JP5289843B2 - 生体関連分子の相互作用を検出するための方法及びそれに用いる担体支持部材 - Google Patents
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(1)生体関連分子が固定化された担体を用いた生体関連分子の相互作用の検出に使用するための、担体が固定化された担体支持部材であって、担体固定部が底面と傾斜面とを有する凹部であり、担体が凹部の底面に配置されている、前記担体支持部材。
(2)担体固定部の傾斜面が鏡面仕上げされている、(1)記載の担体支持部材。
(3)担体固定部の傾斜面の表面粗さが10μm以下である、(2)記載の担体支持部材。
(4)担体が担体固定部の底面の80%以上を覆うように配置されている、(1)〜(3)のいずれか記載の担体支持部材。
(5)担体固定部の傾斜面と底面とのなす角度が75°以下である、(1)〜(4)のいずれかに記載の担体支持部材。
(6)担体固定部の先端部側の傾斜面から先端部まで廃液溝が形成されている、(1)〜(5)のいずれかに記載の担体支持部材。
(7)生体関連分子が固定化された担体を用いて生体関連分子の相互作用を検出する方法であって、担体が固定化された担体支持部材の少なくとも担体固定部を反応液に浸漬し、担体上の生体関連分子と反応液中の蛍光標識された生体関連分子とを相互作用させる相互作用工程、担体を洗浄することにより、担体に固定化された生体関連分子と相互作用しなかった生体関連分子を除去する洗浄工程、および担体に励起光を照射し、検出器で蛍光を検出する検出工程を含み、担体固定部が底面と傾斜面とを有する凹部であり、担体が凹部の底面に配置されている、前記方法。
(8)担体固定部の傾斜面が鏡面仕上げされている、(7)記載の方法。
(9)担体固定部の傾斜面の表面粗さが10μm以下である、(8)記載の方法。
(10)担体が担体固定部の底面の80%以上を覆うように配置されている、(7)〜(9)のいずれかに記載の方法。
(11)担体固定部の傾斜面と底面とのなす角度が75°以下である、(7)〜(10)のいずれかに記載の方法。
(12)担体固定部の先端部側の傾斜面から先端部まで廃液溝が形成されている、(7)〜(11)のいずれかに記載の方法。
(13)検出器が結像光学系の検出器である、(7)〜(12)のいずれかに記載の方法。
(14)励起光をスリットを介して照射する、(7)〜(13)のいずれかに記載の方法。
(15)励起光を担体表面に対して斜めに照射する、(7)〜(14)のいずれかに記載の方法。
図1に本発明の担体支持部材の一実施形態の側面図を示す。図1に示されるように、担体固定部11は底面12および傾斜面13を有する凹部であり、凹部の底面12に担体14が固定化されている。図2に本発明の担体支持部材の一実施形態の正面図を示す。図2においても同様であり、担体固定部11は底面12および傾斜面13を有する凹部であり、凹部の底面12に担体14が固定化されている。
本発明では、検出器として結像光学系の検出器を用いることが好ましい。結像光学系の検出器は、励起光を担体に照射し、得られる蛍光の強度を検出するものである。結像光学系の検出器は、通常、励起光を照射するためのレーザー、目的の波長の蛍光のみを透過させる蛍光フィルター、蛍光フィルターを透過した蛍光を検出するための光検出部(例えば、CCDカメラ)を有する。本発明では、通常、レーザーで一度に担体全体に斜めに励起光を照射し、担体の正面から蛍光を検出する。励起光を担体に対して斜めに照射するとは、担体表面とレーザー光のなす角度が、90°未満であることをさし、担体表面とレーザー光のなす角度(小さい方の角度)が、通常、30〜70°、好ましくは40〜60°の角度となるように照射する。結像光学系の検出器では、担体の全面にレーザーを走査させる必要がなく、検出を短時間で実施することができる。一度に担体全体に励起光を照射するため、生体関連分子を固定化する担体としては、比較的サイズの小さいもの、例えば、寸法が10mm以下、好ましくは5mm以下、さらに好ましくは3mm以下の担体、最も好ましくは1〜5mm四方の担体を用いる。
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明の技術的範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
Claims (8)
- 生体関連分子が固定化された担体を用いて生体関連分子の相互作用を検出する方法であって、
担体が固定化された担体支持部材の少なくとも担体固定部を、反応液を収容した容器に挿入することにより反応液に浸漬し、容器を加熱することにより反応液を加熱し、担体上の生体関連分子と反応液中の蛍光標識された生体関連分子とを相互作用させる相互作用工程、
担体を洗浄することにより、担体に固定化された生体関連分子と相互作用しなかった生体関連分子を除去する洗浄工程、および
担体に励起光を照射し、結像光学系の検出器で蛍光を検出する検出工程
を含み、
担体固定部が底面と傾斜面とを有する凹部であり、担体が凹部の底面に配置されている、前記方法。 - 担体固定部の傾斜面が鏡面仕上げされている、請求項1記載の方法。
- 担体固定部の傾斜面の表面粗さが10μm以下である、請求項2記載の方法。
- 担体が担体固定部の底面の80%以上を覆うように配置されている、請求項1〜3のいずれか1項記載の方法。
- 担体固定部の傾斜面と底面とのなす角度が75°以下である、請求項1〜4のいずれか1項記載の方法。
- 担体固定部の先端部側の傾斜面から先端部まで廃液溝が形成されている、請求項1〜5のいずれか1項記載の方法。
- 励起光をスリットを介して照射する、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
- 励起光を担体表面に対して斜めに照射する、請求項1〜7のいずれか1項記載の方法。
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