチドの例としては、細胞増殖抑制性タンパク質、細胞破壊性タンパク質、アポトーシス促進剤、抗血管新生薬剤、ホルモン、サイトカイン、増殖因子、ペプチド薬物、抗体、Fabフラグメント抗体、抗原、レセプタータンパク質、酵素、レクチン、MHCタンパク質、細胞接着タンパク質および結合タンパク質が挙げられる。これら例によって、限定であることを意味せず、本発明の範囲内で、実質的に任意のタンパク質もしくはペプチドが、標的化ペプチドを含む融合タンパク質に組み込まれ得ることが企図される。融合タンパク質を生成するための方法は、当業者に周知である。このようなタンパク質は、例えば、二官能性架橋試薬を使用する化学的結合によって、完全な融合タンパク質のデノボ合成によって、または標的化ペプチドをコードするDNA配列の、第2のペプチドもしくはタンパク質をコードするDNA配列への結合、続いて、インタクトな融合タンパク質の発現によって、生成され得る。
特定の実施形態において、タンパク質もしくはペプチドは、単離もしくは精製され得る。タンパク質精製技術は、当業者に周知である。これら技術は、あるレベルにおいて、上記細胞、組織もしくは器官の均質化、ならびにそのポリペプチドおよび非ポリペプチド画分への粗い分画を包含する。目的のタンパク質もしくはポリペプチドは、部分的もしくは完全な精製(均質になるまでの精製)を達成するために、クロマトグラフィー技術および電気泳動技術を用いてさらに精製され得る。純粋なペプチドの調製に特に適した分析方法は、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル排除クロマトグラフィー、ポリアクリルアミド電気泳動、アフィニティークロマトグラフィー、イムノアフィニティークロマトグラフィーおよび等電点電気泳動である。アフィニティークロマトグラフィーによるレセプタータンパク質精製の例は、米国特許第5,206,347号(その本文全体は、本明細書に参考として援用される)に開示されている。ペプチドを精製するための特に効率的な方法は、高性能液体クロマトグラフィー(FPLC)もしくは高速液体クロマトグラフィー(HPLC)である。
それらの相対的に小さな大きさが原因で、本発明の標的化ペプチドは、従来の技術に従って、溶液中でまたは固体支持体で、合成され得る。種々の自動化合成機は商業的に利用可能であり、公知のプロトコルに従って使用され得る。例えば、Stewart and Young,1984;Tamら,1983;Merrifield,1986;Barany and Merrifield,1979(本明細書に各々参考として援用される)を参照のこと。短いペプチド配列(通常は、約6から最大約35〜50アミノ酸まで)は、このような方法によって容易に合成され得る。あるいは、組換えDNA技術が使用され得、ここで本発明のペプチドをコードするヌクレオチド配列は、発現ベクターに挿入され、適切な宿主細胞に形質転換もしくはトランスフェクトされ、そして発現に適した条件下で培養される。
これら方法を使用して同定される標的化部分は、種々の物質(マウスモデルシステムにおいて望ましい器官、組織もしくは細胞型への結合体の選択的送達のための、治療剤もしくは診断剤を含む)に連結もしくは結合され得る。例えば、化学療法剤およびアポトーシス促進ペプチドの、腫瘍血管新生の血管系に位置するレセプターの標的化された送達は、治療的な効力における顕著な増加および腫瘍保有マウスモデルにおける全身毒性の減少を生じる(Arapら,1998;Ellerbyら,1999)。
特定の実施形態において、器官、組織もしくは細胞型への標的化送達のために、1種以上の標的化部分へ特異的生体活性薬剤を連結することが望ましい。このような薬剤としては、サイトカイン、ケモカイン、アポトーシス促進因子および抗血管新生因子が挙げられるが、これらに限定されない。用語「サイトカイン」とは、細胞内媒介因子として別の細胞に対して作用する1つの細胞集団によって放出されるタンパク質についての包括的用語である。
特定の実施形態において、本発明の標的化部分は、種々の罹患器官、組織もしくは細胞型の画像化および診断の用途の画像化剤に結合され得る。多くの適切な画像化剤は、当該分野で公知であり、タンパク質もしくはペプチドへのそれらの結合のための方法もまた同様である(例えば、米国特許第5,021,236号および同第4,472,509号(ともに本明細書に参考として援用される)を参照のこと)。特定の結合方法は、例えば、有機キレート化剤を使用する金属キレート錯体の使用(例えば、タンパク質もしくはペプチドに結合したDTPA(米国特許第4,472,509号))を伴う。タンパク質もしくはペプチドはまた、カップリング剤(例えば、グルタルアルデヒドもしくは過ヨウ素酸塩)の存在下で酵素と反応させられ得る。フルオレセインマーカーとの結合体は、これらカップリング剤の存在下で、もしくはイソチオシアネートとの反応によって、調製される。
二官能性架橋試薬は、種々の目的(アフィニティーマトリクスの調製、多様な構造の改変および安定化、リガンドおよびレセプター結合部位の同定、ならびに構造研究を含む)のために広範囲に使用されてきた。2つの同一の官能基を有するホモ二官能性試薬は、同一の高分子および異なる高分子もしくは高分子のサブユニット間の架橋、それらの特異的結合部位に対するポリペプチドリガンドの連結を誘導することにおいて非常に効率的であることが判明した。ヘテロ二官能性試薬は、2つの異なる官能基を含む。上記2つの異なる官能基の異なる反応性を利用することによって、架橋は、選択的にかつ逐次的に制御され得る。上記二官能性架橋試薬は、それらの官能基(例えば、アミノ、スルフヒドリル、グアニジノ、インドール、カルボキシル特異性基(carboxyl specific group)の特異性に従って分けられ得る。これらのうち、遊離アミノ基に指向される試薬は、それらの商業的利用可能性、合成の容易さおよびこれらが適用され得る穏和な反応条件が原因で、特に平易になった。ヘテロ二官能性架橋試薬の大部分は、一級アミン反応性基およびチオール反応性基を含む。
本発明に従う核酸は、標的化ペプチド、標的化抗体、標的化抗体フラグメント、治療的ポリペプチド、融合タンパク質、または他のタンパク質もしくはペプチドをコードし得る。上記核酸は、ゲノムDNA、相補的DNA(cDNA)もしくは合成DNAから得られ得る。
遺伝子治療ベクターが細胞に導入され得る多くの方法が存在する。本発明の特定の実施形態において、上記遺伝子治療ベクターは、ウイルスを含む。特定のウイルスがレセプター媒介性エンドサイトーシスを介して細胞に入って、宿主細胞ゲノムに組み込まれるか、またはエピソームに維持され、そしてウイルス遺伝子を安定にかつ効率的に発現させる能力によって、それらは哺乳動物細胞への外来遺伝子の移入についての魅力的な候補になった(Ridgeway,1988;Nicolas and Rubinstein,1988;Baichwal and Sugden,1986;Temin,1986)。好ましい遺伝子治療ベクターは、一般にウイルスベクターである。遺伝子治療ベクターとして使用されるDNAウイルスとしては、パポバウイルス(例えば、シミアンウイルス40、ウシパピローマウイルス、およびポリオーマ)(Ridgeway,1988;Baichwal and Sugden,1986)およびアデノウイルス(Ridgeway,1988;Baichwal and Sugden,1986)が挙げられる。
本発明の薬学的組成物は、薬学的に受容可能なキャリア中に溶解もしくは分散された本明細書に記載される標的化部分を含む、有効量の1種以上の組成物を含む。語句「薬学的」もしくは「薬理学的に受容可能な」とは、適切な場合、動物(例えば、例えば、ヒト)に投与された場合に、有害な反応、アレルギー反応もしくは他の望ましくない反応を生じない分子実体および組成物をいう。本発明の少なくとも1つの組成物(例えば、LPR標的化部分)もしくはさらなる活性成分を含む薬学的組成物の調製は、本開示に鑑みれば、Remington’s Pharmaceutical Sciences,第18版.Mack Printing Company,1990(本明細書に参考として援用される)によって例示されるように、当業者に公知である。さらに、動物(例えば、ヒト)投与については、調製が、生物学的標準のFDA局によって必要とされる場合に、無菌性、発熱性、一般的安全性および純度の標準を満たすべきであることが理解される。
特定の実施形態において、治療剤は、例えば、VEGFR−1/NRP−1を発現する腫瘍血管系への選択的送達のために、標的化ペプチドもしくは融合タンパク質に作動可能に連結され得る。使用に適した薬剤もしくは因子は、アポトーシス、細胞死、細胞静止および/もしくは抗血管新生を誘導する任意の化合物を含み得る。
アポトーシス、またはプログラムされた細胞死は、正常な胚発生、生体組織においてはホメオスタシスを維持すること、および発癌現象を抑制することに必須のプロセスである(Kerrら,1972)。タンパク質のBcl−2ファミリーおよびICE様プロテアーゼは、他の系におけるアポトーシスの重要な調節因子およびエフェクターであると実証された。上記Bcl−2タンパク質は、濾胞性リンパ腫と関連して発見され、アポトーシスを制御し、多様なアポトーシス刺激に応答して細胞生存を高めることにおいて顕著な役割を果たしている(Bakhshiら,1985;Cleary and Sklar,1985;Clearyら,1986;Tsujimotoら,1985;Tsujimoto and Croce,1986)。進化的に保存されたBcl−2タンパク質は、いまや、死のアゴニストもしくは死のアンタゴニストとして分類され得る関連タンパク質のファミリーのメンバーであると認識されている。
特定の実施形態において、本発明は、抗血管新生薬剤(例えば、アンジオテンシン、ラミニンペプチド、フィブロネクチンペプチド、プラスミノゲンアクチベーターインヒビター、組織メタロプロテイナーゼインヒビター、インターフェロン、インターロイキン12、血小板因子 4、IP−10、Gro−β、トロンボスポンジン、2−メトキシエストラジオール、プロリフェリン関連タンパク質、カルボキサミドトリアゾール、CM101、Marimastat、ペントサンポリスルフェート、アンジオポイエチン 2(Regeneron)、インターフェロン−α、ハービマイシンA、PNU145156E、16K プロラクチンフラグメント、リノマイド、サリドマイド、ペントキシフィリン、ゲニステイン、TNP−470、エンドスタチン、パクリタキセル、アキュチン、アンジオスタチン、シドフォビル、ビンクリスチン、ブレオマイシン、AGM−1470、血小板因子 4もしくはミノサイクリン)に作動可能に連結される標的化部分の投与に関し得る。
化学療法(細胞傷害性)剤は、種々の疾患状態(癌を含む)を処置するために使用され得る。潜在的に有用な化学療法(細胞傷害性)剤としては、5−フルオロウラシル、ブレオマイシン、ブスルファン、カンプトテシン、カルボプラチン、クロラムブシル、シスプラチン(CDDP)、シクロホスファミド、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エストロゲンレセプター結合剤、エトポシド(VP16)、ファルネシル−プロテイントランスフェラーゼインヒビター、ゲムシタビン、イホスファミド、メクロレタミン、メルファラン、マイトマイシン、ナベルビン、ニトロソウレア、プリカマイシン(plicomycin)、プロカルバジン、ラロキシフェン、タモキシフェン、タキソール、テモゾロミド(DTICの水性形態)、トランス白金(transplatinum)、ビンブラスチンおよびメトトレキサート、ビンクリスチン、または前述の任意のアナログもしくは誘導改変体(derivative variant)が挙げられるが、これらに限定されない。大部分の化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗物質、抗腫瘍抗生物質、コルチコステロイドホルモン、有糸分裂インヒビター、およびニトロソウレア、ホルモン薬剤、種々雑多な薬剤、およびその任意のアナログもしくは誘導改変体の分類に入る。
アルキル化剤は、ゲノムDNAと直接相互作用して、細胞を増殖させないようにする薬物である。化学療法剤のこの分類は、細胞周期の全ての相に影響を及ぼす(すなわち、それらは相特異的ではない)薬剤を表す。アルキル化剤は、ナイトロジェンマスタード、エチレンイミン、メチルメラミン、アルキルスルホネート、ニトロソウレアもしくはトリアジンが挙げられ得るが、これらに限定されない。アルキル化剤としては、ブスルファン、クロラムブシル、シスプラチン、シクロホスファミド(サイトキサン)、ダカルバジン、イホスファミド、メクロレタミン(マスタージェン(mustargen))、およびメルファランが挙げられるが、これらに限定されない。
代謝拮抗物質は、DNAおよびRNA合成を乱す。アルキル化剤とは異なり、代謝拮抗物質は、S期の間に、細胞周期に特異的に影響を及ぼす。代謝拮抗物質は、種々の分類に区別され得る(例えば、葉酸アナログ、ピリミジンアナログおよびプリンアナログならびに関連する阻害性化合物)。代謝拮抗物質としては、5−フルオロウラシル(5−FU)、シタラビン(Ara−C)、フルダラビン、ゲムシタビンおよびメトトレキサートが挙げられるが、これらに限定されない。
天然の生成物は、一般に、天然供給源から最初に単離され、薬理学的活性を有すると同定された化合物をいう。このような化合物、そのアナログおよび誘導体は、天然供給源から単離され得るか、化学的に合成され得るか、または当業者に公知の任意の技術によって組換え生成され得る。天然の生成物は、有糸分裂インヒビター、抗腫瘍抗生物質、酵素および生物学的応答改変因子のような分類を含む。
特定の抗生物質は、抗微生物活性および細胞傷害性活性の両方を有する。これら薬物はまた、酵素および有糸分裂を化学的に阻害するかまたは細胞膜を変化させることによって、DNAを妨害する。これら薬剤は、相特異的ではなく、その結果、細胞周期の全ての相において作用する。細胞傷害性抗生物質の例としては、ブレオマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン(アドリアマイシン)、プリカマイシン(ミトラマイシン)およびイダルビシンが挙げられるが、これらに限定されない。
前述の分類に入らない種々雑多な細胞傷害性薬剤としては、白金配位錯体、アントラセンジオン、置換されたウレア、メチルヒドラジン誘導体、アムサクリン、L−アスパラギナーゼ、およびトレチノインが挙げられるが、これらに限定されない。白金配位錯体としては、カルボプラチンおよびシスプラチン(cis−DDP)のような化合物が挙げられる。例示的なアントラセンジオンは、ミトキサントロンである。例示的な置換されたウレアは、ヒドロキシウレアである。例示的なメチルヒドラジン誘導体は、プロカルバジン(N−メチルヒドラジン,MIH)である。これら例は限定ではなく、任意の公知の細胞傷害性、細胞増殖抑制性もしくは細胞破壊性の薬剤が、標的化ペプチドに結合され得、本発明の範囲内で標的化された器官、組織もしくは細胞型に投与され得ることが企図される。
(1.材料および方法)
試薬およびペプチド。ペプチドを合成し、95%より大きな純度で本発明者らの仕様にHPLC精製した:L−Arg−L−Pro−L−Leu(RPL)、D−Leu−D−Pro−D−Arg[D(LPR)]、D−Cys−D−Ala−D−Pro−D−Ala−D−Cys[D(CAPAC);配列番号6](Polypeptide Laboratories(Torrence,CA)による)およびD−Ala−D−Pro−D−Ala[D(APA)](Genemed Synthesis Inc.(San Francisco,CA)による)。組換えレセプター(VEGFR−1およびNPR−1)および増殖因子(ヒトVEGF165)を、R&D Systems(Minneapolis,MN)から得た。ヘパリン、Drabkin試薬、ヒトヘモグロビン、brij−35を、Sigma−Aldrich(St.Louis,MO)から得た。
上記ペプチド模倣化合物D(LPR)がVEGFR−1およびNRP−1結合を示すか否かを評価するために、競合実験を行った。その親CPQPRPLC(配列番号8)ファージの、上記固定化VEGFレセプターNRP−1およびVEGFR−1への結合を、本発明の、漸増濃度のRPLペプチドもしくは上記D(LPR)ペプチド模倣物の存在下で行った。本発明者らの以前の研究(Giordanoら,2005)から予測されるように、上記RPLペプチドは、CPQPRPLC(配列番号8)ファージの両方のレセプターへの結合を完全に抑制した。興味深いことに、上記D(LPR)ペプチド模倣物はまた、RPLと比較して、非常に類似のレベルでファージ結合を阻害した。両方のペプチド、RPLおよびD(LPR)は、用量依存性様式でファージ結合を阻害した一方で、最高濃度(100μM)で使用したコントロールペプチドは、CPQPRPLC(配列番号8)ファージ結合に対して何ら影響を有さなかった。ファージ結合の50%を阻害するのに必要とされるペプチドの濃度(IC 50 )は、上記レセプターに対する上記ペプチドの親和性に反比例するので、本発明者らのデータは、RPLおよびD(LPR)はともに、CPQPRPLC(配列番号8)ペプチド(Giordanoら,2001)と比較して、VEGFR−1およびNRP−1に対してより高い親和性を有したことを示唆する。両方のレセプターに対するD(LPR)のIC50は、VEGFR−1(約1nM)もしくはNRP−1(約50〜100nM)について以前記載されたCPQPRPLC(配列番号8)のIC50と比較して(Giordanoら,2001)、有意に低い(1〜10pM)。
食事およびライフスタイルは、先進国において肥満の高発生率に寄与する。米国において、成人集団のうちの約65%は過体重であり(ボディーマスインデックスは、25kg/m2以上)、30%超が肥満である(ボディーマスインデックスは、30kg/m2以上)。肥満は、糖尿病、癌および心疾患の増大した危険性と関連し、しばしば、ヒトの寿命を短くする原因である。従って、肥満の処置における進歩は、逆に制限されており、異常な脂肪蓄積を制御するために利用可能な薬物はほとんどない(Claphamら,2001)。大部分の抗肥満薬剤は、脳におけるレセプターに対して作用することによる、エネルギー均衡経路および食欲の変更に基づく。このクラスのいくつかの薬物(例えば、フェンフルラミン)は、予測外の毒性に起因して、市場から退けられた。胃腸管を介する脂肪吸収を阻害する化合物を開発しようとする最近の試み(例えば、オルリスタット(orlistat)、Rocheによって商標名Xenical(登録商標)の下で販売されている)は、抗肥満処置を改善し得る。なお、最も有効な薬物ですら、最大5%まで体重を低下させ得るに過ぎず、厳密な節食は、さらなる体重減少に必要である(Claphamら,2001;Padwal & Majumdar,2007)。
以下の参考文献は、それらが本明細書に記載されるものを補充する、例示的な手順的詳細もしくは他の詳細を提供する程度に、本明細書において参考として援用される。
Claims (23)
- 5アミノ酸以下の大きさの、少なくとも連続するアミノ酸配列D(Leu Pro Arg)を含む、単離されたペプチド。
- D(Cys Leu Pro Arg Cys)(配列番号1)としてさらに定義される、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 環状ペプチドとしてさらに定義される、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 前記ペプチドは、D(Leu Pro Arg)からなる、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- VEGF経路を標的とする抗血管新生化合物の、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞への送達を標的化するための組成物であって、該組成物は、5アミノ酸以下の大きさの、少なくとも連続するアミノ酸配列 D (Leu Pro Arg)を含むペプチドを含み、該組成物は、細胞集団に投与されることを特徴とし、ここで該集団は、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞を含み、それによって、該化合物が該細胞に送達される、組成物。
- 前記VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞は、被験体に存在する、請求項5に記載の組成物。
- VEGF経路を標的とする抗血管新生化合物の、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞への送達を標的化するための組み合わせ物であって、該組み合わせ物は、5アミノ酸以下の大きさの、少なくとも連続するアミノ酸配列 D (Leu Pro Arg)を含むペプチドと、アポトーシス促進ペプチドとを含み、該組み合わせ物は、細胞集団に投与されることを特徴とし、ここで該集団は、VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞を含み、それによって、該化合物が該細胞に送達され、該アポトーシス促進ペプチドは配列番号9である、組み合わせ物。
- 前記VEGFR−1もしくはNRP−1を発現する細胞は、被験体に存在する、請求項7に記載の組み合わせ物。
- 前記ペプチドが、 D (Cys Leu Pro Arg Cys)(配列番号1)としてさらに定義される、請求項5に記載の組成物または請求項7に記載の組み合わせ物。
- 環状ペプチドとしてさらに定義される、請求項5に記載の組成物または請求項7に記載の組み合わせ物。
- 前記ペプチドは、 D (Leu Pro Arg)からなる、請求項5に記載の組成物または請求項7に記載の組み合わせ物。
- 前記被験体は、ヒト被験体である、請求項6に記載の組成物または請求項8に記載の組み合わせ物。
- 前記細胞に送達された前記ペプチドもしくはタンパク質を検出するための検出方法において使用するための、請求項5に記載の組成物または請求項7に記載の組み合わせ物。
- 前記被験体は、疾患もしくは障害を有し、前記組成物は、治療組成物としてさらに定義される、請求項6に記載の組成物または請求項8に記載の組み合わせ物。
- 前記被験体は、血管新生成分を伴う疾患もしくは障害を有し、該被験体は、抗血管新生治療の必要がある、請求項14に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記疾患もしくは障害は、過剰増殖疾患、体重障害、肥満、糖尿病、喘息、関節炎、肝硬変、もしくは眼の疾患である、請求項15に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記被験体は、過剰増殖疾患を有する、請求項16に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記過剰増殖疾患は、関節リウマチ、炎症性腸疾患、変形性関節症、平滑筋腫、腺腫、脂肪腫、血管腫、線維腫、脈管閉塞、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、前癌病変(例えば、腺腫様過形成および前立腺上皮内腫瘍)、上皮内癌、口腔毛髪状白斑、もしくは乾癬である、請求項17に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記過剰増殖疾患は癌である、請求項17に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記癌は、歯肉、舌、肺、皮膚、肝臓、腎臓、眼、脳、白血病、中皮腫、神経芽細胞腫、頭部、頸部、乳房、膵臓、前立腺、腎臓、骨、精巣、卵巣、中皮腫、子宮頸部、胃腸、リンパ腫、脳、結腸、肉腫および膀胱の癌の群から選択される、請求項19に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記被験体は、眼内細胞増殖もしくは新生血管形成によって特徴づけられる眼の疾患もしくは障害を有する、請求項15に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記眼の疾患は、加齢性黄斑変性、増殖性糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、緑内障、および増殖性硝子体性網膜症(proliferative vitreoretiriopathy)からなる群より選択される、請求項21に記載の組成物または組み合わせ物。
- 前記被験体は、体重障害を有する、請求項8に記載の組み合わせ物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US95475007P | 2007-08-08 | 2007-08-08 | |
US60/954,750 | 2007-08-08 | ||
PCT/US2008/072675 WO2009032477A2 (en) | 2007-08-08 | 2008-08-08 | Vegfr-1/nrp-1 targeting peptides |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011504458A JP2011504458A (ja) | 2011-02-10 |
JP2011504458A5 JP2011504458A5 (ja) | 2011-09-29 |
JP5548616B2 true JP5548616B2 (ja) | 2014-07-16 |
Family
ID=40429628
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2010520333A Expired - Fee Related JP5548616B2 (ja) | 2007-08-08 | 2008-08-08 | Vegfr−1/nrp−1標的化ペプチド |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20120028880A1 (ja) |
EP (1) | EP2283028A2 (ja) |
JP (1) | JP5548616B2 (ja) |
CN (1) | CN102264755A (ja) |
AU (1) | AU2008296733B2 (ja) |
CA (1) | CA2695960A1 (ja) |
RU (1) | RU2488592C2 (ja) |
WO (1) | WO2009032477A2 (ja) |
Families Citing this family (28)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101870734B (zh) * | 2010-05-25 | 2012-06-20 | 北京大学 | 一种抑制新生血管生成的融合多肽及其编码基因与应用 |
CU23950B1 (es) * | 2011-03-21 | 2013-10-29 | Ct De Ingeniería Genética Y Biotecnología | Péptidos cíclicos con actividad antineoplásica y antiangiogénica |
SG187271A1 (en) * | 2011-07-07 | 2013-02-28 | Agency Science Tech & Res | Anti-amyloidogenic, alpha-helix breaking ultra-small peptide therapeutic |
WO2013134249A1 (en) * | 2012-03-08 | 2013-09-12 | Ablaris Therapeutics Inc. | Adipose tissue targeted peptides |
CN102746380B (zh) * | 2012-07-25 | 2013-12-18 | 中国药科大学 | 血管生成抑制剂多肽在制备治疗肿瘤及类风湿性关节炎药物中的应用 |
CN104903344B (zh) * | 2012-09-20 | 2018-09-04 | 财团法人台湾基督长老教会马偕纪念社会事业基金会马偕纪念医院 | Pedf衍生的多肽在治疗骨关节炎中的用途 |
US10801070B2 (en) | 2013-11-25 | 2020-10-13 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for diagnosing, evaluating and treating cancer |
WO2015085147A1 (en) | 2013-12-05 | 2015-06-11 | The Broad Institute Inc. | Polymorphic gene typing and somatic change detection using sequencing data |
ES2921531T3 (es) * | 2013-12-06 | 2022-08-29 | Broad Inst Inc | Formulaciones para vacunas contra la neoplasia |
WO2015095811A2 (en) | 2013-12-20 | 2015-06-25 | The Board Institute Inc. | Combination therapy with neoantigen vaccine |
US20170051062A1 (en) * | 2014-02-18 | 2017-02-23 | Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) | Methods and Pharmaceutical Compositions for the Treatment of Diseases Mediated by the NRP-1/OBR Complex Signaling Pathway |
CN104774246B (zh) * | 2014-03-21 | 2018-05-04 | 中山大学附属肿瘤医院 | Nrp-1特异性肿瘤靶向多肽及其应用 |
CN104974227B (zh) * | 2014-04-04 | 2019-04-23 | 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 | 阳离子双亲性膜靶向α-螺旋多肽及其应用 |
CN104045718B (zh) * | 2014-07-08 | 2016-08-17 | 南京安吉生物科技有限公司 | 多功能融合多肽及其制备方法和应用 |
WO2016100975A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Massachsetts Institute Ot Technology | Molecular biomarkers for cancer immunotherapy |
WO2016100977A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | The Broad Institute Inc. | Methods for profiling the t-cel- receptor repertoire |
CA3012985A1 (en) | 2015-01-27 | 2016-08-04 | Kardiatonos, Inc. | Biomarkers of vascular disease |
DK3265110T3 (da) * | 2015-03-02 | 2020-10-19 | The Board Of Trustees Of The Univ Of Illionis | Peptider til inhibering af angiogenese |
MX2017014700A (es) | 2015-05-20 | 2018-08-15 | Broad Inst Inc | Neoantigenos compartidos. |
CN105237637B (zh) * | 2015-11-10 | 2018-10-30 | 厦门大学 | 抗人神经纤毛蛋白1的单域抗体及其制备方法 |
WO2018008772A1 (ko) * | 2016-07-05 | 2018-01-11 | (주)아이벤트러스 | 종양 혈관형성을 억제하는 vegf 딥 블로커를 포함하는 암 치료용 조성물 및 이의 제조방법 |
US11549149B2 (en) | 2017-01-24 | 2023-01-10 | The Broad Institute, Inc. | Compositions and methods for detecting a mutant variant of a polynucleotide |
CN109966494A (zh) * | 2017-12-28 | 2019-07-05 | 义慧科技(深圳)有限公司 | 一种预防和/或治疗糖尿病的药物及vegfr1抑制剂在该药物中的应用 |
CN109966495A (zh) * | 2017-12-28 | 2019-07-05 | 义慧科技(深圳)有限公司 | 一种预防和/或治疗脂肪代谢症的药物及vegfr1抑制剂在该药物中的应用 |
AU2019337806A1 (en) * | 2018-09-11 | 2021-05-13 | Anbition S.R.L. | Peptides and medical uses thereof |
CN111018952B (zh) * | 2019-12-23 | 2021-09-07 | 哈尔滨医科大学 | 一种具有双重功效的抗肿瘤多肽及其应用 |
CN112409455A (zh) * | 2020-11-12 | 2021-02-26 | 国家纳米科学中心 | 一种用于治疗脉络膜新生血管的多肽纳米材料及其制备方法和应用 |
CN116254237B (zh) * | 2022-12-20 | 2024-02-20 | 中山大学中山眼科中心 | 一种降低眼压的表达nrp1的重组腺相关病毒的构建方法及其应用 |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL154598B (nl) | 1970-11-10 | 1977-09-15 | Organon Nv | Werkwijze voor het aantonen en bepalen van laagmoleculire verbindingen en van eiwitten die deze verbindingen specifiek kunnen binden, alsmede testverpakking. |
US3817837A (en) | 1971-05-14 | 1974-06-18 | Syva Corp | Enzyme amplification assay |
US3939350A (en) | 1974-04-29 | 1976-02-17 | Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Fluorescent immunoassay employing total reflection for activation |
US3996345A (en) | 1974-08-12 | 1976-12-07 | Syva Company | Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays |
US4277437A (en) | 1978-04-05 | 1981-07-07 | Syva Company | Kit for carrying out chemically induced fluorescence immunoassay |
US4275149A (en) | 1978-11-24 | 1981-06-23 | Syva Company | Macromolecular environment control in specific receptor assays |
US4366241A (en) | 1980-08-07 | 1982-12-28 | Syva Company | Concentrating zone method in heterogeneous immunoassays |
US4957939A (en) | 1981-07-24 | 1990-09-18 | Schering Aktiengesellschaft | Sterile pharmaceutical compositions of gadolinium chelates useful enhancing NMR imaging |
US4472509A (en) | 1982-06-07 | 1984-09-18 | Gansow Otto A | Metal chelate conjugated monoclonal antibodies |
US5206347A (en) | 1985-08-06 | 1993-04-27 | La Jolla Cancer Research Foundation | Isolation and use of receptors binding to a peptide column |
US5603872A (en) | 1991-02-14 | 1997-02-18 | Baxter International Inc. | Method of binding recognizing substances to liposomes |
EP0525132B1 (en) | 1991-02-14 | 1996-01-03 | Baxter International Inc. | Binding of recognizing substances to liposomes |
US5329028A (en) | 1992-08-05 | 1994-07-12 | Genentech, Inc. | Carbohydrate-directed cross-linking reagents |
US5789542A (en) * | 1994-04-22 | 1998-08-04 | Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College | Amphipathic peptides |
US5846782A (en) | 1995-11-28 | 1998-12-08 | Genvec, Inc. | Targeting adenovirus with use of constrained peptide motifs |
US6339069B1 (en) * | 1996-10-15 | 2002-01-15 | Elan Pharmaceuticalstechnologies, Inc. | Peptide-lipid conjugates, liposomes and lipsomal drug delivery |
RU2142134C1 (ru) * | 1997-06-11 | 1999-11-27 | Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им.Пастера | Тест-система для обнаружения антител к ядерному белку вируса гепатита с класса igm |
DE10154458B4 (de) * | 2001-11-08 | 2009-10-29 | Universität Leipzig | Peptide zur Analyse von Gluten in Lebensmitteln und anderen Substanzgemischen und deren Verwendung |
EP1487343B1 (en) | 2002-03-05 | 2008-12-31 | Board of Regents, The University of Texas System | Biospecific contrast agents |
US20030194704A1 (en) * | 2002-04-03 | 2003-10-16 | Penn Sharron Gaynor | Human genome-derived single exon nucleic acid probes useful for gene expression analysis two |
CU23178A1 (es) * | 2002-04-15 | 2006-09-22 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | INMUNOTERAPIA ACTIVA ANTIANGIOGéNICA |
WO2004084950A2 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-07 | Case Western Reserve University | Cell targeting methods and compositions |
-
2008
- 2008-08-08 AU AU2008296733A patent/AU2008296733B2/en not_active Ceased
- 2008-08-08 US US12/672,647 patent/US20120028880A1/en not_active Abandoned
- 2008-08-08 RU RU2010108499/04A patent/RU2488592C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-08-08 WO PCT/US2008/072675 patent/WO2009032477A2/en active Application Filing
- 2008-08-08 CN CN2008801105643A patent/CN102264755A/zh active Pending
- 2008-08-08 JP JP2010520333A patent/JP5548616B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2008-08-08 EP EP08797529A patent/EP2283028A2/en not_active Withdrawn
- 2008-08-08 CA CA2695960A patent/CA2695960A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2695960A1 (en) | 2009-03-12 |
AU2008296733A1 (en) | 2009-03-12 |
US20120028880A1 (en) | 2012-02-02 |
AU2008296733B2 (en) | 2013-07-11 |
WO2009032477A3 (en) | 2011-01-13 |
EP2283028A2 (en) | 2011-02-16 |
WO2009032477A8 (en) | 2009-06-04 |
CN102264755A (zh) | 2011-11-30 |
RU2010108499A (ru) | 2011-09-20 |
JP2011504458A (ja) | 2011-02-10 |
RU2488592C2 (ru) | 2013-07-27 |
WO2009032477A2 (en) | 2009-03-12 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5548616B2 (ja) | Vegfr−1/nrp−1標的化ペプチド | |
JP2011504458A5 (ja) | ||
ES2323465T3 (es) | Peptidos novedosos que se unen al receptor de la eritropoyetina. | |
ES2395413T3 (es) | Péptidos que se unen al receptor de eritropoyetina | |
KR101287280B1 (ko) | 태반 성장 인자 매개된 전이 및/또는 혈관신생의 억제 | |
US7914780B1 (en) | Aminopeptidase A (APA) targeting peptides for the treatment of cancer | |
JP2004536020A (ja) | ターゲティングペプチドを使用したアデノウイルスターゲティング及び免疫系応答の操作方法 | |
JP2011525491A (ja) | Crkl標的化ペプチド | |
US20130296252A1 (en) | Muc18 targeting peptides | |
JP2004508045A (ja) | ファージディスプレイにより同定されたヒト及びマウスのターゲティングペプチド | |
US20070264191A1 (en) | Materials and Methods Relating to the Treatment of Glioblastomas | |
US20130237476A1 (en) | Adipose tissue targeted peptides | |
US20130059793A1 (en) | Egf receptor mimicking peptides | |
WO2013149237A1 (en) | Targeting intracellular organelle zip codes with functional homing ligands from cell-internalizing phage combinatorial libraries | |
WO2010048530A2 (en) | Methods and compositions employing an iip45 targeting ligand | |
JP2009191056A (ja) | 合成ペプチドをベースとするepoレセプターアゴニストを用いた抗エリスロポエチン抗体に媒介された障害の治療 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A524 | Written submission of copy of amendment under section 19 (pct) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A524 Effective date: 20110804 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20110804 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130808 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20131010 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20131018 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20131209 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140107 |
|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140328 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20140421 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20140519 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5548616 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |