JP2019531705A - 操作されたポリペプチドおよびその使用 - Google Patents

Abstract

Ｆｃ領域を含む、抗体分子および融合タンパク質などのポリペプチドが開示される。そのポリペプチドは、障害を処置し、防止し、および／または診断するために使用することができる。特に、表１に開示された特定の変異から選択される１個または複数のいずれかの変異を含むＦｃ領域が開示される。前記変異のある特定のものは、新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対するアフィニティーの増加を生じ、前記変異のある特定のものは、操作された抗体の半減期の増強を生じ、また、エフェクター機能への影響も生じる。特に開示された変異は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、またはそれらの組み合わせである。

Description

関連出願への相互参照
この出願は、２０１６年８月２日に出願された米国仮出願第６２／３７０，２０１号および２０１７年４月１４日に出願された米国仮出願第６２／４８５，６７１号の利益を主張する。上記出願の内容は、その全体が参考として本明細書に援用される。

配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出され、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる配列表を含有する。２０１７年８月１日に作成された、前記ＡＳＣＩＩコピーは、Ｐ２０２９−７０１４ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔと名付けられ、３，４９０バイトのサイズである。

モノクローナル抗体療法は、疾患関連生物学的分子と特異的に相互作用する能力があるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を含む免疫療法の一クラスである。ここ数年、治療抗体がターゲティングしうる疾患分野は、かなり拡大しており、いくつかのモノクローナル抗体および抗体誘導体生成物が、米国および多くの他の国において治療的使用に認可されている。モノクローナル抗体療法は、現在、様々な疾患または状態を処置するために使用され、または調べられており、その疾患または状態には、例えば、感染性疾患、がん、免疫疾患、臓器移植、循環器疾患、および代謝性疾患が含まれる。

モノクローナル抗体の有効性は、異なる作用機構により達成されうる（Ｓｕｚｕｋｉら、Ｊ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ． ２０１５年；２８巻（３号）：１３３〜１３９頁）。多くの治療抗体は、それらの標的分子または細胞の病態生理学的機能を中和する。ここ数年、免疫チェックポイントをブロックするモノクローナル抗体が、がん患者において抗腫瘍免疫を増強するために使用されており、永続的な臨床応答を生じる可能性をもつ。ある特定のモノクローナル抗体は、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性を引き起こすことができる。モノクローナル抗体はまた、例えば、放射性同位元素、毒素、または他の治療剤もしくは診断剤にコンジュゲートされた場合、薬物送達担体として使用することができる。

Ｓｕｚｕｋｉら、Ｊ Ｔｏｘｉｃｏｌ Ｐａｔｈｏｌ．（２０１５年）２８巻（３号）：１３３〜１３９頁

様々な生物学的機能をモジュレートすることにおけるモノクローナル抗体および抗体誘導体生成物の能力を考慮すれば、障害を処置し、防止し、および診断するのに適したポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の作出のための新しい手法を開発する必要性が存在する。

この開示は、少なくとも部分的に、免疫グロブリンのＦｃ領域を含み、かつ本明細書に開示された構造的または機能的特性の１つまたは複数を含むポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を提供する。ある実施形態では、そのポリペプチドをコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞、組成物（例えば、医薬組成物）、キット、容器、およびそのポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を作製するための方法もまた、提供される。本明細書に開示されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、本明細書に開示された障害および状態などの障害を処置し、防止し、および／または診断するために、（単独で、または他の作用物質もしくは治療モダリティーと組み合わせて）使用することができる。

ある態様では、本開示は、Ｆｃ領域を含むポリペプチド、例えば、抗体分子または融合タンパク質であって、Ｆｃ領域が変異を含み、かつポリペプチドが、以下の特性の１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全部）を有する、ポリペプチドを特色とする：
ａ）例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍増加の、例えば、６．０から６．５の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ６．０における）、新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する、増加した結合アフィニティー（例えば、減少した解離定数（Ｋ_ｄ））を有する；
ｂ）例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、７．０から７．４の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ７．４における）結合アフィニティーより、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍高い、６．０から６．５の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ６．０における）、ＦｃＲｎに対する、より高い結合アフィニティー（例えば、より低い解離定数（Ｋ_ｄ））を有する；
ｃ）例えば、６．０から６．５の間のｐＨにおいて（例えば、ｐＨ６．０において）高いアフィニティーで、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、例えば、３００ｎＭまたはそれ未満、例えば、２５０ｎＭまたはそれ未満、２００ｎＭまたはそれ未満、１５０ｎＭまたはそれ未満、１００ｎＭまたはそれ未満、５０ｎＭまたはそれ未満、例えば、２５ｎＭまたはそれ未満、１０ｎＭまたはそれ未満、５ｎＭまたはそれ未満、２ｎＭまたはそれ未満、１ｎＭまたはそれ未満、０．５ｎＭまたはそれ未満、０．２ｎＭまたはそれ未満、０．１ｎＭまたはそれ未満、０．０５ｎＭまたはそれ未満、０．０２ｎＭまたはそれ未満、または０．０１ｎＭまたはそれ未満、例えば、２５ｎＭから０．１ｎＭの間の、２０ｎＭから０．５ｎＭの間の、１５ｎＭから１ｎＭの間の、１０ｎＭから５ｎＭの間の、または２０ｎＭから１０ｎＭの間の解離定数（Ｋ_ｄ）でＦｃＲｎに結合する；
ｄ）例えば、７．０から７．４の間のｐＨにおいて（例えば、ｐＨ７．４において）低いアフィニティーで、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、例えば、５０ｎＭまたはそれより大きな、例えば、６０ｎＭまたはそれより大きな、８０ｎＭまたはそれより大きな、１００ｎＭまたはそれより大きな、１５０ｎＭまたはそれより大きな、２００ｎＭまたはそれより大きな、５００ｎＭまたはそれより大きな、例えば、５０ｎＭから５００ｎＭの間のまたは１００ｎＭから２５０ｎＭの間のＫ_ｄでＦｃＲｎに結合する；
ｅ）例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｆｃγ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、またはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、または全部）に対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｆ）例えば、ｓｙｐｒｏオレンジアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、同じ熱安定性を有し、または熱安定性を実質的に変化させない（例えば、融解温度を１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、または１０℃以下だけ、増加または減少させる）；
ｇ）例えば、ＥＬＩＳＡに基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｈ）例えば、ＥＬＩＳＡに基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｉ）参照ポリペプチドと比較して、同じエフェクター機能、例えば、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）の１つもしくは複数（例えば、２つ、３つ、または全部）を有し、またはエフェクター機能を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％より多く、減少または増加させ）、またはエフェクター機能を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｊ）例えば、動物モデルにおいて決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍増加の、増加したｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を有する；
ｋ）参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで、同じ生物学的機能を有し、または生物学的機能を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または生物学的機能を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｌ）参照ポリペプチドと比較して、同じ開発可能性特徴（ｄｅｖｅｌｏｐａｂｉｌｉｔｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）、例えば、安定性、溶解度、凝集、もしくは発現レベルの１つもしくは複数（例えば、２つ、３つ、または全部）を有し、または開発可能性特徴を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または開発可能性特徴を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；
ｍ）参照ポリペプチドと比較して、エピトープに対する結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方が同じであり、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる；あるいは
ｎ）例えば、トランスサイトーシスアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍だけ、粘膜取込みを増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍増加の、例えば、６．０から６．５の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ６．０における）、新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する、増加した結合アフィニティー（例えば、減少した解離定数（Ｋ_ｄ））を有する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、７．０から７．４の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ７．４における）結合アフィニティーより、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍高い、６．０から６．５の間のｐＨにおける（例えば、ｐＨ ６．０における）、ＦｃＲｎに対する、より高い結合アフィニティー（例えば、より低い解離定数（Ｋ_ｄ））を有する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、６．０から６．５の間のｐＨにおいて（例えば、ｐＨ６．０において）高いアフィニティーで、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、例えば、５０ｎＭまたはそれ未満、例えば、２５ｎＭまたはそれ未満、１０ｎＭまたはそれ未満、５ｎＭまたはそれ未満、２ｎＭまたはそれ未満、１ｎＭまたはそれ未満、０．５ｎＭまたはそれ未満、０．２ｎＭまたはそれ未満、０．１ｎＭまたはそれ未満、０．０５ｎＭまたはそれ未満、０．０２ｎＭまたはそれ未満、または０．０１ｎＭまたはそれ未満、例えば、２５ｎＭから０．１ｎＭの間の、２０ｎＭから０．５ｎＭの間の、１５ｎＭから１ｎＭの間の、１０ｎＭから５ｎＭの間の、または２０ｎＭから１０ｎＭの間の解離定数（Ｋ_ｄ）でＦｃＲｎに結合する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、７．０から７．４の間のｐＨにおいて（例えば、ｐＨ７．４において）低いアフィニティーで、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、例えば、５０ｎＭまたはそれより大きな、例えば、６０ｎＭまたはそれより大きな、８０ｎＭまたはそれより大きな、１００ｎＭまたはそれより大きな、１５０ｎＭまたはそれより大きな、２００ｎＭまたはそれより大きな、５００ｎＭまたはそれより大きな、例えば、５０ｎＭから５００ｎＭの間のまたは１００ｎＭから２５０ｎＭの間のＫ_ｄでＦｃＲｎに結合する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｆｃγ受容体（例えば、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、またはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、または全部）に対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ｓｙｐｒｏオレンジアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、同じ熱安定性を有し、または熱安定性を実質的に変化させない（例えば、融解温度を１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、または１０℃以下だけ、増加または減少させる）。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ＥＬＩＳＡに基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、ＥＬＩＳＡに基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーが同じであり、または結合アフィニティーを実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティーを（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、参照ポリペプチドと比較して、同じエフェクター機能、例えば、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）の１つもしくは複数（例えば、２つ、３つ、または全部）を有し、またはエフェクター機能を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％より多く、減少または増加させ）、またはエフェクター機能を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、動物モデルにおいて決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍増加の、増加したｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を有する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏで、同じ生物学的機能を有し、または生物学的機能を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または生物学的機能を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。ある実施形態では、生物学的機能は、病原体、例えば、ウイルス、細菌、または真菌を阻害する（中和する）ことを含む。ある実施形態では、生物学的機能は、抗腫瘍活性を含む。ある実施形態では、生物学的機能は、免疫応答を阻害することを含む。ある実施形態では、生物学的機能は、アゴニスト活性を含む。ある実施形態では、生物学的機能は、免疫応答を活性化し、または回復させることを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、参照ポリペプチドと比較して、同じ開発可能性特徴（ｄｅｖｅｌｏｐａｂｉｌｉｔｙ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ）、例えば、安定性、溶解度、凝集、もしくは発現レベルの１つもしくは複数（例えば、２つ、３つ、または全部）を有し、または開発可能性特徴を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または開発可能性特徴を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、参照ポリペプチドと比較して、エピトープに対する結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方が同じであり、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を実質的に変化させず（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以下だけ、減少または増加させ）、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を（例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍）増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば、トランスサイトーシスアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、例えば、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍だけ、粘膜取込みを増加させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）を有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）およびｂ）を有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）のうちの一方または両方を有し、上記の特性ｃ）またはｄ）のうちの一方または両方を有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）のうちの一方または両方を有し、上記の特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全てを有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）のうちの一方または両方を有し、上記の特性ｃ）またはｄ）のうちの一方または両方を有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）のうちの一方または両方を有し、上記の特性ｃ）、ｄ）、ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４、５、６個、または全てを有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｂ）のうちの一方または両方、上記の特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全て、および上記の特ｃ）、ｄ）、ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４、５、６個、または全てを有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）、ｂ）、ｃ）、またはｄ）のうちの１、２、３個、または全て、上記の特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全て、および上記の特性ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４個、または全てを有する。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の特性ａ）またはｃ）のうちの一方または両方、上記の特性ｂ）またはｄ）のうちの一方または両方、上記の特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全て、および上記の特性ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４個、または全てを有する。

ある実施形態では、参照ポリペプチドは、変異を含まず、他の点では同一のポリペプチド、例えば、野生型Ｆｃ領域を含む、例えば、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な、または１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ異なるアミノ酸配列を有する、ポリペプチドである。

ある実施形態では、変異は、ＣＨ２ドメイン内の残基においてである。別の実施形態では、変異は、ＣＨ３ドメイン内の残基においてである。ある実施形態では、ポリペプチドは、ＣＨ２ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異、およびＣＨ３ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドはさらに、ＣＨ２ドメインおよび／またはＣＨ３ドメイン以外の領域内の残基における変異を含む。

ある実施形態では、変異は、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインとの間のリンカー領域のコンフォメーションを変化させないか、または実質的に変化させない。ある実施形態では、変異は、例えば、表面領域（例えば、２０％より多い溶媒接触可能区域を有するアミノ酸残基により覆われた区域として定義される領域）上にクラスターの（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０個の、またはそれより多く連続した）疎水性または芳香族残基を導入しない。

ある実施形態では、ポリペプチドは、抗体分子、例えば、本明細書に記載される抗体分子である。

ある実施形態では、ポリペプチドは、ＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４である。ある実施形態では、ポリペプチドは、ＩｇＧ１である。ある実施形態では、ポリペプチドは、ＩｇＧ４である。

ある実施形態では、ポリペプチドは、重鎖免疫グロブリン可変領域、軽鎖免疫グロブリン可変領域、またはその両方を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、２つの重鎖免疫グロブリン可変領域と２つの軽鎖免疫グロブリン可変領域の四量体を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、全長抗体分子を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、抗体分子の断片（例えば、抗原結合性断片）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、キメラ抗体分子を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、ヒト化抗体分子を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、ヒト抗体分子を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、マウス抗体分子を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、二特異的または多特異的抗体分子を含む。

別の実施形態では、ポリペプチドは、融合タンパク質、例えば、本明細書に記載される融合タンパク質である。ある実施形態では、ポリペプチドは、融合ポリペプチドの断片（例えば、機能的断片）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、以下：
（ｉ）ＦｃＲｎ、例えば、ＦｃＲｎ接触残基と相互作用する表面領域（例えば、２０％より多い溶媒接触可能区域を有するアミノ酸残基により覆われた区域として定義される領域）内の残基における変異；
（ｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面（例えば、Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体においてＦｃＲｎから７オングストローム未満にあるＦｃ領域の表面上の任意のアミノ酸残基）に沿う周辺残基である残基における変異；
（ｉｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基における変異；
（ｉｖ）２５０−ヘリックス、例えば、Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、もしくはＭ２５２のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５個、もしくは全部）を含むヘリックスのコンフォメーション動力学を増強する、ヘリックス接触残基である残基における変異；または
（ｖ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってヒスチジンのｐＫをモジュレートする、および／またはＦｃ−ＦｃＲｎ界面（例えば、Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体においてＦｃＲｎから７オングストローム未満にあるＦｃ領域の表面上の任意のアミノ酸残基）に沿ってのヒスチジンの導入である変異
のうちの１個または複数（例えば、２、３、４個、または全部）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）および（ｉｉ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）および（ｉｉｉ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）および（ｉｉｉ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｖ）および（ｖ）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）、（ｉｉｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）および（ｉｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）および（ｖ）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、上記の（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）、および（ｖ）を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、ＦｃＲｎと相互作用する表面領域（例えば、２０％より多い溶媒接触可能区域を有するアミノ酸残基により覆われた区域として定義される領域）内の残基、例えば、ＦｃＲｎ接触残基において変異を含む。

ある実施形態では、変異は、Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基のうちの２個またはそれより多く（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全て）における複数の変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面（例えば、Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体においてＦｃＲｎから７オングストローム未満にあるＦｃ領域の表面上の任意のアミノ酸残基）に沿う周辺残基である残基において変異を含む。

ある実施形態では、変異は、Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、Ｎ３１５、またはＡ３７８のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６個、または全て）から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、Ｎ３１５、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２個またはそれより多く（例えば、２、３、４、５、６個、または全て）における複数の変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６Ｄ、Ｈ２８５Ｎ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、Ｑ３１１Ｖ、Ｎ３１５Ｄ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６個、または全て）を含む。

ある実施形態では、変異は、Ｔ２５６、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２個または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｔ２５６Ｄ、Ｑ３１１Ｖ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｈ２８５、Ｔ３０７、またはＮ３１５から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｈ２８５、Ｔ３０７、またはＮ３１５から選択される残基のうちの２個または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｈ２８５Ｎ、Ｔ３０７Ｑ、またはＮ３１５Ｄから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｈ２８５、Ｔ３０７、またはＡ３７８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｈ２８５、Ｔ３０７、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２個または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２個または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｔ３０７Ｑ、Ｑ３１１Ｖ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｔ２５６、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２、３、４個、または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２、３、４個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｔ３０７、Ｑ３１１、またはＡ３７８から選択される残基のうちの２、３、４個、または全てにおける複数の変異を含む。ある実施形態では、Ｔ２５６Ｄ、Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、またはＡ３７８Ｖから選択される変異のうちのポリペプチドは、１、２、３、４個、または全てを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基のうちの２個またはそれより多く（例えば、３、４、５、６、７、８、９個、または全て）における複数の変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基において変異を含む。

ある実施形態では、変異は、Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基のうちの２個またはそれより多く（例えば、３、４、５、６、７個、または全て）における複数の変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、（例えば、ｐＨ５．０（ＰＤＢ ＩＤ：４Ｊ１２）およびｐＨ ６．５（ＰＤＢ ＩＤ：４Ｑ７Ｄ）において結晶化されたＦｃドメインの結晶構造の比較により示されるように）２５０−ヘリックス（例えば、Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、またはＭ２５２の１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、または全部）を含むヘリックス）のコンフォメーション動力学、例えば、２５０−ヘリックスにより示される側方変位またはコンフォメーション柔軟性を増強する、ヘリックス接触残基である残基において変異を含む。

ある実施形態では、変異は、Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基のうちの２個またはそれより多く（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全て）における複数の変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面（例えば、Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体においてＦｃＲｎから７オングストローム未満にあるＦｃ領域の表面上の任意のアミノ酸残基）に沿ってのヒスチジンの導入である変異を含む。

ある実施形態では、変異は、極性アミノ酸残基を導入する。別の実施形態では、変異は、非極性アミノ酸残基を導入する。ある実施形態では、変異は、荷電アミノ酸残基を導入する。別の実施形態では、変異は、非荷電アミノ酸残基を導入する。ある実施形態では、変異は、正荷電（または塩基性）アミノ酸残基を導入する。別の実施形態では、変異は負荷電（または酸性）アミノ酸残基を導入する。ある実施形態では、変異は、疎水性アミノ酸残基を導入する。別の実施形態では、変異は、親水性アミノ酸残基を導入する。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、２、３、４、５個、またはそれより多く）のＦｃＲｎ接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６、Ｔ３０７、またはＮ２８６のうちの１個または複数（例えば、２個または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６およびＴ３０７における変異を含み、任意選択で残基Ｎ２８６における変異をさらに含む。ある実施形態では、残基Ｔ２５６における変異は、例えば、Ｔ２５６Ｄ、Ｔ２５６Ｅ、またはＴ２５６Ｒから選択される極性残基である。ある実施形態では、残基Ｔ２５６における変異は、Ｔ２５６Ｄである。ある実施形態では、残基Ｔ３０７における変異は、例えば、Ｔ３０７Ｄ、Ｔ３０７Ｅ、またはＴ３０７Ｒから選択される極性残基である。ある実施形態では、残基Ｔ３０７における変異は、Ｔ３０７Ｒである。ある実施形態では、残基Ｎ２８６における変異は、Ｎ２８６Ｉである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６ＤおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、およびＮ２８６Ｉを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、２、３、４、５個、またはそれより多く）のＦｃＲｎ接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｌ３０９、Ｄ３１２、またはＮ３１５のうちの１個または複数（例えば、２個または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｌ３０９における変異を含み、任意選択で残基Ｄ３１２およびＮ３１５における変異をさらに含む。ある実施形態では、残基Ｌ３０９における変異は、Ｌ３０９Ｎである。ある実施形態では、残基Ｄ３１２における変異は、Ｄ３１２Ａである。ある実施形態では、残基Ｎ３１５における変異は、Ｎ３１５Ｄである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｎ、Ｄ３１２ＡおよびＮ３１５Ｄを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、１、２、３、４、５個、またはそれより多く）のＦｃＲｎ非接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｌ２０９Ｒ、Ｄ３１２、またはＱ３１１のうちの１個または複数（例えば、２個または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｌ３０９およびＤ３１２における変異を含み、任意選択で残基Ｑ３１１における変異をさらに含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｑ３１１における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｌ３０９における変異は、Ｌ３０９Ｒである。ある実施形態では、残基Ｄ３１２における変異は、Ｄ３１２Ｅである。ある実施形態では、残基Ｑ３１１における変異は、Ｑ３１１Ｐである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９ＲおよびＤ３１２Ｅを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｒ、Ｄ３１２Ｅ、およびＱ３１１Ｐを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｑ３１１Ｐを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、２、３、４、５個、またはそれより多く）のＦｃＲｎ接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｉ２５３、Ｓ２５４、Ｍ２５２、またはＲ２５５から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２、３、または４個）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｉ２５３における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｉ２５３における変異は、Ｉ２５３Ｍである。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｓ２５４における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｓ２５４における変異は、Ｓ２５４ＨまたはＳ２５４Ｍである。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｍ２５２およびＳ２５４における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｍ２５２における変異は、Ｍ２５２Ｅである。ある実施形態では、残基Ｓ２５４における変異は、Ｓ２５４Ｒである。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｍ２５２、Ｓ２５４、およびＲ２５５における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｍ２５２における変異は、Ｍ２５２Ｅである。ある実施形態では、残基Ｓ２５４における変異は、Ｓ２５４Ｒである。ある実施形態では、残基Ｒ２５５における変異は、Ｒ２５５Ｙである。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、２、３、４、５、またはそれより多く）のＦｃＲｎ非接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５０ＱおよびＭ３４Ｌと同等である変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｄ３７６、Ｋ２４８、Ｅ３８０、Ｍ４２８、またはＡ３２８から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２、３、４個、または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｄ３７６における変異、およびＫ２４８、Ｅ３８０、Ｍ４２８、またはＡ３２８から選択される残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｄ３７６における変異および残基Ｋ２４８における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｄ３７６における変異および残基Ｅ３８０における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｄ３７６における変異および残基Ｍ４２８における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｄ３７６における変異および残基Ａ３２８における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｄ３７６における変異は、Ｄ３７６ＱまたはＤ３７６Ｎである。ある実施形態では、残基Ｋ２４８における変異は、Ｋ２４８Ｓである。ある実施形態では、残基Ｅ３８０における変異は、Ｅ３８０Ａである。ある実施形態では、残基Ｄ３７６における変異は、Ｄ３７６Ｑである。ある実施形態では、残基Ｍ４２８における変異は、Ｍ４２８Ｌである。ある実施形態では、残基Ａ３２８における変異は、Ａ３２８Ｉである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱまたはＤ３７６Ｎ、および変異Ｋ２４８Ｓを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱまたはＤ３７６Ｎ、および変異Ｅ３８０Ａを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱおよびＭ４２８Ｌを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱおよびＡ３２８Ｉを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、少なくとも１個（例えば、２、３、４、５、またはそれより多く）のＦｃＲｎ非接触残基における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｋ２４６、Ｐ２４７、またはＤ３７６から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２個または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｋ２４６における変異および残基Ｐ２４７における変異を含み、任意選択で残基Ｄ３７６における変異をさらに含む。ある実施形態では、残基Ｋ２４６における変異は、Ｋ２４６Ｎである。ある実施形態では、残基Ｐ２４７における変異は、Ｐ２４７Ａである。ある実施形態では、残基Ｄ３７６における変異は、Ｄ３７６Ｎである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４６ＮおよびＰ２４７Ａを含み、任意選択で変異Ｄ３７６Ｎをさらに含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｎ２８６、Ａ２８７、Ｐ２５７、Ｑ３１１、またはＰ２４７から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６個、または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｎ２８６、およびＡ２８７における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６、Ｔ３０７、およびＰ２５７における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６、Ｔ３０７、およびＱ３１１における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｔ２５６、Ｔ３０７、およびＰ２４７における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｔ２５６における変異は、Ｔ２５６Ｄである。ある実施形態では、残基Ｔ３０７における変異は、Ｔ３０７Ｒである。ある実施形態では、残基Ｎ２８６における変異は、Ｎ２８６Ｉである。ある実施形態では、残基Ａ２８７における変異は、Ａ２８７Ｓである。ある実施形態では、残基Ｐ２５７における変異は、Ｐ２５７Ｌである。ある実施形態では、残基Ｑ３１１における変異は、Ｑ３１１ＶまたはＱ３１１Ｌである。ある実施形態では、残基Ｐ２４７における変異は、Ｐ２４７Ｄである。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｎ２８６Ｄ、およびＡ２８７Ｓを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、およびＰ２５７Ｌを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、およびＱ３１１ＶまたはＱ３１１Ｌを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、およびＰ２４７Ｄを含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｎ２８６、Ａ２８７、Ｐ２４７、Ｑ３１１、Ｖ３０８、Ｐ２５７、Ｎ３１５、またはＶ２７９から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７個、または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｎ２８６、Ａ２８７、Ｐ２４７、およびＱ３１１における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｎ２８６における変異は、Ｎ２８６Ｄである。ある実施形態では、残基Ａ２８７における変異は、Ａ２８７Ｓである。ある実施形態では、残基Ｐ２４７における変異は、Ｐ２４７Ｄである。ある実施形態では、残基Ｑ３１１における変異は、Ｑ３１１Ｖである。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｖ３０８およびＰ２５７における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｖ３０８における変異は、Ｖ３０８Ｎである。ある実施形態では、残基Ｐ２５７における変異は、Ｐ２５７Ｍである。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｑ３１１、Ｎ３１５、およびＶ２７９における変異を含む。ある実施形態では、残基Ｑ３１１における変異は、Ｑ３１１Ｌである。ある実施形態では、残基Ｎ３１５における変異は、Ｎ３１５Ｔである。ある実施形態では、残基Ｖ２７９における変異は、Ｖ２７９Ｉである。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｇ４３３またはＨ４３３、Ｐ４３４またはＧ４３４、Ｇ４３４ａ、またはＨ４３５から選択される残基のうちの１個または複数（例えば、２、３個、または全て）における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｇ４３３、Ｐ４３４、およびＨ４３５における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｇ４３３、Ｐ４３４、Ｇ４３４ａ、およびＨ４３５における変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、残基Ｈ４３３、Ｇ４３４、Ｐ４３４ａ、およびＨ４３５における変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、表１に記載されているような、１個もしくは複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれより多く）の変異、または変異の１個もしくは複数の組み合わせを含む。例えば、変異の組み合わせは、ＦｃＭｕｔＸという名前で挙げられた１個または複数の変異およびＦｃＭｕｔＹという名前で挙げられた１個または複数の変異を含むことができ、ただし、ＸおよびＹは、表１に示された３桁の数字であり、かつＸはＹと等しくない。

ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｉ２５３Ｍを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｈ、Ｄ３１２ＡおよびＮ３１５Ｄを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｍ２５２ＥおよびＳ２５４Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｍ２５２Ｅ、Ｓ２５４ＲおよびＲ２５５Ｙを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｓ２５４Ｈを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｓ２５４Ｍを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６ＤおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｌ、Ｎ２８６ＩおよびＴ３０７Ｉを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｉ、Ｎ２８６ＩおよびＴ３０７Ｉを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４８ＳおよびＤ３７６Ｑを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４８ＳおよびＤ３７６Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱおよびＥ３８０Ａを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＮおよびＥ３８０Ａを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６ＱおよびＭ４２８Ｌを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４８ＳおよびＡ３７８Ｉを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３１４Ｋを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｍ２５２Ｗを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｖ３０８Ｆを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｖ３０８ＦおよびＮ４３４Ｙを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＤ３７６Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９ＲおよびＤ３１２Ｅを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｌ３０９Ｒ、Ｑ３１１ＰおよびＤ３１２Ｅを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４６ＮおよびＰ２４７Ａを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｋ２４６Ｎ、Ｐ２４７ＡおよびＤ３７６Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６ＥおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６ＲおよびＴ３０７Ｄを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６ＲおよびＴ３０７Ｅを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｑ３１１Ｐを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｄ３７６Ｑを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ａ２８７ＳおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｐ２５７ＬおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＱ３１１Ｖを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｐ２４７Ｄ、Ｔ２５６ＤおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｐ２４７Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ａ２８７ＳおよびＱ３１１Ｖを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｐ２５７ＭおよびＶ３０８Ｎを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｖ２７９Ｉ、Ｑ３１１ＬおよびＮ３１５Ｔを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｈ４３３ＧおよびＮ４３４Ｐを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６ＤおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６ＥおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６ＱおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｐ２５７ＴおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｐ２５７ＶおよびＴ３０７Ｒを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＱ３１１Ｉを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＱ３１１Ｌを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＱ３１１Ｍを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｐ２５７Ｌ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＱ３１１Ｖを含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、変異Ｔ２５６Ｄ、Ｔ３０７ＲおよびＭ４２８Ｌを含む。

ある実施形態では、変異は、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、またはそれらの組合せ以外である。ある実施形態では、変異は、残基Ｍ２５２、Ｓ２５４、Ｔ２５６、Ｌ３０９、Ｔ２５０、Ｍ４２８、Ｎ４３４、Ｎ４３４、Ｔ３０７、Ｅ３８０、Ｎ４３４、Ｍ２５２、Ｓ２５４、Ｔ２５６、またはそれらの組合せ以外の残基における変異である。ある実施形態では、ポリペプチドは、以下の１個または複数の変異：（ｉ）Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ；（ｉｉ）Ｌ３０９Ｎ；（ｉｉｉ）Ｔ２５０ＱおよびＭ４２８Ｌ；（ｉｖ）Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４Ａ；（ｖ）Ｎ４３４Ａ；（ｖｉ）Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａ；（ｖｉｉ）Ｍ２５２Ｗ；（ｖｉｉｉ）Ｖ３０８Ｆ；（ｉｘ）Ｖ３０８ＦおよびＮ４３４Ｙ；または（ｘ）Ｈ４３５Ａのうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９個、または全て）を有しない。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、またはＴ２５６Ｅから選択される第１の変異、およびＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ以外の表１中の変異から選択される第２の変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドは、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、またはＴ２５６Ｅから選択される変異の組合せを含み、ここで、組合せは、（ｉ）Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ；（ｉｉ）Ｌ３０９Ｎ；（ｉｉｉ）Ｔ２５０ＱおよびＭ４２８Ｌ；（ｉｖ）Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４Ａ；（ｖ）Ｎ４３４Ａ；（ｖｉ）Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａ；（ｖｉｉ）Ｍ２５２Ｗ；（ｖｉｉｉ）Ｖ３０８Ｆ；（ｉｘ）Ｖ３０８ＦおよびＮ４３４Ｙ；または（ｘ）Ｈ４３５Ａ以外である。

ある実施形態では、ポリペプチドは、エフェクター機能を増大させるＦｃ領域における変異をさらに含む。ある実施形態では、変異は、Ｓ２３９（例えば、Ｓ２３９Ｄ）、Ａ３３０（例えば、Ａ３３０Ｌ）、Ｉ３３２（例えば、Ｉ３３２Ｅ）、Ｆ２４３（例えば、Ｆ２４３Ｌ）、Ｇ２３６（例えば、Ｇ２３６Ａ）、またはそれらの組合せから選択される残基における変異であり、例えば、エフェクター機能を増大させる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、エフェクター機能を低下させるＦｃ領域における変異をさらに含む。ある実施形態では、変異は、Ｋ３２２（例えば、Ｋ３２２Ａ）、Ｌ２３４（例えば、Ｌ２３４ＡまたはＬ２３４Ｆ）、Ｌ２３５（例えば、Ｌ２３５ＡまたはＬ２３５Ｅ）、Ｐ３３１（例えば、Ｐ３３１Ｓ）、Ｎ２９７、またはそれらの組合せから選択される残基における変異であり、例えば、エフェクター機能を低下させる。

ある実施形態では、ポリペプチドはさらに、Ｆｃ領域以外の領域において、例えば、Ｆａｂ領域において、変異を含む。

ある実施形態では、ポリペプチドはさらに、複数の変異を含み、少なくとも１個の変異は、代償性変異、例えば、本明細書に記載された代償性変異である。

ある実施形態では、ポリペプチドは、単離されたポリペプチドである。ある実施形態では、ポリペプチドは、合成ポリペプチドである。

ある態様では、本開示は、本明細書に記載されたポリペプチドを含む組成物、例えば、医薬組成物を特色とする。ある実施形態では、組成物はさらに、薬学的に許容される担体を含む。

ある態様では、本開示は、本明細書に記載されたポリペプチドをコードする核酸分子を特色とする。ある態様では、本開示は、本明細書に記載された核酸分子を含むベクターを特色とする。ある態様では、本開示は、本明細書に記載された核酸分子、または本明細書に記載されたベクターを含む細胞、例えば、単離細胞を特色とする。ある態様では、本開示は、本明細書に記載されたポリペプチドおよびポリペプチドの使用のための指示を含むキットを特色とする。ある態様では、本開示は、本明細書に記載されたポリペプチドを含む容器を特色とする。

ある態様では、本開示は、本明細書に記載されたポリペプチドを生成する方法であって、抗体分子の生成を可能にする条件下で、本明細書に記載された細胞を培養して、それにより、ポリペプチドを生成するステップを含む方法を特色とする。ある実施形態では、方法はさらに、ポリペプチドを単離または精製するステップを含む。

ある態様では、本開示は、障害（例えば、本明細書に記載された障害）を処置する方法であって、それを必要とする被験体に、有効量の、本明細書に記載されたポリペプチドまたは本明細書に記載された組成物を投与し、それにより、障害を処置するステップを含む方法を特色とする。

ある態様では、本開示は、障害（例えば、本明細書に記載された障害）を処置する方法における使用のための、本明細書に記載されたポリペプチドを特色とする。別の態様では、本開示は、障害（例えば、本明細書に記載された障害）の処置での医薬の製造における、本明細書に記載されたポリペプチドの使用を特色とする。

ある態様では、本開示は、分子を検出する方法であって、被験体由来の細胞または試料を、本明細書に記載されたポリペプチドと接触させ、それにより分子を検出するステップを含む方法を特色とする。

本開示は、前出の態様および／または実施形態のうちの任意の１つまたは複数の全ての組み合わせのほか、詳細な説明および実施例において明示される実施形態のうちの任意の１つまたは複数との組み合わせも想定する。

本明細書の組成物および方法の、他の特徴、目的、および利点は、記載および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。

図１は、ＦｃＲｎとＩｇＧ１の間の結合を描示する。

図２は、Ｆｃ領域における様々な結合部位を描示する。

図３は、ＦｃＲｎのｐＨ特異的係合についての構造的基盤を描示する。

図４は、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用界面のマッピングを描示する。ＣＨ２およびＣＨ３ドメインが指し示され、異なるモノクロ階調により示されている。

図５は、Ｆｃ−ＦｃＲｎ係合のネットワーク表示を描示する。

図６は、ＦｃＲｎの抗ＣＨ１固定化抗体への結合、およびｐＨ特異的増強を描示する。

図７は、細胞に基づいたＦｃＲｎ結合競合アッセイの結果を描示する。

図８は、例示的な抗体分子のＦｃγＲＩおよびＦｃγＲＩＩＩａへの結合を描示する。

図９は、例示的な抗体分子の熱安定性を描示する。

図１０は、Ｔｇ３２マウスにおける例示的な抗体分子の半減期を描示する。

図１１Ａは、例示的なＦｃ操作型抗体のＫ_ｄ、ｋ_ｏｎ、およびｋ_ｏｆｆを描示する。値は、ＷＴ Ｆｃを含有するＩｇＧと比較しての倍数変化として表された。

図１１Ｂは、代表的なＦｃ操作型抗体の、ｐＨ ６．０におけるＦｃＲｎへの改善された結合、およびｐＨ ７．４におけるＦｃＲｎへの弱い結合を描示する。

図１１Ｃは、抗体ＦｃのＣＨ２ドメインのＦｃＲｎ分子との相互作用を描示する。

図１２は、Ｆｃ操作型改変体の生物物理学的特性を描示する。

図１３Ａは、ＷＴモタビズマブ（Ｍｏｔａ−ＷＴ）と比較した、３つのモタビズマブＦｃ改変体の改善されたｉｎ ｖｉｖｏ半減期を描示する。図１３Ｂは、２つのモタビズマブＦｃ改変体およびＷＴモタビズマブの薬物動態学的特性を描示する。

図１４Ａは、５ｍｇ／ｋｇの用量で投与されたＷＴモタビズマブ（Ｍｏｔａ−ＷＴ）と比較した後期モタビズマブＦｃ改変体の改善されたｉｎ ｖｉｖｏ半減期を描示する。図１４Ｂは、５ｍｇ／ｋｇの用量で投与された後期モタビズマブＦｃ改変体およびＷＴモタビズマブの薬物動態学的特性を描示する。

図１４Ｃは、２ｍｇ／ｋｇの用量で投与されたＷＴモタビズマブ（Ｍｏｔａ−ＷＴ）と比較した後期モタビズマブＦｃ改変体の改善されたｉｎ ｖｉｖｏ半減期を描示する。図１４Ｄは、２ｍｇ／ｋｇの用量で投与された後期モタビズマブＦｃ改変体およびＷＴモタビズマブの薬物動態学的特性を描示する。

図１５は、ＺＶＢ Ｚｉｋａ抗体のより長いｉｎ ｖｉｖｏ半減期を描示する。

図１６は、ＺＫＢ−ＬＳ（ＬＳ Ｆｃ変異を有するＺＶＢ抗体）およびＺＫＢ−１５６（Ｖｉｓｔｅｒｒａ １５６ Ｆｃ変異を有するＺＶＢ抗体）の類似した半減期を描示する。これらの抗体のどちらも、親ＺＶＢ抗体（ＺＫＢ）およびＷＴモタビズマブより長い半減期を有した。

図１７Ａは、例示的なＦｃ改変体のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ、およびＣ１ｑへの結合を描示する。図１７Ｂは、野生型と比較した、ＦｃＭｕｔ２１３のＦｃγＲＩＩＩＡへの結合を描示する。

図１７Ｃは、野生型と比較した、ＦｃＭｕｔ２１３のＦｃγＲＩＩＡへの結合を描示する。図１７Ｄは、野生型と比較した、ＦｃＭｕｔ２１３のＣ１ｑへの結合を描示する。

図１８は、例示的なＦｃ改変体（リツキシマブＦａｂ）のＣＤＣ活性を描示する。計算は、５０％溶解を達成する濃度に基づいており、４パラメータフィットの中間点に基づいていない。

図１９Ａ〜１９Ｂは、例示的なＦｃ改変体（リツキシマブＦａｂ）のＡＤＣＣ活性を描示する。

図２０Ａは、ＩｇＧ Ｆｃ構造およびＦｃ−ＦｃＲｎ相互作用を描示する。図２０Ｂは、２つの異なるｐＨにおけるＦｃの構造を描示する。

図２１Ａは、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用を媒介する可能性をもつ残基の型を描示する。図２１Ｂは、例示的な操作型Ｆｃ改変体の鍵となる残基の分子的相互作用を描示する。

図２２は、例示的なＯｃｔｅｔセンサーグラムを描示する。

図２３は、例示的なＦｃ改変体のＳＥＣプロファイルおよびＴｍを描示する。

図２４は、Ｆｃ改変体の、ＦｃγＲＩＩＩａ（ＡＤＣＣ活性）への、およびＣ１ｑ（ＣＤＣ活性）への結合を描示する。

図２５Ａは、Ｆｃ改変体を有するＩｇＧの薬物動態学的特徴付けを描示する。プロットは、時間をわたってのＩｇＧの濃度の変化を示す。図２５Ｂは、例示的なＦｃ改変体のＰＫ特徴付けを描示する。

図２６は、Ｆｃ改変体を有するモタビズマブＦａｂのＴＲＩＭ２１への結合を描示する。

図２７Ａは、ＦｃＲｎ−Ｆｃ複合体、プロテインＡ−Ｆｃ複合体、Ｔｒｉｍ２１−Ｆｃ複合体、およびＦｃ−Ｆｃ六量体複合体の構造を描示する。

図２７Ｂは、Ｆｃドメイン動力学を強調する、Ｆｃドメインの結晶構造の重ね合わせを描示する。

標的分子または細胞、例えば、ヒトタンパク質または細胞に、高アフィニティーおよび特異性で、結合するポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）が、本明細書に開示される。有利なことには、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）のいくつかは、循環半減期などの、１つまたは複数の改善された、または所望の薬物動態学的特性を有する。理論により束縛されることを望まないが、ポリペプチドは、ヒトにおいて様々な範囲の循環半減期を有することができ、循環半減期は、例えば、血清および細胞構成要素との相互作用、液相飲作用（ｆｌｕｉｄ ｐｈａｓｅ ｐｉｎｏｃｙｔｏｓｉｓ）の速度、ＦｃＲｎとの相互作用、受容体媒介性エンドサイトーシス、薬物用量、および抗薬物抗体の作出に影響しうると考えられる。ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）をコードする核酸分子、発現ベクター、宿主細胞、組成物（例えば、医薬組成物）、キット、容器、およびポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を作製するための方法もまた提供される。本明細書に開示された、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）および医薬組成物は、障害および状態、例えば、標的分子（例えば、タンパク質）または細胞に関連した障害および状態、例えば、本明細書に記載された障害および状態を処置し、防止し、および／または診断するために、（単独で、または他の作用物質もしくは治療モダリティーと組み合わせて）使用することができる。

理論により束縛されることを望まないが、一部の実施形態では、ＩｇＧの長い循環半減期は、新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に会合することによりそのエンドソーム分解を最小限にするその能力に起因すると考えられる。ＦｃＲｎは、母親から胎児へのＩｇＧ分子の胎盤移入、および血清ＩｇＧ恒常性において重要な役割を果たす（Ｌｅａｃｈら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９９６年 １５７巻（８号）：３３１７〜２２頁；Ｓｉｍｉｓｔｅｒら、Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、１９９６年 ２６巻（７号）：１５２７〜３１頁；Ｋｒｉｓｔｏｆｆｅｒｓｅｎ、ＡＰＭＩＳ Ｓｕｐｐｌ、１９９６年 ６４巻：５〜３６頁；Ｒｏｏｐｅｎｉａｎら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００３年 １７０巻（７号）：３５２８〜３３頁；ＪｕｎｇｈａｎｓおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ、１９９６年 ９３巻（１１号）：５５１２〜６頁）。初期エンドソームの酸性環境は、ＩｇＧおよびアルブミンのＦｃＲｎへの結合を可能にすることができ、そのことは、ＩｇＧを、分解を受けることから保護し、ＩｇＧを細胞外環境へ輸送により戻すのを助け、そこで、生理的ｐＨへの曝露により、その分子は、遊離して、循環へと戻る。この経路は、主に、ＩｇＧとアルブミンの両方の長期血清中半減期に関与しうる（ＪｕｎｇｈａｎｓおよびＡｎｄｅｒｓｏｎ、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ、１９９６年 ９３巻（１１号）：５５１２〜６頁；Ｃｈａｕｄｈｕｒｙら、Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ、２００３年 １９７巻（３号）：３１５〜２２頁）。

抗体のＦｃドメインは、主として、抗体リサイクリングを容易とするためのＦｃＲｎへの結合に関与する。一部の実施形態では、同一のＦｃ領域を有する抗体は、異なる循環半減期を有することができ、少なくとも部分的に、熱安定性、血清および細胞構成要素との相互作用、抗薬物抗体の存在、高用量、受容体媒介性エンドサイトーシス、ならびに液相飲作用などのいくつかの因子が、抗体分解を促進し、かつその半減期にマイナスに影響しうるからである。ＩｇＧのＦｃＲｎとの相互作用は、その抗体をエンドソーム分解から保護し、その抗体の半減期を延ばす役割を果たすことができる。Ｆｃの修飾は、ＦｃＲｎ相互作用を促進し、それにしたがって、抗体の半減期を延ばすために使用することができる（Ｇｈｅｔｉｅら、Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、１９９７． １５（７）：ｐ．６３７−４０；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２００６． ２８１（３３）：２３５１４−２４；Ｈｉｎｔｏｎら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２００４． ２７９（８）：６２１３−６；Ｖａｃｃａｒｏら、Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２００５． ２３（１０）：１２８３−８；Ｚａｌｅｖｓｋｙら、Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２０１０． ２８（２）：１５７−９；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００２． １６９（９）：５１７１−８０；Ｍｏｎｎｅｔら、ＭＡｂｓ、２０１４． ６（２）： ４２２−３６；Ｍｏｎｎｅｔら、Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１５． ６：３９；Ｓｈｉｅｌｄｓら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２００１． ２７６（９）：６５９１−６０４；Ｒｏｂｂｉｅら、Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ Ａｇｅｎｔｓ Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ、２０１３． ５７（１２）：６１４７−５３）。

ＩｇＧのＦｃはまた、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩ、Ｃ１ｑ、およびＴＲＩＭ２１などの様々な他の受容体に結合することができ、これらの相互作用は、抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞性食作用（ＡＤＣＰ）、および抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）などの様々なエフェクター機能を媒介する。Ｆｃ改変体を同定するために使用される伝統的な手法は、主に、ランダム変異誘発およびディスプレイフォーマットに依存しており、エフェクター機能または生物物理学的安定性であるならば、抗体のある特定の重要な性状を損なう場合が多い。

理論により束縛されることを望まないが、一部の実施形態では、本明細書に開示されているような、ＦｃＲｎ結合または半減期延長についてのＦｃの操作は、Ｆｃにより媒介される様々なエフェクター機能の関連において実施されると考えられる。例えば、構造的かつネットワークに基づいたフレームワークは、中性および酸性ｐＨにおけるＦｃのＦｃＲｎとの相互作用を調べるために使用することができる。このフレームワークを使用して、ＦｃＲｎ結合を改善する、例えば、相互作用のｋ_ｏｆｆを減少させるための異なる経路を同定することができる。変異の相互作用ネットワークは、マッピングすることができ、変異を組み合わせて、ＦｃＲｎおよび他のＦｃ受容体への結合について評価することができる。例えば、半減期の増強を与え、かつＡＤＣＣおよびＣＤＣなどのエフェクター機能を保持し、場合によっては、増強するＦｃ改変体を、同定することができる。異なる疾患の防止および処置のための治療用物質としての抗体および融合タンパク質の使用の増加に伴い、例えば、慢性疾患を処置し、または防止するための、長い半減期を有する抗体および融合タンパク質を開発する必要性が高まっている。

定義
本明細書で使用される冠詞である「１つの（ａ）」および「１つの（ａｎ）」とは、１つまたは１つを超える（例えば、少なくとも１つの）、冠詞の文法的目的語を指す。

文脈によりそうでないことが明らかに指し示されない限りにおいて、本明細書では、「または」という用語は、「および／または」という用語を意味するように使用され、互換的に使用される。

「約」および「およそ」とは一般に、測定値の性質または精度を踏まえ、測定される数量について許容可能な程度の誤差を意味するものとする。例示的な誤差の程度は、所与の値または値の範囲の、２０パーセント（％）以内、典型的に、１０％以内であり、より典型的には、５％以内である。

本明細書で開示される組成物および方法は、指定された配列、またはこれらと実質的に同一もしくは同様な配列、例えば、指定された配列と、少なくとも８５％、９０％、９５％、またはこれを超えて同一な配列を有するポリペプチドおよび核酸を包含する。

本明細書のアミノ酸配列の文脈では、「実質的に同一な」という用語は、第１のアミノ酸配列と、第２のアミノ酸配列とが、共通の構造的ドメインおよび／または共通の機能的な活性を有しうるよう、ｉ）第２のアミノ酸配列内の、アラインメントされたアミノ酸残基と同一であるか、またはｉｉ）これらのアミノ酸残基の保存的置換である、十分な数または最小数のアミノ酸残基を含有する、第１のアミノ酸を指すように使用される。例えば、参照配列、例えば、本明細書に提供される配列との少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有する共通構造ドメインを含むアミノ酸配列。

本明細書のヌクレオチド配列の文脈では、「実質的に同一な」という用語は、第１のクレオチド配列と、第２のクレオチド配列とが、共通の機能的な活性を有するポリペプチドをコードするか、または共通の構造的ポリペプチドドメインもしくは共通の機能的なポリペプチド活性をコードするよう、第２の核酸配列内の、アラインメントされたヌクレオチドと同一な、十分な数または最小数のヌクレオチドを含有する、第１の核酸配列を指すように使用される。例えば、参照配列、例えば、本明細書に提供される配列との少なくとも約８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％の同一性を有するヌクレオチド配列。

「機能的改変体」という用語は、天然に存在する配列と実質的に同一なアミノ酸配列を有するか、または実質的に同一なヌクレオチド配列によりコードされ、天然に存在する配列の、１つまたは複数の活性を有することが可能であるポリペプチドを指す。

配列の間の相同性または配列同一性（本明細書では、用語は互換的に使用される）の計算は、以下の通りに実施する。

２つのアミノ酸配列、または２つの核酸配列の同一性パーセントを決定するには、最適な比較を目的として、配列をアラインメントする（例えば、最適なアラインメントのために、第１のアミノ酸配列または核酸配列および第２のアミノ酸配列または核酸配列の一方またはその両方に、ギャップを導入することができ、非相同配列は、比較を目的とする場合、無視することができる）。典型的な実施形態では、比較を目的としてアラインメントされる基準配列の長さは、基準配列の長さの少なくとも３０％、例えば少なくとも４０％、５０％、６０％、例えば、少なくとも７０％、８０％、９０％、１００％である。次いで、対応するアミノ酸位置またはヌクレオチド位置におけるアミノ酸残基またはヌクレオチドを比較する。第１の配列内の位置が、第２の配列内の対応する位置と同じアミノ酸残基またはヌクレオチドにより占有されていれば、分子は、この位置において同一である。

２つの配列の間の同一性パーセントとは、２つの配列の最適なアラインメントのために導入する必要がある、ギャップの数および各ギャップの長さを考慮に入れるときに、配列により共有される、同一な位置の数の関数である。

２つの配列の間の配列の比較、および同一性パーセントの決定は、数学的アルゴリズムを使用して達成することができる。一部の実施形態では、２つのアミノ酸配列の間の同一性パーセントは、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２マトリクスまたはＰＡＭ２５０マトリクスのいずれか、および１６、１４、１２、１０、８、６、または４のギャップ重みづけ、および１、２、３、４、５、または６の長さ重みづけを使用する、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能である）内のＧＡＰプログラムへと組み込まれた、ＮｅｅｄｌｅｍａｎおよびＷｕｎｓｃｈ（（１９７０年）Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、４８巻：４４４〜４５３頁）によるアルゴリズムを使用して決定する。ある特定の実施形態では、２つのヌクレオチド配列の間の同一性パーセントは、ＮＷＳｇａｐｄｎａ．ＣＭＰマトリクス、および４０、５０、６０、７０、または８０のギャップ重みづけ、および１、２、３、４、５、または６の長さ重みづけを使用する、ＧＣＧソフトウェアパッケージ（ｗｗｗ．ｇｃｇ．ｃｏｍで入手可能である）内のＧＡＰプログラムを使用して決定する。１つの適切なパラメータのセット（そうでないことが指定されない限りにおいて、使用すべきパラメータのセット）は、ギャップペナルティーを１２とし、ギャップ伸長ペナルティーを４とし、フレームシフトギャップペナルティーを５とする、Ｂｌｏｓｓｕｍ ６２スコアリングマトリクスである。

２つのアミノ酸配列またはヌクレオチド配列の間の同一性パーセントは、ＰＡＭ１２０重みづけ残基表、１２のギャップ長ペナルティー、および４のギャップペナルティーを使用するＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）へと組み込まれた、Ｅ． ＭｅｙｅｒｓおよびＷ． Ｍｉｌｌｅｒ（（１９８９年）、ＣＡＢＩＯＳ、４巻：１１〜１７頁）によるアルゴリズムを使用して決定することができる。

本明細書で記載される核酸配列およびタンパク質配列を、公開データベースに照らした検索を実施する「クエリー配列」として使用して、例えば、他のファミリーメンバーまたは類縁の配列を同定することができる。このような検索は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９０年）、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、２１５巻：４０３〜１０頁による、ＮＢＬＡＳＴプログラムおよびＸＢＬＡＳＴプログラム（バージョン２．０）を使用して実施することができる。ＢＬＡＳＴヌクレオチド検索を、ＮＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝１００、ワード長＝１２で実施して、本明細書で記載される核酸と相同なヌクレオチド配列を得ることができる。ＢＬＡＳＴタンパク質検索を、ＸＢＬＡＳＴプログラム、スコア＝５０、ワード長＝３で実施して、本明細書で記載されるタンパク質分子と相同なアミノ酸配列を得ることができる。比較を目的としてギャップ付きアラインメントを得るには、Ａｌｔｓｃｈｕｌら（１９９７年）、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、２５巻：３３８９〜３４０２頁において記載されている、ｇａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴを用いることができる。ＢＬＡＳＴプログラムおよびＧａｐｐｅｄ ＢＬＡＳＴプログラムを用いる場合は、それぞれのプログラム（例えば、ＸＢＬＡＳＴおよびＮＢＬＡＳＴ）のデフォルトのパラメータを使用することができる。ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖを参照されたい。

本明細書で使用される「低度のストリンジェンシー条件、中程度のストリンジェンシー条件、高度のストリンジェンシー条件、または極めて高度のストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする」という用語は、ハイブリダイゼーションおよび洗浄のための条件について記載する。ハイブリダイゼーション反応を実施するための指針は、参照により組み込まれる、「Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ」、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ、Ｎ．Ｙ．（１９８９年）、６．３．１〜６．３．６において見出すことができる。この参考文献には、水性法および非水性法が記載されており、いずれも使用することができる。本明細書で言及される、具体的なハイブリダイゼーション条件は、以下の通り：１）６倍濃度の塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）中、約４５℃における、低度のストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件に続く、０．２倍濃度のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ中、少なくとも５０℃で２回の洗浄（低度のストリンジェンシー条件のために、洗浄温度を５５℃へと上昇させることができる）；２）６倍濃度のＳＳＣ中、約４５℃における、中程度のストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件に続く、０．２倍濃度のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ中、６０℃で１回または複数回の洗浄；３）６倍濃度のＳＳＣ中、約４５℃における、高度のストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件に続く、０．２倍濃度のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳ中、６５℃で１回または複数回の洗浄であり、４）極めて高度のストリンジェンシーのハイブリダイゼーション条件は、６５℃の、０．５Ｍのリン酸ナトリウム、７％のＳＤＳに続く、０．２倍濃度のＳＳＣ、１％のＳＤＳ中、６５℃で１回または複数回の洗浄であることが好ましい。極めて高度のストリンジェンシー条件４）が、適切な条件であり、そうでないことが指定されない限りにおいて、使用すべき条件である。

本明細書で記載される分子は、それらの機能に対して、実質的な影響を及ぼさない、さらなる保存的アミノ酸置換または非本質的アミノ酸置換を有しうることが理解される。

「アミノ酸」という用語は、天然または合成であれ、アミノ官能基および酸官能基の両方を含み、天然に存在するアミノ酸のポリマー内に含まれることが可能な、全ての分子を包含することを意図する。例示的なアミノ酸は、天然に存在するアミノ酸；それらの類似体、誘導体、および同類；改変体の側鎖を有するアミノ酸類似体；ならびに前出のうちのいずれかの、全ての立体異性体を含む。本明細書で使用された「アミノ酸」という用語は、Ｄ光学異性体またはＬ光学異性体の両方と、ペプチド模倣体（ｐｅｐｔｉｄｏｍｉｍｅｔｉｃ）とを含む。

「保存的アミノ酸置換」とは、アミノ酸残基を、類似の側鎖を有するアミノ酸残基で置きかえたアミノ酸置換である。当技術分野では、類似の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーが規定されている。これらのファミリーは、塩基性側鎖（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、ベータ−分枝型側鎖（例えば、トレオニン、バリン、イソロイシン）、および芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を伴うアミノ酸を含む。

本明細書では、「ポリペプチド」、「ペプチド」、および「タンパク質」（単鎖の場合）という用語は、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指すように、互換的に使用される。ポリマーは、直鎖状の場合もあり、分枝状の場合もあり、修飾アミノ酸を含む場合があり、非アミノ酸により中断される場合がある。用語はまた、例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、リン酸化、または標識化構成要素とのコンジュゲーションなど、他の任意の操作により修飾されたアミノ酸ポリマーも包含する。ポリペプチドは、天然の供給源から単離することもでき、組換え法により、真核宿主または原核宿主から生成することもでき、合成手順の生成物の場合もある。ある実施形態では、ポリペプチドは、抗体分子である。別の実施形態では、ポリペプチドは、融合タンパク質である。

「核酸」、「核酸配列」、「ヌクレオチド配列」、または 「ポリヌクレオチド配列」、および「ポリヌクレオチド」という用語は、互換的に使用される。これらの用語は、デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチド、またはこれらの類似体である、任意の長さのヌクレオチドのポリマー形態を指す。ポリヌクレオチドは、一本鎖の場合もあり、二本鎖の場合もあり、一本鎖は、コード鎖の場合もあり、非コード（アンチセンス）鎖の場合もある。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体など、修飾ヌクレオチドを含みうる。ヌクレオチドの配列は、ヌクレオチド以外の構成要素により中断されうる。ポリヌクレオチドは、標識化構成要素とのコンジュゲーションなどにより、重合の後でさらに修飾することもできる。核酸は、組換えポリヌクレオチドの場合もあり、ゲノム、ｃＤＮＡ、半合成または合成起源のポリヌクレオチドの場合もあり、これらは、天然には存在しないか、または非天然の配置で、別のポリヌクレオチドへと連結される。

本明細書で使用される「単離された」という用語は、その元の環境または天然環境（例えば、天然に存在する場合は、天然環境）から取り出された材料を指す。例えば、生きている動物において存在する、天然に存在するポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、単離されていないが、人為的介入により、天然系に共存する材料の一部または全部から分離された、同じポリヌクレオチドまたはポリペプチドは、単離されている。このようなポリヌクレオチドは、ベクターの一部であることが可能であり、かつ／またはこのようなポリヌクレオチドもしくはポリペプチドは、組成物の一部でありうるが、このようなベクターまたは組成物が、それが天然で見出される環境の一部ではないという点で、依然として単離されている。

本明細書で使用される、例えば、本明細書に記載される障害「を処置する」という用語は、ある実施形態では、障害、例えば、本明細書に記載される障害を有し、かつ／または障害、例えば、本明細書に記載される障害の症状を経験する被験体（例えば、ヒト）が、抗体分子を投与した場合に、抗体分子を投与しなかった場合より重症度が軽い症状を患い、かつ／またはより急速に回復することを意味する。処置は、例えば、障害の影響もしくは症状、特徴、および／または原因の、１つまたは複数の顕在化を、部分的に、または完全に、緩和する場合もあり、好転させる（ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ）場合もあり、和らげる場合もあり、阻害する場合もあり、これらの重症度を低減し、かつ／またはこれらの発生率を低減し、任意選択で、これらの発症を遅延させる場合もある。ある実施形態では、処置は、障害のある特定の徴候を呈さない被験体の処置、ならびに／または障害の早期の徴候だけを呈する被験体の処置である。ある実施形態では、処置は、障害の、１つまたは複数の確立した徴候を呈する被験体の処置である。ある実施形態では、処置は、障害を患うと診断された被験体の処置である。

本明細書で使用される、例えば、障害「を防止する」という用語は、被験体が、ポリペプチド（例えば、抗体分子）を受容すれば、被験体（例えば、ヒト）が、障害を有する可能性が低いことを意味する。

本明細書では、組成物および方法の多様な態様を、下記でさらに詳細に記載する。さらなる定義は、明細書を通して明示される。

抗体分子
抗体分子、例えば、Ｆｃ領域、例えば本明細書に記載された１個もしくは複数の変異を有するＦｃ領域を含み、および／または本明細書に記載された１つもしくは複数の構造的もしくは機能的特性を有する抗体分子が本明細書に開示される。

ある実施形態では、抗体分子は、Ｆｃ領域を含有する抗体分子（例えば、親抗体分子）から操作されるか、またはそれに由来する。例えば、操作された抗体分子または抗体分子誘導体は、親抗体分子とは異なるＦｃ領域を有しうる。別の実施形態では、抗体分子は、Ｆｃ領域を含有しない抗体分子（例えば、親抗体分子）から操作されるか、またはそれに由来する。例えば、操作された抗体分子または抗体分子誘導体は、親抗体分子またはその機能的断片に、直接的に、または間接的に融合したＦｃ領域を有しうる。

本明細書で使用される「抗体分子」という用語は、タンパク質、例えば、免疫グロブリン鎖、または少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むその断片を指す。「抗体分子」という用語は、例えば、全長の成熟抗体、および抗体の抗原結合性断片を含む。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書では、ＶＨと略記する）と、軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書では、ＶＬと略記する）とを含みうる。別の例では、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列と、２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列とを含み、これにより、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、単鎖抗体（例えば、ｓｃＦｖ）、単一可変ドメイン抗体、ダイアボディー（ｄｉａｂｏｄｙ）（Ｄａｂ）（二価および二特異性）、およびキメラ（例えば、ヒト化）抗体（これらは、全抗体または組換えＤＮＡ技術を使用してｄｅ ｎｏｖｏで合成された抗体の修飾により生成され得る）など、２つの抗原結合性部位を形成する。これらの機能的な抗体断片は、それらのそれぞれの抗原または受容体と選択的に結合する能力を保持する。抗体および抗体断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、およびＩｇＥを含むがこれらに限定されない、任意のクラスの抗体、および任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４）の抗体に由来しうる。抗体分子は、モノクローナル抗体分子の場合もあり、ポリクローナル抗体分子の場合もある。抗体分子はまた、ヒト抗体、ヒト化抗体、ＣＤＲグラフト抗体、またはｉｎ ｖｉｔｒｏで作出された抗体でもありうる。抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有しうる。抗体分子はまた、例えば、カッパ軽鎖またはラムダ軽鎖から選択される軽鎖も有しうる。本明細書では、「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語を、「抗体」という用語と互換的に使用する。

抗原結合性断片の例は、（ｉ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片である、Ｆａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片である、Ｆ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなる、Ｆｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一のアームのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなる、Ｆｖ断片；（ｖ）ＶＨドメインからなる、ダイアボディー（ｄＡｂ）断片；（ｖｉ）ラクダ科動物可変ドメインまたはラクダ化可変ドメイン；（ｖｉｉ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）（例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８年）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４２巻：４２３〜４２６頁；およびＨｕｓｔｏｎら（１９８８年）、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ、８５巻：５８７９〜５８８３頁を参照されたい）；（ｖｉｉｉ）単一ドメイン抗体を含む。これらの抗体断片は、当業者に公知である、いくつかの従来の技法を含む、任意の適する方法を使用して得ることができ、断片も、有用性について、無傷抗体と同じ形でスクリーニングすることができる。

「抗体」という用語は、無傷分子のほか、その機能的断片も含む。抗体の定常領域を変更して、例えば、変異させて、抗体の特性を修飾する（例えば、Ｆｃ受容体の結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、または補体機能のうちの１または複数を増大または減少させる）ことができる。

抗体分子は、単鎖抗体でありうる。単鎖抗体（ｓｃＦＶ）は、操作することができる（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ， Ｄ．ら（１９９９年）、Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ、８８０巻：２６３〜８０頁；およびＲｅｉｔｅｒ， Ｙ．（１９９６年）、Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ、２巻：２４５〜５２頁を参照されたい）。単鎖抗体を、二量体化または多量体化させて、同じ標的タンパク質の異なるエピトープに対する特異性を有する多価抗体を作出することができる。

本明細書で開示される抗体分子はまた、単一ドメイン抗体でもありうる。単一ドメイン抗体は、その相補性決定領域が、単一ドメインポリペプチドの部分である抗体を含みうる。例は、天然で軽鎖を欠く抗体である重鎖抗体、従来の４鎖抗体に由来する単一ドメイン抗体、操作抗体、および抗体に由来する足場以外の単一ドメイン足場を含むがこれらに限定されない。単一ドメイン抗体は、任意の当該分野による単一ドメイン抗体、または任意の将来的な単一ドメイン抗体でありうる。単一ドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚類、サメ、ヤギ、ウサギ、およびウシを含むがこれらに限定されない任意の種に由来しうる。一部の態様に従い、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠く重鎖抗体として公知である、天然に存在する単一ドメイン抗体である。このような単一ドメイン抗体については、例えば、ＷＯ９４／０４６７８において開示されている。明確さの理由で述べると、本明細書では、天然で軽鎖を欠く重鎖抗体に由来する、この可変ドメインは、従来の４鎖免疫グロブリンのＶＨから識別される、ＶＨＨまたはナノボディーとして公知である。このようなＶＨＨ分子は、Ｃａｍｅｌｉｄａｅ種、例えば、ラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカ、およびグアナコにおいて惹起される抗体に由来しうる。Ｃａｍｅｌｉｄａｅ以外の他の種も、天然で軽鎖を欠く重鎖抗体を産生することが可能であり、このようなＶＨＨもまた想定される。

ＶＨ領域およびＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲまたはＦＷ）と称する、より保存的な領域を分散させた、「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と称する超可変性領域へと細分することができる。本明細書で使用される「相補性決定領域」および「ＣＤＲ」という用語は、抗体可変領域内のアミノ酸配列であって、抗原特異性および結合アフィニティーを付与するアミノ酸配列を指す。本明細書で使用される「フレームワーク」、「ＦＷ」、および「ＦＲ」という用語は、互換的に使用される。

フレームワーク領域およびＣＤＲの範囲については、多数の方法により正確に規定されている（Ｋａｂａｔ， Ｅ． Ａ．ら（１９９１年）、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」、５版、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、ＮＩＨ刊行物第９１−３２４２号；Ｃｈｏｔｈｉａ， Ｃ．ら（１９８７年）、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、１９６巻：９０１〜９１７頁；およびＯｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ’ｓ ＡｂＭ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｓｏｆｔｗａｒｅにより使用されるＡｂＭによる定義を参照されたい）。一般に、例えば、「Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ」、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｌａｂ Ｍａｎｕａｌ」（Ｄｕｅｂｅｌ， Ｓ．およびＫｏｎｔｅｒｍａｎｎ， Ｒ．編、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇを参照されたい。ある実施形態では、以下の定義：重鎖可変ドメインのＣＤＲ１についてのＡｂＭによる定義と、他のＣＤＲについてのＫａｂａｔによる定義とを使用する。ある実施形態では、全てのＣＤＲについて、Ｋａｂａｔによる定義を使用する。加えて、ＫａｂａｔによるＣＤＲまたはＡｂＭによるＣＤＲに関して記載される実施形態はまた、Ｃｈｏｔｈｉａによる超可変ループを使用して実行することもできる。各ＶＨおよび各ＶＬは、典型的に、アミノ末端から、カルボキシ末端へと、以下の順序：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、およびＦＲ４で配置された、３つのＣＤＲと、４つのＦＲとを含む。

本明細書で使用される「免疫グロブリン可変ドメイン配列」とは、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成しうるアミノ酸配列を指す。例えば、配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全部または一部を含みうる。例えば、配列は、１つ、２つ、またはこれを超えるＮ末端アミノ酸またはＣ末端アミノ酸を含む場合もあり、これらを含まない場合もあり、タンパク質構造の形成と適合性である、他の変更を含む場合もある。

「抗原結合性領域」という用語は、抗原またはそのエピトープに結合する界面を形成する決定基を含む抗体分子の部分を指す。タンパク質（またはタンパク質模倣体）に関して、抗原結合性領域は、典型的に、抗原に結合する界面を形成する、１つまたは複数のループ（少なくとも、例えば、４つのアミノ酸またはアミノ酸模倣体による）を含む。典型的に、抗体分子の抗原結合性領域は、少なくとも１つもしくは２つのＣＤＲおよび／または超可変性ループ、またはより典型的に少なくとも３つ、４つ、５つ、もしくは６つのＣＤＲおよび／または超可変性ループを含む。

本明細書では、「競合する」または「交差競合する」という用語は、別の抗体分子の、標的への結合に干渉する抗体分子の能力を指すように、互換的に使用される。結合への干渉は、直接的な場合もあり、間接的な場合（例えば、抗体分子または標的のアロステリックモジュレーションを介する）もある。抗体分子が、別の抗体分子の、標的への結合に干渉することが可能な程度と、したがって、抗体分子が、競合すると言いうるのかどうかとは、競合結合アッセイ、例えば、ＦＡＣＳアッセイ、ＥＬＩＳＡ、またはＢＩＡＣＯＲＥアッセイを使用して決定することができる。ある実施形態では、競合結合アッセイは、定量的競合アッセイである。ある実施形態では、第１の抗体分子の標的への結合が、競合結合アッセイ（例えば、本明細書に記載の競合アッセイ）において１０％またはそれより多く、例えば、２０％またはそれより多く、３０％またはそれより多く、４０％またはそれより多く、５０％またはそれより多く、５５％またはそれより多く、６０％またはそれより多く、６５％またはそれより多く、７０％またはそれより多く、７５％またはそれより多く、８０％またはそれより多く、８５％またはそれより多く、９０％またはそれより多く、９５％またはそれより多く、９８％またはそれより多く、９９％またはそれより多くだけ低減される場合に、第１の抗体分子は、第２の抗体分子と標的に対する結合について競合するという。

本明細書で使用される「モノクローナル抗体」または「モノクローナル抗体組成物」という用語は、単一の分子組成による抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性およびアフィニティーを提示する。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術により作製することもでき、ハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え法）により作製することもできる。

「事実上のヒト」タンパク質とは、中和抗体応答、例えば、ヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を惹起しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、多数の状況において、例えば、例えば、慢性疾患状態または再発性疾患状態の処置において、抗体分子を反復的に投与する場合に問題となりうる。ＨＡＭＡ応答は、血清からの抗体のクリアランスの増大のために（例えば、Ｓａｌｅｈら、Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ． Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．、３２巻：１８０〜１９０頁（１９９０年）を参照されたい）、また、潜在的なアレルギー性反応のためにも（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏら、Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ、５巻：５１１７〜５１２３頁（１９８６年）を参照されたい）、反復抗体投与を、潜在的に無効としうる。

抗体分子は、ポリクローナル抗体の場合もあり、モノクローナル抗体の場合もある。一部の実施形態では、抗体を、組換えにより生成する、例えば、任意の適切なファージディスプレイ法またはコンビナトリアル法により生成することができる。

抗体を作製するための種々のファージディスプレイ法およびコンビナトリアル法が当該技術分野において公知である（例えば、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号；Ｋａｎｇら、国際公開ＷＯ ９２／１８６１９；Ｄｏｗｅｒら、国際公開ＷＯ ９１／１７２７１； Ｗｉｎｔｅｒら、国際公開ＷＯ ９２／２０７９１； Ｍａｒｋｌａｎｄら、国際公開ＷＯ ９２／１５６７９；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇら、国際公開ＷＯ ９３／０１２８８；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、国際公開９２／０１０４７；Ｇａｒｒａｒｄら、国際公開ＷＯ ９２／０９６９０；Ｌａｄｎｅｒら、国際公開ＷＯ ９０／０２８０９；Ｆｕｃｈｓら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０−１３７２；Ｈａｙら、（１９９２） Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１−８５；Ｈｕｓｅら、（１９８９） Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５−１２８１；Ｇｒｉｆｆｔｈｓら、（１９９３） ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５−７３４；Ｈａｗｋｉｎｓら、（１９９２） Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９−８９６；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、 （１９９１） Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４−６２８； Ｇｒａｍら、（１９９２） ＰＮＡＳ ８９：３５７６−３５８０；Ｇａｒｒａｄら、（１９９１） Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３−１３７７；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、（１９９１） Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３−４１３７；およびＢａｒｂａｓら、（１９９１） ＰＮＡＳ ８８：７９７８−７９８２に記載されている通りであり、これらの全ての内容は本明細書に参考として援用される）。

ある実施形態では、抗体分子は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列に由来する抗体を産生するように遺伝子操作されたマウスにおいて作られる抗体）、または非ヒト抗体、例えば、齧歯類（マウスまたはラット）抗体、ヤギ抗体、霊長類（例えば、サル）抗体、ラクダ抗体である。ある実施形態では、非ヒト抗体は、齧歯類抗体（マウス抗体またはラット抗体）である。当技術分野では、齧歯類抗体を生成する方法が公知である。

ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなく、ヒト免疫グロブリン遺伝子を保有するトランスジェニックマウスを使用して作出することができる。目的の抗原で免疫化された、これらのトランスジェニックマウスに由来する脾臓細胞を使用して、ヒトタンパク質に由来するエピトープに対して特異的なアフィニティーを伴う、ヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマを生成することができる（例えば、Ｗｏｏｄら、国際公開ＷＯ ９１／００９０６，Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉら、国際公開ＷＯ ９１／１０７４１； Ｌｏｎｂｅｒｇら、国際公開ＷＯ ９２／０３９１８；Ｋａｙら、国際公開９２／０３９１７；Ｌｏｎｂｅｒｇら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６−８５９；Ｇｒｅｅｎ， Ｌ．Ｌ．ら、１９９４ Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ． ７：１３−２１；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ．Ｌ．ら、１９９４ Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８１：６８５１−６８５５；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９３ Ｙｅａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７：３３−４０；Ｔｕａｉｌｌｏｎら、１９９３ ＰＮＡＳ ９０：３７２０−３７２４；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎら、１９９１ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２１：１３２３−１３２６を参照）。

抗体は、可変領域またはその部分、例えば、ＣＤＲを、非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて作出した抗体でありうる。キメラ抗体、ＣＤＲグラフト抗体、およびヒト化抗体は、本発明の範囲内にある。非ヒト生物、例えば、ラットまたはマウスにおいて作出し、次いで、ヒトにおける抗原性を減少させるように、例えば、可変領域のフレームワーク内または定常領域内で修飾した抗体も、本発明の範囲内にある。

キメラ抗体は任意の好適な組換えＤＮＡ技術によって作製することができる。いくつかが、当技術分野で公知である（Ｒｏｂｉｎｓｏｎら、国際公開ＰＣＴ／ＵＳ８６／０２２６９；Ａｋｉｒａら、欧州特許出願１８４，１８７； Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ， Ｍ．、欧州特許出願１７１，４９６；Ｍｏｒｒｉｓｏｎら、欧州特許出願１７３，４９４；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら、国際公開ＷＯ ８６／０１５３３；Ｃａｂｉｌｌｙら、米国特許第４，８１６，５６７号；Ｃａｂｉｌｌｙら、欧州特許出願１２５，０２３；Ｂｅｔｔｅｒら、（１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１−１０４３）；Ｌｉｕら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：３４３９−３４４３；Ｌｉｕら、１９８７， Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ． １３９：３５２１−３５２６；Ｓｕｎら、（１９８７） ＰＮＡＳ ８４：２１４−２１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａら、１９８７， Ｃａｎｃ． Ｒｅｓ． ４７：９９９−１００５；Ｗｏｏｄら、（１９８５） Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６−４４９；およびＳｈａｗら、１９８８， Ｊ． Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ． ８０：１５５３−１５５９を参照）。

ヒト化抗体またはＣＤＲグラフト抗体は、少なくとも１つまたは２つであるが、一般に３つ全てのレシピエントＣＤＲ（免疫グロブリンの重鎖およびまたは軽鎖の）を、ドナーＣＤＲで置きかえる。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも１つの部分で置きかえる場合もあり、ＣＤＲの一部だけを、非ヒトＣＤＲで置きかえる場合もある。リポ多糖へのヒト化抗体の結合に要求される数のＣＤＲを置きかえることだけが必要である。ある実施形態では、ドナーは、齧歯類抗体、例えば、ラット抗体またはマウス抗体であり、レシピエントは、ヒトフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークであろう。典型的に、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンを、「ドナー」と呼び、フレームワークを提供する免疫グロブリンを、「アクセプター」と呼ぶ。一部の実施形態では、ドナー免疫グロブリンは、非ヒト（例えば、齧歯類）免疫グロブリンである。アクセプターフレームワークは、典型的に、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワークもしくはコンセンサスフレームワーク、またはこれと、約８５％もしくはこれを超えて、例えば、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な配列である。

本明細書で使用される「コンセンサス配列」という用語は、類縁配列のファミリー内で、最も高頻度で生じるアミノ酸（またはヌクレオチド）から形成される配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ、「Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅｓ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ」（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ、Ｗｅｉｎｈｅｉｍ、Ｇｅｒｍａｎｙ、１９８７年を参照されたい）。タンパク質のファミリー内では、コンセンサス配列内の各位置は、ファミリー内のこの位置において最も高頻度で生じるアミノ酸で占有される。２つのアミノ酸が、同等に高頻度で生じる場合、いずれも、コンセンサス配列内に含まれうる。「コンセンサスフレームワーク」とは、コンセンサス免疫グロブリン配列内のフレームワーク領域を指す。

抗体は任意の好適な方法によってヒト化することができ、いくつかのそのような方法が、当技術分野で公知である（例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ， Ｓ． Ｌ．， １９８５， Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２−１２０７， Ｏｉら、１９８６， ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４およびＱｕｅｅｎら、米国特許第５，５８５，０８９号、米国特許第５，６９３，７６１号および米国特許第５，６９３，７６２号を参照、これらの全ての内容は本明細書に参考として援用される）。

ヒト化抗体またはＣＤＲグラフト抗体は、免疫グロブリン鎖のうちの、１つ、２つ、または全てのＣＤＲを、置きかえうる、ＣＤＲグラフティングまたはＣＤＲ置換により生成することができる。例えば、それらの全ての内容が、参照により本明細書に明示的に組み込まれる、米国特許第５，２２５，５３９号；Ｊｏｎｅｓら、１９８６年、Ｎａｔｕｒｅ、３２１巻：５５２〜５２５頁；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎら、１９８８年、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２３９巻：１５３４頁；Ｂｅｉｄｌｅｒら、１９８８年、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４１巻：４０５３〜４０６０頁；Ｗｉｎｔｅｒ、ＵＳ５，２２５，５３９を参照されたい。Ｗｉｎｔｅｒは、ヒト化抗体を調製するのに使用しうる、ＣＤＲグラフティング法について記載している（その内容が、参照により本明細書に明示的に組み込まれる、Ｗｉｎｔｅｒ、ＵＳ５，２２５，５３９である、１９８７年３月２６日に出願された、英国特許出願第ＧＢ２１８８６３８Ａ号）。

また、特異的なアミノ酸を、置換するか、欠失させるか、または付加したヒト化抗体も提示される。ドナーに由来するアミノ酸を選択するための基準については、例えば、その内容が、参照により本明細書に明示的に組み込まれる、ＵＳ５，５８５，０８９、例えば、ＵＳ５，５８５，０８９の１２〜１６段において記載されている。抗体をヒト化する他の技法については、１９９２年１２月２３日に公表された、Ｐａｄｌａｎら、ＥＰ５１９５９６Ａ１において記載されている。

ある実施形態では、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２（例えば、ＩｇＧ２ａ）、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、およびＩｇＥの重鎖定常領域から選択される；特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、抗体分子は、例えば、カッパまたはラムダの（例えば、ヒト）軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域を変更して、例えば、変異させて、抗体分子の特性を修飾する（例えば、Ｆｃ受容体の結合、抗体のグリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞の機能、および／または補体機能のうちの１または複数を増大または減少させる）ことができる。ある実施形態では、抗体分子は、エフェクター機能を有し、補体に結合しうる。別の実施形態では、抗体分子は、エフェクター細胞を動員したり、補体に結合したりしない。ある特定の実施形態では、抗体分子は、Ｆｃ受容体に結合する能力が低減されているか、またはこの能力を有さない。例えば、抗体分子は、Ｆｃ受容体への結合を支援しない、アイソタイプもしくは亜型、断片、または他の改変体でありうる、例えば、抗体分子は、Ｆｃ受容体結合性領域を、変異または欠失させている。

ある実施形態では、抗体分子の定常領域を変更する。当技術分野では、抗体定常領域を変更するための方法が公知である。機能を変更した、例えば、細胞上のＦｃＲ、または補体のＣ１成分など、エフェクターリガンドに対するアフィニティーを変更した抗体分子は、抗体の定常部分内の、少なくとも１つのアミノ酸残基を、異なる残基で置きかえることにより生成することができる（例えば、それらの全ての内容が、参照により本明細書に組み込まれる、ＥＰ３８８，１５１Ａ１、米国特許第５，６２４，８２１号および米国特許第５，６４８，２６０号を参照されたい）。また、Ｓ２２８Ｐ（ＥＵ命名法；Ｋａｂａｔ命名法では、Ｓ２４１Ｐ）など、ヒトＩｇＧ４内の抗体構造を安定化させるアミノ酸変異も想定される。マウスまたは他の種の免疫グロブリンへと適用されれば、これらの機能を低減するか、または消失させる、同様の種類の変更も記載されうるであろう。

ある実施形態では、抗体分子内のアミノ酸だけが、正準のアミノ酸である。ある実施形態では、抗体分子は、天然に存在するアミノ酸；それらの類似体、誘導体、および同類；改変体の側鎖を有するアミノ酸類似体；および／または前出のうちのいずれかの、全ての立体異性体を含む。抗体分子は、アミノ酸のＤ光学異性体またはＬ光学異性体と、ペプチド模倣体とを含みうる。

本明細書で記載される抗体分子のポリペプチドは、直鎖状の場合もあり、分枝状の場合もあり、修飾アミノ酸を含む場合があり、非アミノ酸により中断される場合がある。抗体分子はまた、例えば、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化、脂質付加、アセチル化、リン酸化、または標識化構成要素とのコンジュゲーションなど、他の任意の操作により修飾することもできる。ポリペプチドは、天然の供給源から単離することもでき、組換え法により、真核宿主または原核宿主から生成することもでき、合成手順の生成物の場合もある。

本明細書で記載される抗体分子は、非コンジュゲート形態において単独で使用することもでき、物質、例えば、毒素もしくは部分（例えば、治療薬；放射線を放出する化合物；植物起源、真菌起源、もしくは細菌起源の分子；または生物学的タンパク質（例えば、タンパク質毒素）もしくは生物学的粒子（例えば、例えば、ウイルスコートタンパク質を介する、組換えウイルス粒子）に結合させることもできる。例えば、抗体分子は、α放射体、β放射体、もしくはγ放射体、またはβおよびγの放射体などの放射性同位元素とカップリングさせることができる。

抗体分子は、誘導体化することもでき、別の機能的分子（例えば、別のペプチドまたはタンパク質）へと連結することもできる。本明細書で使用される「誘導体化」抗体分子とは、修飾抗体分子である。誘導体化法は、蛍光部分、放射性ヌクレオチド、毒素、酵素、またはビオチンなどのアフィニティーリガンドの付加を含むがこれらに限定されない。したがって、抗体分子は、免疫接着分子を含む、本明細書で記載される抗体の誘導体化形態、および他の形の修飾形態を含むことを意図する。例えば、抗体分子は、別の抗体（例えば、二特異性抗体またはダイアボディー）、検出可能な作用物質、毒素、医薬、および／または抗体もしくは抗体部分の、別の分子（ストレプトアビジンのコア領域またはポリヒスチジンタグなど）との会合を媒介しうるタンパク質もしくはペプチドなど、１つまたは複数の他の分子実体へと機能的に連結する（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有結合的会合により、または他の形で）ことができる。

一部の種類の誘導体化抗体分子は、２つまたはこれを超える抗体（同じ種類、または、例えば、二特異性抗体を創出するように、異なる種類）を架橋することにより生成される。適切な架橋剤は、ヘテロ二官能性の架橋剤であって、適切なスペーサーで隔てられた、２つの顕著に異なる反応性基を有する架橋剤（例えば、ｍ−マレイミドベンゾイル−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル）、またはホモ二官能性の架橋剤（例えば、スベリン酸ジスクシンイミジル）を含む。このようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｏｃｋｆｏｒｄ、Ｉｌｌから市販されている。

抗デング抗体分子を誘導体化させうる（または標識化しうる）、有用な検出可能な作用物質は、蛍光化合物、多様な酵素、補欠分子族、発光材料、生物発光材料、蛍光放出性金属原子、例えば、ユーロピウム（Ｅｕ）、および他のランタニド、ならびに放射性材料（下記で記載する）を含む。例示的な蛍光性の検出可能な作用物質は、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、５−ジメチルアミン−１−ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリトリンなどを含む。抗体はまた、アルカリホスファターゼ、西洋ワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコースオキシダーゼなどの検出可能な酵素によっても誘導体化させることができる。抗体を、検出可能な酵素で誘導体化させる場合、検出可能な酵素は、酵素が、検出可能な反応生成物を生成させるのに使用する、さらなる試薬を添加することにより検出することができる。例えば、検出可能な作用物質である、西洋ワサビペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素およびジアミノベンジジンの添加は、検出可能である、有色の反応生成物をもたらす。抗体分子はまた、補欠分子族（例えば、ストレプトアビジン／ビオチンおよびアビジン／ビオチン）によっても誘導体化させることができる。例えば、抗体を、ビオチンで誘導体化させ、アビジンまたはストレプトアビジンの結合の間接的測定を介して検出することができる。適切な蛍光材料の例は、ウンベリフェロン、フルオレセイン、イソチオシアン酸フルオレセイン、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリド、またはフィコエリトリンを含み；発光材料の例は、ルミノールを含み、生物発光材料の例は、ルシフェラーゼ、ルシフェリン、およびエクオリンを含む。

標識化抗体分子は、（ｉ）所定の抗原を、アフィニティークロマトグラフィーまたは免疫沈降などの標準法により単離すること；（ｉｉ）タンパク質の存在度および発現パターンについて評価するために、所定の抗原を検出する（例えば、細胞溶解物中または細胞上清中で）こと；（ｉｉｉ）組織内のタンパク質レベルを、例えば、所与の処置レジメンの有効性を決定する臨床試験手順の一部としてモニタリングすることを含む、多数の文脈で、例えば、診断に使用することもでき、かつ／または実験に使用することもできる。

抗体分子は、別の分子実体、典型的に、標識剤もしくは標識部分または治療剤もしくは治療部分（例えば、抗微生物剤もしくは抗微生物部分（例えば、抗菌剤もしくは抗菌部分、または殺菌剤もしくは殺菌部分）、免疫調節剤もしくは免疫調節部分、免疫刺激剤もしくは免疫刺激剤部分、細胞傷害剤もしくは細胞傷害部分、または細胞増殖抑制剤もしくは細胞増殖抑制部分）とコンジュゲートさせることができる。放射性同位元素は、診断的適用において使用することもでき、治療的適用において使用することもできる。抗体分子とカップリングさせうる放射性同位元素は、α放射体、β放射体、もしくはγ放射体、またはβおよびγの放射体を含むがこれらに限定されない。このような放射性同位元素は、ヨウ素（^１３１Ｉまたは^１２５Ｉ）、イットリウム（^９０Ｙ）、ルテチウム（^１７７Ｌｕ）、アクチニウム（^２２５Ａｃ）、プラセオジム、アスタチン（^２１１Ａｔ）、レニウム（^１８６Ｒｅ）、ビスマス（^２１２Ｂｉまたは^２１３Ｂｉ）、インジウム（^１１１Ｉｎ）、テクネチウム（^９９ｍＴｃ）、リン（^３２Ｐ）、ロジウム（^１８８Ｒｈ）、硫黄（^３５Ｓ）、炭素（^１４Ｃ）、トリチウム（^３Ｈ）、クロム（^５１Ｃｒ）、塩素（^３６Ｃｌ）、コバルト（^５７Ｃｏまたは^５８Ｃｏ）、鉄（^５９Ｆｅ）、セレン（^７５Ｓｅ）、またはガリウム（^６７Ｇａ）を含むがこれらに限定されない。治療剤として有用な放射性同位元素は、イットリウム（^９０Ｙ）、ルテチウム（^１７７Ｌｕ）、アクチニウム（^２２５Ａｃ）、プラセオジム、アスタチン（^２１１Ａｔ）、レニウム（^１８６Ｒｅ）、ビスマス（^２１２Ｂｉまたは^２１３Ｂｉ）、およびロジウム（^１８８Ｒｈ）を含む。例えば、診断法における使用のための標識として有用な放射性同位元素は、ヨウ素（^１３１Ｉまたは^１２５Ｉ）、インジウム（^１１１Ｉｎ）、テクネチウム（^９９ｍＴｃ）、リン（^３２Ｐ）、炭素（^１４Ｃ）、およびトリチウム（^３Ｈ）、または上記で列挙した治療用同位元素のうちの１または複数を含む。

本開示は、放射性標識化抗体分子と、抗体分子を標識化する方法とを提示する。ある実施形態では、抗体分子を標識化する方法が開示される。方法は、抗体分子を、キレート剤と接触させて、これにより、コンジュゲート抗体を生成するステップを含む。コンジュゲート抗体を、放射性同位元素、例えば、^１１１インジウム、^９０イットリウム、および^１７７ルテチウムで放射性標識化して、これにより、標識化抗体分子を生成する。

一部の態様では、本開示は、本明細書で開示される抗体分子を作製する方法を提示する。方法は、抗原またはその断片を提供するステップと；抗原に特異的に結合する抗体分子を得るステップと；抗原および／または抗原を発現する生物の活性をモジュレートすることにおける、抗体分子の有効性を評価するステップとを含む。方法は、その誘導体（例えば、ヒト化抗体分子）を含む抗体分子を、被験体、例えば、ヒトへと投与するステップをさらに含みうる。

本開示は、上記の抗体分子をコードする単離核酸分子、ベクター、およびこれらの宿主細胞を提示する。核酸分子は、ＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、およびｃＤＮＡを含むがこれらに限定されない。

融合タンパク質
融合タンパク質、例えば、Ｆｃ領域、例えば、本明細書に記載された１個もしくは複数の変異を有するＦｃ領域を含み、および／または本明細書に記載された１つもしくは複数の構造的もしくは機能的特性を有する融合タンパク質が本明細書に開示される。

ある実施形態では、融合タンパク質は、Ｆｃ領域を含有するポリペプチド（例えば、融合タンパク質）（例えば、親ポリペプチド）から操作されるか、またはそれに由来する。例えば、操作されたポリペプチドまたは誘導体は、親ポリペプチドとは異なるＦｃ領域を有しうる。別の実施形態では、融合タンパク質は、Ｆｃ領域を含有しないポリペプチド（例えば、親ポリペプチド）から操作されるか、またはそれに由来する。例えば、操作された抗体分子または抗体分子誘導体は、親ポリペプチドに、直接的に、または間接的に融合したＦｃ領域を有しうる。

本明細書で使用される「融合タンパク質」という用語は、２つまたはそれより多いタンパク質またはペプチド構成要素を含む、タンパク質を指す。２つまたはそれより多いタンパク質またはペプチド構成要素は、異なる供給源から得られ、または異なる遺伝子によりコードされうる。融合タンパク質は、時々、キメラタンパク質とも呼ばれる。Ｆｃ融合タンパク質（Ｆｃキメラ融合タンパク質、Ｆｃ−Ｉｇ、Ｉｇに基づいたキメラ融合タンパク質、またはＦｃタグタンパク質としても公知である）は、タンパク質またはペプチドに連結した（例えば、融合した）、免疫グロブリンのＦｃ領域（例えば、本明細書に記載されたＦｃ領域）を含みうる。Ｆｃ領域は、タンパク質またはペプチドに、直接的に、または間接的に、例えば、リンカーを通して、連結する（例えば、遺伝的に融合する）ことができる。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ、例えば、ヒトＩｇＧ、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域に由来する。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＩｇＧ１、例えば、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に由来する。

Ｆｃ融合結合パートナーには、様々なタンパク質もしくはペプチド、またはその断片が含まれうる。例えば、Ｆｃ領域は、ペプチド（例えば、治療用ペプチド）、リガンド（例えば、細胞表面受容体との結合により、活性化するリガンド）、シグナル伝達分子、受容体の細胞外ドメイン、またはベイトタンパク質（例えば、結合パートナーを、例えば、タンパク質マイクロアレイにおいて、同定するために使用される）に融合することができる。

ある実施形態では、Ｆｃ融合タンパク質は、受容体もしくは可溶性受容体の細胞外ドメイン、またはそのリガンド結合部分を含む。ある実施形態では、受容体は、増殖因子受容体である。ある実施形態では、受容体は、サイトカイン受容体である。ある実施形態では、受容体は、免疫チェックポイント分子である。

ある実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合した、ヒトＶＥＧＦ受容体１および２の細胞外ドメイン由来の血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）結合部分を含む。ある実施形態では、融合タンパク質はアフリベルセプトである。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、アフリベルセプト）は、本明細書に記載された障害、例えば、目の障害（例えば、滲出型黄斑変性症）またはがん（例えば、結腸直腸がん）を処置するために使用される。

別の実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合した、可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体２を含む。ある実施形態では、融合タンパク質は、エタネルセプトである。ある実施形態では、Ｆｃ融合タンパク質（例えば、エタネルセプト）は、本明細書に記載された障害、例えば、自己免疫障害（例えば、関節リウマチ）を処置するために使用される。

さらに別の実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合した、ヒトインターロイキン−１受容体１（ＩＬ−１Ｒ１）およびＩＬ−１受容体アクセサリータンパク質（ＩＬ−１ＲＡｃＰ）の細胞外部分のリガンド結合ドメインを含む。ある実施形態では、融合タンパク質は、リロナセプトである。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、リロナセプト）は、本明細書に記載された障害、例えば、クリオピリン関連周期性症候群（ＣＡＰＳ）、例えば、家族性寒冷自己炎症性症候群、マックル・ウェルズ症候群、または新生児期発症多臓器性炎症性疾患を処置するために使用される。

なお別の実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合した、ＣＴＬＡ−４の細胞外ドメインを含む。ある実施形態では、融合タンパク質は、アバタセプトまたはベラタセプトである。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、アバタセプトまたはベラタセプト）は、本明細書に記載された障害、例えば、臓器拒絶反応、自己免疫障害（例えば、関節リウマチ）、またはがんを処置するために使用される。

ある実施形態では、Ｆｃ融合タンパク質は、ペプチド、例えば、治療用ペプチドを含む。

ある実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合したトロンボポエチン結合ペプチドを含む。ある実施形態では、融合タンパク質は、ロミプロスチムである。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、ロミプロスチム）は、本明細書に記載された障害、例えば、慢性特発性（免疫性）血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）を処置するために使用される。

ある実施形態では、融合タンパク質は、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域に融合した、ヒト白血球機能抗原−３（ＬＦＡ−３）の細胞外ＣＤ２結合部分を含む。ある実施形態では、融合タンパク質は、アレファセプトである。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、アレファセプト）は、本明細書に記載された障害、例えば、自己免疫障害（例えば、乾癬）またはがん（例えば、皮膚Ｔ細胞リンパ腫またはＴ細胞非ホジキンリンパ腫）を処置するために使用される。

ある実施形態では、融合タンパク質は凝固因子を含む。

ある実施形態では、融合タンパク質は、ＩｇＧ１のＦｃ領域と融合した第ＩＸ因子を含む。別の実施形態では、融合タンパク質は、ＩｇＧ１のＦｃ領域と融合した第ＶＩＩＩ因子を含む。ある実施形態では、融合タンパク質（例えば、ＦＩＸ−Ｆｃ融合体またはＦＶＩＩＩ−Ｆｃ融合体）は、本明細書に記載された障害、例えば、血友病Ａまたは血友病Ｂを処置するために使用される。

ある実施形態では、融合タンパク質は、１個または複数のグリコシル化部位を含み、またはグリコシル化されている。別の実施形態では、融合タンパク質は、グリコシル化部位を有さず、またはグリコシル化されていない。

ある実施形態では、融合タンパク質におけるアミノ酸だけが、正準のアミノ酸である。ある実施形態では、融合タンパク質は、天然に存在するアミノ酸；それらの類似体、誘導体、および同類；改変体の側鎖を有するアミノ酸類似体；および／または前出のうちのいずれかの全ての立体異性体を含む。融合タンパク質は、アミノ酸のＤ光学異性体またはＬ光学異性体と、ペプチド模倣体とを含みうる。

ある態様では、この開示は、本明細書に開示された融合タンパク質を作製する方法を提供する。本明細書に記載された融合タンパク質は、任意の適切な組換えＤＮＡ技法により生成されうる。ある実施形態では、方法は、融合タンパク質をコードする核酸を含有する細胞を、融合タンパク質の生成を可能にする条件下で培養するステップを含む。別の実施形態では、方法は、融合タンパク質を単離または精製するステップをさらに含む。さらに別の実施形態では、方法は、細胞に基づいたアッセイ、または動物モデルにおいて、融合タンパク質の有効性を評価するステップをさらに含む。なお別の実施形態では、方法は、被験体、例えば、ヒトに、融合タンパク質を投与するステップをさらに含む。

この開示は、上記の融合タンパク質をコードする単離核酸分子、そのベクターおよび宿主細胞を提供する。その核酸分子には、ＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ、およびｃＤＮＡが含まれるが、それらに限定されない。

Ｆｃ領域
断片結晶性領域、すなわち、Ｆｃ領域は、Ｆｃ受容体と相互作用する能力がある免疫グロブリンの領域を指す。ある実施形態では、Ｆｃ領域はまた、補体系のタンパク質と相互作用する能力もある。理論により束縛されることを望まないが、ある実施形態では、Ｆｃ領域とＦｃ受容体との相互作用は、免疫系の活性化を可能にすると考えられる。

ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＤ抗体アイソタイプにおいて、天然に存在するＦｃ領域は、一般的に、抗体の２つの重鎖の第２および第３の定常ドメインに由来した、２つの同一のタンパク質断片を含む。天然に存在するＩｇＭおよびＩｇＥ Ｆｃ領域は一般的に、各ポリペプチド鎖における３つの重鎖定常ドメイン（Ｃ_Ｈドメイン２〜４）を含む。ＩｇＧのＦｃ領域は、高度に保存されたＮ−グリコシル化部位を含有しうる（Ｓｔａｄｌｍａｎｎら、（２００８年） Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ８巻（１４号）：２８５８〜２８７１頁；Ｓｔａｄｌｍａｎｎ （２００９年） Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ ９巻（１７号）：４１４３〜４１５３頁）。理論により束縛されることを望まないが、ある実施形態では、Ｆｃ断片のグリコシル化は、Ｆｃ受容体媒介性活性に寄与すると考えられる（Ｐｅｉｐｐら（２００８年） Ｂｌｏｏｄ １１２巻（６号）：２３９０〜２３９９頁）。ある実施形態では、この部位に付着したＮ−グリカンは、主として、その複合型のコアフコシル化２アンテナ構造（ｄｉａｎｔｅｎｎａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）である。別の実施形態では、少量のこれらのＮ−グリカンはまた、二分性ＧｌｃＮＡｃおよび／またはα−２，６連結型シアル酸残基を含有する。

例示的なＦｃ領域アミノ酸配列は下記に示されている。

配列番号１において、この配列における最初のアミノ酸残基は、本明細書では１１８位と呼ばれる。太字かつ下線で示された３個のヒスチジンは、それぞれ、３１０位、４３３位、および４３５位である。

本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、表１に記載される１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５個、またはそれより多く）の変異、あるいは変異の組合せを有し得る。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ００９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０２９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０３９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０５０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０５１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０５２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０５３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０６７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０６８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０６９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０７９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０８９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０９９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１００を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１０９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１１９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１２９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１３９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１４９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１５９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１６９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１７９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１９９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２００を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、Ｆｃ

Ｍｕｔ２０５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２０９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２１９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２５を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２６を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２７を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２８を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２２９を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２３０を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２３１を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２３２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２３３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２３４を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２４２を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２４３を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ２４４を含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４５、ＦｃＭｕｔ１７１、ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１８６、ＦｃＭｕｔ１９０、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２１６、ＦｃＭｕｔ２１９、ＦｃＭｕｔ２２２、ＦｃＭｕｔ２２３、ＦｃＭｕｔ２２４、ＦｃＭｕｔ２２６、ＦｃＭｕｔ２２７、ＦｃＭｕｔ２２８、またはＦｃＭｕｔ２２９から選択される変異または変異の組合せのうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９個、またはそれより多く）を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０４５、ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、またはＦｃＭｕｔ１５６から選択される変異または変異の組合せのうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６個、または全て）を含む。別の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、またはＦｃＭｕｔ２２９から選択される変異または変異の組合せのうちの１個または複数（例えば、２、３、４、５個、または全て）を含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１８、ＦｃＭｕｔ０２１、ＦｃＭｕｔ０５０、ＦｃＭｕｔ１０２、またはＹＴＥから選択される変異または変異の組合せのうちの１個または複数（例えば、２、３、４個、または全て）を含まない。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、ＦｃＭｕｔ０１８、ＦｃＭｕｔ０２１、ＦｃＭｕｔ０５０、ＦｃＭｕｔ１０２、またはＹＴＥから選択される変異または変異の組合せのうちの１個または複数（例えば、２、３、４個、または全て）、および表１に記載される１個または複数の他の変異または変異の組合せを含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、本明細書に記載されているような相乗効果（例えば、結合アフィニティーまたは循環半減期）を生じる、表１に記載された変異または変異の組み合わせの１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個、またはそれより多く）を含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、Ｎ３１５、またはＡ３７８から選択される残基における１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、または７個）の変異を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、Ｔ２５６Ｄ、Ｈ２８５Ｎ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、Ｑ３１１Ｖ、Ｎ３１５Ｄ、またはＡ３７８Ｖから選択される１個または複数（例えば、２、３、４、５、６、または７個）の変異を含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、半減期を増強する変異、Ｆｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異、またはその両方を含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、本明細書に記載された、１個または複数の、変異または変異の組み合わせを含み、例えば、Ｍ２５２Ｗ、Ｖ３０８Ｆ／Ｎ４３４Ｙ、Ｒ２５５Ｙ、Ｐ２５７Ｌ／Ｎ４３４Ｙ、Ｖ３０８Ｆ、Ｐ２５７Ｎ／Ｍ２５２Ｙ、Ｇ３８５Ｎ、Ｐ２５７Ｎ／Ｖ３０８Ｙ、Ｎ４３４Ｙ、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ（「ＹＴＥ」）、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ（「ＬＳ」）、またはそれらの任意の組み合わせから選択される。代替として、または追加として、ある実施形態では、Ｆｃ領域は、（ａ）Ｔ２５６Ｄ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｈ２８５Ｎ／Ｔ３０７Ｑ／Ｎ３１５Ｄ、Ｈ２８５Ｄ／Ｔ３０７Ｑ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ３０７Ｑ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ２５６Ｄ／Ｎ２８６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、もしくはＴ２５６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖから選択される変異の１個もしくは複数（例えば、２、３、４、５個、または全部）の組み合わせ；（ｂ）Ｆｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異もしくは変異の組み合わせ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ（「ＬＡＬＡ」変異としても公知である）、または（ｃ）（ａ）と（ｂ）の両方を含む。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｔ２５６Ｄ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｈ２８５Ｎ／Ｔ３０７Ｑ／Ｎ３１５Ｄ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｈ２８５Ｄ／Ｔ３０７Ｑ／Ａ３７８Ｖ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｔ３０７Ｑ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｔ２５６Ｄ／Ｎ２８６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。ある実施形態では、Ｆｃ領域は、変異Ｔ２５６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ、およびＦｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異または変異の組合せ、例えば、Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含む。

参照Ｆｃ領域アミノ酸配列（本明細書に使用されたナンバリングを含む）が、下記に提供される（例えば、本明細書に記載された変異位置の同定のために）。ＣＨ２ドメイン配列は下線が引かれ、ヒンジ領域配列はイタリック体で示され、ＣＨ３ドメイン配列は太字で示されている。

本明細書に記載された半減期延長変異のいずれも、Ｆｃエフェクター機能を増強または破壊する能力がある任意のＦｃ変異と組み合わせて使用することができる。

Ｆｃ領域は、様々な細胞受容体（例えば、Ｆｃ受容体）および補体タンパク質に結合することができる。Ｆｃ領域はまた、抗体分子の異なる生理的効果、例えば、オプソニン化粒子の検出；細胞溶解；マスト細胞、好塩基球、および好酸球の脱顆粒；ならびに他の過程を媒介することができる。

Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）のいくつかの異なる型があり、それらが認識する抗体の型に基づいて分類することができる。

Ｆｃγ受容体（ＦｃγＲ）は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属し、例えば、オプソニン化微生物の食作用を誘導することに、関与する。このファミリーは、いくつかのメンバー、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）を含み、それらは、それらの異なる分子構造によって抗体アフィニティーが異なる。例として、ＦｃγＲＩは、ＦｃγＲＩＩまたはＦｃγＲＩＩＩが結合するより強く、ＩｇＧに結合することができる。ＦｃγＲＩはまた、ＦｃγＲＩＩまたはＦｃγＲＩＩＩが有するより１つ多いドメインの、３つの免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメインを含む細胞外部分を有する。この特性は、ＦｃγＲＩが、ただ１個のＩｇＧ分子（または単量体）に結合することを可能にするが、Ｆｃγ受容体は一般的に、活性化されるために免疫複合体内で複数のＩｇＧ分子に結合する必要がある。

Ｆｃγ受容体は、ＩｇＧに対するそれらのアフィニティーが異なり、異なるＩｇＧサブクラスが、Ｆｃγ受容体のそれぞれに対する固有のアフィニティーを有しうる。これらの相互作用はさらに、ＩｇＧのある特定の位置におけるグリカン（オリゴ糖）により調整されうる。例えば、立体障害を生じさせることにより、フコース含有ＣＨ２−８４．４グリカンはＦｃγＲＩＩＩＡに対するＩｇＧアフィニティーを低下させるが、ガラクトースを欠き、かつ代わりに、ＧｌｃＮＡｃ部分で終結するＧ０グリカンは、ＦｃγＲＩＩＩＡに対するアフィニティーを増加させている（Ｍａｖｅｒａｋｉｓら、（２０１５年）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ５７巻（６号）：１〜１３頁）。

新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）は、複数の細胞型で発現し、構造においてＭＨＣクラスＩと類似している。この受容体はまた、ＩｇＧに結合し、この抗体の保存に関与している（Ｚｈｕら、（２００１年） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １６６巻（５号）：３２６６〜７６頁）。ＦｃＲｎはまた、ＩｇＧを母親から、胎盤を介して彼女の胎児へか、または乳中において彼女の授乳する乳児へのいずれかで移動させることに関与する。この受容体はまた、ＩｇＧ血清中レベルの恒常性において役割を果たしうる。

ＦｃαＲＩ（またはＣＤ８９）は、ＦｃαＲサブグループに属する。ＦｃαＲＩは、好中球、好酸球、単球、マクロファージ（クッパー細胞を含む）、および樹状細胞の表面上に見出される。それは、２つの細胞外Ｉｇ様ドメインを含み、免疫グロブリンスーパーファミリーと、多重鎖免疫認識受容体（ＭＩＲＲ）ファミリーの両方のメンバーである。それは、２つのＦｃＲγシグナル伝達鎖と会合することにより、シグナル伝達する。

Ｆｃ−アルファ／ミュー受容体（Ｆｃα／μＲ）は、Ｉ型膜貫通タンパク質である。それはＩｇＡに結合することができるが、ＩｇＭに対するより高いアフィニティーを有する（ＳｈｉｂｕｙａおよびＨｏｎｄａ（２００６年） Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ２８巻（４号）：３７７〜８２頁）。このＦｃ受容体はまた、その細胞外部分に１つのＩｇ様ドメインを有することで、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーでもある。

ＦｃεＲの２つの公知の型がある。高アフィニティー受容体ＦｃεＲＩは、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである（それは、２つのＩｇ様ドメインを有する）。ＦｃεＲＩは、表皮ランゲルハンス細胞、好酸球、マスト細胞、および好塩基球上に見出される。この受容体は、アレルギー応答をコントロールすることにおいて役割を果たすことができる。ＦｃεＲＩはまた、抗原提示細胞上に発現され、免疫メディエータ、例えば、炎症を促進するサイトカインの産生をコントロールする（ｖｏｎ Ｂｕｂｎｏｆｆら（２００３年） Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ ２８巻（２号）：１８４〜７頁）。低アフィニティー受容体ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ２３）は、Ｃ型レクチンである。ＦｃεＲＩＩは、膜結合型または可溶性受容体として多機能をもつ。それはまた、Ｂ細胞増殖および分化をコントロールすることができ、好酸球、単球、および好塩基球のＩｇＥ結合をブロックする（Ｋｉｋｕｔａｎｉら、（１９８９年） Ｃｉｂａ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ １４７巻：２３〜３１頁）。

ある実施形態では、Ｆｃ領域は、抗原結合部位を含有するように操作して、Ｆｃａｂ断片を作出することができる（Ｗｏｚｎｉａｋ−Ｋｎｏｐｐら、（２０１０年） Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ ２３巻（４号）：２８９〜２９７頁）。Ｆｃａｂ断片は、Ｆｃ領域を交換することにより完全免疫グロブリンへ挿入することができ、それにしたがって、二特異性抗体（別々の結合部位を含有する、Ｆａｂ領域とＦｃａｂ領域の両方を有する）が得られる。

ＦｃＲｎの結合およびリサイクリングは、下記で説明されうる。例えば、ＩｇＧおよびアルブミンは、血管内皮細胞へ飲作用を通して内部移行される。エンドソームのｐＨは６．０であり、膜結合型ＦｃＲｎとの会合を容易とする。エンドソームの内容物は、２つの方式：頂端細胞膜へ戻してのリサイクリング、または頂端から基底外側へのトランスサイトーシスのうちの１つにおいて処理されうる。ＦｃＲｎと会合していないＩｇＧは、リソソームにより分解される。

理論により束縛されることを望まないが、ＦｃＲｎのＩｇＧとの相互作用は、Ｆｃを通して媒介されると考えられる。ＦｃのＦｃＲｎへの結合はｐＨ特異的であり、例えば、ｐＨ ７．４において有意な結合はなく、酸性環境において強力に結合する。ＩｇＧ１分子のＦｃドメインとの複合体におけるＦｃＲｎの構造は図１に示されている。各ＦｃＲｎ分子は、一般的に、Ｆｃ単量体に結合する。ある実施形態では、Ｆａｂドメインもまた、ＩｇＧのＦｃＲｎへの結合に影響を及ぼすことができ、例えば、ＩｇＧのＦｃＲｎに対するアフィニティーに、マイナスの影響を生じるか、または影響を生じないかのいずれかである。

Ｆｃ領域が、ポリペプチドの半減期を増強するように操作される場合、複数の検討事項が存在しうる。例えば、抗体分子または融合タンパク質の半減期および効率的な再循環を延長することは、ｐＨ特異的アフィニティー増強（例えば、エンドソームの低いｐＨにおいてのみ）を必要とする場合が多い。ＦｃＲｎは、Ｆｃ領域のＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの間のリンカー領域の近位に結合する。リンカーの修飾は、ＦｃのＦｃγ受容体との係合に影響しうる。Ｆｃ領域上の修飾は、ポリペプチドの熱安定性および凝集特性に影響しうる。

ＦｃＲｎ結合最適化：他のエフェクター機能への影響を低減すること
ある実施形態では、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、同じアフィニティー機能を有し、またはエフェクター機能（例えば、本明細書に記載されたエフェクター機能）を実質的に変化させる（例えば、１０％より多く、２０％より多く、３０％より多く、４０％より多く、５０％より多く、６０％より多く、７０％より多く、８０％より多く、または９０％より多く、減少させる）ことはない。ある実施形態では、エフェクター機能は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎの間の結合に関連していない。

変異されるアミノ酸残基は、少なくとも部分的に、Ｆｃ領域上の１つまたは複数の結合部位の構造的または機能的特性に基づいて、選択することができる。これらの結合部位には、例えば図２に示されているような、プロテインＡ結合部位、Ｃ１ｑ結合部位、ＦｃγＲＩ結合部位、ＦｃγＲＩＩａ結合部位、ＦｃγＲＩＩＩａ結合部位、またはＦｃＲｎ結合部位が含まれるが、それらに限定されない。結合部位にはまた、ＴＲＩＭ２１結合部位、例えば、ＩｇＧのループ３０８〜３１６、ループ２５２〜２５６、またはループ４２９〜４３６から選択される１つまたは複数の残基が含まれうる。ある実施形態では、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの間のリンカー領域は、ＦｃγＲ結合に作用するＣＨ２ドメインの動力学に影響しうる。

ＦｃＲｎのｐＨ特異的係合のための構造的基盤
理論により束縛されることを望まないが、エンドソームの低いｐＨは、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメイン上の表面ヒスチジンのプロトン付加をもたらすと考えられる。例えば、ＣＨ２上の残基Ｈ３１０および／またはＣＨ３上のＨ４３３のプロトン付加は、例えば低いｐＨ（例えば、ｐＨ ６．０）におけるＦｃＲｎ係合に重要でありうる。プロトン付加はまた、溶媒またはリガンド分子結合のためのリンカー領域のより良い曝露または遮蔽などの、領域のコンフォメーション動力学の変化をもたらしうる。したがって、ある実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、残基Ｈ３１０における変異、残基Ｈ４３３における変異、またはその両方を含む。残基Ｈ３１０および／またはＨ４３３に隣接した１個または複数の残基もまた変異させることができる。ポリペプチドはまた、代償性または有益な変異、例えば、前述の変異のいずれかを代償し、またはそれにとって有益な、例えば、その変異のマイナスの結果を低減するための変異（例えば、極性対非極性、荷電対電荷なし、正荷電（塩基性）対負荷電（酸性）、または疎水性対親水性）を含むことができる。例えば、Ｐ２４７Ｄは、代償性または有益な変異でありうる。

ある実施形態では、ヒスチジンのプロトン付加は、例えば、リンカー／ＣＨ２／ＣＨ３界面残基の移動／変位を含む、追加のコンフォメーション変化を生じうる。Ｆｃ断片の結晶構造は、異なるｐＨで結晶化されている。図３に示されているように、ｐＨ ６．５（シアン色）および５．０（緑色）において結晶化されたＦｃ断片の２つの高分解能結晶構造の解析は、潜在的な差を指し示した。

Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用界面のマッピング
ある実施形態では、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎの間の相互作用を変化させることができる変異を含む。ある実施形態では、その変異は、少なくとも部分的に、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用界面の構造的特色に基づいて選択される。

ある実施形態では、免疫グロブリン単量体のＦｃ領域は、図４に示された構造を有しうる。図４に示されているように、黒色点線はＦｃ−ＦｃＲｎ相互作用界面を指し示す。構造は、例えば本明細書に記載されているような、ＦｃＲｎ接触残基、およびＦｃＲｎアフィニティー増強Ｆｃ残基を含む。それぞれ、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインに位置する、残基Ｈ３１０およびＨ４３５は、主に、ｐＨ依存性Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用に関与する。ある実施形態では、ＦｃＲｎは、Ｆｃ領域に、そのＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの間で結合する。別の実施形態では、Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合部位は、Ｆｃ単量体のＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの両方にわたって位置する。

Ｆｃ−ＦｃＲｎ係合のネットワーク表示は、アミノ酸の同時置換に関する洞察を与える
ある実施形態では、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎの間の相互作用を変化させることができる複数の変異を含む。ある実施形態では、変異は、少なくとも部分的に、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用のネットワーク表示に基づいて、選択される。

理論により束縛されることを望まないが、ある実施形態では、例えば、Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体のネットワーク解析により決定されているように、残基Ｈ３１０は、ＦｃＲｎとの係合において中心的役割を果たすことが考えられる。図５に示されているように、残基Ｈ３１０は、複数の他の高度にネットワーク化された残基と高度に相互接続されている。ある実施形態では、Ｈ３１０クラスターおよび隣接部（結ばれたノード）における変異は、Ｈ３１０ネットワークを強化することができる。サブネットワークの解析は、他のＦｃ残基への影響を減らし、または最小にしながらの、都合良いＦｃＲｎ相互作用のための相乗的変異の導入の情報を提供する。

ＦｃＲｎ結合を最適化するためのデザインの検討事項
ある実施形態では、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合を最適化するためにデザインすることができる。

ある実施形態では、Ｆｃ領域に変異を有するポリペプチドは、参照ポリペプチド（例えば、その変異を含まず、その他の点では同一のポリペプチド）と比較して、ｐＨ特異的アフィニティーの増強を有する。ある実施形態では、アフィニティー増強は、ファンデルワールス相互作用を増加させることにより達成される。ある実施形態では、アフィニティー増強は、水素結合および／または静電気的相互作用の導入により達成されない。ある実施形態では、変異は、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの間のリンカー領域のコンフォメーションを変化させないか、またはそれへの摂動を低減するか、もしくは最小にする。ある実施形態では、ポリペプチドは、両方のドメイン（４つの四分円部分（ｑｕａｄｒａｎｔ））にわたる複数の変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、表面上に疎水性または芳香族残基の大きなクラスターを含有しない。

ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば酸性ｐＨにおいて、Ｆｃ領域とＦｃＲｎの間の相互作用の強度を増強するか、またはＦｃＲｎに対する解離定数（Ｋ_ｄ）を低下させる変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば酸性ｐＨにおいて、ＦｃＲｎに対する解離の速度（ｋ_ｏｆｆ）を低下させる変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば酸性ｐＨにおける、ＦｃＲｎに対する会合の速度（ｋ_ｏｎ）を増加させる変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば酸性ｐＨにおいて、ＦｃＲｎに対する解離の速度（ｋ_ｏｆｆ）を低下させ、かつＦｃＲｎに対する会合の速度（ｋ_ｏｎ）を増加させる変異を含む。ある実施形態では、ポリペプチドは、例えば酸性ｐＨにおいて、ＦｃＲｎに対する解離の速度（ｋ_ｏｆｆ）を低下させ、かつＦｃＲｎに対する会合の速度（ｋ_ｏｎ）に影響せず、または有意には影響しない変異を含む。理論により束縛されることを望まないが、ある実施形態では、ＦｃＲｎに対する解離定数Ｋ_ｄの低下は、主として、会合の速度（ｋ_ｏｎ）の増加よりむしろ、ＦｃＲｎに対する解離の速度（ｋ_ｏｆｆ）低下に起因していると考えられる。

実験の評価：多次元に沿って、かつ異なるアッセイプラットフォームにより評価されるＦｃ変異
本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、いくつかの方法により評価することができる。ｐＨ特異的Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合（例えば、ｐＨ ６．０およびｐＨ ７．４における結合）は、例えば、Ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイ、競合アッセイ（例えば、フローサイトメトリー）、または表面プラズモン共鳴法（ＳＰＲ）により、決定することができる。

生物物理学的特徴付け（例えば、熱安定性、凝集、または発現）を実施することができる。熱安定性は、例えば、ＳＹＰＲＯオレンジにより、決定することができる。凝集は、例えば、ＳＥＣまたはＲＰ−ＨＰＬＣにより、測定することができる。

例えば、ＦｃγＲＩ（例えば、Ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイにより）、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ（例えば、ＥＬＩＳＡにより）、Ｃ１ｑ、ＡＤＣＣ、またはＣＤＣに関係する、エフェクター機能を試験することができる。

三要素モチーフ含有タンパク質（Ｔｒｉｐａｒｔｉｔｅ Ｍｏｔｉｆ−Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ）２１（ＴＲＩＭ２１）結合を試験することができる。ＴＲＩＭ２１は、ＩｇＧのＦｃと結合する細胞質受容体である。ＴＲＩＭ２１は、ウイルス、細菌、および真菌などのＦｃに結合した病原体の細胞内認識および中和を媒介することにおいて役割を果たす。例えば、ＴＲＩＭ２１は、エンベロープをもたないウイルスの中和において重要な役割を果たす（ＭｃＥｗａｎら、Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１３年；１４巻（４号）：３２７〜３６頁）。その役割は、分解のための免疫複合体の方向づけを含むとさらに拡大されている（ＭｃＥｗａｎら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ． ２０１７年；１１４巻（３号）：５７４〜５７９頁）。ＴＲＩＭ２１は、抗体Ｆｃ領域のＣＨ２：ＣＨ３界面に結合し、その界面は、ＦｃＲｎ結合部位と重複する。ＦｃＲｎアフィニティーを増加させるいくつかのＦｃ変異は、ＴＲＩＭ２１アフィニティーを減少させる（Ｆｏｓｓら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ． ２０１６年；１９６巻（８号）：３４５２〜３４５９頁）。鍵となる接触残基には、例えば、２５３位、４３３位、４３４位、および４３５位が含まれる。ＬＳ改変体（Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ）は、４３４位における変異を含有し、Ｎ４３４Ｓ変異が、ＴＲＩＭ２１結合を１０分の１にすることが示されている。ＴＲＩＭ２１媒介性中和は、抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）として公知である。

粘膜取込みを試験することができる。ＦｃＲｎは、腸および肺胞表面を裏打ちする粘膜上皮などの異なる細胞バリアを横断してＩｇＧを輸送する。ＦｃＲｎ結合の修飾は、免疫防御を与える粘膜局在化を増強する機構を提供する。

ポリペプチドの半減期は、例えば、トランスジェニックマウス（例えば、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所からのＴｇ３２およびＴｇ２７６マウス）を使用して、または霊長類（例えば、カニクイザル）において、測定することができる。

例示的なアッセイは、以下の通り、より詳細に記載されている：
１．ＦｃＲｎ結合アッセイ
ａ．ＦｃＲｎのＮｉＮＴＡバイオセンサーへの固定化を用いたＯｃｔｅｔアッセイ
ＦｃＲｎの、６×ヒスチジンタグ（配列番号２）を介したＮｉＮＴＡバイオセンサーへの固定化は、酸性（ｐＨ ６．０）および生理的（ｐＨ ７．４）条件下でのＩｇＧ分子への結合のその後の調査を可能にする。このストラテジーは、以前に記載されており（１）、この方法は、参照されたプロトコールの適合を詳述する。略述すると、５μｇ／ｍＬにおける組換えヒトＦｃＲｎを、ＮｉＮＴＡバイオセンサー上へ１８０秒間、ロードする。１×ＰＢＳ ｐＨ ６．０における６０秒間のベースラインステップ後、ＦｃＲｎをロードしたチップを、２５０ｎＭ（３７．５μｇ／ｍＬ）の濃度でのＩｇＧに６０秒間、曝露し、続いて、ＰＢＳ ｐＨ ６．０において６０秒間、およびＰＢＳ ｐＨ ７．４においてさらに３０秒間、解離させる。アッセイ完了後、ｐＨ ６．０におけるアフィニティー定数（Ｋ_Ｄ）の定量的評価を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ ｏｃｔｅｔソフトウェアを使用して、実施し、定性的評価を、時間に対して応答速度をプロットすることにより実施して、ｐＨ ６．０におけるＩｇＧのＦｃＲｎへの会合、ならびにｐＨ ６．０およびｐＨ ７．４におけるその後の解離の可視化を可能にする。

ｂ．ＩｇＧの抗ＣＨ１バイオセンサーへの固定化を用いたＯｃｔｅｔアッセイ
ＩｇＧの抗ＣＨ１バイオセンサーへの固定化は、酸性（ｐＨ ６．０）および生理的（ｐＨ ７．４）条件下でのＦｃＲｎ分子への結合のその後の調査を可能にする。このストラテジーは、以前に記載されており（２）、この方法は、参照されたプロトコールの適合を詳述する。略述すると、５μｇ／ｍＬにおける精製されたＩｇＧを、抗ＣＨ１バイオセンサー上へ１８０秒間、ロードする。１×ＰＢＳ ｐＨ ６．０における６０秒間のベースラインステップ後、ＩｇＧをロードしたチップを、５０μｇ／ｍＬの濃度でのＦｃＲｎに６０秒間、曝露し、続いて、ＰＢＳ ｐＨ ６．０において６０秒間、およびＰＢＳ ｐＨ ７．４においてさらに３０秒間、解離させる。アッセイ完了後、ｐＨ ６．０におけるアフィニティー定数（Ｋ_Ｄ）の定量的評価を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ ｏｃｔｅｔソフトウェアを使用して、実施し、定性的評価を、時間に対して応答速度をプロットすることにより実施して、ｐＨ ６．０におけるＩｇＧのＦｃＲｎへの会合、ならびにｐＨ ６．０およびｐＨ ７．４におけるその後の解離の可視化を可能にする。

ｃ．細胞に基づいたアッセイ
ＦｃＲｎとＩｇＧの間の相互作用を解析するために、細胞に基づいたアッセイもまた使用される（Ｒｅｆ：ＰＭＩＤ：２３３８４８３７）。細胞表面上での膜アンカー型ＦｃＲｎの発現は、ＦｃＲｎの生理的提示を厳密に表し、細胞膜および分子配向が、ＦｃＲｎとＩｇＧの間の相互作用に影響する。ここで使用されるアッセイは、競合アッセイであり、目的のＩｇＧが、蛍光標識された高アフィニティーＦｃ競合試薬（Ｆｃ−Ａ４８８）の細胞結合と競合する能力について評価される。全長膜結合型ＦｃＲｎヘテロ二量体を発現するＥｘｐｉ２９３細胞を、固定濃度のＦｃ−Ａ４８８（０．５ｕｇ／ｍｌ）と様々な濃度の目的のＩｇＧ（０．００１〜１０μＭ）の混合物とインキュベートする。細胞に結合した蛍光を、フローサイトメトリーにより検出する。ＦｃＲｎへの結合が改善されたＩｇＧは、より低いＩｇＧ濃度でＦｃ競合物に打ち勝つ。このアッセイは、ロバストで、線形で、かつ特異的であり、ＩｇＧ／Ｆｃ改変体のＦｃＲｎへの相対的結合における差を示すために使用することができる。

２．熱安定性アッセイ
ＩｇＧ改変体の安定性を、示差走査型蛍光定量法（ＤＳＦ）により評価した。ＤＳＦは、熱ストレス下でのタンパク質アンフォールディングをモニタリングするためにＳＹＰＲＯ（登録商標）オレンジ色素を使用するアッセイである。ＳＹＰＲＯ（登録商標）オレンジは、疎水性表面に非特異的に結合する蛍光色素であり、その蛍光は、水性環境において消光される。温度の上昇で、タンパク質はそれらの二次構造を失い始めて、アンフォールドし、それにしたがって、それらの疎水性コア残基を露出し、その色素が蛍光を発するのを可能にする。最大蛍光シグナルは、完全なアンフォールディングにおいて達成され、その後、そのタンパク質は、凝集し始めて、露出した疎水性残基を減らし、それにしたがって、蛍光シグナルを低下させる。未変性状態と完全にアンフォールドされたタンパク質の間の中間点が、遷移温度、または融解温度（Ｔｍ）であり、相対的安定性についてタンパク質構築物または製剤状態を直接的に比較するために使用することができる。

ある実施形態では、ＦｃＲｎ結合以外の因子もまた、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の観察される半減期に影響しうる。これらの因子には、例えば、凝集傾向、非特異的結合、安定性、またはＦａｂ組成が含まれうる。

ある実施形態では、非Ｆｃ領域における変異は、例えば、最適以下の鋳型の関連において、半減期の実質的な改善を提供するために、導入される。例えば、出発の半減期がより低いポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、最適以下の特性の存在を指し示しうる。例えば、必要な結合プロファイル（例えば、アフィニティーおよび／または特異性）を維持するために、または適切な開発可能性特性（例えば、安定性、溶解度、発現レベル、または凝集）を得るために、より低い半減期の根本的原因を緩和することに、操作努力をまた集中させることができる。ある実施形態では、追加の操作は、最適以下の生物物理学的特徴を有するポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）について、最大半減期の延長を実現するために実施される。

薬物動態
本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、１つまたは複数の所望の薬物動態学的特性、例えば、本明細書に記載された薬物動態学的特性の１つまたは複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、またはそれより多く）を有しうる。

薬物動態（ＰＫ）は、生きている生物に投与された物質の運命を決定するために使用することができる。ＰＫ研究は、薬物代謝を解析するために、およびそれが投与される瞬間から、それが身体から完全に排除される時点までの薬物の運命を同定するために使用することができる。薬物動態は、例えば、身体が、特定の薬物に、投与後、吸収および分布の機構、身体におけるその物質の（例えば、チトクロムＰ４５０またはグルクロノシルトランスフェラーゼ酵素などの代謝酵素による）化学的変化、またはその薬物の代謝産物の排泄の効果および経路を通して、どのように影響を及ぼすかを記載する。薬物の薬物動態学的特性は、投与された薬物の投与部位および用量（吸収速度に影響しうる）などの要素により影響されうる。薬物動態は、薬動力学（例えば、薬物の生化学的および生理学的効果の研究）と共に解析することができる。

いくつかの異なるモデルが、薬物動態について開発されている。例えば、薬物動態モデリングは、非コンパートメントまたはコンパートメント方法により実施することができる。

非コンパートメント方法は、濃度−時間グラフの曲線下面積を見積もることにより、薬物への曝露を推定する。非コンパートメントＰＫ解析は、総薬物曝露の推定に大きく依存している。総薬物曝露は、最も一般的な方法である、台形法則（数値積分）での曲線下面積（ＡＵＣ）方法により見積もられる場合が多い。台形法則における「ｘ」の長さへの依存により、面積見積りは、血液／血漿サンプリングスケジュールに大きく依存している。すなわち、時間の点が近ければ近いほど、台形は、濃度−時間曲線の実際の形をより忠実に反映する。

コンパートメント方法は、動態モデルを使用して、濃度−時間グラフを見積もる。コンパートメントＰＫ解析は、動態モデルを使用して、濃度−時間曲線を記載し、予測する。ＰＫコンパートメントモデルは、化学的動態および熱力学などの他の科学的学問分野に使用される動態モデルに類似する場合が多い。いくつかの非コンパートメント解析を凌ぐコンパートメント解析の利点は、任意の時間における濃度を予測する能力である。曲線ストリッピング（ｃｕｒｖｅ ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ）に基づいた、コンパートメントを含まないモデリングはこの制限を受けない。最も単純なＰＫコンパートメントモデルは、ＩＶボーラス投与および一次消失を有する１コンパートメントＰＫモデルである。より複雑なＰＫモデル（例えば、ＰＢＰＫモデル）は、生理的情報の使用に依拠し、開発および検証を容易にする。

単一コンパートメントモデルにおいて、関与する様々な因子（例えば、用量、血漿中濃度、または消失）間の関係のグラフは、直線、または１つへの近似（すなわち、線形薬物動態）を示す。薬物が有効であるために、それらは、血漿から他の体液および組織へ迅速に移動することができる必要がある。

多コンパートメントモデルにおいて、様々な因子間の非線形関係についてのグラフは、曲線により表され、その後、因子間の関係は、異なる曲線下面積の大きさを計算することにより見出すことができる。非線形薬物動態に使用されるモデルは、主に、ミカエリスメンテン速度式に基づいている。

モデルが分割される様々なコンパートメントは、一般的に、ＡＤＭＥスキーム：遊離（例えば、薬物の医薬製剤からの放出の過程）；吸収（例えば、物質が血液循環に入る過程）；分布（例えば、体液および身体組織を通しての物質の分散または伝播（ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔｉｏｎ））；代謝（または生体内変換または不活性化）（例えば、外来物質が存在することの生物による認識、および親化合物の娘代謝産物への不可逆的変換）；および排泄（例えば、物質の身体からの除去）と呼ばれる（遊離が、吸収とは別個のステップとして含まれる場合には、ＬＡＤＭＥとも呼ばれる）。まれに、いくつかの薬物は、身体組織において不可逆的に蓄積する。代謝と排泄の２つの相はまた、消失という名称の下でひとまとめにすることができる。

全てのこれらのパラメータは、対応するグラフ表示を有する数学式により表すことができる。これらのモデルの使用は、分子の特徴、加えて、特定の薬物が、その酸解離定数（ｐＫａ）、生物学的利用率および溶解度、吸収能力、ならびに生物における分布などのその基本的な特徴の一部に関する情報を考慮すれば、どのように挙動するだろうかということの理解を可能にする。

薬物についてのモデルアウトプットは、産業において（例えば、ジェネリック薬をデザインする場合、生物学的同等性を計算することにおいて）、または薬物動態学的概念の臨床適用において、使用することができる。臨床的薬物動態は、ヒトのヘルスケア専門家にとって、および獣医学において、薬物の有効かつ効率的な使用についてのいくつかの実施ガイドラインを提供する。

例示的な薬物動態学的特性には、用量（例えば、投与された薬物の量）、投与間隔（例えば、薬物用量投与間の時間）、Ｃ_ｍａｘ（例えば、投与後の薬物のピーク血漿中濃度）、ｔ_ｍａｘ（Ｃ_ｍａｘに達するまでの時間）、Ｃ_ｍｉｎ（例えば、次の用量が投与される前に薬物が達する最低濃度）、分布容積（例えば、薬物が分布される見かけの容積、例えば、薬物濃度を身体における薬物量に関係づける）、濃度（例えば、所定の容積の血漿における薬物の量）、半減期または消失半減期（例えば、薬物の濃度が、その最初の値の半分に達するのに必要とされる時間）、消失速度定数（例えば、薬物が身体から除去される速度）、注入速度（例えば、消失のバランスをとるために必要とされる注入の速度）、曲線下面積（例えば、単回用量後または定常状態における、例えば、濃度−時間曲線の積分）、クリアランス（例えば、単位時間当たりの薬物のクリアランスされた血漿の容積）、生物学的利用率（例えば、薬物の全身的に利用可能な割合）、または変動（ｆｌｕｃｔｕａｔｉｏｎ）（例えば、定常状態における１回の投与間隔内のピークトラフ変動）が含まれるが、それらに限定されない。

薬物動態学的特性は、様々な方法により測定することができる。例えば、生物学的解析法は、濃度−時間プロファイルを構築するために使用することができる。化学的技法は、生物学的マトリクス、例えば、血漿における薬物の濃度を測定するために利用することができる。適切な生物学的解析法は、選択的かつ感度が高くあるべきである。例えば、マイクロスケール熱泳動（ｔｈｅｒｍｏｐｈｏｒｅｓｉｓ）は、生物学的マトリクス／液体が、薬物のその標的に対するアフィニティーにどのように影響するかを定量化するために使用することができる（Ｂａａｓｋｅら、（２０１０年） Ａｎｇｅｗ． Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔ． Ｅｄ． ４９巻（１２号）：１〜５頁；Ｗｉｅｎｋｅｎら（２０１０年） Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ １巻（７号）：１００頁）。

薬物動態学的特性はまた、例えば低用量および長時間後に濃度を観察するために高感度が必要とされる場合、質量分析を使用して研究することができる。この適用に使用される一般的装置は、三連四重極型質量分析計を用いたＬＣ−ＭＳである。タンデム質量分析は、追加される特異性のために利用することができる。標準曲線および内部標準は、試料における医薬品の定量化のために使用することができる。医薬品は投与され、その後、代謝され、または身体からクリアランスされるため、試料は、異なる時点を表す。投与前に採取されたブランク試料が、バックグラウンドを決定し、かつそのような複雑な試料マトリクスに関するデータ完全性を保証することにおいて使用される。標準曲線は直線でありえ、または、ほとんどの質量分析計の応答は、大きな濃度範囲にわたって決して直線とは言えないため、二次方程式などのより複雑な関数を用いて、曲線フィッティングを使用することができる（ＨｓｉｅｈおよびＫｏｒｆｍａｃｈｅｒ （２００６年）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ７巻（５号）：４７９〜８９頁；Ｃｏｖｅｙら（１９８６年）Ａｎａｌ． Ｃｈｅｍ． ５８巻（１２号）：２４５３〜６０頁；Ｃｏｖｅｙら（１９８５年）Ａｎａｌ． Ｃｈｅｍ． ５７巻（２号）：４７４〜８１頁）。

例示的な抗体分子
本明細書に記載された方法は、様々な抗体分子、例えば、Ｆｃ領域を含有する任意の抗体分子を操作するために使用することができる。

ある実施形態では、抗体分子は、キメラ抗体分子、ヒト化抗体分子、またはヒト抗体分子である。

ある実施形態では、抗体分子は、モノクローナル抗体全体である。別の実施形態では、抗体分子は、Ｆｃ領域を含有しない抗体分子（例えば、本明細書に記載された抗原結合性断片）のＦｃ領域含有誘導体である。例示的な抗原結合性断片には、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆａｂ’、ｓｃＦｖ、ｄｉ−ｓｃＦｖ、またはｓｄＡｂが含まれるが、それらに限定されない。別の実施形態では、抗体分子は、二特異性モノクローナル抗体、例えば、三機能性抗体（３ｆｕｎｃｔ）または二特異性Ｔ細胞誘導物質（ｂｉ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ−ｃｅｌｌ ｅｎｇａｇｅｒ）（ＢｉＴＥ）である。

ある実施形態では、抗体分子は、感染性疾患（例えば、ウイルス感染症、細菌感染症、または真菌感染症）に関連した分子（例えば、タンパク質）をターゲティングする。別の実施形態では、抗体分子は、がんと関連した分子（例えば、タンパク質）または細胞をターゲティングする。別の実施形態では、抗体分子は、免疫障害と関連した分子（例えば、タンパク質）または細胞をターゲティングする。別の実施形態では、抗体分子は、心血管障害と関連した分子（例えば、タンパク質）または細胞をターゲティングする。別の実施形態では、抗体分子は、代謝性障害と関連した分子（例えば、タンパク質）または細胞をターゲティングする。別の実施形態では、抗体分子は、神経学的障害と関連した分子（例えば、タンパク質）または細胞をターゲティングする。

例示的な抗体分子には、以下の分子または細胞の１つまたは複数（例えば、２つ）をターゲティングする抗体分子が含まれるが、それらに限定されない：β−アミロイド、４−１ＢＢ、５ＡＣ、５Ｔ４、ＡＣＦ９、ＡＣＦＩＸ、アクチビン受容体様キナーゼ１、ＡＣＶＲ２Ｂ、腺癌抗原、ＡＧＳ−２２Ｍ６、アルファ−フェトプロテイン、アンジオポエチン２、アンジオポエチン３、炭疽毒素の防御抗原、ＡＯＣ３（ＶＡＰ−１）、Ｂ７−Ｈ３、ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ炭疽、ＢＡＦＦ、Ｂリンパ腫細胞、Ｃ２４２抗原、Ｃ５、ＣＡ−１２５（模造品）、カルシトニン、ｃａｎｉｓ ｌｕｐｕｓ ｆａｍｉｌｉａｒｉｓ ＩＬ３１、炭酸脱水酵素９（ＣＡ−ＩＸ）、心筋ミオシン、ＣＣＬ１１（エオタキシン−１）、ＣＣＲ２、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＤ１１、ＣＤ１８、ＣＤ１２５、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１４７（ベイシジン）、ＣＤ１５、ＣＤ１５２、ＣＤ１５４（ＣＤ４０Ｌ）、ＣＤ１９、ＣＤ２、ＣＤ２０、ＣＤ２００、ＣＤ２２、ＣＤ２２１、ＣＤ２３（ＩｇＥ受容体）、ＣＤ２５（ＩＬ−２受容体のα鎖）、ＣＤ２７、ＣＤ２７４、ＣＤ２７６、ＣＤ２８、ＣＤ３、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ３８（サイクリックＡＤＰリボースヒドロラーゼ）、ＣＤ４、ＣＤ４０、ＣＤ４０リガンド、ＣＤ４１（インテグリンアルファ−ＩＩｂ）、ＣＤ４４ｖ６、ＣＤ５、ＣＤ５１、ＣＤ５２、ＣＤ５６、ＣＤ６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ７９Ｂ、ＣＤ８０、ＣＥＡ、ＣＥＡ関連抗原、ＣＦＤ、ＣＧＲＰ、ｃｈ４Ｄ５、ＣＬＤＮ１８．２、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、クランピング因子（ｃｌｕｍｐｉｎｇ ｆａｃｔｏｒ）Ａ、凝固因子ＩＩＩ、ＣＳＦ１Ｒ、ＣＳＦ２、ＣＴＧＦ、ＣＴＬＡ−４、Ｃ−Ｘ−Ｃケモカイン受容体４型、サイトメガロウイルス、サイトメガロウイルス糖タンパク質Ｂ、ダビガトラン、ＤＬＬ３、ＤＬＬ４、ＤＰＰ４、ＤＲ５、Ｅ．ｃｏｌｉ志賀毒素１型、Ｅ．ｃｏｌｉ志賀毒素２型、ＥＧＦＬ７、ＥＧＦＲ、エンドグリン、内毒素、ＥｐＣＡＭ、エフリン受容体Ａ３、エピシアリン（ｅｐｉｓｉａｌｉｎ）、ＥＲＢＢ３、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、ＲＳウイルスのＦタンパク質、ＦＡＰ、フィブリンＩＩベータ鎖、フィブロネクチンエクストラドメイン−Ｂ、葉酸ヒドロラーゼ、葉酸受容体１、葉酸受容体アルファ、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ受容体、ガングリオシドＧＤ２、ＧＣＧＲ、ＧＤ２、ＧＤ３ガングリオシド、ＧＤＦ−８、グリピカン３、ＧＭＣＳＦ受容体α鎖、ＧＰＮＭＢ、増殖分化因子８、ＧＵＣＹ２Ｃ、血球凝集素、Ｂ型肝炎表面抗原、Ｂ型肝炎ウイルス、ＨＥＲ１、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３、ＨＧＦ、ＨＨＧＦＲ、ヒストン複合体、ＨＩＶ−１、ＨＬＡ−ＤＲ、ＨＮＧＦ、Ｈｓｐ９０、ヒト分散因子受容体キナーゼ（ｈｕｍａｎ ｓｃａｔｔｅｒ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｋｉｎａｓｅ）、ヒトＴＮＦ、ヒトベータ−アミロイド、ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）、ＩＣＯＳＬ、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＩｇＥ、ＩｇＥ Ｆｃ領域、ＩＧＦ−１受容体、ＩＧＦ−Ｉ、ＩＧＨＥ、ＩＬ ２０、ＩＬ−１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１７、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−１７Ｆ、ＩＬ−１β、ＩＬ２、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ２３Ａ、ＩＬ３１ＲＡ、ＩＬ−４、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ６、ＩＬ−６受容体（ＩＬ６Ｒ）、ＩＬ−９、ＩＬＧＦ２、インフルエンザＡウイルス血球凝集素（ＨＡ）、インスリン様増殖因子Ｉ受容体、インテグリンα４、インテグリンα４β７、インテグリンα５β１、インテグリンα７β７、インテグリンαＩＩｂβ３、インテグリンαｖβ３、インターフェロン受容体、インターフェロンα／β受容体、インターフェロンガンマ誘導性タンパク質、ＩＴＧＡ２、ＩＴＧＢ２（ＣＤ１８）、カリクレイン、ＫＩＲ２Ｄ、ＫＬＲＣ１、ルイスＹ抗原、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ）、ＬＦＡ−１（ＣＤ１１ａ）、ＬＩＮＧＯ−１、リポテイコ酸、ＬＯＸＬ２、Ｌ−セレクチン（ＣＤ６２Ｌ）、ＬＴＡ、ＭＣＰ−１、メゾテリン、ＭＩＦ、ＭＳ４Ａ１、ＭＳＬＮ、ＭＵＣ１、ムチンＣａｎＡｇ、ミエリン関連糖タンパク質、ミオスタチン、ＮＣＡ−９０（顆粒球抗原）、ＮＣＡ−９０（顆粒球抗原）、神経アポトーシス制御プロテイナーゼ１、神経アポトーシス制御プロテイナーゼ１、ＮＧＦ、ＮＧＦ、Ｎ−グリコリルノイラミン酸、ＮＯＧＯ−Ａ、Ｎｏｔｃｈ １、Ｎｏｔｃｈ受容体、ＮＲＰ１、ウサギ（Ｏｒｙｃｔｏｌａｇｕｓ ｃｕｎｉｃｕｌｕｓ）、ＯＸ−４０、ｏｘＬＤＬ、ＰＣＳＫ９、ＰＤ−１、ＰＤ−１、ＰＤＣＤ１、ＰＤＧＦ−Ｒ α、リン酸ナトリウムコトランスポーター、ホスファチジルセリン、血小板由来増殖因子受容体ベータ、前立腺癌細胞、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ ＩＩＩ型分泌系、狂犬病ウイルス糖タンパク質、狂犬病ウイルス糖タンパク質、ＲＡＮＫＬ、ＲＳウイルス、ＲＳウイルス、ＲＨＤ、Ｒｈ因子、Ｒｈ因子、ＲＯＮ、ＲＴＮ４、スクレロスチン、ＳＤＣ１、セレクチンＰ、ＳＬＡＭＦ７、ＳＯＳＴ、スフィンゴシン−１−リン酸、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、ＳＴＥＡＰ１、ＴＡＧ−７２、Ｔ細胞受容体、ＴＥＭ１、テネイシンＣ、ＴＦＰＩ、ＴＧＦベータ１、ＴＧＦベータ２、ＴＧＦ−β、ＴＮＦＲスーパーファミリーメンバー４、ＴＮＦ−α、ＴＲＡＩＬ−Ｒ１、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、ＴＳＬＰ、腫瘍抗原ＣＴＡＡ１６．８８、ＭＵＣ１の腫瘍特異的グリコシル化、腫瘍関連カルシウムシグナルトランスデューサー２、ＴＷＥＡＫ受容体、ＴＹＲＰ１（糖タンパク質７５）、ＶＥＧＦＡ、ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ２、ビメンチン、またはＶＷＦ。

例示的な抗体分子には、以下の病原体（例えば、細菌、ウイルス、または真菌）の１つまたは複数（例えば、２つ）をターゲティングする抗体分子が含まれるが、それらに限定されない：Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｇｅｒｅｎｃｓｅｒｉａｅ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｉｓｒａｅｌｉｉ、Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｏｍａ種、アルファウイルス、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、アナプラズマ種、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、住血線虫属、アニサキス属、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、アスペルギルス種、アストロウイルス科、バベシア種、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、細菌性膣炎細菌叢、バクテロイデス種、Ｂａｌａｎｔｉｄｉｕｍ ｃｏｌｉ、バルトネラ属、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｂａｃｉｌｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ、Ｂａｔｒａｃｈｏｃｈｙｔｒｉｕｍ ｄｅｎｄｒａｂａｔｉｄｉｓ、バイリスアスカリス種、ＢＫウイルス、ブラストシスティス種、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ａｆｚｅｌｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇａｒｉｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｈｅｒｍｓｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、ボレリア種、ブルセラ種、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ、ブンヤウイルス科、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、バークホルデリア種、カリシウイルス科、カンピロバクター種、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、カンジダ種、Ｃａｐｉｌｌａｒｉａ ａｅｒｏｐｈｉｌａ、Ｃａｐｉｌｌａｒｉａ ｈｅｐａｔｉｃａ、Ｃａｐｉｌｌａｒｉａ ｐｈｉｌｉｐｐｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、クロストリジウム種、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｉｍｍｉｔｉｓ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｐｏｓａｄａｓｉｉ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｐｏｓａｄａｓｉｉ、コロラドダニ熱ウイルス（ＣＴＦＶ）、コロナウイルス、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、コクサッキーＡウイルスおよびエンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、クリミア−コンゴ出血性熱ウイルス、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、クリプトスポリジウム種、Ｃｙｃｌｏｓｐｏｒａ ｃａｙｅｔａｎｅｎｓｉｓ、サイトメガロウイルス、デングウイルス（ＤＥＮ−１、ＤＥＮ−２、ＤＥＮ−３、またはＤＥＮ−４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ、裂頭条虫属、Ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ ｍｅｄｉｎｅｎｓｉｓ、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、エキノコックス種、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ、エールリヒア種、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、腸内細菌科、Ｅｎｔｅｒｏｂｉｕｓ ｖｅｒｍｉｃｕｌａｒｉｓ、エンテロコッカス種、エンテロウイルス種、エンテロウイルス、ハエカビ目（エントモフトラ症）、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｆｌｏｃｃｏｓｕｍ、エプスタイン・バーウイルス（Ｅｐｓｔｅｉｎ−Ｂａｒｒ Ｖｉｒｕｓ）（ＥＢＶ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：Ｈ７、Ｅｕｍｙｃｅｔｏｍａ種、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａおよびＦａｓｃｉｏｌａ ｇｉｇａｎｔｉｃａ、Ｆａｓｃｉｏｌｏｐｓｉｓ ｂｕｓｋｉ、フィラリア上科、フラビウイルス、Ｆｏｎｓｅｃａｅａ ｐｅｄｒｏｓｏｉ、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、フゾバクテリウム種、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｈｉｓｐｉｄｕｍ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｓｐｉｎｉｇｅｒｕｍ、緑藻Ｄｅｓｍｏｄｅｓｍｕｓ ａｒｍａｔｕｓ、Ａ群連鎖球菌、グアナリトウイルス、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈｅａｒｔｌａｎｄウイルス、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純疱疹ウイルス１および２（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボカウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ−６）およびヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ−７）、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、Ｈｙｍｅｎｏｌｅｐｉｓ ｄｉｍｉｎｕｔａ、Ｈｙｍｅｎｏｌｅｐｉｓ ｎａｎａ、Ｉｓｏｓｐｏｒａ ｂｅｌｌｉ、ＪＣウイルス、フニンウイルス、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ、ラッサウイルス、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、リーシュマニア種、レプトスピラ種、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、リンパ球脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、マチュポウイルス、マラセジア種、マールブルクウイルス、麻疹ウイルス、麻疹ウイルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗａｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐｈｙｌｕｍ、中東呼吸器症候群コロナウイルス、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、サル痘ウイルス、ケカビ目（ムコール症）、流行性耳下腺炎ウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｓ、ノカルジア種、Ｏ１１１およびＯ１０４：Ｈ４、Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｐｉｓｔｈｏｒｃｈｉｓ ｆｅｌｉｎｅｕｓ、Ｏｐｉｓｔｈｏｒｃｈｉｓ ｖｉｖｅｒｒｉｎｉ、オルトミクソウイルス科、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ、肺吸虫種、寄生性双翅類ハエの幼虫（ｐａｒａｓｉｔｉｃ ｄｉｐｔｅｒｏｕｓ ｆｌｙ ｌａｒｖａｅ）、Ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ Ｂ１９、パスツレラ種、Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ ｈｕｍａｎｕｓ ｃａｐｉｔｉｓ、Ｐｅｄｉｃｕｌｕｓ ｈｕｍａｎｕｓ ｃｏｒｐｏｒｉｓ、Ｐｈｔｈｉｒｕｓ ｐｕｂｉｓ、Ｐｉｅｄｒａｉａ ｈｏｒｔａｅ、プラスモディウム種、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、プレボテラ種、ＰＲＮＰ、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒｏｐｉｏｎｉｃｕｓ、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、Ｒｈｉｎｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｓｅｅｂｅｒｉ、ライノウイルス、ライノウイルス類、リケッチア属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リケッチア種、リフトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビア、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｅｎｔｅｒｉｃａ ｓｕｂｓｐ．ｅｎｔｅｒｉｃａ、サルモネラ種、Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、ＳＡＲＳコロナウイルス、住血吸虫種、血清型ｔｙｐｈｉ、赤痢菌種、シンノンブルウイルス、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、ブドウ球菌、ブドウ球菌種、ブドウ球菌種、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、Ｔａｅｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ、テニア種、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｔｏｎｓｕｒａｎｓ、白癬菌種、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ ｂｅｉｇｅｌｉｉ、Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘−帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、大痘瘡、小痘瘡、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ、ウエストナイルウイルス、Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔｉ、黄熱病ウイルス、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、またはジカウイルス。
例示的な抗体分子には、３ｆ８、８ｈ９、アバゴボマブ（ａｂａｇｏｖｏｍａｂ）、アブシキシマブ、アビツズマブ（ａｂｉｔｕｚｕｍａｂ）、アブリルマブ（ａｂｒｉｌｕｍａｂ）、アクトクスマブ（ａｃｔｏｘｕｍａｂ）、アダリムマブ、アデカツムマブ（ａｄｅｃａｔｕｍｕｍａｂ）、アデュカヌマブ、アファセビクマブ（ａｆａｓｅｖｉｋｕｍａｂ）、アフェリモマブ、アフツズマブ、アラシズマブペゴール（ａｌａｃｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、ａｌｄ５１８、アレムツズマブ、アリロクマブ、アルツモマブペンテテート（ａｌｔｕｍｏｍａｂ ｐｅｎｔｅｔａｔｅ）、アマツキシマブ、アナツモマブマフェナトックス（ａｎａｔｕｍｏｍａｂ ｍａｆｅｎａｔｏｘ）、アネツマブラブタンシン（ａｎｅｔｕｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、アニフロルマブ（ａｎｉｆｒｏｌｕｍａｂ）、アンルキンズマブ（ａｎｒｕｋｉｎｚｕｍａｂ）（ｉｍａ−６３８）、アポリズマブ（ａｐｏｌｉｚｕｍａｂ）、アルシツモマブ、アスクリンバクマブ（ａｓｃｒｉｎｖａｃｕｍａｂ）、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アテゾリズマブ、アチヌマブ（ａｔｉｎｕｍａｂ）、アトリズマブ（ａｔｌｉｚｕｍａｂ）（トシリズマブ）、アトロリムマブ（ａｔｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、アベルマブ（ａｖｅｌｕｍａｂ）、バピニューズマブ（ｂａｐｉｎｅｕｚｕｍａｂ）、バシリキシマブ、バビツキシマブ、ベクツモマブ（ｂｅｃｔｕｍｏｍａｂ）、ベゲロマブ（ｂｅｇｅｌｏｍａｂ）、ベリムマブ、ベンラリズマブ、ベルチリムマブ（ｂｅｒｔｉｌｉｍｕｍａｂ）、ベシレソマブ（ｂｅｓｉｌｅｓｏｍａｂ）、ベバシズマブ、ベズロトクスマブ、ビシロマブ（ｂｉｃｉｒｏｍａｂ）、ビマグルマブ、ビメキズマブ（ｂｉｍｅｋｉｚｕｍａｂ）、ビバツズマブメルタンシン（ｂｉｖａｔｕｚｕｍａｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ブレセルマブ（ｂｌｅｓｅｌｕｍａｂ）、ブリナツモマブ、ブロンツベトマブ（ｂｌｏｎｔｕｖｅｔｍａｂ）、ブロソズマブ（ｂｌｏｓｏｚｕｍａｂ）、ボコシズマブ、ブラジクマブ（ｂｒａｚｉｋｕｍａｂ）、ブレンツキシマブベドチン、ブリアキヌマブ、ブロダルマブ、ブロルシズマブ（ｂｒｏｌｕｃｉｚｕｍａｂ）、ブロンチクツズマブ（ｂｒｏｎｔｉｃｔｕｚｕｍａｂ）、カビラリズマブ（ｃａｂｉｒａｌｉｚｕｍａｂ）、カナキヌマブ、カンツズマブメルタンシン、カンツズマブラブタンシン（ｃａｎｔｕｚｕｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、カプラシズマブ（ｃａｐｌａｃｉｚｕｍａｂ）、カプロマブペンデチド、カルルマブ（ｃａｒｌｕｍａｂ）、カロツキシマブ（ｃａｒｏｔｕｘｉｍａｂ）、カツマキソマブ、ｃｂｒ９６−ドキソルビシンイムノコンジュゲート、セデリズマブ（ｃｅｄｅｌｉｚｕｍａｂ）、セルグツズマブアムナロイキン（ｃｅｒｇｕｔｕｚｕｍａｂ ａｍｕｎａｌｅｕｋｉｎ）、セルトリズマブペゴール、セツキシマブ、ｃｈ．１４．１８、シタツズマブボガトックス（ｃｉｔａｔｕｚｕｍａｂ ｂｏｇａｔｏｘ）、シクスツムマブ、クラザキズマブ（ｃｌａｚａｋｉｚｕｍａｂ）、クレノリキシマブ、クリバツズマブテトラキセタン（ｃｌｉｖａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、コドリツズマブ（ｃｏｄｒｉｔｕｚｕｍａｂ）、コルツキシマブラブタンシン（ｃｏｌｔｕｘｉｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、コナツムマブ、コンシズマブ（ｃｏｎｃｉｚｕｍａｂ）、クレネズマブ、クロテデュマブ（ｃｒｏｔｅｄｕｍａｂ）、ｃｒ６２６１、ダセツズマブ、ダクリズマブ、ダロツズマブ、ダピロリズマブペゴール（ｄａｐｉｒｏｌｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、ダラツムマブ、デクトレクマブ（ｄｅｃｔｒｅｋｕｍａｂ）、デムシズマブ、デニンツズマブマホドチン（ｄｅｎｉｎｔｕｚｕｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、デノスマブ、デルロツキシマブビオチン（ｄｅｒｌｏｔｕｘｉｍａｂ ｂｉｏｔｉｎ）、デツモマブ（ｄｅｔｕｍｏｍａｂ）、ジヌツキシマブ（ｄｉｎｕｔｕｘｉｍａｂ）、ジリダブマブ（ｄｉｒｉｄａｖｕｍａｂ）、ドマグロズマブ（ｄｏｍａｇｒｏｚｕｍａｂ）、ドルリモマブアリトックス（ｄｏｒｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、ドロジツマブ（ｄｒｏｚｉｔｕｍａｂ）、デュリゴツマブ（ｄｕｌｉｇｏｔｕｍａｂ）、デュピルマブ、デュルバルマブ、ドゥシギツマブ（ｄｕｓｉｇｉｔｕｍａｂ）、エクロメキシマブ（ｅｃｒｏｍｅｘｉｍａｂ）、エクリズマブ、エドバコマブ（ｅｄｏｂａｃｏｍａｂ）、エドレコロマブ（ｅｄｒｅｃｏｌｏｍａｂ）、エファリズマブ、エフングマブ（ｅｆｕｎｇｕｍａｂ）、エルデルマブ（ｅｌｄｅｌｕｍａｂ）、エルゲムツマブ（ｅｌｇｅｍｔｕｍａｂ）、エロツズマブ、エルシリモマブ（ｅｌｓｉｌｉｍｏｍａｂ）、エマクツズマブ（ｅｍａｃｔｕｚｕｍａｂ）、エミベツズマブ（ｅｍｉｂｅｔｕｚｕｍａｂ）、エミシズマブ（ｅｍｉｃｉｚｕｍａｂ）、エナバツズマブ（ｅｎａｖａｔｕｚｕｍａｂ）、エンフォルツマブベドチン（ｅｎｆｏｒｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、エンリモマブペゴール（ｅｎｌｉｍｏｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、エノブリツズマブ（ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）、エノキズマブ（ｅｎｏｋｉｚｕｍａｂ）、エノチクマブ（ｅｎｏｔｉｃｕｍａｂ）、エンシツキシマブ（ｅｎｓｉｔｕｘｉｍａｂ）、エピツモマブシツキセタン（ｅｐｉｔｕｍｏｍａｂ ｃｉｔｕｘｅｔａｎ）、エプラツズマブ、エレヌマブ（ｅｒｅｎｕｍａｂ）、エルリズマブ（ｅｒｌｉｚｕｍａｂ）、エルツマキソマブ（ｅｒｔｕｍａｘｏｍａｂ）、エタラシズマブ（ｅｔａｒａｃｉｚｕｍａｂ）、エトロリズマブ（ｅｔｒｏｌｉｚｕｍａｂ）、エビナクマブ（ｅｖｉｎａｃｕｍａｂ）、エボロクマブ（ｅｖｏｌｏｃｕｍａｂ）、エキシビビルマブ（ｅｘｂｉｖｉｒｕｍａｂ）、ファノレソマブ（ｆａｎｏｌｅｓｏｍａｂ）、ファラリモマブ（ｆａｒａｌｉｍｏｍａｂ）、ファルレツズマブ、ファシヌマブ（ｆａｓｉｎｕｍａｂ）、ｆｂｔａ０５、フェルビズマブ（ｆｅｌｖｉｚｕｍａｂ）、フェザキヌマブ（ｆｅｚａｋｉｎｕｍａｂ）、フィバツズマブ（ｆｉｂａｔｕｚｕｍａｂ）、フィクラツズマブ（ｆｉｃｌａｔｕｚｕｍａｂ）、フィギツムマブ、フィリブマブ（ｆｉｒｉｖｕｍａｂ）、フランボツマブ（ｆｌａｎｖｏｔｕｍａｂ）、フレチクマブ（ｆｌｅｔｉｋｕｍａｂ）、フォントリズマブ（ｆｏｎｔｏｌｉｚｕｍａｂ）、フォラルマブ（ｆｏｒａｌｕｍａｂ）、フォラビルマブ（ｆｏｒａｖｉｒｕｍａｂ）、フレソリムマブ（ｆｒｅｓｏｌｉｍｕｍａｂ）、フルラヌマブ（ｆｕｌｒａｎｕｍａｂ）、フツキシマブ（ｆｕｔｕｘｉｍａｂ）、ガルカネズマブ（ｇａｌｃａｎｅｚｕｍａｂ）、ガリキシマブ、ガニツマブ、ガンテネルマブ、ガビリモマブ（ｇａｖｉｌｉｍｏｍａｂ）、ゲムツズマブオゾガマイシン、ゲボキズマブ、ギレンツキシマブ（ｇｉｒｅｎｔｕｘｉｍａｂ）、グレムバツムマブベドチン（ｇｌｅｍｂａｔｕｍｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ゴリムマブ、ゴミリキシマブ（ｇｏｍｉｌｉｘｉｍａｂ）、グセルクマブ、イバリズマブ、イブリツモマブチウキセタン、イクルクマブ（ｉｃｒｕｃｕｍａｂ）、イダルシズマブ、イゴボマブ（ｉｇｏｖｏｍａｂ）、ｉｍａｂ３６２、イマルマブ（ｉｍａｌｕｍａｂ）、イムシロマブ（ｉｍｃｉｒｏｍａｂ）、イムガツズマブ（ｉｍｇａｔｕｚｕｍａｂ）、インクラクマブ（ｉｎｃｌａｃｕｍａｂ）、インダツキシマブラブタンシン（ｉｎｄａｔｕｘｉｍａｂ ｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、インデュサツマブベドチン（ｉｎｄｕｓａｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、イネビリズマブ（ｉｎｅｂｉｌｉｚｕｍａｂ）、インフリキシマブ、インテツムマブ（ｉｎｔｅｔｕｍｕｍａｂ）、イノリモマブ、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、イラツムマブ（ｉｒａｔｕｍｕｍａｂ）、イサツキシマブ（ｉｓａｔｕｘｉｍａｂ）、イトリズマブ（ｉｔｏｌｉｚｕｍａｂ）、イキセキズマブ（ｉｘｅｋｉｚｕｍａｂ）、ケリキシマブ、ラベツズマブ、ランブロリズマブ、ラムパリズマブ（ｌａｍｐａｌｉｚｕｍａｂ）、ラナデルマブ（ｌａｎａｄｅｌｕｍａｂ）、ランドグロズマブ（ｌａｎｄｏｇｒｏｚｕｍａｂ）、ラプリツキシマブエムタンシン（ｌａｐｒｉｔｕｘｉｍａｂ ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）、レブリキズマブ（ｌｅｂｒｉｋｉｚｕｍａｂ）、レマレソマブ（ｌｅｍａｌｅｓｏｍａｂ）、レンダリズマブ（ｌｅｎｄａｌｉｚｕｍａｂ）、レンジルマブ（ｌｅｎｚｉｌｕｍａｂ）、レルデリムマブ（ｌｅｒｄｅｌｉｍｕｍａｂ）、レキサツムマブ（ｌｅｘａｔｕｍｕｍａｂ）、リビビルマブ（ｌｉｂｉｖｉｒｕｍａｂ）、リファスツズマブベドチン（ｌｉｆａｓｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、リゲリズマブ（ｌｉｇｅｌｉｚｕｍａｂ）、リロトマブサテトラキセタン（ｌｉｌｏｔｏｍａｂ ｓａｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、リンツズマブ、リリルマブ（ｌｉｒｉｌｕｍａｂ）、ロデルシズマブ（ｌｏｄｅｌｃｉｚｕｍａｂ）、ロキベトマブ（ｌｏｋｉｖｅｔｍａｂ）、ロルボツズマブメルタンシン（ｌｏｒｖｏｔｕｚｕｍａｂ ｍｅｒｔａｎｓｉｎｅ）、ルカツムマブ（ｌｕｃａｔｕｍｕｍａｂ）、ルリズマブペゴール（ｌｕｌｉｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、ルミリキシマブ、ルムレツズマブ（ｌｕｍｒｅｔｕｚｕｍａｂ）、マパツムマブ、マルジェツキシマブ（ｍａｒｇｅｔｕｘｉｍａｂ）、マスリモマブ（ｍａｓｌｉｍｏｍａｂ）、マブリリムマブ（ｍａｖｒｉｌｉｍｕｍａｂ）、マツズマブ、メポリズマブ（ｍｅｐｏｌｉｚｕｍａｂ）、メテリムマブ（ｍｅｔｅｌｉｍｕｍａｂ）、ミラツズマブ（ｍｉｌａｔｕｚｕｍａｂ）、ミンレツモマブ（ｍｉｎｒｅｔｕｍｏｍａｂ）、ミルベツキシマブソラブタンシン（ｍｉｒｖｅｔｕｘｉｍａｂ ｓｏｒａｖｔａｎｓｉｎｅ）、ミツモマブ（ｍｉｔｕｍｏｍａｂ）、モガムリズマブ、モナリズマブ（ｍｏｎａｌｉｚｕｍａｂ）、モロリムマブ（ｍｏｒｏｌｉｍｕｍａｂ）、モタビズマブ（ｍｏｔａｖｉｚｕｍａｂ）、モキセツモマブパスドトックス（ｍｏｘｅｔｕｍｏｍａｂ ｐａｓｕｄｏｔｏｘ）、ムロモナブ−ｃｄ３、ナコロマブタフェナトックス（ｎａｃｏｌｏｍａｂ ｔａｆｅｎａｔｏｘ）、ナミルマブ（ｎａｍｉｌｕｍａｂ）、ナプツモマブエスタフェナトクス（ｎａｐｔｕｍｏｍａｂ ｅｓｔａｆｅｎａｔｏｘ）、ナラツキシマブエムタンシン（ｎａｒａｔｕｘｉｍａｂ ｅｍｔａｎｓｉｎｅ）、ナルナツマブ（ｎａｒｎａｔｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ナビシキシズマブ（ｎａｖｉｃｉｘｉｚｕｍａｂ）、ナビブマブ（ｎａｖｉｖｕｍａｂ）、ネバクマブ（ｎｅｂａｃｕｍａｂ）、ネシツムマブ、ネモリズマブ、ネレリモマブ（ｎｅｒｅｌｉｍｏｍａｂ）、ネスバクマブ（ｎｅｓｖａｃｕｍａｂ）、ニモツズマブ、ニボルマブ、ノフェツモマブメルペンタン（ｎｏｆｅｔｕｍｏｍａｂ ｍｅｒｐｅｎｔａｎ）、オビルトキサキシマブ（ｏｂｉｌｔｏｘａｘｉｍａｂ）、オビヌツズマブ、オカラツズマブ（ｏｃａｒａｔｕｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オデュリモマブ（ｏｄｕｌｉｍｏｍａｂ）、オファツムマブ、オララツマブ、オロキズマブ（ｏｌｏｋｉｚｕｍａｂ）、オマリズマブ、オナルツズマブ（ｏｎａｒｔｕｚｕｍａｂ）、オンツキシズマブ（ｏｎｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、オピシヌマブ（ｏｐｉｃｉｎｕｍａｂ）、オポルツズマブモナトクス（ｏｐｏｒｔｕｚｕｍａｂ ｍｏｎａｔｏｘ）、オレゴボマブ、オルチクマブ（ｏｒｔｉｃｕｍａｂ）、オテリキシズマブ（ｏｔｅｌｉｘｉｚｕｍａｂ）、オトレルツズマブ（ｏｔｌｅｒｔｕｚｕｍａｂ）、オキセルマブ（ｏｘｅｌｕｍａｂ）、オザネズマブ（ｏｚａｎｅｚｕｍａｂ）、オゾラリズマブ（ｏｚｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、パギバキシマブ、パリビズマブ、パムレブルマブ（ｐａｍｒｅｖｌｕｍａｂ）、パニツムマブ、パンコマブ（ｐａｎｋｏｍａｂ）、パノバクマブ（ｐａｎｏｂａｃｕｍａｂ）、パルサツズマブ（ｐａｒｓａｔｕｚｕｍａｂ）、パスコリズマブ（ｐａｓｃｏｌｉｚｕｍａｂ）、パソツキシズマブ（ｐａｓｏｔｕｘｉｚｕｍａｂ）、パテクリズマブ（ｐａｔｅｃｌｉｚｕｍａｂ）、パトリツマブ（ｐａｔｒｉｔｕｍａｂ）、ペムブロリズマブ、ペムツモマブ（ｐｅｍｔｕｍｏｍａｂ）、ペラキズマブ（ｐｅｒａｋｉｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ、ペキセリズマブ（ｐｅｘｅｌｉｚｕｍａｂ）、ピジリズマ

ブ（ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ）、ピナツズマブベドチン（ｐｉｎａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ピンツモマブ（ｐｉｎｔｕｍｏｍａｂ）、プラクルマブ（ｐｌａｃｕｌｕｍａｂ）、プロザリズマブ（ｐｌｏｚａｌｉｚｕｍａｂ）、ポガリズマブ（ｐｏｇａｌｉｚｕｍａｂ）、ポラツズマブベドチン（ｐｏｌａｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ポネズマブ（ｐｏｎｅｚｕｍａｂ）、プレザリズマブ（ｐｒｅｚａｌｉｚｕｍａｂ）、プリリキシマブ（ｐｒｉｌｉｘｉｍａｂ）、プリトキサキシマブ（ｐｒｉｔｏｘａｘｉｍａｂ）、プリツムマブ（ｐｒｉｔｕｍｕｍａｂ）、プロ１４０、クイリズマブ（ｑｕｉｌｉｚｕｍａｂ）、ラコツモマブ（ｒａｃｏｔｕｍｏｍａｂ）、ラドレツマブ（ｒａｄｒｅｔｕｍａｂ）、ラフィビルマブ（ｒａｆｉｖｉｒｕｍａｂ）、ラルパンシズマブ（ｒａｌｐａｎｃｉｚｕｍａｂ）、ラムシルマブ、ラニビズマブ、ラキシバクマブ、レファネズマブ（ｒｅｆａｎｅｚｕｍａｂ）、レガビルマブ、レスリズマブ、リロツムマブ、リヌクマブ（ｒｉｎｕｃｕｍａｂ）、リサンキズマブ、リツキシマブ、リババズマブペゴール（ｒｉｖａｂａｚｕｍａｂ ｐｅｇｏｌ）、ロバツムマブ（ｒｏｂａｔｕｍｕｍａｂ）、ロレデュマブ（ｒｏｌｅｄｕｍａｂ）、ロモソズマブ（ｒｏｍｏｓｏｚｕｍａｂ）、ロンタリズマブ（ｒｏｎｔａｌｉｚｕｍａｂ）、ロバルピツズマブテシリン（ｒｏｖａｌｐｉｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｓｉｒｉｎｅ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、サシツズマブゴビテカン（ｓａｃｉｔｕｚｕｍａｂ ｇｏｖｉｔｅｃａｎ）、サマリズマブ（ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、サペリズマブ（ｓａｐｅｌｉｚｕｍａｂ）、サリルマブ、サツモマブペンデチド（ｓａｔｕｍｏｍａｂ ｐｅｎｄｅｔｉｄｅ）、セクキヌマブ、セリバンツマブ（ｓｅｒｉｂａｎｔｕｍａｂ）、セトキサキシマブ（ｓｅｔｏｘａｘｉｍａｂ）、セビルマブ（ｓｅｖｉｒｕｍａｂ）、シブロツズマブ（ｓｉｂｒｏｔｕｚｕｍａｂ）、ｓｇｎ−ｃｄ１９ａ、ｓｇｎ−ｃｄ３３ａ、シファリムマブ（ｓｉｆａｌｉｍｕｍａｂ）、シルツキシマブ、シムツズマブ（ｓｉｍｔｕｚｕｍａｂ）、シプリズマブ（ｓｉｐｌｉｚｕｍａｂ）、シルクマブ、ソフィツズマブベドチン（ｓｏｆｉｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ソラネズマブ、ソリトマブ（ｓｏｌｉｔｏｍａｂ）、ソネプシズマブ（ｓｏｎｅｐｃｉｚｕｍａｂ）、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、スタムルマブ（ｓｔａｍｕｌｕｍａｂ）、スレソマブ（ｓｕｌｅｓｏｍａｂ）、スビズマブ（ｓｕｖｉｚｕｍａｂ）、タバルマブ、タカツズマブテトラキセタン（ｔａｃａｔｕｚｕｍａｂ ｔｅｔｒａｘｅｔａｎ）、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、タムツベトマブ（ｔａｍｔｕｖｅｔｍａｂ）、タネズマブ、タプリツモマブパプトクス（ｔａｐｌｉｔｕｍｏｍａｂ ｐａｐｔｏｘ）、タレクスツマブ（ｔａｒｅｘｔｕｍａｂ）、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、テリモマブアリトクス（ｔｅｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、テナツモマブ（ｔｅｎａｔｕｍｏｍａｂ）、テネリキシマブ（ｔｅｎｅｌｉｘｉｍａｂ）、テプリズマブ、テプロツムマブ、テシドルマブ（ｔｅｓｉｄｏｌｕｍａｂ）、テツロマブ（ｔｅｔｕｌｏｍａｂ）、テゼペルマブ、ｔｇｎ１４１２、チシリムマブ（ｔｉｃｉｌｉｍｕｍａｂ）（トレメリムマブ）、チルドラキズマブ、チガツズマブ、チモルマブ（ｔｉｍｏｌｕｍａｂ）、チソツマブベドチン（ｔｉｓｏｔｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、ｔｎｘ−６５０、トシリズマブ（アトリズマブ）、トラリズマブ（ｔｏｒａｌｉｚｕｍａｂ）、トサトクスマブ（ｔｏｓａｔｏｘｕｍａｂ）、トシツモマブ、トベツマブ（ｔｏｖｅｔｕｍａｂ）、トラロキヌマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブエムタンシン、ｔｒｂｓ０７、トレガリズマブ（ｔｒｅｇａｌｉｚｕｍａｂ）、トレメリムマブ、トレボグルマブ（ｔｒｅｖｏｇｒｕｍａｂ）、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツビルマブ（ｔｕｖｉｒｕｍａｂ）、ウブリツキシマブ（ｕｂｌｉｔｕｘｉｍａｂ）、ウロクプルマブ、ウレルマブ、ウルトキサズマブ、ウステキヌマブ、ウトミルマブ（ｕｔｏｍｉｌｕｍａｂ）、バダスツキシマブタリリン（ｖａｄａｓｔｕｘｉｍａｂ ｔａｌｉｒｉｎｅ）、バンドルツズマブベドチン（ｖａｎｄｏｒｔｕｚｕｍａｂ ｖｅｄｏｔｉｎ）、バンチクツマブ（ｖａｎｔｉｃｔｕｍａｂ）、バヌシズマブ（ｖａｎｕｃｉｚｕｍａｂ）、バパリキシマブ（ｖａｐａｌｉｘｉｍａｂ）、バルリルマブ（ｖａｒｌｉｌｕｍａｂ）、バテリズマブ（ｖａｔｅｌｉｚｕｍａｂ）、ベドリズマブ、ベルツズマブ、ベパリモマブ（ｖｅｐａｌｉｍｏｍａｂ）、ベセンクマブ（ｖｅｓｅｎｃｕｍａｂ）、ビシリズマブ、ボバリリズマブ（ｖｏｂａｒｉｌｉｚｕｍａｂ）、ボロシキシマブ、ボルセツズマブマフォドチン（ｖｏｒｓｅｔｕｚｕｍａｂ ｍａｆｏｄｏｔｉｎ）、ボツムマブ（ｖｏｔｕｍｕｍａｂ）、キセンツズマブ（ｘｅｎｔｕｚｕｍａｂ）、ザルツムマブ、ザノリムマブ、ザツキシマブ（ｚａｔｕｘｉｍａｂ）、ジラリムマブ（ｚｉｒａｌｉｍｕｍａｂ）、ゾリモマブアリトクス（ｚｏｌｉｍｏｍａｂ ａｒｉｔｏｘ）、またはそれらの誘導体が含まれるが、それらに限定されない。

ある実施形態では、抗体分子は、ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲの定義を使用して、本明細書に記載の抗体分子のＶＨ領域の１つ、２つまたは３つのＣＤＲを含む。ある実施形態では、抗体分子は、ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲの定義を使用して、本明細書に記載の抗体分子のＶＬ領域のうちの１つ、２つまたは３つのＣＤＲを含む。ある実施形態では、抗体分子は、ＫａｂａｔまたはＣｈｏｔｈｉａのＣＤＲの定義を使用して、本明細書に記載の抗体分子のＶＨ領域の１または複数の（例えば、２または３の）ＣＤＲおよび／またはＶＬ領域の１または複数の（例えば、２または３の）ＣＤＲを含む。

ある実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載の抗体分子のＶＨ領域の１つ、２つ、３つまたは４つのフレームワークを含む。ある実施形態では、本明細書に記載の抗体分子のＶＬ領域の１つ、２つ、３つまたは４つのフレームワークを含む。ある実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載の抗体分子のＶＨ領域の１つまたはそれより多くの（例えば、２つ、３つまたは４つの）フレームワークおよび／またはＶＬ領域の１つまたはそれより多くの（例えば、２つ、３つまたは４つの）フレームワークを含む。

ある実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載された抗体分子の重鎖可変領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する重鎖可変領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載された抗体分子の軽鎖可変領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する軽鎖可変領域を含む。ある実施形態では、抗体分子は、重鎖可変領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する重鎖可変領域と、本明細書に記載された抗体分子の軽鎖可変領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する軽鎖可変領域とを含む。

ある実施形態では、抗体分子は、重鎖定常領域、例えば、本明細書に記載された抗体分子の重鎖可変領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する重鎖定常領域をさらに含む。ある実施形態では、抗体分子は、軽鎖定常領域、例えば、本明細書に記載された抗体分子の軽鎖定常領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する軽鎖定常領域をさらに含む。ある実施形態では、抗体分子は、重鎖定常領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する重鎖定常領域と、軽鎖定常領域、またはそれと実質的に同一のアミノ酸配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一なアミノ酸配列、または１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ、異なるアミノ酸配列）を有する軽鎖定常領域とをさらに含む。ある実施形態では、抗体分子は、本明細書に記載されているような抗体分子の重鎖定常領域、軽鎖定常領域、ならびに重鎖可変領域および軽鎖可変領域を含む。

本明細書に記載された抗体分子は、いくつかの有利な特性をもつことができ、それには、所望の（例えば、増加した）半減期が含まれるが、それに限定されない。例えば、抗体分子は、本明細書に記載された障害を有効に、処置し、防止し、または診断するために使用することができる。

ある実施形態では、抗体分子は、標的分子または細胞に結合する能力がある。例えば、操作された抗体分子は、親抗体分子と比較して、同じ、または実質的に同じ結合特異性および／またはアフィニティーで、標的分子または細胞に結合する能力がある。ある実施形態では、抗体分子は、高アフィニティーで、例えば、約１００ｎＭ未満、典型的には約１０ｎＭ、より典型的には、約１０〜０．０１ｎＭ、約５〜０．０１ｎＭ、約３〜０．０５ｎＭ、約１〜０．１ｎＭまたはそれより強く、例えば、約８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、１０、８、６、４、３、２、１、０．５、０．２、０．１、０．０５、または０．０１ｎＭ未満の解離定数（Ｋ_ｄ）で標的分子または細胞に結合する。ある実施形態では、抗体分子は、１×１０^−４、５×１０^−５または１×１０^−５ｓ^−１より遅いＫ_ｏｆｆで標的分子または細胞に結合する。ある実施形態では、抗体分子は、１×１０^４、５×１０^４、１×１０^５または５×１０^５Ｍ^−１ｓ^−１より速いＫ_ｏｎで標的分子または細胞に結合する。

ある実施形態では、抗体分子は、標的分子または細胞の生物学的機能を阻害し、または活性化する能力がある。例えば、操作された抗体分子は、例えばＩＣ５０、ＥＣ５０、またはＬＤ５０により決定される場合、親抗体分子と比較して、同じ、または実質的に同じレベルの有効性で、標的分子または細胞の生物学的機能を阻害し、または活性化する能力がある。

ある実施形態では、抗体分子は、標的分子または細胞上のエピトープに結合する能力がある。例えば、操作された抗体分子は、親抗体分子と比較して、標的分子または細胞上の同じ、または実質的に同じエピトープに結合する能力がある。

例示的な融合タンパク質
本明細書に記載された方法は、様々な融合タンパク質、例えば、Ｆｃ領域を含有する任意のＦｃ融合タンパク質を操作するために使用することができる。

例示的なＦｃ融合タンパク質には、ＣＴＬＡ−４ Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ベラタセプトまたはアバタセプト）、血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＶＥＧＦＲ１／ＶＥＧＦＲ２ Ｆｃ融合タンパク質、例えば、アフリベルセプトまたはＫＨ９０２）、ＩＬ−１Ｒ Ｆｃ融合タンパク質（例えば、（リロナセプト）、トロンボポエチン結合ペプチドＦｃ融合タンパク質（例えば、ロミプロスチム）、ＬＦＡ−３ Ｆｃ融合タンパク質（例えば、アレファセプト）、抗ＣＤ４０Ｌ Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＩｇＧ１のＦｃ断片に連結した、ＣＤ４０リガンド（ＣＤ４０ＬまたはＣＤ１５４）をターゲティングするドメイン抗体（ｄＡｂ）のＣ末端を含む二量体融合タンパク質、例えば、ＢＭＳ−９８６００４またはレトリズマブ（ｌｅｔｏｌｉｚｕｍａｂ））、ＴＮＦ受容体（ＴＮＦＲ）Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＩｇＧ１ Ｆｃドメインに融合した組換えＴＮＦ受容体２（ＴＮＦＲ２）、例えば、ＯＰＲＸ−１０６またはエタネルセプト）、凝固因子ＶＩＩＩ−Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＢＩＩＢ０３１、エフラロクトコグ−α、またはｒＦＶＩＩＩＦｃ）、凝固因子ＩＸ−Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＢＩＩＢ０２９またはエフトレノナコグ−α）、第ＩＸ因子Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ｒＦＩＸＦｃ）、顆粒球コロニー刺激因子Ｆｃ融合タンパク質（例えば、Ｆ−６２７）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＫＮ０１５）、アクチビン２Ｂ型受容体Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ＳＴＭ ４３４）、アクチビン受容体様キナーゼ１（ＡＬＫ−１）インヒビター受容体Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ダランテルセプト（ｄａｌａｎｔｅｒｃｅｐｔ））、ＲＮアーゼＦｃ融合体（例えば、ＲＳＬＶ−１３２）、抗アンギオポエチンペプチボディ（例えば、Ｆｃ領域に融合している、アンギオポエチン結合特性を有するペプチド、例えば、ＡＭＧ ３８６）、組織非特異性アルカリフォスファターゼ（ＴＮＳＡＬＰ）Ｆｃ融合タンパク質（例えば、アスホターゼアルファまたはＥＮＢ−００４０）、ＣＤ２４ Ｆｃ融合タンパク質、ＢＡＦＦ−Ｆｃ融合タンパク質（例えば、ブリシビモド（ｂｌｉｓｉｂｉｍｏｄ））、ＧＬＰ１ペプチド類似体Ｆｃ融合タンパク質（例えば、デュラグルチドまたはＬＹ２１８９２６５）、エリスロポエチン模倣ペプチドＦｃ融合タンパク質（例えば、エリスロポエチン模倣ペプチド−ＩｇＧ１ Ｆｃミメティボディ（ｍｉｍｅｔｉｂｏｄｙ）（例えば、ＣＮＴＯ ５２８）もしくはエリスロポエチン模倣ペプチド−ＩｇＧ４ Ｆｃ融合タンパク質ミメティボディ（例えば、ＣＮＴＯ ５３０））、またはＣＤ９５ Ｆｃ融合体（例えば、ＡＰＧ １０１またはアポセプト（ａｐｏｃｅｐｔ））が含まれるが、それらに限定されない。

動物モデル
本明細書で記載されるペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、例えば、多様な動物モデルを使用して、ｉｎ ｖｉｖｏにおいて評価することができる。例えば、動物モデルは、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の、標的分子または細胞の生物学的機能をモジュレートすることにおける有効性を試験するために使用することができる。別の例として、動物モデルはまた、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子）の、本明細書に記載された障害を処置し、防止し、または診断することにおける有効性を試験するために使用することができる。動物モデルはまた、例えば、副作用について調べ、抗体分子の濃度を、ｉｎ ｓｉｔｕで測定し、標的分子の機能と本明細書に記載される障害との相関を裏付けるのにも使用することができる。

本明細書で記載される他の障害のための例示的な動物モデルはまた、当該技術分野において公知である。本明細書で記載される抗体分子を評価するために使用しうる、例示的な動物の種類は、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、およびサルを含むがこれらに限定されない。ヒトＦｃＲｎを発現する非ヒト霊長類およびトランスジェニックマウスは、典型的には、ＰＫ解析のための最適なモデルとして使用される（Ａｖｅｒｙら、ＭＡｂｓ． ２０１６年；８巻（６号）：１０６４〜７８頁；Ｆａｎら、ＭＡｂｓ． ２０１６年；８巻（５号）：８４８〜５３頁；Ｔａｍら、ＭＡｂｓ． ２０１３年；５巻（３号）：３９７〜４０５頁）。

例えば、ヒト化ＦｃＲｎマウスは、マウスＦｃＲｎ遺伝子における欠失を行い、続いて、ヒトＦｃＲｎ遺伝子を導入する、マウス系統の創出を含む、逐次的方法において、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊバックグラウンドにおいて確立することができる。例示的なマウス系統には、例えば、Ｔｇ２７６およびＴｇ３２（Ｊａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号００４９１９および０１４５６５）が含まれる。さらなる戻し交雑および逐次的変更で、追加の系統を作製することができる。本明細書に記載されたポリペプチドを評価するために使用することができる例示的なマウスモデルには、例えば、Ｐｒｏｅｔｚｅｌら、ＢｉｏＤｒｕｇｓ． ２０１４年；２８巻（２号）：１７１〜１８０頁に記載されているような、ＦｃＲｎ−ヌルマウス、ヒト化Ｔｇ２７６ ＦｃＲｎマウス（例えば、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号００４９１９を有する、Ｂ６．Ｃｇ−Ｆｃｇｒｔ＜ｔｍ１Ｄｃｒ＞Ｔｇ（ＣＡＧ−ＦＣＧＲＴ）２７６Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ）、ヒト化Ｔｇ３２ ＦｃＲｎマウス（例えば、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号０１４５６５を有する、Ｂ６．Ｃｇ−Ｆｃｇｒｔ＜ｔｍ１Ｄｃｒ＞Ｔｇ（ＦＣＧＲＴ）３２Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ）、免疫不全ｈＦｃＲｎマウス（例えば、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号０２１１４６を有する、Ｂ６．Ｃｇ−Ｆｃｇｒｔ＜ｔｍ１Ｄｃｒ＞Ｐｒｋｄｃ＜ｓｃｉｄ＞Ｔｇ（ＣＡＧ−ＦＣＧＲＴ）２７６Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ）、Ｊａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号０１８４４１を有するＢ６．Ｃｇ−Ｆｃｇｒｔ＜ｔｍ１Ｄｃｒ＞Ｐｒｋｄｃ＜ｓｃｉｄ＞Ｔｇ（ＦＣＧＲＴ）３２Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ、およびＪａｃｋｓｏｎ研究所ストック番号１６９１９を有する、Ｂ６．Ｃｇ−Ｒａｇ１＜ｔｍ＞Ｍｏｍ＜Ｆｃｇｒｔ＞ｔｍ１Ｄｃｒ［Ｔｇ（ＣＡＧ−ＦＣＧＲＴ）２７６Ｄｃｒ／ＤｃｒＪ）が含まれるが、それらに限定されない。

医薬組成物およびキット
一部の態様では、本開示は、薬学的に許容される担体と併せて製剤化される、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を含む組成物、例えば、薬学的に許容される組成物を提示する。

本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」は、生理学的に適合性である、ありとあらゆる溶媒、分散媒、等張剤、および吸収遅延剤などを含む。担体は、静脈内投与、筋内投与、皮下投与、非経口投与、直腸投与、脊髄投与、または表皮投与（例えば、注射または注入による）に適しうる。ある特定の実施形態では、医薬組成物における抗体分子のうち約５％未満、例えば、約４％、３％、２％または１％未満が凝集物として存在する。別の実施形態では、医薬組成物における抗体分子のうち少なくとも約９５％、例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８％、９８．５％、９９％、９９．５％、９９．８％またはそれより多くが単量体として存在する。一部の実施形態では、凝集物または単量体のレベルを、クロマトグラフィー、例えば、高速液体クロマトグラフィーサイズ除外クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−ＳＥＣ）により決定する。

本明細書で明示される組成物は、様々な形態でありうる。これらは、例えば、溶液（例えば、注射用溶液および注入用溶液）、分散物または懸濁物、リポソーム、および坐剤など、液体剤形、半固体剤形、および固体剤形を含む。適切な形態は、投与および治療適用の意図される方式に依存する。典型的な適切な組成物は、注射用溶液または注入用溶液の形態でありうる。１つの適切な投与方式は、非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、筋内）投与方式である。ある実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、静脈内注入または静脈内注射により投与する。別の実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、筋内注射または皮下注射により投与する。

本明細書で使用される「非経口投与」および「非経口投与された」という語句は、通例、注射による、腸内投与および局所投与以外の投与方式を意味し、限定せずに述べると、静脈内注射および静脈内注入、筋内注射および筋内注入、動脈内注射および動脈内注入、髄腔内注射および髄腔内注入、関節包内注射および関節包内注入、眼窩内注射および眼窩内注入、心内注射および心内注入、皮内注射および皮内注入、腹腔内注射および腹腔内注入、経気管注射および経気管注入、皮下注射および皮下注入、表皮下注射および表皮下注入、関節内注射および関節内注入、被膜下注射および被膜下注入、くも膜下注射およびくも膜下注入、脊髄内注射および脊髄内注入、硬膜外注射および硬膜外注入ならびに胸骨内注射および胸骨内注入を含む。

治療用組成物は、滅菌であるものとし、製造条件下および保管条件下で安定であるものとすることが典型的である。組成物は、溶液、マイクロエマルジョン、分散物、リポソーム、または高い抗体濃度に適する、他の秩序化構造として製剤化することができる。滅菌注射用溶液は、要求に応じて、上記で数え上げた成分のうちの１つまたは組み合わせと共に、適切な溶媒中に、要求される量で、活性化合物（すなわち、抗体または抗体部分）を組み込むことに続く、濾過滅菌により調製することができる。一般に、分散物は、活性化合物を、基本分散媒と、上記で数え上げた成分に由来する要求される他の成分とを含有する滅菌ビヒクルへと組み込むことにより調製する。滅菌注射用溶液を調製するための滅菌粉末の場合、調製の好ましい方法は、有効成分に、あらかじめ滅菌濾過されたその溶液に由来する、任意のさらなる所望の成分を加えた粉末をもたらす、真空乾燥および凍結乾燥である。溶液の適正な流動度は、例えば、レシチンなど、コーティングの使用により維持することができ、分散物の場合は、要求される粒子サイズの維持により維持することができ、界面活性剤の使用により維持することができる。注射用組成物の持続吸収は、組成物中に、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩およびゼラチンを組み入れることによりもたらすことができる。

本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、様々な方法により投与することができる。当技術分野では、いくつかの方法が公知であり、多くの治療適用、予防適用、または診断適用に適切な投与経路／投与方式は、静脈内注射または静脈内注入である。例えば、抗体分子は、約１〜１００ｍｇ／ｍ^２、好ましくは、約５〜５０ｍｇ／ｍ^２、約７〜２５ｍｇ／ｍ^２の用量に達し、より好ましくは、約１０ｍｇ／ｍ^２の用量に達するように、１０ｍｇ／分未満；好ましくは、５ｍｇ／分未満であるかまたはこれと等しい速度での静脈内注入により投与することができる。当業者により察知される通り、投与経路および／または投与方式は、所望される結果に応じて変動するであろう。ある特定の実施形態では、活性化合物は、インプラント、経皮パッチ、およびマイクロカプセル化送達系を含む制御放出製剤など、化合物を、急速な放出に対して保護する担体と共に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などの、生体分解性ポリマー、生体適合性ポリマーを使用することができる。このような製剤を調製するための多くの方法は、特許になっているか、または、一般に、当業者に公知である。例えば、「Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ」、Ｊ． Ｒ． Ｒｏｂｉｎｓｏｎ編、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９７８年を参照されたい。

ある特定の実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、例えば、不活性の希釈剤または同化可能な可食性担体と共に、経口投与することができる。抗体分子（および、所望される場合、他の成分）はまた、硬質シェルまたは軟質シェルのゼラチンカプセルへと封入することもでき、錠剤へと圧縮することもでき、被験体の食餌へと直接組み込むこともできる。治療的経口投与のために、ポリペプチド（例えば、抗体分子）は、賦形剤と共に組み込み、摂取可能な錠剤、口腔用錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁物、シロップ、ウェハーなどの形態で使用することができる。抗体分子、ＡＤＣ、または抗微生物性ペプチドを、非経口投与以外で投与するために、化合物をコーティングするか、または化合物を、その不活化を防止する材料と共に共投与することが必要でありうる。治療用組成物、予防用組成物、または診断用組成物はまた、医療デバイスにより投与することもでき、当技術分野では、いくつかが公知である。

投薬レジメンは、所望される応答（例えば、治療的応答、予防的応答、または診断的応答）をもたらすように調整される。例えば、単回のボーラスを投与することもでき、いくつかに分けた用量を、ある期間にわたり投与することもでき、治療状況の要求により示されるように用量を比例して低減するか、または増大させることもできる。投与の容易さおよび投与量の均一性のために、非経口組成物を、単位剤形（ｄｏｓａｇｅ ｕｎｉｔ ｆｏｒｍ）で製剤化することが、とりわけ有利である。本明細書で使用される単位剤形とは、処置される被験体のための単位投与量として適する、物理的に個別の単位であって、各単位が、要求される医薬担体を随伴させて、所望の治療効果をもたらすように計算された、所定数量の活性化合物を含有する単位を指す。単位剤形についての仕様は、（ａ）抗体分子の固有の特徴、および、達成される、特定の治療効果、予防効果、または診断上の効果、ならびに（ｂ）当技術分野における固有の限界であって、個体における感受性の処置のために、このような抗体分子を化合させる限界により決定され、かつ、これに直接左右される。

抗体分子の治療有効量、予防有効量、または診断有効量についての、例示的で非限定的な範囲は、約０．１〜５０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約０．１〜３０ｍｇ／ｋｇ、例えば、約約１〜３０、１〜１５、１〜１０、１〜５、５〜１０、または１〜３ｍｇ／ｋｇ、例えば、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０または５０ｍｇ／ｋｇである。抗体分子は、約１〜１００ｍｇ／ｍ^２、例えば、約５〜５０ｍｇ／ｍ^２、約７〜２５ｍｇ／ｍ^２の用量に達し、例えば、約１０ｍｇ／ｍ^２の用量に達するように、１０ｍｇ／分未満；例えば、５ｍｇ／分未満であるかまたはこれと等しい速度での静脈内注入により投与することができる。投与量値は、緩和される状態の種類および重症度と共に変動しうることに注目すべきである。任意の特定の被験体のために、具体的な投薬レジメンを、ある期間にわたり、個別の必要、および組成物を投与するまたは組成物の投与を管理する人物の職業的判断に従い調整すべきであり、本明細書で明示される投与量範囲は、例示的なものであるに過ぎず、特許請求される組成物についての範囲または実施を限定することを意図するものではないことをさらに理解されたい。

本明細書の医薬組成物は、「治療有効量」、「予防有効量」、または「診断有効量」の、本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子）を含みうる。

「治療有効量」とは、所望される治療結果を達成するのに必要な投与量で、これに必要な期間にわたる有効量を指す。ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに抗体または抗体部分が、個体において所望される応答を誘発する能力などの因子に従い変動しうる。治療有効量はまた、抗体分子の任意の毒性作用または有害作用を、治療的に有益な効果が凌駕するときの量でもある。「治療有効投与量」は、典型的に、測定可能なパラメータを、非処置被験体と比べて、少なくとも約２０％、例えば、少なくとも約４０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約８０％阻害する。測定可能なパラメータは、例えば、血尿、有色の尿、泡沫状尿、疼痛、手および足における腫脹（浮腫）、または高血圧でありうる。抗体分子が、測定可能なパラメータを阻害する能力を、本明細書に記載される障害の処置、または防止における有効性を予測する動物モデル系において評価することができる。代替的に、組成物のこの特性を、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにより、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）が、標的分子または細胞の生物学的機能をモジュレートする能力について検討することにより評価することができる。

「予防有効量」とは、所望される予防結果を達成するのに必要な投与量で、これに必要な期間にわたる有効量を指す。予防用量は、被験体において、疾患の前または疾患の早期に使用されるので、予防有効量は、治療有効量未満となることが典型的であろう。

「診断有効量」とは、所望される診断結果を達成するのに必要な投与量で、これに必要な期間にわたる有効量を指す。診断有効量とは、障害、例えば、本明細書に記載される障害を、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、またはｉｎ ｖｉｖｏにおいて診断しうる量であることが典型的である。

また、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を含むキットも、本開示の範囲内にある。キットは、使用のための指示；他の試薬、例えば、標識、治療剤、または抗体分子をキレート化するか、または抗体分子を、標識もしくは治療剤もしくは放射性組成物へと他の形でカップリングするのに有用な薬剤；ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、投与用に調製するためのデバイスまたは他の材料；薬学的に許容される担体；および被験体への投与のためのデバイスまたは他の材料を含む、１つまたは複数の他の要素を含みうる。

核酸
本開示はまた、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）、例えば、ポリペプチドのＦｃ領域をコードするヌクレオチド配列を含む核酸も特徴とする。

例えば、本開示は、本明細書に記載されたＦｃ領域、例えば、本明細書に記載された変異の１個または複数を含むＦｃ領域をコードする核酸を特色とする。Ｆｃ領域は、本明細書に記載された既存のポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）のＦｃ領域から操作することができる。核酸は、本明細書に記載されたポリペプチド（抗体分子または融合タンパク質）のＦｃ領域のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、またはそれと実質的に同一のヌクレオチド配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な、および／または本明細書に記載されたストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする能力がある配列）を含みうる。

ある実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の重鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）を有するものをさらに含みうる。別の実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）をさらに含みうる。さらに別の実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の重鎖可変領域および軽鎖可変領域をコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）をさらに含みうる。

ある実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の重鎖可変領域由来の少なくとも１つ、２つまたは３つのＣＤＲをコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）をさらに含みうる。別の実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の軽鎖可変領域由来の少なくとも１つ、２つまたは３つのＣＤＲをコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）をさらに含みうる。さらに別の実施形態では、核酸は、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）の重鎖および軽鎖可変領域由来の少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つまたは６つのＣＤＲをコードするヌクレオチド配列、またはこれと実質的に相同なヌクレオチド配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）を含みうる。

ある実施形態では、核酸は、本明細書に記載されたヌクレオチド配列の部分を含む。その部分は、例えば、Ｆｃ領域、可変領域（例えば、ＶＨまたはＶＬ）；１、２、もしくは３個、もしくはそれより多い（例えば、４、５、または６個の）ＣＤＲ；または１、２、３、もしくは４個、もしくはそれより多いフレームワーク領域をコードしうる。

本明細書で開示される核酸は、デオキシリボヌクレオチドもしくはリボヌクレオチド、またはこれらの類似体を含む。ポリヌクレオチドは、一本鎖の場合もあり、二本鎖の場合もあり、一本鎖は、コード鎖の場合もあり、非コード（アンチセンス）鎖の場合もある。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチドおよびヌクレオチド類似体など、修飾ヌクレオチドを含みうる。ヌクレオチドの配列は、ヌクレオチド以外の構成要素により中断されうる。ポリヌクレオチドは、標識化構成要素とのコンジュゲーションなどにより、重合の後でさらに修飾することもできる。核酸は、組換えポリヌクレオチドの場合もあり、ゲノム、ｃＤＮＡ、半合成または合成起源のポリヌクレオチドの場合もあり、これらは、天然には存在しないか、または非天然の配置で、別のポリヌクレオチドへと連結される。

一部の態様では、適用は、本明細書で記載される核酸を含有する、宿主細胞およびベクターを特徴とする。核酸は、下記でより詳細に記載される通り、同じ宿主細胞内または別個の宿主細胞内に存在する、単一のベクターで存在する場合もあり、別個のベクターで存在する場合もある。

ベクター
本開示は、本明細書に記載されているような、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）、例えば、ポリペプチドのＦｃ領域をコードするヌクレオチド配列を含むベクターを特色とする。

例えば、本開示は、本明細書に記載されたＦｃ領域、例えば、本明細書に記載された変異の１個または複数を含むＦｃ領域をコードするヌクレオチド配列を含むベクターを特色とする。Ｆｃ領域は、本明細書に記載された既存のポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）のＦｃ領域から操作することができる。ベクターは、本明細書に記載されたポリペプチド（抗体分子または融合タンパク質）のＦｃ領域のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、またはそれと実質的に同一のヌクレオチド配列（例えば、それと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な、および／または本明細書に記載されたストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする能力がある配列）を含みうる。

ベクターは、ウイルス、プラスミド、コスミド、ラムダファージ、または酵母人工染色体（ＹＡＣ）を含むがこれらに限定されない。

多数のベクター系を利用することができる。例えば、ベクターの１つのクラスは、例えば、ウシパピローマウイルス、ポリオーマウイルス、アデノウイルス、ワクシニアウイルス、バキュロウイルス、レトロウイルス（ラウス肉腫ウイルス、ＭＭＴＶ、またはＭＯＭＬＶ）、またはＳＶ４０ウイルスなど、動物ウイルスに由来するＤＮＡエレメントを用いる。ベクターの別のクラスは、セムリキ森林ウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、およびフラビウイルスなど、ＲＮＡウイルスに由来するＲＮＡエレメントを用いる。

加えて、トランスフェクトされた宿主細胞の選択を可能とする、１つまたは複数のマーカーを導入することにより、ＤＮＡをそれらの染色体へと安定的に組み込んだ細胞を選択することもできる。マーカーは、例えば、栄養要求性宿主に対する原栄養性（ｐｒｏｔｏｔｒｏｐｙ）、殺生物剤耐性（例えば、抗生物質）、または銅などの重金属に対する耐性などをもたらしうる。選択用マーカー遺伝子は、発現させるＤＮＡ配列へと直接連結することもでき、共形質転換により、同じ細胞へと導入することもできる。ｍＲＮＡの最適な合成のためには、さらなるエレメントもまた必要とされうる。これらのエレメントは、スプライスシグナルのほか、転写プロモーター、エンハンサー、および終結シグナルも含みうる。

発現のために、発現ベクターまたはＤＮＡ配列を含有する構築物を調製したら、発現ベクターを、適切な宿主細胞へとトランスフェクトまたは導入することができる。例えば、プロトブラスト融合、リン酸カルシウム沈殿、電気穿孔、レトロウイルスによる形質導入、ウイルスによるトランスフェクション、遺伝子銃、脂質ベースのトランスフェクション、または他の従来の技法など、多様な技法を利用して、これを達成することができる。プロトブラスト融合の場合、細胞を、培地中で増殖させ、適切な活性についてスクリーニングする。

当業者には、結果として得られるトランスフェクトされた細胞を培養し、産生されたポリペプチド（例えば、抗体分子）を回収するための方法および条件が公知であり、本記載に基づき利用される、具体的な発現ベクターおよび哺乳動物の宿主細胞に応じて、変動させるか、または最適化することができる。

細胞
本開示はまた、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）をコードする核酸を含む宿主細胞も提示する。ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、本明細書に記載された方法に従って操作することができる。例えば、宿主細胞は、本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、本明細書に記載される抗体分子または融合タンパク質）のヌクレオチド配列を有する核酸分子、またはこれと実質的に相同な配列（例えば、これと、少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一であり、および／または本明細書で記載されるストリンジェンシーの条件下でハイブリダイズすることが可能な配列）、または前記核酸のうちの１つの部分を含みうる。

一部の実施形態では、本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）をコードする核酸を含むように、宿主細胞を遺伝子操作する。

ある特定の実施形態では、発現カセットを使用することにより、宿主細胞を遺伝子操作する。「発現カセット」という語句は、このような配列と適合性の宿主における遺伝子の発現に影響を及ぼすことが可能なヌクレオチド配列を指す。このようなカセットは、プロモーター、イントロンを伴うかまたは伴わないオープンリーディングフレーム、および終結シグナルを含みうる。例えば、誘導的プロモーターなど、発現を実施するのに必要または有用な、さらなる因子もまた使用することができる。

本開示はまた、本明細書で記載されるベクターを含む宿主細胞も提示する。

細胞は、真核細胞、細菌細胞、昆虫細胞、またはヒト細胞でありうるがこれらに限定されない。適切な真核細胞は、Ｖｅｒｏ細胞、ＨｅＬａ細胞、ＣＯＳ細胞、ＣＨＯ細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＢＨＫ細胞、およびＭＤＣＫＩＩ細胞を含むがこれらに限定されない。適切な昆虫細胞は、Ｓｆ９細胞を含むがこれらに限定されない。

ポリペプチドの使用
本明細書で開示されるポリペプチド（例えば、本明細書に記載される抗体分子または融合タンパク質）のほか、本明細書で開示される医薬組成物は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、およびｉｎ ｖｉｖｏにおける、治療的、予防的、および／または診断的有用性を有する。

ある実施形態では、ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、標的分子（例えば、タンパク質）または細胞の１つまたは複数の生物学的活性をモジュレート（例えば、低減（例えば、阻害、遮断または中和））するか、または増大（例えば、活性化、開始（ｉｎｉｔｉａｔｅ）または増強）する。例えば、これらのポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、標的分子または細胞の１つまたは複数の生物学的活性をモジュレートするために、培養物中の細胞に、ｉｎ ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ ｖｉｖｏで、または被験体、例えばヒト被験体に、例えばｉｎ ｖｉｖｏで、投与され得る。さらに、ある態様では、本開示は、障害が処置、予防または診断されるように、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を被験体に投与するステップを含む、被験体において障害、例えば、本明細書で記載される障害を処置、予防または診断する方法を提示する。例えば、本開示は、障害、例えば、標的分子または細胞に関連する障害（例えば、本明細書に記載される障害）を処置、予防または診断するために、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、培養物中の細胞と、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏもしくはｅｘ ｖｉｖｏで接触させるステップ、または本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を、被験体に、例えばｉｎ ｖｉｖｏで投与するステップを含む方法を提示する。

本明細書で使用される「被験体」という用語は、ヒトおよび非ヒト動物を含むことを意図する。一部の実施形態では、被験体は、ヒト被験体、例えば、本明細書で記載される障害を有する、または本明細書で記載される障害を有する危険性があるヒト患者である。「非ヒト動物」という用語は、哺乳動物および非哺乳動物、例えば、非ヒト霊長動物を含む。ある実施形態では、被験体はヒトである。本明細書で記載される方法および組成物は、本明細書で記載される障害を有するヒト患者を処置するために適切である。本明細書で記載される障害を有する患者は、本明細書で記載される障害を発症しているが、（少なくとも一時的に）無症候性である患者、本明細書で記載される障害の症状を示した患者、または本明細書で記載される障害と関連するかもしくは付随する障害を有する患者を含む。

障害を処置または防止する方法
本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、障害または状態を処置または防止するために使用することができる。ある実施形態では、ポリペプチドは、障害または状態を処置または防止するのに望ましくありうる、最適な、または改善された半減期を有する。理論により束縛されることを望まないが、ある実施形態では、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、最適な、または改善された半減期を有するポリペプチド）は、同じ、または類似した結合アフィニティーおよび／または特異性を有する別のポリペプチド（例えば、最適な、または改善された半減期を有さず、または有するように操作されていないポリペプチド）を凌ぐ１つまたは複数の利点を提供しうると考えられる。これらの利点には、増加した治療的もしくは防止的有効性、低減した投与量レジメン、または改善した薬物動態学的特性が含まうるが、それらに限定されない。ある実施形態では、ポリペプチドは、本明細書に記載された変異型Ｆｃ領域を含む。

本明細書に記載されたポリペプチドにより処置または防止することができる例示的な障害または状態には、がん（例えば、固形腫瘍または血液がん）、感染性疾患（例えば、細菌感染症またはウイルス感染症）、免疫障害（例えば、自己免疫障害）、炎症性障害、代謝性障害（例えば、糖尿病）、心血管障害、臓器移植拒絶が含まれるが、それらに限定されない。ある実施形態では、障害は慢性障害である。

がん
本明細書で記載されるポリペプチによって処置または予防され得る例示的ながんは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、副腎皮質癌、カポジ肉腫、エイズ関連リンパ腫、原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫、肛門がん、虫垂がん、星状細胞腫、非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管がん、膀胱がん、骨がん（例えば、ユーイング肉腫または骨肉腫および悪性線維性組織球腫）、脳腫瘍（例えば、星状細胞腫、脳幹神経膠腫、中枢神経系非定型奇形腫様／ラブドイド腫瘍、中枢神経系胚芽腫、中枢神経系生殖細胞腫瘍、頭蓋咽頭腫または上衣腫）、乳がん、気管支腫瘍、バーキットリンパ腫、カルチノイド腫瘍（例えば、消化管カルチノイド腫瘍）、心（心臓）腫瘍、胚芽腫、生殖細胞腫瘍、リンパ腫、子宮頸がん、胆管細胞癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性骨髄増殖性新生物、結腸がん、結腸直腸がん、頭蓋咽頭腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、乳管内上皮内癌（ＤＣＩＳ）、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、感覚神経芽細胞腫、ユーイング肉腫、頭蓋外生殖細胞腫瘍、性腺外生殖細胞腫瘍、眼がん（例えば、眼球内黒色腫または網膜芽細胞腫）、ファロピウス管がん、骨の線維性組織球腫、骨肉腫、胆嚢がん、胃（ｇａｓｔｒｉｃ／ｓｔｏｍａｃｈ）がん、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、生殖細胞腫瘍（例えば、中枢神経系腫瘍、頭蓋外腫瘍、性腺外腫瘍、卵巣がんまたは精巣がん）、妊娠性絨毛性疾患、神経膠腫、ヘアリーセル白血病、頭頸部がん、肝細胞（肝臓）がん、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、眼球内黒色腫、膵島腫瘍、膵神経内分泌腫瘍、カポジ肉腫、腎臓がん（例えば、腎細胞がんまたはウィルムス腫瘍）、ランゲルハンス細胞組織球症（ＬＣＨ）、喉頭がん、白血病（例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）またはヘアリーセル白血病）、口唇および口腔（ｏｒａｌ ｃａｖｉｔｙ）がん、肝臓がん、肺がん（例えば、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）または小細胞肺がん）、リンパ腫（例えば、エイズ関連、バーキットリンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫または原発性中枢神経系（ＣＮＳ）リンパ腫）、ワルデンストレームマクログロブリン血症、男性乳がん、骨の悪性線維性組織球腫および骨肉腫、黒色腫（例えば、眼球内（眼）黒色腫）、メルケル細胞癌、中皮腫、転移性頸部扁平上皮がん、正中管癌（ｍｉｄｌｉｎｅ ｔｒａｃｔ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、口のがん（ｍｏｕｔｈ ｃａｎｃｅｒ）、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞新生物、菌状息肉症、骨髄異形成症候群、骨髄異形成／骨髄増殖性新生物、慢性骨髄増殖性新生物、鼻腔および副鼻腔がん、鼻咽頭がん、神経芽細胞腫、口腔（ｏｒａｌ）がん、口唇および口腔（ｏｒａｌ ｃａｖｉｔｙ）がん、中咽頭がん、骨肉腫および骨の悪性線維性組織球腫、卵巣がん（例えば、上皮卵巣がんまたは生殖細胞卵巣腫瘍）、膵がん、膵神経内分泌腫瘍（膵島腫瘍）、乳頭腫、傍神経節腫、副鼻腔および鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、咽頭がん、褐色細胞腫、下垂体腫瘍、胸膜肺芽腫（ｐｌｅｕｒｏｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｂｌａｓｔｏｍａ）、腹膜がん、前立腺がん、直腸がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、肉腫（例えば、ユーイング肉腫、カポジ肉腫、骨肉腫、横紋筋肉腫、軟部組織肉腫または子宮肉腫）、セザリー症候群、皮膚がん（例えば、黒色腫、メルケル細胞癌または非黒色腫皮膚がん）、小腸がん、扁平上皮癌、精巣がん、咽喉がん、胸腺腫および胸腺癌、甲状腺がん、腎盂および尿管の移行上皮がん、尿道がん、子宮内膜子宮がん、腟がん、外陰部がん、またはそれらの転移性病変を含むがこれらに限定されない。

本明細書に記載されたポリペプチドにより処置または防止することができる例示的な感染性疾患には、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ感染症、放線菌症、アフリカ睡眠病（アフリカントリパノソーマ症）、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）、アメーバ症、アナプラズマ症、住血線虫症、アニサキス症、炭疽、ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、バベシア症、ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ感染症、細菌性肺炎、細菌性腟炎、バクテロイデス感染症、バランチジウム症、バルトネラ症、バイリスアスカリス感染症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスティス症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボツリヌス中毒（および乳児ボツリヌス中毒）、ブラジル出血熱、ブルセラ症、腺ペスト、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、ｃａｌｉｃｉｖｉｒｕｓ感染症（ｎｏｒｏｖｉｒｕｓおよびｓａｐｏｖｉｒｕｓ）、カンピロバクター症、カンジダ症（モニリア症；鵞口瘡）、毛細虫症、カリオン病、ネコ引っ掻き病、蜂巣炎、シャーガス病（アメリカトリパノソーマ症）、軟性下疳、水痘、チクングンヤ熱、クラミジア感染症、ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ感染症（台湾急性呼吸器因子またはｔｗａｒ）、コレラ、黒色分芽菌症、ツボカビ症、肝吸虫症、ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ大腸炎、コクシジオイデス症、コロラドダニ熱（ＣＴＦ）、感冒（急性ウイルス性鼻咽喉炎；急性コリーザ）、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、クリミア・コンゴ出血熱（ＣＣＨＦ）、クリプトコッカス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症（ＣＬＭ）、シクロスポラ症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、ｄｅｓｍｏｄｅｓｍｕｓ感染症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、メジナ虫症、エボラ出血熱、エキノコックス症、エーリキア症、蟯虫症（蟯虫感染症）、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、発疹チフス、伝染性紅斑（第五病）、突発性発疹（第六病）、肝蛭症、肥大吸虫症、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、フィラリア症、ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓによる食中毒、自由生活アメーバ性感染症、フゾバクテリウム感染症、ガス壊疽（クロストリジウム性筋壊死）、ジオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、ジアルジア症、鼻疽、顎口虫症、淋病、鼠径肉芽腫（鼠径リンパ肉芽腫症）、Ａ群連鎖球菌感染症、Ｂ群連鎖球菌感染症、ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ感染症、手足口病（ＨＦＭＤ）、Ｈａｎｔａｖｉｒｕｓ性肺感染症（ＨＰＳ）、ハートランドウイルス病、ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ感染症、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、腎症候性出血熱（ＨＦＲＳ）、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純ヘルペス、ヒストプラスマ症、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトｅｗｉｎｇｉｉエーリキア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症（ＨＧＡ）、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球エーリキア症、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、膜様条虫症、エプスタイン・バーウイルス伝染性単核球症（Ｍｏｎｏ）、インフルエンザ（ｆｌｕ）、イソスポーラ症、川崎病、角膜炎、ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ感染症、クールー、ラッサ熱、レジオネラ症（レジオネラ病）、レジオネラ症（ポンティアック熱）、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ症、リステリア症、ライム病（ライムボレリア症）、リンパ管フィラリア（象皮症）、リンパ性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルグ出血熱（ＭＨＦ）、麻疹、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）、類鼻疽（ウィットモア病）、髄膜炎、髄膜炎菌性疾患、横川吸虫症、微胞子虫症、伝染性軟属腫（ＭＣ）、サル痘、流行性耳下腺炎、発疹熱（地方性発疹チフス）、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ肺炎、菌腫（曖昧性除去）、ハエ幼虫症、新生児結膜炎（新生児眼炎）、（新）異型クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ、ｎｖＣＪＤ）、ノカルジア症、オンコセルカ症（河川盲目症）、オピストルキス症、パラコクシジオイデス症（南アメリカブラストミセス症）、肺吸虫症、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症（アタマジラミ）、コロモジラミ寄生症（コロモジラミ）、ケジラミ症（毛ジラミ（ｐｕｂｉｃ ｌｉｃｅ）、ケジラミ（ｃｒａｂ ｌｉｃｅ））、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、百日咳（ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）（百日咳（Ｗｈｏｏｐｉｎｇ ｃｏｕｇｈ））、ペスト、肺炎球菌感染症、ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ肺炎（ＰＣＰ）、肺炎、灰白髄炎、プレボテラ感染症、一次アメーバ性髄膜脳炎（ＰＡＭ）、進行性多巣性白質脳症、オウム病、Ｑ熱、狂犬病、回帰熱、ＲＳウイルス感染症、リノスポリジウム症、ライノウイルス感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱（ＲＶＦ）、ロッキー山紅斑熱（ＲＭＳＦ）、ロタウイルス感染症、風疹、サルモネラ症、ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）、疥癬、住血吸虫症、敗血症、細菌性赤痢（ｓｈｉｇｅｌｌｏｓｉｓ）（細菌性赤痢（Ｂａｃｉｌｌａｒｙ ｄｙｓｅｎｔｅｒｙ））、帯状疱疹（ｓｈｉｎｇｌｅｓ）（帯状疱疹（Ｈｅｒｐｅｓ ｚｏｓｔｅｒ））、天然痘（痘瘡）、スポロトリコーシス、ブドウ球菌食中毒、ブドウ球菌感染症、糞線虫症、亜急性硬化性全脳炎、梅毒、条虫症、テタヌス（開口障害）、白癬性毛瘡（かみそり負け）、頭部白癬（頭皮の白癬）、体部白癬（身体の白癬）、股部白癬（いんきんたむし）、手白癬（手の白癬）、黒癬、足白癬（アスリートフット）、爪白癬（爪真菌症）、癜風（なまず）、トキソカラ症（眼幼虫移行症（ＯＬＭ））、トキソカラ症（内臓幼虫移行症（ＶＬＭ））、トラコーマ、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症（鞭虫感染症）、結核、野兎病、腸チフス、発疹チフス、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ感染症、渓谷熱、ベネズエラウマ脳炎、ベネズエラ出血熱、Ｖｉｂｒｉｏ ｖｕｌｎｉｆｉｃｕｓ感染症、Ｖｉｂｒｉｏ ｐａｒａｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ腸炎、ウイルス性肺炎、ウエストナイル熱、白色砂毛（ｗｈｉｔｅ ｐｉｅｄｒａ）（白色砂毛（Ｔｉｎｅａ ｂｌａｎｃａ））、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ感染症、エルシニア感染症、黄熱病、ジカ熱、または接合菌症が含まれるが、それらに限定されない。

本明細書に記載されたポリペプチドにより処置または防止することができる例示的な免疫障害または状態には、アジソン病、無ガンマグロブリン血症、円形脱毛症、アミロイドーシス、強直性脊椎炎、抗ＧＢＭ／抗ＴＢＭ腎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患（ＡＩＥＤ）、軸索型＆神経細胞型ニューロパチー（ＡＭＡＮ）、ベーチェット病、類天疱瘡、キャッスルマン病（ＣＤ）、セリアック病、シャーガス病、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー（ＣＩＤＰ）、慢性再発性多病巣性骨髄炎（ＣＲＭＯ）、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡／良性粘膜類天疱瘡、コーガン症候群、寒冷凝集素症、先天性心ブロック、コクサッキー心筋炎、ＣＲＥＳＴ症候群、クローン病、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、デビック病（視神経脊髄炎）、円板状ループス、ドレスラー症候群、子宮内膜症、好酸球性食道炎（ＥｏＥ）、好酸球性筋膜炎、結節性紅斑、本態性混合型クリオグロブリン血症、エバンス症候群、線維筋痛症、線維化肺胞炎、巨細胞性動脈炎（側頭動脈炎）、巨細胞性心筋炎、糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、多発性血管炎を伴う肉芽腫症、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、橋本甲状腺炎、溶血性貧血、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病（ＨＳＰ）、妊娠性疱疹もしくは妊娠性類天疱瘡（ＰＧ）、低ガンマグロブリン血症（ｈｙｐｏｇａｍｍａｌｇｌｏｂｕｌｉｎｅｍｉａ）、ＩｇＡ腎症、ＩｇＧ４関連硬化性疾患、封入体筋炎（ＩＢＭ）、間質性膀胱炎（ＩＣ）、若年性関節炎、若年性糖尿病（１型糖尿病）、若年性筋炎（ＪＭ）、川崎病、ランバート・イートン症候群、白血球破壊性血管炎、扁平苔癬、硬化性苔癬、木質性結膜炎、線状ＩｇＡ病（ＬＡＤ）、ループス、慢性ライム病、メニエール病、顕微鏡的多発血管炎（ＭＰＡ）、混合性結合組織病（ＭＣＴＤ）、モーレン潰瘍、ムッハ・ハーベルマン病、多発性硬化症（ＭＳ）、重症筋無力症、筋炎、ナルコレプシー、視神経脊髄炎、好中球減少症、眼瘢痕性類天疱瘡、視神経炎、回帰性リウマチ（ＰＲ）、ＰＡＮＤＡＳ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓに関連した小児自己免疫性神経精神疾患）、傍腫瘍性小脳変性症（ＰＣＤ）、発作性夜間血色素尿症（ＰＮＨ）、パリー・ロンバーグ症候群、毛様体扁平部炎（末梢性ぶどう膜炎）、パーソネージ・ターナー症候群（Ｐａｒｓｏｎｎａｇｅ−Ｔｕｒｎｅｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、天疱瘡、末梢神経障害、静脈周囲脳脊髄炎、悪性貧血（ＰＡ）、ＰＯＥＭＳ症候群（多発ニューロパチー、臓器肥大、内分泌疾患、単クローン性ガンマグロブリン血症、皮膚の変化）、結節性多発動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、原発性胆汁性肝硬変、原発性硬化性胆管炎、プロゲステロン皮膚炎、乾癬、乾癬性関節炎、赤芽球癆（ＰＲＣＡ）、壊疽性膿皮症、レイノー現象、反応性関節炎、反射性交感神経性ジストロフィー、ライター症候群、再発性多発性軟骨炎、下肢静止不能症候群（ＲＬＳ）、後腹膜線維症、リウマチ熱、関節リウマチ（ＲＡ）、サルコイドーシス、シュミット症候群、強膜炎、強皮症、シェーグレン症候群、精子および精巣自己免疫、全身硬直症候群（ＳＰＳ）、亜急性細菌性心内膜炎（ＳＢＥ）、スザック症候群、交感性眼炎（ＳＯ）、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、トローザ・ハント症候群（ＴＨＳ）、横断性脊髄炎、１型糖尿病、潰瘍性大腸炎（ＵＣ）、未分化結合組織病（ＵＣＴＤ）、ぶどう膜炎、血管炎、白斑症、またはウェゲナー肉芽腫症（多発性血管炎を伴う肉芽腫症（ＧＰＡ））が含まれるが、それらに限定されない。

本明細書に記載されるポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、患者が回復するまで、患者の全身における、ポリペプチドの治療有効レベルを保つ頻度で投与することが典型的である。例えば、ポリペプチドは、少なくとも約１つ、２つ、５つ、１０、２０、３０、または４０の、ポリペプチドが、各標的分子または細胞に結合するのに十分な血清濃度を達成する頻度で投与することができる。ある実施形態では、ポリペプチドを、１、２、３、４、５、６、または７日ごと、１、２、３、４、５、または６週ごと、または１、２、３、４、５、または６か月ごとに投与する。

当技術分野では、多様なポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）を投与する方法が公知であり、下記でも記載される。使用されるポリペプチドの、適切な投与量は、被験体の年齢および体重と、使用される特定の薬物とに依存するであろう。

ポリペプチドは、それら自体で使用することもでき、第２の薬剤、例えば、抗菌剤、毒素、またはタンパク質、例えば、第２のポリペプチドへとコンジュゲートさせることもできる。この方法は、単独であるか、または第２の薬剤へとコンジュゲートさせた、ポリペプチドを、このような処置を要求する被験体に投与するステップを含む。ポリペプチドを使用して、様々な治療剤、例えば、毒素、またはこれらの混合物を送達することができる。

組み合わせ療法
ポリペプチド（例えば、抗体分子または融合タンパク質）は、他の治療と組み合わせて使用することができる。例えば、組み合わせ療法は、１つまたは複数のさらなる治療剤、例えば、本明細書に記載の１つまたは複数のさらなる治療剤と共に共製剤化され、かつ／または共投与される、ポリペプチドを含みうる。他の実施形態では、ポリペプチドを、他の治療的処置モダリティー、例えば、本明細書に記載の他の治療的処置モダリティーと組み合わせて投与する。有利には、このような組み合わせ療法は、投与される治療剤の低投与量を用い、これにより、多様な単剤療法と関連する、可能な毒性または合併症を回避しうる。

本明細書で使用される「組み合わせで」投与されるとは、２つの（またはこれを超える）異なる処置を、障害への被験体の罹患の前に、またはこの経過中に、被験体に送達することを意味する。ある実施形態では、２つまたはこれを超える処置を、予防的に、例えば、被験体が、障害を有するか、または障害を伴うと診断される前に送達する。別の実施形態では、２つまたはこれを超える処置を、被験体が、障害を発症したか、またはこれを伴うと診断された後で送達する。一部の実施形態では、重複がなされるように、１つの処置の送達は、第２の処置の送達が始まるときに、依然として行われている。本明細書では、場合によって、これを、「同時的送達」または「共時的送達」と称する。他の実施形態では、１つの処置の送達は、他の処置の送達が始まる前に終了する。いずれかの場合の一部の実施形態では、処置は、投与の組み合わせのために、より有効である。例えば、第２の処置を第１の処置の非存在下で投与した場合にみられるものより、第２の処置はより有効である、例えば、より少量の第２の処置により同等の効果が見られるか、もしくは第２の処置が症状を、より大きな程度低減するか、または第１の処置について同様の状況が見られる。一部の実施形態では、送達は、障害と関連する症状または他のパラメータの低減が、他の処置の非存在下で送達された１つの処置により観察される低減を超えるような送達である。２つの処置の効果は、部分的に相加的な場合もあり、完全に相加的な場合もあり、相加性を超える場合もある。送達は、送達される第１の処置の効果が、第２の処置が送達されるときに、なおも検出可能であるような送達でありうる。

ある実施形態では、ポリペプチドは、本明細書に記載された障害を処置または防止するために、第２の治療（例えば、追加の作用物質）と組み合わせて投与される。ある実施形態では、追加の作用物質は、第２のポリペプチド（例えば、抗体分子）、例えば、第１のポリペプチド（例えば、抗体分子）とは異なるポリペプチド（例えば、抗体分子）である。組み合わせて使用することができる例示的なポリペプチド（例えば、抗体分子）には、本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子）の任意の組み合わせが含まれるが、それに限定されない。別の実施形態では、追加の作用物質は、ポリペプチド（例えば、抗体分子）以外である。例えば、追加の作用物質は、小分子または核酸分子でありうる。さらに別の実施形態では、第２の治療は、手術、放射線療法、細胞療法（例えば、幹細胞療法）、または臓器もしくは組織移植から選択される。

ある実施形態では、第２の治療は、以下のうちの１つまたは複数から選択される治療を含む：アンドロゲン補充療法、抗ホルモン療法、抗血清療法、自己免疫増強療法、生物療法、血液照射療法、近接照射療法、心臓再同期療法（ｃａｒｄｉａｃ ｒｅｓｙｎｃｈｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、細胞療法、細胞移入療法、キレート療法、化学療法、金療法、コバルト療法、寒冷圧迫療法（ｃｏｌｄ ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、寒冷療法、電気痙攣療法、電磁療法（ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ）、電子線治療（ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、電気療法、酵素補充療法、エピジェネティック療法（ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ）、エストロゲン補充療法、体外衝撃波療法、高速中性子療法、フッ化物療法、遺伝子治療、温熱療法（ｈｅａｔ ｔｈｅｒａｐｙ）、蠕虫療法、ホルモン療法、ホルモン補充療法、宿主調節療法（ｈｏｓｔ ｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｔｈｅｒａｐｙ）、高圧酸素療法、温熱療法（ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａ ｔｈｅｒａｐｙ）、免疫抑制療法、免疫療法、術中電子線照射療法（ｉｎｔｒａｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、術中照射治療、逆さま療法（ｉｎｖｅｒｓｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、レーザー療法、光療法、リチウム療法、低レベルレーザー療法、磁気療法（ｍａｇｎｅｔ ｔｈｅｒａｐｙ）、磁気共鳴療法（ｍａｇｎｅｔｉｃ ｒｅｓｏｎａｎｃｅ ｔｈｅｒａｐｙ）、医療ガス療法（ｍｅｄｉｃａｌ ｇａｓ ｔｈｅｒａｐｙ）、医学的栄養療法（ｍｅｄｉｃａｌ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、分子シャペロン療法（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｈａｐｅｒｏｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ）、分子療法、モノクローナル抗体療法、マイナスイオン療法（ｎｅｇａｔｉｖｅ ａｉｒ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、中性子捕獲療法、中性子療法、経口補水療法、浸透圧療法、酸素療法、オゾン療法、緩和療法、粒子療法、ファージ療法、音素神経学的低クロム療法（ｐｈｏｎｅｍｉｃ ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｈｙｐｏｃｈｒｏｍｉｕｍ ｔｈｅｒａｐｙ）、光線力学的療法、光線療法、光熱療法（ｐｈｏｔｏｔｈｅｒｍａｌ ｔｈｅｒａｐｙ）、理学療法、増殖療法、タンパク質療法、陽子線療法（ｐｒｏｔｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）、パルス電磁場療法（ｐｕｌｓｅｄ ｅｌｅｃｔｒｏｍａｇｎｅｔｉｃ ｆｉｅｌｄ ｔｈｅｒａｐｙ）、ＰＵＶＡ療法、放射線療法、補水療法、呼吸療法、サルベージ療法、血清療法、幹細胞療法、定位照射療法、標的化療法、温熱療法（ｔｈｅｒｍｏｔｈｅｒａｐｙ）、ＴＫ細胞療法、寛容原性療法（ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃ ｔｈｅｒａｐｙ）、経皮持続酸素療法、紫外線療法、またはウイルス療法（ｖｉｒｏｔｈｅｒａｐｙ）。

他の障害を処置または防止するために、本明細書に記載されたポリペプチドまたは組成物と組み合わせて使用することができる例示的な治療は、本明細書における「障害を処置または防止する方法」のセクションにも記載されている。

診断法
一部の態様では、本開示は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ（例えば、生検または体液（例えば、血液、尿または脳脊髄液）試料中など、生物学的試料中）またはｉｎ ｖｉｖｏ（例えば、被験体におけるｉｎ ｖｉｖｏイメージング）において、標的分子（例えば、タンパク質）または細胞の存在を検出するための診断法を提示する。方法は、（ｉ）試料を、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、本明細書で記載される抗体分子）と接触させるか、または被験体に、ポリペプチド（例えば、抗体分子）を投与するステップと；（任意選択で）（ｉｉ）基準試料、例えば、対照試料（例えば、生検または体液（例えば、血液、尿または脳脊髄液）試料など、対照の生物学的試料）または対照の被験体を、本明細書で記載されるポリペプチド（例えば、本明細書で記載される抗体分子）と接触させるステップと；（ｉｉｉ）ポリペプチド（例えば、抗体分子）と、試料もしくは被験体、または対照試料もしくは対照の被験体中の標的分子または細胞との間の複合体の形成を検出するステップとを含み、ここで試料または被験体における複合体の形成の、対照試料または対照の被験体と比べた変化、例えば、統計学的に有意な変化が、試料中の標的分子または細胞の存在を指し示す。ポリペプチド（例えば、抗体分子）は、結合した抗体または結合しなかったポリペプチド（例えば、抗体分子）の検出を容易とするように、検出可能な物質で、直接的に標識することもでき、間接的に標識することもできる。適切な、検出可能な物質は、本明細書に記載するような、多様な酵素、補欠分子族、蛍光材料、発光材料、および放射性材料を含む。

細菌を検出するために使用される試料を指す場合の「試料」という用語は、細胞試料、細胞溶解物試料、タンパク質試料、もしくは細胞の膜抽出物試料、血液、尿またはＣＳＦなどの体液試料、または生検などの組織試料を含むがこれらに限定されない。

ポリペプチド（例えば、抗体分子）と、標的分子または細胞との複合体の形成は、標的分子または細胞に結合したポリペプチド（例えば、抗体分子）、またはこれらに結合しなかったポリペプチド（例えば、抗体分子）を測定するか、または可視化することにより検出することができる。任意の適切な検出アッセイを使用することができ、従来の検出アッセイは、酵素免疫測定アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、または免疫組織化学を含む。ポリペプチドの標識化に対する代替法として、検出可能な物質で標識化した標準物質と、標識化しないポリペプチドとを用いる競合免疫アッセイにより、試料中の標的分子または細胞の存在を、アッセイすることができる。このアッセイでは、生物学的試料と、標識化した標準物質と、ポリペプチドとを組み合わせ、非標識化結合分子に結合した標識化標準物質の量を決定する。試料中の標的分子または細胞の量は、ポリペプチド（例えば、抗体分子）に結合した標識化標準物質の量と反比例する。

本明細書に記載されたポリペプチド（例えば、抗体分子）は、本明細書に記載されたポリペプチドにより処置または防止することができる障害を診断するために使用することができる。本明細書に記載された検出または診断方法は、本明細書に記載された障害を処置または防止するために本明細書に記載された他の方法と組み合わせて使用することができる。

本開示は、以下の番号付けした項のいずれかも含む。
項１．
Ｆｃ領域を含むポリペプチドであって、前記Ｆｃ領域が変異を含み、前記ポリペプチドが、以下の特性：
ａ）参照ポリペプチドと比較して、６．０から６．５の間のｐＨにおける新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する、増加した結合アフィニティーを有する；
ｂ）７．０から７．４の間のｐＨにおける結合アフィニティーより、６．０から６．５の間のｐＨにおける、ＦｃＲｎに対する、より高い結合アフィニティーを有する；
ｃ）６．０から６．５の間のｐＨにおいてＦｃＲｎに、３００ｎＭもしくはそれ未満の解離定数（Ｋ_ｄ）で結合する；
ｄ）７．０から７．４の間のｐＨにおいてＦｃＲｎに、５０ｎＭもしくはそれより大きいＫ_ｄで結合する；
ｅ）参照ポリペプチドと比較して、Ｆｃγ受容体に対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
ｆ）参照ポリペプチドと比較して、同じ、もしくは実質的に同じ熱安定性を有する；
ｇ）参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
ｈ）参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
ｉ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、実質的に同じであるか、もしくは増加しているエフェクター機能を有する；
ｊ）参照ポリペプチドと比較して、増加したｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を有する；
ｋ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、実質的に同じであるか、もしくは増加している、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を有する；
ｌ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、もしくは実質的に同じである開発可能性特徴を有する；
ｍ）参照ポリペプチドと比較して、エピトープに対する、同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を有する；または
ｎ）参照ポリペプチドと比較して、粘膜取込みを増加させる；
のうちの３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全部を有し、ならびに、前記ポリペプチドが、少なくとも特性ａ）、ｂ）と、特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部とを有する、ポリペプチド。

項２．
少なくとも特性ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、および特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部を有する、項１に記載のポリペプチド。

項３．
少なくとも特性ａ）、ｂ）と、特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部と、特性ｃ）、ｄ）、ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４、５、６個、または全部とを有する、項１または２に記載のポリペプチド。

項４．
ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ｐＨ６．０におけるＦｃＲｎに対する結合アフィニティーが、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍増加している、項１から３のいずれかに記載のポリペプチド。

項５．
ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ６．０におけるＦｃＲｎに対する結合アフィニティーが、ｐＨ ７．４におけるそれより、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍高い、項１から４のいずれかに記載のポリペプチド。

項６．
ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ６．０において２５０ｎＭまたはそれ未満、２００ｎＭまたはそれ未満、１５０ｎＭまたはそれ未満、１００ｎＭまたはそれ未満、５０ｎＭまたはそれ未満、２５ｎＭまたはそれ未満、１０ｎＭまたはそれ未満、５ｎＭまたはそれ未満、２ｎＭまたはそれ未満、１ｎＭまたはそれ未満、０．５ｎＭまたはそれ未満、０．２ｎＭまたはそれ未満、０．１ｎＭまたはそれ未満、０．０５ｎＭまたはそれ未満、０．０２ｎＭまたはそれ未満、０．０１ｎＭまたはそれ未満、２５ｎＭから０．１ｎＭの間の、２０ｎＭから０．５ｎＭの間の、１５ｎＭから１ｎＭの間の、１０ｎＭから５ｎＭの間の、あるいは２０ｎＭから１０ｎＭの間の解離定数（Ｋ_ｄ）でＦｃＲｎに結合する、項１から５のいずれかに記載のポリペプチド。

項７．
ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ７．４において６０ｎＭまたはそれより大きな、８０ｎＭまたはそれより大きな、１００ｎＭまたはそれより大きな、１５０ｎＭまたはそれより大きな、２００ｎＭまたはそれより大きな、５００ｎＭまたはそれより大きな、５０ｎＭから５００ｎＭの間の、あるいは１００ｎＭから２５０ｎＭの間のＫ_ｄでＦｃＲｎに結合する、項１から６のいずれかに記載のポリペプチド。

項８．
ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、もしくはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、もしくは全部に対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、もしくはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、もしくは全部に対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から７のいずれかに記載のポリペプチド。

項９．
ｓｙｐｒｏオレンジアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、融解温度を１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、または１０℃以下だけ、増加または減少させる、項１から８のいずれかに記載のポリペプチド。

項１０．
ＥＬＩＳＡにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＣ１ｑに対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から９のいずれかに記載のポリペプチド。

項１１．
ＥＬＩＳＡにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から１０のいずれかに記載のポリペプチド。

項１２．
参照ポリペプチドと比較して、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）のうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）のうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から１１のいずれかに記載のポリペプチド。

項１３．
動物モデルにおいて決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｖｏでの半減期が、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍、増加している、項１から１２のいずれかに記載のポリペプチド。

項１４．
参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から１３のいずれかに記載のポリペプチド。

項１５．
参照ポリペプチドと比較して、安定性、溶解度、凝集、または発現レベルのうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、１０％、２０％、３０％、４０％、または５０％以下だけ、変化させる、項１から１４のいずれかに記載のポリペプチド。

項１６．
参照ポリペプチドと比較して、結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、項１から１５のいずれかに記載のポリペプチド。

項１７．
トランスサイトーシスアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、粘膜取込みを、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍、増加させる、項１から１６のいずれかに記載のポリペプチド。

項１８．
前記参照ポリペプチドが、野生型Ｆｃ領域、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な、もしくは１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ異なるアミノ酸配列を含むＦｃ領域を含む、項１から４、または８から１７のいずれかに記載のポリペプチド。

項１９．
前記変異がＣＨ２ドメイン内の残基においてである、項１から１８のいずれかに記載のポリペプチド。

項２０．
前記変異がＣＨ３ドメイン内の残基においてである、項１から１８のいずれかに記載のポリペプチド。

項２１．
ＣＨ２ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異、およびＣＨ３ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異を含む、項１から２０のいずれかに記載のポリペプチド。

項２２．
ＣＨ２ドメインおよび／またはＣＨ３ドメイン以外の領域内の残基における変異をさらに含む、項１から２１のいずれかに記載のポリペプチド。

項２３．
前記変異が、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインとの間のリンカー領域のコンフォメーションを変化させないか、または実質的に変化させない、項１から２２のいずれかに記載のポリペプチド。

項２４．
前記変異が、表面領域上に、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれより多く連続した疎水性または芳香族残基を導入しない、項１から２３のいずれかに記載のポリペプチド。

項２５．
抗体分子を含む、項１から２４のいずれかに記載のポリペプチド。

項２６．
ＩｇＧを含む、項１から２５のいずれかに記載のポリペプチド。

項２７．
ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４を含む、項１から２６のいずれかに記載のポリペプチド。

項２８．
重鎖免疫グロブリン可変領域、軽鎖免疫グロブリン可変領域、またはその両方を含む、項１から２７のいずれかに記載のポリペプチド。

項２９．
２つの重鎖免疫グロブリン可変領域と２つの軽鎖免疫グロブリン可変領域の四量体を含む、項１から２８のいずれかに記載のポリペプチド。

項３０．
全長抗体分子を含む、項１から２９のいずれかに記載のポリペプチド。

項３１．
抗体分子の断片を含む、項１から３０のいずれかに記載のポリペプチド。

項３２．
キメラ抗体分子またはマウス抗体分子を含む、項１から３１のいずれかに記載のポリペプチド。

項３３．
ヒト抗体分子またはヒト化抗体分子を含む、項１から３２のいずれかに記載のポリペプチド。

項３４．
融合タンパク質を含む、項１から２４のいずれかに記載のポリペプチド。

項３５．
以下：
（ｉ）ＦｃＲｎと相互作用する表面領域内の残基における変異；
（ｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿う周辺残基である残基における変異；
（ｉｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基における変異；
（ｉｖ）Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、もしくはＭ２５２のうちの１、２、３、４、５個、もしくは全部を含む、ヘリックスのコンフォメーション動力学を増強する、ヘリックス接触残基である残基における変異；または
（ｖ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってヒスチジンのｐＫをモジュレートするか、もしくはＦｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってのヒスチジンの導入である変異
のうちの１、２、３、４個、または全部を含む、項１から３４のいずれかに記載のポリペプチド。

項３６．
ＦｃＲｎと相互作用する表面領域内の残基における変異を含む、項１から３５のいずれかに記載のポリペプチド。

項３７．
前記変異が、Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基における変異である、項３６に記載のポリペプチド。

項３８．
Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全てにおける複数の変異を含む、項１から３７のいずれかに記載のポリペプチド。

項３９．
Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿う周辺残基である残基における変異を含む、項１から３８のいずれかに記載のポリペプチド。

項４０．
前記変異が、Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基における変異である、項３９に記載のポリペプチド。

項４１．
Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９個、または全てにおける複数の変異を含む、項１から４０のいずれかに記載のポリペプチド。

項４２．
Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基における変異を含む、項１から４１のいずれかに記載のポリペプチド。

項４３．
前記変異が、Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基における変異である、項４２に記載のポリペプチド。

項４４．
Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７個、または全てにおける複数の変異を含む、項１から４３のいずれかに記載のポリペプチド。

項４５．
Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、またはＭ２５２のうちの１、２、３、４、５個、または全部を含む、ヘリックスのコンフォメーション動力学を増強するヘリックス接触残基である残基における変異を含む、項１から４４のいずれかに記載のポリペプチド。

項４６．
前記変異は、Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基における変異である、項４５に記載のポリペプチド。

項４７．
Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全てにおける複数の変異を含む、項１から４６のいずれかに記載のポリペプチド。

項４８．
Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってのヒスチジンの導入である変異を含む、項１から４７のいずれかに記載のポリペプチド。

項４９．
表１に記載される１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれより多くの変異、あるいは１個または複数の変異の組み合わせを含む、項１から４８のいずれかに記載のポリペプチド。

項５０．
前記変異が、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、またはそれらの組合せ以外である、項１から４９のいずれかに記載のポリペプチド。

項５１．
前記変異が、残基Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０、Ｍ４２８、Ｎ４３４、Ｎ４３４、Ｔ３０７、Ｅ３８０、Ｎ４３４、Ｍ２５２、Ｓ２５４、Ｔ２５６、またはそれらの組合せ以外の残基における変異である、項１から５０のいずれかに記載のポリペプチド。

項５２．
以下の１つまたは複数の変異：
（ｉ）Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ；
（ｉｉ）Ｌ３０９Ｎ；
（ｉｉｉ）Ｔ２５０ＱおよびＭ４２８Ｌ；
（ｉｖ）Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４Ａ；
（ｖ）Ｎ４３４Ａ；
（ｖｉ）Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａ；
（ｖｉｉ）Ｍ２５２Ｗ；
（ｖｉｉｉ）Ｖ３０８Ｆ；
（ｉｘ）Ｖ３０８ＦおよびＮ４３４Ｙ；または
（ｘ）Ｈ４３５Ａ、
のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９個、または全てを有しない、項１から５１のいずれかに記載のポリペプチド。

項５３．
Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、またはＴ２５６Ｅから選択される第１の変異、およびＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ以外の表１中の変異から選択される第２の変異を含む、項１から５２のいずれかに記載のポリペプチド。

項５４．
エフェクター機能を増加させる、前記Ｆｃ領域における変異をさらに含む、項１から５３のいずれかに記載のポリペプチド。

項５５．
前記変異が、Ｓ２３９、Ａ３３０、Ｉ３３２、Ｆ２４３、Ｇ２３６、またはそれらの組み合わせから選択される残基においてである、項５４に記載のポリペプチド。

項５６．
エフェクター機能を減少させる、前記Ｆｃ領域における変異をさらに含む、項１から５５のいずれかに記載のポリペプチド。

項５７．
前記変異が、Ｋ３２２、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｐ３３１、Ｎ２９７、またはそれらの組み合わせから選択される残基においてである、項５６に記載のポリペプチド。

項５８．
前記Ｆｃ領域が、以下：
（ａ）Ｔ２５６Ｄ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｈ２８５Ｎ／Ｔ３０７Ｑ／Ｎ３１５Ｄ、Ｈ２８５Ｄ／Ｔ３０７Ｑ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ３０７Ｑ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ２５６Ｄ／Ｎ２８６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、もしくはＴ２５６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖから選択される変異の組み合わせのうちの１、２、３、４、５個、もしくは全部；
（ｂ）Ｆｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異もしくは変異の組み合わせ、または
（ｃ）（ａ）と（ｂ）の両方
を含む、項１から５７のいずれかに記載のポリペプチド。

項５９．
（ｉ）Ｔ２５６、Ｑ３１１、およびＡ３７８；
（ｉｉ）Ｈ２８５、Ｔ３０７、およびＮ３１５；
（ｉｉｉ）Ｈ２８５、Ｔ３０７、およびＡ３７８；
（ｉｖ）Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８；
（ｖ）Ｔ２５６、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８；または
（ｖｉ）Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８
から選択される残基における変異を含む、項１から５８のいずれかに記載のポリペプチド。

項６０．
（ｉ）Ｔ２５６Ｄ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；
（ｉｉ）Ｈ２８５Ｎ、Ｔ３０７Ｑ、およびＮ３１５Ｄ；
（ｉｉｉ）Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、およびＡ３７８Ｖ；
（ｉｖ）Ｔ３０７Ｑ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；
（ｖ）Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；または
（ｖｉ）Ｔ２５６Ｄ、Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ
から選択される変異を含む、項１から５９のいずれかに記載のポリペプチド。

項６１．
前記Ｆｃ領域以外の領域における変異をさらに含む、項１から６０のいずれかに記載のポリペプチド。

項６２．
複数の変異を含み、少なくとも１個の変異が代償性または有益な変異である、項１から６１のいずれかに記載のポリペプチド。

項６３．
単離されたポリペプチドである、項１から６２のいずれかに記載のポリペプチド。

項６４．
合成ポリペプチドである、項１から６２のいずれかに記載のポリペプチド。

項６５．
項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドを含む組成物。

項６６．
薬学的に許容される担体をさらに含む、項６５に記載の組成物。

項６７．
項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸分子。

項６８．
項６７に記載の核酸分子を含むベクター。

項６９．
項６７に記載の核酸分子または項６８に記載のベクターを含む細胞。

項７０．
項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドおよび前記ポリペプチドの使用に関する指示を含むキット。

項７１．
項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドを含む容器。

項７２．
ポリペプチドを生成する方法であって、項６９に記載の細胞を、抗体分子の生成を可能にする条件下で培養し、それにより、前記ポリペプチドを生成するステップを含む、方法。

項７３．
前記ポリペプチドを単離または精製するステップをさらに含む、項７２に記載の方法。

項７４．
障害を処置する方法であって、それを必要としている被験体に、有効量の、項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは項６５もしくは６６に記載の組成物を投与し、それにより前記障害を処置するステップを含む、方法。

項７５．
被験体において障害を処置することにおける使用のための、項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは項６５もしくは６６に記載の組成物。

項７６．
被験体における障害の処置のための医薬の製造における、項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは項６５もしくは６６に記載の組成物の使用。

項７７．
分子を検出する方法であって、被験体由来の細胞または試料を、項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドと接触させ、それにより前記分子を検出するステップを含む、方法。

ＩｇＧの複数のＦｃ受容体（例えば、ＦｃＲｎ、Ｃ１ｑ、ＴＲＩＭ２１、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、およびＦｃγＲＩＩＩａ）との係合を調べるために、構造およびネットワークに基づいたフレームワークを開発した。このフレームワークを使用して、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用を支配する特色、およびｐＨ特異的様式でＦｃＲｎ結合を増強するための複数の異なる経路を同定した。ネットワーク解析により、ＦｃＲｎ最適化変異の遠位ＦｃγＲの係合へのアロステリックな影響を研究するためのレンズが提供された。これらの原理を適用して、ロバストな生物物理学的特性および活性化受容体への野生型様結合を有する、ＦｃＲｎ結合を増強する別々のＦｃ改変体のパネルを操作した。これらのＦｃ改変体を有する対照ポリペプチドは、９倍を超える半減期の改善、およびロバストなエフェクター機能、例えば、ＡＤＣＣ、ＡＤＣＰ、ＣＤＣ、およびＴＲＩＭ２１により媒介されるＡＤＩＮを示している。

（実施例１：構造特徴付け、およびＦｃ−ＦｃＲｎ相互作用の分子的特色）
ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインおよびヒト血清アルブミンとの複合体内のヒトＦｃＲｎタンパク質の共結晶構造が、最近、報告された（Ｏｇａｎｅｓｙａｎら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１４年 ２８９巻（１１号）：７８１２〜２頁）。その構造（図２０Ａ）の観察により、ＦｃＲｎ分子のアルファサブユニットとベータサブユニットの両方がＦｃドメインへの結合に関与して、ＦｃのＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの両方と接触していることが示されている。主な相互作用は、ＦｃＲｎ側のアルファサブユニットとＦｃ側のＣＨ２ドメインにより媒介されている。結合のｐＨ特異的性質は、３１０位および４３５位（Ｋａｂａｔナンバリング）におけるヒスチジン残基により駆動され、そのヒスチジン残基は、酸性ｐＨにおいてプロトン付加を受け、ＦｃＲｎの１１５位におけるグルタミン酸および１３０位におけるアスパラギン酸と重要な接触をなす。２個のヒスチジン残基のいずれかの変異は、ＦｃのＦｃＲｎとの結合アフィニティーを有意に低下させる（Ｏｇａｎｅｓｙａｎら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１４年 ２８９巻（４３号）：２９８７４〜８０頁；Ｒａｇｈａｖａｎら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９５年 ３４巻（４５号）：１４６４９〜５７頁）。Ｈ３１０およびＨ４３５に加えて、いくつかの他のＦｃ残基（Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ４３３、Ｎ４３４、およびＹ４３６）が、ＦｃＲｎと分子的に接触するのに関与している。

Ｆｃの構造は、異なるｐＨにおいて解かれている（Ｃｒｉｓｐｉｎら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ、２０１３年 １１０巻（３８号）：Ｅ３５４４〜６頁；Ａｈｍｅｄら、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、２０１４年 ４２６巻（１８号）：３１６６〜７９頁；Ｃｈｅｎら、ＡＣＳ Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ、２０１６年 １１巻（７号）：１８５２〜６１頁）。ｐＨ４．０（ｐｄｂ ｉｄ ４ＢＹＨ）および６．５（ｐｄｂ ｉｄ ４Ｑ７Ｄ）におけるＦｃの結晶構造の重ね合わせにより、いくつかのわずかな変化が明らかにされ、その変化には、２５０−ヘリックスの側方変位、およびＣＨ２の相対的配向における違いが含まれる（図２０Ｂ）。Ｍ２５２およびＩ２５３などのＦｃＲｎ結合性アミノ酸残基が２５０−ヘリックス上に位置することを考えると、観察された、そのヘリックスの変位は、ＦｃＲｎ結合に影響することが予想される（Ｏｇａｎｅｓｙａｎら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１４年 ２８９巻（１１号）：７８１２〜２頁）。さらに、ＣＨ３に対してのＣＨ２の相対的配向における違いは、ＣＨ２領域のコンフォメーション柔軟性を強調する（図２０Ｂ）（Ｆｒａｎｋら、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、２０１４年 ４２６巻（８号）：１７９９〜８１１頁）。ＦｃＲｎ−Ｆｃ界面がＦｃのＣＨ２／ＣＨ３ドメインの両方にわたって見出されることを考えると、ＣＨ２ドメインのコンフォメーション動力学もまた、ＦｃＲｎ結合に影響することが予想される。酸性および中性のｐＨにおけるＦｃＲｎの存在下および非存在下でのＦｃ残基に関する重水素交換研究により、ＦｃＲｎのＦｃ分子への結合が、その結合性Ｆｃ残基に保護を与えることが示された；しかしながら、ＦｃＲｎ分子の非存在下では、酸性ｐＨにおける２５０−ヘリックス残基は、重水素交換の増強を示し、ｐＨ変化が、この領域に関してコンフォメーション変化を誘導することを示唆している（Ｗａｌｔｅｒｓら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１６年 ２９１巻（４号）：１８１７〜２５頁；Ｊｅｎｓｅｎら、Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ、２０１７年 １６巻（３号）：４５１〜４５６頁）。

酸性ｐＨにおけるＦｃのＦｃＲｎとの係合の強度の解析により、ヒトＦｃＲｎがヒトＦｃドメインに、弱いアフィニティー（＞６００ｎＭ）で結合することが明らかにされる。動態パラメータによりさらに、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用の会合速度（ｋ_ｏｎ 約１０^５Ｍ^−１ｓ^−１）が典型的な抗体−抗原相互作用に匹敵するが、より低い結合アフィニティーは、主に、Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用の速い解離速度（ｋ_ｏｆｆ 約０．１ｓ^−１）によることが示される（Ｓｕｚｕｋｉら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１０年 １８４巻（４号）：１９６８〜７６頁）。ＣＨ２サブドメインのコンフォメーション柔軟性は、ＦｃＲｎ結合の不十分なｋ_ｏｆｆに寄与すると考えられる。Ｆｃ−ＦｃＲｎ相互作用のｏｆｆ速度を改善することは、半減期の改善にとって鍵となる一面として働きうる（Ｄａｔｔａ−Ｍａｎｎａｎら、Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２００７年 ２８２巻（３号）：１７０９〜１７頁）。

それに関して、変異がＦｃＲｎ相互作用および解離速度（ｋ_ｏｆｆ）に作用しうる、Ｆｃ残基の４つのセットを同定した（図２１Ａ）。これは、ＦｃＲｎと直接的に接触する残基、加えて、相互作用表面を修飾する可能性がある、周辺残基および非表面露出残基、および２５０−ヘリックス動力学に影響する可能性がある残基を含む。実際、これらの位置の一部は、以前、調べられており、Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ（ＹＴＥ）、Ｍ４２８Ｌ／Ｎ４３４Ｓ（ＬＳ）、Ｔ３０７Ａ／Ｅ３８０Ａ／Ｎ４３４Ａ（ＡＡＡ）、Ｔ２５０Ｑ／Ｍ４２８Ｌ（ＱＬ）、Ｖ３０８Ｐなどの半減期増強性変異体は、列挙された部位における変異の組み合わせを含む。

解析において、各残基の役割を、まず、ｉｎ ｓｉｌｉｃｏで調べ、その残基により媒介される相互作用のネットワークを同定した（図２１Ｂ）。変異の特定のセットを、Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面における疎水性相互作用を増強するように、およびＦｃ−ＦｃＲｎ界面の周辺における極性および静電気的相互作用を増強するようにデザインした。界面近くの非接触残基の変異は、静電荷相補性、およびｋ_ｏｆｆ速度を低下させることによりアフィニティーを増強することができる（ＬｅｅおよびＴｉｄｏｒ、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ、２００１年 １０巻（２号）：３６２〜７７頁；Ｗｈｉｔｅｈｅａｄら、Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２０１２年 ３０巻（６号）：５４３〜８頁）。Ｆｃ上のＦｃＲｎ結合部位は、細胞内受容体ＴＲＩＭ２１、抗体精製に使用されるプロテインＡ、およびＣＤＣ活性のためのＩｇＧの六量体化中に形成されるＦｃ−Ｆｃ相互作用界面の結合部位と重複を有する。各位置における置換を、ＴＲＩＭ２１、プロテインＡ、およびＦｃへのこれらの結合への影響について評価した。３０個より多い異なる位置が置換のために選択された。個々の変異の組み合わせは、以下のガイド原理に基づいてデザインされた：（ａ）溶媒イオンへの結合およびＩｇＧの熱安定性への影響を最小限にするために、電荷または疎水性の大きなクラスターの導入を避けること、および（ｂ）静電気的または疎水的だけでなく、相互作用の型の多様性を組み込むこと、（ｃ）ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインにわたって変異を含むこと。これらの検討事項に基づいて、１５０個より多い固有の変異体組み合わせがデザインされ、実験的に評価された。

デザインされたＦｃ改変体を、アクトクスマブＦａｂまたはモタビズマブＦａｂのいずれかに組み込んだＩｇＧ１を、組換えにより発現させ、以下の２つの異なるプロトコールを使用するバイオレイヤー干渉分光法によりヒトＦｃＲｎへの結合について評価した：ＦｃＲｎはＮｉＮＴＡバイオセンサー上にあり、ＩｇＧを検体とする、およびＩｇＧは抗ＣＨ１バイオセンサー上にあり、ＦｃＲｎを検体とする。そのアッセイを使用して、ｐＨ ６．０における結合、続いて、ｐＨ ６．０およびｐＨ ７．４における解離、加えて、ｐＨ ７．４における結合および解離を定量化した（図１１Ａ）。Ｐ２５７およびＶ３０８に変異が組み込まれているＦｃ改変体は、ｐＨ ６．０において高アフィニティーを有したが、ｐＨ ７．４において著しくより遅いｏｆｆ速度を提示し、さらなる解析には検討されなかった。１０個より多い異なる改変体のＫ_ｄが、ＷＴ Ｆｃを有するＩｇＧのＫ_ｄと比較して５倍超減少した。さらに、これらの改変体は、ｋ_ｏｆｆを、２．５倍超減少させた（図２２）。

Ｆｃドメイン上のＦｃＲｎ結合部位は、複合体結晶構造（図２７Ａ）から決定されるように、プロテインＡおよびＴｒｉｍ２１の結合部位とかなり重複する。Ｆｃドメインはまた、Ｃ１ｑに結合して、ＣＤＣを媒介するが、Ｃ１ｑ結合部位は、Ｆｃ上のＦｃＲｎ結合部位と重複しない。Ｃ１ｑは、天然では、六量体として見出され、Ｆｃドメインのホモ六量体アセンブリが、より良好なＣ１ｑ結合だけでなく、より良好なＣＤＣも生じることが予想される。ホモ六量体の形成のためのＦｃ−Ｆｃ界面は、ＦｃＲｎ結合部位と重複する（図２７Ａ）。Ｆｃドメインの結晶構造の重ね合わせにより、これらの構造におけるＣＨ２ドメインの配向が、ＣＨ３ドメインに対して様々であることが示され、これはＣＨ２ドメインのコンフォメーション柔軟性を示している（図２７Ｂ）。ＦｃＲｎ結合部位は、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインの両方にわたる界面にあるため、このコンフォメーション柔軟性は、その結合にとって重要でありうる。

（実施例２：Ｆｃ領域変異のｐＨ特異的Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合への効果）
Ｆｃ改変体ＦｃＭｕｔ００８およびＦｃＭｕｔ０１５のＦｃＲｎ結合アフィニティーを、Ｏｃｔｅｔにより評価した。抗体は、Ｏｃｔｅｔチップ上に、抗ＣＨ１抗体により固定化され、ＦｃＲｎは溶液中にあった。図６に示されているように、ＦｃＭｕｔ００８およびＦｃＭｕｔ０１５は、ＦｃＲｎに対するアフィニティーを増加させた。結合はｐＨ特異的であり、ｐＨ ６．０における結合の増加が観察された。

（実施例３：細胞に基づいたＦｃＲｎ結合競合アッセイ）
細胞に基づいた競合アッセイは、Ｆｃ改変体の相対的結合における差を示すための、ロバストで、特異的で、線形のアッセイを提供する。ＦｃＲｎ発現細胞を、ＦｃＲｎアルファおよびβ２ｍの一過性トランスフェクションにより得た。細胞を、ＩｇＧの希釈物および一定濃度の蛍光標識Ｆｃ（Ｆｃ−Ａ４８８）と共にｐＨ ６．０でインキュベートした。細胞に結合した蛍光を、ＦＡＣＳにより読み取った。その結果は図７に示されている。ＦｃＭｕｔ００８およびＦｃＭｕｔ０１５は、ｐＨ ６．０においてＦｃＲｎ結合の改善を示した。

（実施例４：Ｆｃ領域変異のＦｃγＲ係合への効果）
例示的な変異体抗体分子のＦｃγＲＩおよびＦｃγＲＩＩＩａへの結合を決定した。図８に示されているように、ＦｃＭｕｔ００８およびＦｃＭｕｔ０１５は、ＦｃγＲ係合を保持し、場合によっては、それを増強した。

（実施例５：Ｆｃ領域変異のＦｃ改変体の熱安定性および生物物理学的特徴付けへの効果）
例示的な変異体抗体分子の熱安定性を決定した。熱安定性を、ＳＹＰＲＯオレンジにより測定した。図９に示されているように、ＦｃＭｕｔ００８およびＦｃＭｕｔ０１５は高い融解温度を保持した。

例示的なＦｃ改変体を組み込むことの生物物理学的特質への影響を実験的に評価した。モタビズマブＦａｂへＦｃ改変体を組み込んだＩｇＧを、ＳＥ−ＨＰＬＣにおいて試験した。全ての試料は、野生型Ｆｃと類似した保持時間で溶出し、きれいな単量体プロファイルを提示し、凝集体は検出されなかった（図２３）。ＩｇＧをまた、示差走査型蛍光定量法（ＤＳＦ）により、ＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインの熱安定性について評価した。示差走査型熱量測定法により測定された場合、野生型ヒトＣＨ２ドメインおよびＣＨ３ドメインの融解温度（Ｔ_ｍ）は、それぞれ、およそ７０℃および８１．５℃である（Ｉｏｎｅｓｃｕら、Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ、２００８年 ９７巻（４号）：１４１４〜２６頁）。この実施例におけるＤＳＦ実験結果は、同じ様な結果を生じ、それぞれ、６８．８℃および８０．８℃のＣＨ２およびＣＨ３ Ｔ_Ｍであった。半減期が延びたＦｃ改変体ＹＴＥは、ＣＨ２ドメインのＴ_Ｍを６．７℃低下させることが報告されている（Ｍａｊｕｍｄａｒら、ＭＡｂｓ、２０１５年 ７巻（１号）：８４〜９５頁）。この実施例に記載された実験において、ＹＴＥのＣＨ２ドメインのＴ_Ｍは、ＷＴより７．２℃低かった。加えて、２４７、２５７、および３０８における変異は、ＣＨ２のＴ_Ｍに有意に影響を及ぼした。例示的なＦｃ改変体（ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、ＦｃＭｕｔ２２９）は、熱的に安定であり、ＣＨ２ドメインのＴ_Ｍは６４℃より高かった（図２３）。

（実施例６：トランスジェニックマウスモデルにおけるＦｃ改変体の評価）
Ｔｇ３２マウスは、ホモ接合体の８週齢の雄であった。被験項目群当たり４匹のマウスであった。被験項目は、ＣＤＡ１−ＷＴ、ＣＤＡ１−ＦｃＭｕｔ００８、およびＣＤＡ１−ＦｃＭｕｔ０１５を含んだ。マウスに、１０ｍｇ／ＫｇでＩＶ投与により投与した。データを、１３時点（１時間目、８時間目、１日目、２日目、３日目、４日目、６日目、８日目、１０日目、１３日目、１６日目、１９日目、および２２日目）において回収した。ヒトＩｇＧを、抗ｈＩｇＧポリクローナル抗体を使用するＥＬＩＳＡにより定量化した。

Ｔｇ３２は、早期評価としての薬物発見、およびモノクローナル抗体のヒト薬物動態の予測において使用することができるヒトＦｃＲｎトランスジェニックマウスモデルである。Ｔｇ３２ホモ接合体マウスにおけるモノクローナル抗体クリアランスは、ヒトにおけるモノクローナル抗体クリアランスと最も強い相関をもつ（Ａｖｅｒｙら、ＭＡｂｓ．２０１６年；８巻（６号）：１０６４〜７８頁）。

ＣＤＡ１（アクトクスマブ）は、ヒトにおいて２５日間より長い半減期を有することが公知である。Ｔｇ３２モデルにおける追加のｍＡｂに関するｉｎ ｖｉｖｏ評価を実施した。その異なる構築物はまた、ＩｇＧ改変体間の半減期の差を増加させることが報告されているＴｇ２７６マウスにおいても評価することができる。結果は表２および図１０に示されている。ＦｃＭｕｔ０１５は、Ｔｇ３２マウスにおいてＣＤＡ１の半減期を増加させた。

（実施例７：例示的な抗体のＦｃ操作）
ＦｃＲｎのＩｇＧとの相互作用は、Ｆｃを通して媒介されると考えられている。ＦｃのＦｃＲｎへの結合は、一般的に、ｐＨ特異的である（典型的には、ｐＨ ７．４におけるわずかな結合または結合なし、および酸性環境における強い結合）。ＩｇＧ１のＦｃドメインとの複合体内のＦｃＲｎの構造は、公知であり、各ＦｃＲｎ分子はＦｃ単量体に結合する。Ｆａｂドメインもまた、ＩｇＧのＦｃＲｎへの結合に影響しうる。

Ｆｃ−ＦｃＲｎ複合体のネットワーク解析は、ＦｃＲｎとの係合におけるＨ３１０の重要性を強調する。Ｈ３１０は、複数の他の高度にネットワーク化された残基に高度に相互接続されている。Ｈ３１０クラスターおよび隣接部（結ばれたノード）における変異は、Ｈ３１０ネットワークを強化する可能性がある。サブネットワークの解析は、他のＦｃ残基への影響を最小にしながらの、都合良いＦｃＲｎ相互作用のための相乗的変異の導入の情報を提供する。

ｐＨ ６．０におけるＦｃＲｎへの結合が改善されたＦｃ改変体を同定するために、様々なＦｃ変異を、ＩｇＧ１モタビズマブ（ｍｏｔａｚｉｖｕｍａｂ）（ＷＴ）に対して操作した。全ての抗体を、ＦｃＲｎへの結合について、バイオレイヤー干渉分光法を使用して評価した。略述すると、抗ＣＨ１バイオセンサー（ＦｏｒｔｅＢｉｏ）に、目的の各抗体をロードした。ロードされたバイオセンサーを、ｐＨ ６．０において組換えＦｃＲｎタンパク質に曝露して、結合を検出した。飽和後、バイオセンサーを、ｐＨ ６．０において緩衝液のみに曝露して、ＦｃＲｎの各抗体からの解離を測定した。結果は、抗体のｏｎ速度とｏｆｆ速度を表す応答曲線である。これらの速度を、ＦｏｒｔｅＢｉｏソフトウェアを使用して計算し、野生型モタビズマブの速度と比較した。野生型と比較してのｏｎ速度における倍数増加（ｆｏｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ）およびｏｆｆ速度における倍数減少（ｆｏｌｄ ｄｅｃｒｅａｓｅ）が表に列挙されている。多数の抗体変異は、ｏｎ速度およびｏｆｆ速度をそれぞれ、有意に、増加および減少させた（図１１Ａ）。６．０〜７．４のｐＨ範囲における代表的なＦｃ改変体のＦｃＲｎへの結合もまた示されている。ＦｃＲｎに対するＦｃ変異体抗体のアフィニティーは、ｐＨ ６．０において改善するが、ｐＨ ７．４などのより高いｐＨにおいて有意には増強されないことは重要である。図１１Ｂは、この代表的な抗体がなお、ｐＨ ７．４におけるＦｃＲｎへの弱い結合（所望の特色）を示すことを裏付けている。

図１１Ｃは、抗体ＦｃのＣＨ２ドメインのＦｃＲｎ分子との相互作用を示す。本明細書に記載された操作努力は、形状の相補性（ＳＣ）、静電荷の相補性（ＣＣ）、および疎水性の相補性（ＨＣ）を改善しようと試みた。Ｆｃ上の少数の位置は、相互作用にとって重要であると注目される。２５０ヘリッックスもまた注目される。このヘリックスは、動的であり、環境のｐＨに依存して動く。これは、ｐＨ ６．０でのＦｃドメインのＦｃＲｎへの結合において重要であるが、ｐＨ ７．４では重要ではない。

例示的なＦｃ改変体を、開発可能性アッセイにおいて試験し、その結果は、図１２に要約されている。Ｓｙｐｒｏオレンジ、ＳＤＳ ＰＡＧＥ、およびＳＥＣ−ＨＰＬＣを含むアッセイを実施した。発現決定について、構築物を、製造会社により記載されているように、ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅを使用して、９６ウェル培養ディッシュにおいてＥｘｐｉ２９３細胞へトランスフェクトした。５〜７日後、上清を、抗ヒトＣＨ１バイオセンサーを備えたバイオレイヤー干渉分光法（Ｏｃｔｅｔ）を使用し、モタビズマブ標準曲線を使用して、定量化した。プロテインＡ結合評価について、以下を実施した。構築物を、製造会社により記載されているように、ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉｎｅを使用して、３０ｍＬ培養物中のＥｘｐｉ２９３細胞へトランスフェクトした。５〜７日後、上清を採取し、抗体を精製した。プロテインＡバイオセンサーでのバイオレイヤー干渉分光法を使用して、プロテインＡに対するＦｃ修飾抗体アフィニティーを測定し、野生型Ｆｃドメインを含有する抗体と比較した。

モタビズマブ抗体の関連において発現した全てのＦｃ改変体を、還元条件下および非還元条件下でＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離した。略述すると、５μＬの水における２μｇの抗体を、β−メルカプトエタノール（ＢｉｏＲａｄカタログ＃１６１−０７１０）を含む、および含まない、５μＬのＬａｅｍｍｌｉ試料緩衝液（ＢｉｏＲａｄカタログ＃１６１−０７３７）と混合した。試料を、９５℃で１０分間、煮沸し、その後、軽く遠心分離した。その後、試料を、ＸＣｅｌｌ ＳｕｒｅＬｏｃｋゲル電気泳動セル（Ｎｏｖｅｘカタログ＃０９０４０３−８３９）において、１×ＭＥＳランニング緩衝液中、４〜１２％ Ｂｉｓ−Ｔｒｉｓ ＮｕＰＡＧＥゲル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＃ＮＰ０３２１ＢＯＸ）上に、ＳｅｅＢｌｕｅ Ｐｌｕｓ２分子量標準（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ＃ＬＣ５９２５）と並行して、流した。試料を、２００Ｖで３５分間、流した。ゲルを、製造会社のプロトコールに従って、ＳｉｍｐｌｙＢｌｕｅ ＳａｆｅＳｔａｉｎ（Ｎｏｖｅｘ ＃ＬＣ６０６５）で染色し、ＢｉｏＲａｄ ＣｈｅｍｉＤｏｃ ＭＰイメージングシステムにおいてイメージングした。

ＨＰＬＣに基づいたサイズ排除クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−ＳＥＣ）は、タンパク質の見かけのサイズ、単量体純度、およびタンパク質とシリカ系サイジング樹脂との間の非特異的カラム吸着の見かけのレベルを決定するために使用される解析ツールである。Ｆｃ変異のＩｇＧ溶出プロファイルへの影響を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｂｉｏｓｅｐ ３０００ｓカラム上で評価した。略述すると、様々なＦｃ改変体を有するＩｇＧを、ＰＢＳ ｐＨ ７．４中、１ｍｇ／ｍｌへ希釈し、２０μＬを、カラムへ注入した。溶出時間および純度百分率を記録した。

ｍＡｂの熱安定性を、示差走査型蛍光定量法（ＤＳＦ）により決定した。ＤＳＦは、タンパク質が、漸増する熱ストレスに曝露される場合のタンパク質のコンフォメーション安定性をモニタリングする。色素、ＳＹＰＲＯ（登録商標）オレンジは、熱的に引き起こされたタンパク質アンフォールディングまたは変性中に露出される疎水性コア残基などの疎水性環境において蛍光を発する。蛍光シグナルをモニタリングすることにより、ＣＨ２、ＣＨ３、およびＦａｂのアンフォールディングをモニタリングすることができる。モタビズマブＦａｂを有する様々なＦｃ改変体を、ＳＹＰＲＯオレンジアッセイにおいて評価した。略述すると、１５μＬの約０．５ｍｇ／ｍＬにおけるＩｇＧを、１５μＬの１：５００希釈されたＳＹＰＲＯオレンジ色素と混合し、４０℃から９９℃までの１℃勾配を使用する蛍光読み取り能力があるサーマルサイクラーにより評価した。未変性状態と最初のアンフォールディング事象との間の中間点が、遷移温度または融解温度（Ｔｍ）として報告された。

全てのＦｃ変異を、ＩｇＧ１（ｍ３アロタイプ）重鎖遺伝子へ導入し、ｐｃＤＮＡ３．１（Ｃ）へクローニングした。軽鎖遺伝子を、ｐｃＤＮＡ３．１（Ａ）へクローニングした。全ての場合において、天然シグナルペプチドを、オステオネクチンシグナルペプチド（ＧｅｎＢａｎｋ受託＃ ＡＡＡ６０９９３）と置きかえた。重鎖ベクターおよび軽鎖ベクターの同時発現を、製造会社のプロトコールに従って、Ｅｘｐｉ２９３トランスフェクションキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒカタログ＃ Ａ１４５２４）を使用して、Ｅｘｐｉ２９３細胞における一過性トランスフェクションにより、実施した。重鎖ベクターおよび軽鎖ベクターは、１：２比で同時トランスフェクトされた。トランスフェクションから５〜７日後、細胞培養上清を採取し、ＡＫＴＡ １０ ＦＰＬＣシステム（ＧＥ）において、ＨｉＴｒａｐ ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅプロテインＡカラム（ＧＥ）を使用して、製造会社の指示に従い、精製した。

全ての抗体を、ＡＫＴＡ ｐｕｒｉｆｉｅｒ １０ ＦＰＬＣシステムを使用するｍＡｂ ｓｅｌｅｃｔ ｓｕｒｅプロテインＡ樹脂（ＧＥカタログ＃ １７５４３８０１）を充填された１ｍＬカラムを使用して細胞培養上清から精製した。略述すると、滅菌濾過された細胞培養上清を、カラムへ２ｍＬ／分の流量でロードした。カラムを、１０カラム体積のＰＢＳＮ（０．０５％アジ化ナトリウムを含む１×ＰＢＳ）で洗浄した。抗体を、１０カラム体積の溶出緩衝液（１００ｍＭグリシンｐＨ ２．５）で溶出し、１７．５％ ｖ／ｖの中和緩衝液（１Ｍ Ｔｒｉｓ、１Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ ８．０）の添加により中和し、１ｍＬ画分において照合した。２８０ｎｍにおける吸光度についてのクロマトグラムを使用して、その抗体を含有する溶出画分を同定した。その後、全ての抗体を、１０，０００ダルトン分子量カットオフカセット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒカタログ＃ ６６３８０）を使用して、１×ＰＢＳへ透析した。

プロテインＡ結合を、プロテインＡカラムを使用するＦＰＬＣにより精製される全ての抗体の能力により、機能的に決定した。精製後、プロテインＡ結合をさらに、Ｏｃｔｅｔデータ取得ソフトウェアと共に提供された標準定量化プロトコールに従って、Ｏｃｔｅｔ ＱＫ^ｅシステムおよびプロテインＡバイオセンサー（Ｐａｌｌカタログ＃ １８−５０１２）を使用して、既知量の抗体を定量化することにより、評価した。

Ｅｘｐｉ２９３細胞に、Ｃ末端に６×ヒスチジンタグを有するヒトα−ＦｃＲｎをコードするプラスミド、およびヒトβ２Ｍをコードするプラスミドを同時トランスフェクトした。トランスフェクションから４日後、細胞培養上清を採取した。ＦｃＲｎを、ＨｉｓＴｒａｐ ＨＰカラム（ＧＥカタログ＃ １７−５２４７−０１）を用いたＡＫＴＡ ｐｕｒｅ ＦＰＬＣシステムを使用して、細胞培養上清から精製した。精製後、そのタンパク質を、１×ＰＢＳ ｐＨ ６．０へ透析した。

スクリーニングアッセイを、Ｏｃｔｅｔ ＱＫ^ｅシステムにおいて抗ＣＨ１ Ｆａｂバイオセンサーを使用して実施した。略述すると、１０μｇ／ｍＬにおける精製されたＩｇＧを、抗ＣＨ１バイオセンサー上へ１８０秒間、ロードする。１×ＰＢＳ ｐＨ ６．０における６０秒間のベースラインステップ後、ＩｇＧをロードしたチップを、５０μｇ／ｍＬの濃度でのＦｃＲｎに６０秒間、曝露し、続いて、ＰＢＳ ｐＨ ６．０において６０秒間、およびＰＢＳ ｐＨ ７．４においてさらに３０秒間、解離させた。加えて、ＦｃＲｎ結合を、ＮｉＮＴＡバイオセンサーを使用して実施した。略述すると、５μｇ／ｍＬにおける組換えヒトＦｃＲｎを、ＮｉＮＴＡバイオセンサー上へ１８０秒間、ロードする。１×ＰＢＳ ｐＨ ６．０における６０秒間のベースラインステップ後、ＦｃＲｎをロードしたチップを、２５０ｎＭ（３７．５μｇ／ｍＬ）の濃度でのＩｇＧに６０秒間、曝露し、続いて、ＰＢＳ ｐＨ ６．０において６０秒間、およびＰＢＳ ｐＨ ７．４においてさらに３０秒間、解離させた。各アッセイのアッセイ完了後、ｐＨ ６．０におけるアフィニティー定数（Ｋ_Ｄ）の定量的評価を、ＦｏｒｔｅＢｉｏ ｏｃｔｅｔソフトウェアを使用して実施し、定性的評価を、時間に対して応答速度をプロットすることにより実施して、ｐＨ ６．０におけるＩｇＧのＦｃＲｎへの会合、ならびにｐＨ ６．０およびｐＨ ７．４におけるその後の解離の可視化を可能にする。

図１２に示されているように、全てのＦｃ改変体は、これらの実験の全てにおいて、ＷＴ抗体と同等に機能した。

（実施例８：操作された抗体の半減期および薬物動態学的解析のｉｎ ｖｉｖｏ評価）
モタビズマブ野生型を、操作された抗体半減期のｉｎ ｖｉｖｏ評価において、Ｆｃ操作型変異の３個を含有するモタビズマブと比較した。抗体（２〜５ｍｇ／ｋｇ）を、ヒトＦｃＲｎについてトランスジェニックなマウスに投与し、毎日、マウス血清の試料を得た（０日目〜４日目）。血清中のモタビズマブの量を定量化するために、ＥＬＩＳＡを血清に実施した。

マウス血清中に存在するヒトＩｇＧの量を、ヒトＩｇＧ定量化ＥＬＩＳＡキット（Ｂｅｔｈｙｌ Ｌａｂｓカタログ＃ Ｅ８０−１０４）を使用して、製造会社のプロトコールに従い、決定した。全ての血清試料を、１：５０希釈から始めて１：６４００希釈で終わる２倍の系列希釈において滴定した。各ＥＬＩＳＡプレートは、二連または三連で、キットと共に提供されたヒト参照標準曲線を含んだ。標準曲線は、以下の濃度を含有する：５００．０、２５０．０、１２５．０、６２．５、３１．３、１５．６、７．８、および３．９ｎｇ／ｍＬ。検出の下限は、参照標準における最後から２番目の点について得られるＡ４５０ｎｍ値であると考えられ、７．８ｎｇ／ｍＬであった。血清の開始希釈が１：５０であったため、この場合、アッセイの検出のレベルを約０．４μｇ／ｍＬ（７．８１２ｎｇ／ｍＬ×５０倍希釈）となる。以下の手順に従って、ＩｇＧレベルを計算した：（１）標準曲線において４パラメータロジスティック回帰（４ＰＬ）を実施する；（２）最大許容Ａ４５０ｎｍシグナルを標準曲線における３番目の滴定点についての読み取りとして設定する；（３）最小許容Ａ４５０ｎｍシグナルを標準曲線における７番目の滴定点についての読み取りとして設定する；（４）最大許容シグナルより上、および最小許容シグナルより下に入る全ての試料滴定点をマスクする；（５）参照標準４ＰＬ曲線フィットを使用して、許容されるＡ４５０シグナルを有する各滴定点についての濃度を計算し、その値にその滴定点の希釈係数を掛ける；（６）各試料滴定について、滴定系列にわたる計算された濃度の平均値を計算する。

ＥＬＩＳＡ結果を、１００％を表す０日目の時点に基づいて、残存する抗体のパーセントへ変換した。図１３Ａ〜１３Ｂに示されているように、全ての３つの抗体改変体は、抗体半減期のこの十分確立されたマウスモデルにおいて半減期の延長を裏付けた。モタビズマブ野生型は、３２時間の半減期を有する。ＦｃＭｕｔ００８に基づいて構築されたＦｃＭｕｔ０４３およびＦｃＭｕｔ０４５変異体は、有意な半減期改善を示す。ＦｃＭｕｔ０４５変異体は、半減期を５．２倍、増強した（約１６６時間の半減期）。図１３Ｂにおける半減期、および他のパラメータは、Ｗｉｎｏｎｌｉｎソフトウェアを使用して計算された。

同様の実験を、モタビズマブの関連における後期Ｆｃ改変体を用いて行った。モタビズマブ改変体を５ｍｇ／ｋｇの用量で投与した場合、次世代改変体（ＦｃＭｕｔ１７１、ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１８６、およびＦｃＭｕｔ１９７）は、ＦｃＭｕｔ２１３で観察された半減期を９倍超増加させた、さらに増強した半減期を示した（図１４Ａ〜１４Ｂ）。初期デザインと比較しての後期デザインに関して見られた半減期の改善を裏付けるものに、初期改変体のうちの１つ（ＦｃＭｕｔ０４５）が含まれた。同様の結果は、モタビズマブ改変体が２ｍｇ／ｋｇの用量で投与された場合に観察された（図１４Ｃ〜１４Ｄ）。

Ｆｃ改変体のヒトＦｃＲｎへの増強した結合が、増加した血清中存続およびより長い循環半減期寿命に変換されたかどうかを評価するために、異なるＦｃ改変体を含有するＩｇＧの薬物動態学的研究を、Ｔｇ２７６トランスジェニックマウスにおいて実施した。ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウスモデルは、ヒトＦｃ含有生物学的治療用物質のＰＫを研究するためにＪａｃｋｓｏｎ研究所（ＪＡＸ）により開発されている。Ｔｇ２７６マウスは、マウスＦｃＲｎアルファ鎖についてヌルであり、構成的プロモーター（アクチン）のコントロール下でヒトＦｃＲｎアルファ導入遺伝子を発現し、マウスβ２ミクログロブリンを使用する。Ｔｇ２７６接合体またはヘミ接合体マウスは、抗体改変体の半減期を区別するために広く使用されている。

ｉｎ ｖｉｖｏ研究について、Ｔｇ２７６ｈｅｍｉ ＦｃＲｎトランスジェニックマウスに、２ｍｇ／ｋｇまたは５ｍｇ／ｋｇのｍＡｂを静脈内に投与した。各ｍＡｂ群はマウス４匹／群を有した。１時間と２１日間の間のいくつかの時点に血液を回収し、ＩｇＧ力価を、本明細書に記載されているように、定量的ＥＬＩＳＡにより決定した。ＰＫパラメータは、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎバージョン７．０（Ｃｅｒｔｅｒａ）を使用する非コンパートメントモデルを用いて、マウスの各群について決定された。

結果は、図１４Ａ〜１４Ｄに示されている。

（実施例９：操作された抗体の半減期のｉｎ ｖｉｖｏ評価）
２つのＺｉｋａ抗体（ＺＶＡおよびＺＶＢ）、加えて、野生型モタビズマブ（ＭＶＺ）を、ヒトＦｃＲｎについてトランスジェニックなマウスに２〜５ｍｇ／ｋｇの用量で投与し、毎日、マウス血清の試料を得た（０日目〜４日目）。モタビズマブの量を定量化するためにＥＬＩＳＡを血清に実施した。ＥＬＩＳＡ結果を、１００％を表す０日目の時点に基づいて、残存する抗体のパーセントへ変換した。ＺＶＡ抗体は、Ａシリーズ抗体Ａ−３／２を表す。ＺＶＢ抗体は、アフィニティー増強型軽鎖修飾Ｓ９２Ｙを含有するＡシリーズ抗体Ａ−５／１を表す。図１５に示されているように、ＺＶＢは、モタビズマブまたはＺＶＡのどちらよりもはるかに長い半減期を有した（ＺＶＡとＺＶＢのどちらもモタビズマブより長い半減期を有した）。これらの抗体は野生型Ｆｃ領域を含有し、それゆえに、ＺＶＢ抗体の延びた半減期は、その抗体自体の特性であり、いかなるＦｃ操作の特性ではない。

次の実験において、モタビズマブ野生型（ＭＶＺ ＷＴ）を、ＺＶＢ抗体（ＺＢ−１／４、グラフにおけるＺＫＢ）、およびＦｃ修飾１５６を含有するＺＶＢ抗体（Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ（「ＬＡＬＡ」）およびＴ２５６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ（半減期延長）、グラフにおけるＺＫＢ−１５６）、加えて「ＬＳ」半減期延長Ｆｃ変異を含有するＺＶＢ抗体（ＺＫＢ−ＬＳ）に対して試験した。ＬＳとＦｃ修飾１５６の両方は、野生型ＺＶＢと比較して、半減期を有意に延ばした（図１６）。これらのデータは、Ｖｉｓｔｅｒｒａ変異が、文献由来のＬＳ変異に匹敵することを裏付け、また、本明細書に記載されたＦｃ操作の努力が、このトランスジェニックマウスモデルにおいて非常に長い半減期をすでに有する抗体の半減期を延長しうることを裏付けている。「ＺＶＢ」は図１６において「ＺＫＢ」として指し示されている。

（実施例１０：Ｆｃ受容体への結合およびエフェクター機能への影響）
例示的なＦｃ改変体を、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ（オプソニン化貪食作用のメディエータ）、ＦｃγＲＩＩＢ、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＡＤＣＣのメディエータ）、およびＣ１ｑ（ＣＤＣのメディエータ）についての複数のアッセイにおいて評価した。

Ｆｃγ受容体Ｉ、ＩＩａ、ＩＩｂ、ＩＩＩａ、およびＩＩＩａ Ｖ１７６Ｆ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ＃ １２５７−ＦＣ−０５０、１３３０−ＣＤ−０５０、１８７５−ＣＤ−０５０、４３２５−ＦＣ−０５０、および８８９４−ＦＣ−０５０）への結合をＥＬＩＳＡにより測定した。全てのＦｃ改変体を、モタビズマブ、リツキシマブ、またはアクトクスマブ抗体の関連において試験した。略述すると、Ｆｃ受容体を、ＥＬＩＳＡプレート（ＶＷＲカタログ＃ ６２４０９−００２）上にＰＢＳ中１μｇ／ｍＬ（０．１μｇ／ウェル）でコーティングし、４℃で一晩、保管した。プレートをＰＢＳＴ（１×ＰＢＳ ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０）で３回、洗浄した。抗体を、１００μｇ／ｍＬから０．０５μｇ／ｍＬまで、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、３倍で滴定し、１００μＬをＥＬＩＳＡプレートの各ウェルに加え、室温で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回、洗浄した。ヤギ抗ヒトＦｃ（Ｊａｃｋｓｏｎカタログ＃ １０９−０３５−０９８）を、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、１：５０００希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、４℃で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで６回、洗浄した。プレートを、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌペルオキシダーゼ基質キット（ＶＷＲカタログ＃ ９５０５９−１５６）を使用して、発色させた。反応を、１０分後、１Ｎ硫酸の添加により停止し、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。抗体濃度（ｘ軸）および４５０ｎｍにおける吸光度（ｙ軸）の値を、４パラメータロジスティック回帰（４ＰＬ）曲線にフィットさせた。その後、曲線フィットを使用して、各Ｆｃ改変体のＥＣ５０（４ＰＬの中間点）を決定した。

Ｆｃγ受容体ＩＩａおよびＩＩｂへの結合を、Ｏｃｔｅｔ ＱＫｅシステムを使用するバイオレイヤー干渉分光法により測定した。略述すると、ＦｃγＩＩａおよびＦｃγＩＩｂ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓカタログ＃ １３３０−ＣＤ−０５０および１８７５−ＣＤ−０５０）をＰＢＳ中５μｇ／ｍＬへ希釈した。その受容体を、Ｃ末端６×ヒスチジンタグ（配列番号２）を介してＮｉ−ＮＴＡバイオセンサー（Ｐａｌｌカタログ＃ １８−５１０１）へ１８０秒間、固定化し、続いて、ＰＢＳ中の６０秒間ベースラインステップを行った。その後、バイオセンサーを、ＰＢＳ中５０μｇ／ｍＬの濃度での様々なＦｃ改変体に１２０秒間、曝露し、続いて、さらに１２０秒間のＰＢＳ中での解離ステップを行った。各改変体についての会合ステップ中の最大結合応答が報告され、野生型Ｆｃ応答と比較された。

Ｃ１ｑへの結合を、ＥＬＩＳＡにより測定した。全てのＦｃ改変体を、モタビズマブ抗体の関連において試験した。略述すると、抗体を、ＥＬＩＳＡプレート（ＶＷＲカタログ＃ ６２４０９−００２）上にＰＢＳ中２５μｇ／ｍＬ（２．５μｇ／ウェル）でコーティングし、４℃で一晩、保管した。プレートをＰＢＳＴ（１×ＰＢＳ ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０）で３回、洗浄した。精製されたＣ１ｑ（Ｑｕｉｄｅｌ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎカタログ＃ Ａ４００）を、１２．５μｇ／ｍＬから０．０２μｇ／ｍＬまで、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ（１×ＰＢＳ ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０ １％ ＢＳＡ）中、３倍で滴定し、室温で９０分間、インキュベートした。液体をウェルから吸引し、ポリクローナルウサギ抗ヒトＣ１ｑ（Ａｇｉｌｅｎｔカタログ＃ Ａ０１３６０２−１）をＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、１μｇ／ｍＬの最終濃度へ希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、室温で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回、洗浄した。ポリクローナルブタ抗ウサギ−ＨＲＰ（Ａｇｉｌｅｎｔカタログ＃ Ｐ０２１７０２−２）をＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、０．５μｇ／ｍＬへ希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、室温で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで６回、洗浄した。プレートを、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌペルオキシダーゼ基質キット（ＶＷＲカタログ＃ ９５０５９−１５６）を使用して、発色させた。反応を、１０分後、１Ｎ硫酸の添加により停止し、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。抗体濃度（ｘ軸）および４５０ｎｍにおける吸光度（ｙ軸）の値を、４パラメータロジスティック回帰（４ＰＬ）曲線にフィットさせた。その後、曲線フィットを使用して、各Ｆｃ改変体のＥＣ５０（４ＰＬの中間点）を決定した。

結果は図１７Ａ〜１７Ｄに示されている。

（実施例１１：操作された抗体のＣＤＣ活性）
例示的なＦｃ改変体（リツキシマブＦａｂ）の補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）活性を検討した。

ＣＤＣアッセイを、ＣＤ２０＋ Ｒａｊｉ細胞および低毒性モルモット補体（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｐｒｏｄｕｃｔ ＃ ＣＬ４０５１）を使用して実施した。補体誘導性細胞溶解を、Ｐｒｏｍｅｇａ製のＣＹＴＯＴＯＸ ９６（登録商標）非放射性細胞傷害アッセイ（カタログ＃ Ｇ１７８０）を使用して、製造会社のプロトコールに従い、測定した。全てのＦｃ改変体を、抗ＣＤ２０抗体、リツキシマブの関連において試験した。略述すると、抗体濃度を、２０μｇ／ｍＬから０．００５μｇ／ｍＬまでの範囲で４倍で滴定し、ウェル１つ当たり２０，０００個の標的細胞と３７℃で３０分間、インキュベートした。その後、補体を細胞に加え、３７℃でさらに２時間、インキュベートした。さらに、ＣＹＴＯＴＯＸキットと共に提供された細胞溶解緩衝液を対照ウェルに加えて、最大細胞溶解を測定した。陰性対照抗体、モタビズマブを使用して、無関係の抗体のバックグラウンドシグナルを測定した。バックグラウンドシグナルおよび最大溶解シグナルを使用して、各Ｆｃ改変体についての細胞溶解のパーセントを計算した。抗体濃度（ｘ軸）および溶解パーセント（ｙ軸）の値を、４パラメータロジスティック回帰曲線にフィットさせた。その後、曲線フィットを使用して、各Ｆｃ改変体のＥＣ５０（５０％溶解を得るために必要とされる濃度）および最大溶解を決定した。

結果は、図１８に示されている。

（実施例１２：操作された抗体のＡＤＣＣ活性）
例示的なＦｃ改変体（リツキシマブＦａｂ）の抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）活性を検討した。

ＡＤＣＣアッセイを、製造会社のプロトコールに従い、Ｐｒｏｍｅｇａ製のＣＤ２０^＋ ＷＩＬ２−Ｓ標的細胞（カタログ＃ Ｇ７０１４）でのＡＤＣＣ受容体バイオアッセイを使用して実施した。全てのＦｃ改変体を、抗ＣＤ２０抗体、リツキシマブの関連において試験した。抗体濃度を、５μｇ／ｍＬから０．００１６μｇ／ｍＬまでの範囲で５倍で滴定した。抗体濃度（ｘ軸）および発光レポーター遺伝子の倍数誘導（ｙ軸）の値を、４パラメータロジスティック回帰（４ＰＬ）曲線にフィットさせた。その後、曲線フィットを使用して、各Ｆｃ改変体のＥＣ５０（４ＰＬの中間点）および最大誘導を決定した。

結果は図１９Ａ〜１９Ｂに示されている。例示的なＦｃ改変体はＡＤＣＣ活性を保持し、場合によっては、それを増強する。

（実施例１３：操作された抗体のＡＤＩＮ活性）
ＴＲＩＭ２１は、ＩｇＧのＦｃと結合する細胞質受容体である。ＴＲＩＭ２１は、Ｆｃに結合したウイルスの細胞内認識および中和を媒介することにおいて役割を果たす。ＴＲＩＭ２１媒介性中和は、抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）として公知である。

ＴＲＩＭ２１への結合をＥＬＩＳＡにより測定した。全てのＦｃ改変体を、モタビズマブまたはアクトクスマブ抗体の関連において試験した。略述すると、抗体を、ＥＬＩＳＡプレート（ＶＷＲカタログ＃ ６２４０９−００２）上にＰＢＳ中２５μｇ／ｍＬ（２．５μｇ／ウェル）でコーティングし、４℃で一晩、保管した。プレートをＰＢＳＴ（１×ＰＢＳ ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０）で３回、洗浄した。ＴＲＩＭ２１−ＧＳＴ（Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ｏｎｌｉｎｅカタログ＃ ＡＢＩＮ１３２３６２１）を、１２．５μｇ／ｍＬから０．０２μｇ／ｍＬまで、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ（１×ＰＢＳ ０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０ １％ ＢＳＡ）中、３倍で滴定し、室温で９０分間、インキュベートした。液体をウェルから吸引し、２つのウサギ抗ＴＲＩＭ２１抗体（ＡｂＣａｍカタログ＃ ａｂ９１４２３およびａｂ９６８００）を、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、各１μｇ／ｍＬの最終濃度で一緒に混合し、１００μＬを各ウェルに加え、室温で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで３回、洗浄した。ポリクローナルブタ抗ウサギ−ＨＲＰ（Ａｇｉｌｅｎｔカタログ＃ Ｐ０２１７０２−２）を、ＰＢＳＴ−ＢＳＡ中、０．５μｇ／ｍＬへ希釈し、１００μＬを各ウェルに加え、室温で１時間、インキュベートした。プレートをＰＢＳＴで６回、洗浄した。プレートを、ＴＭＢ Ｍｉｃｒｏｗｅｌｌペルオキシダーゼ基質キット（ＶＷＲカタログ＃ ９５０５９−１５６）を使用して、発色させた。反応を、１０分後、１Ｎ硫酸の添加により停止し、４５０ｎｍにおける吸光度を測定した。抗体濃度（ｘ軸）および４５０ｎｍにおける吸光度（ｙ軸）の値を、４パラメータロジスティック回帰（４ＰＬ）曲線にフィットさせた。その後、曲線フィットを使用して、各Ｆｃ改変体のＥＣ５０（４ＰＬの中間点）を決定した。

Ｆｃ改変体が、ＴＲＩＭ２１への結合に影響したかどうかを評価するために、ＴＲＩＭ２１結合ＥＬＩＳＡを実施した。結果は図２６に示されている。Ｆｃ改変体ＦｃＭｕｔ０４５、ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８は、ＷＴ ＥＣ５０の１．５倍の範囲内であるＴＲＩＭ２１結合ＥＣ５０を有した。

（実施例１４：Ｆｃ変異による粘膜取込みの増強）
ＦｃＲｎは、腸および肺胞表面を裏打ちする粘膜上皮などの異なる細胞バリアを横断してＩｇＧを輸送する。ＦｃＲｎ結合の修飾は、免疫防御を与える粘膜局在化を増強する機構を提供する。例示的なＦｃ変異体は、同様の様式で粘膜取込みを増強することが予想される。

（実施例１５：ＦｃＲｎアフィニティー増強性変異の、Ｆｃ受容体との係合およびエフェクター機能への影響）
ＦｃＲｎアフィニティー増強性変異の、Ｆｃの他の受容体への結合への影響を実験的に評価した。ＩｇＧのＦｃ領域は、多くの異なるＦｃ受容体へ結合する能力があり、多くの治療用抗体についての作用機構は、Ｆｃ受容体との係合に依拠している。Ｆｃ受容体結合部位から遠い位置における変異でさえも、Ｆｃの、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、Ｃ１ｑ、ＴＲＩＭ２１などの受容体との係合に影響することができる。Ｆｃ受容体ＴＲＩＭ２１は、ＣＨ２−ＣＨ３上のＦｃＲｎ結合部位と重複する部位に結合し、一方、Ｆｃγ受容体およびＣ１ｑなどの他の受容体は、二量体ＣＨ２により形成される界面で係合する。そのため、半減期を増強するために導入された任意の変異は、他の受容体への結合へのその影響について評価されるべきである。半減期を増強するために導入した変異は。Ｆｃ改変体（ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、ＦｃＭｕｔ２２９、ＹＴＥ、ＬＳ）を、リツキシマブＦａｂへ組み込み、ＷＴリツキシマブと共に、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、Ｃ１ｑ、およびＴＲＩＭ２１への結合について評価した。図２４に示されているように、Ｆｃ改変体ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、およびＦｃＭｕｔ２２９の導入は、試験されたＦｃ受容体との係合に有意には影響を及ぼさなかった。

Ｆｃ受容体への結合は、ＡＤＣＣ（ＦｃγＲＩＩＩａ）、ＣＤＣ（Ｃ１ｑ）、およびＡＤＩＮ（ＴＲＩＭ２１）などの活性に必要であるが、それは、これらの活性を媒介することにおいて十分ではない可能性がある。例えば、Ｆｃの六量体アセンブリが、ＣＤＣ活性を誘発するために必要とされる。Ｆｃ六量体アセンブリは、Ｆｃ−Ｆｃ界面の形成を含み、この界面の形成に関与する残基は、ＦｃＲｎ結合部位と部分的に重複する。それゆえに、Ｆｃ変異の、Ｆｃ受容体への結合への影響だけでなく、ＣＤＣおよびＡＤＣＣなどの活性への影響も評価することは重要であった。様々なＦｃ改変体（ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、ＦｃＭｕｔ２２９、ＹＴＥ、ＬＳ、ＷＴ）を有するリツキシマブを、方法セクションにおいて記載されているように、ＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性について評価した。結果により、Ｆｃ改変体ＦｃＭｕｔ１８３、ＦｃＭｕｔ１９７、ＦｃＭｕｔ２１３、ＦｃＭｕｔ２１５、ＦｃＭｕｔ２２８、およびＦｃＭｕｔ２２９が、ＡＤＣＣ活性にマイナスに影響せず、実際にはＣＤＣ活性にわずかな増強を示すことが確認された。ＹＴＥを含有するリツキシマブは、検出可能なＣＤＣ活性を生じず、ＡＤＣＣ活性を有意に低下させた。同様に、別の変異体ＦｃＭｕｔ１９７は、ＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性を低下させた。これらの変異のネットワークマップの観察により、ＡＤＣＣおよびＣＤＣ活性の損失の考えられる理由への洞察が得られる。

（実施例１６：トランスジェニックマウスの血清における最適化Ｆｃ改変体の存続）
Ｆｃ改変体のヒトＦｃＲｎへの増強した結合が、増加した血清中存続およびより長い循環半減期寿命に変換されたかどうかを評価するために、異なるＦｃ改変体を含有するＩｇＧの薬物動態学的研究を、Ｔｇ２７６トランスジェニックマウスにおいて実施した。ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウスモデルは、ヒトＦｃ含有生物学的治療用物質のＰＫを研究するために使用することができる（Ｒｏｏｐｅｎｉａｎら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ、２０１０年 ６０２巻：９３〜１０４頁；Ｐｅｔｋｏｖａら、Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００６年 １８巻（１２号）：１７５９〜６９頁）。Ｔｇ２７６マウスは、マウスＦｃＲｎアルファ鎖についてヌルであり、構成的プロモーター（アクチン）のコントロール下でヒトＦｃＲｎアルファ導入遺伝子を発現し、マウスβ２ミクログロブリン（ｍｉｃｒｏｇｌｏｂｕｌｉ）を使用する。Ｔｇ２７６接合体およびヘミ接合体マウスは、抗体改変体の半減期を区別するために使用することができる。ＰＫ研究について、Ｔｇ２７６ｈｅｍｉ ＦｃＲｎトランスジェニックマウスに、５ｍｇ／ｋｇのＩｇＧ（ＷＴまたは修飾型Ｆｃ上のモタビズマブＦａｂ）を静脈内に投与した。後眼窩血液回収を、いくつかの時点において実施し、ＩｇＧ力価を、定量的ＥＬＩＳＡにより決定した。操作されたＦｃ改変体を含有するＩｇＧは、野生型モタビズマブよりはるかに長く血清中に存続した（図２５Ａ）。非コンパートメント解析からの薬物動態学的パラメータにより、Ｆｃ改変体を有するモタビズマブが、２分の１未満のクリアランス速度、ならびにβ相消失半減期および曲線下面積（ＡＵＣ）測定値における有意な増加を有することが指し示された（図２５Ｂ）。

参照による組込み
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、および受託番号は、各個別の刊行物または特許が、参照により組み込まれることが、具体的、かつ、個別に指し示された場合と同じ程度に、参照によりそれらの全体において本明細書に組み込まれる。

均等物
本発明の具体的な実施形態について論じてきたが、上記の明細書は、例示的なものであり、限定的なものではない。本明細書および下記の特許請求の範囲を検討すれば、当業者には、本発明の多くの変化形が明らかとなるであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲を、それらの均等物の全範囲と共に参照し、本明細書を、このような変化形と共に参照することにより決定されるものとする。

Claims (77)

1. Ｆｃ領域を含むポリペプチドであって、前記Ｆｃ領域が変異を含み、前記ポリペプチドが、以下の特性：
   ａ）参照ポリペプチドと比較して、６．０から６．５の間のｐＨにおける新生児型Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）に対する、増加した結合アフィニティーを有する；
   ｂ）７．０から７．４の間のｐＨにおける結合アフィニティーより、６．０から６．５の間のｐＨにおける、ＦｃＲｎに対する、より高い結合アフィニティーを有する；
   ｃ）６．０から６．５の間のｐＨにおいてＦｃＲｎに、３００ｎＭもしくはそれ未満の解離定数（Ｋ_ｄ）で結合する；
   ｄ）７．０から７．４の間のｐＨにおいてＦｃＲｎに、５０ｎＭもしくはそれより大きいＫ_ｄで結合する；
   ｅ）参照ポリペプチドと比較して、Ｆｃγ受容体に対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
   ｆ）参照ポリペプチドと比較して、同じ、もしくは実質的に同じ熱安定性を有する；
   ｇ）参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
   ｈ）参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティーを有する；
   ｉ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、実質的に同じであるか、もしくは増加しているエフェクター機能を有する；
   ｊ）参照ポリペプチドと比較して、増加したｉｎ ｖｉｖｏでの半減期を有する；
   ｋ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、実質的に同じであるか、もしくは増加している、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を有する；
   ｌ）参照ポリペプチドと比較して、同じであるか、もしくは実質的に同じである開発可能性特徴を有する；
   ｍ）参照ポリペプチドと比較して、エピトープに対する、同じ、実質的に同じ、もしくは増加した結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を有する；または
   ｎ）参照ポリペプチドと比較して、粘膜取込みを増加させる；
   のうちの３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全部を有し、ならびに、前記ポリペプチドが、少なくとも特性ａ）、ｂ）と、特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部とを有する、ポリペプチド。
2. 少なくとも特性ａ）、ｂ）、ｃ）、ｄ）、および特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部を有する、請求項１に記載のポリペプチド。
3. 少なくとも特性ａ）、ｂ）と、特性ｅ）、ｆ）、ｇ）、ｈ）、またはｉ）のうちの１、２、３、４個、または全部と、特性ｃ）、ｄ）、ｊ）、ｋ）、ｌ）、ｍ）、またはｎ）のうちの１、２、３、４、５、６個、または全部とを有する、請求項１または２に記載のポリペプチド。
4. ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ｐＨ６．０におけるＦｃＲｎに対する結合アフィニティーが、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、または５０倍増加している、請求項１から３のいずれかに記載のポリペプチド。
5. ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ６．０におけるＦｃＲｎに対する結合アフィニティーが、ｐＨ ７．４におけるそれより、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、または５０倍高い、請求項１から４のいずれかに記載のポリペプチド。
6. ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ６．０において２５０ｎＭまたはそれ未満、２００ｎＭまたはそれ未満、１５０ｎＭまたはそれ未満、１００ｎＭまたはそれ未満、５０ｎＭまたはそれ未満、２５ｎＭまたはそれ未満、１０ｎＭまたはそれ未満、５ｎＭまたはそれ未満、２ｎＭまたはそれ未満、１ｎＭまたはそれ未満、０．５ｎＭまたはそれ未満、０．２ｎＭまたはそれ未満、０．１ｎＭまたはそれ未満、０．０５ｎＭまたはそれ未満、０．０２ｎＭまたはそれ未満、０．０１ｎＭまたはそれ未満、２５ｎＭから０．１ｎＭの間の、２０ｎＭから０．５ｎＭの間の、１５ｎＭから１ｎＭの間の、１０ｎＭから５ｎＭの間の、あるいは２０ｎＭから１０ｎＭの間の解離定数（Ｋ_ｄ）でＦｃＲｎに結合する、請求項１から５のいずれかに記載のポリペプチド。
7. ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、ｐＨ７．４において６０ｎＭまたはそれより大きな、８０ｎＭまたはそれより大きな、１００ｎＭまたはそれより大きな、１５０ｎＭまたはそれより大きな、２００ｎＭまたはそれより大きな、５００ｎＭまたはそれより大きな、５０ｎＭから５００ｎＭの間の、あるいは１００ｎＭから２５０ｎＭの間のＫ_ｄでＦｃＲｎに結合する、請求項１から６のいずれかに記載のポリペプチド。
8. ｏｃｔｅｔに基づいたアッセイまたは細胞に基づいたアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、もしくはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、もしくは全部に対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ／ｂ、もしくはＦｃγＲＩＩＩのうちの１つ、２つ、もしくは全部に対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から７のいずれかに記載のポリペプチド。
9. ｓｙｐｒｏオレンジアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、融解温度を１℃、２℃、３℃、４℃、５℃、６℃、７℃、８℃、９℃、または１０℃以下だけ、増加または減少させる、請求項１から８のいずれかに記載のポリペプチド。
10. ＥＬＩＳＡにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、Ｃ１ｑに対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＣ１ｑに対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から９のいずれかに記載のポリペプチド。
11. ＥＬＩＳＡにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーを、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはＴＲＩＭ２１に対する結合アフィニティーを、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から１０のいずれかに記載のポリペプチド。
12. 参照ポリペプチドと比較して、補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）のうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介細胞傷害（ＡＤＣＣ）、抗体依存性細胞媒介食作用（ＡＤＣＰ）、もしくは抗体依存性細胞内中和（ＡＤＩＮ）のうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から１１のいずれかに記載のポリペプチド。
13. 動物モデルにおいて決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｖｏでの半減期が、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍、増加している、請求項１から１２のいずれかに記載のポリペプチド。
14. 参照ポリペプチドと比較して、ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、またはｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏ、もしくはｉｎ ｖｉｖｏでの生物学的機能を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から１３のいずれかに記載のポリペプチド。
15. 参照ポリペプチドと比較して、安定性、溶解度、凝集、または発現レベルのうちの１つ、２つ、３つ、または全部を、１０％、２０％、３０％、４０％、または５０％以下だけ、変化させる、請求項１から１４のいずれかに記載のポリペプチド。
16. 参照ポリペプチドと比較して、結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を、１０％、２０％、３０％、４０％、もしくは５０％以下だけ、減少させるか、または結合アフィニティー、特異性、もしくはその両方を、少なくとも１．５、２、３、４、もしくは５倍、増加させる、請求項１から１５のいずれかに記載のポリペプチド。
17. トランスサイトーシスアッセイにより決定される場合、参照ポリペプチドと比較して、粘膜取込みを、少なくとも１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０倍、増加させる、請求項１から１６のいずれかに記載のポリペプチド。
18. 前記参照ポリペプチドが、野生型Ｆｃ領域、配列番号１のアミノ酸配列、またはそれと少なくとも約８５％、９０％、９５％、９９％、もしくはこれを超えて同一な、もしくは１、２、５、１０、もしくは１５個以下のアミノ酸残基だけ異なるアミノ酸配列を含むＦｃ領域を含む、請求項１から４、または８から１７のいずれかに記載のポリペプチド。
19. 前記変異がＣＨ２ドメイン内の残基においてである、請求項１から１８のいずれかに記載のポリペプチド。
20. 前記変異がＣＨ３ドメイン内の残基においてである、請求項１から１８のいずれかに記載のポリペプチド。
21. ＣＨ２ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異、およびＣＨ３ドメイン内の残基における少なくとも１個の変異を含む、請求項１から２０のいずれかに記載のポリペプチド。
22. ＣＨ２ドメインおよび／またはＣＨ３ドメイン以外の領域内の残基における変異をさらに含む、請求項１から２１のいずれかに記載のポリペプチド。
23. 前記変異が、ＣＨ２ドメインとＣＨ３ドメインとの間のリンカー領域のコンフォメーションを変化させないか、または実質的に変化させない、請求項１から２２のいずれかに記載のポリペプチド。
24. 前記変異が、表面領域上に、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれより多く連続した疎水性または芳香族残基を導入しない、請求項１から２３のいずれかに記載のポリペプチド。
25. 抗体分子を含む、請求項１から２４のいずれかに記載のポリペプチド。
26. ＩｇＧを含む、請求項１から２５のいずれかに記載のポリペプチド。
27. ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４を含む、請求項１から２６のいずれかに記載のポリペプチド。
28. 重鎖免疫グロブリン可変領域、軽鎖免疫グロブリン可変領域、またはその両方を含む、請求項１から２７のいずれかに記載のポリペプチド。
29. ２つの重鎖免疫グロブリン可変領域と２つの軽鎖免疫グロブリン可変領域の四量体を含む、請求項１から２８のいずれかに記載のポリペプチド。
30. 全長抗体分子を含む、請求項１から２９のいずれかに記載のポリペプチド。
31. 抗体分子の断片を含む、請求項１から３０のいずれかに記載のポリペプチド。
32. キメラ抗体分子またはマウス抗体分子を含む、請求項１から３１のいずれかに記載のポリペプチド。
33. ヒト抗体分子またはヒト化抗体分子を含む、請求項１から３２のいずれかに記載のポリペプチド。
34. 融合タンパク質を含む、請求項１から２４のいずれかに記載のポリペプチド。
35. 以下：
    （ｉ）ＦｃＲｎと相互作用する表面領域内の残基における変異；
    （ｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿う周辺残基である残基における変異；
    （ｉｉｉ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基における変異；
    （ｉｖ）Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、もしくはＭ２５２のうちの１、２、３、４、５個、もしくは全部を含む、ヘリックスのコンフォメーション動力学を増強する、ヘリックス接触残基である残基における変異；または
    （ｖ）Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってヒスチジンのｐＫをモジュレートするか、もしくはＦｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってのヒスチジンの導入である変異
    のうちの１、２、３、４個、または全部を含む、請求項１から３４のいずれかに記載のポリペプチド。
36. ＦｃＲｎと相互作用する表面領域内の残基における変異を含む、請求項１から３５のいずれかに記載のポリペプチド。
37. 前記変異が、Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基においてである、請求項３６に記載のポリペプチド。
38. Ｌ２５１、Ｉ２５３、Ｒ２５５、Ｐ２５７、Ｈ２８５、Ｎ２８６、Ｋ２８８、Ｔ３０７、Ｖ３０８、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｌ３１４、Ｈ３１０、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｈ４３５、またはＹ４３６から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６個、または全てにおける複数の変異を含む、請求項１から３７のいずれかに記載のポリペプチド。
39. Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿う周辺残基である残基における変異を含む、請求項１から３８のいずれかに記載のポリペプチド。
40. 前記変異が、Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基においてである、請求項３９に記載のポリペプチド。
41. Ｍ２５２、Ｔ２５６、Ｔ３０７、Ｌ３０９、Ｑ３１１、Ｈ４３３、Ｎ４３４、Ｙ４３６、Ｎ２８６、またはＫ２８８から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９個、または全てにおける複数の変異を含む、請求項１から４０のいずれかに記載のポリペプチド。
42. Ｆｃ−ＦｃＲｎ結合において非接触残基である残基における変異を含む、請求項１から４１のいずれかに記載のポリペプチド。
43. 前記変異が、Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基においてである、請求項４２に記載のポリペプチド。
44. Ａ２８７、Ｖ３０８、Ｎ３１５、Ｌ３１４、Ｌ４３２、Ｈ４２９、Ｅ４３０、またはＡ４３１から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７個、または全てにおける複数の変異を含む、請求項１から４３のいずれかに記載のポリペプチド。
45. Ｐ２４７、Ｋ２４８、Ｄ２４９、Ｔ２５０、Ｌ２５１、またはＭ２５２のうちの１、２、３、４、５個、または全部を含む、ヘリックスのコンフォメーション動力学を増強するヘリックス接触残基である残基における変異を含む、請求項１から４４のいずれかに記載のポリペプチド。
46. 前記変異は、Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基における変異である、請求項４５に記載のポリペプチド。
47. Ｐ２４４、Ｐ２４５、Ｔ２５０、Ｌ２５１、Ｐ２４７、Ｅ３８０、Ｍ４２８、Ａ３７８、Ｄ３７６、Ｐ２５７、Ｖ３０８、Ａ２８７、Ｌ３０６、またはＨ４２７から選択される残基のうちの２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３個、または全てにおける複数の変異を含む、請求項１から４６のいずれかに記載のポリペプチド。
48. Ｆｃ−ＦｃＲｎ界面に沿ってのヒスチジンの導入である変異を含む、請求項１から４７のいずれかに記載のポリペプチド。
49. 表１に記載される１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０個、またはそれより多くの変異、あるいは１個または複数の変異の組み合わせを含む、請求項１から４８のいずれかに記載のポリペプチド。
50. 前記変異が、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、またはそれらの組合せ以外である、請求項１から４９のいずれかに記載のポリペプチド。
51. 前記変異が、残基Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０、Ｍ４２８、Ｎ４３４、Ｎ４３４、Ｔ３０７、Ｅ３８０、Ｎ４３４、Ｍ２５２、Ｓ２５４、Ｔ２５６、またはそれらの組合せ以外の残基においてである、請求項１から５０のいずれかに記載のポリペプチド。
52. 以下の１つまたは複数の変異：
    （ｉ）Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ；
    （ｉｉ）Ｌ３０９Ｎ；
    （ｉｉｉ）Ｔ２５０ＱおよびＭ４２８Ｌ；
    （ｉｖ）Ｍ４２８ＬおよびＮ４３４Ａ；
    （ｖ）Ｎ４３４Ａ；
    （ｖｉ）Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、およびＮ４３４Ａ；
    （ｖｉｉ）Ｍ２５２Ｗ；
    （ｖｉｉｉ）Ｖ３０８Ｆ；
    （ｉｘ）Ｖ３０８ＦおよびＮ４３４Ｙ；または
    （ｘ）Ｈ４３５Ａ、
    のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９個、または全てを有しない、請求項１から５１のいずれかに記載のポリペプチド。
53. Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、またはＴ２５６Ｅから選択される第１の変異、およびＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ、Ｌ３０９Ｎ、Ｔ２５０Ｑ、Ｍ４２８Ｌ、Ｎ４３４Ｓ、Ｎ４３４Ａ、Ｔ３０７Ａ、Ｅ３８０Ａ、Ｎ４３４Ａ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、およびＴ２５６Ｅ以外の表１中の変異から選択される第２の変異を含む、請求項１から５２のいずれかに記載のポリペプチド。
54. エフェクター機能を増加させる、前記Ｆｃ領域における変異をさらに含む、請求項１から５３のいずれかに記載のポリペプチド。
55. 前記変異が、Ｓ２３９、Ａ３３０、Ｉ３３２、Ｆ２４３、Ｇ２３６、またはそれらの組み合わせから選択される残基においてである、請求項５４に記載のポリペプチド。
56. エフェクター機能を減少させる、前記Ｆｃ領域における変異をさらに含む、請求項１から５５のいずれかに記載のポリペプチド。
57. 前記変異が、Ｋ３２２、Ｌ２３４、Ｌ２３５、Ｐ３３１、Ｎ２９７、またはそれらの組み合わせから選択される残基においてである、請求項５６に記載のポリペプチド。
58. 前記Ｆｃ領域が、以下：
    （ａ）Ｔ２５６Ｄ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｈ２８５Ｎ／Ｔ３０７Ｑ／Ｎ３１５Ｄ、Ｈ２８５Ｄ／Ｔ３０７Ｑ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ３０７Ｑ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、Ｔ２５６Ｄ／Ｎ２８６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖ／Ａ３７８Ｖ、もしくはＴ２５６Ｄ／Ｔ３０７Ｒ／Ｑ３１１Ｖから選択される変異の組み合わせのうちの１、２、３、４、５個、もしくは全部；
    （ｂ）Ｆｃエフェクター機能を破壊する能力がある変異もしくは変異の組み合わせ、または
    （ｃ）（ａ）と（ｂ）の両方
    を含む、請求項１から５７のいずれかに記載のポリペプチド。
59. （ｉ）Ｔ２５６、Ｑ３１１、およびＡ３７８；
    （ｉｉ）Ｈ２８５、Ｔ３０７、およびＮ３１５；
    （ｉｉｉ）Ｈ２８５、Ｔ３０７、およびＡ３７８；
    （ｉｖ）Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８；
    （ｖ）Ｔ２５６、Ｎ２８６、Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８；または
    （ｖｉ）Ｔ２５６、Ｈ２８５、Ｔ３０７、Ｑ３１１、およびＡ３７８
    から選択される残基における変異を含む、請求項１から５８のいずれかに記載のポリペプチド。
60. （ｉ）Ｔ２５６Ｄ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；
    （ｉｉ）Ｈ２８５Ｎ、Ｔ３０７Ｑ、およびＮ３１５Ｄ；
    （ｉｉｉ）Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｑ、およびＡ３７８Ｖ；
    （ｉｖ）Ｔ３０７Ｑ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；
    （ｖ）Ｔ２５６Ｄ、Ｎ２８６Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ；または
    （ｖｉ）Ｔ２５６Ｄ、Ｈ２８５Ｄ、Ｔ３０７Ｒ、Ｑ３１１Ｖ、およびＡ３７８Ｖ
    から選択される変異を含む、請求項１から５９のいずれかに記載のポリペプチド。
61. 前記Ｆｃ領域以外の領域における変異をさらに含む、請求項１から６０のいずれかに記載のポリペプチド。
62. 複数の変異を含み、少なくとも１個の変異が代償性または有益な変異である、請求項１から６１のいずれかに記載のポリペプチド。
63. 単離されたポリペプチドである、請求項１から６２のいずれかに記載のポリペプチド。
64. 合成ポリペプチドである、請求項１から６２のいずれかに記載のポリペプチド。
65. 請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドを含む組成物。
66. 薬学的に許容される担体をさらに含む、請求項６５に記載の組成物。
67. 請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドをコードする核酸分子。
68. 請求項６７に記載の核酸分子を含むベクター。
69. 請求項６７に記載の核酸分子または請求項６８に記載のベクターを含む細胞。
70. 請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドおよび前記ポリペプチドの使用に関する指示を含むキット。
71. 請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドを含む容器。
72. ポリペプチドを生成する方法であって、請求項６９に記載の細胞を、抗体分子の生成を可能にする条件下で培養し、それにより、前記ポリペプチドを生成するステップを含む、方法。
73. 前記ポリペプチドを単離または精製するステップをさらに含む、請求項７２に記載の方法。
74. 障害を処置する方法であって、それを必要としている被験体に、有効量の、請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは請求項６５もしくは６６に記載の組成物を投与し、それにより前記障害を処置するステップを含む、方法。
75. 被験体において障害を処置することにおける使用のための、請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは請求項６５もしくは６６に記載の組成物。
76. 被験体における障害の処置のための医薬の製造における、請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドまたは請求項６５もしくは６６に記載の組成物の使用。
77. 分子を検出する方法であって、被験体由来の細胞または試料を、請求項１から６４のいずれかに記載のポリペプチドと接触させ、それにより前記分子を検出するステップを含む、方法。