JP2021503281A5 - - Google Patents
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Claims (34)
- 腫瘍浸潤リンパ球(TIL)を治療用TIL集団に拡大培養する方法であって、
(i)IL−2を含む細胞培養培地中で、患者の腫瘍からの少なくとも1つの細針吸引(FNA)又は少なくとも1つの小生検から得られた第1のTIL集団を培養することにより、第1の拡大培養を実施して、第2のTIL集団を産生することであって、前記細胞培養培地は、任意選択により、1〜3日目のいずれか1つでOKT−3を補充され、前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団を得るために約3日間〜約12にわたって実施され、前記第2のTIL集団は、前記第1のTIL集団が小生検からのものである場合、約3日〜約12日までに少なくとも5×107個のTILを含む、産生すること;及び
(ii)前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地に追加のIL−2、OKT−3及び抗原提示細胞(APC)を補充することにより、第2の拡大培養を実施して、第3のTIL集団を産生することであって、前記第3のTIL集団は、数において前記第2のTIL集団より少なくとも25倍多く、前記第2の拡大培養は、前記第3のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間にわたって実施され、前記第3のTIL集団は、治療用TIL集団である、産生すること
を含む方法。 - ステップ(i)におけるIL−2を含む前記細胞培養培地は、OKT−3を更に含み、且つ任意選択により、1〜3日目のいずれか1つでOKT−3を補充されず、ステップ(i)は、第1の初回刺激拡大培養ステップであり、及びステップ(ii)は、第2の急速拡大培養であり、且つ任意選択により、ステップ(ii)後、前記細胞は、細胞培養物から取り出され、且つ貯蔵培地中に凍結保存され、且つ任意選択により、貯蔵培地中に凍結保存された後、前記細胞は解凍され、前記患者に投与される、請求項1に記載の方法。
- ステップ(i)〜(ii)は、約17日〜約24日の期間内に実施され、且つ任意選択により、約18日〜約22日の期間内に実施され、且つ任意選択により、約20日〜約22日の期間内に実施され、且つ任意選択により、約22日の期間内に実施される、請求項1又は2に記載の方法。
- ステップ(ii)からの治療用TIL集団における前記細胞は、CD4、CD8及びTCRαβを新鮮回収細胞と同様のレベルで発現する、請求項1〜3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記APCは、末梢血単核球(PBMC)であり、且つ任意選択により、ステップ(i)における培養の開始後3〜12日目のいずれかのステップ(i)における細胞培養物及び/又はステップ(ii)における培養の開始後11〜14日目のいずれかのステップ(iiにおける細胞培養物に添加され、且つ任意選択により、前記APCは、人工APC(aAPC)又は自己APCである、請求項1に記載の方法。
- 前記第3のTIL集団は、前記第2のTIL集団と比べて、エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞の増加したサブ集団を含み、ステップ(ii)における前記治療用TIL集団中の前記エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞は、前記第2の細胞集団中のエフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞と比べて、CD27の発現、CD28の発現、より長いテロメア、増加したCD57発現及び減少したCD56発現からなる群から選択される1つ以上の特徴を呈し、且つ任意選択により、前記エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞は、増加したCD57発現及び減少したCD56発現を呈する、請求項2〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記治療用TIL集団は、患者に注入のためのものである、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- ステップ(i)における前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地にOKT−3、IL−15、OX40アゴニスト性抗体及び/又は4−1BBアゴニスト性抗体を更に補充することによって実施され、そして/あるいはステップ(ii)における前記第2の拡大培養は、前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地にIL−15、OX40アゴニスト性抗体及び/又は4−1BBアゴニスト性抗体を更に補充することによって実施される、請求項1に記載の方法。
- ステップ(i)における前記FNAは、少なくとも400,000個のTILを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記小生検は、膵臓、黒色腫、乳房及び卵巣からなる群から選択される腫瘍から得られ、且つ任意選択により、前記FNAは、肺、黒色腫、頭頸部、子宮頸部、卵巣、膵臓、神経膠芽腫、結腸直腸及び肉腫からなる群から選択される腫瘍から得られ、且つ任意選択により、前記肺腫瘍は、非小細胞肺癌(NSCLC)であり、任意選択により、前記患者は、以前に外科的処置を受けたことがある、請求項1に記載の方法。
- ステップ(i)における前記第1のTIL集団は、FNAから得られ、且つ任意選択により、前記FNAは、25〜18ゲージ針を使用して得られる、請求項1に記載の方法。
- ステップ(i)における前記第1のTIL集団は、小生検から得られ、且つ任意選択により、前記小生検は、16〜11ゲージ針を使用して得られる、請求項1に記載の方法。
- ステップ(ii)は、前記治療用TIL集団中において、治療有効投与量の前記TILのために十分なTILを得るために1〜4回繰り返され、且つ任意選択により、治療有効投与量のために十分なTILの数は、約2.3×10 10 〜約13.7×10 10 個である、請求項1に記載の方法。
- 前記第1の拡大培養は、約3日〜約10日実施される、請求項1〜13のいずれか一項に記載の方法。
- 前記第1の拡大培養が、前記細胞培養培地にOKT−3を補充することを含む、請求項1〜14のいずれか一項に記載の方法。
- 前記第3のTIL集団の前記細胞培養培地にIL−15、OX40アゴニスト性抗体及び/又は4−1BBアゴニスト性抗体を更に補充することによって実施される、ステップ(ii)における追加の第2の拡大培養を更に含む、請求項15に記載の方法。
- 癌を有する対象を治療する方法において使用するための、治療用腫瘍浸潤リンパ球(TIL)集団である拡大培養された腫瘍浸潤リンパ球であって、請求項1〜16のいずれか一項に記載の方法により得られる、腫瘍浸潤リンパ球。
- 前記癌は、黒色腫、子宮頸癌、頭頸部癌、膠芽腫、卵巣癌、肉腫、膵癌、膀胱癌、乳癌、トリプルネガティブ乳癌及び非小細胞肺癌からなる群から選択される、請求項17に記載の腫瘍浸潤リンパ球。
- (a)前記第1のTIL集団を閉鎖系に添加すること;
(b)IL−2を含む細胞培養培地中で前記第1のTIL集団を培養することにより、前記第1の拡大培養を実施して、第2のTIL集団を産生することであって、前記細胞培養培地は、1〜3日目のいずれか1つでOKT−3を補充され、前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間にわたって実施され、前記第2のTIL集団は、前記第1のTIL集団が小生検からのものである場合、約3日〜約12日までに少なくとも5×107個のTILを含み、前記第1の拡大培養は、第1のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、前記第2のTIL集団は、数において前記第1のTIL集団より少なくとも25倍多く、ステップ(a)からステップ(b)への移行は、前記系を開放することなく行われる、産生すること;
(c)前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地に追加のIL−2、OKT−3及び抗原提示細胞(APC)を補充することにより、前記第2の拡大培養を実施して、第3のTIL集団を産生することであって、前記第2の拡大培養は、前記第3のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間にわたって実施され、前記第3のTIL集団は、治療用TIL集団であり、前記第2の拡大培養は、第2のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ(b)からステップ(c)への移行は、前記系を開放することなく行われる、産生すること;
(d)ステップ(c)から得られた前記治療用TIL集団を回収することであって、ステップ(c)からステップ(d)への移行は、前記系を開放することなく行われる、回収すること;及び
(e)ステップ(d)からの前記回収されたTIL集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ(d)から(e)への移行は、前記系を開放することなく行われる、移すこと
を含む、請求項1〜16のいずれか一項に記載の方法。 - 腫瘍浸潤リンパ球(TIL)を治療用TIL集団に拡大培養する方法であって、
(a)患者の腫瘍からの少なくとも1つの細針吸引(FNA)又は少なくとも1つの小生検から得られた第1のTIL集団を閉鎖系に添加すること;
(b)IL−2を含む細胞培養培地中で前記第1のTIL集団を培養することにより、前記第1の拡大培養を実施して、第2のTIL集団を産生することであって、前記細胞培養培地は、1〜3日目のいずれか1つでOKT−3を補充され、前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間にわたって実施され、前記第2のTIL集団は、前記第1のTIL集団が小生検からのものである場合、約3日〜約12日までに少なくとも5×107個のTILを含み、前記第1の拡大培養は、第1のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間の第1の期間にわたって実施され、前記第2のTIL集団は、数において前記第1のTIL集団より少なくとも25倍多く、ステップ(a)からステップ(b)への移行は、前記系を開放することなく行われる、産生すること;
(c)前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地に追加のIL−2、OKT−3及び抗原提示細胞(APC)を補充することにより、前記第2の拡大培養を実施して、第3のTIL集団を産生することであって、前記第2の拡大培養は、前記第3のTIL集団を得るために約3日間〜約12日間の第2の期間にわたって実施され、前記第3のTIL集団は、治療用TIL集団であり、前記第2の拡大培養は、第2のガス透過性表面積を提供する閉鎖型容器内で実施され、ステップ(b)からステップ(c)への移行は、前記系を開放することなく行われる、産生すること;
(d)ステップ(c)から得られた前記治療用TIL集団を回収することであって、ステップ(c)からステップ(d)への移行は、前記系を開放することなく行われる、回収すること;及び
(e)ステップ(d)からの前記回収されたTIL集団を輸注バッグに移すことであって、ステップ(d)から(e)への移行は、前記系を開放することなく行われる、移すこと
を含む方法。 - ステップ(b)におけるIL−2を含む前記細胞培養培地は、OKT−3を更に含み、且つ任意選択により、1〜3日目のいずれか1つでOKT−3を補充されず、ステップ(b)は、第1の初回刺激拡大培養ステップであり、及びステップ(c)は、第2の急速拡大培養ステップであり、且つ任意選択により、前記方法は、凍結保存プロセスを使用して、ステップ(e)における前記回収されたTIL集団を含む前記輸注バッグを凍結保存するステップを更に含み、且つ任意選択により、前記凍結保存プロセスは、回収されたTIL集団対CS10培地の1:1比を使用して実施される、請求項20に記載の方法。
- 前記APCは、末梢血単核球(PBMC)であり、且つ任意選択により、前記PBMCは、照射され、且つ同種異系であり、且つ任意選択により、前記PBMCは、ステップ(b)における前記第1の期間の3〜12日目のいずれか及び/又はステップ(c)における第2の期間の3〜12日目のいずれかに細胞培養物に添加される、請求項20又は21に記載の方法。
- ステップ(b)における前記第1の拡大培養は、前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地にOKT−3、IL−15、OX40アゴニスト性抗体及び/又は4−1BBアゴニスト性抗体を更に補充することによって実施され、そして/あるいはステップ(c)における前記第2の拡大培養は、前記第2のTIL集団の前記細胞培養培地にIL−15、OX40アゴニスト性抗体及び/又は4−1BBアゴニスト性抗体を更に補充することによって実施される、請求項20に記載の方法。
- ステップ(a)における前記TILは、FNAから得られ、且つ任意選択により、前記FNAは、少なくとも400,000個のTILを含み、且つ任意選択により、前記FNAは、25〜18ゲージ針を使用して得られ、且つ任意選択により、前記FNAは、肺、黒色腫、頭頸部、子宮頸部、卵巣、膵臓、神経膠芽腫、結腸直腸及び肉腫からなる群から選択される腫瘍から得られ、且つ任意選択により、前記肺腫瘍は、非小細胞肺癌(NSCLC)であり、任意選択により、前記患者は、以前に外科的処置を受けたことがある、請求項20に記載の方法。
- ステップ(a)における前記第1のTIL集団は、小生検から得られ、且つ任意選択により、前記小生検は、膵臓、黒色腫、乳房及び卵巣からなる群から選択される腫瘍から得られ、且つ任意選択により、前記小生検は、16〜11ゲージ針を使用して得られる、請求項20に記載の方法。
- ステップ(d)における前記回収は、LOVO(登録商標)細胞プロセスシステムを使用して実施され、且つ任意選択により、前記細胞培養培地は、Gコンテナ(登録商標)及びXuri細胞培養バッグ(登録商標)からなる群から選択される容器内に提供され、且つ任意選択により、ステップ(e)における前記輸注バッグは、hypothermosol輸注バッグである、請求項20に記載の方法。
- ステップ(a)〜(e)は、約17日〜約24日の期間内に実施され、且つ任意選択により、ステップ(a)〜(e)は、約18日〜約22日の期間内に実施され、且つ任意選択により、ステップ(a)〜(e)は、約20日〜約22日の期間内に実施される、請求項20に記載の方法。
- ステップ(a)〜(e)及び、任意選択により、凍結保存は、22日以下で実施される、請求項20に記載の方法。
- ステップ(d)で回収された前記治療用TIL集団は、治療有効投与量の前記TILのために十分なTILを含み、且つ任意選択により、治療有効投与量のために十分なTILの数は、約2.3×10 10 〜約13.7×10 10 個である、請求項20〜28のいずれか一項に記載の方法。
- ステップ(a)〜(d)は、単一の容器内で実施され、ステップ(a)〜(d)を単一の容器内で実施することは、ステップ(a)〜(d)を複数の容器内で実施することと比較して、切除された腫瘍毎のTIL収率の増加をもたらし、且つ任意選択により、前記抗原提示細胞は、前記系を開放することなく、ステップ(c)における第2の拡大培養中に前記TILに添加され、且つ任意選択により、前記第3のTIL集団は、前記第2のTIL集団と比べて、エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞の増加したサブ集団を含み、前記治療用TIL集団中の前記エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞は、前記第2の細胞集団から得られるエフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞と比べて、CD27+を発現すること、CD28+を発現すること、より長いテロメア、増加したCD57発現及び減少したCD56発現からなる群から選択される1つ以上の特徴を呈し、且つ任意選択により、前記第3のTIL集団から得られた前記エフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞は、前記第2の細胞集団から得られるエフェクターT細胞及び/又はセントラルメモリーT細胞と比べて、増加したCD57発現及び減少したCD56発現を呈する、請求項20〜29のいずれか一項に記載の方法。
- 癌を有する対象を治療する方法において使用するための拡大培養された腫瘍浸潤リンパ球(TIL)であって、前記腫瘍浸潤リンパ球が請求項20〜30のいずれか一項に記載の方法により得られ、前記方法が、任意選択により、
(f)凍結保存プロセスを使用して、ステップ(e)からの前記回収されたTIL集団を含む前記輸注バッグを凍結保存すること、を含み、ステップ(f)における前記輸注バッグからの治療有効投与量の前記第3のTIL集団が患者への投与のためのものである、腫瘍浸潤リンパ球。 - ステップ(d)で回収された前記治療用TIL集団は、治療有効投与量の前記TILを投与するのに十分なTILを含む、請求項31に記載の腫瘍浸潤リンパ球。
- 治療有効投与量のTIL細胞を投与する前に、非破壊的リンパ球枯渇レジメンは、前記患者に投与されており、且つ任意選択により、前記骨髄非破壊的リンパ球枯渇レジメンは、60mg/m 2 /日の用量で2日間にわたってシクロホスファミドを投与し、同時に25mg/m 2 /日の用量で5日間にわたってフルダラビンを投与するステップを含み、且つ任意選択により、前記患者が、前記患者に前記TIL細胞を投与した翌日に始まる高用量IL−2レジメンで治療され、且つ任意選択により、前記高用量IL−2レジメンは、忍容量まで8時間毎に15分ボーラス静脈内注入として投与される600,000又は720,000IU/kgを含む、請求項31又は32に記載の腫瘍浸潤リンパ球。
- 請求項1〜16及び19〜30のいずれか一項に記載の方法を使用して拡大培養されたTILを含む組成物であって、任意選択により、前記組成物が凍結保存剤を更に含み、任意選択により、前記凍結保存剤は、ジメチルスルホキシドを含み、任意選択により、前記組成物が、ジメチルスルホキシドを含む凍結保存剤並びに塩化ナトリウム、グルコン酸ナトリウム及び酢酸ナトリウムを含む等張剤を含むか、ジメチルスルホキシド及びデキストラン40を含む凍結保存剤並びに塩化ナトリウム、グルコン酸ナトリウム及び酢酸ナトリウムを含む等張剤を含み、且つ任意選択により、前記組成物が、無菌輸注バッグで提供される、組成物。
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