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Claims (17)
- 少なくとも一つの発酵工程および改変微生物を用いて、唯一の炭素源としての炭水化物からグリコール酸および/またはグリオキシル酸を製造する方法であって、前記改変微生物において:
-aceB、glcB、gclおよびedaからなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の発現が低減され、かつ、
-キシルロース5-リン酸ホスホケトラーゼおよび/またはフルクトース6-リン酸ホスホケトラーゼをコードする少なくとも一つの遺伝子の発現が増強されており、
前記微生物が腸内細菌科から選択される微生物である、
前記製造方法。 - 前記ホスホケトラーゼをコードする遺伝子が、ラクトバチルス・ペントサス(Lactobacillus pentosus)のxpkA遺伝子、ビフィドバクテリウム・アニマリス(Bifidobacterium animalis)のxfp遺伝子およびビフィドバクテリウム・ラクティス(Bifidobacterium lactis)のxfp遺伝子からなる群から選択される、請求項1に記載の製造方法。
- 前記改変微生物が、大腸菌(Escherichia coli)由来のycdW遺伝子をさらに過剰発現する、請求項1または2に記載のグリコール酸の製造方法。
- グリコール酸からグリオキシル酸を製造するための請求項3に記載の方法であって、
-大腸菌由来のgldDEFG遺伝子によりコードされるグリコール酸オキシダーゼおよび大腸菌由来のkatEまたはkatG遺伝子によりコードされるカタラーゼを用いたグリコール酸からの生物変換によって、またはニトロキシルラジカル触媒を用いた化学変換によって、グリコール酸をグリオキシル酸に変換する工程、
-グリオキシル酸を回収する工程
をさらに含む、前記製造方法。 - 前記グリコール酸をグリオキシル酸に変換する工程の前に、発酵ブロスからグリコール酸を分離する工程をさらに含む、請求項4に記載の製造方法。
- グリコール酸オキシダーゼおよびカタラーゼが同じ微生物において発現される、請求項4に記載の製造方法。
- 前記改変微生物において、少なくとも大腸菌由来のycdW遺伝子が低減されている、請求項1または2に記載のグリオキシル酸の製造方法。
- グリオキシル酸からグリコール酸を製造するための請求項7に記載の方法であって、
-大腸菌由来のycdW遺伝子またはリゾビウム・エトリ(Rhizobium etli)由来のgrxA遺伝子によりコードされるグリオキシル酸レダクターゼを用いたグリオキシル酸からの生物変換によって、または水素化ホウ素ナトリウムを用いた化学変換によって、グリオキシル酸をグリコール酸に変換する工程、
-グリコール酸を回収する工程
をさらに含む、前記製造方法。 - 前記グリオキシル酸をグリコール酸に変換する工程の前に、発酵ブロスからグリオキシル酸を分離する工程をさらに含む、請求項8に記載の製造方法。
- グリコール酸が、結晶化、蒸留、液-液抽出または抽出発酵の工程により精製される、請求項1~9のいずれか一項に記載の製造方法。
- グリオキシル酸が、イオン交換、結晶化、沈殿または抽出発酵の工程により精製される、請求項1~10のいずれか一項に記載の製造方法。
- グリコール酸またはグリオキシル酸の製造のための改変された微生物であって、
-aceB、glcB、gclおよびedaからなる群から選択される少なくとも一つの遺伝子の発現が低減され、
-ホスホケトラーゼをコードする少なくとも一つの遺伝子の発現が増強されており、
腸内細菌科から選択される微生物である、
前記微生物。 - 前記ホスホケトラーゼをコードする遺伝子が、ラクトバチルス・ペントサスのxpkA遺伝子、ビフィドバクテリウム・アニマリスのxfp遺伝子およびビフィドバクテリウム・ラクティスのxfp遺伝子からなる群から選択される、請求項12記載の微生物。
- -グリコール酸産生のための大腸菌由来のycdW遺伝子の過剰発現、または、
-グリオキシル酸産生のための大腸菌由来の少なくともycdW遺伝子の発現の低減をさらに含む、
請求項12または13に記載の微生物。 - 前記微生物が大腸菌種由来である、請求項12~14のいずれか一項に記載の微生物。
- 前記微生物において、aceB、glcBおよびgclの遺伝子の発現が低減されている、請求項1~11のいずれか一項に記載の製造方法。
- 前記微生物において、aceB、glcBおよびgclの遺伝子の発現が低減されている、請求項12~15のいずれか一項に記載の微生物。
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