JP2745351B2 - ペプチド誘導体及びその用途 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、トリペプチドを必須単
位として含有するペプチド誘導体またはその薬理学的に
許容される塩およびそれらの癌転移抑制剤としての用途
に関する。

【０００２】

【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与する蛋白質であり、血小板凝集や癌転移にも
関与していると考えられている。これらの相互作用は一
連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィブロネ
クチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもかかわら
ず、これらのレセプターはその中のＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
ｓｐ配列を特異的に認識することが明らかにされ、レセ
プターとの相互作用に重要なものであることが報告され
ている（ネイチャー(Nature)、第309巻、30頁、984
年）。このArg-Gly-Asp配列はビトロネクチン等の他の
接着性蛋白質にも存しており、フィブロネクチンは上記
コア配列を介して、被接着細胞のレセプターと接合し、
その情報を接着細胞に伝達する。また、ヘパリン、コラ
ーゲン、フィブリン等の生体高分子との結合能も有し、
細胞と間質結合組織との接着、細胞の分化、増殖に関与
しているとも考えられている。

【０００３】このように、細胞接着活性蛋白質は種々の
生物活性を有するため、医薬、医用材料への応用が検討
されている。例えば、Arg-Gly-Asp配列を有する種々の
鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血小板凝集を
阻害する方法（高分子学会予稿集(Polymer Preprints,
Japan)、第38巻、3149頁、1989年、特開平2-174797
号）、Arg-Gly-Asp配列を有するペプチドを細胞移動抑
制剤として用いる方法（特開平2-4716号）、Arg-Gly-As
p配列を固定化したPMMA膜を細胞接着膜として用いる方
法(高分子学会予稿集(Polymer Preprints,Japan)、第37
巻、705頁、1988年）等が報告されている。さらに、ポ
リマーにArg-Gly-Aspを必須構成単位とするペプチドを
共有結合させ動物細胞培養基体、生体複合人工臓器用基
体として用いる方法（特開平1-309682号、特開平1-3059
60号）、Arg-Gly-Asp-Ser配列を有するポリペプチドを
体外血液用血小板保護剤として用いる方法等も開示され
ている（特開昭64-6217号）。

【０００４】更に近年、細胞接着活性蛋白質は、癌転移
に関係する物質としても注目されてきている。癌転移の
一連の段階では、癌細胞は種々の宿主細胞や生体高分子
と接触する。このとき、フィブロネクチンのような細胞
接着分子が存在すると、該細胞は多細胞塊を形成し、癌
細胞の増殖や生存をより容易にする。ところがこの際、
フィブロネクチンの接着コアであるトリペプチドArg-Gl
y-Aspが共存すると、競争的に癌細胞上のレセプターと
接合することにより逆に癌転移阻害活性を示すことが報
告されている。（サイエンス、第２３８巻、４６７ペー
ジ、１９８６年）。更に、効果の増強をはかる目的で、
この配列を有するオリゴペプチド、環状オリゴペプチ
ド、あるいはその繰り返し構造を有するポリペプチドを
用いた癌転移抑制方法も開示されている(Int.J.Biol.Ma
cromol.、第11巻、23頁、1989年、同誌、第11巻、226頁、19
89年、Jpn.J.Cancer Res.、第60巻、722頁、1989年開平2-
174797号）。

【０００５】このように、フィブロネクチン等の細胞接
着性蛋白質あるいはそのペプチド断片の有する生物活性
を医薬品や関連医用材料へ利用する研究はさかんに行わ
れており、特に接着コア配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒを癌転移抑制剤へ応用する試みは活発である。し
かし従来の研究ではこのコア配列はレセプターとリガン
ドが介在する生物活性の発現に必須なものとされてお
り、特にＧｌｙ部を他のアミノ酸に変更したアナログで
はその活性が消失することが報告されている（高分子学
会予稿集（Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，Ｊａ
ｐａｎ）第３８巻、３１４９頁、１９８９年）：Ｊ．Ｂ
ｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，第２６２巻、１７２９４ページ、
１９８７年）。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、フィブロネクチン蛋白の接着コア配列であるArg-Gl
y-Asp-Serよりも癌転移抑制能が増強された新規なペプ
チド配列を必須構成単位として含み、さらに血液中でよ
り安定な新規なペプチド誘導体またはその薬理学的に許
容される塩を含有する医薬組成物を提供することであ
る。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記目的に対し本発明者
らは接着コア部の配列の系統的な検討を行い、上記接着
コア配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒの特にＧｌｙ
部とＳｅｒ部を種々のアミノ酸に変更したアナログに着
目しその生物活性を評価することにより、癌転移抑制性
を充分に保持し、血流中で長時間安定に滞留し、重大な
副作用も示さず且つ合成も容易な新規な誘導体を見出
し、本発明を完成した。

【０００８】本発明の医薬組成物は、下記一般式（Ｉ）
で表されるペプチド配列あるいはその薬理学的に許容さ
れる塩を必須構成単位として１〜２０単位含むペプチド
誘導体を含有することを特徴とする。 一般式（Ｉ） ［Ｚ］−Ａｒｇ−Ｘ−Ａｓｐ−［Ｙ］ 式中、ＡｒｇはＬ−またはＤ−アルギニンを表し、Ａｓ
ｐはＬ−アスパラギン酸を表す。ＸはＬ−もしくはＤ−
ロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｌ−もしくはＤ−ノルロ
イシン、Ｌ−もしくはＤ−フェニルアラニン、Ｄ−フェ
ニルグリシンまたはＤ−アラニンを表す。［ ］は、
［ ］内の残基が存在してもしなくてもよいことを表
し、存在する場合Ｚ及びＹはそれぞれグリシン、Ｌ−セ
リン、Ｌ−スレオニン、Ｄ−及びＬ−アスパラギン酸、
Ｌ−アラニン、Ｄ−及びＬ−グルタミン酸及びＬ−プロ
リンから選ばれるアミノ酸またはこれらのアミノ酸を組
合せたペプチドを表す。

【０００９】本発明のペプチド誘導体は上記式（Ｉ）で
表されるペプチド配列自体であってもよいが、好ましく
は上記ペプチド配列を繰り返し単位として２単位以上有
するオリゴペプチドもしくはポリペプチド、または上記
ペプチド配列が、その生物活性を減じず水溶性を損なわ
ない、薬理学的に許容される任意の有機基に結合してな
る化合物である。本発明のペプチド誘導体がオリゴペプ
チド、ポリペプチドの場合はそのカルボキシル末端が任
意にアミド化されていてもよい。

【００１０】一般に薬物が生体に投与された後、有効な
治療濃度を保持するには、生物活性の強さのみならずそ
の薬物の生体中での安定性（例えば血流中での滞留時間
や排泄される時間など）が薬効に大きな影響を与えるこ
とが知られている。本発明の一般式（Ｉ）のペプチド配
列も例外ではなくそれ単独ではペプチド特有の速い分解
や排泄が起こり、所望の効果が期待できない場合も生じ
る。従ってペプチド基の薬効を維持するために、上記ペ
プチド配列を繰返しオリゴマーにしたり、他の有機基に
連結した化合物、さらにはそのアミノ酸をＤ系列に変更
した化合物を種々評価することにより本発明を完成した
ものである。

【００１１】上記の通り、本発明の一般式（Ｉ）で表さ
れるペプチド配列に有機基を連結するのは、有効なペプ
チドの周辺を修飾することにより、体液中の酵素による
分解から保護したり、酸性基や糖を連結することにより
特定の臓器に集積することを避けたり、あるいは場合に
よっては特定の臓器に集積させたり、高分子量にして徐
放の効果を付与したりするためである。従って有機基と
しては、薬理学的に許容されるものであり、生物活性を
減ずることなくかつ分子全体の水溶性を妨げないもので
あれば目的に応じて使い分けることができる。

【００１２】有機基は、置換または非置換の、アシル
基、アルキル基、アルキルアミノ基（これらは炭素数１
〜１５のものが好ましく、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、
エステル結合、アミド結合、ウレタン結合、尿素結合を
含んでいてもよい）、並びに、単糖、オリゴ糖（好まし
くは構成糖数２〜７個のもの）、多糖誘導体、多価カル
ボン酸（特に好ましくはカルボン酸数２〜１２のも
の）、多価アミン（特に好ましくアミン数２〜１２のも
の）、エチレン性不飽和結合を有するモノマーから形成
されるポリマー（特に好ましくはアクリル酸、メタクリ
ル酸、エタクリル酸、アリルアミン由来のポリマー）、
ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド誘導体
カルボン酸（ＰＥＯ酸）に由来する基から選択されるこ
とが好ましい。

【００１３】ポリエチレングリコールは、平均分子量が
２０００〜１００００のものが好ましい。上記一般式
（Ｉ）のペプチド配列は、本発明のペプチド誘導体中、
有機基が糖類に由来するものである場合は１〜１０単
位、有機基が多価カルボン酸または多価アミンに由来す
るものである場合には１〜５単位含まれることが好まし
い。単糖、オリゴ糖、多糖誘導体の構成糖としてはグル
コース、ガラクトース、Ｎ−アセチルグルコサミン、グ
ルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、ガラクトサ
ミン、ウロン酸、シアル酸等が好ましく、適当にこれら
を組み合わせて用いてもよい。

【００１４】多糖類としては、キチン、キトサン、カル
ボキシメチル化キチン、硫酸化カルボキシメチル化キチ
ン、コンドロイチン硫酸、カードラン硫酸、ヘパラン硫
酸、ケラタン硫酸、ヒアルロン酸等が好ましい。これ等
の多糖類は分子量が１万〜３０万のものが好ましい。ま
たこれらの有機基は−SO₃(X)、−OSO₃(X)、−OPO₃(X)
、-CO₂(X) オン性基が置換していてもよい。Ｘは水素原子または薬
理学的に許容される対アニオンであり、アルカリ金属イ
オンが好ましい。

【００１５】上記ペプチド配列と有機基とは、エステル
結合、アミド結合、ウレタン結合、尿素結合等により連
結する。また特に、有機基が糖、オリゴ糖、多糖、ポリ
マー等の場合は、本発明の一般式（Ｉ）で表されるペプ
チド配列と有機基の連結は適当なアルキレン、アリーレ
ン基を介して行われてもよい。その場合のアルキレン、
アリーレン基は、炭素数１〜１５の直鎖または置換基を
有するものが好ましくは、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、
エステル結合、アミド結合、ウレタン結合または尿素結
合を含んでいてもよい。

【００１６】有機基は、式（Ｉ）で表されるペプチド配
列のカルボキシ末端かアミノ末端で連結するのが好まし
い。アミノ末端側から連結する場合、カルボキシ末端
は、−ＯＲ_aまたは−ＮＲ_bＲ_cであることが好ましい。
Ｒ_a、Ｒ_b及びＲ_cはそれぞれ水素原子または鎖状もしく
は環状のアルキル基を表し、Ｒ_b及びＲ_cは互いに連結し
ていてもよい。またＲ_a、Ｒ_b及びＲ_cは−Ｏ−、−ＮＨ
−、−Ｓ−、エステル結合、アミド結合、ウレタン結合
または尿素結合を含んでいてもよい。Ｒ _a、Ｒ_b及びＲ_c
は、好ましくはメチル基（Ｍｅ）、エチル基（Ｅｔ）、
イソプロピル基（ｉＰｒ）、シクロヘキシル基である。

【００１７】カルボキシ末端側から有機基が連結する場
合、アミノ末端は水素原子、置換または無置換のアシル
基であることが好ましい。アシル基の場合、炭素数はカ
ルボニル炭素を除いて１５以下が好ましい。またアシル
基の好ましい置換基としては、前記のカルボキシル基、
スルホ基等のアニオン性基が挙げられる。またアシル基
は−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、エステル結合、アミド結
合、ウレタン結合、尿素結合を含んでいてもよい。

【００１８】本発明のペプチド誘導体の分子量は、その
生物活性を維持し、かつ分子全体が水溶性である限り特
に制限されないが、平均分子量が１０００〜１０万であ
ることが好ましい。本発明のペプチド誘導体の塩として
は、例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホウ
酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸
塩等の有機酸との塩が挙げられ、そのような塩への変換
は慣用手段で行うことができる。

【００１９】以下に実施例（合成例、生物試験例）に記
載した本発明の代表的な化合物を包含する本発明のペプ
チド誘導体の具体例を列挙するが、本発明はこれらに限
定されるものではない。尚、該ペプチドのアミノ末端が
水素原子の場合、およびカルボキシ末端が−ＯＨの場合
は、該分野の表記法の慣例によりそれぞれの記載を省略
する。またアミノ酸がＤ体の場合はD-と表記するが、Ｌ
体の場合は特に表記していない。

【００２０】 化合物１ Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物２ Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物３ Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物４ Ａｒｇ−D-Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物５ Ａｒｇ−D-Ｐｈｇ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物６ Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物７ Ａｒｇ−D-Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物８ D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物９ Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ
₂ 化合物１０ Ａｒｇ−D-Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｔｈｒ−Ｎ
Ｈ₂ 化合物１１ Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｎ
ＨＣＨ₃ 化合物１２ Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｎ
Ｈ−ｉｓｏＣ₃Ｈ₇ 化合物１３ Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＮＨ
−ｃｙｃｌｏＣ₆Ｈ₁₁ 化合物１４ D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｐ
ｒｏ−ＮＨＣＨ₃ 化合物１５ Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ 化合物１６ Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ 化合物１７ Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−ＯＣ
Ｈ₃ 化合物１８ Ｇｌu−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ 化合物１９ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ−ＮＨ₂ 化合物２０ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ 化合物２１ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−D-Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｓ
ｅｒ 化合物２２ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−D-Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓ
ｅｒ 化合物２３ Ａｃ−D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ 化合物２４ Ｓｕｃ−Ａｒｇ−Ｎｌｅ−Ａｓｐ−Ｓｅ
ｒ

【００２１】化合物２５ Ｓｕｃ−D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物２６ Ｃ₄Ｈ₉ＣＯ−D-Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ 化合物２７ Ａｃ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ
−Ｓｅｒ 化合物２８ Ａｃ−D-Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ 化合物２９ Ａｃ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ 化合物３０ Ａｃ−Ａｓｐ−Ａｒｇ−D-Ｐｈｅ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ 化合物３１ Ａｃ−Ｇｌｕ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ
−Ｓｅｒ−ＮＨＣ₃Ｈ₇ 化合物３２ Ａｃ−Ａｓｐ−D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ 化合物３３ Ａｃ−D-Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ−ＮＨＣＨ₃ 化合物３４ Ｃ₄Ｈ₉ＣＯ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒ 化合物３５ Ａｃ−D-Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓ
ｐ−Ｓｅｒ 化合物３６ （Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ）₄ 化合物３７ （Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ）₄ 化合物３８ （Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ）₃
−ＮＨ−isoC₃H₇ 化合物３９ Ｓｕｃ−（Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒ）₂−ＮＨＣＨ₃ 化合物４０ Ｓｕｃ−（D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−
Ｓｅｒ）₄ 化合物４１ （Ｇｌｙ−Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓ
ｅｒ）₁₀ 化合物４２ Ａｃ−(Ａｓｐ−Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ)₆ 化合物４３ Ａｃ−(Ａｓｐ−D-Ａｒｇ−Ｌｅｕ−Ａ
ｓｐ−Ｓｅｒ)₁₀ 化合物４４ (Ａｒｇ−D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ）₂₀ 化合物４５ （D-Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ）₂₀ 化合物４６ （Arg-D-Phe-Asp-Ser)₃-NH-cycloC₆H₁₁ 化合物４７ NaO₃S-CH₂-CH(CH₃)-CO-NHCH₂CH₂CO-Arg-
Leu-Asp-Ser 化合物４８ NaO₃S-CH₂-CH₂-CO-NHCH₂CH₂CH₂CO-Gly-Arg
-D-Ile-Asp-Ser 化合物４９ NaO₃SCH₂CH(CH₃)CONHCH₂CH₂CO-Gly-Arg-L-Leu-Asp-Ser-
NH-isoC

【００２２】化合物５０ NaO₃SO(CH₂)₃-CO-Arg-L-Le
u-Asp-Ser 化合物５１ NaO₃SO(CH₂)₁₁-CO-Gly-D-Arg-L-Phe-Asp
-Ser-NH-CH₃ 化合物５２ H₃CCH(OSO₃Na)CH₂CH₂CO-Asp-Arg-D-Leu-
Asp-Ser-NH₂ 化合物５３ NaO₃SO-CH₂CH(OSO₃Na)-CO-Arg-Phe-Asp-
Ser 化合物５４ H₃CCH(OPO₃H₂)CH₂CH₂-CO-Gly-Arg-L-Nle
-Asp-Ser 化合物５５ NaO₃SOCH₂CHCONHCH₂CH₂CO-(Arg-D-Leu-A
sp-Ser)₂ 化合物５６から化合物６3は以下に示すモノマー（以
下、各化合物の出発化合物となるモノマーを（Ｍ）で表
す）の重合物を表わす。 化合物５６（Ｍ） CH₂=CCH₃-CONHCH₂CH₂-CO-Arg-Leu-A
sp-Ser 化合物５７（Ｍ） CH₂=CCH₃-CO-Gly-Gly-Arg-Leu-Asp-
Ser-NH-CH₃ 化合物５８（Ｍ） CH₂=CCH₃-CONHCH₂CH₂-CO-Arg-Nle-A
sp-Ser 化合物５９（Ｍ） CH₂=CH-CONHCH₂CH₂-CO-Asp-Arg-D-L
eu-Asp-Ser 化合物６０（Ｍ） CH₂=CCH₃-CONHCH₂CH₂-CO-Gly-Arg-P
he-Asp-Ser-NH-iso 化合物６１（Ｍ） CH₂=CCH₃-CONHCH₂CH₂CH₂CH₂-CO-Gly
-D-Arg-Leu-Asp- 化合物６２（Ｍ） CH₂=CCH₃-CO-NHCH₂CH₂CH₂-CO-Arg-D
-Phg-Asp-Ser 化合物６３（Ｍ） CH₂=CCH₃-CO-NHCH₂CH₂-CO-(Asp-Arg
-D-Leu-Ser)₂ 化合物６４ HOOC-C(CH₂-O-COCH₂CH₂-CO-Gly-Arg-Phe
-Asp-Ser)₃ 化合物６５ HO₃SO-(CH₂)₃-CO-Arg-Leu-Asp-Ser 化合物６６ NaO₃SO-(CH₂)₁₁-CO-Gly-Arg-Phe-Asp-Se
r-NHCH₃ 化合物６７ H₃C-CH(OSO₃Na)-CH₂CH₂-CO-Asp-Arg-D-L
eu-Asp-Ser-NH₂ 化合物６８ NaO₃SO-CH₂CH(OSO₃Na)-CO-Arg-D-Phe-As
p-Ser 化合物６９ H₃C-CH(OPO₃H₂)-CH₂CH₂-CO-Gly-Arg-Nle
-Asp-Ser 化合物７０ NaO₃S-CH₂CH(CH₃)-CONH-CH₂CH₂-CO-Arg-
Leu-Asp-Ser 化合物７１ NaO₃S-CH₂CH₂-CONH-CH₂CH₂CH₂-CO-Gly-Ar
g-D-Ile-Asp-Ser- 化合物７２ NaO₃S-CH₂CH(CH₃)-CONH-CH₂CH₂-CO-Gly-Arg-Leu-Asp-Se
r-NHCH(CH

【００２３】

【化１】

【００２４】

【化２】

【００２５】

【化３】

【００２６】

【化４】

【００２７】

【化５】

【００２８】

【化６】

【００２９】

【化７】

【００３０】

【化８】

【００３１】

【化９】

【００３２】

【化１０】

【００３３】

【化１１】

【００３４】

【化１２】

【００３５】

【化１３】

【００３６】化合物１０２ スクシニル化ポリアリルア
ミン−Arg-D-Leu-Asp-Ser 化合物１０３ スクシニル化ポリアリルアミン−(Asp-D
-Arg-Phe-Asp-Ser)₂ 化合物１０４ Arg-D-Leu-Asp-Ser-Gly-ポリアリルアミ
ン 化合物１０５ ＣＭキチン−Arg-Leu-Asp-Ser 化合物１０６ スクシニル化ＣＭキチン−Gly-Arg-D-Le
u-Asp-Ser 化合物１０７ マレイル化ＣＭキチン−Asp-Arg-D-Ile-
Asp-Ser-NHCH₃ 化合物１０８ フタロイル化ＣＭキチン−Asp-D-Arg-Nl
e-Asp-Ser 化合物１０９ イタコニル化ＣＭキチン−Arg-Leu-Asp-
Ser 化合物１１０ ＣＭキチン−Gly-Arg-D-Phe-Asp-Ser-Pr
o 化合物１１１ ＣＭキチン−Gly-Asp-D-Phg-Asp-Thr-NH
₂ 化合物１１２ スクシニル化ＣＭキチン−(Arg-D-Leu-A
sp-Ser)₂ 化合物１１３ 硫酸化ＣＭキチン−Gly-Arg-Nle-Asp-Se
r-NH-CH₃ 化合物１１４ 硫酸化ＣＭキチン−Gly-D-Arg-Leu-Asp-
Ser 化合物１１５ 硫酸化スクシニル化ＣＭキチン−Arg-Ph
e-Asp-Ser-NH-iso-C₃H

【００３７】化合物１１６ 硫酸化スクシニル化ＣＭキチン−Arg-D-Leu-Asp-Ser-Pr
o-NHC₂H₅ 化合物１１７ コンドロイチン硫酸−Gly-D-Arg-Leu-As
p-Ser-NH-isoC₃H₇ 化合物１１８ スクシニル化コンドロイチン硫酸-D-Arg
-Phe-Asp-Ser 化合物１１９ マレイル化コンドロイチン硫酸-Arg-D-L
eu-Asp-Ser 化合物１２０ トリメリチル化コンドロイチン硫酸-Glu
-Arg-Phg-Asp-Ser 化合物１２１ スクシニル化コンドロイチン硫酸-(Arg-
D-Leu-Asp-Ser)₂ 化合物１２２ スクシニル化コンドロイチン硫酸-(Arg-
D-Leu-Asp-Ser)₅ 化合物１２３ シアヌル-PEG₁(Arg-Leu-Asp-Ser)₂ 化合物１２４ シアヌル-PEG₂-Arg-D-Leu-Asp-Ser 化合物１２５ R⁸0CCH₂(OCH₂CH₂)_nOCH₂COR⁸ R⁸ : -Gly-Arg-Leu-Asp-Ser Mn : 4,900 化合物１２６ R⁹0CCH₂(OCH₂CH₂)_nOCH₂COR⁹ R⁹ : -Gly-Arg-Leu-Asp-Ser-Pro-NH₂ Mn : 5,200

【００３８】

【化１４】

【００３９】ペプチド合成方法は特に限定されないが、
連結する有機基の構造に応じて、液相法、固相法及び自
動合成装置による合成方法を使い分けるとよい。固相法
ではアミノ酸の保護には、Ｂｏｃ基を用いオリゴペプチ
ドを合成し、トリフルオロメタンスルホン酸を用いて樹
脂からの切断及び側鎖保護基の除去を行ない、分取用Ｈ
ＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）で精製し、単一
ピークを示すペプチドまたはその誘導体を得ることがで
きる。例えば本化合物３６、３７及び４０〜４６のオリ
ゴペプチドはYMC-Pack ODS 長さ５００mm、内径２０mm
のカラムを用いて、０．０１N HCl/アセトニトリル、
0.1%TFA/アセトニトリル、あるいは0.1%FA/水の溶離液
を用いて分取することができる。また適当なグラジエン
トをかけるのも好ましい。これを陰イオン交換樹脂カラ
ム（アンバーライト ＩＲＡ−４００；Ｃｌ型あるいは
ＩＲＡ−９３ＺＵ；酢酸塩型等）を通し塩酸塩、酢酸塩
として用いる。このようにして得られたペプチドを直接
有機基と反応させることも可能であるが、樹脂からの切
断の前に適当な修飾を行うこともできる。本合成例にお
いて液相法によって合成したペプチドはまず適当な保護
基を有する状態で合成を進め、必要に応じて修飾部位の
保護を解き修飾を施し、その後に全保護基を除去すると
いう手順が一般的である。

【００４０】本合成例では化合物例の中の代表的な保護
ペプチドの合成方法についてのみ述べるが保護ペプチド
類の合成方法の詳細については、生化学実験講座”タン
パク質の化学IV” ｐ２０７−４９５（日本生化学会
編、東京化学同人）、”続生化学実験講座タンパク質の
化学（下）”（日本生化学会編、東京化学同人）、泉屋
ら編”ペプチド合成の基礎と実験”（丸善）に記載され
ている。また、市販されている合成ペプチドを中間体と
して利用することも可能である。繰返しポリペプチドの
合成法としてジフェニルフォスフォリルアジド（ＤＰＰ
Ａ）による連続的重合法（Ｎ．Ｎｉｓｈｉ， ｅｔ ａ
ｌ：Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ ＰｒｏｔｅｉｎＲｅ
ｓ．，３０，２７５ （１９８７）を利用することによ
って容易に合成できる。また遺伝子工学的手法で製造す
ることも可能である。

【００４１】糖部分の合成は、グリコシル化反応を鍵段
階として行うことができる。グリコシル化反応には種々
の方法が知られているが、糖の種類や入手の容易さ、脱
保護条件等を考慮して適宜反応条件を設定することがで
きる。反応は基本的に糖供与体および糖受容体となるア
ルコールを、プロモーターの存在下に縮合することによ
り行われる。例えば糖供与体として塩化糖、臭化糖を用
いる場合には、プロモーターとして酸化銀、炭酸銀、過
塩素酸銀、トリフルオロメタンスルホン酸銀、シアン化
第二水銀、臭化水銀等が用いられる。フッ化糖を糖供与
体として用いる場合には、プロモーターとして塩化第一
スズ／過塩素酸銀、二塩化ジルコノセン／過塩素酸銀等
を用いることができる。糖供与体としてアルキルチオ体
を用いる場合には、プロモーターとしてジメチル（メチ
ルチオ）スルホニウムトリフレート、トリフルオロメタ
ンスルホン酸メチルエステル、フェニルセレニルトリフ
レートなどが用いられる。糖供与体としてイミデートを
用いる場合には、反応はルイス酸（例えば三フッ化ホウ
素ジエチルエーテル錯体等）を用いて行う。以上のグリ
コシル化反応を行うにあたっては、モレキュラーシーブ
やドライライトといった脱水乾燥剤を用いることもでき
る。また糖残基の還元末端がＮ-アセチルグルコサミン
のような２-アセトアミド-２-デオキシ糖である場合
は、オキサゾリン法によるグリコシル化が有効である。

【００４２】糖残基がアリールグリコシドである場合に
は、ポリアセチル化糖とフェノールを無極性溶媒（ベン
ゼン、トルエンなど）中で加熱する反応を鍵段階として
合成することができる。特にp-ニトロフェニルグリコシ
ド体は市販品を購入することも可能である。またＳ-グ
リコシドは糖供与体として塩化糖、臭化糖を用いてチオ
ールと反応させるKoenig-Knorr法により合成することが
できる。チオールはアルコールより求核反応性が強いた
め反応は容易に進行する。

【００４３】該ペプチド配列と薬理学的に許容される有
機基との結合がアミド、エステル結合の場合には、活性
エステル法、混合酸無水物法、アジド法、酸塩化物法、
対称酸無水物法、ＤＣＣ法、ＤＣＣ−添加物法、カルボ
ニルジイミダゾール法等を利用した合成方法が利用でき
る。プロペンアミド誘導体で例示されるような重合物は
一般のラジカル重合法、イオン重合法により得られる。
重合物はゲルろ過法、透析法、その他既知の方法により
特定の分子量分画を行なうことができる。

【００４４】本明細書の記載において使用する略号は以
下の通りである。尚、以下の合成例の記載においても、
アミノ酸でD-と表記したものはＤ体を表し、表記のない
ものはＬ体を表す。

【００４５】 Ｂｏｃ ：t-ブトキシカルボニル Ｂｎ ：ベンジル Ｚ ：ベンジルオキシカルボニル Ａｃ ：アセチル Ｓｕ ：スクシニル Ｍｅ ：メチル Ｅｔ ：エチル ｉＰｒ ：イソプロピル ＯＳｕ ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド ＯＮｂ ：ニトロベンジルエステル Ｍｔｓ ：メシチレンスルホニル ＨＯＢｔ ：１−ヒドロキシベンゾトリアゾール ＤＣＣ ：ジシクロヘキシルカルボジイミド ｉＲｒ₂ ＮＥｔ：ジイソプロピルエチルアミン ＡｃＯＨ ：酢酸 ＡｃＯＥｔ ：酢酸エチル ＤＭＦ ：ジメチルホルムアミド ＣＤＩ ：カルボニルジイミダゾール ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸 ＤＣウレア ：ジシクロヘキシルウレア Ｔｈｒ ：スレオニン Ａｒｇ ：アルギニン Ｇｌｙ ：グリシン Ａｓｐ ：アスパラギン酸 Ｓｅｒ ：セリン Ｐｒｏ ：プロリン Ｖａｌ ：バリン Ｌｅｕ ：ロイシン Ｐｈｅ ：フェニルアラニン Ｐｈｇ ：フェニルグリシン Ｉｌｅ ：イソロイシン Ｎｌｅ ：ノルロイシン Ｇｌｕ ：グルタミン酸 Ａｌａ ：アラニン 以下に本発明の化合物の合成法を記す。 合成例１ 化合物１の合成 化合物１は下記式１に示す経路に従って合成した。

【００４６】

【化１５】

【００４７】(1a)の合成 t-Boc-Ser(Bn)１４.８ｇ（５０ｍｍｏｌ）、NaHCO₃８.
４ｇ（０.１ｍｏ）、を含むＤＭＦ溶液（１５０ｍｌ）
に室温で臭化ベンジル８.５５ｇ（５０ｍｍｏｌ）を滴
下し、２４時間室温で撹拌した。反応溶液に４％NaHCO₃
水溶液と酸エチルを加え抽出、分液した。酢酸エチル層
を水で、次いで食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウム上
で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去することにより油状
の(1a)１７.０ｇ（４.４ｍｍｏｌ）を得た。収率８８
％。

【００４８】(1b)の合成 (1a)１７.０ｇ（４４ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３０ｍ
ｌに溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）３０ｍｌを
加えて室温で３時間乾燥した。塩化メチレン及びＴＦＡ
をロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢
酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液
した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した
後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧
留去した後、残留物を塩化メチレン（６０ｍｌ）とＤＭ
Ｆ（４０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Asp(OBn)１
５ｇ（４６ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾール
・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ₂Ｏ）６.７ｇ（４４ｍｍｏ
ｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤＣＣ１
０.３ｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌した。
析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残
留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて
抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で
洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減
圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフ
ィー（n-ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）で精製するこ
とにより、白色固体の(1b)１５.８ｇ（２６.７ｍｍｏ
ｌ）を得た。収率６１％。 (1c)の合成 (1b)１５.５ｇ（２６.２ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３０
ｍｌに溶解し、ＴＦＡ３０ｍｌを加えて室温で３０分撹
拌した。塩化メチレン及びＴＦＡをロータリーエバポレ
ーターで留去し、残留物にn-ヘキサンとエーテルの混合
溶媒（５：１）を加えて析出した白色固体の(1c)を濾取
した。１５.０ｇ（２４.８ｍｍｏｌ）。収率９５％。

【００４９】(1d)の合成 (1c)１.５ｇ（２.４８ｍｍｏｌ）、t-Boc-Leu・H₂O６９
０ｍｇ（２.９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ₂Ｏ３８０ｍｇ
（２.５ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルエーテル４
７０μｌ（２.７ｍｍｏｌ）を含む塩化メチレン（１５
ｍｌ）とＤＭＦ（７ｍｌ）の反応溶液を氷冷撹拌した。

【００５０】この反応液にＤＣＣ５７０ｍｇを加え、氷
冷で２時間、室温で終夜撹拌した。析出した尿素誘導体
を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物に酢酸エチルを
加え、１０％クエン酸水溶液、４％炭酸ナトリウム水溶
液、水、食塩水の順序で洗浄した。新たに析出した尿素
誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮した。残留物とシリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／酢酸エ
チル＝１０／１）で精製することにより白色固体の(1d)
１.３９ｇ（２ｍｍｏｌ）を得た。収率８０％。

【００５１】(1e)の合成 (1d)１.１５ｇ（１.６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン６ｍｌ
に溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）６ｍｌを加え
て室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡを
ロータリーエバポレーターで留去した後、残留物に酢酸
エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液し
た。酢酸エチル層を水で、次いで食塩水で洗浄した後、
硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチルを減圧留去
した後、残留物を塩化メチレン（１５ｍｌ）とＤＭＦ
（８ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Arg(Z)₂９７０
ｍｇ（１.８ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾー
ル・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ₂Ｏ）２２０ｍｇ（１.４ｍ
ｍｏｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤＣＣ
４２０ｍｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌し
た。析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮し
た。残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を
加えて抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食
塩水で洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別し、濾
液を減圧濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（クロロホルム／酢酸エチル＝１０／１）で
精製し、さらにn-ヘキサンと酢酸エチルの混合溶媒（２
／１）より再結晶することにより、白色固体の(1e)６９
０ｍｇ（０.６１ｍｍｏｌ）を得た。収率３８％。融点
１００〜１０４℃。

【００５２】化合物１の合成 (1e)５９０ｍｇ（０.５３ｍｍｏｌ）を塩化メチレン６
ｍｌに溶解し、ＴＦＡ６ｍｌを加えて室温で３０分撹拌
した。塩化メチレンとＴＦＡをロータリーエバポレータ
ーで留去した後、残留物に酢酸１０ｍｌと１０％パラジ
ウム炭素６０ｍｇを加え、室温で加水素分解を終夜行っ
た。触媒を濾別し酢酸を減圧留去した後、残留物にエー
テルを加え析出物を濾取した。

【００５３】この粗ペプチドを少量の水に溶解（ｐＨ１
〜２）し、Amberlite IRA93ZU（酢酸型）のカラムに純
水で展開した。ニンヒドリン発色法で陽性のフラクショ
ン（ｐＨ４〜５）を集めて減圧濃縮し、最後に凍結乾燥
を行って、２４０ｍｇの化合物１を白色無定形物として
得た。プロトンＮＭＲにおいて２.０２ppmに酢酸のメチ
ル基のピークが認められ、その積分強度より、化合物１
は１酢酸塩の形であることがわかった。収率８２％。

【００５４】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ４９０ （Ｍ＋Ｈ）⁺

【００５５】合成例２ 化合物８の合成 合成例１の(1e)の合成において、t-Boc-Arg(Z₂)の代わ
りにt-Boc-D-Arg(Z₂)を用いて同様に縮合反応を行い、
化合物８の全保護体を得た（収率４０％）。融点１３６
〜１３９℃。この全保護体６２０ｍｇ（０.５５ｍｍｏ
ｌ）を用いて、化合物１の合成と同様の加水素分解及び
精製を行って化合物８の１酢酸塩２８０ｍｇを得た。収
率８４％。

【００５６】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ４９０ （Ｍ＋Ｈ）⁺

【００５７】合成例３ 化合物23の合成 合成例２における化合物８の全保護体４.０２ｇ（３.５
６ｍｍｏｌ）を塩化メチレン３０ｍｌに溶解して、トリ
フルオロ酢酸（ＴＦＡ）３０ｍｌを加えて室温で１時間
撹拌した。塩化メチレン及びＴＦＡをロータリーエバポ
レーターで留去した後、残留物にクロロホルムと４％炭
酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分液した。クロロホル
ム層を水で、次いで食塩水で洗浄した後、硫酸マグネシ
ウム上で乾燥した。クロロホルムを減圧留去して、化合
物８の全保護体の脱t-Boc体３.５６ｇ（３.４６ｍｍｏ
ｌ）を得た。収率９７％。

【００５８】この脱t-Boc体１.３６ｇ（１.３２ｍｍｏ
ｌ）を塩化メチレン（１５ｍｌ）に溶解し、無水酢酸
０.１５ｍｌを加えて、室温で２時間撹拌した。生成し
た沈澱物を濾取し、アセトニトリルで再結晶して、化合
物２３全保護体９３０ｍｇ（０.８７ｍｍｏｌ）を得た
（収率６６％）。融点１６３〜１６６℃。この全保護体
９３０ｍｇを酢酸１５ｍｌに溶解し、１０％パラジウム
炭素を９０ｍｇ加えて、加水素分解を４０℃で１時間、
次いで室温で終夜行った。触媒を濾別し酢酸を減圧留去
した後、残留物にエーテルを加え析出物を濾取した。

【００５９】この粗ペプチドを純水に溶解し、活性炭を
加え室温で１５分撹拌した。活性炭を濾別し、水を減圧
留去した後に凍結乾燥して、２９０ｍｇの化合物２３を
得た。収率６１％。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５３２ （Ｍ＋Ｈ）⁺、 ５５
４（Ｍ＋Ｎａ）⁺

【００６０】合成例４ 化合物２０の合成 合成例３と同様に合成した化合物(1e)の脱t-Boc体１.１
ｇ（１.０７ｍｍｏｌ）を塩化エチレン１５ｍｌに溶解
し、無水コハク酸１３０ｍｇを加えて室温で２時間撹拌
した。溶媒を減圧留去し、残留物をアセトニトリルで再
結晶して、化合物２０の全保護体１.１８ｇ（１.０５ｍ
ｍｏｌ）を得た（収率９８％）。融点１６７〜１６９
℃。

【００６１】この全保護体１.０ｇ（０.８８６ｍｍｏ
ｌ）を酢酸１５ｍｌに溶解し、１０％パラジウム炭素を
９０ｍｇ加えて、加水素分解を４０℃で１時間、次いで
室温で終夜行った。触媒を濾別し酢酸を減圧留去した
後、残留物にエーテルを加え析出物を濾取した。この粗
ペプチドを純水に溶解し、活性炭を加え室温で１５分撹
拌した。活性炭を濾別し、水を減圧留去した後に凍結乾
燥して、４８０ｍｇの化合物２０を得た。収率９２％。

【００６２】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ５９０ （Ｍ＋Ｈ）⁺

【００６３】合成例５ 化合物１７の合成 t-Boc-Ser(Bn) ８.８６ｇ（３０ｍｍｏｌ）、N,N-ジメ
チルアミノピリジン３６０ｍｇ、メタノール１.４ｍｌ
を含む塩化メチレン溶液（６０ｍｌ）を氷冷撹拌し、Ｄ
ＣＣ６.２ｇを加えた。室温で終夜撹拌した後、塩化メ
チレンを減圧留去し、残留物に酢酸エチル（４０ｍｌ）
を加えた。尿素誘導体を濾別し、酢酸エチル濾液を、ク
エン酸水溶液、炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水の順
序で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。酢酸エチ
ルを減圧留去し、無色油状のt-Boc-Ser(Bn)-OCH₃の粗製
物９.３ｇを得た。

【００６４】これを(1a)の代わりに用いて式１と同様の
ルートに従い(1b)〜(1e) のセリン残基のベンジルエス
テルがメチルエステルに変更された(17b)〜(17e) を合
成した。各ステップの収率は以下の通りである。 (１７b) ７９％ (１７c) ８６％ (１７d) ７５％ (１７e) ６２％ 融点１３０〜１３２℃ 合成例４において(1e)の代わりに(17e) を用いて同様の
操作を行い、化合物１７を１酢酸塩の形で得た。

【００６５】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ６０４ （Ｍ＋Ｈ）⁺

【００６６】合成例６ カルボキシ末端のアミド
化法 本発明のペプチドのカルボキシ末端のアミド化は、活性
エステル化法、ＤＣＣ法いずれの方法でも可能である。
代表的なアミドへの変換の具体例を次に示す。Boc-Ser
(Bn)-NHMeの合成Boc-Ser(Bn)-OH (29.5 g, 0.1 mol)お
よびp-ニトロフェノール(13.9 g, 0.1 mol)を塩化メチ
レン (20 ml) およびDMF (20 ml) からなる混合溶媒に
溶解し、氷冷しながらDCC (20.6 g, 0.1 mol) を加え
た。反応混合物を氷冷下１時間、さらに室温まで昇温し
ながら終夜撹拌した。セライト濾過して沈殿を除き、セ
ライト層を酢酸エチルで洗浄した。濾液及び洗液を減圧
濃縮し、粗p-ニトロフェニルエステル体を得た。これを
THF (150 ml) に溶解し、40 % メチルアミン溶液を加え
た。反応混合物を室温で20時間撹拌した後、減圧濃縮し
た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製
（溶出液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）し、目的と
するメチルアミド体を無色粉末として29.6 g (収率96
%)得た。

【００６７】その他のアミド体も同様の手法で得られ
る。

【００６８】合成例７ 化合物１６の合成 (1e)４.２ｇ（３.７ｍｍｏｌ）を塩化メチレン２０ｍｌ
に溶解して、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）２０ｍｌを加
えて室温で１時間撹拌した。塩化メチレンおよびＴＦＡ
をロータリーエバポレーターで留去した後、残留物にク
ロロホルムと４％炭酸ナトリウム水溶液を加えて抽出分
液した。クロロホルム層を水で、次いで食塩水で洗浄し
た後、硫酸マグネシウム上で乾燥した。クロロホルムを
減圧留去した後、残留物を塩化メチレン（３０ｍｌ）と
ＤＭＦ（３０ｍｌ）の混合溶媒に溶解し、t-Boc-Asp(OB
n)１.３ｇ（４ｍｍｏｌ）とヒドロキシベンゾトリアゾ
ール・１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ₂Ｏ）６１０ｍｇ（４.０
ｍｍｏｌ）を加えて氷冷撹拌した。この反応溶液にＤＣ
Ｃ８５０ｍｇを加え、氷冷で２時間、室温で終夜撹拌し
た。析出した尿素誘導体を濾別し、濾液を減圧濃縮し
た。残留物に酢酸エチルと４％炭酸ナトリウム水溶液を
加えて抽出、分液した。酢酸エチル層を水で、次いで食
塩水で洗浄し、新たに析出した尿素誘導体を濾別し、濾
液を減圧濃縮した後、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢
酸エチルを減圧留去し、残留物を酢酸エチルとn-ヘキサ
ンの混合溶媒（３：１）で、次いでアセトニトリルで再
結晶して、t-Boc-Asp(OBn)-Arg(Z₂)-Leu-Asp(OBn)-Ser
(Bn)-OBnの無色固体３.２（２.４ｍｍｏｌ）を得た。収
率６５％。

【００６９】この全保護体を(1e)の代わりに用いて、化
合物４の合成と同様の脱t-Boc反応、アセチル化反応、
加水素分解、精製を行い、化合物１６を得た。 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ６４７（Ｍ＋Ｈ）⁺、 ６６９
（Ｍ＋Ｎａ）⁺ 合成例８ 化合物18の合成 化合物１６の合成において、t-Boc-Asp(OBn)の代わりに
t-Boc-Glu(OBn)を用いて同様の操作を行い、化合物18を
得た。

【００７０】 ＦＡＢ Ｍａｓｓ ６６１（Ｍ＋Ｈ）⁺

【００７１】合成例９ 化合物２、３、４、５、
６、７の合成 化合物１の中間体である(1d)の合成において、t-Boc-Le
uの代わりに、それぞれt-Boc-D-Leu、t-Boc-Nle、t-Boc
-D-Nle、t-Boc-D-Phg、t-Boc-Phe、t-BoD-Pheを反応さ
せて(2d),(3d),(4d),(5d),(6d),(7d)を合成した。次い
で(1e)の合成において、(1d)の代わりにそれぞれの中間
体を用いて反応し、(2e),(3e),(4e),(5e),(6e),(7e)を
合成した。さらにこれらを化合物１と同様の方法で脱保
護と精製を行って、化合物２、３、４、５、６、７をそ
れぞれ１酢酸塩の形で得た。各ステップの収率、融点及
び質量スペクトルのデータを表１、２及び３に記す。

【００７２】 表１ 各ステップの収率 ─────────────────────────────────── 収率（％） 収率（％） 収率（％） ─────────────────────────────────── (2d) ８７ (2e) ７６ 化合物２ ８８ (3d) ８６ (3e) ８４ 化合物３ ８７ (4d) ６９ (4e) ６９ 化合物４ ８６ (5d) ８６ (5e) ８１ 化合物５ ９２ (6d) ９１ (6e) ６５ 化合物６ ８２ (7d) ６６ (7e) ７８ 化合物７ ８０ ───────────────────────────────────

【００７３】 表２ 全保護体の融点 ───────────────────── 融点（℃） ───────────────────── (2e) １２６〜１２７ (3e) １３９〜１４１ (4e) １３１〜１３４ (5e) １４７〜１５１ (6e) １２４〜１２７ (7e) １４１〜１４１ ─────────────────────

【００７４】 表３ 化合物２〜７の ＦＡＢ Ｍａｓｓ データ ─────────────────────────────── ＦＡＢ Ｍａｓｓ ─────────────────────────────── 化合物２ ４９０（Ｍ＋Ｈ）⁺ 、 ５１２（Ｍ＋Ｎａ）⁺ 化合物３ ４９０（Ｍ＋Ｈ）⁺ 化合物４ ４９０（Ｍ＋Ｈ）⁺ 化合物５ ５１０（Ｍ＋Ｈ）⁺ 化合物６ ５２４（Ｍ＋Ｈ）⁺ 、 ５４６（Ｍ＋Ｎａ）⁺ 化合物７ ５２４（Ｍ＋Ｈ）⁺ 、 ５４６（Ｍ＋Ｎａ）⁺ ───────────────────────────────

【００７５】合成例１０ 化合物５６の合成 （a) β−アラニン１７．８ｇ（０．２ｍｏｌ）の水酸
化ナトリウム水溶液にメタクリル酸クロリド２０．９ｇ
（０．２ｍｏｌ）を氷冷下滴下し、４時間撹拌後塩酸に
より中和した。減圧濃縮により濃縮し沈殿した塩化ナト
リウムを濾別した。濃縮液をクロロホルムで抽出し、乾
燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去した。濃縮物をエ
ーテルで洗浄しカルボキシメチルメタクリルアミドを白
色固体として１７．６ｇ得た。（収率５６％） ＣＨ₂＝ＣＣＨ₃−ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂−ＣＯＯＨ 上記と同様の方法でメタクリル酸クロリドと４−アミノ
酪酸、エタクリル酸クロリドと５−アミノ吉草酸、メタ
クリル酸と６−アミノカプロン酸、アクリル酸と１２−
アミノラウリン酸、アクリル酸とロイシン、メタクリル
酸とグルタミン、アクリル酸と２（２−アミノエトキ
シ）プロピオン酸、メタクリル酸と２（２−アミノエト
キシ）酢酸、メタクリル酸とグリシルグリシンとの反応
により対応する種々のプロペン酸誘導体を製造すること
ができる。 (b)ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅ
ｒ（Ｂn）ＯＢnの合成 Ｂｏｃ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＯＢn
２8ｇ（３９ｍｍｏｌ）((1d)に相当する。合成法は上
述した。）にＴＦＡ：ＣＨ₂Ｃｌ₂＝１：１の２００ｍｌ
を加えて室温で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ₂Ｃｌ₂
を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ
₃水溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ₂
ＳＯ₄で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。

【００７６】この化合物とＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）１
７．８ｇ（３９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４００ｍｌに溶解
し、ＤＣＣ８．０ｇ（３９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ６．８
ｇ（４５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹拌してから、
さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣウレアを濾別してから
減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ₃水溶
液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄
し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥してから減圧乾固して白色粉末を
１９．５ｇ（収率48％）得た。 （c）化合物５６のモノマーの合成 ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ
（Ｂn）ＯＢn １５.6ｇ（１５ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：Ｃ
Ｈ₂Ｃｌ₂＝１：１ １００ｍｌ加えて室温で１時間撹拌
した後、ＴＦＡとＣＨ₂Ｃｌ₂ を減圧濃縮した。これを
酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ₃水溶液で中和した後Ｎ
ａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥してから酢
酸エチルを減圧留去した。

【００７７】この化合物とカルボキシエチルメタクリル
アミド２．４ｇ（１５ｍｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂ ２００
ｍｌに溶解しＤＣＣ３．１ｇ（１５ｍｍｏｌ）を氷冷下
加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。
減圧濃縮してからアセトンを加え生じたＤＣウレアを濾
別した。減圧濃縮後、酢酸エチルに続いてエーテルで洗
浄し、減圧乾燥して白色粉末を１０．０ｇ（収率６2
％）得た。

【００７８】この化合物１０ｇ（９．3ｍｍｏｌ）のＴ
ＦＡ溶液に、１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加
えて１時間反応させ、ペプチド側鎖及び末端の保護基の
脱保護を行った。反応液をエーテル中に投入しオイル状
の沈殿物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後、陰
イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４０
０；Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白色固
体のモノマー４．4ｇ（収率76％）が得られた。

【００７９】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg： 0.9877 Leu： 0.9916 Asp： 0.9899 Ser： 0.8891 β−Ala ： 1.0115 マススペクトル Ｍ⁺： ５７３

【００８０】(d)化合物５６の合成（重合） モノマー（化合物５６Ｍ）５００ｍｇを水５ｍｌに溶解
し１Ｎ ＮａＯＨでｐＨ７．４に調整した後開始剤とし
て、過硫酸カリウム２．５ｍｇと亜硫酸水素ナトリウム
１．０ｍｇを加え窒素気流下２０℃で２０時間重合し
た。スペクトラポア７分子分画量３０００を用いて純水
に対して透析し低分子量分を除いた後凍結乾燥させた。
収量２４０ｍｇ（目的物5６）。

【００８１】目的物５６をゲルクロマトグラフィーによ
り分子量分画を行った。分子量は東ソー（株）製ＴＳＫ
ｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷカラムを用い、移動相は０．２
Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）とし、流速１．０ｍｌ／
ｍｉｎで測定した。ＰＥＧ換算分子量は以下の通りであ
る。 画分１ 分子量約 ４８０００ （化合物５６−１） 画分２ 分子量約 ２１０００ （化合物５６−２） 画分３ 分子量約 １２０００ （化合物５６−３） 合成例１１ 化合物５６−４の合成（開始剤量の変
更による低分子量重合物合成） 下記の開始剤を使用して、合成例１０と同様に反応を行
い、化合物５６−４を得た。 開始剤 過硫酸カリウム１０ｍｇ 亜硫酸水素ナトリウム４ｍｇ 収量 １８０ｍｇ（化合物５６−４） 分子量約 ５０００

【００８２】合成例１２ 参照用重合物Ａの合成 合成例１０(a) で合成したカルボキシエチルメタクリル
アミドをラジカル重合により重合した。カルボキシエチ
ルメタクリルアミド２ｇを２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、
和光純薬製のラジカル開始剤Ｖ65（２，２−アゾビス
（２，４−ジメチルバレロニトリル））１０ｍｇを加え
窒素気流下６５℃で４時間重合した。重合物は酢酸エチ
ルで沈殿させた後、スペクトラポア７（分子分画量 ３
０００）を用い純水に対して透析し低分子量画分を除い
た後凍結乾燥した。収量１．２４ｇ 参照用重合物Ａ Ｈ−（ＣＨ₂−ＣＨＣＨ₃（ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯＯ
Ｈ））_n ＰＥＧ換算分子量は約３００００であった。

【００８３】合成例１３ 化合物５７(Ｍ)の合成 以下の試薬ならびに条件を使用して合成例１０と同様に
ペプチドの連結を行い、化合物５７(Ｍ)合成した。 （a) BocAsp(OBn)Ser(Bn)NHCH₃の合成 BocAsp(OBn) : 32.3 g (0.1 mol) Ser(Bn)NHCH₃ HCl : 24.4 g (0.1 mol) N-メチルモルフォリン : 10.1 g (0.1 mol) CH₂Cl₂ : 500 ml DCC : 20.6 g (0.1 mol) (a)の収量 44.2 g (Mw 513.6) (b) BocLeuAsp(OBn)Ser(Bn)NHCH₃ の合成 (a) の生成物 : 25.6 g (0.05 mol) TFA/CH₂Cl₂ : 150 ml/150 ml BocLeu : 11.5 g (0.05 mol) CH₂Cl₂ : 300 ml DCC : 10.3 g (0.05 mol) (b)の収量 20.1 g (Mw 614.7)

【００８４】 (c) BocArg(Mts)LeuAsp(OBn)Ser(Bn)NHCH₃の合成 （b)の生成物 : 20.7 g (0.03 mol) TFA/CH₂Cl₂ : 100 ml/100ml BocArg(Mts) : 13.7 g (0.03 mol) DMF : 250 ml DCC : 6.18 g (0.03 mol) HOBt : 4.0 g (0.03 mol) (c)の収量 17.5 g (Mw 953.1) (d) BocGlyArg(Mts)LeuAsp(OBn)Ser(Bn)NHCH₃ の合成 (c) の生成物 : 9.53 g (0.01 mol) TFA/CH₂Cl₂ : 100 ml/100ml BocGly : 1.75 g (0.01 mol) DMF : 80 ml DCC : 2.06 g (0.01 mol) HOBt : 1.36 g (0.01 mol) (d)の収量 6.53 g (Mw 1009.9) (e) BocGlyGlyArg(Mts)LeuAsp(OBn)Ser(Bn)NHCH₃の合成 (d) の生成物 : 5.04 g (0.005 mol) TFA/CH₂Cl₂ : 50 ml/50 ml BocGly : 0.88 g (0.005 mol) DMF : 200 ml DCC : 1.03 g (0.005 mol) HOBt : 0.68 g (0.005 mol) (e)の収量 3.84 g (Mw 1066.7)

【００８５】(f) 化合物５７(Ｍ)の合成 (e) の生成物 : 3.20 g (0.003 mol) TFA/CH₂Cl₂ : 40 ml/40 ml メタクリル酸 : 0.22 g (0.003 mol) DMF : 60 ml DCC : 0.62 g (0.003 mol) HOBt : 0.41 g (0.003 mol) 1M-トリフルオロメタンスルホン酸／チオアニソール／m
-クレゾールのTFA溶液 : 25 ml (アンバーライトIRA-400;Cl型処理) アミノ酸分析（nmol/50μl) Arg: 0.9845 Gly: 2.1361 Asp: 0.9554 Ser: 0.8879 Leu: 0.9472 マススペクトルM⁺ : 656

【００８６】合成例１４ 化合物５９(Ｍ)の合成 合成例１０と同様にして、化合物５９(Ｍ)を合成した。 ＣＨ₂＝ＣＨＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯ−Asp-Arg-D-Leu-A
sp-Ser 収率３５％ アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 0.9982 Ser : 1.0319 Asp : 1.9971 D-Leu : 1.0063 β−Ala : 1.024 マススペクトル Ｍ⁺： ７２９ （７２９．７５）

【００８７】合成例１５ 化合物６２(Ｍ)の合成 合成例１０と同様にして、化合物６２(Ｍ)を合成した。 ＣＨ₂＝ＣＣＨ₃ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＨ₂ ＣＯ−Arg-D-
Phg-Asp-Ser 収率２４％ アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 1.0028 D-Phg : 1.0014 Asp : 1.0043 Ser : 0.9963 ４−アミノ酪酸 : 1.0257 マススペクトル Ｍ⁺： ６６２ （６６２．６７）

【００８８】合成例１６ 化合物６１(Ｍ)の合成 合成例１０と同様にして、化合物６１(Ｍ)を合成した。 CH₂=CCH₃CONHCH₂CH₂CH₂CH₂CO-Gly-D-Arg-Leu-Asp-Ser 収率１７％ アミノ酸分析(nmol/50μl) D-Arg : 1.0056 Gly : 1.0012 Asp : 0.9645 Leu : 1.0177 Ser : 1.0090 マススペクトル Ｍ⁺： ７１３、 ７１３．８

【００８９】合成例１７ 化合物６３(Ｍ)の合成 合成例１０と同様にして、化合物６３(Ｍ)を合成した。 ＣＨ₂＝ＣＣＨ₃ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂ＣＯ−(Asp-Arg-D-L
eu-Ser)₂ 収率１０％ アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 2.0484 D-Leu : 2.0965 Asp : 2.0333 Ser : 2.1032 β-Ala : 1.0449 マススペクトル Ｍ+： １１００ (１１００．２
１）

【００９０】合成例１８ 重合物５７〜６３の合成 合成例１０(d) と同じ方法で化合物５７(Ｍ)〜６３(Ｍ)
の重合を行った。 ──────────────────────────────── 目的化合物． モノマー ポリマー収量 分子量 Ｎｏ． （ｍｇ） ──────────────────────────────── ５７ ５７(Ｍ) ２３０ ９５００ ５８ ５８(Ｍ) １８０ １３０００ ５９ ５９(Ｍ) １９０ ９０００ ６０ ６０(Ｍ) １５０ １１０００ ６１ ６１(Ｍ) ２４０ １６０００ ６２ ６２(Ｍ) １２０ ８０００ ６３ ６３(Ｍ) １７０ １００００ ────────────────────────────────

【００９１】合成例１９ スクシニル化ポリアリル
アミンの合成 ポリアリルアミン（日東紡績製）５．２ｇとトリエチル
アミン１５．２ｇを１００ｍｌの水に溶解し、これに４
−ジメチルアミノピリジン１．７ｇと無水コハク酸１
５．０ｇを加え、室温で一晩撹拌した。アセトンで再沈
後エーテルで洗浄、乾燥してスクシニル化ポリアリルア
ミンを得た。収量 １．２６ｇ、分子量１１０００。

【００９２】合成例２０ スクシニル化ポリアリル
アミン−Arg-D-Leu-Asp-Ser （化合物１０２）の合成 合成例１９のスクシニル化ポリアリルアミン ０.３９
ｇをｐＨ７．４リン酸バッファー２５ｍｌに溶解し、０
℃に保ちながら１−エチル−３−（ジメチルアミノプロ
ピル）−カルボジイミド ０．２６ｇの５．０ｍｌリン
酸バッファー溶液を加えて、１．５時間反応させた。次
いで、１０ｍｌのリン酸バッファーに溶解したArg-D-Le
u-Asp-Ser０．７１ｇを添加し４℃で一晩反応させた。
反応溶液を、エクストラポア７（分子分画量 ８００
０）に入れイオン交換水、ついで純水に対して透析し低
分子量成分を除いて精製、凍結乾燥した。収量０．７１
ｇ構造の確認は、ＩＲおよび元素分析により行なった。
元素分析の結果、ペプチドフラグメントの導入率は約１
５％であった。

【００９３】Arg-D-Leu-Asp-Serの組成 １５％ 元素分析Ｎ値 １9．80％ ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
４８ｃｍ^-1

【００９４】合成例２１ スクシニル化ポリアリル
アミン-(Asp-D-Arg-Phe-Asp-Ser)₂ （化合物１０３）の合成 合成例１９のスクシニル化ポリアリルアミン０．６６
ｇ、ペプチドフラグメントとして(Asp-D-Arg-Phe-Asp-S
er)₂ ０．８５ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇをい、合成
例20と同様にしてスクシニル化ポリアリルアミン-(Asp-
D-Arg-Phe-Asp-Ser)₂ を合成した。収量０．７１ｇ構造
の確認は、ＩＲ及び元素分析により行った。元素分析の
結果（Asp-D-Arg-Phe-Asp)₂ フラグメントの導入率は約
9％であった。導入率は合成例４４と同様に計算した。

【００９５】（Asp-D-Arg-Phe-Asp)₂ の組成 ９％ 元素分析Ｎ値 １9．４4％ ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
４８ｃｍ^-1

【００９６】合成例２２ Arg-D-Leu-Asp-Ser-Gly
−ポリアリルアミン （化合物１０４）の合成 合成例３１（６）に記載の保護ペプチド体（カルボキシ
ル基遊離体）４．０４ｇ（４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４０ｍ
ｌに溶解し、ＤＣＣ０．８３ｇ（４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢ
ｔ０．５４ｇ（４ｍｍｏｌ）を氷冷下加えて１時間撹拌
した。これにＤＭＦ２０ｍｌに溶解したポリアリルアミ
ン塩酸塩０．７８ｇを加え３時間撹拌した後室温でさら
に終夜撹拌した。ＤＣウレアを濾別してから減圧濃縮し
た。以下化合物５６Ｍの合成(合成例１０(c))と同様に
して脱保護を行った。

【００９７】１Ｍトリフルオロメタンスルホン酸／チオ
アニソール／m-クレゾール のＴＦＡ溶液： １５０ｍｌ アンバーライトＩＲＡ−４００（Ｃｌ型）処理 収量 ０．８２ｇ 構造確認は、ＩＲ及び元素分析により行った。元素分析
の結果ペプチドフラグメントの導入率は約１１％であっ
た。

【００９８】Arg-D-Leu-Asp-Ser-Gly の組成 １１％ 元素分析Ｎ値 ２４．９３％ ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ-1

【００９９】合成例２３ 化合物６５の合成 下記式２に従って化合物６５を合成した。

【０１００】

【化１６】

【０１０１】(a) 中間体１の合成 4-ヒドロキシ酪酸ナトリウム (25 g, 0.2 mol) および
ベンジルブロミド (37g, 0.22 mol) をDMF (40 ml) 及
び酢酸エチル (50 ml)の混合溶媒に溶解し、反応混合物
を４時間加熱還流した。室温まで放冷した後、適当量の
酢酸エチルで希釈し、水、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸
ナトリウムで乾燥の後減圧濃縮して油状物を得た。これ
をシリカゲルカラムクロマトグフラフィーで精製（溶出
液：ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）し、4-ヒドロキシ
酪酸ベンジルを無色油状物として34.9 g（収率90 %）得
た。

【０１０２】得られた4-ヒドロキシ酪酸ベンジル (19.4
g, 0.1 mol) とイミダゾール (102g, 0.15 mol)の DMF
(100 ml) 溶液にt-ブチルジメチルシリルクロリド (16
g,0.11 mol)を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌し
た。減圧下大部分の溶媒を留去したのち残渣を酢酸エチ
ルで希釈し、水、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥ののち減圧濃縮して油状物を得た。シリカゲル
カラムクロマトグフラフィーで精製（溶出液：ヘキサン
／酢酸エチル＝１０／１）し、4-t-ブチルジメチルシリ
ルオキシ酪酸ベンジルを無色油状物として29.8 g（収率
97 %）得た。

【０１０３】得られた4-t-ブチルジメチルシリルオキシ
酪酸ベンジル (29 g, 94 mmol) の酢酸エチル(400 ml)
溶液に10 % Pd-C (1.5 g) を加え、反応混合物を水素雰
囲気下室温で18時間撹拌した。触媒をセライト濾過して
除き、セライト層を酢酸エチルで洗浄した。濾液及び洗
液を合わせて減圧濃縮し、目的とする中間体１を無色油
状物として20 g (収率98 %)得た。

【０１０４】(b) 中間体２の合成 中間体１ (440 g, 2 mmol) を乾燥DMF (10 ml) に溶解
し、これに氷冷しながらCDI（330 mg, 2 mmol) の乾燥D
MF (10 ml) 溶液を加えた。反応混合物を氷冷しながら
１時間撹拌した後、中間体５ (2.06 g, 2 mmol) のDMF
(25 ml) 溶液を加えた。反応混合物を氷冷下４時間、更
に室温まで昇温しながら終夜撹拌した後、減圧下溶媒を
留去した。残渣をクロロホルムで希釈し、水、飽和食塩
水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥した後減圧濃縮し
た。残渣にエーテルを加えて結晶化させ、目的とする中
間体２を無色粉末として 2.13 g（収率87 %）得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 1228.

【０１０５】(c) 中間体３の合成 中間体２ (2.1 g, 1.7 mmol) のアセトニトリル (30 m
l) 溶液に、46 % フッ化水素酸５滴を加え、反応混合物
を室温で２時間撹拌した。ＴＬＣで反応の完結を確認し
たのち反応混合物を飽和重曹水にあけ、クロロホルムで
抽出した。クロロホルム層を合わせて水、飽和食塩水で
洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥の後減圧濃縮した。残
渣にエーテルを加えて結晶化させ、目的とする中間体３
を無色粉末として 1.8 g（収率95 %）得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 1114.

【０１０６】(d) 化合物６５の合成 中間体３ (1.8 g, 1.6 mmol) の乾燥DMF (15 ml) 溶液
に三酸化硫黄トリメチルアミン錯体 (500 mg, 3.6 mmo
l) を加え、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。Ｔ
ＬＣで原料の消失を確認したのち適当量の飽和重曹水を
加えて反応を停止し、減圧下大部分の溶媒を留去した。
残渣にエーテルを加えて結晶化させ、得られた結晶を水
洗、乾燥して硫酸エステル体を得た。これを酢酸 (20 m
l) に溶解し、10 % Pd-C (100 mg) を加えたのち反応混
合物を水素雰囲気下室温で４０時間撹拌した。触媒をセ
ライト濾過して除き、セライト層を水洗ののち濾液及び
洗液を合わせて減圧濃縮した。残渣を少量の水に溶解
し、セファデクッスＧ-10を用いたゲル濾過クロマトグ
ラフィーにかけて精製、凍結乾燥して目的とする化合物
６５を無色粉末として610 mg (収率59 %)得た。 FAB-MS: (M-H)^- 654.

【０１０７】合成例２４ 化合物４７の合成 メタクリルアミド体５６(Ｍ)(620 mg, 1 mmol) の水溶
液 (20 ml) に亜硫酸水素ナトリウム (300 mg, 3 mmol)
を加え、反応混合物を７０℃で23時間加熱撹拌した。
反応混合物を室温まで放冷したのち、減圧濃縮して大部
分の水を留去した。残渣を少量の水に溶解し、セファデ
クッスＧ-10を用いたゲル濾過クロマトグラフィーにか
けて精製、凍結乾燥して目的とする例示化合物４７を無
色粉末として580 mg (収率80 %)得た。 FAB-MS: (M-H)^- 709.

【０１０８】合成例２５ テトラヒドロフラン−
２，３，４，５−テトラカルボン酸− （ＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ)₄ (化合物７３）の合成 テトラヒドロフランテトラカルボン酸０．１３ｇ（０．
５ｍｍｏｌ）をＤＭＦ１０ｍｌに溶解し、０℃に冷却し
ながらＣＤＩ０．３５ｇ（２．２ｍｍｏｌ）を加え２時
間反応させた。これに、ＤＭＦ２０ｍｌに溶解したＡｒ
ｇ（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＯＢｎ
トリフルオロ酢酸塩２．４０ｇ（２．１ｍｍｏｌ）及び
ジイソプロピルエチルアミン０．２８ｇ（２．２ｍｍｏ
ｌ）を加え、０℃で２時間反応させた後室温で２４時間
反応させた。ＤＭＦを留去した後酢酸エチルから再結晶
し、目的物の保護体０．６０ｇ（０．１４ｍｍｏｌ）を
得た。保護体０．６０ｇを酢酸１０ｍｌに溶解し、常法
に従いＰｄ−Ｃを触媒として加水素分解を行ない、目的
のテトラヒドロフラン−２，３，４，５−テトラカルボ
ン酸−（ＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ)₄０．２８ｇ（０．
１３ｍｍｏｌを得た。

【０１０９】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 3.7352 Leu : 3.6256 Asp : 3.7157 Ser : 3.2917 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） ２１３３

【０１１０】合成例２６ クエン酸−（ＡｒｇＬｅ
ｕＡｓｐＳｅｒＮＨ-ＣＨ₃）₃ （化合物７４）の合成 クエン酸０．１９ｇ（１．０ｍｍｏｌ）とＡｒｇ
（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢ）Ｓｅｒ（Ｂn）ＮＨＣＨ₃
トリフルオロ酢酸塩３．１９ｇ（３．０ｍｍｏｌ）をＤ
ＭＦ４０ｍｌに溶解し、０℃に冷却しながらＨＯＢｔ
０．４０ｇ、ＤＣＣ０．６２ｇ（３．０ｍｍｏｌ）及び
ジイソプロピルエチルアミン０．３９ｇ（３．０ｍｍｏ
ｌ）を加えた。２時間後室温に戻し一晩反応させた。反
応終了後尿素を除き、ＤＭＦを留去した後酢酸エチルか
ら再結晶し目的物の保護体０．７９ｇ（０．２６ｍｍｏ
ｌ）を得た。これを、合成例７３と同様に加水素分解し
目的のクエン酸−（ＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒＮＨＣＨ
₃)₃０．３９ｇ（０．２４ｍｍｏｌ）を得た。

【０１１１】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 3.4512 Leu : 3.3499 Asp : 3.4332 Ser : 3.0414 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） １６４５

【０１１２】合成例２７ アコニット酸− (β-Ala
-Arg-Leu-Asp-Ser-NH-iPr)₃ （化合物７５）の合成 トランスアコニット酸０．１７ｇ（１．０ｍｍｏｌ）と
β-ＡｌａＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅ
ｒ（Ｂn）ＮＨ-iＰｒトリフルオロ酢酸塩３．２３ｇ
（３．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中でＣＤＩにより縮合させ
た。合成例７３と同様に処理をして、目的物の保護体
０．６７ｇ（０．２２ｍｍｏｌ））を得た。この保護体
を１０ｍｌのトリフルオロ酢酸に溶解し、０℃で１Ｍト
リフルオロメタンスルホン酸／チオアニソール／m-クレ
ゾールのトリフルオロ酢酸溶液を氷冷下加えて１時間反
応させ、ペプチド側鎖及び末端の保護基の脱保護を行っ
た。反応液をエーテル中に投入しオイル状の沈殿物を蒸
留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後、陰イオン交換樹
脂カラム（アンバーライトＩＡｒｇＡ−４００；Ｃｌ
型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。目的のアコニッ
ト酸−(β-ＡｌａＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒＮＨ-iＰ
ｒ）₃０．２９ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を得た。

【０１１３】アミノ酸分析(nmol/50μl) β−Ala : 3.1009 Arg : 3.0881 Leu : 2.9975 Asp : 3.0720 Ser : 2.7214 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） １９２４

【０１１４】合成例２８ イミノジ酢酸テトラカル
ボン酸誘導体−（β-ＡｌａＡｒｇ-ＬｅｕＡｓｐＳｅ
ｒ)₄（化合物７６）の合成 ジエチルイミノジ酢酸１．８９ｇ（０．０１０ｍｏｌ）
をＤＭＦ３０ｍｌに溶解し、氷冷下撹拌しながらＮＥｔ
₃１．５ｇ（０．０１５ｍｏｌ）と（Ｂｏｃ)₂Ｏ ２．４
０ｇ（０．０１１ｍｏｌ）とを加えた。室温で３０分撹
拌した後減圧濃縮し、酢酸エチルに溶解して水洗した後
乾燥した。これを濃縮して結晶化させ、Ｂｏｃジエチル
イミノジ酢酸２．６０ｇ（９０％）を得た。

【０１１５】Ｂｏｃジエチルイミノジ酢酸２．６０ｇ１
００ｍｌのメタノールに溶解し、１．１当量の１Ｍ Ｎ
ａＯＨ溶液を加え、１時間撹拌した。反応終了後メタノ
ールを留去し、１０％クエン酸を加えて酢酸エチルで抽
出し、水洗、乾燥した後濃縮し結晶化させＢｏｃイミノ
ジ酢酸１．８６ｇ（８９％）を得た。Ｂｏｃイミノジ酢
酸１．８９ｇ（０．００８ｍｏｌ）とジエチルイミノジ
酢酸３．０ｇ（０．０１６ｍｏｌ）をＤＭＦ中ＣＤＩ
２．６０ｇ（０．０１６ｍｏｌ）を用いて縮合させた。
ＤＭＦを留去し酢酸エチルに溶解して、ＮａＨＣＯ₃水
溶液及び水で洗い、乾燥、濃縮し、酢酸エチル−ヘキサ
ンで再結晶した。これを、再びけん化して目的のテトラ
カルボン酸２．８５ｇ（７７％）を得た。

【０１１６】テトラカルボン酸０．２３ｇ（０．５ｍｍ
ｏｌ）とβ-ＡｌａＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＬｅｕＡｓｐ（Ｏ
Ｂn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＯＢｎトリフルオロ酢酸塩２．２５
ｇ（２．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中ＣＤＩ０．３２ｇ
（２．０ｍｍｏｌ）を用いて縮合させた。ＤＭＦを留去
した後酢酸エチルから結晶化させ、保護体０．６７ｇ
（０．１５ｍｍｏｌ）を得た。

【０１１７】この保護体０．６７ｇをＴＦＡで処理しＢ
ｏｃ基を除いた後、２０ｍｌのＤＭＡｃに溶解しこれに
トリエチルアミン４０ｍｇを加えた。０℃でメタクリル
酸クロリド２１ｍｇの２ｍｌＤＭＡｃ溶液を添加し１時
間反応させた。反応液を水中に投入して生じた沈殿を集
め、水洗、エーテル洗浄の後酢酸エチルから再結晶し
て、０．５３ｇ（０．１２ｍｍｏｌ）の保護体を得た。
このメタクリルアミド誘導体０．５３ｇを合成例７５と
同様にして脱保護し、イミノジ酢酸テトラカルボン酸誘
導体−（β-ＡｌａＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ)₄ のメタ
クリルアミド０．２９ｇ（０．１１ｍｍｏｌ）得た。

【０１１８】このメタクリルアミド誘導体を合成例２４
と同様にして亜硫酸水素ナトリウムで処理し目的物を定
量的に得た。収量０．２９ｇ（０．１１ｍｍｏｌ）。 アミノ酸分析(nmol/50μl) β−Ala : 3.6405 Arg : 3.7707 leu : 3.7271 Asp : 3.8197 Ser : 3.3838 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） ２６８２

【０１１９】合成例２９ スクシニル化ペンタエチ
レンヘキサミン-（β-Ａｌａ-ＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅ
ｒＮＨ-iＰｒ)₆（化合物７７）の合成 ペンタエチレンヘキサミン３．５６ｇ（０．０１５ｍｏ
ｌ）を８０ｍｌのメタノールに溶解し、これに無水コハ
ク酸２０．０ｇ（０．２０ｍｏｌ）、トリエチルアミン
２０．０ｇの２０ｍｌメタノール溶液を加え一晩反応さ
せた。反応終了後メタノールとトリエチルアミンを減圧
留去し水に溶解して陽イオン交換樹脂アンバーライトＩ
ＲＡ−１２０Ｂ（Ｈ⁺）で処理した。溶離液を凍結乾燥
しスクシニル化ペンタエチレンヘキサミン１．０４ｇ
（０．００４ｍｏｌ）を得た。スクシニル化ペンタエチ
レンヘキサミン０．２３ｇ（１．０ｍｍｏｌ）とβ-Ａ
ｌａＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ
（Ｂn）ＮＨ-iＰｒトリフルオロ酢酸塩６．４５ｇ
（６．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中でＣＤＩにより縮合さ
せ、合成例７３と同様に処理して目的物の保護体１．１
７ｇ（０．１８ｍｍｏｌ）を得た。この保護体を合成例
７５と同様に脱保護し、目的のスクシニル化ペンタエチ
レンヘキサミン-（β-ＡｌａＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ
ＮＨ-iＰｒ）₆０．５４ｇ（０．１３ｍｍｏｌ）を得
た。

【０１２０】アミノ酸分析(nmol/50μl) β−Ala : 4.8209 Arg : 4.6912 Leu : 4.5448 Asp : 4.4577 Ser : 4.1263 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） ４１６３

【０１２１】合成例３０ アコニット酸トリアスパ
ルチルアミド-（ＡｒｇD-Ｌｅｕ-ＡｓｐＳｅｒＮＨ-cyc
loＣ₆Ｈ₁₁）₆（化合物７８） の合成 １．８３ｇ（０．０１０５ｍｏｌ）のトランスアコニッ
ト酸と１３．５ｇのＡｓｐ（ＯＢｎ）₂（０．０３２ｍ
ｏｌ）を４０ｍｌのＤＭＦに溶解し、０℃でＤＣＣ６．
６０ｇ（０．０３２ｍｏｌ）とＨＯＢｔ４．３２ｇ
（０．０３２ｍｏｌ）を加え２時間反応させ、室温に戻
してから一晩反応させた。尿素を除きＤＭＦを減圧留去
した後エタノール−ヘキサン系で結晶化させ、エーテル
で洗浄した後減圧乾燥しアコニット酸トリアスパルチル
アミド８．７１ｇ（８．２ｍｍｏｌ）を得た。これを４
０ｍｌの酢酸に溶解しＰｄ−Ｃを触媒として加水素分解
を行ないヘキサカルボン酸３．８９ｇ（７．５ｍｍｏ
ｌ）を得た。ヘキサカルボン酸０．５２ｇ（１．０ｍｍ
ｏｌ）とＡｒｇ（Ｍｔｓ）D-ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓ
ｅｒ（Ｂn）ＮＨ-cycloＣ₆Ｈ₁₁のトリフルオロ酢酸塩
６．２６ｇ（６．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ中でＣＤＩによ
り縮合させ、合成例７３と同様に処理して目的物の保護
体０．９１ｇ（０．１５ｍｍｏｌ）を得た。この保護体
を合成例７５と同様に脱保護し、目的のアコニット酸ト
リアスパルチルアミド-（ＡｒｇD-ＬｅｕＡｓｐＳｅｒ
ＮＨ-cycloＣ₆Ｈ₁₁）₆ ０．４６ｇ（０．１２ｍｍｏ
ｌ）を得た。

【０１２２】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 5.2567 Leu : 5.1025 Asp : 5.2293 Ser : 4.6328 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） ３８３２ 合成例３１ （ＡｒｇDＬｅｕＡｓｐＳｅｒＧｌ
ｙ）₄-トリエチレンテトミド（化合物７９）の合成 １．ペプチドフラグメントの合成 ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）DＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ
（Ｂn）Ｇｌｙ上記保護ペプチドを、逐次延長法により
液相法で合成した。以下に詳細を示す。 （１）ＢｏｃＧｌｙＯＮｂの合成 ＢｏｃＧｌｙ ３５ｇ（０．２ｍｏｌ）、トリエチルア
ミン２８ｍｌ（０．２ｍｏｌ）及び臭化ｐ-ニトロベン
ジル４３．２ｇ（０．２ｍｏｌ）を４００ｍｌの酢酸エ
チルに溶解し、５時間還流した後室温で一晩放置した。
生成した塩を濾別しＮａＨＣＯ₃水溶液及び水で洗浄し
た後、Ｎａ₂ＳＯ₄上で乾燥、減圧濃縮し酢酸エチル−ヘ
キサンより再結晶した。５２．７ｇ（０．１７ｍｏ
ｌ）。 （２）ＢｏｃＳｅｒ（Ｂn）ＧｌｙＯＮｂの合成 Ｂｏｃ ＧｌｙＯＮｂ ４６．５ｇ（０．１５ｍｏｌ）
にＴＦＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂＝１／１ ４００ｍｌを加え室温
で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ₂Ｃｌ₂を減圧濃縮し
た。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ₃水溶液で中
和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥
してから酢酸エチルを減圧留去した。

【０１２３】この化合物と、ＢｏｃＳｅｒ（Ｂn）４
１．７ｇ（０．１５ｍｏｌ）をＣＨ₂Ｃｌ₂ ７５０ｍｌ
に溶解し、ＤＣＣ ３０．９ｇ（０．１５ｍｏｌ）を氷
冷下加え３時間撹拌してから、さらに室温で撹拌した。
減圧下ＣＨ₂Ｃｌ₂を留去してから酢酸エチルに溶解し
た。これをＮａＨＣＯ₃水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、
ＮａＣｌ水溶液で順に洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥してか
ら減圧乾固して白色粉末５８．４ｇ（０．１２ｍｏｌ）
を得た。

【０１２４】以下（２）と同様な方法でペプチド鎖を延
長した。以下に、試薬、その量等を示す。 （３）ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＧｌｙＯＮｂの合成 （２）の生成物 ：５８．４ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｎ） ：３６．７ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＣＨ₂Ｃｌ₂ ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：２４．７ｇ（０．１２ｍｏｌ） （３）の収量 ６７．２ ｇ（収率 ０．１０ｍｏｌ）

【０１２５】 （４）ＢｏｃDＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＧｌｙＯＮｂの合成 （３）の生成物 ：６７．２ｇ（０．１０ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃDＬｅｕ ：２１．４ｇ（０．１０ｍｏｌ） ＣＨ₂Ｃｌ₂ ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：２０．６ｇ（０．１０ｍｏｌ） （４）の収量 ６３．６ｇ（７９ｍｍｏｌ） （５）ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）DＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）Ｇｌｙ ＯＮｂの合成 （４）の生成物 ：６３．６ｇ（７９ｍｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ₂Ｃｌ₂ ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ） ：３６．０ｇ（７９ｍｍｏｌ） ＤＭＦ ：８００ｍｌ ＤＣＣ ：１６．３ｇ（７９ｍｍｏｌ） ＨＯＢｔ ：１０．８ｇ（８０ｍｏｌ） （５）の収量 ４９．７ｇ（４３ｍｍｏｌ）

【０１２６】（６）ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）D-ＬｅｕＡ
ｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）Ｇｌｙの合成 （５）の生成物１１．４４ｇ（１０ｍｍｏｌ）を９０％
酢酸３００ｍｌに溶解し、Ｚｎ末３２．７ｇ（０．５ｍ
ｏｌ）を加え、０℃で３時間撹拌した。Ｚｎ末を濾別
し、濾液を減圧濃縮、これにクエン酸を加えて酸性にし
酢酸エチルで抽出した。Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥し減圧濃縮し
てからエーテルを加えて白色粉末６．８６ｇ（６．８ｍ
ｍｏｌ）を得た。

【０１２７】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 2.3055 D-Leu : 2.2380 Asp : 2.1065 Ser : 2.0314 Gly : 2.4707 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） １０１０ ２．トリエチレンテトラミンとペプチドフラグメントの
縮合 ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）DＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ
（Ｂn）Ｇｌｙ４．０４ｇ（４．０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ
４０ｍｌに溶解し、ＤＣＣ０．８３ｇ（４．０ｍｍｏ
ｌ）、ＨＯＢｔ０．５４ｇ（４．０ｍｍｏｌ）を氷冷下
加えて１時間撹拌した。これにＤＭＦ２０ｍｌに溶解し
たトリエチレンテトラミン０．１４（０．９６ｍｍｏ
ｌ）ｇを加え３時間撹拌した後室温でさらに終夜撹拌し
た。尿素を濾別してから減圧濃縮した。酢酸エチルより
再結晶し、目的物の保護体１．１３ｇを得た。以下合成
例７４と同様にして脱保護を行ない、（ＡｒｇDＬｅｕ
ＡｓｐＳｅｒＧｌｙ)₄ -トリエチレンテトラミド０．４
７ｇ（０．２１ｍｍｏｌ）を得た。

【０１２８】アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 4.1419 D-Leu : 4.0203 Asp : 4.1202 Ser : 3.6501 Gly : 4.2725 ＭＳ（Ｍ＋Ｈ⁺） ２２５９

【０１２９】合成例３２ 化合物８０の合成 下記式３に従い化合物８０を合成した。

【０１３０】

【化１７】

【０１３１】(a) 合成例１の中間体(１e) (7.0 g, 6.2
mmol) の塩化メチレン (30 ml) 溶液にトリフルオロ酢
酸 (30 ml) を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌し
た。反応終了後溶媒を留去し、残渣をクロロホルムに溶
解した。クロロホルム層を飽和重曹水、飽和食塩水でこ
の順に洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥の後減圧濃縮し
た。残渣をエーテルから再結晶して脱Boc体を6.3 g (定
量的)得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 1028. (b) 中間体２の合成 2-（2-N-ベンジルオキシカルボニルアミノエトキシ）エ
タノール (7.2 g, 30mmol)、炭酸銀 (12 g)、ドライラ
イト (40 g)、乾燥したアルコールを含まないクロロホ
ルム (100 ml) からなる混合物を、遮光条件下１時間撹
拌して系内の水分を除去した。ヨウ素 (4 g) を加えた
後、（2,3,4-トリ-O-アセチル-α-D-グルコピラノシル
ブロミド）-ウロネートメチルエステル［8 g, 20 mmol,
文献（Y.A. Hassan, J. Carbohydrates. Nucreosides.
Nucreotides, 4巻, 77頁(1977) 記載の方法により調
製］のクロロホルム (50 ml) 溶液を３０分以上かけて
加え、反応混合物を室温で３０時間撹拌した。セライト
濾過して不溶性成分を除き、セライト層をクロロホルム
で洗浄した。濾液及び洗液を合わせて水、飽和食塩水で
洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥の後減圧濃縮して油状
物を得た。シリカゲルカラムクロマトグフラフィーで精
製（溶出液：クロロホルム）し、目的とする中間体２を
無色油状物として8.9 g（収率80 %）得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 556, (M+Na)⁺ 578.

【０１３２】(c) 中間体３の合成 中間体２ (5.4 g, 9.7 mmol) のメタノール (100 ml)
溶液に、10 % Pd-C(300 mg)を加え、反応混合物を水素
雰囲気下室温で１３時間撹拌した。反応終了後触媒をセ
ライト濾過して除き、セライト層をメタノールで洗浄し
た。濾液及び洗液を合わせて減圧濃縮し、アミン体 4.1
g を無色油状物として得た。

【０１３３】得られたアミン体を塩化メチレン (50 ml)
に溶解し、トリエチルアミン(1.02 g, 10 mmol) を加
えた後、氷冷しながらコハク酸無水物 (980 mg, 9.8 mm
ol) を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌した後、
適当量の水を加えて反応を停止した。有機層を分取した
後水層をクロロホルムで抽出した。クロロホルム層を合
わせて水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで
乾燥した後減圧濃縮し、目的とする中間体３を油状物と
して5.0 g（定量的）得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 552.

【０１３４】(d) 中間体４の合成 中間体３ (1.04 g, 2 mmol) を乾燥DMF (1 ml) に溶解
し、これに氷冷しながらCDI（330 mg, 2 mmol) の乾燥D
MF (10 ml) 溶液を加えた。反応混合物を氷冷しながら
１時間撹拌した後、中間体５ (2.06 g, 2 mmol) のDMF
(25 ml) 溶液を加えた。反応混合物を氷冷下２時間、更
に室温まで昇温しながら２０時間撹拌した後、減圧下溶
媒を留去した。残渣をエーテルから再結晶し、目的とす
る中間体４を無色粉末として 2.3 g（収率75 %）得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 1531. (e) 中間体５の合成 中間体４ (1.1 g, 0.7 mmol) の 酢酸(30 ml) 溶液に10
% Pd-C (100 mg)を加え、反応混合物を水素雰囲気下室
温で18時間撹拌した。触媒をセライト濾過して除き、セ
ライト層を酢酸で洗浄した。濾液及び洗液を合わせて減
圧濃縮した。残渣を少量の水に溶解して凍結乾燥し、中
間体５を無色粉末として 690 mg (収率96.7 %)得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 993. (f) 化合物８０の合成 中間体５ (650 mg, 0.65 mmol) の水溶液 (20 ml) に粉
末ナトリウムメトキシド(180 mg, 3.3 mmol)を加え、反
応混合物を室温で４時間撹拌した。反応終了後希酢酸を
加えて反応液を中和し、減圧濃縮した。残渣を少量の水
に溶解し、セファデクッスＧ-10を用いたゲル濾過クロ
マトグラフィーにかけて精製、凍結乾燥して目的とする
例示化合物８０を無色無定形固体として 440 mg (収率8
0 %)得た。 FAB-MS: (M+H)⁺ 854.

【０１３５】合成例３３ ６−Ｏ−カルボキシメチル
−Ｎ−アセチルキトオリゴ糖の合成 ６−Ｏ−カルボキシメチルキチン（ＣＭキチン、カルボ
キシメチル化度０．８、脱アセチル化度０）６ｇを純水
６００ｍｌに１日間撹拌して溶解した後、卵白リゾチー
ム（ＥＣ−３．２．１．１７）１ｇを加えて３７℃にお
いて２日間振とうした。反応液を減圧下において濃縮し
た後、スペクトラポア６（ＭＷＣＯ２０００）を用いて
純水中にて透析を行った。外液を凍結乾燥して６−Ｏ−
カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトオリゴ糖３ｇを得
た。得られた混合物についてイオン交換クロマトグラフ
ィー（ＤＥＡＥ−セルロース）を行い、６−Ｏ−カルボ
キシメチル−Ｎ−アセチルキトヘキサオース０．３５
ｇ、６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトペン
タオース０．３ｇ、６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−ア
セチルキトテトラオース０．３ｇを得た。

【０１３６】合成例３４ 化合物８７〜９１の合成 化合物８７〜９１の合成は出発物質として、市販されて
いる４−ニトロフェニルN-アセチルβ-D-グルコサミニ
ド、４−ニトロフェニル−ジ−Ｎ−アセチル−β−キト
ビオース、4-ニトロフェニル−ジ−N-アセチル−β-キ
トトリオース、４−ニトロフェニル−α-D-グルコピラ
ノシド、４−ニトロフェニル−α-D-マルトトリオシ
ド、（生化学工業、ベーリンガーマンハイム山之内社）
を用いて行った。代表的な例を述べる。 (a)化合物８７の合成（式４） 下記式４に従って化合物８７を合成した。

【０１３７】

【化１８】

【０１３８】無水酢酸50 mlとピリジン１００mlの中に
４−ニトロフェニル−N-アセチルβD-グルコサミニド３
_.４g(0.01mol)を加え室温にて１６時間撹拌した。常法
にて後処理を行なうと白色粉末が得られた。これをエー
テル／ヘキサン系で再沈を繰返すことにより、目的とす
る中間体１が３_.８g得られた。中間体１３_.０g(0.0064m
ol)を酢酸エチル１００mlに溶解し１０％Pd/C 0.3gを加
えて、水素雰囲気下６時間、加水素分解を行った。触媒
を濾過後、濾液を濃縮すると目的とする中間体２が２_.
７gアモルファス状で得られた。不安定なので精製する
ことなく次の反応に使用した。

【０１３９】中間体２の２_.５g(0.0057mol)をピリジン
５０mlに溶解し無水グルタール酸(64mg,0.006mol)と触
媒量のジメチルアミノピリジンを加えて、５０℃の湯浴
で１４時間加温した。常法にて後処理を行い、得られた
残渣を分離精製（シリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー；溶離液；クロロホルム／メタノール＝３０：１）す
ることにより目的とする中間体３が２_.１g 粉末として
得られた。

【０１４０】中間体３の2.0g(0.0036mol) とカルボニル
ジイミダゾール 640mg (0.004mol)を無水テトラヒドロ
フラン４０mlに溶解し０℃に冷却した。合成例３に記し
た化合物２の脱Boc体（遊離のアミノ体）4.1g (0.004mo
l)を無水DMF 10ml に溶解して冷却下、滴下した。滴下
後１６時間室温にて撹拌し、常法にて後処理を行った。
得られた残渣を分離精製（シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー：クロロホルム／メタノール= 20:1) すること
により、目的とする中間体４が4.８g 得られた。

【０１４１】中間体４の2.0 g(0.0013mol)をエタノール
２０mlに溶解し１NのNaOH水１０ml加えて室温で８時間
撹拌した。１N塩酸水で中和後、溶媒を留去し残渣を充
分に乾燥した。残渣を乾燥DMF (15 ml) 溶液に溶かし、
三酸化硫黄トリメチルアミン錯体 (500 mg, 0.0036 mo
l) を加え、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。Ｔ
ＬＣで原料の消失を確認したのち適当量の飽和重曹水を
加えて反応を停止し溶液のpHを中性とし、減圧下大部分
の溶媒を留去した。残渣にエーテルを加えて結晶化さ
せ、得られた結晶を水洗、乾燥して硫酸エステル体を得
た。これを酢酸 (20ml) に溶解し、10 % Pd-C (100 mg)
を加えた後反応混合物を水素雰囲気下室温で４０時間
撹拌した。触媒をセライト濾過して除き、セライト層を
水洗した後濾液及び洗液を合わせて減圧濃縮した。残渣
を少量の水に溶解し、セファデクッスＧ-10を用いたゲ
ル濾過クロマトグラフィーにかけて精製、凍結乾燥して
目的とする化合物８７を無色粉末として710 mg 得た。 FAB-MS: (M-H)⁺ 998 同様の手法により化合物８８及び８９を得た。以下にそ
のFAB-MSのデータを示す。 化合物８８ （M-H)^- 1387 化合物８９ (M-H)^- 700 (b)化合物９０の合成（式５） 下記式５に従い化合物９０を合成した。

【０１４２】

【化１９】

【０１４３】市販の４−ニトロフェニル−α−Ｄ−グル
コピラノシド20g(0.066 mol)とジメトキシプロパン 24
ｍｌをＤＭＦ４００ｍｌに溶解し触媒量（０.３g)のカ
ンファースルホン酸を加えて室温にて１６時間撹拌し
た。その中に無水酢酸５０mlとピリジン１００mlを加え
てさらに２４時間撹拌を続けた。過剰の試薬及び溶媒を
減圧除去した後、残渣を飽和食塩水と酢酸エチルに分配
し、繰返し酢酸エチルで抽出した。有機層を５％塩酸
水、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去した後、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１：１）で分
離精製を行ない、目的とする中間体１を１４g 得た。

【０１４４】中間体１の１０g (0.023 mol)を酢酸エチ
ル ４００mlに溶解し１０％Pd/Cを０．３ｇ加えて加水
素分解を行なった。２４時間後、反応液を濾過し濾液を
留去すると、目的とする中間体２がアモルファス状で得
られた(9.1g)。不安定なのでＩＲスペクトル(ＫＢｒ）
でアミノ基の吸収を確認して（υ ３３００−２９５０
cm^-1）、そのままさらに精製することなく次の段階に供
した。

【０１４５】中間体２ 7.0g (0.018 mol) をクロロホ
ルム５０mlとピリジン８mlの混合溶媒に溶解しその中に
無水コハク酸 ２.２g(0.02 mol)を加えて２時間室温に
て撹拌した。常法により後処理を行ない、得られた残渣
を分離精製（シリカゲルカラムクロマトグラフィー：溶
離液；クロロホルム／メタノール＝６：１）することに
より目的とする中間体３を得た。薄黄色アモルファス状
５.９g。

【０１４６】合成例３に記した方法で得られた化合物２
の脱Boc体１．３６g (1.32 mmol)を常法(DCC/HOBt法）
に従いt-Boc-Gly 0.23g(1.32 mmol）と連結してt-Boc-G
ly-Arg-D-Leu-Asp-Serの全保護体を得た。中間体３の1.
03g (0.002mol) とカルボニルジイミダゾール（４００m
g;0.002mol)を無水テトラヒドロフラン４０mlに溶解し
０度に冷却した。上記全保護体の脱Boc体（遊離のアミ
ノ体）２．０g(0.002mol)を無水DMF 10ml に溶かして冷
却下、滴下した。滴下後１６時間室温にて撹拌し、常法
にて後処理を行った。得られた残渣を分離精製（シリカ
ゲルカラムクロマトグラフィー：クロロホルム／メタノ
ール= 20:1) することにより、目的とする中間体４が
１.８g 得られた。

【０１４７】中間体４の０.７８g(0.0005 mol)を85% 含
水酢酸２０mlに加えて５時間室温にて撹拌した。反応終
了後、溶媒を減圧留去すると目的の中間体５が０．７３
g得られた。構造の確認は1H-NMR (溶媒CDCl₃)のアセト
ナイド部のメチル基のピクδ 1.38と 1.61（それぞれ
３H,シングレット）が消失していることとMassスペクト
ルによって行った。FAB MS (M+H)⁺ 1523中間体５ (０.
７ g, 0.00046 mol) の乾燥DMF (15 ml) 溶液に三酸化
硫黄トリメチルアミン錯体 (417 mg, 0.003 mmol) を加
え、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。ＴＬＣで原
料の消失を確認した後適当量の飽和重曹水を加えて反応
を停止し溶液のpHを中性とし1N NaOH 水５mlを加えて２
時間さらに撹拌した後、減圧下大部分の溶媒を留去し
た。残渣にエーテルを加えて結晶化させ、得られた結晶
を水洗、乾燥して硫酸エステル体を得た。これを酢酸
(20 ml) に溶解し、0% Pd-C (100 mg) を加えた後反応
混合物を水素雰囲気下室温で４０時間撹拌した。触媒を
セライト濾過して除き、セライト層を水洗の後濾液及び
洗液を合わせて減圧濃縮した。残渣を少量の水に溶解
し、セファデックスＧ-10を用いたゲル濾過クロマトグ
ラフィーにかけて精製、凍結乾燥して目的とする化合物
90を無色粉末として280 mg 得た。 FAB-MS: (M-H)^- 1103 同様の手法で化合物９１を合成した。以下にそのFAB MS
のデータを示す。 化合物９１ (M-H)^- 1399

【０１４８】合成例３５ Asp-Arg-Leu-Asp-Ser担
持６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトヘキサ
オース（化合物９４）の合成 ６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトヘキサオ
ース０．５ｇを純水に溶解した後、ＷＳＣ ０．３７ｇ
を加え１時間撹拌した。次に、Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ１．０ｇを加え１日間撹拌した。反応
液を減圧下において濃縮し残留物をエーテルで洗浄した
後、イオン交換樹脂アンバーライトＩＲＡ−９３、セフ
ァデックスＧ−５０を用いて精製して目的化合物０．６
ｇを得た。

【０１４９】アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 0.98 Leu : 0.95 Ser : 0.78

【０１５０】合成例３６ Asp-Arg-D-Leu-Asp-Ser
担持６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトペン
タオース（化合物９５）の合成 ６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトペンタオ
ースとＡｓｐ−Ａｒｇ-D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用
いて合成例３５と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 0.87 D-Leu : 0.86 Ser : 0.72

【０１５１】合成例３７ Gly-Arg-Phe-Asp-Ser
担持６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトヘキ
サオース（化合物９６）の合成 ６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトヘキサオ
ースとＧｌｙ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用い
て合成例３５と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Gly : 0.91 Arg : 0.92 Phe : 0.94 Ser : 0.82 Asp : 1.00

【０１５２】合成例３８ Asp-Arg-D-Phe-Asp-Ser
担持６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトテト
ラオース（化合物９７）の合成 ６−Ｏ−カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトテトラオ
ースとＡｓｐ−Ａｒｇ-D-Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用
いて合成例３５と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 1.02 D-Phe : 0.99 Ser : 0.83

【０１５３】合成例３９ ６−Ｏ−硫酸化カルボキ
シメチル−Ｎ−アセチルキトオリゴ糖混合物の合成 戸倉らの方法（Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．、
第８０卷、８６６頁、１９８９年に記載）を用いて６−
Ｏ−硫酸化カルボキシメチルキチン（ＳＣＭ−キチン、
硫酸化度 ０．６、カルボキシメチル化度 ０．４）
５．３ｇを調製した。

【０１５４】得られた６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル
キチン５ｇを純水５００ｍｌに１日間撹拌して溶解した
後、卵白リゾチーム（ＥＣ−３．２．１．１７）１ｇを
加えて３７℃で２日間振とうさせた。反応液を減圧下に
おいて濃縮した後、スペクトラポア６（ＭＷＣＯ２００
０）を用いて純水中にて透析を行った。外液を凍結乾燥
して６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキ
トオリゴ糖３．５ｇを得た。

【０１５５】合成例４０ Asp-Arg-Leu-Asp-Ser担
持６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキト
オリゴ糖（化合物９８）の合成 ６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキトオ
リゴ糖０．５ｇを純水に溶解した後、ＳＣ ０．２ｇを
加え１時間撹拌した。次に、Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｌｅｕ−
Ａｓｐ−Ｓｅｒ１．０ｇを加え１日間撹拌した。反応液
を減圧下において濃縮し残留物をエーテルで洗浄した
後、イオン交換樹脂アンバーライトＩＲＡ−９３、セフ
ァデックスＧ−５０を用いて精製して目的化合物０．３
ｇを得た。

【０１５６】アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 0.96 Leu : 0.96 Ser : 0.81

【０１５７】合成例４１ Asp-Arg-D-Leu-Asp-Ser
担持６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキ
トオリゴ糖（化合物９９）の合成 Ａｓｐ−Ａｒｇ-D-Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用いて合
成例４０と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 0.92 D-Leu : 0.95 Ser : 0.73

【０１５８】合成例４２ Gly-Arg-Phe-Asp-Ser担
持６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキト
オリゴ糖（化合物１００）の合成 Ｇｌｙ−Ａｒｇ−Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用いて合成
例４０と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Gly : 1.04 Arg : 1.12 Phe : 0.94 Asp : 1.00 Ser : 0.84

【０１５９】合成例４３ Asp-Arg-D-Phe-Asp-Ser
担持６−Ｏ−硫酸化カルボキシメチル−Ｎ−アセチルキ
トオリゴ糖（化合物１０１）の合成 Ａｓｐ−Ａｒｇ-D-Ｐｈｅ−Ａｓｐ−Ｓｅｒを用いて合
成例４０と同様に合成した。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Asp : 2.00 Arg : 1.11 Phe : 0.98 Ser : 0.69

【０１６０】合成例４４ ＣＭキチン−Arg-Leu-As
p-Ser（化合物１０５）の合成 粘度９ｃｐｓ（１％溶液、２０℃）、エーテル化度０．
７８のＣＭキチン、脱アセチル化度０．５のＣＭキチン
（焼津水産化学工業製）０．３０ｇをｐＨ７．４リン酸
バッファーに溶解し、０℃に保ちながら水溶性ＤＣＣ
〔１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）−カル
ボジイミド〕１２８ｍｇの２．６ｍｌリン酸バッファー
溶液を加えて、１．５時間反応させた。ついで、８ｍｌ
のリン酸バッファーに溶解したペプチドＡｒｇ−Ｌｅｕ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ４００ｍｇを添加し４℃で一晩反応さ
せた。反応溶液を、Ｖｉｓｋｉｎｇ ｔｕｂｅに入れイ
オン交換水、ついで純水に対して透析し低分子量成分を
除いて精製、凍結乾燥した。 収量 ０．２４ｇ 構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析により行った。

【０１６１】アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 20.5558 Arg : 2.0556 Leu : 2.1352 Asp : 1.9854 Ser : 1.8792 以下の計算式に従いアルギニン残基濃度とグルコサミン
濃度の比よりペプチドフラグメントの導入率を計算し約
１０％の値を得た。

【０１６２】 導入率＝［Ａｒｇ］／［グルコサミン］×１００ （％） ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ^-1

【０１６３】合成例４５ スクシニル化ＣＭキチン
-Gly-Arg-D-Leu-Asp-Ser（化合物１０６）の合成 ＣＭキチン２０．０ｇを１％トリエチルアミン溶液１０
０ｍｌに溶解、これに無水コハク酸３４.０ｇ、４−ジ
メチルアミノピリジン２．００ｇを加え室温で一昼夜撹
拌した。反応終了後溶液を大過剰のアセトンに投入して
スクシニル化ＣＭキチンを再沈殿させた。沈殿を集め更
に大量のメタノールで洗浄した後エーテルで洗浄し真空
乾燥させた。収量 ２２．４０ｇ。

【０１６４】スクシニル化ＣＭキチン０．３０ｇをｐＨ
７．４リン酸バッファーに溶解し、０℃に保ちながら水
溶性ＤＣＣ（１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピ
ル）−カルボジイミド）１２８ｍｇの２．６ｍｌリン酸
バッファー溶液を加えて、１．５時間反応させた。次い
で、８ｍｌのリン酸バッファーに溶解したGly-Arg-D-Le
u-Asp-Ser４００ｍｇを添加し４℃で一晩反応させた。
反応溶液を、Ｖｉｓｋｉｎｇ ｔｕｂｅに入れイオン交
換水、次いで純水に対して透析し低分子量成分を除いて
精製、凍結乾燥した。収量 ０．２６ｇ構造の確認は、
ＩＲ及びアミノ酸分析により行った。アミノ酸分析の結
果ペプチドフラグメントの導入率は約１０％であった。

【０１６５】アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 23.6218 Arg : 2.3622 D-Leu : 2.1253 Asp : 2.2391 Ser : 2.0031 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ^-1

【０１６６】合成例４６ マレイル化ＣＭキチン-A
sp-Arg-D-Ile-Asp-Ser-NHCH₃（化合物１０７）の合成 ＣＭキチン２０．００ｇと３６.６ｇの無水マレイン酸
を合成例4５と同様に反応させマレイル化ＣＭキチン２
１．６０ｇを得た。マレイル化ＣＭキチン０．３０ｇを
ｐＨ７．４リン酸バッファーに溶解し、合成例４５と同
様にしてペプチドフラグメントを共有結合させた。収量
０．３３ｇ。

【０１６７】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１１％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 28.4956 Arg : 3.1345 Thr : 2.7751 Asp : 5.4426 Ser : 2.5694 D-Ile : 2.6120 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
４８ｃｍ-1

【０１６８】合成例４７ フタロイル化ＣＭキチン
-Asp-D-Arg-Nle-Asp-Ser（化合物１０８）の合成 ＣＭキチン２０．０ｇと５０.０ｇの無水フタル酸を合
成例４５と同様に反応させフタロイル化ＣＭキチン２
２．３１ｇを得た。フタロイル化ＣＭキチン０．３０ｇ
をｐＨ７．４リン酸バッファーに溶解し、合成例４５と
同様にしてAsp-D-Arg-Nle-Asp-Serを共有結合させた。
収量０．４４ｇ。

【０１６９】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１２％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 19.1856 D-Arg : 1.1023 Nle : 1.2231 Asp : 1.0937 Ser : 1.0632 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ^-1

【０１７０】合成例４８ イタコニル化ＣＭキチン
−Arg-Leu-Asp-Ser(化合物１０９）の合成 ＣＭキチン２０．００ｇと３８.０ｇの無水イタコン酸
を合成例４５と同様に反応させイタコニル化ＣＭキチン
２１．４５ｇを得た。イタコニル化ＣＭキチン０．３０
ｇをｐＨ７．４リン酸バッファーに溶解し、合成例４５
と同様にしてペプチドフラグメントを共有結合させた。
収量０．３６ｇ。

【０１７１】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約９％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 35.2316 Arg : 3.1708 Leu : 3.2511 Asp : 3.1005 Ser : 2.8862 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５０ｃｍ^-1

【０１７２】合成例４９ ＣＭキチン−Gly-Arg-D-
Phe-Asp-Ser-Pro（化合物１１０）の合成 ペプチドフラグメントとしてＧｌｙ−Ａｒｇ−D-Ｐｈｅ
−Ａｓｐ−Ｓｅｒ-Pro４６０ｍｇを用い、合成例４４と
同様にしてＣＭキチン−Gly-Arg-D-Phe-Asp-er-Proを合
成した。収量０．３６ｇ。

【０１７３】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１０％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 15.3319 Arg : 1.5332 Gly : 1.4132 Asp : 1.3468 Ser : 1.1132 Pro : 1.3078 D-Phe : 1.5810 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５４ｃｍ^-1

【０１７４】合成例５０ ＣＭキチン−Gly-Asp-D-
Phg-Asp-Thr-NH₂(化合物１１１）の合成 ペプチドフラグメントとしてGly-Asp-D-Phg-Asp-Thr-NH
₂４６０ｍｇを用い、合成例４４と同様にしてＣＭキチ
ン−Gly-Asp-D-Phg-Asp-Thr-NH₂を合成した。収量０．
３６ｇ。

【０１７５】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１０％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 17.6368 Arg : 1.8166 Gly : 1.8243 Asp : 3.7468 Ser : 1.6112 D-Phg : 1.7134 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５８ｃｍ^-1

【０１７６】合成例５１ スクシニル化ＣＭキチン
−(Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂（化合物１１２）の合成 ペプチドフラグメントとして（Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂ ４
６０ｍｇを用い、合成例４５と同様にしてフタロイル化
ＣＭキチン−(Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂を合成した。収量
０．３１ｇ。

【０１７７】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１２％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 25.1913 Arg : 6.0459 D-Leu : 5.9883 Asp : 5.8996 Ser : 5.7398

【０１７８】ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸
縮振動 １６５４ｃｍ^-1 合成例５２ 硫酸化ＣＭキチン−Gly-Arg-Nle-Asp-
Ser-NHCH₃（化合物１１３）の合成 エーテル化度０．５０、脱アセチル化度０．０５のＣＭ
キチンを戸倉らの方法（Jpn. J. Cancer Res.,80,866-8
72(1989),Cancer Res.,50,3631-3637(1990))に従い硫酸
化し、合成例４４と同様にしてGly-Arg-Nle-Asp-Ser-NH
CH₃フラグメントを共有結合させた。収量０．３６ｇ。

【０１７９】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１２％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 33.1569 Arg : 3.9780 Gly : 3.9251 Asp : 3.6053 Ser : 3.4921 Nle : 3.5548 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５０ｃｍ^-1

【０１８０】合成例５３ 硫酸化ＣＭキチン−Gly-
D-Arg-Leu-Asp-Ser（化合物１１４）の合成 ペプチドフラグメント Gly-D-Arg-Leu-Asp-Ser ４６０
ｍｇと合成例４９の硫酸化ＣＭキチンとを合成例４４と
同様にして共有結合させ、硫酸化ＣＭキチン−Gly-D-Ar
g-Leu-Asp-Serを合成した。収量０．３５ｇ。

【０１８１】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１０％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 25.1515 D-Arg : 2.5152 Gly : 2.4134 Asp : 2.4251 Ser : 2.1111 Leu : 2.5631 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５５ｃｍ^-1

【０１８２】合成例５４ 硫酸化スクシニル化ＣＭ
キチン−Arg-Phe-Asp-Ser-NH-iso-C₃H₇（化合物１１
５）の合成 スクシニル化ＣＭキチンを合成例５２と同じ方法で硫酸
化し、合成例４５と同様にしてArg-Phe-Asp-Ser-NH-iso
-C₃H₇フラグメントを共有結合させた。収量．３７ｇ。

【０１８３】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１４％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 18.6932 Arg : 2.6170 Phe : 2.7739 Asp : 2.5931 Ser : 2.2168 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５４ｃｍ^-1

【０１８４】合成例５５ 硫酸化スクシニル化ＣＭ
キチン−Arg-D-Leu-Asp-Ser-Pro-NHC₂H₅（化合物１１
６）の合成 スクシニル化ＣＭキチンを合成例５２と同じ方法で硫酸
化し、合成例４５と同様にしてペプチドフラグメントを
共有結合させた。収量０．３７ｇ。構造の確認は、ＩＲ
及びアミノ酸分析により行った。アミノ酸分析の結果ペ
プチドフラグメントの導入率は約１４％であった。

【０１８５】アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 18.6932 Arg : 2.6170 D-Leu : 2.7739 Asp : 2.5931 Ser : 2.2168 Pro : 2.2916 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５４ｃｍ^-1

【０１８６】合成例５６ コンドロイチン硫酸−Gl
y-D-Arg-Leu-Asp-Ser-NH-isoC₃H₇の合成（化合物１１
７）の合成 粘度９ｃｐｓ（１％溶液、２０℃）、エーテル化度０．
７８のコンドロイチン硫酸（焼津水産化学工業製）０．
３０ｇをｐＨ７．４リン酸バッファーに溶解し、０℃に
保ちながら１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピ
ル）−カルボジイミド１２８ｍｇの２．６ｍｌリン酸バ
ッファー溶液を加えて、１．５時間反応させた。次いで
8ｍｌのリン酸バッファーに溶解したペプチドGly-D-Arg
-Leu-Asp-er-NHisoC₃H₇ ４００ｍｇを添加し４℃で一晩
反応させた。反応溶液を、Ｖｉｋｉｎｇ ｔｕｂｅに入
れイオン交換水、次いで純水に対して透析し低分子量成
分を除いて精製、凍結乾燥した。収量 ０．２４ｇ。

【０１８７】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 20.5558 D-Arg : 2.0556 Gly : 2.1352 Asp : 1.9854 Ser : 1.8792 Leu : 1.9790 以下の計算式に従いアルギニン残基濃度とグルコサミン
濃度の比よりペプチドフラグメントの導入率を計算し約
１０％の値を得た。

【０１８８】導入率＝［Ａｒｇ］／［グルコサミン］×
１００ （％） ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ^-1

【０１８９】合成例５７ スクシニル化コンドロイ
チン硫酸−D-Arg-Phe-Asp-Ser（化合物１１８）の合成 合成例５６のコンドロイチン硫酸２０．０ｇを１％トリ
エチルアミン溶液１００ｍｌに溶解し、これに無水コハ
ク酸３４.０ｇ、４−ジメチルアミノピリジン２．００
ｇを加え室温で一昼夜撹拌した。反応終了後溶液を大過
剰のアセトンに投入してスクシニル化コンドロイチン硫
酸を再沈殿させた。沈殿を集め更に大量のメタノールで
洗浄した後エーテルで洗浄し真空乾燥させた。収量２
２．４０ｇ。

【０１９０】スクシニル化コンドロイチン硫酸０．３０
ｇをｐＨ７．４リン酸バッファーに溶解し、０℃に保ち
ながら１−エチル−３−（ジメチルアミノプロピル）−
カルボジイミド）１２８ｍｇの２．６ｍｌリン酸バッフ
ァー溶液を加えて、１．５時間反応させた。次いで、８
ｍｌのリン酸バッファーに溶解したD-Arg-Phe-Asp-Ser
４００ｍｇを添加し４℃で一晩反応させた。反応溶液
を、Ｖｉｓｋｉｎｇ ｔｕｂｅに入れイオン交換水、次
いで純水に対して透析し低分子量成分を除いて精製、凍
結乾燥した。収量０．２６ｇ。

【０１９１】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１０％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 23.6218 D-Arg : 2.3622 Phe : 2.1253 Asp : 2.2391 Ser : 2.0031 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ^-1

【０１９２】合成例５８ マレイル化コンドロイチ
ン硫酸−Arg-D-Leu-Asp-Ser（化合物１１９）の合成 合成例５６のコンドロイチン硫酸２０．００ｇと３６.
６ｇの無水マレイン酸を合成例５７と同様に反応させマ
レイル化コンドロイチン硫酸２１．６０ｇを得た。マレ
イル化コンドロイチン硫酸０．３０ｇをｐＨ７．４リン
酸バッファーに溶解し、合成例４５と同様にしてペプチ
ドフラグメントを共有結合させた。収量０．３３ｇ。

【０１９３】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１１％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 28.4956 Arg : 3.1345 D-Leu : 2.7751 Asp : 2.7213 Ser : 2.5694 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
４８ｃｍ^-1

【０１９４】合成例５９ トリメリチル化コンドロ
イチン硫酸−Glu-Arg-Phg-Asp-Ser（化合物１２０）の
合成 合成例５６のコンドロイチン硫酸２０．００ｇと６４.
９ｇのトリメリト酸無水物を合成例５７と同様に反応さ
せトリメリチル化コンドロイチン硫酸２３．７４ｇを得
た。トリメリチル化コンドロイチン硫酸０．３０ｇをｐ
Ｈ７．４リン酸バッファーに溶解し、合成例４５と同様
にしてGlu-Arg-Phg-Asp-Serフラグメントを共有結合さ
せた。収量０．３７ｇ。

【０１９５】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１４％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 18.7612 Arg : 2.6266 Glu : 2.7899 Asp : 2.5532 Ser : 2.2689 Phg : 2.2449 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５６ｃｍ^-1

【０１９６】合成例６０ スクシニル化コンドロイ
チン硫酸−（Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂ （化合物１２１）の
合成 ペプチドフラグメントとして（Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂ ４
６０ｍｇを用い、合成例５７と同様にしてスクシニル化
コンドロイチン硫酸−（Arg-D-Leu-Asp-Ser)₂ を合成し
た。収量０．３１ｇ。

【０１９７】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１２％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 25.1913 Arg : 6.0459 D-Lue : 5.9883 Asp : 5.8996 Ser : 5.8798 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５４ｃｍ^-1

【０１９８】合成例６１ スクシニル化コンドロイ
チン硫酸−(Arg-D-Leu-Asp-Ser)₅（化合物１２２）の合
成 ペプチドフラグメントとして（Arg-D-Leu-Asp-Ser)₅ ４
６０ｍｇを用い、合成例５７と同様にしてスクシニル化
コンドロイチン硫酸−(Arg-D-Leu-Asp-Ser)₅ を合成し
た。収量０．２８ｇ。

【０１９９】構造の確認は、ＩＲ及びアミノ酸分析によ
り行った。アミノ酸分析の結果ペプチドフラグメントの
導入率は約１５％であった。 アミノ酸分析(nmol/50μl) グルコサミン: 23.6811 Arg : 23.0108 D-Leu : 21.0993 Asp : 20.3332 Ser : 21.0728 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５６ｃｍ^-1

【０２００】合成例６２ シアヌルＰＥＧ₁（Ａｒ
ｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ)₂（化合物１２３）の合成 下記式６に従い、化合物１２３を合成した。

【０２０１】

【化２０】

【０２０２】１）シアヌルＰＥＧ₁ の合成 平均分子量５０００のポリエチレングリコールモノメチ
ルエーテル（１０ｇ，２ｍｍｏｌ）を充分乾燥し、トル
エン（１００ｍｌ）、炭酸ナトリウム（５ｇ）、塩化シ
アヌル（１．１ｇ，６ｍｍｏｌ）を加え、８０℃で１２
０時間撹拌した。反応液が室温になるまで放冷した後に
濾過し、濾液にヘキサンを加えて結晶化した。さらにト
ルエン・アセトン・ヘキサンの溶媒系からこの結晶を再
結晶させて精製し、シアヌルＰＥＧ₁ の白色粉末（７
ｇ）を得た。 ２）ＰＥＧ₁−ＡｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒの合成 ＢｏｃＡｒｇ（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂ
n）ＯＢn（１．１４ｇ，１ｍｍｏｌ）を塩化メチレン１
０ｍｌに溶解し、トリフルオロ酢酸１０ｍｌを加えて室
温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去した後にクロロ
ホルム１００ｍｌを加え、１Ｎ炭酸水素ナトリウム水溶
液、飽和食塩水各１００ｍｌで数回洗浄し、無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾過して除き、
濾液を減圧濃縮して白色粉末を得た。これとシアヌルＰ
ＥＧ₁（２．５g)、トリエチルアミン（０．１ｇ）、ク
ロロホルム５０ｍｌの混合物を室温で２４時間撹拌し
た。ゲル濾過（Sephadex LH-60）により精製し、ＰＥＧ
₁−Ａｒｇ（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）
ＯＢｎを３．１ｇ得た。

【０２０３】この保護ペプチド誘導体（３．１ｇ）を酢
酸５０ｍｌに溶解し、１０％パラジウム炭素１．０ｇを
加え、室温で常圧加水素分解を２４時間行った。触媒を
セライトを用いて濾別し、溶媒を減圧留去した。ゲル濾
過（Sephadex LH-60）により精製し、ＰＥＧ₁−Ａｒｇ
ＬｅｕＡｓｐＳｅｒを２．５ｇ得た。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 1.0326 Leu : 0.9574 Asp : 0.9811 Ser : 0.9209 数平均分子量：６０００

【０２０４】合成例６３ シアヌルＰＥＧ₂−ＡｒｇDＬ
ｅｕＡｓｐＳｅｒ（化合物１２４）の合成 下記式７に従って化合物１２４を合成した。

【０２０５】

【化２１】

【０２０６】ＢｏｃＡｒｇ（Ｚ₂）DＬｅｕＡｓｐ（ＯＢ
n）Ｓｅｒ（Ｂn）ＯＢn（１．１４ｇ，１ｍｍｏｌ）を
塩化メチレン１０ｍｌに溶解し、トリフルオロ酢酸１０
ｍｌを加えて室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去
した後にクロロホルム１００ｍｌを加え、１Ｎ 炭酸水
素ナトリウム水溶液、飽和食塩水各１００ｍｌで数回洗
浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウム
を濾過して除き、濾液を減圧濃縮して白色粉末を得た。
これと生化学工業製活性化ポリエチレングリコール（Ｐ
ＥＧ₂）（１．２５ｇ）、トリエチルアミン（０．１
ｇ）、クロロホルム５０ｍｌの混合物を室温で２４時間
撹拌した。ゲル濾過（Sephadex LH-60）により精製し、
ＰＥＧ₂−Ａｒｇ（Ｚ₂）DＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅｒ
（Ｂn）ＯＢnを１．７９ｇ得た。

【０２０７】この保護ペプチド誘導体１．７９ｇを酢酸
５０ｍｌに溶解し、１０％パラジウム炭素１．０ｇを加
え、室温で常圧加水素分解を２４時間行った。触媒をセ
ライトを用いて濾別し、溶媒を減圧留去した。ゲル濾過
（Sephadex LH-60）により精製し、ＰＥＧ₂−ＡｒｇD-
ＬｅｕＡｓｐＳｅｒを１．３４ｇ得た。 アミノ酸分析(nmol/50μl) Arg : 1.1408 D-Leu : 0.9357 Asp : 0.9412 Ser : 0.9166 数平均分子量：１００００

【０２０８】合成例６４ ＰＥＯ酸−ＧｌｙＡｒｇ
ＬｅｕＡｓｐＳｅｒ（化合物１２５）の合成 ＢｏｃＧｌｙＡｒｇ（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ（ＯＢn）Ｓｅ
ｒ（ＯＢn）（０．６３ｇ，０．５ｍｍｏｌ）を塩化メ
チレン１０ｍｌに溶解し、トリフルオロ酢酸１０ｍｌを
加えて室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧留去した後
にクロロホルム１００ｍｌを加え、１Ｎ 炭酸水素ナト
リウム水溶液、飽和食塩水各１００ｍｌで数回洗浄し、
無水硫酸ナトリウムで乾燥した。硫酸ナトリウムを濾過
して除き、濾液を減圧濃縮して白色粉末を得た。これと
ポリエチレンオキシド誘導体カルボン酸ＰＥＯ酸＃４０
００(川研ファインケミカル（株）から購入）（１．０
ｇ）、ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．１２ｇ，
０．５５ｍｍｏｌ）、クロロホルム５０ｍｌの混合物を
室温で２４時間撹拌した。ゲル濾過（Sephadex LH-20、
溶出液 クロロホルム・メタノール 9:1）により導入さ
れなかったペプチドを除いた。カルボキシル基に対する
保護ペプチドの導入率は、¹ＨＮＭＲ測定によるメチレ
ンプロトンとアロマティクプロトンと強度比から算出し
たところ、約６５%であった。

【０２０９】保護ペプチドを導入したポリエチレングリ
コール誘導体(１ｇ)をエタノール１００ｍｌ、水１０ｍ
ｌに溶解し、１０%パラジウム炭素１ｇを加え、室温で
常圧加水素分解を２４時間行った。触媒をセライトを用
いて濾別し、溶媒を減圧留去した。ゲル濾過（Sephadex
LH-20、溶出液 エタノール）により脱保護された保護
基を除去し、さらにイオン交換クロマトグラフィー（DE
AE-Sphadex A-25）により精製し、ＰＥＯ酸−ＧｌｙＡ
ｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒ（２５０ｍｇ）を得た。

【０２１０】アミノ酸分析(nmol/50μl) Gly : 1.0151 Arg : 1.0045 Leu : 0.9897 Asp : 0.9564 Ser : 0.9106 数平均分子量：４９００

【０２１１】合成例６５ ＰＥＯ酸−ＧｌｙＡｒｇ
ＬｅｕＡｓｐＳｅｒＰｒｏＮＨ₂（化合物１２６）の合
成 保護ペプチドＢｏｃＧｌｙＡｒｇ（Ｚ₂）ＬｅｕＡｓｐ
（ＯＢn）Ｓｅｒ（Ｂn）ＰｒｏＮＨ₂は、ＢｏｃＰｒｏ
ＮＨ₂を出発物質にＮ末端側へ逐次延長して合成した。
合成例１１２と同様にして、ＰＥＯ酸＃４０００（１．
０ｇ）と保護ペプチド０．６０ｇ（０．５０ｍｍｏｌ）
の縮合、加水素分解を行い、目的のＰＥＯ酸−ＧｌｙＡ
ｒｇＬｅｕＡｓｐＳｅｒＰｒｏＮＨ₂ ３１０ｍｇを合成
した。。

【０２１２】アミノ酸分析(nmol/50μl) Gly : 0.9841 Arg : 1.0193 Leu : 0.9417 Asp : 0.9924 Ser : 0.8846 Pro : 0.9511 数平均分子量：５２００ 本発明のペプチド誘導体またはその塩のIN VIVO系での
強力な癌転移抑制作用機序は明らかではないが、細胞接
着性蛋白の接着機能発現の最小単位であるＡｒｇ−Ｇｌ
ｙ−Ａｓｐ−（Ｓｅｒ）とIN VITRO系でその細胞接着阻
害能、血小板凝集阻害能を比較すると本発明のペプチド
誘導体は必ずしも勝るものではないものの、細胞移動
（浸潤）阻害能はIN VITRO系でArg-Gly-Asp-Serより明
らかに強いことが判明している。従って、本発明のペプ
チド誘導体またはその塩は、その少なくとも一種を、場
合により慣用の担体または医薬用助剤とともに、癌転移
抑制剤として患者に投与することが可能である。その投
与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋｇの範囲
で、患者の症状、年齢、体重等に基づいて決定される。

【０２１３】本発明のペプチド誘導体またはその塩は、
ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方法、即ち
非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下
投与等によって投与するのが好ましい。そのような注射
用製剤を製造する場合、本発明のペプチド誘導体または
その塩を、例えば後記実施例で示すようにＰＢＳまたは
生理食塩水に溶解して注射用製剤としてもよく、あるい
は０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後凍結乾燥製剤と
してもよい。このような製剤には、グリシンやアルブミ
ン等の慣用の安定剤を添加してもよい。さらに、本発明
のペプチド誘導体またはその塩は、例えばリポソーム中
に包容したマイクロカプセル剤あるいはミクロスフェア
状、ハイドロゲル状とすれば、経口投与することも可能
であり、また、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤等の形に
すれば、消化菅以外の粘膜からも吸収させることも可能
である。

【０２１４】試験例（実験的肺転移及び実験的肝・脾臓
転移） 本発明の化合物類の癌転移阻止作用について検討した。
化合物１〜１３、１５、１９〜２２、２５、３２、３
６、３７、４４、４７、５０、５６−１、５６−４、５
９、６５、６８、７０、７３、７６、７７、８０、８
４、８７、８９、９０、９４、９６、９９、１０１、１
０３、１０６、１１２、１１４、１１８、１２１、１２
３を各々３０００、１０００、５００μgと、非常に転
移性の強い癌細胞としてB16-BL6 メラノーマ細胞を各々
PBS中で混合後、その０.２mlを１群５匹のC57BL/6雌マ
ウスに静脈注射した。注射された混合物０.２ml中にはB
16-BL6 細胞が５×10⁴ 個含まれていた。投与１４日後
にマウスの肺コロニー数を数えて対照のPBS投与群と比
較した。その結果を表４に示す。

【０２１５】次にL5178Y ML25 T-lymphoma 細胞を各々P
BS中で混合後、その0.2 mlを一群５匹のCDF₁(BALB/c×D
BA/2)の雌マウスに静脈注射した (同時投与) 。注射さ
れた混合物０。２ml中にはT-lymphoma細胞が４×10⁴ 個
含まれていた。投与１４日後にマウスの肝臓及び脾臓の
重量を量り、対照のPBS投与群と比較した。その結果を
表５に示す。

【０２１６】また、本発明のペプチド誘導体の比較用と
して、癌転移抑制効果が知られているArg-Gly-Asp-Ser
(比較A)、Gly-Arg-Gly-Asp-Ser(比較B)、(Arg-Gly-Asp)
n（n=5)(比較C)も同様に投与した。この結果によれば、
本発明の化合物はそのいずれの場合においても既存の接
着性ペプチド配列に比べて肺、肝、脾臓への癌転移を顕
著に抑制した。これは明らかに、本発明のペプチド配列
が既存のものより本質的に高い癌転移抑制能を有してい
ることを示している。また、本発明のペプチドを有機基
で修飾した化合物群では少ない投与量で高い抑制効果を
示しており、本発明の重要な目的のひとつである、修飾
による活性増強が目論見通りに達成されていることを示
している。

【０２１７】また、本発明の化合物群をB16-BL6細胞と
混合せずにB16-BL6細胞を投与した５分後にマウスに静
脈投与しても（実験２、別個投与）、やはり高い転移抑
制効果が得られた。この結果は、本発明の化合物を静脈
注射等の適当な方法で癌患者に投与すると、癌の転移抑
制効果が得られることを示している。

【０２１８】 表４ B16-BL6メラノーマ細胞の注射で誘発された癌の実験的肺転移に対するポ リペプチドの効果 ─────────────────────────────────── 投与化合物 投与時 投与量 肺への転移数 （μg） 平均±SD（範囲） ─────────────────────────────────── 実験１ ＰＢＳ（未処理）同時 −−−− １１６ ± ２７（８４〜１６０） 化合物１ 同時 ３０００ ３５ ± ３（３０〜３６）** 化合物２ 同時 ３０００ ４１ ± ８（２９〜４９）** 化合物３ 同時 ３０００ ３９ ±１８（２３〜５８）** 化合物４ 同時 ３０００ ３５ ±１１（２３〜４７）** 化合物５ 同時 ３０００ ５１ ± ６（４４〜５７）** 化合物６ 同時 ３０００ ２１ ±１０（１０〜２９）** 化合物７ 同時 ３０００ ２５ ± ６（１７〜３２）** 化合物８ 同時 ３０００ ３７ ± ９（２８〜４３）** 化合物９ 同時 ３０００ ２２ ±１０（１１〜２９）** 化合物１０ 同時 ３０００ ５８ ±１５（４１〜７２）* 化合物１１ 同時 ３０００ １９ ±１０（９〜３１）** 化合物１２ 同時 ３０００ ２３ ± ４（１８〜２６）** 化合物１３ 同時 ３０００ ４２ ± ８（３５〜５１）** 化合物１５ 同時 ３０００ ４３ ±１２（１９〜５７）** 比較Ａ 同時 ３０００ ７０ ± ８（５９〜７８）* 比較Ｂ 同時 ３０００ ５０ ±１０（３５〜６３）** 比較Ｃ 同時 １０００ ４０ ±１５（２６〜５９）*

【０２１９】 実験２ ＰＢＳ（未処理）同時 −−−− ８４ ±１１（４８〜８５） 化合物１９ 同時 １０００ ２１ ± ８（１２〜２４）** 化合物２０ 別個 １０００ ２０ ± ９（１８〜２７）** 化合物２１ 同時 １０００ １６ ±１３（２〜３３） ** 化合物２２ 別個 １０００ １９ ± ８（１３〜２９）** 化合物２５ 同時 １０００ ３０ ± ６（２３〜３８）** 化合物３２ 同時 １０００ ２４ ± ５（１８〜３０）** 比較Ａ 同時 １０００ ６２ ± ９（５４〜７３）* 比較Ｂ 同時 １０００ ４０ ±１０（２９〜５１）* 比較Ｃ 同時 １０００ ２３ ± ９（１３〜２９）* 「同時」は投与化合物と癌細胞を同時に注射したことを
示し「別個」は癌細胞と投与化合物を別々に注射したこ
とを示す。

【０２２０】 実験３ (以下はすべて同時投与） ＰＢＳ（未処理） −−− １４５ ± ３０（１１４〜１８０） 化合物３６ ５００ ４６ ± ６ （３９〜５７）** 化合物３７ ５００ ２７ ± １１（１３〜３９）** 化合物４４ ５００ ６６ ± １５（４９〜７９）** 比較Ａ ３０００ ９２ ± １４（７６〜１２９）* 比較Ｂ １０００ ８９ ± １８（７１〜９８）* 比較Ｃ ５００ ６８ ± ９ （５８〜７９）**

【０２２１】 実験４ ＰＢＳ（未処理） −−− １１６ ± １９（９８〜１４２） 化合物７３ ５００ ３８ ± ７ （３０〜４４）** 化合物７６ ５００ ４８ ± ５ （４２〜５２）** 化合物７７ ５００ ４１ ± ６ （３４〜４８）** 化合物５６−１ ５００ １１ ± １０（０〜２１）** 化合物５６−４ ５００ １９ ± ５ （１３〜２３）** 化合物５９ ５００ ３２ ± ９ （２３〜４３）** 参照用重合物Ａ １０００ ９８ ± ２６（６８〜１２６） 比較Ａ ３０００ ７４ ± １１（６６〜８７）* 比較Ｂ １０００ ７８ ± ８ （６９〜８８）*

【０２２２】 実験５ ＰＢＳ（未処理） −−− ９１ ± ３３（６５〜１３６） 化合物４７ １０００ ２５ ± ４ （２０〜２８）* 化合物５０ １０００ １９ ± １０（４〜３０）** 化合物６５ １０００ １０ ± ４ （４〜１４）** 化合物６８ １０００ １６ ± ５ （１０〜２３）** 化合物７０ １０００ ２３ ± ５ （１４〜３０）* 比較Ａ ３０００ ６０ ± ４ （５５〜６７） 比較Ｂ １０００ ４９ ± ７ （３３〜５６） 比較Ｃ １０００ ３９ ± １１（１８〜５５）*

【０２２３】 実験６ ＰＢＳ（未処理） −−− １２８ ± ２４（１００〜１５６） 化合物８０ ５００ ３６ ± ７ （２７〜４４）* 化合物８４ ５００ １３ ± ６ （５〜２０）** 化合物８７ ５００ ２０ ± ９ （９〜２８）** 化合物８９ ５００ ２９ ± １１（１６〜３９）* 化合物９０ ５００ ４４ ± ９ （３２〜５１）* 比較Ａ ３０００ ８８ ± ２０（６５〜１１２）* 比較Ｂ １０００ ７６ ± ６ （６５〜８７）* 比較Ｃ ５００ ５７ ± １２（４４〜７１）*

【０２２４】 実験７ ＰＢＳ（未処理） −−− ８５ ± ２０（６４〜１０７） 化合物９４ ５００ １４ ± ３ （８〜１６）** 化合物９６ ５００ ９ ± ４ （３〜１１）** 化合物９９ ５００ ３ ± ３ （０〜６）** 化合物１０１ ５００ １３ ± ６ （２〜２２）** 化合物１０３ ５００ ２４ ± ８ （１４〜３３）** 化合物１０６ ５００ １ ± １ （０〜３）** 化合物１１２ ５００ １４ ± ７ （６〜２３）** 化合物１１４ ５００ ２１ ± １１（１０〜３３）** 化合物１１８ ５００ ４３ ± ８ （３３〜４９）* 化合物１２１ ５００ ４５ ± １１（３３〜５９）* 比較Ａ ３０００ ５１ ± ６ （４５〜５９）* 比較Ｂ １０００ ５０ ± ８ （４０〜５６）* 比較Ｃ ５００ ４４ ± １６（２８〜６３）* ─────────────────────────────────── ＊ t検定で未処理対照と比較して p＜0.01 ＊＊ t検定で未処理対照と比較して p＜0.001

【０２２５】 表５ L5178Y ML25 T-Lymphoma細胞の注射で誘発された癌の実験的肝及び脾転 移に対するペプチドの効果 ─────────────────────────────────── 投与化合物 投与量 重量 平均±SD(範囲）（g) 肝臓 脾臓 ────────────────────────────────── PBS(未処理） ４.２１±０.４９ ０.２８±０.０３ 化合物１ ３０００ １.２９±０.３２** ０.１０±０.０２** 化合物２ ３０００ ２.０１±０.２０** ０.１１±０.０２** 化合物８ ３０００ １.９２±０.２０** ０.１１±０.０２** 化合物１２ ３０００ ２.６７±０.７８* ０.１７±０.０５* 化合物２０ １０００ ２.６６±０.６７* ０.１６±０.０６* 化合物４７ １０００ ２.２８±０.５４** ０.１４±０.０４** 化合物５６ １０００ １.８８±０.２８** ０.１３±０.０３** 化合物５９ １０００ １.８０±０.７７** ０.１４±０.０４** 化合物６７ １０００ １.６２±０.５２** ０.１２±０.０２** 化合物７３ １０００ １.９５±１.００* ０.１５±０.０５* 化合物８５ １０００ １.１１±０.０９** ０.１０±０.０２** 比較Ｂ １０００ ３.６７±１.０４ ０.２２±０.０３ 比較Ｃ １０００ ２.２４±０.４６** ０.１７±０.０３** 癌細胞未投与 １.０９±０.１１ ０.０８±０ ────────────────────────────────── ＊ t検定で未処理対照と比較して p＜0.01 ＊＊ t検定で未処理対照と比較して p＜0.001

【０２２６】試験例５ 毒性 上記の試験において本発明の化合物群は、宿主マウスの
赤血球細胞や脾臓及び胸腺細胞に対する細胞毒性や、血
清蛋白質に対する好しくない凝集作用を有していないこ
とが確認された。

【０２２７】

【発明の効果】以上説明した通り、本発明のペプチド誘
導体は、細胞接着性蛋白質のコア配列に比べて高い癌転
移抑制作用を有し、毒性の問題も殆どない。また、その
構造も単純であって合成も容易であり、医薬としての価
値は高いものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ｃ０７Ｋ 7/08 Ｃ０７Ｋ 9/00 9/00 14/78 // Ｃ０７Ｋ 14/78 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＤＵ (72)発明者 森 英登 神奈川県南足柄市中沼210番地 富士写 真フイルム株式会社内 (72)発明者 西川 尚之 神奈川県南足柄市中沼210番地 富士写 真フイルム株式会社内 (72)発明者 佐藤 秀顕 神奈川県南足柄市中沼210番地 富士写 真フイルム株式会社内 (72)発明者 織笠 敦 神奈川県南足柄市中沼210番地 富士写 真フイルム株式会社内 (72)発明者 小野 光則 神奈川県南足柄市中沼210番地 富士写 真フイルム株式会社内 (72)発明者 東 市郎 北海道札幌市南区真駒内上町５丁目３− ２ (72)発明者 済木 育夫 北海道札幌市厚別区厚別北３条西５丁目 12−６ (56)参考文献 特表 昭63−502106（ＪＰ，Ａ) 欧州特許出願公開335637（ＥＰ，Ａ) Ｂｕｌｌ．Ｍａｔｈ．Ｂｉｏｌ．, 1983，Ｖｏｌ．45，Ｎｏ．１，ｐ．117 −138 Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ａｂｓｔｒａｃｔ ｓ，1971，Ｖｏｌ．75，ｐ．36654, 36654ｄ Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，1989，Ｖ ｏｌ．264，Ｎｏ．34，ｐ．20309− 20313 Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ ｌ．，1979．Ｖｏｌｕｍｅ Ｄａｔｅ 1978 120Ａ ｐ．185−193

Claims (29)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式（Ｉ）で表されるペプチド配
   列あるいはその薬理学的に許容される塩を必須構成単位
   として１〜２０単位含むペプチド誘導体を含有すること
   を特徴とする癌転移抑制剤。 一般式（Ｉ） ［Ｚ］−Ａｒｇ−Ｘ−Ａｓｐ−［Ｙ］ 式中、ＡｒｇはＬ−またはＤ−アルギニンを表し、Ａｓ
   ｐはＬ−アスパラギン酸を表す。ＸはＬ−もしくはＤ−
   ロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｌ−もしくはＤ−ノルロ
   イシン、Ｌ−もしくはＤ−フェニルアラニン、Ｄ−フェ
   ニルグリシンまたはＤ−アラニンを表す。［ ］は、
   ［ ］内の残基が存在してもしなくてもよいことを表
   し、存在する場合Ｚ及びＹはそれぞれグリシン、Ｌ−セ
   リン、Ｌ−スレオニン、Ｄ−及びＬ−アスパラギン酸、
   Ｌ−アラニン、Ｄ−及びＬ−グルタミン酸及びＬ−プロ
   リンから選ばれるアミノ酸またはこれらのアミノ酸を組
   合せたペプチドを表す。
2. 【請求項２】 ペプチド誘導体が、一般式（Ｉ）で表さ
   れるペプチド配列あるいはその薬理学的に許容される塩
   からなるオリゴペプチドまたはポリペプチドであり、ペ
   プチドのカルボキシル末端は任意にアミド化されていて
   もよい請求項１記載の癌転移抑制剤。
3. 【請求項３】 一般式（Ｉ）で表されるペプチド配列あ
   るいはその薬理学的に許容される塩を２〜２０単位含む
   ことを特徴とする請求項２記載の癌転移抑制剤。
4. 【請求項４】 ペプチド誘導体が、一般式（Ｉ）で表さ
   れるペプチド配列あるいはその薬理学的に許容される塩
   が、その生物活性を減じることがなく、分子全体の水溶
   性を妨げず、かつ薬理学的に許容される任意の有機基に
   結合してなる化合物である請求項１記載の癌転移抑制
   剤。
5. 【請求項５】 有機基が、 ｉ）アシル基、アルキル基、アルキルアミノ基（これら
   の基は置換もしくは非置換で、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ
   −、エステル結合、アミド結合、ウレタン結合または尿
   素結合を含んでいてもよい）、 ｉｉ）多価カルボン酸、多価アミン、エチレン性不飽和
   モノマーをから得られるポリマー、単糖、オリゴ糖、多
   糖誘導体、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキ
   シド誘導体カルボン酸に由来する基（これらの基と一般
   式（Ｉ）で表されるペプチド配列は、−Ｏ−、−ＮＨ
   −、−Ｓ−、エステル結合、アミド結合、ウレタン結合
   または尿素結合を含んでいてもよい、置換または非置換
   で炭素数１〜１５のアルキレンまたはアリーレン基を介
   して結合されていてもよい）から選択されることを特徴
   とする請求項４記載の癌転移抑制剤。
6. 【請求項６】 有機基が一般式（Ｉ）のペプチド配列の
   アミノ末端側から連結し、該ペプチド配列のカルボキシ
   ル末端が，−ＯＲ_ａまたは−ＮＲ_ｂＲ_ｃで表され、
   Ｒ_ａ、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃはそれぞれ水素原子または環状であ
   ってもよいアルキル基であり、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃが連結して
   環を形成していてもよいことを特徴とする請求項５記載
   の癌転移抑制剤。
7. 【請求項７】 有機基が少なくとも一つのカルボキシル
   基、スルホ基、硫酸基またはリン酸基を有することを特
   徴とする請求項６記載の癌転移抑制剤。
8. 【請求項８】 有機基が一般式（Ｉ）のペプチド配列の
   カルボキシル末端側から連結し、該ペプチド配列のアミ
   ノ末端が水素原子または置換もしくは無置換のアシル基
   であることを特徴とする請求項５記載の癌転移抑制剤。
9. 【請求項９】 有機基が少なくとも一つのカルボキシル
   基、スルホ基、硫酸基またはリン酸基を有することを特
   徴とする請求項８記載の癌転移抑制剤。
10. 【請求項１０】 一般式（Ｉ）のペプチド配列あるいは
    その薬理学的に許容される塩を２〜２０単位含むポリペ
    プチドであって、アミノ末端が置換または非置換のアシ
    ル基であり、カルボキシル末端が置換または非置換の鎖
    状もしくは環状アルキルアミノ基であることを特徴とす
    る請求項５記載の癌転移抑制剤。
11. 【請求項１１】 一般式（Ｉ）のペプチド配列あるいは
    その薬理学的に許容される塩を１〜５単位含み、有機基
    が多価カルボン酸または多価アミンに由来するものであ
    ることを特徴とする請求項５記載の癌転移抑制剤。
12. 【請求項１２】 一般式（Ｉ）のペプチド配列あるいは
    その薬理学的に許容される塩を１〜１０単位含み、有機
    基がポリエチレングリコールであることを特徴とする請
    求項５記載の癌転移抑制剤。
13. 【請求項１３】 一般式（Ｉ）のペプチド配列あるいは
    その薬理学的に許容される塩を１〜１０単位含み、有機
    基が単糖、オリゴ糖または多糖誘導体であることを特徴
    とする請求項５記載の癌転移抑制剤。
14. 【請求項１４】 単糖、オリゴ糖または多糖誘導体の糖
    鎖上に少なくとも一つのカルボキシル基、スルホ基、硫
    酸基またはリン酸基を有することを特徴とする請求項１
    ３記載の癌転移抑制剤。
15. 【請求項１５】 下記（ａ）〜（ｄ）からなる群から選
    ばれるペプチド誘導体。 （ａ） 下記一般式（Ｉ）で表されるペプチド配列１〜
    ２０単位からなるペプチド誘導体； ［Ｚ］−Ａｒｇ−Ｘ−Ａｓｐ−［Ｙ］ （Ｉ） （式中、ＡｒｇはＬ−またはＤ−アルギニンを表し、Ａ
    ｓｐはＬ−アスパラギン酸を表す。ＸはＬ−もしくはＤ
    −ロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｌ−もしくはＤ−ノル
    ロイシン、Ｄ−フェニルアラニンまたはＤ−フェニルグ
    リシンを表す。［］は、［ ］内の残基が存在してもし
    なくてもよいことを表し、存在する場合Ｚ及びＹはそれ
    ぞれグリシン、Ｌ−セリン、Ｌ−スレオニン、Ｄ−及び
    Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−アラニン、Ｄ−及びＬ−グル
    タミン酸及びＬ−プロリンから選ばれるアミノ酸または
    これらのアミノ酸を組合せたペプチドを表す。） （ｂ） （ａ）のペプチドであってカルボキシ末端がア
    ミド化されたもの； （ｃ） （ａ）又は（ｂ）の末端に有機基（但し、アミ
    ノ酸を除く）が結合したものであって、該有機基が、一
    般式（Ｉ）で表されるペプチド配列あるいはその薬理学
    的に許容される塩の生物活性を減じることがなく、分子
    全体の水溶性を妨げず、かつ薬理学的に許容されるもの
    であり；及び （ｄ） （ａ）〜（ｃ）の薬理学的に許容される塩。
16. 【請求項１６】 平均分子量が１０００〜１０万である
    請求項１５記載のペプチド誘導体。
17. 【請求項１７】 有機基が、 ｉ）アシル基、アルキル基、アルキルアミノ基（これら
    の基は置換もしくは非置換で、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ
    −、エステル結合、アミド結合、ウレタン結合または尿
    素結合を含んでいてもよい）、 ｉｉ）多価カルボン酸、多価アミン、エチレン性不飽和
    モノマーをから得られるポリマー、単糖、オリゴ糖、多
    糖誘導体、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキ
    シド誘導体カルボン酸に由来する基（これらの基と一般
    式（Ｉ）で表されるペプチド配列は、−Ｏ−、−ＮＨ
    −、−Ｓ−、エステル結合、アミド結合、ウレタン結合
    または尿素結合を含んでいてもよい、置換または非置換
    で炭素数１〜１５のアルキレンまたはアリーレン基を介
    して結合されていてもよい）から選択されることを特徴
    とする請求項１５記載のペプチド誘導体。
18. 【請求項１８】 有機基が一般式（Ｉ）のペプチド配列
    のアミノ末端側から連結し、該ペプチド配列のカルボキ
    シル末端が，−ＯＲ_ａまたは−ＮＲ_ｂＲ_ｃで表され、Ｒ
    _ａ，Ｒ_ｂ及びＲ_ｃはそれぞれ水素原子または環状であっ
    てもよいアルキル基であり、Ｒ_ｂ及びＲ_ｃが連結して環
    を形成していてもよいことを特徴とする請求項１７記載
    のペプチド誘導体。
19. 【請求項１９】 有機基が少なくとも一つのカルボキシ
    ル基、スルホ基、硫酸基またはリン酸基を有することを
    特徴とする請求項１８記載のペプチド誘導体。
20. 【請求項２０】 有機基が一般式（Ｉ）のペプチド配列
    のカルボキシル末端側から連結し、該ペプチド配列のア
    ミノ末端が水素原子または置換もしくは無置換のアシル
    基であることを特徴とする請求項１７記載のペプチド誘
    導体。
21. 【請求項２１】 有機基が少なくとも一つのカルボキシ
    ル基、スルホ基、硫酸基またはリン酸基を有することを
    特徴とする請求項２０記載のペプチド誘導体。
22. 【請求項２２】 一般式（Ｉ）のペプチド配列２〜２０
    単位からなるポリペプチドであって、アミノ末端が置換
    または非置換のアシル基であり、カルボキシル末端が置
    換または非置換の鎖状もしくは環状アルキルアミノ基で
    あることを特徴とする請求項１７記載のペプチド誘導体
    あるいはその薬理学的に許容される塩。
23. 【請求項２３】 一般式（Ｉ）のペプチド配列１〜５単
    位からなり、有機基が多価カルボン酸または多価アミン
    に由来するものであることを特徴とする請求項１７記載
    のペプチド誘導体あるいはその薬理学的に許容される
    塩。
24. 【請求項２４】 多価カルボン酸がアクリル酸、メタク
    リル酸の重合物である請求項２３記載のペプチド誘導
    体。
25. 【請求項２５】 多価アミンがアリルアミンの重合物で
    ある請求項２３記載のペプチド誘導体。
26. 【請求項２６】 一般式（Ｉ）のペプチド配列１〜１０
    単位からなり、有機基がポリエチレングリコールである
    ことを特徴とする請求項１７記載のペプチド誘導体ある
    いはその薬理学的に許容される塩。
27. 【請求項２７】 平均分子量が２０００〜１００００の
    ポリエチレングリコールである請求項２６記載のペプチ
    ド誘導体。
28. 【請求項２８】 一般式（Ｉ）のペプチド配列１〜１０
    単位からなり、有機基が単糖、オリゴ糖または多糖誘導
    体であることを特徴とする請求項１７記載のペプチド誘
    導体あるいはその薬理学的に許容される塩。
29. 【請求項２９】 単糖、オリゴ糖または多糖誘導体の糖
    鎖上に少なくとも一つのカルボキシル基、スルホ基、硫
    酸基またはリン酸基を有することを特徴とする請求項２
    ８記載のペプチド誘導体。