JP2019520852A5

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Publication number: JP2019520852A5
Application number: JP2019514870A
Authority: JP
Filing date: 2017-05-25
Publication date: 2020-11-12
Anticipated expiration: 2037-05-25

Claims

(i)少なくとも1つの対象のポリペプチド(PoI);
(ii)少なくとも1つのエクソソームポリペプチド;及び
(iii)ポリペプチドに基づく放出系
を含む少なくとも1つのポリペプチド構築物を含む細胞外小胞(EV)であって、
前記ポリペプチドに基づく放出系が、内在的活性化により前記少なくとも1つのエクソソームポリペプチドから前記少なくとも1つのPoIを放出し、
前記ポリペプチドに基づく放出系が、シス切断性放出系又は核局在化シグナル(NLS)-核局在化シグナル結合タンパク質(NLSBP)(NLS-NLSBP)放出系から選択される、
EV。
前記PoIが、抗体、細胞内抗体、一本鎖可変断片、アフィボディ、酵素、腫瘍抑制剤、ウイルス又は細菌阻害剤、細胞成分タンパク質、DNA及び/又はRNA結合タンパク質、DNA修復阻害剤、ヌクレアーゼ、プロテイナーゼ、インテグラーゼ、転写因子、成長因子、アポトーシス阻害剤及び誘導物質、毒素、構造タンパク質、神経栄養因子、膜輸送体、ヌクレオチド結合タンパク質、熱ショックタンパク質、CRISPR関連タンパク質、並びにその任意の組合せを含む群から選択される治療的ポリペプチドである、請求項1に記載のEV。
前記エクソソームポリペプチドが、CD9、CD53、CD63、CD81、CD54、CD50、FLOT1、FLOT2、CD49d、CD71、CD133、CD138、CD235a、ALIX、シンテニン-1、シンテニン-2、Lamp2b、TSPAN8、TSPAN14、CD37、CD82、CD151、CD231、CD102、NOTCH1、NOTCH2、NOTCH3、NOTCH4、DLL1、DLL4、JAG1、JAG2、CD49d/ITGA4、ITGB5、ITGB6、ITGB7、CD11a、CD11b、CD11c、CD18/ITGB2、CD41、CD49b、CD49c、CD49e、CD51、CD61、CD104、テトラスパニン、Fc受容体、インターロイキン受容体、免疫グロブリン、MHC-I又はMHC-II成分、CD2、CD3ε、CD3ζ、CD13、CD18、CD19、CD30、CD34、CD36、CD40、CD40L、CD44、CD45、CD45RA、CD47、CD86、CD110、CD111、CD115、CD117、CD125、CD135、CD184、CD200、CD279、CD273、CD274、CD362、COL6A1、AGRN、EGFR、GAPDH、GLUR2、GLUR3、HLA-DM、HSPG2、L1CAM、LAMB1、LAMC1、LFA-1、LGALS3BP、Mac-1α、Mac-1β、MFGE8、SLIT2、STX3、TCRA、TCRB、TCRD、TCRG、VTI1A、VTI1B、及び他のエクソソームポリペプチドを含む群から選択される、請求項1又は2に記載のEV。
前記EVが、少なくとも1つの対象のポリヌクレオチドを更に含む、請求項1から3のいずれか一項に記載のEV。
前記対象のポリヌクレオチドが、RNA結合PoI又はDNA結合PoIとの相互作用によって前記EVに輸送される、請求項4に記載のEV。
少なくとも1つのPoIを含むEVであって、前記PoIが、ポリペプチドに基づく放出系の内在的活性化によって少なくとも1つのエクソソームポリペプチドから放出されたものである、EV。
前記EVが、対象のポリヌクレオチドを更に含む、請求項6に記載のEV。
前記EVが、少なくとも1つの標的化部分を更に含む、請求項1から7のいずれか一項に記載のEV。
請求項1から8のいずれか一項に記載のEVを製造する方法であって、
i.少なくとも1つのPoI、内在的に活性化可能なポリペプチドに基づく放出系、及び少なくとも1つのエクソソームポリペプチドを含む少なくとも1つのポリペプチド構築物をコードする少なくとも1つのポリヌクレオチド構築物を、EV産生細胞に導入する工程;
ii.前記少なくとも1つのポリヌクレオチド構築物によりコードされる少なくとも1つのポリペプチド構築物を、前記EV産生細胞中で発現させる工程;並びに
iii.前記EV産生細胞からPoIを含むEVを回収する工程
を含む、方法。
i.少なくとも1つのPoI;
ii.少なくとも1つの内在的に活性化可能なポリペプチドに基づく放出系であって、前記ポリペプチドに基づく放出系が、シス切断性放出系又は核局在化シグナル(NLS)-核局在化シグナル結合タンパク質(NLSBP)(NLS-NLSBP)放出系から選択される、放出系;及び
iii.少なくとも1つのエクソソームポリペプチド
をコードするポリヌクレオチド構築物。
i.少なくとも1つのPoI;
ii.少なくとも1つの内在的に活性化可能なポリペプチドに基づく放出系であって、前記ポリペプチドに基づく放出系が、シス切断性放出系又は核局在化シグナル(NLS)-核局在化シグナル結合タンパク質(NLSBP)(NLS-NLSBP)放出系から選択される、放出系;及び
iii.少なくとも1つのエクソソームポリペプチド
を含むポリペプチド構築物。
(i)少なくとも1つの請求項10に記載のポリヌクレオチド構築物、
(ii)少なくとも1つの請求項11に記載のポリペプチド構築物、及び/又は
(iii)少なくとも1つの請求項1〜8のいずれか一項に記載のEV
を含む細胞。
少なくとも1つのPoIの細胞内送達のためのin vitro方法であって、少なくとも1つの請求項1〜8のいずれか一項に記載のEVと標的細胞とを接触させる工程を含む、方法。
(i)少なくとも1つの請求項10に記載のポリヌクレオチド構築物、
(ii)少なくとも1つの請求項11に記載のポリペプチド構築物、
(iii)少なくとも1つの請求項1〜8のいずれか一項に記載のEV、及び/又は
(iv)請求項12に記載の細胞
を含む医薬組成物。
医薬に使用するための、請求項1〜8のいずれか一項に記載のEV及び/又はEVの集団を含む組成物。