JP4179877B2 - 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 - Google Patents
単離されたルシフェラーゼおよびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4179877B2 JP4179877B2 JP2002545175A JP2002545175A JP4179877B2 JP 4179877 B2 JP4179877 B2 JP 4179877B2 JP 2002545175 A JP2002545175 A JP 2002545175A JP 2002545175 A JP2002545175 A JP 2002545175A JP 4179877 B2 JP4179877 B2 JP 4179877B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- luciferase
- lual
- pcdna3
- coelenterazine
- luciferases
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/0004—Oxidoreductases (1.)
- C12N9/0069—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y113/00—Oxidoreductases acting on single donors with incorporation of molecular oxygen (oxygenases) (1.13)
- C12Y113/12—Oxidoreductases acting on single donors with incorporation of molecular oxygen (oxygenases) (1.13) with incorporation of one atom of oxygen (internal monooxygenases or internal mixed function oxidases)(1.13.12)
- C12Y113/12007—Photinus-luciferin 4-monooxygenase (ATP-hydrolysing) (1.13.12.7), i.e. firefly-luciferase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
- G01N2333/902—Oxidoreductases (1.)
- G01N2333/90241—Oxidoreductases (1.) acting on single donors with incorporation of molecular oxygen, i.e. oxygenases (1.13)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Description
発光(ルミネッセンス)は励起されたエミッター分子が引き起こす可視スペクトル範囲内の光子放射に与えられる用語である。蛍光とは対照的に、発光のエネルギーは短波長照射の形で外部から供給されるものではない。
数種のルシフェラーゼ基質およびその変換については下記の実施例に記載する。本明細書に記載する基質は全て、光および二酸化炭素(CO2)の放出および酸素(O2)の消費を伴って、酵素的に変換される。補助因子またはエネルギー輸送体(たとえば、ホタル・ルシフェラーゼの場合のATP)に対するこの反応の依存性は、酵素特異的である。
レポータ遺伝子または標識遺伝子は、ある遺伝子の遺伝子産物が単純な生化学的または組織化学的方法を使用すれば、容易に検出できるような遺伝子に、一般的に与えられる用語である。レポータ遺伝子には、少なくとも二つの型が認められている。
1)耐性遺伝子:耐性遺伝子は、その発現が抗生物質、その他、耐性遺伝子が存在しなければ細胞死を起こす物質の培養培地中における存在に対する耐性を細胞に与える遺伝子を示す用語である。
2)レポータ遺伝子:組換えDNA技術では、レポータ遺伝子の産物は融合標識または非融合標識として使用される。最も通常のレポータ遺伝子には、ベータガラクトシダーゼ(Alam et al. 1990)、アルカリフォスファターゼ(Yang et al. 1997;Cullen et al. 1992)、ルシフェラーゼおよびその他のフォトプロテイン(Shimomura, 1985; Philips GN, 1997; Snowdowne et al. 1984)が含まれる。
節足動物門→→甲殻綱→→櫂脚類
Metridia longa 種は甲殻綱、特に櫂脚類または動物プランクトンに属する。
Metridia longa 種の生物発光活性を研究するため、白海で標本を採集し(カルテシュ(Kartesh)生物学研究所、ロシア)、液体窒素中に保存した。Metridia longaのcDNAライブラリーを調製するため、イソチオシアネートを用いるKrieg(Krieg et al. 1996)の方法により、RNAを単離した。
2. 6分 68℃
3. 10秒 95℃
4. 6分 68℃
段階3、段階4: 17サイクル
LuAL
ルシフェラーゼLuALは、分子量23.7kDa、等電点8.32を有するタンパク質である。このコード化ヌクレオチド配列は以下のとおり:
であり、これから次表のアミノ酸配列:
、および次表のアミノ酸組成:
が導かれる。
ルシフェラーゼLu164は、分子量23.8kDa、等電点7.81を有するタンパク質である。このコード化ヌクレオチド配列は次のとおり:
であり、これから次表のアミノ酸配列:
、および次表のアミノ酸組成:
が導かれる。
ルシフェラーゼLu22は、分子量20.2kDa、等電点7.89を有するタンパク質である。このコード化ヌクレオチド配列は次のとおり:
であり、これから次表のアミノ酸配列:
、および次表のアミノ酸組成:
が導かれる。
タンパク質LuAL、Lu164およびLu22は酵素であって、セレンテラジンを変換する時に光を放射する。それ故、いずれもルシフェラーゼ群に属する。ルシフェラーゼは、細菌および真核生物細胞の双方において有効に発現させることができる。真核生物細胞にて発現させるルシフェラーゼLuAL、Lu164およびLu22は分泌される。細菌で発現すると、分泌は起きない。
プラスミド/組立て物
以下に記載する組立て物を製造するために使用するベクターは、Clontech社のベクターpcDNA3.1(+)とpTriplEx2、およびベクター pASMplr(cAMP感受性プロモータエレメント:creを有する当社内組立て物)であった。このベクターの誘導体は、pcDNA3−x、pTriplEx2−x およびpASM−xと命名した。
図1は、ベクターpTriplEx2−LuAL、pcDNA3−LuAL、およびpASM−LuALのプラスミド地図を示す。
Lu164の基質を確認するために、各種セレンテラジン誘導体の10μL溶液(10−4M)を、各々CHO−pcDNA3−Lu164細胞系列からの上清液10μLとともに、インキュベーションし、発光を測定した。各セレンテラジンは、Molecular Probes社(米国)から購入した。
細菌での発現
細菌発現は、この細菌を発現プラスミドpTriplEx2−Lu164、 pTriplEx2−LuAL、およびpTriplEx2−Lu22で形質転換した結果として、E. coli のBL21 (DE3) 株内で行った。形質転換した細菌をLB培地中、37℃で3時間インキュベーションし、1mM最終濃度になるようにIPTGを加えて4時間、発現を誘導した。誘導された細菌を、遠心分離で収集し、PBSに再懸濁し、超音波で破砕した。セレンテラジン(10−4M、メタノール)、またはルシフェリン(ホタル・ルシフェリン)を溶解液5μL(5mg/mL)に加え、化学発光を測定した。
構成的真核生物発現は、一過性の実験で発現プラスミドpcDNA3−Lu164、pcDNA3−LuALおよびpcDNA3−Lu22で細胞を形質転換することによってCHO細胞内で行った。そのために、96穴マイクロタイタープレートの各ウェルに、DMEM−F12培地中の細胞10000個を塗布し、37℃で一夜インキュベーションした。このトランスフェクションは、製造社の指示書に従い、Fugene6キット(Roche社)を使用して行った。遺伝子移入を受けた細胞をDMEM−F12培地中、37℃で一夜インキュベーションした。セレンテラジン(10−4M、メタノール)添加後、培地(5μL)と細胞溶解液(5μL)の化学発光を室温、9.5kV、30秒間光度計で測定した。
放射スペクトルを測定するために、E. coli のBL21(DE3)株細胞をプラスミドpTriplEx2−Lu164、pTriplEx2−LuALおよび pTriplEx2−Lu22で形質転換し、前記3.1に記載のようにしてオーバーエクスプレッションした。細菌溶解液100μL容にセレンテラジン(10−4M;50μL)を添加し、放射スペクトルを測定した。各ルシフェラーゼが発する放射スペクトルのグラフを以下に記載する。
真核生物細胞内でのルシフェラーゼLu164、LuALおよびLu22の発現を特徴付けるために、CHO細胞にプラスミドpcDNA3−LuAL、pcDNA3−Lu164およびpcDNA3−Fireluc、およびpcDNA3.1(+)を安定的に遺伝子移入した。得られたクローンは、DMEM−F12培地中で培養した。ホタル・ルシフェラーゼは、非分泌性ルシフェラーゼの陽性対照として使用した。プラスミドpcDNA3.1(+)は、CHO親細胞の内因性活性があれば検出するための対照プラスミドとして使用した。
ルシフェラーゼLu22、Lu164およびLuALの温度依存性を測定するために、CHO細胞にベクターpcDNA3−Lu22、pcDNA3−Lu164、pcDNA3−LuALを一過性に遺伝子移入し、上清液のルシフェラーゼ活性を0℃と47℃との間の温度で測定した。この測定のために、細胞上清液とセレンテラジン溶液とを5分間測定温度に順応させた。測定は光度計で9.5 kV、30秒間行った。
この実験では、CHO細胞に、発現プラスミドpASM−LuALを一過性に遺伝子移入して真核生物での発現を誘導した。そのために、96穴マイクロタイタープレートにウェル当りDMEM−F12培地中の細胞10000個を塗布し、一夜37℃でインキュベーションした。遺伝子移入は、製造社の指示書に従ってFugene 6キット(Roche社)を使用して行った。遺伝子移入した細胞は、DMEM−F12培地中、37℃で一夜インキュベーションした。次に細胞をフォルスコリン(Forkolin;10−5M)で5時間誘導した。次に、セレンテラジン(10−4M、メタノール)を添加後、培地内および細胞溶解物内の化学発光を、9.5kV、30秒間、光度計で測定した。
細胞に基づく系でGプロテイン共役受容体の活性化の受容体特異的リガンドによる分析を可能にするために、ルシフェラーゼLuALのcDNA配列を、発現ベクターpASMplrにクローニングした。この発現ベクター、pASMplrは、camp−感受性のプロモータエレメント(CRE)を含み、campの細胞内濃度を間接的に測定することを可能にする。この系では、ルシフェラーゼがレポータ遺伝子として役立っている。
Claims (6)
- 以下からなる群より選択される核酸分子:
a)配列番号2、4または6に示されるペプチド配列をコードする核酸分子、および
b)配列番号1、3または5に示されるヌクレオチド配列からなる核酸分子。 - その配列の5’側に機能的プロモーターが位置する、請求項1に記載の核酸分子。
- 請求項2に記載の核酸分子を含む、組換えDNAベクターまたはRNAベクター。
- 請求項3に記載のベクターを有する非ヒト生物。
- 請求項1に記載の核酸分子によってコードされるペプチド。
- 請求項1または2に記載の核酸分子の、細胞系用レポータ遺伝子としての、使用。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE10058091A DE10058091A1 (de) | 2000-11-23 | 2000-11-23 | Isolierte Luziferasen Lu164, LuAL und Lu22, sowie deren Verwendung |
PCT/EP2001/013597 WO2002042470A1 (de) | 2000-11-23 | 2001-11-22 | Isolierte luziferasen sowie deren verwendung |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007264492A Division JP4519163B2 (ja) | 2000-11-23 | 2007-10-10 | 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2004516828A JP2004516828A (ja) | 2004-06-10 |
JP2004516828A5 JP2004516828A5 (ja) | 2005-05-26 |
JP4179877B2 true JP4179877B2 (ja) | 2008-11-12 |
Family
ID=7664340
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2002545175A Expired - Lifetime JP4179877B2 (ja) | 2000-11-23 | 2001-11-22 | 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 |
JP2007264492A Expired - Lifetime JP4519163B2 (ja) | 2000-11-23 | 2007-10-10 | 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007264492A Expired - Lifetime JP4519163B2 (ja) | 2000-11-23 | 2007-10-10 | 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 |
Country Status (19)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US7297483B2 (ja) |
EP (1) | EP1339853B1 (ja) |
JP (2) | JP4179877B2 (ja) |
KR (1) | KR100841808B1 (ja) |
CN (4) | CN102732537A (ja) |
AT (1) | ATE335824T1 (ja) |
AU (3) | AU2002220697A1 (ja) |
BR (2) | BR0115534A (ja) |
CA (1) | CA2429451C (ja) |
DE (2) | DE10058091A1 (ja) |
DK (1) | DK1339853T3 (ja) |
ES (1) | ES2271111T3 (ja) |
HK (3) | HK1061044A1 (ja) |
IL (2) | IL155878A0 (ja) |
MX (1) | MXPA03004539A (ja) |
PL (1) | PL206385B1 (ja) |
PT (1) | PT1339853E (ja) |
WO (2) | WO2002042469A1 (ja) |
ZA (1) | ZA200303928B (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE10058091A1 (de) * | 2000-11-23 | 2002-06-06 | Bayer Ag | Isolierte Luziferasen Lu164, LuAL und Lu22, sowie deren Verwendung |
DE102007005804A1 (de) | 2007-02-06 | 2008-08-07 | Bayer Healthcare Ag | Sekretierte Luziferase Lu164M3 und deren Verwendung |
DE102007005803A1 (de) | 2007-02-06 | 2008-08-07 | Bayer Healthcare Ag | Sekretierte Luziferase MLuc7 und deren Verwendung |
JP5605727B2 (ja) | 2010-04-06 | 2014-10-15 | Jnc株式会社 | セレンテラジン類縁体及びセレンテラミド類縁体 |
US10428317B2 (en) | 2010-12-03 | 2019-10-01 | Gene Stream Pty Ltd | Light-emitting molecules |
US8435777B1 (en) | 2012-01-20 | 2013-05-07 | Cayla | CPG-free gene for a new secreted reporter protein |
WO2014065047A1 (ja) * | 2012-10-26 | 2014-05-01 | 独立行政法人産業技術総合研究所 | 人工生物発光酵素 |
JP6132350B2 (ja) * | 2012-10-26 | 2017-05-24 | 国立研究開発法人産業技術総合研究所 | 人工生物発光酵素 |
CA3174484A1 (en) * | 2012-12-12 | 2014-06-19 | Promega Corporation | Recognition of cellular target binding by a bioactive agent using intracellular bioluminescence resonance energy transfer |
US10214766B2 (en) | 2013-10-18 | 2019-02-26 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | Luminescent substrate for use in artificial bioluminescent enzyme |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5604123A (en) * | 1988-08-09 | 1997-02-18 | Toray Industries, Inc. | Luciferase, gene encoding the same and production process of the same |
US5838313A (en) * | 1995-11-20 | 1998-11-17 | Siemens Corporate Research, Inc. | Multimedia-based reporting system with recording and playback of dynamic annotation |
JP2002507410A (ja) * | 1998-03-27 | 2002-03-12 | プロルーム・リミテッド | ルシフェラーゼ、蛍光タンパク質、ルシフェラーゼおよび蛍光タンパク質をコードする核酸および、診断、高処理スクリーニングおよび新規アイテムにおけるその使用 |
US6995768B2 (en) * | 2000-05-10 | 2006-02-07 | Cognos Incorporated | Interactive business data visualization system |
DE10058091A1 (de) * | 2000-11-23 | 2002-06-06 | Bayer Ag | Isolierte Luziferasen Lu164, LuAL und Lu22, sowie deren Verwendung |
US6643635B2 (en) * | 2001-03-15 | 2003-11-04 | Sagemetrics Corporation | Methods for dynamically accessing, processing, and presenting data acquired from disparate data sources |
US8036939B2 (en) * | 2001-06-08 | 2011-10-11 | Servigistics, Inc. | Reporting in a supply chain |
US7587755B2 (en) * | 2004-07-02 | 2009-09-08 | Citrix Systems, Inc. | System and method for executing interactive applications with minimal privileges |
US20060230234A1 (en) * | 2005-03-30 | 2006-10-12 | Sap Ag. | Browser cache management |
US7779347B2 (en) * | 2005-09-02 | 2010-08-17 | Fourteen40, Inc. | Systems and methods for collaboratively annotating electronic documents |
US7831464B1 (en) * | 2006-04-06 | 2010-11-09 | ClearPoint Metrics, Inc. | Method and system for dynamically representing distributed information |
-
2000
- 2000-11-23 DE DE10058091A patent/DE10058091A1/de not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-11-12 AU AU2002220697A patent/AU2002220697A1/en not_active Withdrawn
- 2001-11-12 WO PCT/EP2001/013057 patent/WO2002042469A1/de unknown
- 2001-11-22 PT PT01994705T patent/PT1339853E/pt unknown
- 2001-11-22 EP EP01994705A patent/EP1339853B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 AU AU2002224876A patent/AU2002224876B2/en not_active Expired
- 2001-11-22 BR BR0115534-2A patent/BR0115534A/pt active IP Right Grant
- 2001-11-22 ES ES01994705T patent/ES2271111T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 AU AU2487602A patent/AU2487602A/xx active Pending
- 2001-11-22 BR BRPI0115534-2A patent/BRPI0115534B1/pt unknown
- 2001-11-22 CA CA2429451A patent/CA2429451C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 WO PCT/EP2001/013597 patent/WO2002042470A1/de active IP Right Grant
- 2001-11-22 CN CN2012102094057A patent/CN102732537A/zh active Pending
- 2001-11-22 DK DK01994705T patent/DK1339853T3/da active
- 2001-11-22 AT AT01994705T patent/ATE335824T1/de active
- 2001-11-22 IL IL15587801A patent/IL155878A0/xx active IP Right Grant
- 2001-11-22 JP JP2002545175A patent/JP4179877B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 MX MXPA03004539A patent/MXPA03004539A/es active IP Right Grant
- 2001-11-22 KR KR1020037006911A patent/KR100841808B1/ko active IP Right Grant
- 2001-11-22 CN CN2010105056541A patent/CN101979586B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 CN CNB018194338A patent/CN1303214C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 PL PL362774A patent/PL206385B1/pl unknown
- 2001-11-22 DE DE50110723T patent/DE50110723D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 CN CN200510118849XA patent/CN1847399B/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-11-22 US US10/416,752 patent/US7297483B2/en not_active Expired - Lifetime
-
2003
- 2003-05-13 IL IL155878A patent/IL155878A/en unknown
- 2003-05-21 ZA ZA200303928A patent/ZA200303928B/en unknown
-
2004
- 2004-06-08 HK HK04104076A patent/HK1061044A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2004-06-08 HK HK07103527.9A patent/HK1096423A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2007
- 2007-10-10 JP JP2007264492A patent/JP4519163B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2007-10-22 US US11/975,752 patent/US8236540B2/en active Active
-
2011
- 2011-08-18 HK HK11108724.3A patent/HK1154623A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2012
- 2012-07-18 US US13/552,486 patent/US20130115641A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-05-15 US US14/714,166 patent/US9745557B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4519163B2 (ja) | 単離されたルシフェラーゼおよびその使用 | |
RU2251571C2 (ru) | РЕКОМБИНАНТНАЯ ТЕРМОСТАБИЛЬНАЯ ЛЮЦИФЕРАЗА, СПОСОБ ЕЕ ПОЛУЧЕНИЯ, ИЗОЛИРОВАННАЯ НУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЙ ВЕКТОР, НАБОР ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНОМ АНАЛИЗЕ, АНАЛИТИЧЕСКИЙ ТЕСТ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИСУТСТВИЯ В ОБРАЗЦЕ СоА | |
JP2011083289A (ja) | 変異型ルシフェラーゼ | |
TW200846469A (en) | Secreted MLuc7 luciferase and use thereof | |
US8722376B2 (en) | Firefly luciferase | |
KR102018248B1 (ko) | 생물발광 강도가 증폭된 변이 가우시아 루시퍼라아제 | |
JP6006070B2 (ja) | ホタル由来ルシフェラーゼ | |
JP2023043461A (ja) | 発光性タンパク質を用いた発光方法 | |
US8642272B2 (en) | Isolated luciferase gene of L. italica | |
JP5969757B2 (ja) | ホタル由来ルシフェラーゼの変異体 | |
WO2024000408A1 (zh) | 荧光素酶突变体及其应用 | |
JP2002335961A (ja) | 渦鞭毛藻ルシフェラーゼ及びそれをコードする遺伝子 | |
EP2686424B1 (en) | Star-worm luciferase | |
CN117106097A (zh) | 一种rna-蛋白质复合物及其应用 | |
Kim Choi et al. | Modified luciferase |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041122 |
|
A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20050329 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20050629 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20061212 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070309 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20070612 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20080826 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4179877 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110905 Year of fee payment: 3 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313111 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110905 Year of fee payment: 3 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120905 Year of fee payment: 4 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130905 Year of fee payment: 5 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
EXPY | Cancellation because of completion of term |