JP3344738B2 - 固定化修飾酵素、該固定化修飾酵素を用いるエステル合成方法 - Google Patents
固定化修飾酵素、該固定化修飾酵素を用いるエステル合成方法Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、光架橋性樹脂に固定化
してなる疎水性固定化修飾酵素及び該固定化修飾酵素の
存在下、有機溶媒中でエステルを合成する反応方法に関
する。更に詳細には、二分子膜形成能のある中性の界面
活性剤で修飾された疎水性酵素を光架橋性樹脂に固定化
してなる固定化修飾酵素及び該固定化修飾酵素を用いた
有機溶媒中でのエステル合成反応方法に関する。
してなる疎水性固定化修飾酵素及び該固定化修飾酵素の
存在下、有機溶媒中でエステルを合成する反応方法に関
する。更に詳細には、二分子膜形成能のある中性の界面
活性剤で修飾された疎水性酵素を光架橋性樹脂に固定化
してなる固定化修飾酵素及び該固定化修飾酵素を用いた
有機溶媒中でのエステル合成反応方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】酵素を用いて、各種の反応に利用する方
法は公知の技術であり、さらに、酵素を固定化して得ら
れた固定化酵素を用いて水性媒体中で各種の反応に利用
する方法も公知である。
法は公知の技術であり、さらに、酵素を固定化して得ら
れた固定化酵素を用いて水性媒体中で各種の反応に利用
する方法も公知である。
【０００３】一般的に酵素は水溶性であり、水性媒体中
での反応には非常に適した性質を有している。最近にな
って、酵素を有機溶媒中で各種のエステル合成やエステ
ル交換、さらには酵素の基質特異性を利用した光学活性
体の製造などに利用されているが、これらの反応は概ね
有機溶媒の存在下で行われることが多い。しかしなが
ら、一般的に酵素は有機溶媒には不溶で、さらに有機溶
媒に対して不安定で失活し易く、その反応効率は悪いも
のであった。酵素を有機溶媒の存在下での反応に利用す
る方法として以下に述べるような方法が知られている。
での反応には非常に適した性質を有している。最近にな
って、酵素を有機溶媒中で各種のエステル合成やエステ
ル交換、さらには酵素の基質特異性を利用した光学活性
体の製造などに利用されているが、これらの反応は概ね
有機溶媒の存在下で行われることが多い。しかしなが
ら、一般的に酵素は有機溶媒には不溶で、さらに有機溶
媒に対して不安定で失活し易く、その反応効率は悪いも
のであった。酵素を有機溶媒の存在下での反応に利用す
る方法として以下に述べるような方法が知られている。
【０００４】１．酵素粉末を有機溶媒中に直接分散させ
て反応を行う。（酵素粉末法） ２．基質を含んだ有機相と、酵素を含んだ水相間で界面
反応を行う。（エマルジョン法） ３．親水性のゲルに酵素を固定化し、又は水系で固定化
酵素を調製した後、有機溶媒中で反応を行う。（固定化
酵素法） ４．界面活性剤で有機溶媒中に酵素水溶液を逆ミセル化
として可溶化させて反応する。（逆ミセル法） ５．ポリエチレングリコール、２分子膜形成能のある界
面活性剤で酵素表面を疎水化して有機溶媒に可溶化した
酵素を用いて有機溶媒中で反応する。（酵素修飾法）
て反応を行う。（酵素粉末法） ２．基質を含んだ有機相と、酵素を含んだ水相間で界面
反応を行う。（エマルジョン法） ３．親水性のゲルに酵素を固定化し、又は水系で固定化
酵素を調製した後、有機溶媒中で反応を行う。（固定化
酵素法） ４．界面活性剤で有機溶媒中に酵素水溶液を逆ミセル化
として可溶化させて反応する。（逆ミセル法） ５．ポリエチレングリコール、２分子膜形成能のある界
面活性剤で酵素表面を疎水化して有機溶媒に可溶化した
酵素を用いて有機溶媒中で反応する。（酵素修飾法）
【０００５】上記の方法の内で、特に５．の酵素修飾法
は水相中での均一反応に近い反応速度が得られ、しかも
酵素の耐有機溶媒性も良好であるので優れた方法であ
る。
は水相中での均一反応に近い反応速度が得られ、しかも
酵素の耐有機溶媒性も良好であるので優れた方法であ
る。
【０００６】しかしながら、水性媒体中での反応に固定
化酵素を使用する方法は知られているが、有機溶媒中で
同様に上記の修飾酵素を固定化して得られた固定化修飾
酵素を用いる反応は知られていない。
化酵素を使用する方法は知られているが、有機溶媒中で
同様に上記の修飾酵素を固定化して得られた固定化修飾
酵素を用いる反応は知られていない。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】酵素を固定化すること
によるメリットは次のような点が挙げられる。 １．酵素の繰り返し利用が可能になる。 ２．粉末の酵素と異なり取扱いが容易で、連続生産が可
能になる。 ３．熱安定性が向上する。 ４．反応後の生成物の回収が容易である。
によるメリットは次のような点が挙げられる。 １．酵素の繰り返し利用が可能になる。 ２．粉末の酵素と異なり取扱いが容易で、連続生産が可
能になる。 ３．熱安定性が向上する。 ４．反応後の生成物の回収が容易である。
【０００８】このように酵素を固定化して使用すること
によりその利用価値は増大するため、有機溶媒中でも酵
素反応を利用することができる固定化酵素及び当該固定
化酵素を用いた有機溶媒中でのエステル合成反応方法の
開発が望まれていた。
によりその利用価値は増大するため、有機溶媒中でも酵
素反応を利用することができる固定化酵素及び当該固定
化酵素を用いた有機溶媒中でのエステル合成反応方法の
開発が望まれていた。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明者らは上記のよう
な従来の問題点に鑑み、有機溶媒中でエステル合成反応
などに応用可能な固定化酵素を調製する方法を鋭意研究
し、ここに完成した。
な従来の問題点に鑑み、有機溶媒中でエステル合成反応
などに応用可能な固定化酵素を調製する方法を鋭意研究
し、ここに完成した。
【００１０】本発明で用いる酵素は、有機溶媒中で各種
の反応に応用できる酵素であれば何れも用いることがで
きる。例えば、各種の酸化還元酵素、転移酵素、加水分
解酵素、脱離酵素、異性化酵素、合成酵素等が挙げられ
る。特に各種の有機溶媒中では加水分解酵素を用いた反
応が利用されている。加水分解酵素としては、リパー
ゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ等が挙げられ、本発明に
おいてはリパーゼが好適に用いられる。
の反応に応用できる酵素であれば何れも用いることがで
きる。例えば、各種の酸化還元酵素、転移酵素、加水分
解酵素、脱離酵素、異性化酵素、合成酵素等が挙げられ
る。特に各種の有機溶媒中では加水分解酵素を用いた反
応が利用されている。加水分解酵素としては、リパー
ゼ、プロテアーゼ、セルラーゼ等が挙げられ、本発明に
おいてはリパーゼが好適に用いられる。
【００１１】リパーゼの具体例としては、シュードモナ
ス（Pseudomonas）属由来のリパーゼ（例えば、リパー
ゼＰＳ：天野製薬製）、等が挙げられ、好適に使用でき
る。
ス（Pseudomonas）属由来のリパーゼ（例えば、リパー
ゼＰＳ：天野製薬製）、等が挙げられ、好適に使用でき
る。
【００１２】上記の各種酵素を用いて酵素修飾法によっ
て有機溶媒可溶化酵素を調製することができる。即ち、
ポリエチレングリコール修飾法では２，４−ビス（ｏ−
メトキシポリエチレングリコール）−６−クロロ−ｓ−
トリアジン（活性化ＰＥＧ2）を水系で酵素表面のアミ
ノ基と反応させ、一方、界面活性剤による修飾方法（錯
化法）では水系で二分子膜形成能のある界面活性剤と酵
素を混合することにより有機溶媒可溶化酵素を調製する
ことができる。
て有機溶媒可溶化酵素を調製することができる。即ち、
ポリエチレングリコール修飾法では２，４−ビス（ｏ−
メトキシポリエチレングリコール）−６−クロロ−ｓ−
トリアジン（活性化ＰＥＧ2）を水系で酵素表面のアミ
ノ基と反応させ、一方、界面活性剤による修飾方法（錯
化法）では水系で二分子膜形成能のある界面活性剤と酵
素を混合することにより有機溶媒可溶化酵素を調製する
ことができる。
【００１３】前者は化学反応を利用した修飾法であり、
修飾できる酵素がかなり限定される。即ち、全てのアミ
ノ酸を修飾してしまうと酵素活性が消失し、しかも反応
後の透析などの操作が繁雑で調製に時間がかかる。
修飾できる酵素がかなり限定される。即ち、全てのアミ
ノ酸を修飾してしまうと酵素活性が消失し、しかも反応
後の透析などの操作が繁雑で調製に時間がかかる。
【００１４】それに対して後者の錯化法は水中で酵素と
界面活性剤を混合し、得られた固体錯体を単離するだけ
の簡便な方法であるので、より有利に利用できる。
界面活性剤を混合し、得られた固体錯体を単離するだけ
の簡便な方法であるので、より有利に利用できる。
【００１５】酵素を修飾する界面活性剤としてはアルキ
ル基の異なる合成品２ＣｎＧＥ（Ｌ−グルタミン酸ジア
ルキルエステルリビトール；ｎ＝８〜１８）やジヘキサ
デシルジメチルアンモニウムブロミドが利用でき、特に
Ｌ−グルタミン酸ジオレイルエステルリビトール（以
下、２Ｃ１８Δ９ＧＥと略する）が好適に用いられる。
ル基の異なる合成品２ＣｎＧＥ（Ｌ−グルタミン酸ジア
ルキルエステルリビトール；ｎ＝８〜１８）やジヘキサ
デシルジメチルアンモニウムブロミドが利用でき、特に
Ｌ−グルタミン酸ジオレイルエステルリビトール（以
下、２Ｃ１８Δ９ＧＥと略する）が好適に用いられる。
【００１６】２Ｃ18△9ＧＥは、疎水鎖を２本有する２
分子膜形成のある両性界面活性剤で、無極性の溶媒には
易溶で、極性溶媒には不溶である。
分子膜形成のある両性界面活性剤で、無極性の溶媒には
易溶で、極性溶媒には不溶である。
【００１７】調製した有機溶媒可溶化酵素を適当な固定
化担体に固定化する。固定化担体としては、光架橋性樹
脂が好適に用いられる。
化担体に固定化する。固定化担体としては、光架橋性樹
脂が好適に用いられる。
【００１８】光架橋性樹脂としては、スチルバゾール含
有ポリビニルアルコール（PVA-SbQ：東洋合成化学製）
をアセチル化して得られるスチルバゾール含有ポリ酢酸
ビニル（PVAc-SbQ）、メタクリル酸メチル−４−オキシ
カルコン共重合体（4AC/PMMA）、スチルバゾール含有ポ
リクロロエチルビニルエーテル（PCV-SbQ）、ＥＮＴＰ
−1000、ＥＮＴＰ−2000、ＥＮＴＰ−3000及びＥＮＴＰ
−4000（以上、関西ペイント製：商品名）等が挙げられ
る。
有ポリビニルアルコール（PVA-SbQ：東洋合成化学製）
をアセチル化して得られるスチルバゾール含有ポリ酢酸
ビニル（PVAc-SbQ）、メタクリル酸メチル−４−オキシ
カルコン共重合体（4AC/PMMA）、スチルバゾール含有ポ
リクロロエチルビニルエーテル（PCV-SbQ）、ＥＮＴＰ
−1000、ＥＮＴＰ−2000、ＥＮＴＰ−3000及びＥＮＴＰ
−4000（以上、関西ペイント製：商品名）等が挙げられ
る。
【００１９】以下、リパーゼ及び光架橋性樹脂としてＥ
ＮＴＰ−1000を用いた固定化酵素の調製法について例示
する。もちろん、他の酵素についても同様にして固定化
酵素を調製することができる。
ＮＴＰ−1000を用いた固定化酵素の調製法について例示
する。もちろん、他の酵素についても同様にして固定化
酵素を調製することができる。
【００２０】 界面活性剤とリパーゼの錯体は次の
ように調製する。即ち、界面活性剤の水懸濁液にリパー
ゼ水溶液を攪拌下に混合し、冷所で１日放置し、遠心分
離で錯体を分離し、真空乾燥して酵素錯体を調製する。
ように調製する。即ち、界面活性剤の水懸濁液にリパー
ゼ水溶液を攪拌下に混合し、冷所で１日放置し、遠心分
離で錯体を分離し、真空乾燥して酵素錯体を調製する。
【００２１】 光架橋性樹脂を有機溶媒に加熱して
溶解し増感剤を加え、冷後、上記の酵素錯体を加えて攪
拌して均一溶液としフィルム上にキャストする。溶媒を
蒸発させ、紫外線を照射して架橋する。これを有機溶媒
で洗浄し、固定化酵素を調製する。
溶解し増感剤を加え、冷後、上記の酵素錯体を加えて攪
拌して均一溶液としフィルム上にキャストする。溶媒を
蒸発させ、紫外線を照射して架橋する。これを有機溶媒
で洗浄し、固定化酵素を調製する。
【００２２】PVA-SbQを用いる場合は水溶液中に酵素錯
体を分散状態で固定化し、水洗して乾燥させる。
体を分散状態で固定化し、水洗して乾燥させる。
【００２３】本発明で得られた疎水性固定化酵素を用い
る有機溶媒中での反応としては、エステル合成、エステ
ル交換反応などが挙げられ、従来の有機溶媒中で行われ
る酵素を用いた反応の何れにも適用できる。
る有機溶媒中での反応としては、エステル合成、エステ
ル交換反応などが挙げられ、従来の有機溶媒中で行われ
る酵素を用いた反応の何れにも適用できる。
【００２４】固定化酵素を用いて有機溶媒中での各種反
応に利用するには通常の方法が適用できる。
応に利用するには通常の方法が適用できる。
【００２５】以下に試験例、実施例を挙げて本発明を詳
細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものでは
ない。尚、酵素錯体調製のために使用する２Ｃ18△9Ｇ
Ｅの合成は以下のようにして行った。
細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものでは
ない。尚、酵素錯体調製のために使用する２Ｃ18△9Ｇ
Ｅの合成は以下のようにして行った。
【００２６】Ｌ−グルタミン酸 15ｇ（102mmol）、ｐ−
トルエンスルホン酸 30ｇ、オレイルアルコール70.75ml
（223mmol）をトルエン300mlに溶解し、500ml丸底フラ
スコでディーンスタークトラップを用いて脱水しながら
加熱還流させ６時間反応した。
トルエンスルホン酸 30ｇ、オレイルアルコール70.75ml
（223mmol）をトルエン300mlに溶解し、500ml丸底フラ
スコでディーンスタークトラップを用いて脱水しながら
加熱還流させ６時間反応した。
【００２７】反応後、トラップに滞留或いは除去水に付
着して減少した分のトルエンを追加して更に４〜５時間
反応させた。冷却後、毛管を装着し、低真空で大部分の
トルエンを減圧流去後、高真空でトルエンを完全に除去
した。残渣にアセトン250mlと塩酸約10mlを加え、冷凍
庫で１晩放置冷却した。
着して減少した分のトルエンを追加して更に４〜５時間
反応させた。冷却後、毛管を装着し、低真空で大部分の
トルエンを減圧流去後、高真空でトルエンを完全に除去
した。残渣にアセトン250mlと塩酸約10mlを加え、冷凍
庫で１晩放置冷却した。
【００２８】析出した結晶を取り出し、アセトンで再結
晶した。この結晶にジエチルエーテルと炭酸ナトリウム
水溶液を加えて振り混ぜ、飽和食塩水を加えて塩析し、
エーテル相を分離し、硫酸マグネシウムで脱水した。硫
酸マグネシウムを濾去後、エーテルを除去した。残渣と
グルコノ−δ−ラクトンを無水エタノールに溶解し、３
時間以上加熱還流した。エタノールを減圧除去後、残渣
をアセトンで再結晶を繰り返し、結晶を得る。
晶した。この結晶にジエチルエーテルと炭酸ナトリウム
水溶液を加えて振り混ぜ、飽和食塩水を加えて塩析し、
エーテル相を分離し、硫酸マグネシウムで脱水した。硫
酸マグネシウムを濾去後、エーテルを除去した。残渣と
グルコノ−δ−ラクトンを無水エタノールに溶解し、３
時間以上加熱還流した。エタノールを減圧除去後、残渣
をアセトンで再結晶を繰り返し、結晶を得る。
【００２９】
実施例１ 酵素錯体の調製 2.0ｇ／Ｌの上記の様に調製した２Ｃ18△9ＧＥをイオン
交換水に懸濁させた液250mlと同濃度、同量のリパーゼ
ＰＳ水溶液を攪拌しながら混合し、１時間攪拌した後、
20分間超音波を照射した。その後、24時間冷蔵庫で冷却
して熟成させ、懸濁液を遠心分離（10000-12000rpm、５
分）して沈殿を取り出した。沈殿を乾燥して酵素錯体を
調製した。リパーゼＰＳでの錯化収率は83％であった。
そして、元素分析値から算出した錯体中のリパーゼＰＳ
含有量は53重量％であった。
交換水に懸濁させた液250mlと同濃度、同量のリパーゼ
ＰＳ水溶液を攪拌しながら混合し、１時間攪拌した後、
20分間超音波を照射した。その後、24時間冷蔵庫で冷却
して熟成させ、懸濁液を遠心分離（10000-12000rpm、５
分）して沈殿を取り出した。沈殿を乾燥して酵素錯体を
調製した。リパーゼＰＳでの錯化収率は83％であった。
そして、元素分析値から算出した錯体中のリパーゼＰＳ
含有量は53重量％であった。
【００３０】実施例２ 酵素錯体のＰＶＡ−ＳｂＱへの
固定化 ＰＶＡ−ＳｂＱ水溶液（ポリマー含量11.3重量％）１ｇ
を試験管に取り、これに実施例１で得られた酵素錯体0.
1ｇを加えて混合した。混合後、懸濁液をポリエステル
フィルム上に均一な厚さになるようにキャストし、暗室
で風乾した後、片面につき10分間紫外線（ウシオ100Ｗ
中圧水銀ランプを使用）を約５cmの距離で両面から照射
して硬化させた。硬化した樹脂の付着しているポリエス
テルフィルムを蒸留水をいれたシャーレに浸して樹脂を
離し、洗浄し、ろ紙に挟んで乾燥した。この固定化酵素
は約３mm四方に切断して以下の反応に使用した。
固定化 ＰＶＡ−ＳｂＱ水溶液（ポリマー含量11.3重量％）１ｇ
を試験管に取り、これに実施例１で得られた酵素錯体0.
1ｇを加えて混合した。混合後、懸濁液をポリエステル
フィルム上に均一な厚さになるようにキャストし、暗室
で風乾した後、片面につき10分間紫外線（ウシオ100Ｗ
中圧水銀ランプを使用）を約５cmの距離で両面から照射
して硬化させた。硬化した樹脂の付着しているポリエス
テルフィルムを蒸留水をいれたシャーレに浸して樹脂を
離し、洗浄し、ろ紙に挟んで乾燥した。この固定化酵素
は約３mm四方に切断して以下の反応に使用した。
【００３１】実施例３ 酵素錯体のＥＮＴＰ−1000への
固定化 ＥＮＴＰ−1000（１ｇ）を試験管にとり、ベンゼン（0.
5ｇ）を加え加熱して溶解し、増感剤としてベンゾイン
エチルエーテル10mgを加えて混合し、放冷後に実施例１
で得られた酵素錯体0.1gを加えて攪拌して均一溶液とし
ポリエステルフィルム上にキャストした。溶媒を蒸発さ
せ、空気を遮断するために表面をポリエステルフィルム
で覆い、紫外線を片面につき１０〜１５分両面に照射
し、架橋した。これをベンゼンで洗浄し、固定化酵素を
調製した。この固定化酵素は約３mm四方に切断して以下
の反応に使用した。
固定化 ＥＮＴＰ−1000（１ｇ）を試験管にとり、ベンゼン（0.
5ｇ）を加え加熱して溶解し、増感剤としてベンゾイン
エチルエーテル10mgを加えて混合し、放冷後に実施例１
で得られた酵素錯体0.1gを加えて攪拌して均一溶液とし
ポリエステルフィルム上にキャストした。溶媒を蒸発さ
せ、空気を遮断するために表面をポリエステルフィルム
で覆い、紫外線を片面につき１０〜１５分両面に照射
し、架橋した。これをベンゼンで洗浄し、固定化酵素を
調製した。この固定化酵素は約３mm四方に切断して以下
の反応に使用した。
【００３２】実施例４ 固定化酵素および酵素錯体の反
応性 実施例１で得られたリパーゼＰＳの酵素錯体と実施例２
及び実施例３で得られたリパーゼＰＳの固定化酵素を用
いて有機溶媒中のベンジルアルコールのラウリン酸エス
テル化反応を検討した。反応条件は以下のようにして行
った。
応性 実施例１で得られたリパーゼＰＳの酵素錯体と実施例２
及び実施例３で得られたリパーゼＰＳの固定化酵素を用
いて有機溶媒中のベンジルアルコールのラウリン酸エス
テル化反応を検討した。反応条件は以下のようにして行
った。
【００３３】 ベンジルアルコール 50mM ラウリン酸 25mM 反応液量 10ml 反応温度 30℃ 酵素錯体及び固定化酵素の量 50mg （固定化酵素中の酵素錯体量として） モレキュラーシーブ ３Ａ 0.5g
【００３４】生成物の分析は高速液体クロマトグラフィ
ーで行い、内部標準物質としてプロゲステロンを用い
て、ベンジルアルコールの減少量を測定し反応率を求め
た。
ーで行い、内部標準物質としてプロゲステロンを用い
て、ベンジルアルコールの減少量を測定し反応率を求め
た。
【００３５】尚、反応溶媒にはベンゼン、イソプロピル
エーテル及びイソオクタンを用いた。反応時間５時間で
の反応収率を表１に示す。
エーテル及びイソオクタンを用いた。反応時間５時間で
の反応収率を表１に示す。
【００３６】
【表１】
【００３７】この結果、反応溶媒としてはベンゼンが良
好であることが判った。また、担体がＰＶＡ−ＳｂＱよ
りもＥＮＴＰ−１０００のときのほうが反応収率がよい
のは、前者は親水性のための酵素錯体が均一に溶解せず
に懸濁状態で固定化されているためと、また疎水性の基
質と担体との親和性の相違のためと考えられた。
好であることが判った。また、担体がＰＶＡ−ＳｂＱよ
りもＥＮＴＰ−１０００のときのほうが反応収率がよい
のは、前者は親水性のための酵素錯体が均一に溶解せず
に懸濁状態で固定化されているためと、また疎水性の基
質と担体との親和性の相違のためと考えられた。
【００３８】実施例５ 実施例４のベンゼン中での反応に用いたＥＮＴＰ−１０
００固定化修飾リパーゼを回収して、新しい基質溶液に
入れて５時間ベンゼン中で反応させ、繰り返しによる反
応への影響を調べた。その結果を表２に示す。
００固定化修飾リパーゼを回収して、新しい基質溶液に
入れて５時間ベンゼン中で反応させ、繰り返しによる反
応への影響を調べた。その結果を表２に示す。
【００３９】
【表２】
【００４０】この固定化修飾酵素の繰り返し利用の傾向
も、ほぼ水系での固定化酵素の挙動に類似してた。
も、ほぼ水系での固定化酵素の挙動に類似してた。
【００４１】
【発明の効果】界面活性剤で被覆して有機溶媒に可溶と
なった酵素を有機溶媒中で固定化でき、有機溶媒中で酵
素本来の活性を発現させることができた。今後色々な有
機溶媒中での酵素反応に本手法を応用することにより水
相系では実現できなっかった酵素反応や、疎水性基質の
酵素反応の連続化が有望になる。
なった酵素を有機溶媒中で固定化でき、有機溶媒中で酵
素本来の活性を発現させることができた。今後色々な有
機溶媒中での酵素反応に本手法を応用することにより水
相系では実現できなっかった酵素反応や、疎水性基質の
酵素反応の連続化が有望になる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) C12N 11/06 C12N 11/08
Claims (3)
- 【請求項１】L-グルタミン酸ジアルキルエステルリビト
ール（２ＣｎＧＥ；ｎ=8〜18）を酵素に作用させてなる
有機溶媒に可溶な修飾酵素を用い、光架橋性樹脂に固定
化してなる疎水性固定化修飾酵素。 - 【請求項２】L-グルタミン酸ジアルキルエステルリビト
ールがL-グルタミン酸ジオレイルエステルリビトールで
ある請求項１記載の疎水性固定化修飾酵素。 - 【請求項３】酵素を用いたエステル合成反応において、
請求項１又は請求項２記載の疎水性固定化修飾酵素を用
いることを特徴とするエステル合成方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24557292A JP3344738B2 (ja) | 1992-08-20 | 1992-08-20 | 固定化修飾酵素、該固定化修飾酵素を用いるエステル合成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP24557292A JP3344738B2 (ja) | 1992-08-20 | 1992-08-20 | 固定化修飾酵素、該固定化修飾酵素を用いるエステル合成方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0662859A JPH0662859A (ja) | 1994-03-08 |
| JP3344738B2 true JP3344738B2 (ja) | 2002-11-18 |
Family
ID=17135719
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP24557292A Expired - Fee Related JP3344738B2 (ja) | 1992-08-20 | 1992-08-20 | 固定化修飾酵素、該固定化修飾酵素を用いるエステル合成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3344738B2 (ja) |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
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