JP2020511149A - パラインフルエンザウイルスを検出または定量化するための組成物および方法 - Google Patents
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- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/70—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving virus or bacteriophage
- C12Q1/701—Specific hybridization probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/118—Prognosis of disease development
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/166—Oligonucleotides used as internal standards, controls or normalisation probes
Abstract
Description
(b)第1の増幅オリゴマーが、HPIV 3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第2の増幅オリゴマーが、HPIV 3の1437位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV 3アンプリコンを生成するように構成される、組成物またはキットが本明細書で提供される。
試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、HPIV−3核酸の存在下で少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−3アンプリコンを生成する核酸増幅反応を組成物中で行うことと、少なくとも1つのアンプリコンの有無を検出することと、を含み、
第1の増幅オリゴマーおよび第2の増幅オリゴマーが、1295〜1305位、1350〜1360位、および/または1380〜1390位内に位置する少なくとも1つのヒトパラインフルエンザウイルス3(HPIV−3)位置を含むHPIV−3アンプリコンを増幅するように構成される、方法もまた本明細書で提供される。
試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、HPIV−3核酸の存在下で、HPIV−3アンプリコンを生成する核酸増幅反応を組成物中で行うことと、
少なくとも1つのアンプリコンの有無を検出することと、を含み、
(a)第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1270位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成されるか、または(b)第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1437位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成される、方法もまた本明細書で提供される。
試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、HPIV−1核酸の存在下で、HPIV−1アンプリコンを生成する核酸増幅反応を組成物中で行うことと、
少なくとも1つのアンプリコンの有無を検出することと、を含み、第1のHPIV−1増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の330〜490位または960〜1100位内に位置する少なくとも1つのHPIV−1の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−1アンプリコンを増幅するように構成される、方法もまた本明細書で提供される。
第1のHPIV 2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV 2増幅オリゴマーが、HPIV 2の1600〜1700位内に位置する少なくとも1つのHPIV 2の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV 2アンプリコンを増幅するように構成される、組成物またはキットもまた本明細書で提供される。
試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、HPIV−2核酸の存在下で、HPIV−2アンプリコンを生成する核酸増幅反応を組成物中で行うことと、
少なくとも1つのアンプリコンの有無を検出することと、を含み、
第1のHPIV−2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1600〜1700位内に位置する少なくとも1つのHPIV−2の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−2アンプリコンを増幅するように構成される、方法もまた本明細書で提供される。
第1のHPIV 4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV 4増幅オリゴマーは、HPIV 4の620〜740位、2130〜2410位、2520〜3040位、または10090〜11980位内に位置する少なくとも1つのHPIV 4の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV 4アンプリコンを増幅するように構成される。
試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、HPIV−4核酸の存在下で、HPIV−4アンプリコンを生成する核酸増幅反応を組成物中で行うことと、
少なくとも1つのアンプリコンの有無を検出することと、を含み、
第1のHPIV−4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーは、HPIV−4の620〜740位、2130〜2410位、2520〜3040位、または10090〜11980位内に位置する少なくとも1つのHPIV−4の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−4アンプリコンを増幅するように構成される、方法もまた本明細書で提供される。
本教示を詳細に説明する前に、本開示が特定の組成物またはプロセスステップに限定されず、それらは変化し得ることを理解されたい。本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「a」、「an」、および「the」は、文脈が明らかにそうでないことを指示しない限り、複数の言及を含むことに留意されたい。したがって、例えば、「1つのオリゴマー(an oligomer)」への言及は、複数のオリゴマーなどを含む。接続詞「または」は、包括的な意味が文脈において不合理でない限り、包括的な意味で、すなわち、「および/または」と同等であると解釈されるべきである。
本開示は、試料からのHPIV−1、HPIV−2、HPIV−3、および/またはHPIV−4を増幅させる、検出する、または定量化するのに有用なオリゴマー、組成物、およびキットを提供する。
19.05μL Supermix(Promega GoTaq(登録商標)Supermix)
0.35μL Roche MMLV逆転写酵素(35U)
0.6μL GoTaq MDX Hotstart Taq(3U)
5μLの核酸(好適な希釈液中のプライマー、プローブ、および標的)
=25μL総反応体積。
HPIV−1、HPIV−2、およびHPIV−3については、ヘマグルチニン−ノイラミニダーゼ(HN)遺伝子を標的とした。HPIV−4aおよび4bの検出のためにヌクレオキャプシドタンパク質遺伝子(NP)を標的とした。同じセットのプライマーおよびプローブを用いてHPIV−4aおよびHPIV−4bを検出することができると決定された。
NWC塩基対を使用するオリゴマーを試験するために、好適な培地で希釈した参照株を上記のように抽出し、自家生成のインビトロ転写物(IVT)をRNase阻害剤/水中に希釈した。縮重塩基または非ワトソンクリック塩基のいずれかおよび5−メチルシトシンを含有する標的特異的オリゴを用いて3つのアニーリング温度(57℃、60℃、および65℃)で、各参照株またはIVTを試験した。参照株またはIVTは、縮重塩基および非ワトソンクリック塩基の位置においてNCBIデータベースで観察された様々な変異の組み合わせと一致するように選択された。例えば、AおよびGが異なる株で観察された場合、UがNWCオリゴマーで使用され(結果として、標準的なA−U塩基対合またはG−UゆらぎNWC塩基対合のいずれかを生じ)、CおよびAが異なる株で観察された場合、GがNWCオリゴマーで使用された(結果として、標準的なC−G塩基対合またはA−Gプリン−プリンNWC塩基対合のいずれかを生じた)。プローブとして使用されるNWCオリゴマーは、オリゴマーがNWC位置でU、G、またはAを含むように、必要に応じて標的HPIVアンプリコンのプラス鎖またはマイナス鎖にハイブリダイズするように設計された。プライマーとして使用されるNWCオリゴマーは、そのバリアントまたは補体が、オリゴマーがハイブリダイズする鎖中にUおよびA、GおよびA、CおよびA、またはCおよびU、またはUおよびGのいずれかを主に含有する部位でハイブリダイズするように設計された。
本開示の例示的なプライマー対およびプローブを使用し、一般的な試薬および方法の節において上述したようにして、候補オリゴマーの臨床感度を評価した。73個のHPIV−1、114個のHPIV−2、192個のHPIV−3、および54個のHPIV−4の試料を抽出し、試験した。HPIV−4試料はまた、Cepheid SmartCycler IIおよびPromegaから入手した試薬を用いて試験し、HPIV−4臨床標本の検出結果を比較し、不一致を解消した。
参照株を好適な培地中に希釈し、プールされた陰性鼻咽頭スワブ試料に4つの濃度でスパイクし、上記のように抽出した。各濃度を6つの複製物中で抽出し、複製物からの核酸は合わせなかった。各抽出から、3〜4つの複製物を使用して、各アッセイで試験した合計20の複製物について、本開示のオリゴマーおよびProdesse(登録商標)ProParaflu+(商標)アッセイを試験した。アッセイはABI 7500 FAST(登録商標)で行った。
Claims (165)
- 少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーを含む組成物またはキットであって、
前記第1の増幅オリゴマーおよび第2の増幅オリゴマーが、1295〜1305位、1350〜1360位、および/または1380〜1390位の範囲に位置する少なくとも1つのヒトパラインフルエンザウイルス3(HPIV−3)位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−3アンプリコンを増幅するように構成される、組成物またはキット。 - 少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーを含む組成物またはキットであって、
(a)前記第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1270位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成される、または
(b)前記第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1437位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成される、組成物またはキット。 - 試料中のHPIV−3を検出する方法であって、
前記試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、
HPIV−3核酸の存在下で、少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−3アンプリコンを生成する核酸増幅反応を前記組成物中で行うことと、
少なくとも1つの前記アンプリコンの有無を検出することと、を含み、
前記第1の増幅オリゴマーおよび前記第2の増幅オリゴマーが、1295〜1305位、1350〜1360位、および/または1380〜1390位内に位置する少なくとも1つのヒトパラインフルエンザウイルス3(HPIV−3)位置を含むHPIV−3アンプリコンを増幅するように構成される、方法。 - 試料中のHPIV−3を検出する方法であって、
前記試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、
HPIV−3核酸の存在下で、HPIV−3アンプリコンを生成する核酸増幅反応を前記組成物中で行うことと、
少なくとも1つの前記アンプリコンの有無を検出することと、を含み、
(a)前記第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1270位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成される、または
(b)前記第1の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1355位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3の1437位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第1および第2の増幅オリゴマーが、HPIV−3アンプリコンを生成するように構成される、方法。 - 前記アンプリコンが、HPIV−3の1305位を含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記アンプリコンが、HPIV−3の1355位を含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記アンプリコンが、HPIV−3の1380位を含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号25からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号25の配列を含む、請求項1〜8のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、配列番号25の配列を含む、請求項1〜9のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号36からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項1〜6または8〜10のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号36の配列を含む、請求項1〜6または8〜11のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、配列番号36の配列を含む、請求項1〜6または8〜12のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号28からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項1〜4、6〜7、または11〜13のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号28の配列を含む、請求項1〜4、6〜7、または11〜14のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、配列番号28の配列を含む、請求項1〜4、6〜7、または11〜15のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号37からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項1〜10または14〜16のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号37の配列を含む、請求項1〜10または14〜17のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、配列番号37の配列を含む、請求項1〜10または14〜18のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマーが、少なくとも1つの5−メチルシトシン残基を含む、請求項1〜19のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項1〜20のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のオリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項1〜21のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマーが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項1〜22のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項1〜23のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のオリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項1〜24のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のオリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項1〜25のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記アンプリコンの有無が、前記アンプリコンへの前記第3のオリゴマーのハイブリダイゼーションの発生または不発生によって検出される、請求項26に記載の方法。
- 前記HPIV−3核酸が、前記HPIV−3アンプリコンの生成をモニタリングすることによって定量化される、請求項3〜27のいずれか一項に記載の方法。
- 前記第3のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号31、32、33、34、または35からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項26〜28のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号31の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号31の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号32の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号32の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号33の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号33の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号34の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号34の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号35の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号35の配列を含む、請求項26〜29のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号26、27、28、29、または30からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項26〜28のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号26の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号26の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号27の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号27の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号28の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号28の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号29の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、配列番号29の配列を含む、請求項26〜28または40のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマーが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項26〜48のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項26〜49のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のオリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項26〜50のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記第3のオリゴマーとは異なる第4のオリゴマーをさらに含み、前記第4のオリゴマーが、前記アンプリコンにハイブリダイズするように構成され、検出可能な標識を含む、請求項26〜51のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第4のオリゴマーが、配列番号31、32、33、34、または35の配列を含む、請求項52に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第4のオリゴマーが、配列番号26、27、28、29、または30の配列を含む、請求項52に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第4のオリゴマーが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項52〜54のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第4のオリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項52〜55のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第4のオリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項52〜56のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 第1のヒトパラインフルエンザウイルス1(HPIV−1)増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーをさらに含み、
前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の330〜490位または960〜1100位内に位置する少なくとも1つのHPIV−1の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−1アンプリコンを増幅するように構成される、請求項1〜57のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。 - 少なくとも第1のHPIV−1増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーを含む組成物またはキットであって、
前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の330〜490位または960〜1100位内に位置する少なくとも1つのHPIV−1の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−1アンプリコンを増幅するように構成される、組成物またはキット。 - 試料中のHPIV−1を検出する方法であって、
前記試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、
HPIV−1核酸の存在下で、HPIV−1アンプリコンを生成する核酸増幅反応を前記組成物中で行うことと、
少なくとも1つの前記アンプリコンの有無を検出することと、を含み、
前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の330〜490位または960〜1100位内に位置する少なくとも1つのHPIV−1の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−1アンプリコンを増幅するように構成される、方法。 - 前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の970位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の1098位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項58〜60のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−1核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号6からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項58〜61のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1オリゴマーが、最大2までつのミスマッチを有する配列番号6の配列を含む、請求項58〜62のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1オリゴマーが、配列番号6の配列を含む、請求項58〜62のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−1核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号24からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項58〜64のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号24の配列を含む、請求項58〜65のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1オリゴマーが、配列番号24の配列を含む、請求項58〜65のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の331位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、HPIV−1の486位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項58〜59のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−1核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号17からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項58〜59または68のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号17の配列を含む、請求項58〜59または68〜69のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−1オリゴマーが、配列番号17の配列を含む、請求項58〜59または68〜69のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−1核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号22からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項58〜59または68〜71のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号22の配列を含む、請求項58〜59または68〜72のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−1オリゴマーが、配列番号22の配列を含む、請求項58〜59または68〜72のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記HPIV−1アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のHPIV−1オリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項58〜74のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号5、7、8、9、12、13、14、15、16、18、19、20、21、23、または125からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項75に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号5、7、8、9、12、13、14、15、16、18、19、20、21、23、または125の配列を含む、請求項75または76に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、配列番号5、7、21、23、または125の配列を含む、請求項77に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、配列番号8、9、20、または125の配列を含む、請求項77に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、配列番号12、13、14、または15の配列を含む、請求項77に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、配列番号16、18、または19の配列を含む、請求項77に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号10または11からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項75に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号10または11の配列を含む、請求項75または82に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−1オリゴマーが、配列番号10または11の配列を含む、請求項75または82に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および第3のHPIV−1オリゴマーのうちの少なくとも1つ、少なくとも2つ、またはそれぞれが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項58〜84のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−1オリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項58〜84のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−1オリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項58〜84のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 第1のヒトパラインフルエンザウイルス1(HPIV−2)増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーをさらに含み、
前記第1のHPIV−2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1600〜1700位内に位置する少なくとも1つのHPIV−2の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−2アンプリコンを増幅するように構成される、請求項1〜87のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。 - 少なくとも第1のHPIV−2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーを含む組成物またはキットであって、
前記第1のHPIV−2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1600〜1700位内に位置する少なくとも1つのHPIV−2の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−2アンプリコンを増幅するように構成される、組成物またはキット。 - 試料中のHPIV−2を検出する方法であって、
前記試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、
HPIV−2核酸の存在下で、HPIV−2アンプリコンを生成する核酸増幅反応を前記組成物中で行うことと、
少なくとも1つの前記アンプリコンの有無を検出することと、を含み、
前記第1のHPIV−2増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1600〜1700位内に位置する少なくとも1つのHPIV−2の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−2アンプリコンを増幅するように構成される、方法。 - 前記第1のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1603位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、HPIV−2の1698位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項88〜90のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−2増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−2核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号44からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項88〜91のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−2オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号44の配列を含む、請求項88〜92のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−2オリゴマーが、配列番号44の配列を含む、請求項88〜92のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−2増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−2核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号40からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項88〜94のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−2オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号40の配列を含む、請求項88〜95のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−2オリゴマーが、配列番号40の配列を含む、請求項88〜95のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記HPIV−2アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のHPIV−2オリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項88〜97のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号38、39、41、42、43、または45からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項98に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号38、39、41、42、43、または45の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号45の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号43の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号42の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号41の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号39の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−2オリゴマーが、配列番号38の配列を含む、請求項98または99に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および第3のHPIV−2オリゴマーのうちの少なくとも1つ、少なくとも2つ、またはそれぞれが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項88〜106のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−2オリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項88〜107のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−2オリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項88〜107のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 第1のヒトパラインフルエンザウイルス1(HPIV−4)増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーをさらに含み、
前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の620〜740位、2130〜2410位、2520〜3040位、または10090〜11980位内に位置する少なくとも1つのHPIV−4の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−4アンプリコンを増幅するように構成される、請求項1〜109のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。 - 少なくとも第1のHPIV−4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーを含む組成物またはキットであって、
前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の620〜740位、2130〜2410位、2520〜3040位、または10090〜11980位内に位置する少なくとも1つのHPIV−4の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−4アンプリコンを増幅するように構成される、組成物またはキット。 - 試料中のHPIV−4を検出する方法であって、
前記試料を少なくとも第1および第2の増幅オリゴマーと接触させ、それにより組成物を形成することと、
HPIV−4核酸の存在下で、HPIV−4アンプリコンを生成する核酸増幅反応を前記組成物中で行うことと、
少なくとも1つの前記アンプリコンの有無を検出することと、を含み、
前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーおよび第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の620〜740位、2130〜2410位、2520〜3040位、または10090〜11980位内に位置する少なくとも1つのHPIV−4の位置を含む少なくとも約50ヌクレオチド長のHPIV−4アンプリコンを増幅するように構成される、方法。 - 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の10094位、10205位、または10248位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の11685位、11739位、または11981位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項110〜112のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号79、80、81、82、97、98、99、または100からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜113のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号79、80、81、82、97、98、99、または100の配列を含む、請求項110〜114のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、配列番号79、80、81、82、97、98、99、または100の配列を含む、請求項110〜114のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号54、63、64、113、114、または115からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜116のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号54、63、64、113、114、または115の配列を含む、請求項110〜117のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、配列番号54、63、64、113、114、または115の配列を含む、請求項110〜117のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記HPIV−4アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のHPIV−4オリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項110〜119のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号53、55、58、60、62、65、67、68、76、83、84、85、86、92、94、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、または112からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項120に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号53、55、58、60、62、65、67、68、76、83、84、85、86、92、94、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、または112の配列を含む、請求項120〜121のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、配列番号53、55、58、60、62、65、67、68、76、83、84、85、86、92、94、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、または112の配列を含む、請求項120〜121のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の625位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−4の増幅オリゴマーが、HPIV−4の738位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項110〜112のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号78からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜112または124のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号78の配列を含む、請求項110〜112または124〜125のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、配列番号78の配列を含む、請求項110〜112または124〜125のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号56からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜112または124〜127のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号56の配列を含む、請求項110〜112または124〜128のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、配列番号56の配列を含む、請求項110〜112または124〜128のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記HPIV−4アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のHPIV−4オリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項110〜112または124〜130のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号71からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項131に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号71の配列を含む、請求項131または132に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、配列番号71の配列を含む、請求項131または132に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の2128位、2352位、2386位、2388位、2404位、または2524位を含む部位にハイブリダイズするように構成され、前記第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、HPIV−4の2907位、3006位、または3039位を含む部位にハイブリダイズするように構成される、請求項110〜112のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号72または124からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜112または135のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号72または124の配列を含む、請求項110〜112または135〜136のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1のHPIV−4オリゴマーが、配列番号72または124の配列を含む、請求項110〜112または135〜136のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−4核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号50、51、52、93、95、または96からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項110〜112または135〜138のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する、配列番号50、51、52、93、95、または96の配列を含む、請求項110〜112または135〜139のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第2のHPIV−4オリゴマーが、配列番号50、51、52、93、95、または96の配列を含む、請求項110〜112または135〜139のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記組成物またはキットが、前記HPIV−4アンプリコンにハイブリダイズするように構成された第3のHPIV−4オリゴマーをさらに含み、前記第3のオリゴマーが、検出可能な標識を含む、請求項110〜112または135〜141のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、ストリンジェントな条件下で、HPIV−3核酸へのハイブリダイゼーションを、配列番号46、47、48、49、59、61、69、70、72、73、74、75、77、88、90、91、116、117、118、119、121、122、または123からなる配列を有するオリゴマーと競合する、請求項142に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、最大2つまでのミスマッチを有する配列番号46、47、48、49、59、61、69、70、72、73、74、75、77、88、90、91、116、117、118、119、121、122、または123の配列を含む、請求項142または143に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第3のHPIV−4オリゴマーが、配列番号46、47、48、49、59、61、69、70、72、73、74、75、77、88、90、91、116、117、118、119、121、122、または123の配列を含む、請求項142または143に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および第3のHPIV−4オリゴマーのうちの少なくとも1つ、少なくとも2つ、またはそれぞれが、少なくとも1つの5−メチルシトシンを含む、請求項110〜145のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−4オリゴマー中のC残基のうちの少なくとも約半分が、5−メチル化されている、請求項110〜146のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1、第2、および/または第3のHPIV−4オリゴマー中のC残基の実質的に全てが、5−メチル化されている、請求項110〜147のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記核酸増幅反応が、サーマルサイクリングを含む、請求項3〜58、60〜88、または90〜148のいずれか一項に記載の方法。
- 前記核酸増幅反応が、逆転写を含む、請求項3〜58、60〜88、または90〜149のいずれか一項に記載の方法。
- 前記核酸増幅反応が、RT−PCRを含む、請求項3〜58、60〜88、または90〜150のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも1つの検出可能な標識が、蛍光性である、請求項26〜58、61〜88、または91〜151のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 蛍光標識を含む少なくとも1つのオリゴマーが、クエンチャーをさらに含む、請求項152に記載の組成物、キット、または方法。
- 蛍光標識を含む少なくとも1つのオリゴマーが、伸長不能なオリゴマーである、請求項152または153に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記核酸増幅反応が、5’から3’のエキソヌクレアーゼ活性を有するポリメラーゼを用いたPCR、ならびにフルオロフォアおよびクエンチャーを含むプローブオリゴマーを使用してアンプリコンを検出することを含み、前記ポリメラーゼによる前記プローブのエキソヌクレアーゼ分解が、前記クエンチャーによる蛍光のクエンチングを低減する、請求項3〜58、60〜88、または90〜154のいずれか一項に記載の方法。
- 少なくとも1つ、少なくとも2つ、または少なくとも3つのオリゴマーが、少なくとも1つの非ワトソンクリック(NWC)位置を含む、請求項1〜155のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- HPIV−1、HPIV−2、HPIV−3、またはHPIV−4にハイブリダイズするように構成されたオリゴマーのうちの少なくとも1つ、2つ、3つ、または4つがそれぞれ、少なくとも1つのNWC位置を含む、請求項156に記載の組成物、キット、または方法。
- 少なくとも1つ、少なくとも2つ、または少なくとも3つのオリゴマーが、縮重位置を含む、請求項1〜157のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- HPIV−1、HPIV−2、HPIV−3、またはHPIV−4にハイブリダイズするように構成されたオリゴマーのうちの少なくとも1つ、2つ、3つ、または4つがそれぞれ、少なくとも1つの縮重位置を含む、請求項158に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記第1および第2の増幅オリゴマー、前記第1および第2のHPIV−1増幅オリゴマー、前記第1および第2のHPIV−2増幅オリゴマー、および/または前記第1ならびに第2のHPIV−4増幅オリゴマーが、約10〜60塩基長、約14〜50塩基長、約14〜40塩基長、約14〜35塩基長、または約15〜30塩基長の標的ハイブリダイズ領域を含む、請求項1〜159のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 前記HPIV−3アンプリコン、前記HPIV−1アンプリコン、前記HPIV−2アンプリコン、および/または前記HPIV−4アンプリコンが、約50〜1000ヌクレオチド長、約50〜100ヌクレオチド長、約100〜200ヌクレオチド長、約200〜300ヌクレオチド長、約300〜400ヌクレオチド長、約400〜500ヌクレオチド長、約500〜600ヌクレオチド長、約600〜700ヌクレオチド長、約700〜800ヌクレオチド長、約800〜900ヌクレオチド長、約900〜1000ヌクレオチド長、または約1000〜2000ヌクレオチド長である、請求項1〜160のいずれか一項に記載の組成物、キット、または方法。
- 請求項1〜2、5〜59、61〜89、91〜111、113〜148、または153〜161のいずれか一項に記載のキット。
- 請求項1〜2、5〜59、61〜89、91〜111、113〜148、または153〜161のいずれか一項に記載の組成物。
- 水性、凍結、または凍結乾燥である、請求項163に記載の組成物。
- 試料中のHPIV−1核酸、HPIV−2核酸、HPIV−3核酸、および/またはHPIV−4核酸を検出または定量化するための、請求項162〜164のいずれか一項に記載の組成物またはキットの使用。
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