JP2611874B2 - 水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途 - Google Patents
水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途Info
- Publication number
- JP2611874B2 JP2611874B2 JP2404347A JP40434790A JP2611874B2 JP 2611874 B2 JP2611874 B2 JP 2611874B2 JP 2404347 A JP2404347 A JP 2404347A JP 40434790 A JP40434790 A JP 40434790A JP 2611874 B2 JP2611874 B2 JP 2611874B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- water
- vinyl polymer
- soluble vinyl
- peptide
- methacryloyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、Ａｒｇ- Ｇｌｙ- Ａｓ
ｐのトリペプチドを必須単位として有する水溶性ビニル
ポリマー誘導体およびその塩、並びにそれを有効成分と
する動物細胞の接着阻害剤および血小板の凝集・粘着抑
制剤に関するものである。
ｐのトリペプチドを必須単位として有する水溶性ビニル
ポリマー誘導体およびその塩、並びにそれを有効成分と
する動物細胞の接着阻害剤および血小板の凝集・粘着抑
制剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのArg-Gly-Asp 配列
を特異的に認識することが明らかにされ、レセプターと
の相互作用に重要なものであることが報告されている
（ネイチャー(Nature)、第309 巻、30頁、1984年）。以
来、Arg-Gly-Asp 配列を有するオリゴあるいは水ポリペ
プチドを用いる研究が成されている。
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのArg-Gly-Asp 配列
を特異的に認識することが明らかにされ、レセプターと
の相互作用に重要なものであることが報告されている
（ネイチャー(Nature)、第309 巻、30頁、1984年）。以
来、Arg-Gly-Asp 配列を有するオリゴあるいは水ポリペ
プチドを用いる研究が成されている。
【０００３】例えば、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有
する種々の鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血
小板凝集を阻害する方法（高分子学会予稿集（Ｐｏｌｙ
ｍｅｒ Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，Ｊａｐａｎ）、第３８
巻、３１４９頁、１９８９年、特開平２−１７４７９７
号）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有するペプチドを
細胞移動抑制剤として用いる方法（特開平２−４７１６
号）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを固定化したＰＭＭＡ膜
を細胞接着膜として用いる方法（高分子学会予稿集（Ｐ
ｏｌｙｍｅｒ Ｐｒｅｐｒ１ｎｔｓ，Ｊａｐａｎ）、第
３７巻、７０５頁、１９８８年）が報告されている。さ
らに、ポリマーにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須構成単
位とするペプチドを共有結合させ動物細胞培養基体、生
体複合人工臓器用基体として用いる方法（特開平１−３
０９６８２号、特開平１−３０５９６０号）、Ａｇｒ−
Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ配列を有する水溶性ポリペプチ
ドを体外血液用血小板保護剤として用いる方法が開示さ
れている（特開昭６４−６２１７号）。また、Ａｒｇ−
Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有するオリゴペプチドあるいはそ
の繰り返し構造を有する水溶性ポリペプチドを用いて、
ガン転移を抑制する方法が知られている（（Ｉｎｔ．
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．）、第１１巻、２３
頁、１９８９年、同誌、第１１巻、２２６頁１９８９
年、（Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）第６０
巻、７２２頁、１９８９年）。
する種々の鎖状および環状のオリゴペプチドを用いて血
小板凝集を阻害する方法（高分子学会予稿集（Ｐｏｌｙ
ｍｅｒ Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，Ｊａｐａｎ）、第３８
巻、３１４９頁、１９８９年、特開平２−１７４７９７
号）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有するペプチドを
細胞移動抑制剤として用いる方法（特開平２−４７１６
号）、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを固定化したＰＭＭＡ膜
を細胞接着膜として用いる方法（高分子学会予稿集（Ｐ
ｏｌｙｍｅｒ Ｐｒｅｐｒ１ｎｔｓ，Ｊａｐａｎ）、第
３７巻、７０５頁、１９８８年）が報告されている。さ
らに、ポリマーにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須構成単
位とするペプチドを共有結合させ動物細胞培養基体、生
体複合人工臓器用基体として用いる方法（特開平１−３
０９６８２号、特開平１−３０５９６０号）、Ａｇｒ−
Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ配列を有する水溶性ポリペプチ
ドを体外血液用血小板保護剤として用いる方法が開示さ
れている（特開昭６４−６２１７号）。また、Ａｒｇ−
Ｇｌｙ−Ａｓｐ配列を有するオリゴペプチドあるいはそ
の繰り返し構造を有する水溶性ポリペプチドを用いて、
ガン転移を抑制する方法が知られている（（Ｉｎｔ．
Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．）、第１１巻、２３
頁、１９８９年、同誌、第１１巻、２２６頁１９８９
年、（Ｊｐｎ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．）第６０
巻、７２２頁、１９８９年）。
【０００４】水不溶性のビニル重合体にＡｒｇ−Ｇｌｙ
−Ａｓｐを必須単位とするオリゴペプチドを高分子反応
により導入した例は見られるが、水溶性ビニルポリマー
の側鎖にＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須単位とするオリ
ゴペプチドあるいはその繰返し構造を有するオリゴペプ
チドを導入した水溶性ビニルポリマー誘導体は知られて
おらず、導入した場合にはレセプターとの結合能の増強
及び血液中での安定化が期待できる。
−Ａｓｐを必須単位とするオリゴペプチドを高分子反応
により導入した例は見られるが、水溶性ビニルポリマー
の側鎖にＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須単位とするオリ
ゴペプチドあるいはその繰返し構造を有するオリゴペプ
チドを導入した水溶性ビニルポリマー誘導体は知られて
おらず、導入した場合にはレセプターとの結合能の増強
及び血液中での安定化が期待できる。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
な水溶性ビニルポリマー誘導体及びそれを有効成分とす
る動物細胞の接着阻害剤並びに血小板凝集・粘着抑制剤
を提供することである。
な水溶性ビニルポリマー誘導体及びそれを有効成分とす
る動物細胞の接着阻害剤並びに血小板凝集・粘着抑制剤
を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、水溶性ビニル
ポリマーの側鎖にアミド結合、エステル結合のいずれか
を介し、下記一般式（１）で表される接着性ペプチドを
必須単位として有する水溶性ビニルポリマー誘導体およ
びその塩を提供するものである。一般式（１）−[R1]−
[CO]−([X]−Arg −Gly −Asp −[Y])n −[Z] −[R2]−
ポリマーの側鎖にアミド結合、エステル結合のいずれか
を介し、下記一般式（１）で表される接着性ペプチドを
必須単位として有する水溶性ビニルポリマー誘導体およ
びその塩を提供するものである。一般式（１）−[R1]−
[CO]−([X]−Arg −Gly −Asp −[Y])n −[Z] −[R2]−
【０００７】式中、［ ］は存在するかあるいは存在し
なくともよく、存在する場合はＸ、ＹはＳｅｒ、Ｇｌ
ｙ、Ｖａｌ、Ａｓｎ、Ｐｒｏから選択されるアミノ酸残
基又はペプチド残基を示し、Ｚは−Ｏ−または−ＮＨ−
を示す。Ｒ1 、Ｒ2 のいずれか一方は、水素原子または
炭素数が１〜９の直鎖もしくは分岐のアルキル基、また
は炭素数が６〜９のアリ−ル基であり、置換基を有して
いても良い。他方は、水素原子または炭素数が１〜９の
直鎖もしくは分岐のアルキレン基、または炭素数が６〜
９のアリ−レン基であり、置換基を有していても良い。
ｎは１〜５の整数を表す。
なくともよく、存在する場合はＸ、ＹはＳｅｒ、Ｇｌ
ｙ、Ｖａｌ、Ａｓｎ、Ｐｒｏから選択されるアミノ酸残
基又はペプチド残基を示し、Ｚは−Ｏ−または−ＮＨ−
を示す。Ｒ1 、Ｒ2 のいずれか一方は、水素原子または
炭素数が１〜９の直鎖もしくは分岐のアルキル基、また
は炭素数が６〜９のアリ−ル基であり、置換基を有して
いても良い。他方は、水素原子または炭素数が１〜９の
直鎖もしくは分岐のアルキレン基、または炭素数が６〜
９のアリ−レン基であり、置換基を有していても良い。
ｎは１〜５の整数を表す。
【０００８】置換基としては、カルボニル基、カルボキ
シル基、アミノ基、ヒドロキシル基、スルホ基、ハロゲ
ン原子、アリール基、ニトロ基、シアノ基、不飽和基の
２重結合、３重結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有
していても良い。
シル基、アミノ基、ヒドロキシル基、スルホ基、ハロゲ
ン原子、アリール基、ニトロ基、シアノ基、不飽和基の
２重結合、３重結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有
していても良い。
【０００９】本発明はさらに、上記水溶性ビニルポリマ
ー誘導体またはその塩を有効成分とする動物細胞の接着
阻害剤並びに血小板凝集・粘着抑制剤を提供するもので
ある。本発明は、合成水溶性ビニルポリマーに、Ａｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須単位として有する接着性ペプチ
ドを共有結合してなる水溶性ビニルポリマー誘導体であ
る。水溶性ビニルポリマー誘導体の分子量は好ましくは
２０万以下、特に３０００〜１０万の範囲で、室温で水
溶性であることが好ましい。本発明に係わる接着性ペプ
チドに用いられるアミノ酸残基はＬ体、Ｄ体どちらでも
良いが、好ましくはＬ体である。
ー誘導体またはその塩を有効成分とする動物細胞の接着
阻害剤並びに血小板凝集・粘着抑制剤を提供するもので
ある。本発明は、合成水溶性ビニルポリマーに、Ａｒｇ
−Ｇｌｙ−Ａｓｐを必須単位として有する接着性ペプチ
ドを共有結合してなる水溶性ビニルポリマー誘導体であ
る。水溶性ビニルポリマー誘導体の分子量は好ましくは
２０万以下、特に３０００〜１０万の範囲で、室温で水
溶性であることが好ましい。本発明に係わる接着性ペプ
チドに用いられるアミノ酸残基はＬ体、Ｄ体どちらでも
良いが、好ましくはＬ体である。
【００１０】本発明に用いることのできるポリマー担体
は通常の水溶性ビニル重合体であれば特に限定されな
い。
は通常の水溶性ビニル重合体であれば特に限定されな
い。
【００１１】例えば、アクリル酸、メタクリル酸、イタ
コン酸、マレイン酸、フマル酸、クロトン酸、２−アク
リルアミドグリコール酸、２−メタクリルアミドグリコ
ール酸、４−ビニル安息香酸、Ｎ−メタクリロイルグリ
シン、Ｎ−メタクリロイル−β−アラニン、Ｎ−メタク
リロイルアラニン、Ｎ−メタクリロイル−γ−アミノ酪
酸、Ｎ−メタクリロイルバリン、Ｎ−メタクリロイルロ
イシン、Ｎ−メタクリロイルイソロイシン、Ｎ−メタク
リロイルノルバリン、Ｎ−メタクリロイルノルロイシ
ン、Ｎ−メタクリロイルセリン、Ｎ−メタクリロイルス
レオニン、Ｎ−メタクリロイルメチオニン、Ｎ−メタク
リロイルフェニルアラニン、Ｎ−メタクリロイルチロシ
ン、Ｎ−α−メタクリロイルトリプトファン、Ｎ−メタ
クリロイルプロリン、Ｎ−メタクリロイルヒドロキシプ
ロリン、Ｎ−メタクリロイルアスパラギン酸、Ｎ−メタ
クリロイルアスパラギン、Ｎ−メタクリロイルグルタミ
ン酸、Ｎ−メタクリロイルグルタミン、Ｎ−α−メタク
リロイルアルギニン、Ｎ−α−メタクリロイルシトルリ
ン、Ｎ−アクリロイルグリシン、Ｎ−アクリロイル−β
−アラニン、Ｎ−アクリロイルアラニン、Ｎ−アクリロ
イル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−アクリロイルバリン、Ｎ−
アクリロイルロイシン、Ｎ−アクリロイルイソロイシ
ン、Ｎ−アクリロイルノルバリン、Ｎ−アクリロイルノ
ルロイシン、Ｎ−アクリロイルセリン、Ｎ−アクリロイ
ルスレオニン、Ｎ−アクリロイルメチオニン、Ｎ−アク
リロイルフェニルアラニン、Ｎ−アクリロイルチロシ
ン、Ｎ−α−アクリロイルトリプトファン、Ｎ−アクリ
ロイルプロリン、Ｎ−アクリロイルヒドロキシプロリ
ン、Ｎ−アクリロイルアスパラギン酸、Ｎ−アクリロイ
ルアスパラギン、Ｎ−アクリロイルグルタミン酸、Ｎ−
アクリロイルグルタミン、Ｎ−α−アクリロイルアルギ
ニン、Ｎ−α−アクリロイルシトルリン等のビニル単量
体の単独重合物および共重合物が挙げられる。また、側
鎖にアミノ基を有するポリビニルアミン、ポリアリルア
ミンおよびそのカルボキシル化物を用いることもでき
る。
コン酸、マレイン酸、フマル酸、クロトン酸、２−アク
リルアミドグリコール酸、２−メタクリルアミドグリコ
ール酸、４−ビニル安息香酸、Ｎ−メタクリロイルグリ
シン、Ｎ−メタクリロイル−β−アラニン、Ｎ−メタク
リロイルアラニン、Ｎ−メタクリロイル−γ−アミノ酪
酸、Ｎ−メタクリロイルバリン、Ｎ−メタクリロイルロ
イシン、Ｎ−メタクリロイルイソロイシン、Ｎ−メタク
リロイルノルバリン、Ｎ−メタクリロイルノルロイシ
ン、Ｎ−メタクリロイルセリン、Ｎ−メタクリロイルス
レオニン、Ｎ−メタクリロイルメチオニン、Ｎ−メタク
リロイルフェニルアラニン、Ｎ−メタクリロイルチロシ
ン、Ｎ−α−メタクリロイルトリプトファン、Ｎ−メタ
クリロイルプロリン、Ｎ−メタクリロイルヒドロキシプ
ロリン、Ｎ−メタクリロイルアスパラギン酸、Ｎ−メタ
クリロイルアスパラギン、Ｎ−メタクリロイルグルタミ
ン酸、Ｎ−メタクリロイルグルタミン、Ｎ−α−メタク
リロイルアルギニン、Ｎ−α−メタクリロイルシトルリ
ン、Ｎ−アクリロイルグリシン、Ｎ−アクリロイル−β
−アラニン、Ｎ−アクリロイルアラニン、Ｎ−アクリロ
イル−γ−アミノ酪酸、Ｎ−アクリロイルバリン、Ｎ−
アクリロイルロイシン、Ｎ−アクリロイルイソロイシ
ン、Ｎ−アクリロイルノルバリン、Ｎ−アクリロイルノ
ルロイシン、Ｎ−アクリロイルセリン、Ｎ−アクリロイ
ルスレオニン、Ｎ−アクリロイルメチオニン、Ｎ−アク
リロイルフェニルアラニン、Ｎ−アクリロイルチロシ
ン、Ｎ−α−アクリロイルトリプトファン、Ｎ−アクリ
ロイルプロリン、Ｎ−アクリロイルヒドロキシプロリ
ン、Ｎ−アクリロイルアスパラギン酸、Ｎ−アクリロイ
ルアスパラギン、Ｎ−アクリロイルグルタミン酸、Ｎ−
アクリロイルグルタミン、Ｎ−α−アクリロイルアルギ
ニン、Ｎ−α−アクリロイルシトルリン等のビニル単量
体の単独重合物および共重合物が挙げられる。また、側
鎖にアミノ基を有するポリビニルアミン、ポリアリルア
ミンおよびそのカルボキシル化物を用いることもでき
る。
【００１２】好ましくは、ポリアクリル酸、ポリメタク
リル酸、ポリＮ−メタクリロイルグリシン、ポリＮ−メ
タクリロイルβ−アラニン、ポリＮ−メタクリロイルγ
−アミノ酪酸、ポリアリルアミン、スクシニル化ポリア
リルアアミンである。
リル酸、ポリＮ−メタクリロイルグリシン、ポリＮ−メ
タクリロイルβ−アラニン、ポリＮ−メタクリロイルγ
−アミノ酪酸、ポリアリルアミン、スクシニル化ポリア
リルアアミンである。
【００１３】本発明の水溶性ビニルポリマー誘導体の塩
として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホ
ウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸
塩等の有機酸との塩にしても良く、そのような塩への変
換は慣用手段で行なうことができる。
として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、ホ
ウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリフルオロ酢酸
塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳酸塩、酒石酸
塩等の有機酸との塩にしても良く、そのような塩への変
換は慣用手段で行なうことができる。
【００１４】ペプチド合成方法としては特に限定しない
が、液相法、固相法、および自動合成装置による合成方
法が挙げられる。これらの合成方法の詳細については、
生化学実験講座「タンパク質の化学ＩＶ」ｐ２０７−４
９５（日本生化学会編、東京化学同人）、「続生化学実
験講座タンパク質の化学（下）」（日本生化学会編、東
京化学同人）、泉屋ら編「ペプチド合成の基礎と実験」
（丸善）に記載されている。また、市販されている合成
ペプチドを利用することも可能である。
が、液相法、固相法、および自動合成装置による合成方
法が挙げられる。これらの合成方法の詳細については、
生化学実験講座「タンパク質の化学ＩＶ」ｐ２０７−４
９５（日本生化学会編、東京化学同人）、「続生化学実
験講座タンパク質の化学（下）」（日本生化学会編、東
京化学同人）、泉屋ら編「ペプチド合成の基礎と実験」
（丸善）に記載されている。また、市販されている合成
ペプチドを利用することも可能である。
【００１５】水溶性ビニルポリマーおよびカルボキシル
化水溶性ビニルポリマーと接着性ペプチドの結合には、
臭化シアン、酸アジド、水溶性カルボジイミド等を利用
したアミド結合合成方法が挙げられる。
化水溶性ビニルポリマーと接着性ペプチドの結合には、
臭化シアン、酸アジド、水溶性カルボジイミド等を利用
したアミド結合合成方法が挙げられる。
【００１６】本発明の水溶性ビニルポリマー誘導体は、
細胞接着性蛋白質のコア配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを
有し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質と同様の機
序で細胞に接着する。そのため、細胞接着性蛋白のアゴ
ニストまたはアンタゴニストとして種々の生物活性を示
し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中で起こる
癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治癒作用な
どの広範な生物活性が認められている。
細胞接着性蛋白質のコア配列Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐを
有し、該コア配列を介して細胞接着性蛋白質と同様の機
序で細胞に接着する。そのため、細胞接着性蛋白のアゴ
ニストまたはアンタゴニストとして種々の生物活性を示
し、免疫調整作用、創傷治癒作用、毛細血管中で起こる
癌細胞による血小板凝集抑制作用、神経疾患治癒作用な
どの広範な生物活性が認められている。
【００１７】従って、本発明の水溶性ビニルポリマー誘
導体は、そのすくなくとも一種を、場合により慣用の担
体または医薬用助剤とともに、癌転移抑制剤、創傷治癒
剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制剤として患者に投
与することが可能である。特に、動物細胞接着阻害剤ま
たは血小板凝集粘着抑制剤としての使用が好ましい。そ
の投与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋｇの範
囲で、症状、年齢、体重等に基づいて決定される。
導体は、そのすくなくとも一種を、場合により慣用の担
体または医薬用助剤とともに、癌転移抑制剤、創傷治癒
剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着抑制剤として患者に投
与することが可能である。特に、動物細胞接着阻害剤ま
たは血小板凝集粘着抑制剤としての使用が好ましい。そ
の投与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４００ｍｇ／ｋｇの範
囲で、症状、年齢、体重等に基づいて決定される。
【００１８】本発明の水溶性ビニルポリマー誘導体は、
ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方法、即ち
非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下
投与等によって投与するのが好ましい。そのような注射
用製剤を製造する場合、本発明の水溶性ビニルポリマー
誘導体を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳまたは
生理食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、ある
いは０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製
剤としても良い。この様な製剤には、グリシンやアルブ
ミン等の慣用の安定剤を添加しても良い。さらに、 本
発明の水溶性ビニルポリマー誘導体は、例えばリポソー
ム中に包容したマイクロカプセル剤とすれば、経口投与
することも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤
等の形にすれば、消化菅以外の粘膜からも吸収させるこ
とも可能である。
ペプチド系医薬に一般に使用されている投与方法、即ち
非経口投与方法、例えば静脈内投与、筋肉内投与、皮下
投与等によって投与するのが好ましい。そのような注射
用製剤を製造する場合、本発明の水溶性ビニルポリマー
誘導体を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳまたは
生理食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、ある
いは０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製
剤としても良い。この様な製剤には、グリシンやアルブ
ミン等の慣用の安定剤を添加しても良い。さらに、 本
発明の水溶性ビニルポリマー誘導体は、例えばリポソー
ム中に包容したマイクロカプセル剤とすれば、経口投与
することも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻スプレー剤
等の形にすれば、消化菅以外の粘膜からも吸収させるこ
とも可能である。
【００１９】
【実施例】以下実施例により本発明を更に説明するが本
発明はこれに限定されるものではない。なお、以下にお
いて、Ｒはアルギニル、Ｇはグリシル、Ｄはアスパルチ
ル、Ｓはセリル、Ｐはプロリルを表す。製造例１
接着性ペプチドの固相法による合成Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌ
ｄ方式によるペプチド合成装置を用いて合成を行なっ
た。αアミノ基の保護にはＢｏｃ基を用い、樹脂から切
出した後分取用ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ
ー）で精製し、単一ピークを示す接着性合成ペプチドを
得た。
発明はこれに限定されるものではない。なお、以下にお
いて、Ｒはアルギニル、Ｇはグリシル、Ｄはアスパルチ
ル、Ｓはセリル、Ｐはプロリルを表す。製造例１
接着性ペプチドの固相法による合成Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌ
ｄ方式によるペプチド合成装置を用いて合成を行なっ
た。αアミノ基の保護にはＢｏｃ基を用い、樹脂から切
出した後分取用ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィ
ー）で精製し、単一ピークを示す接着性合成ペプチドを
得た。
【００２０】 表１ 接着性合成ペプチド 名称 構造式 略号 収率 ペプチド−１ H-Arg-Gly-Asp-OH RGD ３７％ ペプチド−２ H-(Arg-Gly-Asp)2-OH (RGD)2 ２８％ （配列番号１） ペプチド−３ H-(Arg-Gly-Asp)3-OH (RGD)3 １９％ （配列番号２） ペプチド−４ H-(Arg-Gly-Asp)5-OH (RGD)5 １１％ （配列番号３） ペプチド−５ H-(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser-Pro)-OH GRGDSP ２７％ （配列番号４）
【００２１】製造例２ ペプチド−６ Ｈ−（Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ）−Ｎ
Ｈ2 （配列番号５）
Ｈ2 （配列番号５）
【００２２】ペプチド−６を逐次延長法により液相法で
合成した。 （１）ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）５９ｇ（０．２ｍｏｌ）をＣＨ
2 Ｃｌ2４００ｍｌに溶解しＤＣＣ４１．２ｇ（０．２
ｍｏｌ）を氷冷下加えた。この溶液に、ＧｌｙＮＨ2 ・
ＨＣｌの２２．１ｇをＣＨ2 Ｃｌ2 ４００ｍｌに溶かし
てから、Ｎ−メチルモルホリン２０．２ｇで氷冷下中和
した溶液を添加した。氷冷下３時間撹拌してから、さら
に室温で終夜撹拌した。沈殿物をろ別してから減圧濃縮
し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ3 水溶液、１Ｍク
エン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ2 Ｓ
Ｏ4 で乾燥してから減圧乾固して白色粉末５８．３ｇ
（収率８３％）を得た。
合成した。 （１）ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）５９ｇ（０．２ｍｏｌ）をＣＨ
2 Ｃｌ2４００ｍｌに溶解しＤＣＣ４１．２ｇ（０．２
ｍｏｌ）を氷冷下加えた。この溶液に、ＧｌｙＮＨ2 ・
ＨＣｌの２２．１ｇをＣＨ2 Ｃｌ2 ４００ｍｌに溶かし
てから、Ｎ−メチルモルホリン２０．２ｇで氷冷下中和
した溶液を添加した。氷冷下３時間撹拌してから、さら
に室温で終夜撹拌した。沈殿物をろ別してから減圧濃縮
し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ3 水溶液、１Ｍク
エン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ2 Ｓ
Ｏ4 で乾燥してから減圧乾固して白色粉末５８．３ｇ
（収率８３％）を得た。
【００２３】（２）ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ
（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 ５６．２ｇ（０．
１６ｍｏｌ）にＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ＝１／１を４００
ｍｌ加え室温で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ 2 Ｃｌ
2 を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣ
Ｏ3 水溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎ
ａ2 ＳＯ4 で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
この化合物と、ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）５１．７ｇ
（０．１６ｍｏｌ）をＣＨ2 Ｃｌ2 の８００ｍｌに溶解
し、ＤＣＣ３３ｇ（０．１６ｍｏｌ）を氷冷下加え３時
間撹拌してから、さらに室温で撹拌した。減圧下ＣＨ2
Ｃｌ2 を留去してから酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣ
Ｏ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順
に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから減圧乾固して白
色粉末７１．２ｇ（収率８０％）を得た。
（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 ５６．２ｇ（０．
１６ｍｏｌ）にＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ＝１／１を４００
ｍｌ加え室温で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ 2 Ｃｌ
2 を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣ
Ｏ3 水溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎ
ａ2 ＳＯ4 で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。
この化合物と、ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）５１．７ｇ
（０．１６ｍｏｌ）をＣＨ2 Ｃｌ2 の８００ｍｌに溶解
し、ＤＣＣ３３ｇ（０．１６ｍｏｌ）を氷冷下加え３時
間撹拌してから、さらに室温で撹拌した。減圧下ＣＨ2
Ｃｌ2 を留去してから酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣ
Ｏ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順
に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから減圧乾固して白
色粉末７１．２ｇ（収率８０％）を得た。
【００２４】（３）ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓ
ｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 （配列番号６）の合成 ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ
2 ６６．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ2 Ｃｌ
2 ＝１：１の４００ｍｌを加えて室温で１時間撹拌した
後、ＴＦＡとＣＨ2 Ｃｌ2 を減圧濃縮した。これを酢酸
エチルに溶解しＮａＨＣＯ3 水溶液で中和した後ＮａＣ
ｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから酢酸
エチルを減圧留去した。この化合物とＢｏｃＧｌｙ５
１．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）をＣＨ2 Ｃｌ2 の７００ｍ
ｌに溶解し、ＤＣＣ２４．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）を氷
冷下加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌し
た。ＤＣｕｒｅａをろ別してから減圧濃縮し酢酸エチル
に溶解した。ＮａＨＣＯ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶
液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥
してから減圧乾固して白色粉末 ６１．８ｇ（収率８４
％）を得た。
ｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 （配列番号６）の合成 ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ
2 ６６．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ2 Ｃｌ
2 ＝１：１の４００ｍｌを加えて室温で１時間撹拌した
後、ＴＦＡとＣＨ2 Ｃｌ2 を減圧濃縮した。これを酢酸
エチルに溶解しＮａＨＣＯ3 水溶液で中和した後ＮａＣ
ｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから酢酸
エチルを減圧留去した。この化合物とＢｏｃＧｌｙ５
１．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）をＣＨ2 Ｃｌ2 の７００ｍ
ｌに溶解し、ＤＣＣ２４．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）を氷
冷下加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌し
た。ＤＣｕｒｅａをろ別してから減圧濃縮し酢酸エチル
に溶解した。ＮａＨＣＯ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶
液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥
してから減圧乾固して白色粉末 ６１．８ｇ（収率８４
％）を得た。
【００２５】（４）ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓ
ｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｇｌ
ｙＮＨ2 ６１．３ｇ（０．１ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ
2 Ｃｌ2 ＝１：１の４００ｍｌを加えて室温で１時間撹
拌した後、ＴＦＡとＣＨ2 Ｃｌ2 を減圧濃縮した。これ
を酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ3 水溶液で中和した後
ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してか
ら酢酸エチルを減圧留去した。この化合物とＢｏｃＡｒ
ｇ（Ｍｔｓ）４５．６ｇ（０．１ｍｏｌ）をＤＭＦ８０
０ｍｌに溶解し、ＤＣＣ２２．５ｇ（０．１ｍｏｌ）、
ＨＯＢｔ１４ｇ（０．１ｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹
拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａ
をろ別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。Ｎａ
ＨＣＯ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液
の順に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから減圧乾固し
て白色粉末 ４２．８ｇ（収率４５％）を得た。
ｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ2 の合成 ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｇｌ
ｙＮＨ2 ６１．３ｇ（０．１ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ
2 Ｃｌ2 ＝１：１の４００ｍｌを加えて室温で１時間撹
拌した後、ＴＦＡとＣＨ2 Ｃｌ2 を減圧濃縮した。これ
を酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ3 水溶液で中和した後
ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してか
ら酢酸エチルを減圧留去した。この化合物とＢｏｃＡｒ
ｇ（Ｍｔｓ）４５．６ｇ（０．１ｍｏｌ）をＤＭＦ８０
０ｍｌに溶解し、ＤＣＣ２２．５ｇ（０．１ｍｏｌ）、
ＨＯＢｔ１４ｇ（０．１ｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹
拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａ
をろ別してから減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。Ｎａ
ＨＣＯ3 水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液
の順に洗浄し、Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥してから減圧乾固し
て白色粉末 ４２．８ｇ（収率４５％）を得た。
【００２６】（５）ペプチド−６ 保護体の脱保護 ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅ
ｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ 2 ５ｇ（５．３ｍｍｏｌ）のＴ
ＦＡ溶液に、１Ｍのトリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加
えて１時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基
の脱保護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイ
ル状の沈殿物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した
後、陰イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−
４００；Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白
色固体２．１７ｇ（収率８６％）が得られた。
ｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ 2 ５ｇ（５．３ｍｍｏｌ）のＴ
ＦＡ溶液に、１Ｍのトリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加
えて１時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基
の脱保護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイ
ル状の沈殿物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した
後、陰イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−
４００；Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白
色固体２．１７ｇ（収率８６％）が得られた。
【００２７】製造例３ ベプチド−７の合成 ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌ
ｙ （配列番号７） ペプチド−７を逐次延長法により液相法にて合成した。 （１）ＢｏｃＧｌｙＯＮｂの合成 ＢｏｃＧｌｙ３５ｇ（０．２ｍｏｌ）、トリエチルアミ
ン２８ｍｌ（０．２ｍｏｌ）および臭化ｐ−ニトロベン
ジル４３．２ｇ（０．２ｍｏｌ）を４００ｍｌの酢酸エ
チルに溶解し、５時間還流した後室温で一晩放置した。
生成した塩をろ別しＮａＨＣＯ３水溶液および水で洗浄
した後、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧濃縮し酢酸エチル
ーヘキサンより再結晶した。５２．７ｇ（収率 ８５
％）
ｙ （配列番号７） ペプチド−７を逐次延長法により液相法にて合成した。 （１）ＢｏｃＧｌｙＯＮｂの合成 ＢｏｃＧｌｙ３５ｇ（０．２ｍｏｌ）、トリエチルアミ
ン２８ｍｌ（０．２ｍｏｌ）および臭化ｐ−ニトロベン
ジル４３．２ｇ（０．２ｍｏｌ）を４００ｍｌの酢酸エ
チルに溶解し、５時間還流した後室温で一晩放置した。
生成した塩をろ別しＮａＨＣＯ３水溶液および水で洗浄
した後、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥、減圧濃縮し酢酸エチル
ーヘキサンより再結晶した。５２．７ｇ（収率 ８５
％）
【００２８】以下製造例２と同様な方法でペプチド鎖を
延長した。以下にその概略を示す。（２）ＢｏｃＡｓｐ
（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂの合成 （１）の生成物 ：４６．５ｇ（０．１５ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ） ：４８．５ｇ（０．１５ｍｏｌ） ＣＨ2 Ｃｌ2 ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：３０．９ｇ（０．１５ｍｏｌ） （２）の収量 ６４．０ｇ（収率 ８０％）
延長した。以下にその概略を示す。（２）ＢｏｃＡｓｐ
（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂの合成 （１）の生成物 ：４６．５ｇ（０．１５ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ） ：４８．５ｇ（０．１５ｍｏｌ） ＣＨ2 Ｃｌ2 ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：３０．９ｇ（０．１５ｍｏｌ） （２）の収量 ６４．０ｇ（収率 ８０％）
【００２９】（３）ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
ＧｌｙＯＮｂの合成 （２）の生成物 ：６４．０ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＧｌｙ ：２１ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＣＨ2 Ｃｌ2 ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：２４．７ｇ（０．１２ｍｏｌ） （３）の収量 ５８．８ｇ（収率 ８３％）
ＧｌｙＯＮｂの合成 （２）の生成物 ：６４．０ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＧｌｙ ：２１ｇ（０．１２ｍｏｌ） ＣＨ2 Ｃｌ2 ：７５０ｍｌ ＤＣＣ ：２４．７ｇ（０．１２ｍｏｌ） （３）の収量 ５８．８ｇ（収率 ８３％）
【００３０】 （４）ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）Ｇｌ
ｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂの合成 （３）の生成物 ：５３．７ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ） ：４１．５ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＤＭＦ ：８００ｍｌ ＤＣＣ ：１８．７ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＨＯＢｔ ：１３．５ｇ（０．１ｍｏｌ） （４）の収量 ４６．５ｇ（収率 ５５％）
ｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂの合成 （３）の生成物 ：５３．７ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＴＦＡ／ＣＨ2 Ｃｌ2 ：２００ｍｌ／２００ｍｌ ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ） ：４１．５ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＤＭＦ ：８００ｍｌ ＤＣＣ ：１８．７ｇ（９１ｍｍｏｌ） ＨＯＢｔ ：１３．５ｇ（０．１ｍｏｌ） （４）の収量 ４６．５ｇ（収率 ５５％）
【００３１】（５）ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙの合成（４）の生成物９．２９
ｇ（１０ｍｍｏｌ）を９０％酢酸３００ｍｌに溶かし、
Ｚｎ末３２．７ｇ（０．５ｍｏｌ）を加え、０度（摂
氏）で３時間撹拌した。Ｚｎ末をろ別し、ろ液を減圧濃
縮、これにクエン酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出
した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥し減圧濃縮してからエーテル
を加えて白色粉末６．２６ｇ（収率７９％）を得た。
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙの合成（４）の生成物９．２９
ｇ（１０ｍｍｏｌ）を９０％酢酸３００ｍｌに溶かし、
Ｚｎ末３２．７ｇ（０．５ｍｏｌ）を加え、０度（摂
氏）で３時間撹拌した。Ｚｎ末をろ別し、ろ液を減圧濃
縮、これにクエン酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出
した。Ｎａ2 ＳＯ4 で乾燥し減圧濃縮してからエーテル
を加えて白色粉末６．２６ｇ（収率７９％）を得た。
【００３２】製造例４ カルボキシメタクリルアミドをショッテンバウマン反応
により合成した。即ち、β−アラニン１７．８ｇ（０．
２ｍｏｌ）の水酸化ナトリウム水溶液にメタクリル酸ク
ロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）を氷冷下滴下し、４
時間撹拌後塩酸により中和した。減圧濃縮により濃縮し
沈殿した塩化ナトリウムをろ別した。濃縮液をクロロホ
ルムで抽出し、乾燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去
した。濃縮物をエーテルで洗浄し製造物１を白色固体と
して１７．６ｇ得た。（収率５６％） 製造物４ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ
により合成した。即ち、β−アラニン１７．８ｇ（０．
２ｍｏｌ）の水酸化ナトリウム水溶液にメタクリル酸ク
ロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）を氷冷下滴下し、４
時間撹拌後塩酸により中和した。減圧濃縮により濃縮し
沈殿した塩化ナトリウムをろ別した。濃縮液をクロロホ
ルムで抽出し、乾燥後減圧濃縮してクロロホルムを留去
した。濃縮物をエーテルで洗浄し製造物１を白色固体と
して１７．６ｇ得た。（収率５６％） 製造物４ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ
【００３３】製造例５ 製造例４と同じ方法によりアクリル酸クロリドとグリシ
ンとの反応により以下のＮ−メタクリロイルグリシンを
合成した。製造物５ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ
2 ＣＯＯＨ収率 ７１％
ンとの反応により以下のＮ−メタクリロイルグリシンを
合成した。製造物５ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ
2 ＣＯＯＨ収率 ７１％
【００３４】製造例６ 製造例４と同じ方法によりアクリル酸クロリドとγ−ア
ミノ酪酸との反応により以下のＮ−メタクリロイルγ−
アミノ酪酸を合成した。 製造物６ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ 収率 ６４％
ミノ酪酸との反応により以下のＮ−メタクリロイルγ−
アミノ酪酸を合成した。 製造物６ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ 収率 ６４％
【００３５】製造例７製造例４と同じ方法によりアクリ
ル酸クロリドと６−アミノカプロン酸との反 応により以下のＮ−メタクリロイル６−アミノカプロン
酸を合成した。 製造物７ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ 収率 ５９％
ル酸クロリドと６−アミノカプロン酸との反 応により以下のＮ−メタクリロイル６−アミノカプロン
酸を合成した。 製造物７ ＣＨ2 ＝Ｃ（ＣＨ3 ）ＣＯＮＨＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＨ2 ＣＯＯＨ 収率 ５９％
【００３６】製造例８ 製造例４で合成したＮ−メタクリロイルβ−アラニンを
ラジカル重合により重合した。Ｎ−メタクリロイルβ−
アラニン２．０ｇを２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、和光純
薬製のラジカル開始剤Ｖ65（２，２−アゾビス（２，４
−ジメチルバレロニトリル））１０ｍｇを加え窒素気流
下６５度（摂氏）で４時間重合した。重合物は酢酸エチ
ルで沈殿させた後、スペクトラポア７（分子分画量 ８
０００）を用い純水に対して透析し低分子量画分を除い
た後凍結乾燥した。収量１．２４ｇ。分子量は東ソー
（株）製ＴＳＫｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷカラムを用い、
移動相は０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）とし、流
速１．０ｍｌ／ｍｉｎで測定した。製造物８のＰＥＧ換
算分子量は約３００００であった。
ラジカル重合により重合した。Ｎ−メタクリロイルβ−
アラニン２．０ｇを２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、和光純
薬製のラジカル開始剤Ｖ65（２，２−アゾビス（２，４
−ジメチルバレロニトリル））１０ｍｇを加え窒素気流
下６５度（摂氏）で４時間重合した。重合物は酢酸エチ
ルで沈殿させた後、スペクトラポア７（分子分画量 ８
０００）を用い純水に対して透析し低分子量画分を除い
た後凍結乾燥した。収量１．２４ｇ。分子量は東ソー
（株）製ＴＳＫｇｅｌ Ｇ３０００ＳＷカラムを用い、
移動相は０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）とし、流
速１．０ｍｌ／ｍｉｎで測定した。製造物８のＰＥＧ換
算分子量は約３００００であった。
【００３７】製造例９ 製造物５を製造例８と同様に重合して製造物９を得た。
収量 １．３７ｇ、分子量 ２３０００ 製造例１０ 製造物６を製造例８と同様に重合して製造物１０を得
た。収量 １．２９ｇ、分子量 １９０００ 製造例１１ 製造物７を製造例８と同様に重合して製造物１１を得
た。 収量 １．４０ｇ、分子量 ２１０００
収量 １．３７ｇ、分子量 ２３０００ 製造例１０ 製造物６を製造例８と同様に重合して製造物１０を得
た。収量 １．２９ｇ、分子量 １９０００ 製造例１１ 製造物７を製造例８と同様に重合して製造物１１を得
た。 収量 １．４０ｇ、分子量 ２１０００
【００３８】製造例１２ スクシニル化ポリアリルアミ
ンの合成 ポリアリルアミン（日東紡績製）５．２ｇとトリエチル
アミン１５．２ｇを１００ｍｌの水に溶解し、これに４
−ジメチルピリジン１．７ｇと無水コハク酸１５．０ｇ
を加え、室温で一晩撹拌した。アセトンで再沈後エーテ
ルで洗浄、乾燥してスクシニル化ポリアリルアミンを得
た。収量 １．２６ｇ、分子量１１０００
ンの合成 ポリアリルアミン（日東紡績製）５．２ｇとトリエチル
アミン１５．２ｇを１００ｍｌの水に溶解し、これに４
−ジメチルピリジン１．７ｇと無水コハク酸１５．０ｇ
を加え、室温で一晩撹拌した。アセトンで再沈後エーテ
ルで洗浄、乾燥してスクシニル化ポリアリルアミンを得
た。収量 １．２６ｇ、分子量１１０００
【００３９】合成例１ ポリ（Ｎ−メタクリロイルβ−
アラニン）−ＲＧＤＳ（配列番号８）の合成 製造例８のポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン０．６
０ｇをｐＨ７．４リン酸バッファー３５ｍｌに溶解し、
０度（摂氏）に保ちながら水溶性ＤＣＣ〔１−エチル−
３−３−（ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミ
ド〕０．２６ｇの５．０ｍｌリン酸バッファー溶液を加
えて、１．５時間反応させた。ついで、１０ｍｌのリン
酸バッファーに溶解した接着性ペプチドＲＧＤＳ（国産
化学工業製）０．７２ｇを添加し４度（摂氏）で一晩反
応させた。反応溶液を、エクストラポア７（分子分画量
８０００）に入れイオン交換水、ついで純水に対して
透析し低分子量成分を除いて精製、凍結乾燥した。収量
０．７１ｇ構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析によ
り行なった。
アラニン）−ＲＧＤＳ（配列番号８）の合成 製造例８のポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン０．６
０ｇをｐＨ７．４リン酸バッファー３５ｍｌに溶解し、
０度（摂氏）に保ちながら水溶性ＤＣＣ〔１−エチル−
３−３−（ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミ
ド〕０．２６ｇの５．０ｍｌリン酸バッファー溶液を加
えて、１．５時間反応させた。ついで、１０ｍｌのリン
酸バッファーに溶解した接着性ペプチドＲＧＤＳ（国産
化学工業製）０．７２ｇを添加し４度（摂氏）で一晩反
応させた。反応溶液を、エクストラポア７（分子分画量
８０００）に入れイオン交換水、ついで純水に対して
透析し低分子量成分を除いて精製、凍結乾燥した。収量
０．７１ｇ構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析によ
り行なった。
【００４０】
【００４１】以下の計算式に従いアルギニン残
基濃度とβ−アラニン残基濃度の比よりＲＧＤＳフラグ
メントの導入率を計算し約１０％の値を得た。導入率＝
［Ａｒｇ］÷［β−Ａｌａ］×１００ＩＲ： アミドカ
ルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６５２ｃｍ-1
基濃度とβ−アラニン残基濃度の比よりＲＧＤＳフラグ
メントの導入率を計算し約１０％の値を得た。導入率＝
［Ａｒｇ］÷［β−Ａｌａ］×１００ＩＲ： アミドカ
ルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６５２ｃｍ-1
【００４２】合成例２ ポリＮ−メタクリロイルグリシ
ン−ＧＲＧＤＳ（配列番号９）の合成 製造物９のポリＮ−メタクリロイルグリシン０．５４ｇ
と接着性ペプチドフラグメントＧＲＧＤＳ（国産化学工
業製）０．８１ｇとを合成例１と同様にして共有結合さ
せ、ポリＮ−メタクリロイルグリシン−ＧＲＧＤＳを合
成した。収量０．６０ｇ 構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なっ
た。アミノ酸分析の結果ＧＲＧＤＳフラグメントの導入
率は約１０％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６５５ｃｍ-1
ン−ＧＲＧＤＳ（配列番号９）の合成 製造物９のポリＮ−メタクリロイルグリシン０．５４ｇ
と接着性ペプチドフラグメントＧＲＧＤＳ（国産化学工
業製）０．８１ｇとを合成例１と同様にして共有結合さ
せ、ポリＮ−メタクリロイルグリシン−ＧＲＧＤＳを合
成した。収量０．６０ｇ 構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なっ
た。アミノ酸分析の結果ＧＲＧＤＳフラグメントの導入
率は約１０％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６５５ｃｍ-1
【００４３】合成例３ ポリＮ−メタクリロイルグリシ
ン−ＲＧＤ（配列番号１０）製造物９のポリＮ−メタク
リロイルグリシン０．５４ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６
ｇ、ＲＧＤ０．５７ｇを用い、合成例１と同様にしてＲ
ＧＤフラグメントを共有結合させた。収量 ０．６２
ｇ。構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行な
った。アミノ酸分析の結果ＲＧＤフラグメントの導入率
は約１４％であった。
ン−ＲＧＤ（配列番号１０）製造物９のポリＮ−メタク
リロイルグリシン０．５４ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６
ｇ、ＲＧＤ０．５７ｇを用い、合成例１と同様にしてＲ
ＧＤフラグメントを共有結合させた。収量 ０．６２
ｇ。構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行な
った。アミノ酸分析の結果ＲＧＤフラグメントの導入率
は約１４％であった。
【００４４】合成例４ ポリＮ−メタクリロイルβ−ア
ラニン−（ＲＧＤ）2 （配列番号１１） 製造物８のポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン０．６
０ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラグ
メントとして（ＲＧＤ）2 ０．５６ｇを用い、合成例１
と同様にしてポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン−
（ＲＧＤ）2 を合成した。収量０．６７ｇ。構造の確認
は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸
分析の結果（ＲＧＤ）2 フラグメントの導入率は約１２
％であった。
ラニン−（ＲＧＤ）2 （配列番号１１） 製造物８のポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン０．６
０ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラグ
メントとして（ＲＧＤ）2 ０．５６ｇを用い、合成例１
と同様にしてポリＮ−メタクリロイルβ−アラニン−
（ＲＧＤ）2 を合成した。収量０．６７ｇ。構造の確認
は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸
分析の結果（ＲＧＤ）2 フラグメントの導入率は約１２
％であった。
【００４５】合成例５ ポリメタクリル酸−（ＲＧＤ）
3 ポリメタクリル酸（ポリサイエンス社製；分子量 約１
５０００）０．３６ｇ、接着性ペプチドフラグメントと
して（ＲＧＤ）3 ０．８５ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ
を用い、合成例１と同様にしてポリメタクリル酸−（Ｒ
ＧＤ）3 を合成した。収量０．４０ｇ。構造の確認は、
ＩＲおよび元素分析により行なった。元素分析の結果
（ＲＧＤ）3 フラグメントの導入率は約１０％であっ
た。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
3 ポリメタクリル酸（ポリサイエンス社製；分子量 約１
５０００）０．３６ｇ、接着性ペプチドフラグメントと
して（ＲＧＤ）3 ０．８５ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ
を用い、合成例１と同様にしてポリメタクリル酸−（Ｒ
ＧＤ）3 を合成した。収量０．４０ｇ。構造の確認は、
ＩＲおよび元素分析により行なった。元素分析の結果
（ＲＧＤ）3 フラグメントの導入率は約１０％であっ
た。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
【００４６】合成例６ ポリアクリル酸−（ＲＧＤ）5 ポリアクリル酸（ポリサイエンス社製；分子量 約１０
０００）０．３０ｇ、接着性ペプチドフラグメントとし
て（ＲＧＤ）5 ０．９１ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇを
用い、合成例１と同様にしてポリアクリル酸−（ＲＧ
Ｄ）5 を合成した。収量０．３６ｇ構造の確認は、ＩＲ
および元素分析により行なった。元素分析の結果（ＲＧ
Ｄ） 5 フラグメントの導入率は約７％であった。 合成物３の組成 ７％ 元素分析Ｎ値 １５．７３％ ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ-1
０００）０．３０ｇ、接着性ペプチドフラグメントとし
て（ＲＧＤ）5 ０．９１ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇを
用い、合成例１と同様にしてポリアクリル酸−（ＲＧ
Ｄ）5 を合成した。収量０．３６ｇ構造の確認は、ＩＲ
および元素分析により行なった。元素分析の結果（ＲＧ
Ｄ） 5 フラグメントの導入率は約７％であった。 合成物３の組成 ７％ 元素分析Ｎ値 １５．７３％ ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振動 １６
５２ｃｍ-1
【００４７】合成例７ ポリＮ−メタクリロイルγ−ア
ミノ酪酸−（ＲＧＤ）2 （配列番号１２） 製造物６のポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸０．
６６ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラ
グメントとして（ＲＧＤ）2 ０．５６ｇを用い、合成例
１と同様にしてポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸
−（ＲＧＤ）2 を合成した。収量０．７３ｇ。構造の確
認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ
酸分析の結果（ＲＧＤ）2 フラグメントの導入率は約１
５％であった。
ミノ酪酸−（ＲＧＤ）2 （配列番号１２） 製造物６のポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸０．
６６ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラ
グメントとして（ＲＧＤ）2 ０．５６ｇを用い、合成例
１と同様にしてポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸
−（ＲＧＤ）2 を合成した。収量０．７３ｇ。構造の確
認は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ
酸分析の結果（ＲＧＤ）2 フラグメントの導入率は約１
５％であった。
【００４８】合成例８ ポリＮ−メタクリロイルグリシ
ン−ＲＧＤＳＧ−ＮＨ2 （配列番号１ ３）の合成 製造物９のポリＮ−メタクリロイルグリシン０．５４
ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、製造物２のＲＧＤＳＧ−
ＮＨ2 ０．８１ｇを用い、合成例１と同様にしてＲＧＤ
ＳＧ−ＮＨ2 フラグメントを共有結合させた。収量
０．６５ｇ。構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析に
より行なった。アミノ酸分析の結果ＲＧＤＳＧ−ＮＨ2
フラグメントの導入率は約１７％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
ン−ＲＧＤＳＧ−ＮＨ2 （配列番号１ ３）の合成 製造物９のポリＮ−メタクリロイルグリシン０．５４
ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、製造物２のＲＧＤＳＧ−
ＮＨ2 ０．８１ｇを用い、合成例１と同様にしてＲＧＤ
ＳＧ−ＮＨ2 フラグメントを共有結合させた。収量
０．６５ｇ。構造の確認は、ＩＲおよびアミノ酸分析に
より行なった。アミノ酸分析の結果ＲＧＤＳＧ−ＮＨ2
フラグメントの導入率は約１７％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
【００４９】合成例９ Ｎ−メタクリロイルβ−アラニ
ン−ＲＧＤＳＧ- ＮＨ2 （配列番号１３）製造物９のポリＮ−メタクリロイルβ
−アラニン０．６０ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、製造
物２のオリゴペプチド０．８１ｇを用い、合成例１と同
様にしてＲＧＤＳＧ−ＮＨ2 フラグメンを結合した。
収量０．７７ｇＮ−メタクリロイルβ−アラニン−Ｒ
ＧＤＳＧ- ＮＨ2 の構造確認は、ＩＲおよびアミノ酸分
析により行なった。アミノ酸分析の結果ＲＧＤＳＧ- Ｎ
Ｈ2 フラグメントの導入率は約１３％であった。
ン−ＲＧＤＳＧ- ＮＨ2 （配列番号１３）製造物９のポリＮ−メタクリロイルβ
−アラニン０．６０ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、製造
物２のオリゴペプチド０．８１ｇを用い、合成例１と同
様にしてＲＧＤＳＧ−ＮＨ2 フラグメンを結合した。
収量０．７７ｇＮ−メタクリロイルβ−アラニン−Ｒ
ＧＤＳＧ- ＮＨ2 の構造確認は、ＩＲおよびアミノ酸分
析により行なった。アミノ酸分析の結果ＲＧＤＳＧ- Ｎ
Ｈ2 フラグメントの導入率は約１３％であった。
【００５０】合成例１０ ポリＮ−メタクリロイルγ−
アミノ酪酸−ＧＲＧＤＳＰ（配列番号１４）の合成 製造物６のポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸０．
６６ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラ
グメントとしてＧＲＧＤＳＰ ０．５９ｇを用い、合成
例１と同様にしてポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪
酸を合成した。収量０．７３ｇ。構造の確認は、ＩＲお
よびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸分析の結果
ＲＧＤＳ−ＮＨ2 フラグメントの導入率は約１５％であ
った。
アミノ酪酸−ＧＲＧＤＳＰ（配列番号１４）の合成 製造物６のポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪酸０．
６６ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチドフラ
グメントとしてＧＲＧＤＳＰ ０．５９ｇを用い、合成
例１と同様にしてポリＮ−メタクリロイルγ−アミノ酪
酸を合成した。収量０．７３ｇ。構造の確認は、ＩＲお
よびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸分析の結果
ＲＧＤＳ−ＮＨ2 フラグメントの導入率は約１５％であ
った。
【００５１】合成例１１ スクシニル化ポリアリルアミ
ン−ＲＧＤＳの合成 ポリアリルアミン塩酸塩（日東紡績製）０．３９ｇ、接
着性ペプチドフラグメントとしてＲＧＤＳ ０．７１
ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇを用い、合成例１と同様に
してポリアリルアミン−ＲＧＤＳを合成した。収量０．
４４ｇ。構造の確認は、ＩＲおよび元素分析により行な
った。元素分析の結果ＲＧＤＳフラグメントの導入率は
約１５％であった。
ン−ＲＧＤＳの合成 ポリアリルアミン塩酸塩（日東紡績製）０．３９ｇ、接
着性ペプチドフラグメントとしてＲＧＤＳ ０．７１
ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇを用い、合成例１と同様に
してポリアリルアミン−ＲＧＤＳを合成した。収量０．
４４ｇ。構造の確認は、ＩＲおよび元素分析により行な
った。元素分析の結果ＲＧＤＳフラグメントの導入率は
約１５％であった。
【００５２】合成例１２ スクシニル化ポリアリルアミ
ン−（ＲＧＤ）3 の合成製造物１２のスクシニル化ポリ
アリルアミン０．６６ｇ、接着性ペプチドフラグメント
として（ＲＧＤ）3 ０．８５ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６
ｇを用い、合成例１と同様にしてスクシニル化ポリアリ
ルアミン−（ＲＧＤ）3 を合成した。収量０．７１ｇ。
構造の確認は、ＩＲおよび元素分析により行なった。元
素分析の結果（ＲＧＤ）3フラグメントの導入率は約１
２％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
ン−（ＲＧＤ）3 の合成製造物１２のスクシニル化ポリ
アリルアミン０．６６ｇ、接着性ペプチドフラグメント
として（ＲＧＤ）3 ０．８５ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６
ｇを用い、合成例１と同様にしてスクシニル化ポリアリ
ルアミン−（ＲＧＤ）3 を合成した。収量０．７１ｇ。
構造の確認は、ＩＲおよび元素分析により行なった。元
素分析の結果（ＲＧＤ）3フラグメントの導入率は約１
２％であった。 ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ＝Ｏ）の伸縮振
動 １６４８ｃｍ-1
【００５３】合成例１３ ポリＮ−メタクリロイル６−
アミノカプロン酸−ＲＧＤＳの合成 製造物１１のポリＮ−メタクリロイル６−アミノカプロ
ン０．７８ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチ
ドフラグメントとしてＲＧＤＳ ０．７１ｇを用い、合
成例１と同様にしてポリＮ−メタクリロイル６−アミノ
カプロン酸を合成した。収量０．８６ｇ。構造の確認
は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸
分析の結果ＲＧＤＳフラグメントの導入率は約１３％で
あった。
アミノカプロン酸−ＲＧＤＳの合成 製造物１１のポリＮ−メタクリロイル６−アミノカプロ
ン０．７８ｇ、水溶性ＤＣＣ０．２６ｇ、接着性ペプチ
ドフラグメントとしてＲＧＤＳ ０．７１ｇを用い、合
成例１と同様にしてポリＮ−メタクリロイル６−アミノ
カプロン酸を合成した。収量０．８６ｇ。構造の確認
は、ＩＲおよびアミノ酸分析により行なった。アミノ酸
分析の結果ＲＧＤＳフラグメントの導入率は約１３％で
あった。
【００５４】合成例１４ ＲＧＤＧ−ポリアリ
ルアミンの合成 製造例３のペプチド−７ ３．１８ｇ（４ｍｍｏｌ）を
ＤＭＦ４０ｍｌに溶解し、ＤＣＣ０．８３ｇ（４ｍｍｏ
ｌ）、ＨＯＢｔ０．５４ｇ（４ｍｍｏｌ）を氷冷下加え
て１時間撹拌した。これにＤＭＦ２０ｍｌに溶解したポ
リアリルアミン塩酸塩０．７８ｇを加え３時間撹拌した
後室温でさらに終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮した。 以下製造例２と同様にして脱保護
を行なった。１Ｍ トリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ-クレゾールのＴＦＡ溶液： １５０
ｍｌアンバーライトＩＲＡ−４００（Ｃｌ型）処理収量
０．８２ｇ 構造確認は、ＩＲおよび元素分析により
行なった。元素分析の結果ＲＧＤＧフラグメントの導入
率は約１１％であった。製造物３の組成 １１％元素分
析Ｎ値 ２４．９３％ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ
＝Ｏ）の伸縮振動 １６５２ｃｍ-1
ルアミンの合成 製造例３のペプチド−７ ３．１８ｇ（４ｍｍｏｌ）を
ＤＭＦ４０ｍｌに溶解し、ＤＣＣ０．８３ｇ（４ｍｍｏ
ｌ）、ＨＯＢｔ０．５４ｇ（４ｍｍｏｌ）を氷冷下加え
て１時間撹拌した。これにＤＭＦ２０ｍｌに溶解したポ
リアリルアミン塩酸塩０．７８ｇを加え３時間撹拌した
後室温でさらに終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮した。 以下製造例２と同様にして脱保護
を行なった。１Ｍ トリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ-クレゾールのＴＦＡ溶液： １５０
ｍｌアンバーライトＩＲＡ−４００（Ｃｌ型）処理収量
０．８２ｇ 構造確認は、ＩＲおよび元素分析により
行なった。元素分析の結果ＲＧＤＧフラグメントの導入
率は約１１％であった。製造物３の組成 １１％元素分
析Ｎ値 ２４．９３％ＩＲ： アミドカルボニル（Ｃ
＝Ｏ）の伸縮振動 １６５２ｃｍ-1
【００５５】試験例１ 細胞接着性阻害活性の測定 本発明の水溶性ビニルポリマー誘導体が細胞のフィブロ
ンネクチンやビトロネクチンに対する接着阻害活性の測
定方法を以下に示す。本実験例で用いられた競争法は基
本的に生化学分野では広く用いられているものであり例
えば「Methods in Enzymology 」, 82,803-831 (1981),
特開平１−３０９６８２、同 ２−１７４７９７に開示
されている。
ンネクチンやビトロネクチンに対する接着阻害活性の測
定方法を以下に示す。本実験例で用いられた競争法は基
本的に生化学分野では広く用いられているものであり例
えば「Methods in Enzymology 」, 82,803-831 (1981),
特開平１−３０９６８２、同 ２−１７４７９７に開示
されている。
【００５６】実験方法 １．フィブロネクチンおよびビトロネクチン吸着プレー
トの作製 市販のフィブロネクチン（ヒト由来：生化学工業（株）
より購入）あるいはビトロネクチン（ヒト由来 フナコ
シ薬品（株）より購入）をＰＢＳで各々１．０μｌ／ｍ
ｌ、２．０μｌ／ｍｌに希釈しその希釈液０．５ｍｌを
２４穴のプラスチックプレートに入れ３７度（摂氏）で
一晩保温しコーティングした。次に非特異的吸着を防ぐ
目的で牛血清アルブミン（ＢＳＡ １％）を加え３７度
（摂氏）、１時間保温し、その後通常の洗浄操作（ＰＢ
Ｓ）を加え充分に水切りしてフィブロネクチン吸着プレ
ートを作製した。同様の操作によりビトロネクチン吸着
プレートを作製した。
トの作製 市販のフィブロネクチン（ヒト由来：生化学工業（株）
より購入）あるいはビトロネクチン（ヒト由来 フナコ
シ薬品（株）より購入）をＰＢＳで各々１．０μｌ／ｍ
ｌ、２．０μｌ／ｍｌに希釈しその希釈液０．５ｍｌを
２４穴のプラスチックプレートに入れ３７度（摂氏）で
一晩保温しコーティングした。次に非特異的吸着を防ぐ
目的で牛血清アルブミン（ＢＳＡ １％）を加え３７度
（摂氏）、１時間保温し、その後通常の洗浄操作（ＰＢ
Ｓ）を加え充分に水切りしてフィブロネクチン吸着プレ
ートを作製した。同様の操作によりビトロネクチン吸着
プレートを作製した。
【００５７】２．接着阻害実験 凍結乾燥により得た水溶性ビニルポリマー誘導体をDulb
ecco's Modified Eagles Medium （以下DMEMと略記す
る）を用い、０、０．２５、０．５、１．０、１．５ｍ
ｇ／ｍｌの各濃度の水溶性ビニルポリマー誘導体溶液と
した。この溶液０．２５ｍｌを上記方法で作製したプレ
ートに入れ、そこへ血管内皮細胞（４ｘ１０6 ｃｅｌｌ
ｓ／ｍｌ）の懸濁液を０．２５ｍｌ加え３７度（摂氏）
で１時間保温し細胞を接着させた。ＤＭＥＭ倍地で３回
洗浄し、未接着の細胞を剥離し、２％トリパンブルーで
染色して細胞数を計測した。結果を表２及び表３に示
す。
ecco's Modified Eagles Medium （以下DMEMと略記す
る）を用い、０、０．２５、０．５、１．０、１．５ｍ
ｇ／ｍｌの各濃度の水溶性ビニルポリマー誘導体溶液と
した。この溶液０．２５ｍｌを上記方法で作製したプレ
ートに入れ、そこへ血管内皮細胞（４ｘ１０6 ｃｅｌｌ
ｓ／ｍｌ）の懸濁液を０．２５ｍｌ加え３７度（摂氏）
で１時間保温し細胞を接着させた。ＤＭＥＭ倍地で３回
洗浄し、未接着の細胞を剥離し、２％トリパンブルーで
染色して細胞数を計測した。結果を表２及び表３に示
す。
【００５８】 表２ フィブロネクチンに対する細胞接着阻害（cells/well） 濃度（mg/ml ） 添加化合物 ０ ０．２５ ０．５ １．０ １．５ 合成物 １ × △ ○ ○ ○ 合成物 ２ × △ ○ ○ ○ 合成物 ３ × △ △ ○ ○ 合成物 ４ × △ ○ ○ ○ 合成物 ５ × △ ○ ○ ○ 合成物 ６ × △ ○ ○ ○ 合成物 ７ × △ ○ ○ ○ 合成物 ８ × △ ○ ○ ○ 合成物 ９ × △ ○ ○ ○ 合成物１０ × △ ○ ○ ○ 合成物１１ × △ ○ ○ ○ 合成物１２ × △ ○ ○ ○ 合成物１３ × △ ○ ○ ○ 合成物１４ × △ ○ ○ ○ 製造物 ２ × × △ △ △ ＲＧＤ × × × × △ ＲＧＤＳ × × × △ △ （cells/well）； ○：５０以下、△：５０〜１００、×：１００以上
【００５９】 表３ ビトロネクチンに対する細胞接着阻害（cells/well） 濃度（mg/ml ） 添加化合物 ０ １０ ５０ １００ ３００ 合成物 １ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ２ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ３ × △ △ ○ ○ 合成物 ４ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ５ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ６ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ７ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ８ × ○ ○ ○ ○ 合成物 ９ × ○ ○ ○ ○ 合成物１０ × ○ ○ ○ ○ 合成物１１ × ○ ○ ○ ○ 合成物１２ × ○ ○ ○ ○ 合成物１３ × ○ ○ ○ ○ 合成物１４ × ○ ○ ○ ○ 製造物 ２ × × △ △ △ ＲＧＤ × × × △ △ ＲＧＤＳ × × △ △ ○ （cells/well）； ○：１００以下、△：１００〜２００、×：２００以上
【００６０】試験例２ 血小板凝集阻害活性の測定 本発明において合成した水溶性ビニルポリマー誘導体の
ｉｎ ｖｉｔｒｏ系での血小板凝集阻害作用をヒト多血
小板血漿を用いて検討した。以下にその実験方法を示
す。 実験方法 新鮮なヒト血液に１／９量の３．８％クエン酸ナトリウ
ムを加え遠心分離（１０００ｒｐｍ、１０分）し、上層
を多血小板血漿として分取した。凍結乾燥より得た水溶
性ビニルポリマー誘導体を０〜１．５ｍｇ／ｍｌの種々
の濃度になるように生理食塩水に溶解した。水溶性ビニ
ルポリマー誘導体溶液２５μｌを血漿２００μｌに加え
３７度（摂氏）で３分間でインキュベートしたのち、５
０μＭアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）溶液あるいは２０
０μｇ／ｍｌのコラーゲン溶液を２５μｌ加え凝集の様
子をアグリゴメーターを用いて透過度を測定することに
より検定した。結果を表４に示す。
ｉｎ ｖｉｔｒｏ系での血小板凝集阻害作用をヒト多血
小板血漿を用いて検討した。以下にその実験方法を示
す。 実験方法 新鮮なヒト血液に１／９量の３．８％クエン酸ナトリウ
ムを加え遠心分離（１０００ｒｐｍ、１０分）し、上層
を多血小板血漿として分取した。凍結乾燥より得た水溶
性ビニルポリマー誘導体を０〜１．５ｍｇ／ｍｌの種々
の濃度になるように生理食塩水に溶解した。水溶性ビニ
ルポリマー誘導体溶液２５μｌを血漿２００μｌに加え
３７度（摂氏）で３分間でインキュベートしたのち、５
０μＭアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）溶液あるいは２０
０μｇ／ｍｌのコラーゲン溶液を２５μｌ加え凝集の様
子をアグリゴメーターを用いて透過度を測定することに
より検定した。結果を表４に示す。
【００６１】
【００６２】
【発明の効果】本発明の化合物は、水溶性ビニルポリマ
ーの側鎖にArg-Gly-Asp を必須単位とするオリゴペプチ
ドあるいはその繰返し構造を有するオリゴペプチドを導
入した水溶性ビニルポリマー誘導体であり、これによ
り、動物細胞の接着阻害、血小板凝集・粘着抑制の効果
が得られるとともに、レセプターとの結合能の増強及び
血液中での安定化が期待できる。
ーの側鎖にArg-Gly-Asp を必須単位とするオリゴペプチ
ドあるいはその繰返し構造を有するオリゴペプチドを導
入した水溶性ビニルポリマー誘導体であり、これによ
り、動物細胞の接着阻害、血小板凝集・粘着抑制の効果
が得られるとともに、レセプターとの結合能の増強及び
血液中での安定化が期待できる。
【００６３】
【００６４】配列番号：１ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００６５】配列番号：２ 配列の長さ：９ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００６６】配列番号：３ 配列の長さ：１５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００６７】配列番号：４ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００６８】配列番号：５ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００６９】配列番号：６ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７０】配列番号：７ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７１】配列番号：８ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７２】配列番号：９ 配列の長さ：５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７３】配列番号：１０ 配列の長さ：４ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７４】配列番号：１１ 配列の長さ：７ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７５】配列番号：１２ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７６】配列番号：１３ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７７】配列番号：１１ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
【００７８】配列番号：１４ 配列の長さ：６ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 7/06 Ｃ０７Ｋ 7/08 7/08 Ａ６１Ｋ 37/02 ＡＣＢ Ｃ１２Ｎ 5/06 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｅ Ａ６１Ｌ 33/00 Ｐ
Claims (4)
- 【請求項１】水溶性ビニルポリマーの側鎖にアミド結
合、エステル結合のいずれかを介し、下記一般式（１）
で表される接着性ペプチドを必須単位として有する水溶
性ビニルポリマー誘導体またはその塩。一般式（１）−
[R1]−[CO]−([X]−Arg −Gly −Asp −[Y])n −[Z] −
[R2]−式中、［ ］は存在するかあるいは存在しなくと
もよく、存在する場合はＸ、ＹはＳｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａ
ｌ、Ａｓｎ、Ｐｒｏから選択されるアミノ酸残基又はペ
プチド残基を示し、Ｚは−Ｏ−または−ＮＨ−を示す。
Ｒ1 、Ｒ2 のいずれか一方は、水素原子または炭素数が
１〜９の直鎖もしくは分岐のアルキル基、または炭素数
が６〜９のアリ−ル基であり、置換基を有していても良
い。他方は、水素原子または炭素数が１〜９の直鎖もし
くは分岐のアルキレン基、または炭素数が６〜９のアリ
−レン基であり、置換基を有していても良い。ｎは１〜
５の整数を表す。 - 【請求項２】分子量が約３、０００〜１００、０００の
範囲である請求項１記載の水溶性ビニルポリマー誘導体
またはその塩。 - 【請求項３】請求項１または２記載の水溶性ビニルポリ
マー誘導体またはその塩を有効成分とする動物細胞の接
着を阻害する薬剤。 - 【請求項４】請求項１または２記載の水溶性ビニルポリ
マー誘導体またはその塩を有効成分とする血小板凝集・
粘着抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2404347A JP2611874B2 (ja) | 1990-12-20 | 1990-12-20 | 水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2404347A JP2611874B2 (ja) | 1990-12-20 | 1990-12-20 | 水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH04221396A JPH04221396A (ja) | 1992-08-11 |
| JP2611874B2 true JP2611874B2 (ja) | 1997-05-21 |
Family
ID=18514025
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2404347A Expired - Fee Related JP2611874B2 (ja) | 1990-12-20 | 1990-12-20 | 水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2611874B2 (ja) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6017877A (en) * | 1990-04-06 | 2000-01-25 | La Jolla Cancer Research Foundation | Method and composition for treating thrombosis |
| US6521594B1 (en) | 1990-04-06 | 2003-02-18 | La Jolla Cancer Research Foundation | Method and composition for treating thrombosis |
| US5672585A (en) * | 1990-04-06 | 1997-09-30 | La Jolla Cancer Research Foundation | Method and composition for treating thrombosis |
| US5780303A (en) * | 1990-04-06 | 1998-07-14 | La Jolla Cancer Research Foundation | Method and composition for treating thrombosis |
| JP6529130B2 (ja) | 2013-08-26 | 2019-06-12 | 国立研究開発法人科学技術振興機構 | 接着剤 |
-
1990
- 1990-12-20 JP JP2404347A patent/JP2611874B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｊｏｕｒｎａｌ ２２［１１］９８５−９９０（１９９０） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH04221396A (ja) | 1992-08-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0488258B1 (en) | Propenamide derivatives, polymers, copolymers and use thereof | |
| EP0619118B1 (en) | Use of peptide derivatives | |
| EP0482649B1 (en) | CM-chitin derivatives and use thereof | |
| US5229366A (en) | Peptide-containing polyethylene glycol derivatives and application thereof | |
| JP2611874B2 (ja) | 水溶性ビニルポリマー誘導体とその用途 | |
| EP0644181B1 (en) | Amino acid derivative and use thereof | |
| JPH04213311A (ja) | プロペンアミド誘導体とノニオン性単量体との共重合物およびその用途 | |
| US5763408A (en) | Amino acid derivatives and application thereof | |
| JPH04221397A (ja) | 水溶性ポリペプチド誘導体とその用途 | |
| JP2745342B2 (ja) | プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途 | |
| JPH04221400A (ja) | ゼラチン誘導体およびその用途 | |
| JP2745343B2 (ja) | プロペンアミド誘導体とカチオン性単量体との共重合物およびその用途 | |
| JP2649871B2 (ja) | 疎水性単量体、該疎水性単量体とプロペンアミド誘導体単量体の共重合物およびその用途 | |
| JPH05271094A (ja) | カルボキシメチル化キチン誘導体を用いる癌転移抑制剤 | |
| JPH04235922A (ja) | グリコサミノグリカン誘導体を用いた細胞接着阻害剤 | |
| JPH06116288A (ja) | プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途 | |
| JPH04213308A (ja) | プロペンアミド誘導体とアニオン性単量体との共重合物およびその用途 | |
| JP2620728B2 (ja) | ペプチド含有ポリエチレングリコール誘導体とその用途 | |
| JPH06116287A (ja) | プロペンアミド誘導体、その重合物およびその用途 | |
| JP2662830B2 (ja) | Ｃｍ−キチン誘導体およびその用途 | |
| JP3190758B2 (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH0597699A (ja) | プロペンアミド誘導体の重合物からなる癌転移抑制剤 | |
| JPH0770183A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH0717999A (ja) | ペプチド誘導体及びその用途 | |
| JPH06128289A (ja) | ペプチド誘導体およびその用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |