JP2745342B2 - プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途 - Google Patents
プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途Info
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Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Arg-Gly-Asp のトリペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体、
その重合物及びその塩、並びにそれを有効成分とする動
物細胞の接着阻害剤及び血小板の凝集・粘着抑制剤に関
するものである。また、Arg-Gly-Asp のトリペプチドを
必須単位として有するプロペンアミド誘導体の架橋共重
合物及びその塩、並びにそれを有効成分とする細胞培養
基体に関するものである。
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体、
その重合物及びその塩、並びにそれを有効成分とする動
物細胞の接着阻害剤及び血小板の凝集・粘着抑制剤に関
するものである。また、Arg-Gly-Asp のトリペプチドを
必須単位として有するプロペンアミド誘導体の架橋共重
合物及びその塩、並びにそれを有効成分とする細胞培養
基体に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのArg-Gly-Asp 配列
を特異的に認識することが明らかにされ、レセプターと
の相互作用に重要なものであることが報告されている
（ネイチャー（Nature) 、第309 巻、30頁、1984年）。
以来、Arg-Gly-Asp 配列を有するオリゴあるいはポリペ
プチドを用いる研究が成されている。
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのArg-Gly-Asp 配列
を特異的に認識することが明らかにされ、レセプターと
の相互作用に重要なものであることが報告されている
（ネイチャー（Nature) 、第309 巻、30頁、1984年）。
以来、Arg-Gly-Asp 配列を有するオリゴあるいはポリペ
プチドを用いる研究が成されている。
【０００３】例えば、Arg-Gly-Asp 配列を有する種々の
鎖状及び環状のオリゴペプチドを用いて血小板凝集を阻
害する方法（高分子学会予稿集（Polymer Preprints, J
apan）、第38巻、3149頁、1989年、特開平2-174797号)
、Arg-Gly-Asp 配列を有するペプチドを細胞移動抑制
剤として用いる方法（特開平2-4716号) 、Arg-Gly-Asp
を固定化したＰＭＭＡ膜を細胞接着膜として用いる方法
（高分子学会予稿集（Polymer Preprints, Japan）、第
37巻、705 頁、1988年) が報告されている。さらに、ポ
リマーにArg-Gly-Asp を必須構成単位とするペプチドを
共有結合させ動物細胞培養基体、生体複合人工臓器用基
体として用いる方法（特開平1-309682号、特開平1-3059
60号) 、Arg-Gly-Asp-Ser 配列を有するポリペプチドを
体外血液用血小板保護剤として用いる方法が開示されて
いる（特開昭64-6217 号) 、また、Arg-Gly-Asp 配列を
有するオリゴペプチドあるいはその繰り返し構造を有す
るポリペプチドを用いて、ガン転移を抑制する方法が知
られている((Int. J. Biol. Macromol.)、第11巻、23
頁、1989年、同誌、第11巻、226 頁、1989年、(Jpn. J.
Cancer Res.) 第60巻、722 頁、1989年) 。
鎖状及び環状のオリゴペプチドを用いて血小板凝集を阻
害する方法（高分子学会予稿集（Polymer Preprints, J
apan）、第38巻、3149頁、1989年、特開平2-174797号)
、Arg-Gly-Asp 配列を有するペプチドを細胞移動抑制
剤として用いる方法（特開平2-4716号) 、Arg-Gly-Asp
を固定化したＰＭＭＡ膜を細胞接着膜として用いる方法
（高分子学会予稿集（Polymer Preprints, Japan）、第
37巻、705 頁、1988年) が報告されている。さらに、ポ
リマーにArg-Gly-Asp を必須構成単位とするペプチドを
共有結合させ動物細胞培養基体、生体複合人工臓器用基
体として用いる方法（特開平1-309682号、特開平1-3059
60号) 、Arg-Gly-Asp-Ser 配列を有するポリペプチドを
体外血液用血小板保護剤として用いる方法が開示されて
いる（特開昭64-6217 号) 、また、Arg-Gly-Asp 配列を
有するオリゴペプチドあるいはその繰り返し構造を有す
るポリペプチドを用いて、ガン転移を抑制する方法が知
られている((Int. J. Biol. Macromol.)、第11巻、23
頁、1989年、同誌、第11巻、226 頁、1989年、(Jpn. J.
Cancer Res.) 第60巻、722 頁、1989年) 。
【０００４】一般に高分子物質は多様な性状、機能を有
し生体との間で示される相互作用も低分子の場合と非常
に異なっている。そこで低分子薬物、生理活性ペプチド
などを高分子に結合させることで、それらの化合物と細
胞との相互作用や生体内における挙動を制御しようとす
る研究が盛んに行なわれている。この様な、高分子のラ
イフサイエンスへの応用は、医用高分子材料、高分子医
薬、診断用材料、バイオリアクター、バイオアフィニテ
ィー材料などへ幅広く試みられており、これらに関する
高分子材料とその用途については、竹本喜一、砂本順
三、明石満 共編“高分子と医療”（三田出版会）、千
畑一郎編“バイオテクノロジーシリーズ固定化酵素”
（講談社）、山崎誠、石井信一、岩井浩一編“アフィニ
ティークロマトグラフィー”（講談社）に詳しく記載さ
れている。
し生体との間で示される相互作用も低分子の場合と非常
に異なっている。そこで低分子薬物、生理活性ペプチド
などを高分子に結合させることで、それらの化合物と細
胞との相互作用や生体内における挙動を制御しようとす
る研究が盛んに行なわれている。この様な、高分子のラ
イフサイエンスへの応用は、医用高分子材料、高分子医
薬、診断用材料、バイオリアクター、バイオアフィニテ
ィー材料などへ幅広く試みられており、これらに関する
高分子材料とその用途については、竹本喜一、砂本順
三、明石満 共編“高分子と医療”（三田出版会）、千
畑一郎編“バイオテクノロジーシリーズ固定化酵素”
（講談社）、山崎誠、石井信一、岩井浩一編“アフィニ
ティークロマトグラフィー”（講談社）に詳しく記載さ
れている。
【０００５】プロペン酸誘導体から合成したプロペンア
ミド誘導体はビニル基を有しており、ビニル重合により
容易に重合物が得られ種々の材料に供することが出来
る。水不溶性のビニル重合体にArg-Gly-Asp を必須単位
とするオリゴペプチドを高分子反応により高分子に導入
した例は見られるが、Arg-Gly-Asp を必須単位とするオ
リゴペプチドを側鎖に有する単独重合可能なプロペンア
ミド誘導体とその水溶性重合物およびハイドロゲルは知
られておらず、これらはレセプターとの結合能の増強お
よび血液中での安定化等が期待できる。
ミド誘導体はビニル基を有しており、ビニル重合により
容易に重合物が得られ種々の材料に供することが出来
る。水不溶性のビニル重合体にArg-Gly-Asp を必須単位
とするオリゴペプチドを高分子反応により高分子に導入
した例は見られるが、Arg-Gly-Asp を必須単位とするオ
リゴペプチドを側鎖に有する単独重合可能なプロペンア
ミド誘導体とその水溶性重合物およびハイドロゲルは知
られておらず、これらはレセプターとの結合能の増強お
よび血液中での安定化等が期待できる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
なプロペンアミド誘導体とその重合物及びその塩、並び
にそれを有効成分とする動物細胞の接着阻害剤、血小板
凝集・粘着抑制剤および細胞培養基体を提供することで
ある。
なプロペンアミド誘導体とその重合物及びその塩、並び
にそれを有効成分とする動物細胞の接着阻害剤、血小板
凝集・粘着抑制剤および細胞培養基体を提供することで
ある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明は、下記一般式
〔Ｉ〕の側鎖に、下記一般式〔II〕で表される接着性ペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体と
その重合物又はその塩を提供するものである。
〔Ｉ〕の側鎖に、下記一般式〔II〕で表される接着性ペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体と
その重合物又はその塩を提供するものである。
【０００８】 一般式〔Ｉ〕 R1R2C＝CR3 −CO−［NH］− 式中、Ｒ1 、Ｒ2 は水素原子又はカルボキシル基を表
し、Ｒ3 は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲン原
子又はカルボキシメチル基を表す。
し、Ｒ3 は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲン原
子又はカルボキシメチル基を表す。
【０００９】 一般式〔ＩＩ〕 −（Ｒ ４ ）−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［Ｙ］）ｎ− ［Ｚ］−Ｈ 一般式〔ＩＩＩ〕 Ｈ−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］− （Ｒ ５ ）− 一般式〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ〕において 、Ｘ、ＹはＳｅ
ｒ，Ｇｌｙ，Ｖａｌ，Ａｓｎ，Ｐｒｏから選択されるア
ミノ酸残基又はペプチド残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は−
ＮＨ−を表す。Ｒ４、Ｒ５は、炭素数が１〜１１の直鎖
又は分岐のアルキレン基、又は炭素数が６〜１１のアリ
ーレン基を表し、置換基を有していてもよい。置換基と
しては、カルボニル基、カルボキシル基、アミノ基、ヒ
ドロキシル基、スルホ基、ハロゲン原子、アリール基、
ニトロ基、シアノ基、不飽和基の２重結合、３重結合等
があげられ、同一鎖に２つ以上有していてもよい。ｎは
１〜５の整数を表す。
ｒ，Ｇｌｙ，Ｖａｌ，Ａｓｎ，Ｐｒｏから選択されるア
ミノ酸残基又はペプチド残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は−
ＮＨ−を表す。Ｒ４、Ｒ５は、炭素数が１〜１１の直鎖
又は分岐のアルキレン基、又は炭素数が６〜１１のアリ
ーレン基を表し、置換基を有していてもよい。置換基と
しては、カルボニル基、カルボキシル基、アミノ基、ヒ
ドロキシル基、スルホ基、ハロゲン原子、アリール基、
ニトロ基、シアノ基、不飽和基の２重結合、３重結合等
があげられ、同一鎖に２つ以上有していてもよい。ｎは
１〜５の整数を表す。
【００１０】一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ〕にお
いて、［］は［］内の基が存在するかあるいは存在しな
くてもよいことを示す。
いて、［］は［］内の基が存在するかあるいは存在しな
くてもよいことを示す。
【００１１】本発明の、Arg-Gly-Asp を必須単位として
有するペプチド断片のＮ末端に結合する単量体として
は、Ｎ−メタクリロイルグリシン、Ｎ−メタクリロイル
−β−アラニン、Ｎ−メタクリロイルアラニン、Ｎ−メ
タクリロイル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−メタクリロイルバ
リン、Ｎ−メタクリロイルロイシン、Ｎ−メタクリロイ
ルイソロイシン、Ｎ−メタクリロイルノルバリン、Ｎ−
メタクリロイルノルロイシン、Ｎ−メタクリロイルセリ
ン、Ｎ−メタクリロイルスレオニン、Ｎ−メタクリロイ
ルメチオニン、Ｎ−メタクリロイルフェニルアラニン、
Ｎ−メタクリロイルチロシン、Ｎ−α−メタクリロイル
トリプトファン、Ｎ−メタクリロイルプロリン、Ｎ−メ
タクリロイルヒドロキシプロリン、Ｎ−メタクリロイル
アスパラギン酸、Ｎ−メタクリロイルアスパラギン、Ｎ
−メタクリロイルグルタミン酸、Ｎ−メタクリロイルグ
ルタミン、Ｎ−α−メタクリロイルアルギニン、Ｎ−α
−メタクリロイルシトルリン等の各種α、β、γあるい
はω−アミノ酸残基を有するプロペンアミド誘導体が挙
げられる。
有するペプチド断片のＮ末端に結合する単量体として
は、Ｎ−メタクリロイルグリシン、Ｎ−メタクリロイル
−β−アラニン、Ｎ−メタクリロイルアラニン、Ｎ−メ
タクリロイル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−メタクリロイルバ
リン、Ｎ−メタクリロイルロイシン、Ｎ−メタクリロイ
ルイソロイシン、Ｎ−メタクリロイルノルバリン、Ｎ−
メタクリロイルノルロイシン、Ｎ−メタクリロイルセリ
ン、Ｎ−メタクリロイルスレオニン、Ｎ−メタクリロイ
ルメチオニン、Ｎ−メタクリロイルフェニルアラニン、
Ｎ−メタクリロイルチロシン、Ｎ−α−メタクリロイル
トリプトファン、Ｎ−メタクリロイルプロリン、Ｎ−メ
タクリロイルヒドロキシプロリン、Ｎ−メタクリロイル
アスパラギン酸、Ｎ−メタクリロイルアスパラギン、Ｎ
−メタクリロイルグルタミン酸、Ｎ−メタクリロイルグ
ルタミン、Ｎ−α−メタクリロイルアルギニン、Ｎ−α
−メタクリロイルシトルリン等の各種α、β、γあるい
はω−アミノ酸残基を有するプロペンアミド誘導体が挙
げられる。
【００１２】好ましくは、Ｎ−メタクリロイルグリシ
ン、Ｎ−メタクリロイル−β−アラニン、Ｎ−メタクリ
ロイルアラニン、Ｎ−メタクリロイル−β−アミノプロ
ピオン酸、Ｎ−メタクリロイル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−
メタクリロイルバリン、Ｎ−メタクリロイルロイシン、
Ｎ−メタクリロイルイソロイシン、Ｎ−メタクリロイル
ノルバリン、Ｎ−メタクリロイルノルロイシンである。
ン、Ｎ−メタクリロイル−β−アラニン、Ｎ−メタクリ
ロイルアラニン、Ｎ−メタクリロイル−β−アミノプロ
ピオン酸、Ｎ−メタクリロイル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−
メタクリロイルバリン、Ｎ−メタクリロイルロイシン、
Ｎ−メタクリロイルイソロイシン、Ｎ−メタクリロイル
ノルバリン、Ｎ−メタクリロイルノルロイシンである。
【００１３】本発明の、Arg-Gly-Asp を必須単位として
有するペプチド断片のＣ末端に結合する単量体として
は、ジアミノアルキル誘導体およびジアミノアリール誘
導体のモノメタクリルアミドが挙げられるが、好ましく
はエチレンジアミンモノメタクリルアミド、１，３−ジ
アミノプロパンモノメタクリルアミド、１，４−ジアミ
ノブタンモノメタクリルアミドおよび１，６−ジアミノ
ヘキサンモノメタクリルアミドである。
有するペプチド断片のＣ末端に結合する単量体として
は、ジアミノアルキル誘導体およびジアミノアリール誘
導体のモノメタクリルアミドが挙げられるが、好ましく
はエチレンジアミンモノメタクリルアミド、１，３−ジ
アミノプロパンモノメタクリルアミド、１，４−ジアミ
ノブタンモノメタクリルアミドおよび１，６−ジアミノ
ヘキサンモノメタクリルアミドである。
【００１４】本発明はさらに、上記プロペンアミド誘導
体の重合物又はその塩を有効成分とする動物細胞の接着
阻害剤および血小板凝集・粘着抑制剤を提供するもので
ある。
体の重合物又はその塩を有効成分とする動物細胞の接着
阻害剤および血小板凝集・粘着抑制剤を提供するもので
ある。
【００１５】プロペンアミド誘導体の重合物又はその塩
の分子量は、好ましくは３０万以下、特に３０００〜２
０万の範囲で、室温で水溶性であることが好ましい。
の分子量は、好ましくは３０万以下、特に３０００〜２
０万の範囲で、室温で水溶性であることが好ましい。
【００１６】本発明はさらに、Arg-Gly-Asp のペプチド
配列を必須単位として共有結合してなる、上記プロペン
アミド誘導体の架橋重合物又はその塩を有効成分とする
動物細胞の培養基体を提供するものである。架橋物は水
溶液中でハイドロゲル状であることが好ましい。
配列を必須単位として共有結合してなる、上記プロペン
アミド誘導体の架橋重合物又はその塩を有効成分とする
動物細胞の培養基体を提供するものである。架橋物は水
溶液中でハイドロゲル状であることが好ましい。
【００１７】本発明に係わる接着性ペプチドに用いられ
るアミノ酸はＬ体、Ｄ体どちらでもよいが、好ましくは
Ｌ体である。
るアミノ酸はＬ体、Ｄ体どちらでもよいが、好ましくは
Ｌ体である。
【００１８】本発明のプロペンアミド誘導体重合物の塩
として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホ
ウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸
塩等の有機酸との塩が挙げられ、そのような塩への変換
は慣用手段で行なうことができる。
として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホ
ウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸
塩等の有機酸との塩が挙げられ、そのような塩への変換
は慣用手段で行なうことができる。
【００１９】ペプチド合成方法は特に限定されるもので
はなく、液相法、固相法、および自動合成装置による合
成方法が挙げられる。これらの合成方法の詳細について
は、生化学実験講座“タンパク質の化学IV”ｐ２０７−
４９５（日本生化学会編、東京化学同人）、“続生化学
実験講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編、
東京化学同人）、泉屋ら編“ペプチド合成の基礎と実
験”（丸善）に記載されている。また、市販されている
合成ペプチドを利用することも可能である。
はなく、液相法、固相法、および自動合成装置による合
成方法が挙げられる。これらの合成方法の詳細について
は、生化学実験講座“タンパク質の化学IV”ｐ２０７−
４９５（日本生化学会編、東京化学同人）、“続生化学
実験講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編、
東京化学同人）、泉屋ら編“ペプチド合成の基礎と実
験”（丸善）に記載されている。また、市販されている
合成ペプチドを利用することも可能である。
【００２０】プロペン酸誘導体と細胞接着性ペプチドと
の結合方法としては、活性エステル法、混合酸無水物
法、アジド法、酸塩化物法、対称酸無水物法、ＤＣＣ
法、ＤＣＣ−アディティブ法、カルボニルジイミダゾー
ル法等を利用したアミド結合合成方法が挙げられる。プ
ロペンアミド誘導体の重合物および架橋重合物は一般の
ラジカル重合法、イオン重合法により得られる。水溶性
重合物はゲルろ過法、透析法等により特定の分子量分画
を行なうことが出来る。架橋重合物は多官能性モノマー
の組成を変えることで含水率、ゲル強度等の物性が異な
るハイドロゲルとして得ることができる。架橋重合物
中、多官能性単量体由来の構成単位の含有量は好ましく
は０．１〜３０モル％であり、さらに好ましくは０．５
〜２０モル％である。
の結合方法としては、活性エステル法、混合酸無水物
法、アジド法、酸塩化物法、対称酸無水物法、ＤＣＣ
法、ＤＣＣ−アディティブ法、カルボニルジイミダゾー
ル法等を利用したアミド結合合成方法が挙げられる。プ
ロペンアミド誘導体の重合物および架橋重合物は一般の
ラジカル重合法、イオン重合法により得られる。水溶性
重合物はゲルろ過法、透析法等により特定の分子量分画
を行なうことが出来る。架橋重合物は多官能性モノマー
の組成を変えることで含水率、ゲル強度等の物性が異な
るハイドロゲルとして得ることができる。架橋重合物
中、多官能性単量体由来の構成単位の含有量は好ましく
は０．１〜３０モル％であり、さらに好ましくは０．５
〜２０モル％である。
【００２１】多官能性単量体としては、トリエチレング
リコールジメタクリレート、メチレンビスアクリルアミ
ド等のジメタクリレート、ジアクリレート、ジメタクリ
ルアミド、ジアクリルアミドやジビニルベンゼン等の芳
香環を有する多官能性単量体、さらに細胞接着性フラグ
メントを有する多官能性単量体等を用いることができ
る。
リコールジメタクリレート、メチレンビスアクリルアミ
ド等のジメタクリレート、ジアクリレート、ジメタクリ
ルアミド、ジアクリルアミドやジビニルベンゼン等の芳
香環を有する多官能性単量体、さらに細胞接着性フラグ
メントを有する多官能性単量体等を用いることができ
る。
【００２２】本発明のプロペンアミド誘導体およびその
重合物又はその塩は、細胞接着性蛋白質のコア配列Arg-
Gly-Asp を有し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質
と同様の機序で細胞に接着する。そのため、細胞接着性
蛋白のアゴニスト又はアンタゴニストとして種々の生物
活性を示し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中
で起こる癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治
癒作用などの広範な生物活性が認められている。
重合物又はその塩は、細胞接着性蛋白質のコア配列Arg-
Gly-Asp を有し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質
と同様の機序で細胞に接着する。そのため、細胞接着性
蛋白のアゴニスト又はアンタゴニストとして種々の生物
活性を示し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中
で起こる癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治
癒作用などの広範な生物活性が認められている。
【００２３】従って、本発明のプロペンアミド誘導体お
よびその重合物又はその塩は、その少なくとも一種を、
場合により慣用の担体又は医薬用助剤とともに、癌転移
抑制剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制
剤として患者に投与することが可能である。特に、動物
細胞接着阻害剤又は血小板凝集粘着抑制剤としての使用
が好ましい。その投与量は、0.２μｇ／kg〜４００mg／
kgの範囲で、症状、年齢、体重等に基づいて決定され
る。
よびその重合物又はその塩は、その少なくとも一種を、
場合により慣用の担体又は医薬用助剤とともに、癌転移
抑制剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制
剤として患者に投与することが可能である。特に、動物
細胞接着阻害剤又は血小板凝集粘着抑制剤としての使用
が好ましい。その投与量は、0.２μｇ／kg〜４００mg／
kgの範囲で、症状、年齢、体重等に基づいて決定され
る。
【００２４】本発明のプロペンアミド誘導体およびその
重合物又はその塩は、ペプチド系医薬に一般に使用され
ている投与方法、即ち非経口投与方法、例えば静脈内投
与、筋肉内投与、皮下投与等によって投与するのが好ま
しい。そのような注射用製剤を製造する場合、本発明の
プロペンアミド誘導体およびその重合物又はその塩を例
えば、後記実施例で示すようにＰＢＳ又は生理食塩水に
溶解して、注射用製剤としてもよく、あるいは0.１Ｎ程
度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製剤としてもよ
い。この様な製剤には、グリシンやアルブミン等の慣用
の安定剤を添加してもよい。さらに、本発明のプロペン
アミド誘導体およびその重合物又はその塩は、例えばリ
ポソーム中に包容したマイクロカプセル剤あるいはミク
ロスフェア状、ハイドロゲル状とすれば、経口投与する
ことも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤等の
形にすれば、消化管以外の粘膜からも吸収させることも
可能である。
重合物又はその塩は、ペプチド系医薬に一般に使用され
ている投与方法、即ち非経口投与方法、例えば静脈内投
与、筋肉内投与、皮下投与等によって投与するのが好ま
しい。そのような注射用製剤を製造する場合、本発明の
プロペンアミド誘導体およびその重合物又はその塩を例
えば、後記実施例で示すようにＰＢＳ又は生理食塩水に
溶解して、注射用製剤としてもよく、あるいは0.１Ｎ程
度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製剤としてもよ
い。この様な製剤には、グリシンやアルブミン等の慣用
の安定剤を添加してもよい。さらに、本発明のプロペン
アミド誘導体およびその重合物又はその塩は、例えばリ
ポソーム中に包容したマイクロカプセル剤あるいはミク
ロスフェア状、ハイドロゲル状とすれば、経口投与する
ことも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤等の
形にすれば、消化管以外の粘膜からも吸収させることも
可能である。
【００２５】動物細胞の培養における細胞培養基体の使
用方法については、通常の方法で行なわれ特に限定され
ない。例えば、接着性ペプチドを共有結合処理したビー
ズ培養液中に浮遊させて低速度で撹拌を行なうことで動
物細胞をマイクロキャリアー表面に接着させ培養する方
法、接着性ペプチドを共有結合処理したシャーレ・ロー
ラーびん等の上で動物細胞を培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理した中空糸に培養液を還流させ動物
細胞を中空糸内面に接着させ培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理したマイクロキャリアーを充填した
カラムを用いる方法等が挙げられる。
用方法については、通常の方法で行なわれ特に限定され
ない。例えば、接着性ペプチドを共有結合処理したビー
ズ培養液中に浮遊させて低速度で撹拌を行なうことで動
物細胞をマイクロキャリアー表面に接着させ培養する方
法、接着性ペプチドを共有結合処理したシャーレ・ロー
ラーびん等の上で動物細胞を培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理した中空糸に培養液を還流させ動物
細胞を中空糸内面に接着させ培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理したマイクロキャリアーを充填した
カラムを用いる方法等が挙げられる。
【００２６】この発明の細胞培養基体は、種々の細胞の
培養に使用することができ、細胞の種類は特に限定され
ず、生体由来細胞、ハイブリドーマ等が挙げられる。
培養に使用することができ、細胞の種類は特に限定され
ず、生体由来細胞、ハイブリドーマ等が挙げられる。
【００２７】
【実施例】以下実施例により本発明を更に説明するが本
発明はこれに限定されるものではない。
発明はこれに限定されるものではない。
【００２８】 製造例１ カルボキシエチルメタクリルアミドをショッテンバウマ
ン反応により合成した。即ち、β−アラニン１7.８ｇ
（0.２mol)の水酸化ナトリウム水溶液にメタクリル酸ク
ロリド２0.９ｇ（0.２mol)を氷冷下滴下し、４時間撹拌
後、塩酸により中和した。減圧濃縮し、沈澱した塩化ナ
トリウムをろ別した。濃縮液をクロロホルムで抽出し、
乾燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去した。濃縮物を
エーテルで洗浄し製造物１を白色固体として１7.６ｇ得
た。（収率５６％）製造物１ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−COOH
ン反応により合成した。即ち、β−アラニン１7.８ｇ
（0.２mol)の水酸化ナトリウム水溶液にメタクリル酸ク
ロリド２0.９ｇ（0.２mol)を氷冷下滴下し、４時間撹拌
後、塩酸により中和した。減圧濃縮し、沈澱した塩化ナ
トリウムをろ別した。濃縮液をクロロホルムで抽出し、
乾燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去した。濃縮物を
エーテルで洗浄し製造物１を白色固体として１7.６ｇ得
た。（収率５６％）製造物１ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−COOH
【００２９】 製造例２〜８ 製造例１と同じ方法によりアクリル酸クロリド、メタク
リル酸クロリド、エタクリル酸クロリドと４−アミノ酪
酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、１２−
アミノラウリン酸、ロイシン、グルタミン、ｐ−アミノ
安息香酸との反応により以下のプロペン酸誘導体を製造
した。 製造物２ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)3−COOH 収率５２％ 製造物３ CH2＝CC2H5 −CO−NH−(CH2)4−COOH 収率６１％ 製造物４ CH2＝CCH3−CO−NH−(CH2)5−COOH 収率６９％ 製造物５ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)11 −COOH 収率７１％ 製造物６ CH2＝CH−CO−NH−CH(CH2CH(CH3)2) −COOH 収率６４％ 製造物７ CH2＝CCH3−CO−NH−CH(C2H4CONH2) −COOH 収率５９％ 製造物８ CH2＝CH−CO−NH−p −C6H4−COOH 収率６８％
リル酸クロリド、エタクリル酸クロリドと４−アミノ酪
酸、５−アミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、１２−
アミノラウリン酸、ロイシン、グルタミン、ｐ−アミノ
安息香酸との反応により以下のプロペン酸誘導体を製造
した。 製造物２ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)3−COOH 収率５２％ 製造物３ CH2＝CC2H5 −CO−NH−(CH2)4−COOH 収率６１％ 製造物４ CH2＝CCH3−CO−NH−(CH2)5−COOH 収率６９％ 製造物５ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)11 −COOH 収率７１％ 製造物６ CH2＝CH−CO−NH−CH(CH2CH(CH3)2) −COOH 収率６４％ 製造物７ CH2＝CCH3−CO−NH−CH(C2H4CONH2) −COOH 収率５９％ 製造物８ CH2＝CH−CO−NH−p −C6H4−COOH 収率６８％
【００３０】 製造例９ アミノエチルメタクリルアミドをショッテンバウマン反
応により合成した。即ち、エチレンジアミン１２０ｇ
（２mol)を溶かしたクロロホルム溶液（４００ml）へ、
メタクリル酸クロリド２0.９ｇ（0.２mol)を氷冷下滴下
し４時間撹拌後減圧濃縮してクロロホルムを留去した。
濃縮物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液５０mlを加えク
ロロホルムで抽出した。硫酸ナトリウム上で乾燥の後濃
縮し、クロロホルム／メタノール＝７／３を溶離液とし
たアルミナカラムクロマトグラフィーにより精製した。
応により合成した。即ち、エチレンジアミン１２０ｇ
（２mol)を溶かしたクロロホルム溶液（４００ml）へ、
メタクリル酸クロリド２0.９ｇ（0.２mol)を氷冷下滴下
し４時間撹拌後減圧濃縮してクロロホルムを留去した。
濃縮物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液５０mlを加えク
ロロホルムで抽出した。硫酸ナトリウム上で乾燥の後濃
縮し、クロロホルム／メタノール＝７／３を溶離液とし
たアルミナカラムクロマトグラフィーにより精製した。
【００３１】 収量１4.８ｇ（５7.８％、0.１１６mol) 製造物９ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−NH2
【００３２】 製造例１０ 製造例１で合成したカルボキシエチルメタクリルアミド
をラジカル重合により重合した。カルボキシエチルメタ
クリルアミド２ｇを２０mlのＤＭＦに溶解し、和光純薬
製のラジカル開始剤Ｖ65（２，２−アゾビス（２，４−
ジメチルバレロニトリル））１０mgを加え窒素気流下６
５℃で４時間重合した。重合物は酢酸エチルで沈澱させ
た後、スペクトラポア７（分子分画量３０００）を用い
純水に対して透析し低分子量画分を除いた後凍結乾燥し
た。収量1.２４ｇ（製造物１０）分子量は東ソー（株）
製 TSKgel G3000SW カラムを用い、移動相は0.２Ｍリン
酸緩衝液（pH7.４）とし、流速1.０ml／min で測定し
た。ＰＥＧ換算分子量は約３００００であった。
をラジカル重合により重合した。カルボキシエチルメタ
クリルアミド２ｇを２０mlのＤＭＦに溶解し、和光純薬
製のラジカル開始剤Ｖ65（２，２−アゾビス（２，４−
ジメチルバレロニトリル））１０mgを加え窒素気流下６
５℃で４時間重合した。重合物は酢酸エチルで沈澱させ
た後、スペクトラポア７（分子分画量３０００）を用い
純水に対して透析し低分子量画分を除いた後凍結乾燥し
た。収量1.２４ｇ（製造物１０）分子量は東ソー（株）
製 TSKgel G3000SW カラムを用い、移動相は0.２Ｍリン
酸緩衝液（pH7.４）とし、流速1.０ml／min で測定し
た。ＰＥＧ換算分子量は約３００００であった。
【００３３】 製造例１１ 製造例１で合成したカルボキシエチルメタクリルアミド
をラジカル重合により重合しハイドロゲルを作成した。
をラジカル重合により重合しハイドロゲルを作成した。
【００３４】シラン処理したガラス板（５cm×６cm×１
cm）２枚とガスケットを用意した。カルボキシエチルメ
タクリルアミド２ｇとメチレンビスアクリルアミド１０
０mg（５wt％）を蒸留水１２mlに溶解し１Ｎ NaOH でpH
7.４に合わせた。これに過硫酸アンモニウム１０mgを加
え充分窒素置換をした後、ガラス板の間に注入した。万
力でガラス板を押え、６０℃で２０時間重合させた。生
成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応モノマーを
除いた。（紫外線ランプにより滅菌処理した後細胞培養
実験に供した）（製造物１１）
cm）２枚とガスケットを用意した。カルボキシエチルメ
タクリルアミド２ｇとメチレンビスアクリルアミド１０
０mg（５wt％）を蒸留水１２mlに溶解し１Ｎ NaOH でpH
7.４に合わせた。これに過硫酸アンモニウム１０mgを加
え充分窒素置換をした後、ガラス板の間に注入した。万
力でガラス板を押え、６０℃で２０時間重合させた。生
成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応モノマーを
除いた。（紫外線ランプにより滅菌処理した後細胞培養
実験に供した）（製造物１１）
【００３５】 合成例１〜１４ 接着性ペプチドの固相法による合成 Merrifield方式によるペプチド合成装置を用いて合成を
行なった。α−アミノ酸の保護には、Ｂco基を用いArg-
Gly-Asp を必須単位として含むオリゴペプチドを合成し
その末端に製造例１〜８に示したプロペン酸誘導体およ
びアクリル酸、メタクリル酸、エタクリル酸を縮合させ
た。トリフルオロメタンスルホン酸を用いて樹脂からの
切断及び側鎖保護基の除去を行ない、分取用ＨＰＬＣ
（高速液体クロマトグラフィー）で精製し、単一ピーク
を示すプロペンアミド誘導体を得た。これを、陰イオン
交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００；Ｃｌ
型）を通し塩酸塩とした。
行なった。α−アミノ酸の保護には、Ｂco基を用いArg-
Gly-Asp を必須単位として含むオリゴペプチドを合成し
その末端に製造例１〜８に示したプロペン酸誘導体およ
びアクリル酸、メタクリル酸、エタクリル酸を縮合させ
た。トリフルオロメタンスルホン酸を用いて樹脂からの
切断及び側鎖保護基の除去を行ない、分取用ＨＰＬＣ
（高速液体クロマトグラフィー）で精製し、単一ピーク
を示すプロペンアミド誘導体を得た。これを、陰イオン
交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００；Ｃｌ
型）を通し塩酸塩とした。
【００３６】以下、ＡrgをＲ、ＧlyをＧ、ＡspをＤ、Ｓ
erをＳ、ＰroをＰと示す。また保護基、試薬の略号は以
下の様である。
erをＳ、ＰroをＰと示す。また保護基、試薬の略号は以
下の様である。
【００３７】 Ｂoc ：ｔ−ブトキシカルボニル ＯＢzl ：ベンジルエステル ＨＯＢｔ ：ヒドロキシベンゾトリアゾール ＯＳｕ ：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド ＯＮｂ ：ニトロベンジルエステル ＴＦＡ ：トリフルオロ酢酸 ＤＣＣ ：ジシクロヘキシルカルボジイミド ＤＣ urea ：シクロヘキシルウレア Ｍts ：メシチレンスルホニル ＤＭＦ ：ジメチルホルムアミド
【００３８】 合成物１ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)3−CO−RGD （配列番号１） 収率３５％
【００３９】 合成物２ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−(RGD)2 （配列番号２）
【００４０】 合成物３ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−(RGD)3 （配列番号３） 収率１７％
【００４１】 合成物４ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−(RGD)5 （配列番号４） 収率１０％
【００４２】 合成物５ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)3−CO−RGDS （配列番号５） 収率３３％
【００４３】 合成物６ CH2＝CC2H5 −CO−NH−(CH2)4−CO−RGDS （配列番号６） 収率３１％
【００４４】 合成物７ CH2＝CCH3−CO−NH−(CH2)5−CO−RGDS （配列番号７） 収率３０％
【００４５】 合成物８ CH2＝CH−CO−NH−(CH2)11 −CO−RGDS （配列番号８） 収率２７％ マススペクトル Ｍ＋ ： ６８６
【００４６】 合成物９ CH2＝CH−CO−NH−CH(CH2CH(CH3)2) −CO−RGDS （配列番号９） 収率３１％
【００４７】 合成物１０ CH2＝CCH3−CO−NH−CH(C2H4CONH2) −CO−RGDS （配列番号１０） 収率３３％
【００４８】 合成物１１ CH2＝CH−CO−NH−p −C6H4−CO−RGDS （配列番号１１） 収率３１％
【００４９】 合成物１２ CH2＝CC2H5 −CO−NH−(CH2)4−CO−GRGDS （配列番号１２） 収率３５％
【００５０】 合成物１３ CH2＝CCH3−CO−GRGDSP （配列番号１３） 収率２６％
【００５１】 合成物１４ CH2＝CH−CO−GGGRGDS （配列番号１４） 収率３０％
【００５２】 合成例１５ 合成物１５ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−RGDS （配列番号１５）
【００５３】 合成物１５を逐次延長法により液相法で合成した。 (1) BocSer(Bzl)OBzl の合成 BocSer(Bzl) ６０ｇ（0.２mol)を４００mlの酢酸エチル
に加え、さらにトリエチルアミン２１ｇ（0.２mol)、臭
化ベンジル３5.４ｇ（0.２mol)を加えて還流下４時間反
応させた。冷却後、塩をろ別し、NaHCO3水溶液、NaCl水
溶液で洗浄した。これをNa2SO4で乾燥した後減圧乾固
し、白色粉末５４ｇ（収率６８％）を得た。
に加え、さらにトリエチルアミン２１ｇ（0.２mol)、臭
化ベンジル３5.４ｇ（0.２mol)を加えて還流下４時間反
応させた。冷却後、塩をろ別し、NaHCO3水溶液、NaCl水
溶液で洗浄した。これをNa2SO4で乾燥した後減圧乾固
し、白色粉末５４ｇ（収率６８％）を得た。
【００５４】(2) BocAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzlの合成 BocSer(Bzl)OBzl ３０ｇ（７８mmol）にＴＦＡ／CH2Cl2
＝１／１ ２００mlを加え室温で１時間撹拌した後、Ｔ
ＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解
しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗浄した。Na
2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
＝１／１ ２００mlを加え室温で１時間撹拌した後、Ｔ
ＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解
しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗浄した。Na
2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
【００５５】この化合物と、BocAsp(OBzl)OSu ３2.８ｇ
（７８mmol）をCH2Cl2５００mlに溶解し終夜撹拌した。
減圧下CH2Cl2を留去してから酢酸エチルに溶解した。Na
HCO3水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液の順に洗
浄し、Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色粉末を４
１ｇ（収率８９％）得た。
（７８mmol）をCH2Cl2５００mlに溶解し終夜撹拌した。
減圧下CH2Cl2を留去してから酢酸エチルに溶解した。Na
HCO3水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液の順に洗
浄し、Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色粉末を４
１ｇ（収率８９％）得た。
【００５６】(3) BocGlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzl の合成 BocAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzl ３５ｇ（５９mmol）にＴＦ
Ａ：CH2Cl2＝１：１２００mlを加え室温で１時間撹拌し
た後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エチ
ルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗浄
し、Na2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
Ａ：CH2Cl2＝１：１２００mlを加え室温で１時間撹拌し
た後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エチ
ルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗浄
し、Na2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
【００５７】この化合物とBocGly 9.８ｇ（５９mmol）
をCH2Cl2に溶解し、ＤＣＣ１2.２ｇ（５９mmol）を氷冷
下加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌し
た。DCureaをろ別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解
した。NaHCO3水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液
の順に洗浄し、Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色
粉末を３0.５ｇ（収率７５％）得た。
をCH2Cl2に溶解し、ＤＣＣ１2.２ｇ（５９mmol）を氷冷
下加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌し
た。DCureaをろ別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解
した。NaHCO3水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液
の順に洗浄し、Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色
粉末を３0.５ｇ（収率７５％）得た。
【００５８】(4) BocArg(Mts)GlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBz
l の合成 BocGlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzl ２５ｇ（３９mmol）にＴ
ＦＡ：CH2Cl2＝１：１２００mlを加え室温で１時間撹拌
した後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エ
チルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗
浄した。Na2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去し
た。
l の合成 BocGlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzl ２５ｇ（３９mmol）にＴ
ＦＡ：CH2Cl2＝１：１２００mlを加え室温で１時間撹拌
した後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。これを酢酸エ
チルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後NaCl水溶液で洗
浄した。Na2SO4で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去し
た。
【００５９】この化合物とBocArg(Mts) １7.８ｇ（３９
mmol）をＤＭＦ４００mlに溶解し、ＤＣＣ8.０ｇ（３９
mmol）、 HOBt 6.８ｇ（４５mmol）を氷冷下加え３時間
撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。DCureaをろ
別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。NaHCO3水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液の順に洗浄し、
Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色粉末を１9.５ｇ
（収率５０％）得た。
mmol）をＤＭＦ４００mlに溶解し、ＤＣＣ8.０ｇ（３９
mmol）、 HOBt 6.８ｇ（４５mmol）を氷冷下加え３時間
撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。DCureaをろ
別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。NaHCO3水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、NaCl水溶液の順に洗浄し、
Na2SO4で乾燥してから減圧乾固して白色粉末を１9.５ｇ
（収率５０％）得た。
【００６０】(5) 合成物１５の合成 BocArg(Mts)GlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)OBzl１5.０ｇ（１５m
mol）にＴＦＡ：CH2Cl2＝１：１を１００ml加えて室温
で１時間撹拌した後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。
これを酢酸エチルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後、
NaCl水溶液で洗浄した。Na2SO4で乾燥してから酢酸エチ
ルを減圧留去した。
mol）にＴＦＡ：CH2Cl2＝１：１を１００ml加えて室温
で１時間撹拌した後、ＴＦＡとCH2Cl2を減圧濃縮した。
これを酢酸エチルに溶解しNaHCO3水溶液で中和した後、
NaCl水溶液で洗浄した。Na2SO4で乾燥してから酢酸エチ
ルを減圧留去した。
【００６１】この化合物とカルボキシエチルメタクリル
アミド2.４ｇ（１５mmol）をCH2Cl2２００mlに溶解しＤ
ＣＣ3.１ｇ（１５mmol）を氷冷下加え３時間撹拌してか
ら、さらに室温で終夜撹拌した。減圧濃縮してからアセ
トンを加え、生じたDCureaをろ別した。減圧濃縮後、酢
酸エチルに続いてエーテルで洗浄し、減圧乾燥して白色
粉末を１0.０ｇ（収率６５％）得た。
アミド2.４ｇ（１５mmol）をCH2Cl2２００mlに溶解しＤ
ＣＣ3.１ｇ（１５mmol）を氷冷下加え３時間撹拌してか
ら、さらに室温で終夜撹拌した。減圧濃縮してからアセ
トンを加え、生じたDCureaをろ別した。減圧濃縮後、酢
酸エチルに続いてエーテルで洗浄し、減圧乾燥して白色
粉末を１0.０ｇ（収率６５％）得た。
【００６２】この化合物１０ｇ（9.８mmol）のＴＦＡ溶
液に、１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニ
ソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加えて１
時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基の脱保
護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイル状の
沈澱物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後、陰イ
オン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００；
Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白色固体4.
８ｇ（収率８０％）が得られた。
液に、１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニ
ソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加えて１
時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基の脱保
護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイル状の
沈澱物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後、陰イ
オン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００；
Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白色固体4.
８ｇ（収率８０％）が得られた。
【００６３】 合成例１６ 合成物１６ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−RGDSGNH2 （配列番号１６）
【００６４】 合成例１５と同様な方法でペプチド鎖を延長した。以下
にその概略を示す。 (1) BocSer(Bzl)GlyNH2 の合成 BocSer(Bzl) ：５９ｇ（0.２mol) GlyNH2・HCl ：２2.１ｇ（0.２mol) N-メチルモルホリン ：２0.２ｇ（0.２mol) CH2Cl2 ：８００ml ＤＣＣ ：４1.２ｇ（0.２mol) (1) の収量 ５8.３ｇ（収率８３％）
にその概略を示す。 (1) BocSer(Bzl)GlyNH2 の合成 BocSer(Bzl) ：５９ｇ（0.２mol) GlyNH2・HCl ：２2.１ｇ（0.２mol) N-メチルモルホリン ：２0.２ｇ（0.２mol) CH2Cl2 ：８００ml ＤＣＣ ：４1.２ｇ（0.２mol) (1) の収量 ５8.３ｇ（収率８３％）
【００６５】 (2) BocAsp(OBzl)Ser(Bzl)GlyNH2の合成 (1) の生成物 ：５6.２ｇ（0.１６mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocAsp(OBzl) ：５1.７ｇ（0.１６mol) CH2Cl2 ：８００ml ＤＣＣ ：３３ｇ（0.１６mol) (2) の収量 ７1.２ｇ（収率８０％）
【００６６】 (3) BocGlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)GlyNH2の合成 (2) の生成物 ：６6.７ｇ（0.１２mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocGly ：５1.７ｇ（0.１２mol) CH2Cl2 ：７００ml ＤＣＣ ：２4.７（0.１２mol) (3) の収量 ６1.８ｇ（収率８４％） (4) BocArg(Mts)GlyAsp(OBzl)Ser(Bzl)GlyNH2 の合成 (3) の生成物 ：６1.３ｇ（0.１mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocArg(Mts) ：４5.６ｇ（0.１mol) ＤＭＦ ：８００ml ＤＣＣ ：２2.５（0.１mol) ＨＯＢｔ ：１４ｇ（0.１mol) (4) の収量 ４2.８ｇ（収率４５％）
【００６７】 (5) 合成物１６の合成 (4) の生成物 ：5.０ｇ（5.３mmol） TFA/CH2Cl2 ：５０ml／５０ml カルボキシエチルメタクリルアミド：0.８３ｇ（5.３mmol） ＤＭＦ ：５０ml ＤＣＣ ：1.１ｇ（5.３mmol） ＨＯＢｔ ：0.７２ｇ（5.３mmol） １Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−ｍ−クレゾールのＴ ＦＡ溶液 ：２５０ml
【００６８】合成例１７ 合成物１７ RGDG−NH−C2H4−NH−CO−CCH3＝CH2 （配列番号１７）
【００６９】 合成物１７を逐次延長法により液相法にて合成した。 (1) BocGlyONb の合成 BocGly３５ｇ（0.２mol)、トリエチルアミン２８ml（0.
２mol)および臭化ｐ−ニトロベンジル４3.２ｇ（0.２mo
l)を４００mlの酢酸エチルに溶解し、５時間還流した後
室温で一晩放置した。沈澱物をろ別しろ液を減圧濃縮し
た。酢酸エチル１０００mlに溶解し、水およびNaHCO3水
溶液で洗浄した後さらに水洗し、Na2SO4で乾燥、ろ液を
減圧濃縮し酢酸エチル−ヘキサンより再結晶した。５2.
７ｇ（収率８５％）。
２mol)および臭化ｐ−ニトロベンジル４3.２ｇ（0.２mo
l)を４００mlの酢酸エチルに溶解し、５時間還流した後
室温で一晩放置した。沈澱物をろ別しろ液を減圧濃縮し
た。酢酸エチル１０００mlに溶解し、水およびNaHCO3水
溶液で洗浄した後さらに水洗し、Na2SO4で乾燥、ろ液を
減圧濃縮し酢酸エチル−ヘキサンより再結晶した。５2.
７ｇ（収率８５％）。
【００７０】以下合成例１５と同様な方法でペプチド鎖
を延長した。以下に、その概略を示す。 (2) BocAsp(OBzl)GlyONbの合成 (1) の生成物 ：４6.５ｇ（0.１５mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocAsp(OBzl) ：４8.５ｇ（0.１５mol) CH2Cl2 ：７５０ml ＤＣＣ ：３0.９ｇ（0.１５mol) (2) の収量 ６4.０ｇ（収率８０％）
を延長した。以下に、その概略を示す。 (2) BocAsp(OBzl)GlyONbの合成 (1) の生成物 ：４6.５ｇ（0.１５mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocAsp(OBzl) ：４8.５ｇ（0.１５mol) CH2Cl2 ：７５０ml ＤＣＣ ：３0.９ｇ（0.１５mol) (2) の収量 ６4.０ｇ（収率８０％）
【００７１】 (3) BocGlyAsp(OBzl)GlyONb の合成 (2) の生成物 ：６4.０ｇ（0.１２mol) TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocGly ：２１ｇ（0.１２mol) CH2Cl2 ：７５０ml ＤＣＣ ：２4.７ｇ（0.１２mol) (3) の収量 ５8.８ｇ（収率８３％）
【００７２】 (4) BocArg(Mts)GlyAsp(OBzl)GlyONb の合成 (3) の生成物 ：５3.７ｇ（９１mmol） TFA/CH2Cl2 ：２００ml／２００ml BocArg(Mts) ：４1.５ｇ（９１mmol） ＤＭＦ ：８００ml ＤＣＣ ：１8.７ｇ（９１mmol） ＨＯＢｔ ：１3.５ｇ（0.１mol) (4) の収量 ４6.５ｇ（収率５５％）
【００７３】 (5) BocArg(Mts)GlyAsp(OBzl)Glyの合成 (4) の生成物9.２９ｇ（１０mmol）を９０％酢酸３００
mlに溶かし、Ｚn 末３2.７ｇ（0.５mol)を加え、０℃で
３時間撹拌した。Ｚn 末をろ別し、ろ液を減圧濃縮、こ
れにクエン酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出した。
Na2SO4で乾燥し減圧濃縮してからエーテルを加えて白色
粉末6.２６ｇ（収率７９％）を得た。
mlに溶かし、Ｚn 末３2.７ｇ（0.５mol)を加え、０℃で
３時間撹拌した。Ｚn 末をろ別し、ろ液を減圧濃縮、こ
れにクエン酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出した。
Na2SO4で乾燥し減圧濃縮してからエーテルを加えて白色
粉末6.２６ｇ（収率７９％）を得た。
【００７４】 (6) 合成物１７の合成 (5) の生成物 ：5.３１ｇ（6.７mmol） アミノエチルメタクリルアミド：0.８６ｇ（6.７mmol） ＤＭＦ ：６０ml ＤＣＣ ：1.４ｇ（6.７mmol） ＨＯＢｔ ：0.９５ｇ（７mmol） １Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−ｍ−クレゾールのＴ ＦＡ溶液 ：２５０ml
【００７５】 合成例１８ 合成物１８ CH2＝CCH3−CO−NH−C2H4−CO−RGDG−NH−C2H4−NH−C
O−CCH3＝CH2 （配列番号１８）
O−CCH3＝CH2 （配列番号１８）
【００７６】合成例１７の（１）〜（５）と同様の合成
を行なった後、以下の合成により合成物１８を得た。
を行なった後、以下の合成により合成物１８を得た。
【００７７】
【００７８】 (2) 合成物１８の合成 (1) の生成物 ：4.４ｇ（５mmol） ＴＦＡ／CH2Cl2 ：５０ml／５０ml カルボキシエチルメタクリルアミド：0.７９ｇ（５mmol） ＤＭＦ ：５０ml ＤＣＣ ：1.０３ｇ（５mmol） ＨＯＢｔ ：0.６８ｇ（５mmol） １Ｍトリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦ Ａ溶液 ：２５０ml アンバーライトＩＲＡ−４００ ：ＣＩ型処理
【００７９】 合成例１９ 合成物１５の重合物をラジカル重合で得た。 合成物１５ ５００mgを水５mlに溶解し１Ｎ NaOH でpH
7.４に調整した後開始剤として、過硫酸カリウム2.５mg
と亜硫酸水素ナトリウム1.０mgを加え窒素気流下２０℃
で２０時間重合した。
7.４に調整した後開始剤として、過硫酸カリウム2.５mg
と亜硫酸水素ナトリウム1.０mgを加え窒素気流下２０℃
で２０時間重合した。
【００８０】スペクトラポア７（分子分画量３０００）
を用いて純水に対して透析し低分子量分を除いた後凍結
乾燥させた。収量２４０mg（合成物１９）
を用いて純水に対して透析し低分子量分を除いた後凍結
乾燥させた。収量２４０mg（合成物１９）
【００８１】合成物１９をゲルクロマトグラフィーによ
り分子量分画を行なった。分子量は、製造例１０と同様
の方法で測定した。
り分子量分画を行なった。分子量は、製造例１０と同様
の方法で測定した。
【００８２】 合成例２０ 合成物１５の重合を合成例１９と同様の方法で開始剤の
量を変えて行なった。
量を変えて行なった。
【００８３】 合成例２１〜３６ 合成例１９と同じ方法で合成物１〜１４、１６および１
７の重合を行なった。
７の重合を行なった。
【００８４】 合成例No. モノマー ポリマー収量 分子量 （合成物No. ） （mg） ２１ 合成物１ ２３０ １５０００ ２２ 合成物２ １８０ １３０００ ２３ 合成物３ １９０ １５０００ ２４ 合成物４ １５０ １１０００ ２５ 合成物５ ２４０ １６０００ ２６ 合成物６ １２０ ８０００ ２７ 合成物７ １７０ １００００ ２８ 合成物８ １４０ ９０００ ２９ 合成物９ １７０ １１０００ ３０ 合成物１０ １３０ １２０００ ３１ 合成物１１ １５０ ９０００ ３２ 合成物１２ １４０ ８０００ ３３ 合成物１３ １３０ ８０００ ３４ 合成物１４ １７０ １００００ ３５ 合成物１６ ２００ １５０００ ３６ 合成物１７ １９０ １３０００ 合成物８は重合溶媒および透析液を水／メタノール＝１
／１とした。
／１とした。
【００８５】 合成例３７ 合成例１８で合成した化合物（合成物１８）のハイドロ
ゲルをラジカル重合法により合成した。シラン処理した
ガラス板（５cm×６cm×１cm）２枚とガスケットを用意
した。合成物１５ ２ｇ（3.２mmol）と合成物１８ 0.
２１ｇ（0.３mmol）を蒸留水１２mlに溶解し１Ｎ NaOH
でpH7.４に合わせた。これに過硫酸アンモニウム１１mg
を加え充分窒素置換をした後ガラス板の間に注入した。
万力でガラス板を押え、６０℃で４０時間重合させた。
生成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応モノマー
を除いた（合成物３７）。紫外線ランプにより滅菌処理
した後、細胞培養実験に供した。
ゲルをラジカル重合法により合成した。シラン処理した
ガラス板（５cm×６cm×１cm）２枚とガスケットを用意
した。合成物１５ ２ｇ（3.２mmol）と合成物１８ 0.
２１ｇ（0.３mmol）を蒸留水１２mlに溶解し１Ｎ NaOH
でpH7.４に合わせた。これに過硫酸アンモニウム１１mg
を加え充分窒素置換をした後ガラス板の間に注入した。
万力でガラス板を押え、６０℃で４０時間重合させた。
生成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応モノマー
を除いた（合成物３７）。紫外線ランプにより滅菌処理
した後、細胞培養実験に供した。
【００８６】 試験例１ 細胞接着性阻害活性の測定 本発明のプロペンアミド誘導体およびその重合物の塩
は、細胞のフィブロンネクチンやビトロネクチンに対す
る接着を阻害する。その活性測定方法を以下に示す。本
実験例で用いられた競争法は基本的に生化学分野では広
く用いられているものであり例えば“Methods in Enzym
ology"、８２、８０３−８３１（１９８１）、特開平１
−３０９６８２号、同２−１７４７９７号に開示されて
いる。
は、細胞のフィブロンネクチンやビトロネクチンに対す
る接着を阻害する。その活性測定方法を以下に示す。本
実験例で用いられた競争法は基本的に生化学分野では広
く用いられているものであり例えば“Methods in Enzym
ology"、８２、８０３−８３１（１９８１）、特開平１
−３０９６８２号、同２−１７４７９７号に開示されて
いる。
【００８７】 実験方法 1. フィブロネクチンおよびビトロネクチン吸着プレー
トの作製市販のフィブロネクチン（ヒト由来：生化学工
業（株）より購入）あるいはビトロネクチン（ヒト由来
フナコシ薬品（株）より購入）をＰＢＳで各々1.０μ
ｌ／ml、2.０μｌ／mlに希釈しその希釈液0.５mlを２４
穴のプラスチックプレートに入れ３７℃で一晩保温しコ
ーティングした。次に非特異的吸着を防ぐ目的で牛血清
アルブミン（ＢＳＡ １％）を加え３７℃で１時間保温
し、その後、通常の洗浄操作（ＰＢＳ）を加え充分に水
切りしてフィブロネクチン吸着プレートを作製した。同
様の操作によりビトロネクチン吸着プレートを作製し
た。
トの作製市販のフィブロネクチン（ヒト由来：生化学工
業（株）より購入）あるいはビトロネクチン（ヒト由来
フナコシ薬品（株）より購入）をＰＢＳで各々1.０μ
ｌ／ml、2.０μｌ／mlに希釈しその希釈液0.５mlを２４
穴のプラスチックプレートに入れ３７℃で一晩保温しコ
ーティングした。次に非特異的吸着を防ぐ目的で牛血清
アルブミン（ＢＳＡ １％）を加え３７℃で１時間保温
し、その後、通常の洗浄操作（ＰＢＳ）を加え充分に水
切りしてフィブロネクチン吸着プレートを作製した。同
様の操作によりビトロネクチン吸着プレートを作製し
た。
【００８８】 2. 接着阻害実験 凍結乾燥により得たプロペンアミド誘導体およびその重
合物の塩をDulbecco'sModified Eagles Medium(以下Ｄ
ＭＥＭと略記する）に溶解し、０、0.２５、0.５、1.
０、1.５mg／mlの溶液とした。この溶液0.２５mlを上記
方法で作製したプレートに入れ、そこへ血管内皮細胞
（４×１０6 cells ／ml）の懸濁液を0.２５ml加え、３
７℃で１時間保温し細胞を接着させた。ＤＭＥＭ培地で
３回洗浄し、未接着の細胞を剥離し、２％トリパンブル
ーで染色して細胞数を計測した。結果を表１及び表２に
示す。
合物の塩をDulbecco'sModified Eagles Medium(以下Ｄ
ＭＥＭと略記する）に溶解し、０、0.２５、0.５、1.
０、1.５mg／mlの溶液とした。この溶液0.２５mlを上記
方法で作製したプレートに入れ、そこへ血管内皮細胞
（４×１０6 cells ／ml）の懸濁液を0.２５ml加え、３
７℃で１時間保温し細胞を接着させた。ＤＭＥＭ培地で
３回洗浄し、未接着の細胞を剥離し、２％トリパンブル
ーで染色して細胞数を計測した。結果を表１及び表２に
示す。
【００８９】 表１ フィブロネクチンに対する細胞接着阻害(cells／well) 濃度（mg／ml） ０ 0.25 0.5 1.0 1.5 添加化合物 合成物１９−１ × △ ○ ○ ○ 合成物１９−２ × △ ○ ○ ○ 合成物１９−３ × △ ○ ○ ○ 合成物２０ × △ ○ ○ ○ 合成物２１ × × △ △ ○ 合成物２２ × △ ○ ○ ○ 合成物２３ × △ ○ ○ ○ 合成物２４ × △ ○ ○ ○ 合成物２５ × △ ○ ○ ○ 合成物２６ × △ ○ ○ ○ 合成物２７ × △ ○ ○ ○ 合成物２８ × △ △ ○ ○ 合成物２９ × △ ○ ○ ○ 合成物３０ × △ ○ ○ ○ 合成物３１ × △ △ ○ ○ 合成物３２ × △ ○ ○ ○ 合成物３３ × △ ○ ○ ○ 合成物３４ × △ ○ ○ ○ 合成物３５ × △ ○ ○ ○ 合成物３６ × △ ○ ○ ○ 製造物１０ × × × × × 合成物１５ × × × △ △ ＲＧＤ × × × × △ ＲＧＤＳ × × × △ △ (cells／well) ； ○：５０以下、△：５１〜９９、×：１００以上
【００９０】 表２ ビトロネクチンに対する細胞接着阻害(cells／well) 濃度（mg／ml） ０ 10 50 100 300 添加化合物 合成物１９−１ × ○ ○ ○ ○ 合成物１９−２ × ○ ○ ○ ○ 合成物１９−３ × ○ ○ ○ ○ 合成物２０ × ○ ○ ○ ○ 合成物２１ × × △ △ ○ 合成物２２ × ○ ○ ○ ○ 合成物２３ × ○ ○ ○ ○ 合成物２４ × ○ ○ ○ ○ 合成物２５ × ○ ○ ○ ○ 合成物２６ × ○ ○ ○ ○ 合成物２７ × ○ ○ ○ ○ 合成物２８ × △ △ ○ ○ 合成物２９ × ○ ○ ○ ○ 合成物３０ × ○ ○ ○ ○ 合成物３１ × △ △ ○ ○ 合成物３２ × ○ ○ ○ ○ 合成物３３ × ○ ○ ○ ○ 合成物３４ × ○ ○ ○ ○ 合成物３５ × ○ ○ ○ ○ 合成物３６ × ○ ○ ○ ○ 製造物１０ × × × × × 合成物１５ × × △ △ ○ ＲＧＤ × × × △ △ ＲＧＤＳ × × △ △ ○ (cells／well) ；○：１００以下、△：１０１〜１９９、×：２００以上
【００９１】 試験例２ 血小板凝集阻害活性の測定 本発明において合成したプロペンアミド誘導体及びその
重合物の塩のin vitro系での血小板凝集阻害作用をヒト
多血小板血漿を用いて検討した。以下にその実験方法を
示す。
重合物の塩のin vitro系での血小板凝集阻害作用をヒト
多血小板血漿を用いて検討した。以下にその実験方法を
示す。
【００９２】 実験方法 新鮮なヒト血液に１／９量の3.８％クエン酸ナトリウム
を加え遠心分離（１０００rpm 、１０分）し、上層を多
血小板血漿として分取した。凍結乾燥より得たプロペン
アミド誘導体及びその重合物の塩を０〜1.５mg／mlの種
々の濃度となる様に生理食塩水に溶解した。この塩溶液
２５μｌを血漿２００μｌに加え、３７℃で３分間イン
キュベートしたのち、５０μＭアデノンシ二リン酸（Ａ
ＤＰ）溶液あるいは２００μｇ／mlのコラーゲン溶液を
２５μｌ加え凝集の様子をアグリゴメーターを用いて透
過度を測定することにより検定した。結果を表３に示
す。
を加え遠心分離（１０００rpm 、１０分）し、上層を多
血小板血漿として分取した。凍結乾燥より得たプロペン
アミド誘導体及びその重合物の塩を０〜1.５mg／mlの種
々の濃度となる様に生理食塩水に溶解した。この塩溶液
２５μｌを血漿２００μｌに加え、３７℃で３分間イン
キュベートしたのち、５０μＭアデノンシ二リン酸（Ａ
ＤＰ）溶液あるいは２００μｇ／mlのコラーゲン溶液を
２５μｌ加え凝集の様子をアグリゴメーターを用いて透
過度を測定することにより検定した。結果を表３に示
す。
【００９３】 凝集阻害率（１−Ｔ／Ｔ0 ）×１００％ Ｔ0 ＝プロペンアミド誘導体またはその重合物の塩、非
添加時の透過度 Ｔ ＝プロペンアミド誘導体またはその重合物の塩、添
加時の透過度
添加時の透過度 Ｔ ＝プロペンアミド誘導体またはその重合物の塩、添
加時の透過度
【００９４】 ＩＣ50（μｇ／ml）；○：４０以下、△：４０〜８
０、×：８０以上
０、×：８０以上
【００９５】 試験例３ 動物細胞の増殖性の評価 実施例および比較例にて作成した動物細胞培養基体を用
いて細胞培養を行なった。細胞は血管内皮細胞を用い、
培養液はＤＭＥＭおよび１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）
を含むＤＭＥＭを用いた。この培養液に細胞を１×１０
4 個／mlの割合となるように浮遊させ、予め架橋重合物
を入れておいたプラスチックシャーレの中に、１×１０
4 個／cm2 となる割合で加えた。これを３７℃、５％の
炭酸ガス雰囲気下にて培養した。培養後、位相差顕微鏡
にて接着性および増殖性の観察を行った。結果を表４に
示した。
いて細胞培養を行なった。細胞は血管内皮細胞を用い、
培養液はＤＭＥＭおよび１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）
を含むＤＭＥＭを用いた。この培養液に細胞を１×１０
4 個／mlの割合となるように浮遊させ、予め架橋重合物
を入れておいたプラスチックシャーレの中に、１×１０
4 個／cm2 となる割合で加えた。これを３７℃、５％の
炭酸ガス雰囲気下にて培養した。培養後、位相差顕微鏡
にて接着性および増殖性の観察を行った。結果を表４に
示した。
【００９６】 表４ 動物細胞の増殖性の評価 ＤＭＥＭ培地 ＤＭＥＭ／ＦＣＳ培地 接着性 増殖性 接着性 増殖性 実施例（合成物３７） ○ ○ ○ ○ 比較例（製造物１１） ×〜△ ×〜△ △〜○ △〜○ ○：良好、 △：やや不良、 ×：不良
【００９７】比較に用いた製造物１１はＦＣＳを含まな
いＤＭＥＭ培地において細胞接着性および増殖性は、実
施例の合成物３７の基体に比べ劣っていた。
いＤＭＥＭ培地において細胞接着性および増殖性は、実
施例の合成物３７の基体に比べ劣っていた。
【００９８】
【００９９】 配列番号：１ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa は4Abuで置換されている 配列 Xaa Arg Gly Asp 1
【０１００】 配列番号：２ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Arg Gly Asp 1 5
【０１０１】 配列番号：３ 配列の長さ：１０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Arg Gly Asp Arg GlyAsp 1 5 10
【０１０２】 配列番号：４ 配列の長さ：１６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Arg Gly Asp Arg GlyAsp Arg Gly Asp
Arg Gly Asp 1 5 10
15
Arg Gly Asp 1 5 10
15
【０１０３】 配列番号：５ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa は4Abuで置換されている 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1
【０１０４】 配列番号：６ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa はNva で置換されている 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１０５】 配列番号：７ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa はAcp で置換されている 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１０６】 配列番号：８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa は１２−アミノラウリン酸で置換されて
いる 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1 5
いる 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１０７】 配列番号：９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Leu Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１０８】 配列番号：１０ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Gln Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１０９】 配列番号：１１ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa はｐ−アミノ安息香酸で置換されている 配列 Xaa Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１１０】 配列番号：１２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Xaa はNva で置換されている 配列 Xaa Gly Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１１１】 配列番号：１３ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Gly Arg Gly Asp Ser Pro 1 5
【０１１２】 配列番号：１４ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列 Gly Gly Gly Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１１３】 配列番号：１５ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Ser 1 5
【０１１４】 配列番号：１６ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｃ末端フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Ser Gly 1 5
【０１１５】 配列番号：１７ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：Ｎ末端フラグメント 配列 Arg Gly Asp Gly 1
【０１１６】 配列番号：１８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド フラグメント型：中間部フラグメント 配列の特徴： 特徴を表す記号：modified site 存在位置：１ 特徴を決定した方法：Ｅ 他の情報：Ala はbAlaで置換されている 配列 Ala Arg Gly Asp Gly 1 5
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｍ 3/00 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＤＵ Ｃ１２Ｎ 5/06 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｅ
Claims (8)
- 【請求項１】 下記一般式〔Ｉ〕の側鎖に、下記一般式
〔ＩＩ〕又は〔ＩＩＩ〕で表される接着性ペプチドを必
須単位として有するプロペンアミド誘導体又はその塩。 一般式〔Ｉ〕 Ｒ１Ｒ２Ｃ＝ＣＲ３−ＣＯ−［ＮＨ］− 式中、Ｒ１、Ｒ２は水素原子又はカルボキシル基を表
し、Ｒ３は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲン原
子又はカルボキシメチル基を表す。 一般式〔ＩＩ〕 −（Ｒ ４ ）−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［Ｙ］）ｎ− ［Ｚ］−Ｈ 一般式〔ＩＩＩ〕 Ｈ−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］− （Ｒ ５ ）− 一般式〔ＩＩＩ〕、〔ＩＩＩ〕において 、Ｘ、ＹはＳｅ
ｒ，Ｇｌｙ，Ｖａｌ，Ａｓｎ，Ｐｒｏから選択されるア
ミノ酸残基又はペプチド残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は−
ＮＨ−を表す。Ｒ４、Ｒ５は、炭素数が１〜１１の直鎖
又は分岐のアルキレン基、又は炭素数が６〜１１のアリ
ーレン基を表し、置換基を有していてもよい。ｎは１〜
５の整数を表す。一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ〕
において、［］は［］内の基が存在するかあるいは存在
しなくてもよいことを示す。 - 【請求項２】 請求項１記載のプロペンアミド誘導体の
重合物又はその塩。 - 【請求項３】 分子量が約3,000 〜200,000 の範囲であ
る、請求項２記載のプロペンアミド誘導体の重合物又は
その塩。 - 【請求項４】 請求項１記載のプロペンアミド誘導体の
架橋重合物又はその塩。 - 【請求項５】 多官能性単量体由来の構成単位が 0.1〜
３０モル％である請求項４記載の架橋重合物又はその
塩。 - 【請求項６】 請求項１、２又は３記載のプロペンアミ
ド誘導体、その重合物又はその塩を有効成分とする動物
細胞の接着阻害剤。 - 【請求項７】 請求項１、２又は３記載のプロペンアミ
ド誘導体、その重合物又はその塩を有効成分とする血小
板凝集・粘着抑制剤。 - 【請求項８】 請求項４又は５記載のプロペンアミド誘
導体の架橋重合物又はその塩を有効成分とする動物細胞
培養基体。
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3066157A JP2745342B2 (ja) | 1990-11-30 | 1991-03-29 | プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途 |
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| 第１１回日本バイオマテリアル学会大会予稿集１９８９第８２頁 |
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