JPH04213311A - プロペンアミド誘導体とノニオン性単量体との共重合物およびその用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【産業上の利用分野】本発明は、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ　のトリペプチドを必須単位として有するノニオン性
プロペンアミド誘導体共重合物とその塩、およびそれを
有効成分とする動物細胞の接着阻害剤、血小板の凝集・
粘着抑制剤、並びにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　のトリペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体の
ノニオン性架橋共重合物とその塩、およびそれを有効成
分とする動物細胞培養基体に関するものである。 【０００２】 【従来の技術】フィブロネクチンは細胞−細胞外基質の
接着に関与するタンパク質であり、血小板凝集やガン転
移にも関与していると考えられている。これらの相互作
用は一連の細胞表面のレセプターにより仲介され、フィ
ブロネクチンは分子量約２５万の巨大分子であるにもか
かわらず、これらのレセプターがそのＡｒｇ−Ｇｌｙ−
Ａｓｐ　配列を特異的に認識することが明らかにされ、
レセプターとの相互作用に重要なものであることが報告
されている（ネイチャー（Ｎａｔｕｒｅ）　、第３０９
　巻、３０頁、１９８４年）。 以来、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するオリゴあ
るいはポリペプチドを用いる研究が成されている。 【０００３】例えば、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を
有する種々の鎖状及び環状のオリゴペプチドを用いて血
小板凝集を阻害する方法（高分子学会予稿集（Ｐｏｌｙ
ｍｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐａｎ）、第３８
巻、３１４９頁、１９８９年、特開平２−１７４７９７
号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するペプチ
ドを細胞移動抑制剤として用いる方法（特開平２−４７
１６号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を固定化したＰ
ＭＭＡ膜を細胞接着膜として用いる方法（高分子学会予
稿集（Ｐｏｌｙｍｅｒ　Ｐｒｅｐｒｉｎｔｓ，　Ｊａｐ
ａｎ）、第３７巻、７０５　頁、１９８８年）　が報告
されている。さらに、ポリマーにＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ　を必須構成単位とするペプチドを共有結合させ動物
細胞培養基体、生体複合人工臓器用基体として用いる方
法（特開平１−３０９６８２号、特開平１−３０５９６
０号）　、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ　配列を有
するポリペプチドを体外血液用血小板保護剤として用い
る方法が開示されている（特開昭６４−６２１７　号）
　、また、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　配列を有するオリ
ゴペプチドあるいはその繰り返し構造を有するポリペプ
チドを用いて、ガン転移を抑制する方法が知られている
（（Ｉｎｔ．　Ｊ．　Ｂｉｏｌ．　Ｍａｃｒｏｍｏｌ．
）、第１１巻、２３頁、１９８９年、同誌、第１１巻、
２２６　頁、１９８９年、（Ｊｐｎ．　Ｊ．Ｃａｎｃｅ
ｒ　Ｒｅｓ．）　第６０巻、７２２　頁、１９８９年）
　。 【０００４】一般に高分子物質は多様な性状、機能を有
し生体との間で示される相互作用も低分子の場合と非常
に異なっている。そこで低分子薬物、生理活性ペプチド
などを高分子に結合させることで、それらの化合物と細
胞との相互作用や生体内における挙動を抑制しようとす
る研究が盛んに行なわれている。この様な、高分子のラ
イフサイエンスへの応用は、医用高分子材料、高分子医
薬、診断用材料、バイオリアクター、バイオアフィニテ
ィー材料などへ幅広く試みられており、これらに関する
高分子材料とその用途については、竹本喜一、砂本順三
、明石満　　共編“高分子と医薬”（三田出版会）、千
畑一郎編“バイオテクノロジーシリーズ固定化酵素”（
講談社、山崎誠、石井信一、岩井浩一編“アフィニティ
ークロマトグラフィー”（講談社）に詳しく記載されて
いる。 【０００５】プロペン酸誘導体から合成したプロペンア
ミド誘導体はビニル基を有しており、ビニル重合により
各種ノニオン性ビニルモノマーと容易に共重合物を合成
することができ、種々の材料に供することができる。水
不溶性のビニル重合体にＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を必
須単位とするオリゴペプチドを高分子反応により高分子
に導入した例は見られるが、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　
を必須単位とするオリゴペプチドを側鎖に有する重合可
能なプロペンアミド誘導体の水溶性ノニオン性共重合物
およびハイドロゲルは知られておらず、これらはレセプ
ターとの結合能の増強および血液中での安定化等が期待
できる。 【０００６】 【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、新規
なノニオン性プロペンアミド誘導体共重合物とその塩、
およびそれを有効成分とする動物細胞の接着阻害剤、血
小板凝集・粘着抑制剤および細胞培養基体を提供するこ
とである。 【０００７】 【課題を解決するための手段】本発明は、下記一般式〔
Ｉ〕の側鎖に、下記一般式〔ＩＩ〕で表される接着性ペ
プチドを必須単位として有するプロペンアミド誘導体と
、下記一般式〔ＩＩＩ　〕で表わされるノニオン性単量
体との共重合物又はその塩を提供するものである。 【０００８】一般式〔Ｉ〕Ｒ１Ｒ２Ｃ　＝ＣＲ３　−Ｃ
Ｏ−［ＮＨ］−式中、Ｒ１　、Ｒ２　は水素原子又はカ
ルボキシル基を表し、Ｒ３　は水素原子、メチル基、エ
チル基、ハロゲン原子又はカルボキシメチル基を表す。 【０００９】一般式〔ＩＩ〕−［Ｒ４］−［ＣＯ］−（
［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］
−［Ｒ５］−式中、Ｘ，ＹはＳｅｒ，　Ｇｌｙ，　Ｖａ
ｌ，　Ａｓｎ，　Ｐｒｏ　から選択されるアミノ酸残基
又はペプチド残基を表し、Ｚは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示
す。Ｒ４　、Ｒ５　のいずれか一方は水素原子であり、
他方は炭素数が１〜１１の直鎖又は分岐のアルキレン基
、又は炭素数が６〜１１のアリーレン基であり、置換基
を有していてもよい。置換基としては、カルボニル基、
カルボキシル基、アミノ基、ヒドロキシル基、スルホ基
、ハロゲン原子、アリール基、ニトロ基、シアノ基、不
飽和基の２重結合、３重結合等があげられ、同一鎖に２
つ以上有していてもよい。ｎは１〜５の整数を表す。 【００１０】一般式〔ＩＩＩ　〕Ｈ２Ｃ＝ＣＲ６　−［
ＣＯ］−［Ｗ］−Ｒ７式中、Ｒ６　は水素原子又はは炭
素数１〜３のアルキル基で置換基を有していてもよい。 置換基としては、ヒドロキシル基、ハロゲン原子、ニト
ロ基、シアノ基、等があげられ、同一鎖に２つ以上有し
ていてもよい。 【００１１】Ｗは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。Ｒ７　は
水素原子又は炭素数が１〜１２の直鎖又は分岐のアルキ
ル基、又は炭素数が６〜１１のアリール基であり置換基
として少なくともヒドロキシル基、アミド基のいずれか
を含み、さらに置換基を有していてもよい。置換基とし
ては、カルボニル基、ヒドロキシル基、ハロゲン原子、
アリール基、ニトロ基、シアノ基、不飽和基の２重結合
、３重結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有していて
もよい。また、アミド結合、エステル結合、エーテル結
合、尿素結合、カルバミン酸エステル結合、炭酸エステ
ル結合等があげられ、同一鎖に２つ以上有していてもよ
く、さらにピロリドンの様なヘテロ環を有していてもよ
い。 【００１２】一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ〕、〔ＩＩＩ　〕に
おいて、［　　］は［　　］内の基が存在するかあるい
は存在しなくてもよいことを示す。 【００１３】本発明はさらに、上記ノニオン性プロペン
アミド誘導体共重合物およびその塩を有効成分とする動
物細胞の接着阻害剤および血小板凝集・粘着抑制剤を提
供するものである。共重合物中のプロペンアミド誘導体
由来の構成単位の含有量は、好ましくは　０．１〜９０
モル％、さらに好ましくは　０．５〜６０モル％である
。 【００１４】ノニオン性プロペンアミド誘導体共重合物
およびその塩の分子量は好ましくは３０万以下、特に３
０００〜２０万の範囲で、室温で水溶性であることが好
ましい。 【００１５】本発明はまた、Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　
のペプチド配列を必須単位として共有結合してなるプロ
ペンアミド誘導体のノニオン性架橋共重合物及びその塩
を提供するものである。架橋共重合物は水溶液中でハイ
ドロゲル状であることが好ましい。架橋共重合物を合成
する場合、プロペンアミド誘導体、ノニオン性単量体に
加え多官能性単量体を添加する。多官能性単量体として
は、トリエチレングリコールジメタクリレート、メチレ
ンビスアクリルアミド等のジメタクリレート、ジアクリ
レート、ジメタクルアミド、ジアクリルアミドやジビニ
ルベンゼン等の芳香環を有する多官能性単量体、さらに
細胞接着性フラグメントを有する多官能性単量体等を用
いることができる。架橋共重合物中、プロペンアミド誘
導体由来の構成単位の含有量は、好ましくは０．１〜９
０モル％、さらに好ましくは０．５〜６０モル％であり
、また多官能性単量体由来の構成単位の含有量は、好ま
しくは０．１〜３０モル％、さらに好ましくは０．５〜
２０モル％である。本発明はさらに、この架橋共重合物
又はその塩を有効成分とする動物細胞の培養基体を提供
するものである。 【００１６】本発明に係わる接着性ペプチドに用いられ
るアミノ酸はＬ体、Ｄ体どちらでもよいが、好ましくは
Ｌ体である。 【００１７】本発明に用いることのできるノニオン性単
量体は通常の重合可能なビニル単量体であればよく、特
に限定されない。 【００１８】例えば、Ｎ−ビニルピロリドン、２−ヒド
ロキシエチルアクリレート、２−ヒドロキシエチルメタ
クリレート、３−ヒドロキシプロピルメタクリレート、
３−ヒドロキシプロピルアクリレート、２−ヒドロキシ
プロピルメタクリレート、２−ヒドロキシプロピルアク
リレート、４−ヒドロキシブチルメタクリレート、４−
ヒドロキシブチルアクリレート、２−ヒドロキシブチル
メタクリレート、２−ヒドロキシブチルアクリレート、
ポリプロピレングリコールモノメタクリレート、ポリプ
ロピレングリコールモノアクリレート、ポリエチレング
リコールモノメタクリレート、ポリエチレングリコール
モノアクリレート等が挙げられる。 【００１９】また、テトラヒドロフルフリルメタクリレ
ート、テトラヒドロフルフリルアクリレート、エトキシ
エチルメタクリレート、メトキシエチルメタクリレート
、エトキシエチルアクリレート、メトキシエチルアクリ
レート、アクリルアミド、Ｎ−メチロールアクリルアミ
ド、Ｎ−イソブトキシメチルアクリルアミド、ｔ−ブチ
ルアクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアクリルアミド、
グリセリルアクリレート、メタクリルアミド、Ｎ−メチ
ロールメタクリルアミド、Ｎ−イソブトキシメチルメタ
クリルアミド、ｔ−ブチルメタクリルアミド、Ｎ，Ｎ−
ジメチルメタクリルアミド、グリセリルメタクリレート
、アクリロニトリル、Ｎ−アクリロイルグルタミンアミ
ド、Ｎ−メタクリロイルグルタミンアミド、Ｎ−アクリ
ロイルセリンアミド、Ｎ−メタクリロイルセリンアミド
、ヒドロキシエチルアクリルアミド、ヒドロキシエチル
メタクリルアミド、Ｎ−アクリロイルグリシンアミド、
Ｎ−メタクリロイルグリシンアミド、２−ヒドロキシプ
ロピルメタクリルアミド、３−ヒドロキシプロピルメタ
クリルアミド、３−ヒドロキシプロピルアクリルアミド
、エトキシトリエチレングリコールメタクリレート、等
も使用できる。 【００２０】好ましくは、Ｎ−ビニルピロリドン、Ｎ，
Ｎ−ジメチルメタクリルアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルアク
リルアミド、２−ヒドロキシプロピルメタクリルアミド
、エトキシトリエチレングリコールメタクリレート、３
−ヒドロキシプロピルメタクリルアミド、２−ヒドロキ
シプロピルアクリルアミド、ヒドロキシエチルメタクリ
ルアミド、ヒドロキシエチルアクリルアミド、Ｎ−メタ
クリロイルグリシンアミド、Ｎ−アクリロイルグリシン
アミド、Ｎ−メタクリロイルセリンアミド、Ｎ−アクリ
ロイルセリンアミド、Ｎ−メタクリロイルグルタミンア
ミド、Ｎ−アクリロイルグルタミンアミドである。 【００２１】本発明のノニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物の塩として例えば、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、
リン酸塩、ホウ酸塩等の無機酸との塩や、酢酸塩、トリ
フルオロ酢酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、乳
酸塩、酒石酸塩等の有機酸との塩が挙げられ、そのよう
な塩への変換は慣用手段で行なうことができる。 【００２２】ペプチド合成方法は特に限定されるもので
はなく、液相法、固相法、および自動合成装置による合
成方法が挙げられる。これらの合成方法の詳細について
は、生化学実験講座“タンパク質の化学ＩＶ”ｐ２０７
−４９５（日本生化学会編、東京化学同人）、“続生化
学実験講座タンパク質の化学（下）”（日本生化学会編
、東京化学同人）、泉屋ら編“ペプチド合成の基礎と実
験”（丸善）に記載されている。また、市販されている
合成ペプチドを利用することも可能である。 【００２３】プロペン酸誘導体とアミノアルキルカルボ
ン酸および細胞接着性ペプチドとの結合方法としては、
活性エステル法、混合酸無水物法、アジド法、酸塩化物
法、対称酸無水物法、ＤＣＣ法、ＤＣＣ−アディティブ
法、カルボニルジイミダゾール法等を利用したアミド結
合合成方法が挙げられる。プロペンアミド誘導体とノニ
オン性単量体との共重合物および架橋共重合物は一般の
ラジカル重合法、イオン重合法により得られる。水溶性
重合物はゲルろ過法、透析法等により特定の分子量分画
を行なうことが出来る。架橋共重合物は多官能性単量体
の組成を変えることで含水率、ゲル強度等の物性が異な
るハイバロゲルとして得ることができる。 【００２４】本発明のノニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物およびその塩は、細胞接着性蛋白質のコア配列
Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓｐ　を有し、該コア配列を介して
細胞接着性蛋白質と同様の機序で細胞に接着する。その
ため、細胞接着性蛋白のアゴニスト又はアンタゴニスト
として種々の生物活性を示し、免疫調整作用、創傷治癒
作用、毛細血管中で起こる癌細胞による血小板凝集抑制
作用、神経疾患治癒作用などの広範な生物活性が認めら
れている。 【００２５】従って、本発明のノニオン性プロペンアミ
ド誘導体共重合物およびその塩は、その少なくとも一種
を、場合により慣用の担体又は医薬用助剤とともに、癌
転移抑制剤、創傷治癒剤、免疫調整剤、血小板凝集粘着
抑制剤として患者に投与することが可能である。特に、
動物細胞接着阻害剤又は血小板凝集粘着抑制剤としての
使用が好ましい。その投与量は、０．２μｇ／ｋｇ〜４
００ｍｇ／ｋｇの範囲で、症状、年齢、体重等に基づい
て決定される。 【００２６】本発明のノニオン性プロペンアミド誘導体
共重合物およびその塩は、ペプチド系医薬に一般に使用
されている投与方法、即ち非経口投与方法、例えば静脈
内投与、筋肉内投与、皮下投与等によって投与するのが
好ましい。そのような注射用製剤を製造する場合、本発
明のノニオン性プロペンアミド誘導体共重合物およびそ
の塩を例えば、後記実施例で示すようにＰＢＳ又は生理
食塩水に溶解して、注射用製剤としてもよく、あるいは
０．１Ｎ程度の酢酸水等に溶解した後、凍結乾燥製剤と
してもよい。この様な製剤には、グリシンやアルブミン
等の慣用の安定剤を添加してもよい。さらに、本発明の
ノニオン性プロペンアミド誘導体共重合物およびその塩
は、例えばリポソーム中に包容したマイクロカプセル剤
あるいはミクロスフェア状、ハイドロゲル状とすれば、
経口投与することも可能であり、座剤、舌下錠、点鼻ス
プレー剤等の形にすれば、消化管以外の粘膜からも吸収
させることが可能である。 【００２７】動物細胞の培養における細胞培養基体の使
用方法については、通常の方法で行なわれ特に限定され
ない。例えば、接着性ペプチドを共有結合処理したビー
ズ培養液中に浮遊させて低速度で撹拌を行なうことで動
物細胞をマイクロキャリアー表面に接着させ培養する方
法、接着性ペプチドを共有結合処理したシャーレ・ロー
ラーびん等の上で動物細胞を培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理した中空糸に培養液を還流させ動物
細胞を中空糸内面に接着させ培養する方法、接着性ペプ
チドを共有結合処理したマイクロキャリアーを充填した
カラムを用いる方法等が挙げられる。 【００２８】この発明の細胞培養基体は、種々の細胞の
培養に使用することができ、細胞の種類は特に限定され
ず、生体由来細胞、ハイブリドーマ等が挙げられる。 【００２９】 【実施例】以下実施例により本発明を更に説明するが本
発明はこれに限定されるものではない。 【００３０】製造例１カルボキシエチルメタクリルアミ
ドをショッテンバウマン反応により合成した。即ち、β
−アラニン１７．８ｇ（０．２ｍｏｌ）の水酸化ナトリ
ウム水溶液にメタクリル酸クロリド２０．９ｇ（０．２
ｍｏｌ）を氷冷下滴下し、４時間撹拌後塩酸により中和
した。減圧濃縮により濃縮し沈澱した塩化ナトリウムを
ろ別した。濃縮液をクロロホルムで抽出し、乾燥後減圧
濃縮してクロロホルムを留去した。濃縮物をエーテルで
洗浄し製造物１を白色固体として１７．６ｇ得た。（収
率５６％）製造物１ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ
２Ｈ４−ＣＯＯＨ【００３１】製造例２〜８製造例１と
同じ方法によりアクリル酸クロリド、メタクリル酸クロ
リド、エタクリル酸クロリドと４−アミノ酪酸、５−ア
ミノ吉草酸、６−アミノカプロン酸、１２−アミノラウ
リン酸、ロイシン、グルタミン、ｐ−アミノ安息香酸、
グリシン、グルタミン酸との反応により以下のプロペン
酸誘導体を製造した。製造物２ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−Ｎ
Ｈ−（ＣＨ２）３−ＣＯＯＨ収率５２％製造物３ＣＨ２
＝ＣＣ２Ｈ５　−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）４−ＣＯＯＨ
収率６１％製造物４ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−（
ＣＨ２）５−ＣＯＯＨ収率６９％製造物５ＣＨ２＝ＣＨ
−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）１１　−ＣＯＯＨ収率７１％
製造物６ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ
（ＣＨ３）２）　−ＣＯＯＨ収率６４％製造物７ＣＨ２
＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＮＨ２）
　−ＣＯＯＨ収率５９％製造物８ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−
ＮＨ−ｐ　−Ｃ６Ｈ４−ＣＯＯＨ収率６８％製造物９ア
ミノエチルメタクリルアミドをショッテンバウマン反応
により合成した。即ち、エチレンジアミン１２０ｇ（２
ｍｏｌ）を溶かしたクロロホルム溶液（４００ｍｌ）へ
、メタクリル酸クロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）を
氷冷下滴下し４時間撹拌後減圧濃縮してクロロホルムを
留去した。濃縮物に５％炭酸水素ナトリウム水溶液５０
ｍｌを加えクロロホルムで抽出した。 硫酸ナトリウム上で乾燥の後濃縮し、クロロホルム／メ
タノール＝７／３を溶離液としたアルミナカラムクロマ
トグラフィーにより精製した。収量１４．８ｇ（５７．
８％、０．１１６ｍｏｌ）製造物９ＣＨ２＝ＣＣＨ３−
ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ２　 【００３２】製造例１０ヒドロキシエチルメタクリルア
ミドをショッテンバウマン反応により合成した。メタク
リル酸クロリド２０．９ｇ（０．２ｍｏｌ）をエタノー
ルアミン１２．２ｇ（０．２ｍｏｌ）の水酸化ナトリウ
ム水溶液４００ｍｌ中に氷冷下滴下し、４時間撹拌後塩
酸により中和した。 減圧濃縮により水溶液を濃縮し、生じた塩化ナトリウム
をろ別した。酢酸エチルにより抽出し、シリカゲルカラ
ムクロマトグラフィー（溶離液；酢酸エチル）により精
製し目的物を１６．８ｇ（６５％）得た。製造物１０Ｃ
Ｈ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＯＨ　　【０
０３３】製造例１１〜１４製造例１０と同様にして、２
−ヒドロキシプロピルアミン１４．８ｇ（０．２ｍｏｌ
）、グリシンアミド１４．８ｇ（０．２ｍｏｌ）、セリ
ンアミド２０．８ｇ（０．２ｍｏｌ）及びグルタミンア
ミド２９．０ｇ（０．２ｍｏｌ）を用いて、それぞれ製
造物１１〜１４を合成した。製造物１１ＣＨ２＝ＣＣＨ
３−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−ＯＨ　　収率６０％製
造物１２ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ２　−Ｃ
ＯＮＨ２　収率６３％製造物１３ＣＨ２＝ＣＣＨ３−Ｃ
Ｏ−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）−ＣＯＮＨ２　収率５７
％製造物１４ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（Ｃ
２Ｈ４ＣＯＮＨ２）　−ＣＯＮＨ２　収率５９％ 【００３４】製造例１５製造例１０で合成したヒドロキ
シエチルメタクリルアミド（製造物１０）をラジカル重
合により重合した。ヒドロキシエチルメタクリルアミド
２ｇを２０ｍｌのＤＭＦに溶解し、和光純薬製のラジカ
ル開始剤Ｖ６５（２，２−アゾビス（２，４−ジメチル
バレロニトリル））１０ｍｇを加え窒素気流下６５℃で
４時間重合した。重合物は酢酸エチルで沈澱させた後、
スペクトラポア７（分子分画量３０００）を用い純水に
対して透析し低分子量画分を除いた後凍結乾燥した。収
量１．３５ｇ（製造物１５） 【００３５】分子量は東ソー（株）製　ＴＳＫｇｅｌ　
Ｇ３０００ＳＷ　カラムを用い、移動相は０．２Ｍリン
酸緩衝液（ｐＨ７．４）とし、流速１．０ｍｌ／ｍｉｎ
　で測定した。ＰＥＧ換算分子量は約３４０００であっ
た。 【００３６】製造例１６製造例１０で合成したヒドロキ
シエチルメタクリルアミドをラジカル重合により重合し
ハイドロゲルを作成した。シラン処理したガラス板（５
ｃｍ×６ｃｍ×１ｃｍ）２枚とガスケットを用意した。 カルボキシエチルメタクリルアミド２ｇとメチレンビス
アクリルアミド１００ｍｇ（５ｗｔ％）を蒸留水１２ｍ
ｌに溶解し１Ｎ　ＮａＯＨ　でｐＨ７．４に合わせた。 これに過硫酸アンモニウム１０ｍｇを加え充分窒素置換
をした後、ガラス板の間に注入した。万力でガラス板を
押え、６０℃で２０時間重合させた。生成したハイドロ
ゲルを蒸留水で洗浄し未反応単量体を除いた。（紫外線
ランプにより滅菌処理した後細胞培養実験に供した。）
（製造物１６）【００３７】合成例１〜１４接着性ペプ
チドの固相法による合成Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ方式によ
るペプチド合成装置を用いて合成を行なった。α−アミ
ノ酸の保護には、Ｂｃｏ基を用いＡｒｇ−Ｇｌｙ−Ａｓ
ｐ　を必須単位として含むオリゴペプチドを合成し、そ
の末端に製造例１−８に示したプロペン酸誘導体および
アクリル酸、メタクリル酸、エタクリル酸を縮合させた
。トリフルオロメタンスルホン酸を用いて樹脂からの切
断及び側鎖保護基の除去を行ない、分取用ＨＰＬＣ（高
速液体クロマトグラフィー）で精製し、単一ピークを示
すプロペンアミド誘導体を得た。これを、陰イオン交換
樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４００；Ｃｌ型）
を通し塩酸塩とした。 【００３８】以下、ＡｒｇをＲ、ＧｌｙをＧ、Ａｓｐを
Ｄ、ＳｅｒをＳ、ＰｒｏをＰと示す。また保護基、試薬
の略号は以下の様である。Ｂｏｃ　　　　　　　　：ｔ
−ブトキシカルボニルＯＢｚｌ　　　　　　：ベンジル
エステルＨＯＢｔ　　　　：ヒドロキシベンゾトリアゾ
ールＯＳｕ　　　　　　：Ｎ−ヒドロキシスクシンイミ
ドＯＮｂ　　　　　　：ニトロベンジルエステルＴＦＡ
　　：トリフルオロ酢酸ＤＣＣ　　　　　　：ジシクロ
ヘキシルカルボジイミドＤＣ　ｕｒｅａ　　　：シクロ
ヘキシルウレアＭｔｓ　　　　　　　　：メシチレンス
ルホニルＤＭＦ　　　　　　：ジメチルホルムアミド 【００３９】合成物１ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−（Ｃ
Ｈ２）３−ＣＯ−ＲＧＤ　（配列番号１）収率３５％ア
ミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９９８２Ｇ
：１．０３１９Ｄ：０．９９７１４−アミノ酪酸：１．
０２４７マススペクトル　　Ｍ＋　：　　４８６ 【００４０】合成物２ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−
Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−（ＲＧＤ）２（配列番号２）収率２４
％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：１．９５６
８Ｇ：２．１００４Ｄ：１．９６７３β−アラニン：１
．０２５７マススペクトル　　Ｍ＋　：　　８１５ 【００４１】合成物３ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−
Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−（ＲＧＤ）３（配列番号３）収率１７
％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：２．８３８
２Ｇ：３．１１２１Ｄ：２．９４５１β−アラニン：１
．０２８７マススペクトル　　Ｍ＋　：　　１１４４ 【００４２】合成物４ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−
Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−（ＲＧＤ）５（配列番号４）収率１０
％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：４．８６６
４Ｇ：５．１９６５Ｄ：４．９０３３β−アラニン：１
．０４４９マススペクトル　　Ｍ＋　：　　１８０２ 【００４３】合成物５ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−（Ｃ
Ｈ２）３−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　（配列番号５）収率３３
％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９９８
９Ｇ：１．１００８Ｄ：０．９５９６Ｓ：０．８９９１
４−アミノ酪酸：１．００５４マススペクトル　　Ｍ＋
　：　　５７３ 【００４４】合成物６ＣＨ２＝ＣＣ２Ｈ５　−ＣＯ−Ｎ
Ｈ−（ＣＨ２）４−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　（配列番号６）
収率３１％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０
．９８７４Ｇ：０．９９２７Ｄ：０．９９３５Ｓ：０．
８８６９マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６１５【００
４５】合成物７ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ
２）５−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　（配列番号７）収率３０％
アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９７５５
Ｇ：１．０３６１Ｄ：０．９６７１Ｓ：０．８９４３マ
ススペクトル　　Ｍ＋　：　　６１５【００４６】合成
物８ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）１１　−Ｃ
Ｏ−ＲＧＤＳ　　（配列番号８）収率２７％アミノ酸分
析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９６４７Ｇ：１．０
５７０Ｄ：０．９８８４Ｓ：０．８６０３マススペクト
ル　　Ｍ＋　：　　６８６【００４７】合成物９ＣＨ２
＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ＣＨ（ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２）
　−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　（配列番号９）収率３１％アミ
ノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９８１４Ｇ：
１．０５１９Ｄ：０．９７３１Ｓ：０．８９８９ロイシ
ン：０．９８５３マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６０
１ 【００４８】合成物１０ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＮＨ
−ＣＨ（Ｃ２Ｈ４ＣＯＮＨ２）　−ＣＯ−ＲＧＤＳ　（
配列番号１０）収率３３％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５
０μｌ）Ｒ：０．９７７１Ｇ：１．０５０１Ｄ：０．９
６５１Ｓ：０．８９６９グルタミン酸：０．９５８７マ
ススペクトル　　Ｍ＋　：　　６３０【００４９】合成
物１１ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＮＨ−ｐ−Ｃ６Ｈ４−ＣＯ
−ＲＧＤＳ（配列番号１１）収率３１％アミノ酸分析（
ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９８４５Ｇ：１．０３６
１Ｄ：０．９５５４Ｓ：０．８８７９マススペクトル　
　Ｍ＋　：　　５９５【００５０】合成物１２ＣＨ２＝
ＣＣ２Ｈ５　−ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）４−ＣＯ−ＧＲ
ＧＤＳ　（配列番号１２）収率３５％アミノ酸分析（ｎ
ｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９５８２Ｇ：２．０３７１
Ｄ：０．９８７４Ｓ：０．８７３３マススペクトル　　
Ｍ＋　：　　６７２ 【００５１】合成物１３ＣＨ２＝ＣＣＨ３−ＣＯ−ＧＲ
ＧＤＳＰ（配列番号１３）収率２６％アミノ酸分析（ｎ
ｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９６６９Ｇ：２．０５５２
Ｄ：０．９８０９Ｓ：０．８６７７Ｐ：０．９５４６マ
ススペクトル　　Ｍ＋　：　　６５６【００５２】合成
物１４ＣＨ２＝ＣＨ−ＣＯ−ＧＧＧＲＧＤＳ　（配列番
号１４）収率３０％アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ
）Ｒ：０．９５５４Ｇ：４．００１１Ｄ：０．９３８０
Ｓ：０．８５１８マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６５
９【００５３】合成例１５合成物１５ＣＨ２＝ＣＣＨ３
−ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−ＲＧＤＳ　　（配列番
号１５）【００５４】合成物１５を逐次延長法により液
相法で合成した。（１）　ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢ
ｚｌ　の合成ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）　６０ｇ（０．２
ｍｏｌ）を４００ｍｌの酢酸エチルに加え、さらにトリ
エチルアミン２１ｇ（０．２ｍｏｌ）、臭化ベンジル３
５．４ｇ（０．２ｍｏｌ）を加えて還流下４時間反応さ
せた。冷却後、塩をろ別した後ＮａＨＣＯ３水溶液、Ｎ
ａＣｌ水溶液で洗浄した。これをＮａ２ＳＯ４で乾燥し
た後減圧乾固し、白色粉末５４ｇ（収率６８％）を得た
。 【００５５】（２）　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ
（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌの合成ＢｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢ
ｚｌ　３０ｇ（７８ｍｍｏｌ）にＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２
＝１／１　　２００ｍｌを加え室温で１時間撹拌した後
、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。これを酢酸エ
チルに溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和した後ＮａＣｌ
水溶液で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから酢酸エ
チルを減圧留去した。 【００５６】この化合物と、ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
ＯＳｕ　３２．８ｇ（７８ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２５
００ｍｌに溶解し終夜撹拌した。 減圧下ＣＨ２Ｃｌ２を留去してから酢酸エチルに溶解し
た。ＮａＨＣＯ３水溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣ
ｌ水溶液の順に洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減
圧乾固して白色粉末を４１ｇ（収率８９％）得た。 【００５７】（３）　ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　の合成ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　　３５ｇ（５９ｍｍ
ｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２Ｃｌ２＝１：１２００ｍｌを加
え室温で１時間撹拌した後、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減
圧濃縮した。これを酢酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ３水
溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ２Ｓ
Ｏ４で乾燥してから酢酸エチルを減圧留去した。 【００５８】この化合物とＢｏｃＧｌｙ　　９．８ｇ（
５９ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２に溶解し、ＤＣＣ１２．
２ｇ（５９ｍｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹拌してから
、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ３水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄
し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減圧乾固して白色粉末
を３０．５ｇ（収率７５％）得た。 【００５９】（４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚｌ　の合成Ｂ
ｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＯＢｚ
ｌ　２５ｇ（３９ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２Ｃｌ２＝
１：１２００ｍｌを加え室温で１時間撹拌した後、ＴＦ
ＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。これを酢酸エチルに
溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和した後ＮａＣｌ水溶液
で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから酢酸エチルを
減圧留去した。 【００６０】この化合物とＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　１
７．８ｇ（３９ｍｍｏｌ）をＤＭＦ４００ｍｌに溶解し
、ＤＣＣ８．０ｇ（３９ｍｍｏｌ）、　ＨＯＢｔ　６．
８ｇ（４５ｍｍｏｌ）を氷冷下加え３時間撹拌してから
、さらに室温で終夜撹拌した。ＤＣｕｒｅａをろ別して
から減圧濃縮し酢酸エチルに溶解した。ＮａＨＣＯ３水
溶液、１Ｍクエン酸水溶液、ＮａＣｌ水溶液の順に洗浄
し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから減圧乾固して白色粉末
を１９．５ｇ（収率５０％）得た。 【００６１】（５）　合成物１５の合成ＢｏｃＡｒｇ（
Ｍｔｓ）ＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）Ｏ
Ｂｚｌ　１５．０ｇ（１５ｍｍｏｌ）にＴＦＡ：ＣＨ２
Ｃｌ２＝１：１を１００ｍｌ加えて室温で１時間撹拌し
た後、ＴＦＡとＣＨ２Ｃｌ２を減圧濃縮した。これを酢
酸エチルに溶解しＮａＨＣＯ３水溶液で中和した後、Ｎ
ａＣｌ水溶液で洗浄した。Ｎａ２ＳＯ４で乾燥してから
酢酸エチルを減圧留去した。 【００６２】この化合物とカルボキシエチルメタクリル
アミド２．４ｇ（１５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２２００
ｍｌに溶解しＤＣＣ３．１ｇ（１５ｍｍｏｌ）を氷冷下
加え３時間撹拌してから、さらに室温で終夜撹拌した。 減圧濃縮してからアセトンを加え、生じたＤＣｕｒｅａ
をろ別した。減圧濃縮後、酢酸エチルに続いてエーテル
で洗浄し、減圧乾燥して白色粉末を１０．０ｇ（収率６
５％）得た。 【００６３】この化合物１０ｇ（９．８ｍｍｏｌ）のＴ
ＦＡ溶液に、１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チ
オアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液を氷冷下加
えて１時間反応させ、ペプチド側鎖および末端の保護基
の脱保護を行なった。反応液をエーテル中に投入しオイ
ル状の沈澱物を蒸留水に溶解し酢酸エチルで洗浄した後
、陰イオン交換樹脂カラム（アンバーライトＩＲＡ−４
００；Ｃｌ型）に通して塩酸塩とし凍結乾燥した。白色
固体４．８ｇ（収率８０％）が得られた。アミノ酸分析
（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：０．９８７７Ｇ：０．９９
１６Ｄ：０．９８９９Ｓ：０．８８９１β−アラニン：
１．０１１５マススペクトル　　Ｍ＋　：　　５７３ 【００６４】合成例１６合成物１６ＣＨ２＝ＣＣＨ３−
ＣＯ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＣＯ−ＲＧＤＳＧＮＨ２（配列
番号１６）【００６５】合成例１５と同様な方法でペプ
チド鎖を延長した。以下にその概略を示す。（１）　Ｂ
ｏｃＳｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２　の合成ＢｏｃＳｅ
ｒ（Ｂｚｌ）　　　　　　　　　：５９ｇ（０．２ｍｏ
ｌ）ＧｌｙＮＨ２・ＨＣｌ　　　　　　　　　：２２．
１ｇ（０．２ｍｏｌ）Ｎ−メチルモルホリン　　：２０
．２ｇ（０．２ｍｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　
　　　　　　：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　
　　　　：４１．２ｇ（０．２ｍｏｌ）（１）　の収量
　　　　５８．３ｇ（収率８３％）【００６６】（２）
　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮ
Ｈ２の合成（１）　の生成物　　　　　　　　：５６．
２ｇ（０．１６ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　
　　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＡｓｐ（
ＯＢｚｌ）　　　　　　　　：５１．７ｇ（０．１６ｍ
ｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：８
００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：３３ｇ
（０．１６ｍｏｌ）（２）　の収量　　　　７１．２ｇ
（収率８０％）【００６７】（３）　ＢｏｃＧｌｙＡｓ
ｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２　の合成
（２）　の生成物　　　　　　　　：６６．７ｇ（０．
１２ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　
　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＧｌｙ　　　　　　
　　　　　　　　：５１．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）ＣＨ
２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：７００ｍｌＤ
ＣＣ　　　　　　　　　　　　　　：２４．７（０．１
２ｍｏｌ）（３）　の収量　　　　６１．８ｇ（収率８
４％）【００６８】（４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）Ｇ
ｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｓｅｒ（Ｂｚｌ）ＧｌｙＮＨ２
　の合成（３）　の生成物　　　　　　　　：６１．３
ｇ（０．１ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　
：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　　
　　　　　　　：４５．６ｇ（０．１ｍｏｌ）ＤＭＦ　
　　　　　　　　　　　　　：８００ｍｌＤＣＣ　　　
　　　　　　　　　　　：２２．５（０．１ｍｏｌ）Ｈ
ＯＢｔ　　　　　　：１４ｇ（０．１ｍｏｌ）（４）　
の収量　　　　４２．８ｇ（収率４５％） 【００６９】（５）　合成物１６の合成（４）　の生成
物　　　　　　　　　　　　：５．０ｇ（５．３ｍｍｏ
ｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２：５０ｍｌ／５０ｍｌカルボ
キシエチルメタクリルアミド：０．８３ｇ（５．３ｍｍ
ｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　：５０ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　：１．１ｇ（５．３
ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　：０．７２ｇ（５．３ｍｍｏｌ）１Ｍ
−トリフルオロメタンスルホン酸−チオアニソール−ｍ
−クレゾールのＴＦＡ溶液　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　：２５０ｍｌアンバー
ライトＩＲＡ−４００；Ｃｌ型処理合成物１６　　　　
２．２９ｇ（収率６５％）アミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５
０μｌ）Ｒ：０．９５１７Ｇ：２．１００４Ｄ：０．９
７５３Ｓ：０．８９２６β−アラニン：１．０１４３マ
ススペクトル　　Ｍ＋　：　　６２９【００７０】合成
例１７合成物１７ＲＧＤＧ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−Ｃ
Ｏ−ＣＣＨ３＝ＣＨ２　（配列番号１７）【００７１】
合成物１７を逐次延長法により液相法にて合成した。（
１）　ＢｏｃＧｌｙＯＮｂ　の合成ＢｏｃＧｌｙ３５ｇ
（０．２ｍｏｌ）、トリエチルアミン２８ｍｌ（０．２
ｍｏｌ）、臭化ｐ−ニトロベンジル４３．２ｇ（０．２
ｍｏｌ）を４００ｍｌの酢酸エチルに溶解し、５時間還
流した後室温で一晩放置した。沈澱物をろ別しろ液を減
圧濃縮した。酢酸エチル１１に溶解し、水およびＮａＨ
ＣＯ３水溶液で洗浄した後さらに水洗し、Ｎａ２ＳＯ４
で乾燥、ろ液を減圧濃縮し酢酸エチル−ヘキサンより再
結晶した。５２．７ｇ（収率８５％）。 【００７２】以下合成例１５と同様な方法でペプチド鎖
を延長した。以下に、その概略を示す。 【００７３】（２）　ＢｏｃＡｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙ
ＯＮｂの合成（１）　の生成物　　　　　　　　：４６
．５ｇ（０．１５ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　
　　　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏｃＡｓｐ
（ＯＢｚｌ）　　　　　　　　：４８．５ｇ（０．１５
ｍｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　　：
７５０ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　：３０．９
ｇ（０．１５ｍｏｌ）（２）　の収量　　　　６４．０
ｇ（収率８０％） 【００７４】（３）　ＢｏｃＧｌｙＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
ＧｌｙＯＮｂ　の合成（２）　の生成物　　　　　　　
　：６４．０ｇ（０．１２ｍｏｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ
２　　　　　　　　　　：２００ｍｌ／２００ｍｌＢｏ
ｃＧｌｙ　　　　　　　　　　　　　　：２１ｇ（０．
１２ｍｏｌ）ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　　　　
　：７５０ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　：２４
．７ｇ（０．１２ｍｏｌ）（３）　の収量　　　　５８
．８ｇ（収率８３％） 【００７５】（４）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）ＧｌｙＯＮｂ　の合成（３）　の生成
物　　　　　　　　：５３．７ｇ（９１ｍｍｏｌ）ＴＦ
Ａ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　　　：２００ｍｌ／
２００ｍｌＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）　　　　　　　　　
：４１．５ｇ（９１ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　
　　　　　　：８００ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　
　　：１８．７ｇ（９１ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　
　　　　　　　：１３．５ｇ（０．１ｍｏｌ）（４）　
の収量　　　　４６．５ｇ（収率５５％） 【００７６】（５）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙの合成（４）　の生成物９．２
９ｇ（１０ｍｍｏｌ）を９０％酢酸３００ｍｌに溶かし
、Ｚｎ　末３２．７ｇ（０．５ｍｏｌ）を加え、０℃で
３時間撹拌した。Ｚｎ　末をろ別し、ろ液を減圧濃縮、
これにクエン酸を加えて酸性にし酢酸エチルで抽出した
。 Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し減圧濃縮してからエーテルを加え
て白色粉末６．２６ｇ（収率７９％）を得た。 【００７７】（６）　合成物１７の合成（５）　の生成
物　　　　　　　　　　　　：５．３１ｇ（６．７ｍｍ
ｏｌ）アミノエチルメタクリルアミド：０．８６ｇ（６
．７ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　：６０ｍｌＤＣＣ　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　：１．４ｇ（６．７ｍｍｏｌ）Ｈ
ＯＢｔ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　：０
．９５ｇ（７ｍｍｏｌ）１Ｍ−トリフルオロメタンスル
ホン酸−チオアニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：２５０ｍｌアンバーライトＩＲＡ−４００；Ｃ
ｌ型処理合成物１７　　　　２．９ｇ（収率７５％）ア
ミノ酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：４．５９１５Ｇ
：９．４３２４Ｄ：４．６６１８マススペクトル　　Ｍ
＋　：　　５１４ 【００７８】合成例１８合成物１８ＣＨ２＝ＣＣＨ３−
ＣＯ−ＮＨ−（ＣＨ２）３−ＲＧＤＧ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４
−ＮＨ−ＣＯ−ＣＣＨ３＝ＣＨ２　（配列番号１８） 【００７９】合成例１７の（１）〜（５）と同様の合成
を行なった後、以下の合成により合成物１８を得た。 【００８０】（１）　ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙ−ＮＨ−Ｃ２Ｈ４−ＮＨ−ＣＯ
−ＣＣＨ３　＝ＣＨ２ＢｏｃＡｒｇ（Ｍｔｓ）ＧｌｙＡ
ｓｐ（ＯＢｚｌ）Ｇｌｙ　　：５．１９ｇ（６．７ｍｍ
ｏｌ）アミノエチルメタクリルアミド：０．８６ｇ（６
．７ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　：６０ｍｌＤＣＣ：１．４ｇ（６．７ｍ
ｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　：０．９５ｇ（７ｍｍｏｌ）（１）　の収量４．
７ｇ（収率８０％）マススペクトル　　Ｍ＋　：　　８
８５【００８１】（２）　合成物１８の合成（１）　の
生成物　　　　　　　　　　　　：４．４ｇ（５ｍｍｏ
ｌ）ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２　　　　　　　　：５０ｍｌ
／５０ｍｌカルボキシエチルメタクリルアミド：０．７
９ｇ（５ｍｍｏｌ）ＤＭＦ　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　：５０ｍｌＤＣＣ　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　：１．
０３ｇ（５ｍｍｏｌ）ＨＯＢｔ　　：０．６８ｇ（５ｍ
ｍｏｌ）１Ｍ−トリフルオロメタンスルホン酸−チオア
ニソール−ｍ−クレゾールのＴＦＡ溶液　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　：２５０ｍｌ
アンバーライトＩＲＡ−４００　　　　：ＣＩ型処理合
成物１８　　　　　　２．４１ｇ（収率７０％）アミノ
酸分析（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　　８．８９６３Ｇ
：１７．９７４６Ｄ：　　８．７５３１β−アラニン：
８．８３３０マススペクトル　　Ｍ＋　：　　６５３ 【００８２】合成例１９合成物１５と製造物１０の単量
体をラジカル共重合した。合成物１５　　５００ｍｇ（
０．８２ｍｍｏｌ）と製造例１０　　４２６ｍｇ（３．
３ｍｍｏｌ）を水９ｍｌに溶解し、１Ｎ　ＮａＯＨ　で
ｐＨ７．４に調整した後、開始剤である過硫酸アンモニ
ウム４．６ｍｇと亜硫酸水素ナトリウム１．９ｍｇを加
え窒素気流下２０℃で２０時間重合させた。 重合物の水溶液をスペクトラポア７（分子分画量３００
０）を用い純水に対して透析し低分子量分を除いた後凍
結乾燥した。収量２７２ｍｇ 【００８３】アミノ酸分析によりエタノールアミンとグ
リシンの値から共重合物の組成を求めたところ、合成物
１５が１６％導入されていることが分かった。アミノ酸
分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　　５．１１３０Ｇ
：　　５．３６５９Ｄ：　　５．２０５０Ｓ：　　４．
９７３１エタノールアミン：２８．１７１０ 【００８４】合成物１９をゲルクロマトグラフィーによ
り分子量分画を行なった。合成物　　　　　　　　　　
画分　　　　　　　　　　分子量１９−１　　　　　　
　　　　１　　　　　　　　５５０００１９−２　　　
　　　　　　　２　　　　　　　　２５０００１９−３
　　　　　　　　　　３　　　　　　　　　　９０００
分子量は製造例１５と同じ方法で測定した。 【００８５】合成例２０合成物１５と製造例１０とのラ
ジカル共重合を開始剤量を変えて合成例１９と同様の方
法で行なった。開始剤　　　　過硫酸カリウム　　　　
　　１８．４ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　７．６ｍｇ
収量　　　　　　２１３ｍｇ（合成物２０）分子量　　
　　４０００合成物１５の組成　　　　２０％（アミノ
酸分析のエタノールアミンとＧｌｙの値より算出）アミ
ノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　　４．３３５
９Ｇ：　　４．４８１９Ｄ：　　４．２５１３Ｓ：　　
４．００３１エタノールアミン：１８．０４０２【００
８６】合成例２１、２２合成例１９と同じ方法で単量体
組成を変えて共重合を行なった。 【００８７】合成例２１単量体　　　　合成物１５　　
５００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）製造物１０　　１０６
ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリウ
ム　　　　　　　　３．０ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　
　１．２ｍｇ収量　　　　　　１８８ｍｇ（合成物２１
）分子量　　　　４０００合成物１５の組成　　４９％
（アミノ酸分析のエタノールアミンとＧｌｙの値より算
出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：７．３
１５１Ｇ：７．５５９６Ｄ：７．３８８１Ｓ：７．０２
０５エタノールアミン：７．８６８２ 【００８８】合成例２２単量体　　　　合成物１５　　
５００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）製造物１０　　２．０
１ｇ（１５．５８ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリ
ウム　　　　　　１２．６ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　
　５．０．２ｍｇ収量　　　　　　１．４６ｇ（合成物
２２）分子量　　　　４５０００合成物１５の組成　　
　　４％（アミノ酸分析のエタノールアミンとＧｌｙの
値より算出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ
：　　０．９９８１Ｇ：　　１．１０５１Ｄ：　　１．
００３０Ｓ：　　０．８８９１エタノールアミン：２７
．９７６５ 【００８９】合成例２３〜３８合成例１９と同じ方法で
合成物１〜１４、１６および１７と各種ノニオン性単量
体との共重合を行なった。 【００９０】合成例２３単量体　　　　合成物　　１　
　５００ｍｇ（０．９６ｍｍｏｌ）製造物１０　　４９
４ｍｇ（３．８３ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリ
ウム　　　　　　　　５．０ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム
　　２．０ｍｇ収量　　　　　　３７８ｍｇ（合成物２
３）分子量　　　　１１０００合成物１の組成　　　　
２１％（アミノ酸分析のエタノールアミンとＧｌｙの値
より算出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：
　　３．６８１１Ｇ：　　３．８２５３Ｄ：　　３．７
０５１エタノールアミン：１４．０４９９ 【００９１】合成例２４単量体　　　　合成物　　２　
　　　５００ｍｇ（０．５６ｍｍｏｌ）製造物１１　　
　　２８７ｍｇ（２．２６ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過
硫酸カリウム　　　　　　　　３．９ｍｇ亜硫酸水素ナ
トリウム　　１．６ｍｇ収量　　　　　　２５５ｍｇ（
合成物２４）分子量　　　　１１０００合成物２の組成
　　　　１７％（元素分析値より算出）元素分析Ｎ値　
　１６．６２％【００９２】合成例２５単量体　　　　
合成物　　３　　５００ｍｇ（０．４ｍｍｏｌ）Ｎ，Ｎ
−ジメチルメタクリルアミド　　　　１８１ｍｇ（１．
６ｍｍｏｌ）（ポリサイエンス製）開始剤　　　　過硫
酸カリウム　　　　　　　　３．４ｍｇ亜硫酸水素ナト
リウム　　１．４ｍｇ収量　　　　　　２０６ｍｇ（合
成物２５）分子量　　　　１００００合成物３の組成　
　　　１７％（元素分析値より算出）元素分析Ｎ値　　
１８．５５％ 【００９３】合成例２６単量体　　　　合成物　　４　
　５００ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ）Ｎ−ビニルピロリド
ン　　１１１ｍｇ（１．０ｍｍｏｌ）（ポリサイエンス
製）開始剤　　　　過硫酸カリウム　　　　　　　　３
．１ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　１．２ｍｇ収量　　
　　　　１７３ｍｇ（合成物２６）分子量　　　　９０
００合成物４の組成　　　　１５％（元素分析値より算
出）元素分析Ｎ値　　１９．６８％ 【００９４】合成例２７単量体　　　　合成物　　５　
　　　５００ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ）２−ヒドロキシ
プロピルメタクリルアミド　　４７２ｍｇ（３．２８ｍ
ｍｏｌ）（ポリサイエンス製）開始剤　　　　過硫酸カ
リウム　　４．９ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　１．９
ｍｇ収量　　　　　　３７２ｍｇ（合成物２７）分子量
　　　　１３０００合成物５の組成　　　　２１％（元
素分析値より算出）元素分析Ｎ値　　１４．３６％【０
０９５】合成例２８単量体　　　　合成物　　６　　　
　５００ｍｇ（０．７７ｍｍｏｌ）製造物１２　　　　
４３７ｍｇ（３．０８ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸
カリウム　　　　　　　　４．７ｍｇ亜硫酸水素ナトリ
ウム　　１．９ｍｇ収量　　　　　　３３３ｍｇ（合成
物２８）分子量　　　　１１０００合成物６の組成　　
　　２０％（アミノ酸分析のＡｒｇとＧｌｙの値より算
出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　　２
．３５１６Ｇ：１１．９３７１Ｄ：　　２．３３２１Ｓ
：　　２．１８３２【００９６】合成例２９単量体　　
　　合成物　　７　　　　　　５００ｍｇ（０．７７ｍ
ｍｏｌ）製造物１３　　　　　　５３０ｍｇ（３．０８
ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリウム　　　　　　
　　　　　　５．２ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　　　
　　２．１ｍｇ収量　　　　　　２９７ｍｇ（合成物２
９）分子量　　　　８０００合成物７の組成　　　　２
３％（アミノ酸分析のＳｅｒとＧｌｙの値より算出）ア
ミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　　２．５１
５１Ｇ：　　２．７６３８Ｄ：　　２．６１３５Ｓ：１
１．８１１１【００９７】合成例３０単量体　　　　合
成物　　８　　　　　　　　　　　　５００ｍｇ（０．
６９ｍｍｏｌ）Ｎ−ビニルピロリドン　　３０６ｍｇ（
２．７６ｍｍｏｌ）（ポリサイエンス製）開始剤　　　
　過硫酸カリウム　　　　　　　　　　　　４．０ｍｇ
亜硫酸水素ナトリウム　　　　　　１．６ｍｇ収量　　
　　　　２３０ｍｇ（合成物３０）分子量　　　　９０
００合成物８の組成　　　　　　１５％（元素分析値よ
り算出）元素分析Ｎ値　　　　１４．１７％合成例３０
は重合溶媒および透析液を水／メタノール＝１／１とし
た。 【００９８】合成例３１単量体　　　　合成物　　９　
　　　５００ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）製造物１４　　
　　６７３ｍｇ（３．１６ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過
硫酸カリウム　　　　　　　　５．９ｍｇ亜硫酸水素ナ
トリウム　　２．３ｍｇ収量　　　　　　３４３ｍｇ（
合成物３１）分子量　　　　８０００合成物９の組成　
　　　２０％（アミノ酸分析のＧｌｕとＧｌｙの値より
算出）　アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　
　３．１５２９Ｇ：　　３．４１０２Ｄ：　　３．２２
５３Ｓ：　　２．９０３１Ｌｅｕ：　　３．３１６２Ｇ
ｌｕ：１３．９００５ 【００９９】合成例３２単量体合成物１０　　　　５０
０ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ）エトキシトリエチレングリ
コールメタクリレート７８０ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ）（
ポリサイエンス製）開始剤　　　　過硫酸カリウム６．
４ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　２．６ｍｇ収量　　　
　　　３６７ｍｇ（合成物３２）分子量　　　　１３０
００合成物１０の組成　　　　１５％（元素分析値より
算出）元素分析Ｎ値　　５．８９％ 【０１００】合成例３３単量体　　　　合成物１１　　
　　５００ｍｇ（０．７９ｍｍｏｌ）製造物１０　　　
　４０８ｍｇ（３．１６ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫
酸カリウム　　　　　　　　４．５ｍｇ亜硫酸水素ナト
リウム　　１．８ｍｇ収量　　　　　　３２６ｍｇ（合
成物３３）分子量　　　　１００００合成物１１の組成
　　１８％（アミノ酸分析のエタノールアミンとＧｌｙ
の値より算出）　アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ
）Ｒ：　　２．１８３１Ｇ：　　２．３５３４Ｄ：　　
２．１５１３Ｓ：　　１．９８１１エタノールアミン：
１１．０９４６ 【０１０１】合成例３４単量体　　　　合成物１２　　
　　５００ｍｇ（０．７１ｍｍｏｌ）製造物１１　　　
　３６１ｍｇ（２．８４ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫
酸カリウム　　　　　　　　４．３ｍｇ亜硫酸水素ナト
リウム　　１．７ｍｇ収量　　　　　　２４６ｍｇ（合
成物３４）分子量　　　　１３０００合成物１２の組成
　　　　１６％（元素分析値より算出）元素分析Ｎ値　
　　　１４．５２％【０１０２】合成例３５単量体　　
　　合成物１３　　　　５００ｍｇ（０．７５ｍｍｏｌ
）２−ヒドロキシプロピルメタクリルアミド４１２ｍｇ
（２．８８ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫酸カリウム　
　　　　　　　４．６ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　１
．８ｍｇ収量　　　　　　３２５ｍｇ（合成物３５）分
子量　　　　１２０００合成物１３の組成　　　　２０
％（元素分析値より算出）元素分析Ｎ値　　　　１４．
４０％ 【０１０３】合成例３６単量体　　　　合成物１４　　
　　５００ｍｇ（０．７２ｍｍｏｌ）製造物１２　　　
　４０９ｍｇ（２．８８ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫
酸カリウム　　　　　　　　４．５ｍｇ亜硫酸水素ナト
リウム　　１．８ｍｇ収量　　　　　　２３７ｍｇ（合
成物３６）分子量　　　　１００００合成物１４の組成
　　　　１７％（アミノ酸分析のＡｒｇとＧｌｙの値よ
り算出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　
　１．８８３５Ｇ：１８．６１３４Ｄ：　　１．８２１
５Ｓ：　　１．６２３８【０１０４】合成例３７単量体
　　　　合成物１６　　　　５００ｍｇ（０．７５ｍｍ
ｏｌ）製造物１３　　　　５１６ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ
）開始剤　　　　過硫酸カリウム　　　　　　　　５．
１ｍｇ亜硫酸水素ナトリウム　　２．０ｍｇ収量　　　
　　　３０５ｍｇ（合成物３７）分子量　　　　１４０
００合成物１６の組成　　　　２４％（アミノ酸分析の
ＳｅｒとＧｌｙの値より算出）アミノ酸分析値（ｎｍｏ
ｌ／５０μｌ）Ｒ：　　２．５１３６Ｇ：　　５．３４
６６Ｄ：　　２．４５１１Ｓ：１０．９５６１β−アラ
ニン：　　２．５９８８ 【０１０５】合成例３８単量体　　　　合成物１７　　
　　５００ｍｇ（０．８５ｍｍｏｌ）製造物１４　　　
　７２４ｍｇ（３．４０ｍｍｏｌ）開始剤　　　　過硫
酸カリウム　　　　　　　　６．１ｍｇ亜硫酸水素ナト
リウム　　２．４ｍｇ収量　　　　　　３５７ｍｇ（合
成物３８）分子量　　　　１１０００合成物１７の組成
　　　　１７％（アミノ酸分析のＧｌｕとＧｌｙの値よ
り算出）アミノ酸分析値（ｎｍｏｌ／５０μｌ）Ｒ：　
　３．１８７９Ｇ：　　６．７０８４Ｄ：　　３．２２
５８Ｇｌｕ：１５．９２２８【０１０６】合成例３９合
成物１５、合成物１８及び製造物１０のハイドロゲルを
ラジカル重合により合成した。シラン処理したガラス板
（５ｃｍ×６ｃｍ×１ｃｍ）２枚とガスケットを用意し
、合成物１５　　０．３７ｇ（０．６ｍｍｏｌ）、合成
物１８　　０．４２ｇ（０．６ｍｍｏｌ）及び製造物１
０　　１．３９ｇ（１０．８ｍｍｏｌ）を蒸留水に溶解
し１０ｗｔ％の溶液とした。１Ｎ　ＮａＯＨ　でｐＨ７
．４に合わせた後、過硫酸アンモニウム１１．１ｍｇを
加え充分窒素置換をした後ガラス板の間に注入した。万
力でガラス板を押え、６０℃で２０時間重合させた。生
成したハイドロゲルを蒸留水で洗浄し未反応モノマーを
除いた。合成物１５及び合成物１８のゲル（合成物３９
）中の組成は７％であった。 （元素分析Ｎ値　　１３．５７％）生成したゲルは紫外
線ランプにより滅菌処理した後細胞培養実験に供した。 【０１０７】試験例１　　細胞接着性阻害活性の測定本
発明のプロペンアミド誘導体の共重合物の塩は細胞のフ
ィブロンネクチンやビトロネクチンに対する接着を阻害
する。その活性の測定方法を以下に示す。本実験例で用
いられた競争法は基本的に生化学分野では広く用いられ
ているものであり例えば“Ｍｅｔｈｏｄｓｉｎ　Ｅｎｚ
ｙｍｏｌｏｇｙ”、８２、８０３−８３１（１９８１）
、特開平１−３０９６８２号、同２−１７４７９７号に
開示されている。 【０１０８】実験方法１．　　フィブロネクチンおよび
ビトロネクチン吸着プレートの作製市販のフィブロネク
チン（ヒト由来：生化学工業（株）より購入）あるいは
ビトロネクチン（ヒト由来　　フナコシ薬品（株）より
購入）をＰＢＳで各々１．０μｌ／ｍｌ、２．０μｌ／
ｍｌに希釈しその希釈液０．５ｍｌを２４穴のプラスチ
ックプレートに入れ３７℃で一晩保温しコーティングし
た。次に非特異的吸着を防ぐ目的で牛血清アルブミン（
ＢＳＡ１％）を加え３７℃で１時間保温し、その後通常
の洗浄操作（ＰＢＳ）を加え充分に水切りしてフィブロ
ネクチン吸着プレートを作製した。同様の操作によりビ
トロネクチン吸着プレートを作製した。 【０１０９】２．　　接着阻害実験凍結乾燥により得た
プロペンアミド誘導体の共重合物の塩をＤｕｌｂｅｃｃ
ｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅｓ　Ｍｅｄｉｕ
ｍ（以下ＤＭＥＭと略記する）に溶解し、０、０．２５
、０．５、１．０、１．５ｍｇ／ｍｌの各濃縮の溶液と
した。この溶液０．２５ｍｌを上記方法で作製したプレ
ートに入れ、そこへ血管内皮細胞（４×１０６　ｃｅｌ
ｌｓ　／ｍｌ）の懸濁液を０．２５ｍｌ加え、３７℃で
１時間保温し細胞を接着させた。ＤＭＥＭ培地で３回洗
浄し、未接着の細胞を剥離し、２％トリパンブルーで染
色して細胞数を計測した。結果を表１及び表２に示す。 【０１１０】表１　　フィブロネクチンに対する細胞接
着阻害（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　濃度（ｍｇ／ｍｌ）
０　　　　　　　０．２５　　　　　０．５　　　　　
　　１．０　　　　　　　１．５　　添加化合物合成物
１９−１　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　
　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○合成物１９
−２　　　　×　　△　　　　　　　　△　　　　　　
　　○　　　　　　　　○合成物１９−３　　　　×　
　　　　　　　△　　　　　　　　△○　　　　　　　
　○合成物２０　　　　　　　　×　　　　　　　　△
　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　
　○合成物２１　　　　　　　　×　　　　　　　　△
　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　
　○合成物２２　　×　　　　　　　　△　　　　　　
　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○合成物２
３　　　　　　　　×　　　　　　　　××　　　　　
　　　△　　　　　　　　○合成物２４　　　　　　　
　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　
　　　○○合成物２５　　　　　　　　×　　　　　　
　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　
　　　　○合成物２６×　　　　　　　　△　　　　　
　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○合成物
２７　　　　　　　　×　　　　　　　　△△　　　　
　　　　○　　　　　　　　○合成物２８　　　　　　
　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　
　　　　○○合成物２９　　　　　　　　×　　　　　
　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　
　　　　　○合成物３０×　　　　　　　　△　　　　
　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○合成
物３１　　　　　　　　×　　　　　　　　△△　　　
　　　　　○　　　　　　　　○合成物３２　　　　　
　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　
　　　　　△○合成物３３　　　　　　　　×　　　　
　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　
　　　　　　○合成物３４×　　　　　　　　△　　　
　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○合
成物３５　　　　　　　　×　　　　　　　　△△　　
　　　　　　○　　　　　　　　○合成物３６　　　　
　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　
　　　　　　○○合成物３７　　　　　　　　×　　　
　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　
　　　　　　　○合成物３８×　　　　　　　　△　　
　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○
製造物１５　　　　　　　　×　　　　　　　　××　
　　　　　　　×　　　　　　　　×ＲＧＤ　　　　　
　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　　
×　　　　　　　　×△ＲＧＤＳ　　　　　　　　　　
×　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　　
　　△　　　　　　　　△（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　
；　　○：５０以下、△：５１〜９９、×：１００以上 【０１１１】表２　　　　ビトロネクチンに対する細胞
接着阻害（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）　濃度（ｍｇ／ｍｌ
）０　　　　　　　　１０　　　　　　　５０　　　　
　　　１００　　　　　　　３００　　添加化合物合成
物１９−１　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　
　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　○合成物１
９−２　　　　×　　　　△　　　　　　　　△　　　
　　　　　○　　　　　　　　○合成物１９−３　　　
　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△○　　　　
　　　　○合成物２０　　　　　　　　×　　　　　　
　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　
　　　　○合成物２１　　　　　　　　×　　　　　　
　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　
　　　　○合成物２２　　×　　　　　　　　△　　　
　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○合
成物２３　　　　　　　　×　　　　　　　　××　　
　　　　　　△　　　　　　　　○合成物２４　　　　
　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　
　　　　　　○○合成物２５　　　　　　　　×　　　
　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　
　　　　　　　○合成物２６×　　　　　　　　△　　
　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○
合成物２７　　　　　　　　×　　　　　　　　△△　
　　　　　　　○　　　　　　　　○合成物２８　　　
　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△　
　　　　　　　○○合成物２９　　　　　　　　×　　
　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　○
　　　　　　　　○合成物３０×　　　　　　　　△　
　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　　
○合成物３１　　　　　　　　×　　　　　　　　△△
　　　　　　　　○　　　　　　　　○合成物３２　　
　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　△
　　　　　　　　△○合成物３３　　　　　　　　×　
　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　　
○　　　　　　　　○合成物３４×　　　　　　　　△
　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　　
　○合成物３５　　　　　　　　×　　　　　　　　△
△　　　　　　　　○　　　　　　　　○合成物３６　
　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　　　　　　
△　　　　　　　　○○合成物３７　　　　　　　　×
　　　　　　　　△　　　　　　　　△　　　　　　　
　○　　　　　　　　○合成物３８×　　　　　　　　
△　　　　　　　　△　　　　　　　　○　　　　　　
　　○製造物１５　　　　　　　　×　　　　　　　　
××　　　　　　　　×　　　　　　　　×ＲＧＤ　　
　　　　　　　　　　×　　　　　　　　×　　　　　
　　　×　　　　　　　　△△ＲＧＤＳ　　　　　　　
　　　×　　　　　　　　×　　　　　　　　△　　　
　　　　　△　　　　　　　　○（ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌ
ｌ）　；○：１００以下、△：１０１〜１９９、×：２
００以上 【０１１２】試験例２　　血小板凝集阻害活性の測定本
発明において合成したプロペンアミド誘導体の共重合物
の塩のｉｎ　ｖｉｔｒｏ系での血小板凝集阻害作用をヒ
ト多血小板血漿を用いて検討した。以下にその実験方法
を示す。 【０１１３】実験方法新鮮なヒト血液に１／９量の３．
８％クエン酸ナトリウムを加え遠心分離（１０００ｒｐ
ｍ　、１０分）し、上層を多血小板血漿として分取した
。凍結乾燥より得たプロペンアミド誘導体の共重合物の
塩を０〜１．５ｍｇ／ｍｌの種々の濃度になる様に生理
食塩水に溶解した。この塩溶液２５μｌを血漿２００μ
ｌに加え、３７℃で３分間インキュベートしたのち、５
０μＭアデノンシ二リン酸（ＡＤＰ）溶液あるいは２０
０μｇ／ｍｌのコラーゲン溶液を２５μｌ加え凝集の様
子をアグリゴメーターを用いて透過度を測定することに
より検定した。 結果を表３に示す。 【０１１４】凝集阻害率（１−Ｔ／Ｔ０　）×１００％
Ｔ０　＝プロペンアミド誘導体の共重合物の塩、非添加
時の透過度Ｔ　　＝プロペンアミド誘導体の共重合物の
塩、添加時の透過度 【０１１５】表３　　　　血小板凝集阻害添加化合物　
　　　　　　　　　　　　　　　阻害活性ＡＤＰ刺激　
　　　　　コラーゲン刺激合成物１９−１　　　　　　
　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○合成物
１９−２　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　
　　　　　　○合成物１９−３　　　　　　　　　　○
　　　　○合成物２０　　　　　　　　　　　　　　○
　　　　　　　　　　　　　　　　○合成物２１　　　
　　　　　　　　　　　○○合成物２２　　　　　　　
　　　　　　　△　　　　　　　　　　　　　　　　△
合成物２３　　　　　　　　　　　　　　○○合成物２
４　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　
　　　　　　　○合成物２５　　　　　　　　　　　　
　　○○合成物２６　　　　　　　　　　　　　　△　
　　　　　　　　　　　　　　　○合成物２７　　　　
　　　　　　　　　　○○合成物２８　　　　　　　　
　　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○合
成物２９　　　　　　　　　　　　　　○○合成物３０
　　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　
　　　　　　○合成物３１　　　　　　　　　　　　　
　○○合成物３２　　　　　　　　　　　　　　○　　
　　　　　　　　　　　　　　△合成物３３　　　　　
　　　　　　　　　○○合成物３４　　　　　　　　　
　　　　　○　　　　　　　　　　　　　　　　○合成
物３５　　　　　　　　　　　　　　○○合成物３６　
　　　　　　　　　　　　　○　　　　　　　　　　　
　　　　　○合成物３７　　　　　　　　　　　　　　
○○合成物３８　　　　　　　　　　　　　　○　　　
　　　　　　　　　　　　　○製造物１５　　　　　　
　　　　　　　　××ＲＧＤ　　　　　　　　　　　　
　　　　△〜○　　　　　　　　　　　　△〜○ＲＧＤ
Ｓ　　　　　　　　　　　　　　△〜○　　　　　　　
　　　　　△〜○ＩＣ５０（μｇ／ｍｌ）；○：４０以
下、△：４０〜８０、×：８０以上【０１１６】試験例
３　　動物細胞の増殖性の評価実施例および比較例にて
作成した動物細胞培養基体を用いて細胞培養を行なった
。細胞は血管内皮細胞を用い、培養液はＤＭＥＭおよび
１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）を含むＤＭＥＭを用いた
。この培養液に細胞を１×１０４　個／ｍｌの割合とな
るように浮遊させ、予め架橋共重合物を入れておいたプ
ラスチックシャーレの中に、１×１０４　個／ｃｍ２　
となる割合で加えた。これを３７℃、５％の炭酸ガス雰
囲気下にて培養した。培養後、位相差顕微鏡にて接着性
および増殖性の観察を行った。結果を表４に示した。 【０１１７】表４　　動物細胞の増殖性の評価ＤＭＥＭ
培地　　　　　　ＤＭＥＭ／ＦＣＳ培地接着性　　　　
増殖性　　　　　　接着性　　　　増殖性実施例（合成
物３９）　　　　○　　○　　　　　　　　　　○　　
　　　　　　○比較例（製造物１６）　　×〜△　　　
　×〜△　　　　　　△〜○　　　　△〜○○：良好、
　　　　△：やや不良、　　　　×：不良 【０１１８】比較に用いた製造物１６はＦＣＳを含まな
いＤＭＥＭ培地において、細胞接着性および増殖性は、
合成物３９の基体に比べ劣っていた。 【０１１９】 【配列表】 【０１２０】配列番号：１配列の長さ：４配列の型：ア
ミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグ
メント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表す
記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴
を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　は４Ａｂｕで置
換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　１
　 【０１２１】配列番号：２配列の長さ：７配列の型：ア
ミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグ
メント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表す
記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴
を決定した方法：Ｅ他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置
換されている配列Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａ
ｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　１　　　　　　　５　【０１２
２】配列番号：３配列の長さ：１０配列の型：アミノ酸
トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント
型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表す記号：
ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴を決定
した方法：Ｅ他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換され
ている配列Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　
Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　１　　　　
　　　　　　　　　　　５　　　　　　　　　　　　　
　１０　【０１２３】配列番号：４配列の長さ：１６配
列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプ
チドフラグメント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：
特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１特徴を決定した方法：Ｅ他の情報：Ａｌａ　はｂ
Ａｌａで置換されている配列Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　
Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａ
ｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓ
ｐ　１　　　　　　　　　　　　　　　５　　　　　　
　　　　　　　　　　　　１０　　　　　　１５　 【０１２４】配列番号：５配列の長さ：５配列の型：ア
ミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグ
メント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表す
記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴
を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　は４Ａｂｕで置
換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓ
ｅｒ　１　【０１２５】配列番号：６配列の長さ：５配
列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプ
チドフラグメント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：
特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１特徴を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　はＮ
ｖａ　で置換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　
Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　　　　　　５
　【０１２６】配列番号：７配列の長さ：５配列の型：
アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラ
グメント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表
す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特
徴を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　はＡｃｐ　で
置換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　
Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　　　　　　５　【０１
２７】配列番号：８配列の長さ：５配列の型：アミノ酸
トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント
型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴を表す記号：
ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴を決定
した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　は１２−アミノラウリ
ン酸で置換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａ
ｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　５　【０１２８
】配列番号：９配列の長さ：５配列の型：アミノ酸トポ
ロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント型：
Ｃ末端フラグメント配列Ｌｅｕ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓ
ｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　　　　　　５　【
０１２９】配列番号：１０配列の長さ：５配列の型：ア
ミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグ
メント型：Ｃ末端フラグメント配列Ｇｌｎ　Ａｒｇ　Ｇ
ｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　　　　
　　５　【０１３０】配列番号：１１配列の長さ：５配
列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプ
チドフラグメント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：
特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位
置：１特徴を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　はｐ
−アミノ安息香酸で置換されている配列Ｘａａ　Ａｒｇ
　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　　
５　【０１３１】配列番号：１２配列の長さ：６配列の
型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド
フラグメント型：Ｃ末端フラグメント配列の特徴：特徴
を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：
１特徴を決定した方法：Ｅ他の情報：Ｘａａ　はＮｖａ
　で置換されている配列Ｘａａ　Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌ
ｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　　　　　　　５　【０
１３２】配列番号：１３配列の長さ：６配列の型：アミ
ノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメ
ント型：Ｃ末端フラグメント配列Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌ
ｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　１　　　　　　　　　　
　　　５　　　【０１３３】配列番号：１４配列の長さ
：７配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類
：ペプチドフラグメント型：Ｃ末端フラグメント配列Ｇ
ｌｙ　Ｇｌｙ　Ｇｌｙ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅ
ｒ　１　　　　　　　　　５　　　【０１３４】配列番
号：１５配列の長さ：５配列の型：アミノ酸トポロジー
：直鎖状配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｃ末端
フラグメント配列の特徴：特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆ
ｉｅｄ　ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴を決定した方法：
Ｅ他の情報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列
Ａｌａ　Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　１　　　　
　　　　　　　　　　５　【０１３５】配列番号：１６
配列の長さ：６配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状
配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｃ末端フラグメ
ント配列の特徴：特徴を表す記号：ｍｏｄｉｆｉｅｄ　
ｓｉｔｅ　存在位置：１特徴を決定した方法：Ｅ他の情
報：Ａｌａ　はｂＡｌａで置換されている配列Ａｌａ　
Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ｇｌｙ　１　　　　
　　　　　　５　　　　　【０１３６】配列番号：１７
配列の長さ：４配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状
配列の種類：ペプチドフラグメント型：Ｎ末端フラグメ
ント配列Ａｒｇ　Ｇｌｙ　Ａｓｐ　Ｇｌｙ　１　　　　
　　　　　

Claims (8)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】　　下記一般式〔Ｉ〕の側鎖に、下記一般
   式〔ＩＩ〕で表される接着性ペプチドを必須単位として
   有するプロペンアミド誘導体と、下記一般式〔ＩＩＩ〕
   で表されるノニオン性単量体との共重合物又はその塩。 一般式〔Ｉ〕Ｒ１Ｒ２Ｃ＝ＣＲ３　−ＣＯ−［ＮＨ］−
   式中、Ｒ１　、Ｒ２　は水素原子又はカルボキシル基を
   表し、Ｒ３　は水素原子、メチル基、エチル基、ハロゲ
   ン原子又はカルボキシメチル基を表す。一般式〔ＩＩ〕
   −［Ｒ４］−［ＣＯ］−（［Ｘ］−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ａ
   ｓｐ−［Ｙ］）ｎ−［Ｚ］−［Ｒ５］−式中、Ｘ，Ｙは
   Ｓｅｒ，　Ｇｌｙ，　Ｖａｌ，　Ａｓｎ，　Ｐｒｏ　か
   ら選択されるアミノ酸残基又はペプチド残基を表し、Ｚ
   は−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。Ｒ４　、Ｒ５　のいずれ
   か一方は水素原子を、他方は炭素数が１〜１１の直鎖又
   は分岐のアルキレン基、又は炭素数が６〜１１のアリー
   レン基を表し、置換基を有していてもよい。ｎは１〜５
   の整数を表す。一般式〔ＩＩＩ　〕Ｈ２Ｃ＝ＣＲ６　−
   ［ＣＯ］−［Ｗ］−Ｒ７式中、Ｒ６　は水素原子又は炭
   素数１〜３のアルキル基で置換基を有していてもよい。 Ｗは−Ｏ−又は−ＮＨ−を示す。Ｒ７　は水素原子又は
   炭素数が１〜１２の直鎖又は分岐のアルキル基、又は炭
   素数が６〜１１のアリール基であり置換基として少なく
   とも、ヒドロキシル基、アミド基のいずれかを含み、さ
   らに置換基を有していてもよい。一般式〔Ｉ〕、〔ＩＩ
   〕、〔ＩＩＩ　〕において［　　］は［］内の基が存在
   するかあるいは存在しなくてもよいことを示す。
2. 【請求項２】　　分子量が約３，０００　〜２００，０
   ００　の範囲である、請求項１記載のプロペンアミド誘
   導体共重合物又はその塩。
3. 【請求項３】　　プロペンアミド誘導体由来の構成単位
   の含有量が　０．１〜９０モル％である請求項１記載の
   共重合物又はその塩。
4. 【請求項４】　　請求項１記載のプロペンアミド誘導体
   とノニオン性単量体との架橋共重合物又はその塩。
5. 【請求項５】　　プロペンアミド誘導体由来の構成単位
   及び多官能性単量体由来の構成単位の含有量が、それぞ
   れ　０．１〜９０モル％及び　０．１〜３０モル％であ
   る請求項４記載の架橋共重合物又はその塩。
6. 【請求項６】　　請求項１、２又は３記載のプロペンア
   ミド誘導体共重合物又はその塩を有効成分とする動物細
   胞の接着阻害剤。
7. 【請求項７】　　請求項１、２又は３記載のプロペンア
   ミド誘導体共重合物又はその塩を有効成分とする血小板
   凝集・粘着抑制剤。
8. 【請求項８】　　請求項４又は５記載のプロペンアミド
   誘導体とノニオン性単量体との架橋共重合物又はその塩
   を有効成分とする動物細胞培養基体。