JP2019530875A5 - - Google Patents
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Claims (41)
- 対象者のユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼL1(UCH−L1)状況の評価を補助する方法であって、
前記対象者からの生体サンプル中の少なくとも一つの生物マーカーを検出する工程を含み、生物マーカーの少なくとも一つがUCH−L1であり、当該方法は、(i)25,000pg/mL以下の量でのUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、(ii)5logのダイナミックレンジを有し、(iii)そのダイナミックレンジにおいて直線性である、方法。 - 対象者のユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼL1(UCH−L1)状況の評価を補助する方法であって、
a)前記対象者からの生体サンプルを、同時若しくは順次に、任意の順序で、少なくとも一つの第1の特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2の特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記第1の特異的結合メンバー及び前記第2の特異的結合メンバーはそれぞれ特異的にUCH−L1に結合し、それにより、前記第1の特異的結合メンバー−UCH−L1−第2の特異的結合メンバーを含む一又は複数の第1の複合体を産生する、
b)前記サンプル中に存在する前記一又は複数の第1の複合体中のUCH−L1を検出する工程と
を含み、
当該方法が、
(i)25,000pg/mL以下のUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、前記生体サンプルの希釈を必要とせず;又は
(ii)25,000pg/mL以下の量でのUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、当該方法が5logのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり;又は
(iii)約5pg/mL〜約25,000pg/mLのダイナミックレンジでUCH−L1のレベルを定量することができ、10%未満CVの精度及び10%未満の直線性からの偏差(DL)が前記ダイナミックレンジで達成される、方法。 - 対象者のユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼL1(UCH−L1)状況の評価を補助する方法であって、
a)前記対象者からの生体サンプルを、同時若しくは順次に、任意の順序で、少なくとも一つの第1の特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2の特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記第1の特異的結合メンバー及び前記第2の特異的結合メンバーは、それぞれ特異的にUCH−L1に結合し、それによって、前記第1の特異的結合メンバー−UCH−L1−第2の特異的結合メンバーを含む一又は複数の第1の複合体を産生し、前記第1の特異的結合メンバー又は第2の特異的結合メンバーのいずれかは、検出可能な標識を含む、
b)一又は複数の第1の複合体からのシグナルを評価する工程と、ここで、検出可能な標識からの検出可能なシグナルの量が、前記サンプル中に存在するUCH−L1の量を示す、
を含み、
当該方法が、
(i)25,000pg/mL以下のUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、前記生体サンプルの希釈を必要とせず;又は
(ii)25,000pg/mL以下の量でのUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、当該方法が5logのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり;又は
(iii)約5pg/mL〜約25,000pg/mLのダイナミックレンジでUCH−L1のレベルを定量することができ、10%未満CVの精度及び10%未満の直線性からの偏差(DL)が前記ダイナミックレンジで達成される、方法。 - 対象者からの生体サンプル中のUCH−L1を測定する方法であって、
(a)前記対象者からの生体サンプルを得ること;
(b)前記生体サンプルを、同時に又は順次に、任意の順序で、
(1)UCH−L1若しくはUCH−L1断片上のエピトープに結合して、捕捉抗体−UCH−L1抗原複合体を形成する少なくとも一つの捕捉抗体、及び(2)検出可能な標識を含み、前記捕捉抗体によって結合されていないUCH−L1上のエピトープに結合して少なくとも一つの捕捉抗体−UCH−L1抗原−少なくとも一つの第1の検出抗体−複合体を形成する、少なくとも一つの第1の検出抗体
と接触させること、及び
(c)前記少なくとも一つの捕捉抗体−UCH−L1抗原−少なくとも一つの第1の検出抗体複合体中の前記検出可能な標識によって発生するシグナルに基づいて、前記生体サンプル中のUCH−L1の量若しくは濃度を求めること
を含み、
当該方法が、
(i)25,000pg/mL以下の量でUCH−L1のレベルを求めるに用いることができ、当該方法が5logのダイナミックレンジを有し、前記ダイナミックレンジで直線性であり;又は
(ii)約5pg/mL〜約25,000pg/mLのダイナミックレンジでUCH−L1のレベルを定量することができ、10%未満CVの精度及び10%未満の直線性からの偏差(DL)が前記ダイナミックレンジで達成される、方法。 - 前記方法が、前記少なくとも第1の特異的結合メンバー及び前記少なくとも第2の特異的結合メンバーによって結合されていないエピトープに結合する少なくとも一つの第3の特異的結合メンバーをさらに含み、前記第1の特異的結合メンバー、第2の特異的結合メンバー及び第3の特異的結合メンバーの少なくとも二つが、検出可能な標識を含む、請求項3に記載の方法。
- 前記少なくとも一つの特異的結合メンバー、少なくとも第2の特異的結合メンバー及び少なくとも第3の特異的結合メンバーが、単一特異性抗体である、請求項5に記載の方法。
- 前記方法が、前記捕捉抗体及び前記第1の検出抗体によって結合されていないUCH−L1上のエピトープに結合し、検出可能な標識を含む、少なくとも一つの第2の検出抗体をさらに含む、請求項4に記載の方法。
- 前記少なくとも一つの捕捉抗体、少なくとも一つの検出抗体及び少なくとも第2の検出抗体が、単一特異性抗体である、請求項7に記載の方法。
- 前記第1の特異的結合メンバー及び第2の特異的結合メンバーのいずれかであって、前記検出可能な標識を含まないメンバーが、固体支持体上に固定化されている、請求項3、5又は6のいずれか一項に記載の方法。
- UCH−L1を一又は複数の他の生物マーカーとともに評価する、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- UCH−L1を前記対象者のグリア細胞繊維性酸性タンパク質(GFAP)状況とともに評価し、前記方法が、
前記対象者からの生体サンプル中の少なくとも二つの生物マーカーを検出する工程を含み、前記生物マーカーの少なくとも二つが、GFAP及びUCH−L1であり、当該方法が、(i)50,000pg/mL以下の量でのGFAPのレベル及び25,000pg/mL以下の量でのUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、(ii)5logのダイナミックレンジを有し、(iii)そのダイナミックレンジにおいて直線性である、請求項1に記載の方法。 - 前記UCH−L1をイムノアッセイ、臨床化学アッセイ又は単分子検出アッセイによって検出する、請求項1、2又は11に記載の方法。
- 前記GFAPをイムノアッセイ、臨床化学アッセイ又は単分子検出アッセイによって検出する、請求項11又は12に記載の方法。
- 前記方法が、対象者のGFAP状況を評価することを含み、当該方法が、
a)前記生体サンプルを、同時に又は順次に、(i)少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーが、それぞれ特異的にGFAPに結合し、それにより、前記少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー−GFAP−少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーを含む一又は複数の第2の複合体を産生する、
b)前記サンプル中の前記一又は複数の第2の複合体中のGFAPを検出する工程と
をさらに含み、
当該方法が、(i)50,000pg/mL以下のGFAPのレベル及び25,000pg/mL以下のUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、(ii)生体サンプルの希釈を必要とせず、(iii)ポイント・オブ・ケア機器を用いて行われる、請求項2に記載の方法。 - 前記方法は、対象者のGFAP状況を評価することをさらに含み、当該方法が、
a)前記生体サンプルを、同時に又は順次に、(i)少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーと接触させる工程と、ここで、前記少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー及び少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーがそれぞれ特異的にGFAPに結合することで、前記少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー−GFAP−少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーを含む一又は複数の第2の複合体を産生し、前記少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーが第2の検出可能な標識を含む、
b)前記一又は複数の第2の複合体からのシグナルを評価する工程と、ここで、(i)前記少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーからの検出可能な標識からの検出可能なシグナルの存在が、GFAPがサンプル中に存在することを示し、前記少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーからの検出可能な標識からの検出可能なシグナルの量が、サンプル中に存在するGFAPの量を示すことから、前記少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーからの前記検出可能な標識からの前記検出可能なシグナルの存在及び/又は量を用いて、前記対象者のGFAP状況を評価することができる、
をさらに含み、
当該方法が、(i)50,000pg/mL以下のGFAPのレベル及び25,000pg/mL以下のUCH−L1のレベルを求めるのに用いることができ、(ii)生体サンプルの希釈を必要とせず、(iii)ポイント・オブ・ケア機器を用いて行われる、請求項3、5、6、9又は14に記載の方法。 - 前記方法は、対象者からの生体サンプル中のGFAPを測定することをさらに含み、
(a)前記生体サンプルを、同時に又は順次に、任意の順序で、
(1)(i)GFAP若しくはGFAP断片上のエピトープに結合して少なくとも一つの捕捉抗体−GFAP抗原複合体を形成する少なくとも一つの捕捉抗体、及び(ii)少なくとも一つの検出可能な標識を含み、捕捉抗体によって結合していないGFAP上のエピトープに結合してGFAP抗原−検出抗体複合体を形成する検出抗体と接触させる工程、及び
(b)前記少なくとも一つの捕捉抗体−GFAP抗原−少なくとも一つの検出抗体複合体中の前記検出可能な標識によって発生するシグナルに基づいて前記生体サンプル中のGFAPの量若しくは濃度を求める工程と
をさらに含み、当該方法を用いて、50,000pg/mL以下の量でのGFAP及び25,000pg/mL以下の量でのUCH−L1を求めることができ、当該方法が5logのダイナミックレンジを有し、当該ダイナミックレンジにおいて直線性である、請求項4、7、8又は15に記載の方法。 - 前記方法が、約16pg/mL〜約50,000pg/mL、約35pg/mL〜約50,000pg/mL、約100pg/mL〜約50,000pg/mL、約125pg/mL〜約50,000pg/mL、及び約150pg/mL〜約50,000pg/mLからなる群から選択されるGFAPのレベルを検出する、請求項14、15又は16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、約10pg/mL〜約25,000pg/mL、約35pg/mL〜約20,000pg/mL、約100pg/mL〜約25,000pg/mL、約125pg/mL〜約20,000pg/mL、約150pg/mL〜約15,000pg/mL及び約175pg/mL〜約10,000pg/mLからなる群から選択されるUCH−L1のレベルを検出する、請求項1〜17のいずれか一項に記載の方法。
- 前記接触を同時に行う、請求項3、4、14、15又は16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記接触を順次に行う、請求項3、4、14、15又は16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記少なくとも一つの捕捉抗体が、固体支持体上に固定化されている、請求項4、8又は16のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を約5〜約20分以内に行う、請求項1〜21のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を約15分以内に行う、請求項1〜22のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生体サンプルが、全血サンプル、血清サンプル、脳脊髄液サンプル、血漿サンプル、組織又は生物学的液体からなる群から選択される、請求項1〜23のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を、外傷性脳損傷の発生又は外傷性脳損傷のないことを確認するために行う、請求項1〜24のいずれか一項に記載の方法。
- 前記外傷性脳損傷が、軽度外傷性脳損傷である、請求項25に記載の方法。
- UCH−L1の状況が、単一時間点でのUCH−L1のレベル又は量を測定することによって評価される、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- UCH−L1の状況が、複数の時間点でのUCH−L1のレベル又は量を測定することによって評価される、請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を、前記対象者の臨床状態、前記対象者の臨床検査値、前記対象者の軽度、中等度若しくは重度TBIを患っているという分類、前記対象者の低若しくは高UCH−L1のレベルの表示、及び前記対象者が頭部への損傷を受けた可能性がある事象のタイミングからなる群から選択される因子とは無関係に、対象者について行うことができる、請求項1〜28のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法を、20マイクロリットル未満の体積の前記生体サンプルを用いて行う、請求項1〜29のいずれか一項に記載の方法。
- 前記生体サンプルが希釈を必要としない、請求項1、4、7、又は8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、約10pg/mLの検出下限(LoD)を有する、請求項1〜31のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、約20pg/mLの検出下限(LoD)を有する、請求項1〜32のいずれか一項に記載の方法。
- 前記方法が、拡大された検出ウィンドウを提供する、請求項1〜33のいずれか一項に記載の方法。
- 前記一つの第1のGFAP特異的結合メンバーが、固体支持体上に固定化されている、請求項14に記載の方法。
- 少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーが固体支持体に固定化されている、請求項14に記載の方法。
- 前記生体サンプルが、希釈されている又は未希釈である、請求項24に記載の方法。
- 前記少なくとも一つの第1のGFAP特異的結合メンバー及び前記少なくとも一つの第2のGFAP特異的結合メンバーが単一特異性抗体である、請求項14又は15に記載の方法。
- 当該方法を、ポイント・オブ・ケア機器を用いて行う、請求項1〜13及び16〜38のいずれか一項に記載の方法。
- 前記GFAPをイムノアッセイ又は臨床化学アッセイによって検出する、請求項14に記載の方法。
- 前記方法を、単分子検出アッセイを用いて行う、請求項1〜39のいずれか一項に記載の方法。
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