JP2019509257A - 癌治療用のaxl特異的抗体−薬物コンジュゲート - Google Patents
癌治療用のaxl特異的抗体−薬物コンジュゲート Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019509257A JP2019509257A JP2018536482A JP2018536482A JP2019509257A JP 2019509257 A JP2019509257 A JP 2019509257A JP 2018536482 A JP2018536482 A JP 2018536482A JP 2018536482 A JP2018536482 A JP 2018536482A JP 2019509257 A JP2019509257 A JP 2019509257A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- seq
- region
- adc
- cdr1
- cdr2
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 title claims abstract description 218
- 239000000611 antibody drug conjugate Substances 0.000 title claims abstract description 191
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 96
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 title description 52
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 title description 17
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims abstract description 429
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 153
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 claims abstract description 104
- 108010023337 axl receptor tyrosine kinase Proteins 0.000 claims abstract description 102
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 claims abstract description 71
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 claims abstract description 71
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims abstract description 64
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 claims description 373
- 230000035772 mutation Effects 0.000 claims description 172
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 147
- BFSMGDJOXZAERB-UHFFFAOYSA-N dabrafenib Chemical compound S1C(C(C)(C)C)=NC(C=2C(=C(NS(=O)(=O)C=3C(=CC=CC=3F)F)C=CC=2)F)=C1C1=CC=NC(N)=N1 BFSMGDJOXZAERB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 132
- 229960002465 dabrafenib Drugs 0.000 claims description 132
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 119
- GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N vemurafenib Chemical group CCCS(=O)(=O)NC1=CC=C(F)C(C(=O)C=2C3=CC(=CN=C3NC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1F GPXBXXGIAQBQNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 115
- 229940124647 MEK inhibitor Drugs 0.000 claims description 113
- 229960003862 vemurafenib Drugs 0.000 claims description 112
- 229960004066 trametinib Drugs 0.000 claims description 111
- LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N trametinib Chemical group CC(=O)NC1=CC=CC(N2C(N(C3CC3)C(=O)C3=C(NC=4C(=CC(I)=CC=4)F)N(C)C(=O)C(C)=C32)=O)=C1 LIRYPHYGHXZJBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 111
- 229940125431 BRAF inhibitor Drugs 0.000 claims description 106
- MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N BAY-43-9006 Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=CC(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 MLDQJTXFUGDVEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 94
- 239000005511 L01XE05 - Sorafenib Substances 0.000 claims description 94
- 229960003787 sorafenib Drugs 0.000 claims description 94
- 229960002271 cobimetinib Drugs 0.000 claims description 91
- RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N cobimetinib fumarate Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F.C1C(O)([C@H]2NCCCC2)CN1C(=O)C1=CC=C(F)C(F)=C1NC1=CC=C(I)C=C1F RESIMIUSNACMNW-BXRWSSRYSA-N 0.000 claims description 91
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 88
- 229950003054 binimetinib Drugs 0.000 claims description 87
- ACWZRVQXLIRSDF-UHFFFAOYSA-N binimetinib Chemical compound OCCONC(=O)C=1C=C2N(C)C=NC2=C(F)C=1NC1=CC=C(Br)C=C1F ACWZRVQXLIRSDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 87
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 66
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 claims description 59
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 claims description 56
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 claims description 53
- 102000018471 Proto-Oncogene Proteins B-raf Human genes 0.000 claims description 43
- 108010091528 Proto-Oncogene Proteins B-raf Proteins 0.000 claims description 43
- 101150022345 GAS6 gene Proteins 0.000 claims description 42
- 102100039788 GTPase NRas Human genes 0.000 claims description 37
- 101000744505 Homo sapiens GTPase NRas Proteins 0.000 claims description 37
- 239000012824 ERK inhibitor Substances 0.000 claims description 34
- -1 BAL-3833 Chemical compound 0.000 claims description 32
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 32
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 31
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 claims description 28
- IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N [4-[[(2S)-5-(carbamoylamino)-2-[[(2S)-2-[6-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)hexanoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]pentanoyl]amino]phenyl]methyl N-[(2S)-1-[[(2S)-1-[[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-3-[[(1S,2R)-1-hydroxy-1-phenylpropan-2-yl]amino]-1-methoxy-2-methyl-3-oxopropyl]pyrrolidin-1-yl]-3-methoxy-5-methyl-1-oxoheptan-4-yl]-methylamino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]amino]-3-methyl-1-oxobutan-2-yl]-N-methylcarbamate Chemical group CC[C@H](C)[C@@H]([C@@H](CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)c1ccccc1)OC)N(C)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)OCc1ccc(NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CCCCCN2C(=O)CCC2=O)C(C)C)cc1)C(C)C IEDXPSOJFSVCKU-HOKPPMCLSA-N 0.000 claims description 26
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 claims description 24
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 24
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 claims description 24
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 21
- 229940121742 Serine/threonine kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 20
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 18
- 229950001969 encorafenib Drugs 0.000 claims description 13
- CMJCXYNUCSMDBY-ZDUSSCGKSA-N lgx818 Chemical compound COC(=O)N[C@@H](C)CNC1=NC=CC(C=2C(=NN(C=2)C(C)C)C=2C(=C(NS(C)(=O)=O)C=C(Cl)C=2)F)=N1 CMJCXYNUCSMDBY-ZDUSSCGKSA-N 0.000 claims description 13
- 102200006532 rs112445441 Human genes 0.000 claims description 13
- 102220053950 rs121913238 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006520 rs121913240 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006525 rs121913240 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006531 rs121913529 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006539 rs121913529 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006538 rs121913530 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006541 rs121913530 Human genes 0.000 claims description 13
- 102200006533 rs121913535 Human genes 0.000 claims description 13
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 13
- YFCIFWOJYYFDQP-PTWZRHHISA-N 4-[3-amino-6-[(1S,3S,4S)-3-fluoro-4-hydroxycyclohexyl]pyrazin-2-yl]-N-[(1S)-1-(3-bromo-5-fluorophenyl)-2-(methylamino)ethyl]-2-fluorobenzamide Chemical group CNC[C@@H](NC(=O)c1ccc(cc1F)-c1nc(cnc1N)[C@H]1CC[C@H](O)[C@@H](F)C1)c1cc(F)cc(Br)c1 YFCIFWOJYYFDQP-PTWZRHHISA-N 0.000 claims description 12
- YZDJQTHVDDOVHR-UHFFFAOYSA-N PLX-4720 Chemical compound CCCS(=O)(=O)NC1=CC=C(F)C(C(=O)C=2C3=CC(Cl)=CN=C3NC=2)=C1F YZDJQTHVDDOVHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- CYOHGALHFOKKQC-UHFFFAOYSA-N selumetinib Chemical compound OCCONC(=O)C=1C=C2N(C)C=NC2=C(F)C=1NC1=CC=C(Br)C=C1Cl CYOHGALHFOKKQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- HDAJDNHIBCDLQF-RUZDIDTESA-N SCH772984 Chemical compound O=C([C@@H]1CCN(C1)CC(=O)N1CCN(CC1)C=1C=CC(=CC=1)C=1N=CC=CN=1)NC(C=C12)=CC=C1NN=C2C1=CC=NC=C1 HDAJDNHIBCDLQF-RUZDIDTESA-N 0.000 claims description 6
- 229950010746 selumetinib Drugs 0.000 claims description 6
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 claims description 5
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 claims description 5
- GFMMXOIFOQCCGU-UHFFFAOYSA-N 2-(2-chloro-4-iodoanilino)-N-(cyclopropylmethoxy)-3,4-difluorobenzamide Chemical compound C=1C=C(I)C=C(Cl)C=1NC1=C(F)C(F)=CC=C1C(=O)NOCC1CC1 GFMMXOIFOQCCGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- CFQULUVMLGZVAF-OYJDLGDISA-N U0126.EtOH Chemical compound CCO.C=1C=CC=C(N)C=1SC(\N)=C(/C#N)\C(\C#N)=C(/N)SC1=CC=CC=C1N CFQULUVMLGZVAF-OYJDLGDISA-N 0.000 claims description 4
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 4
- RDSACQWTXKSHJT-NSHDSACASA-N n-[3,4-difluoro-2-(2-fluoro-4-iodoanilino)-6-methoxyphenyl]-1-[(2s)-2,3-dihydroxypropyl]cyclopropane-1-sulfonamide Chemical compound C1CC1(C[C@H](O)CO)S(=O)(=O)NC=1C(OC)=CC(F)=C(F)C=1NC1=CC=C(I)C=C1F RDSACQWTXKSHJT-NSHDSACASA-N 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 229950008933 refametinib Drugs 0.000 claims description 4
- MLSAQOINCGAULQ-QFMPWRQOSA-N (E)-SB-590885 Chemical compound C1=CC(OCCN(C)C)=CC=C1C1=NC(C=2C=CN=CC=2)=C(C=2C=C3CCC(/C3=CC=2)=N\O)N1 MLSAQOINCGAULQ-QFMPWRQOSA-N 0.000 claims description 3
- DKNUPRMJNUQNHR-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(6,7-dimethoxyquinazolin-4-yl)oxyphenyl]-3-[5-(1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-yl)-1,2-oxazol-3-yl]urea Chemical compound C=12C=C(OC)C(OC)=CC2=NC=NC=1OC(C=1)=CC=CC=1NC(=O)NC=1C=C(C(C)(C)C(F)(F)F)ON=1 DKNUPRMJNUQNHR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- YABJJWZLRMPFSI-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-5-[[2-[5-(trifluoromethyl)-1H-imidazol-2-yl]-4-pyridinyl]oxy]-N-[4-(trifluoromethyl)phenyl]-2-benzimidazolamine Chemical compound N=1C2=CC(OC=3C=C(N=CC=3)C=3NC(=CN=3)C(F)(F)F)=CC=C2N(C)C=1NC1=CC=C(C(F)(F)F)C=C1 YABJJWZLRMPFSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZGBGPEDJXCYQPH-UHFFFAOYSA-N 3-(2-cyanopropan-2-yl)-N-[4-methyl-3-[(3-methyl-4-oxo-6-quinazolinyl)amino]phenyl]benzamide Chemical compound C1=C(NC=2C=C3C(=O)N(C)C=NC3=CC=2)C(C)=CC=C1NC(=O)C1=CC=CC(C(C)(C)C#N)=C1 ZGBGPEDJXCYQPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ZGXOBLVQIVXKEB-UHFFFAOYSA-N 3-[N-[3-[(dimethylamino)methyl]phenyl]-C-phenylcarbonimidoyl]-2-hydroxy-N,N-dimethyl-1H-indole-6-carboxamide Chemical compound CN(C)CC1=CC(=CC=C1)N=C(C2=CC=CC=C2)C3=C(NC4=C3C=CC(=C4)C(=O)N(C)C)O ZGXOBLVQIVXKEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- NGFFVZQXSRKHBM-FKBYEOEOSA-N 5-[[(1r,1as,6br)-1-[6-(trifluoromethyl)-1h-benzimidazol-2-yl]-1a,6b-dihydro-1h-cyclopropa[b][1]benzofuran-5-yl]oxy]-3,4-dihydro-1h-1,8-naphthyridin-2-one Chemical compound N1C(=O)CCC2=C1N=CC=C2OC(C=C1[C@@H]23)=CC=C1O[C@@H]3[C@H]2C1=NC2=CC=C(C(F)(F)F)C=C2N1 NGFFVZQXSRKHBM-FKBYEOEOSA-N 0.000 claims description 3
- DEZZLWQELQORIU-RELWKKBWSA-N GDC-0879 Chemical compound N=1N(CCO)C=C(C=2C=C3CCC(/C3=CC=2)=N\O)C=1C1=CC=NC=C1 DEZZLWQELQORIU-RELWKKBWSA-N 0.000 claims description 3
- 102100031487 Growth arrest-specific protein 6 Human genes 0.000 claims description 3
- 101000923005 Homo sapiens Growth arrest-specific protein 6 Proteins 0.000 claims description 3
- VWMJHAFYPMOMGF-ZCFIWIBFSA-N TAK-580 Chemical compound N([C@H](C)C=1SC(=CN=1)C(=O)NC=1N=CC(Cl)=C(C=1)C(F)(F)F)C(=O)C1=NC=NC(N)=C1Cl VWMJHAFYPMOMGF-ZCFIWIBFSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 101000984753 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase B-raf Proteins 0.000 abstract description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 3
- 102100027103 Serine/threonine-protein kinase B-raf Human genes 0.000 abstract 1
- 102100035360 Cerebellar degeneration-related antigen 1 Human genes 0.000 description 314
- 101000807561 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase receptor UFO Proteins 0.000 description 216
- 102100037236 Tyrosine-protein kinase receptor UFO Human genes 0.000 description 210
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 113
- KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 1-n-(4-chlorophenyl)-6-methyl-5-n-[3-(7h-purin-6-yl)pyridin-2-yl]isoquinoline-1,5-diamine Chemical compound N=1C=CC2=C(NC=3C(=CC=CN=3)C=3C=4N=CNC=4N=CN=3)C(C)=CC=C2C=1NC1=CC=C(Cl)C=C1 KKVYYGGCHJGEFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 106
- 101100381978 Mus musculus Braf gene Proteins 0.000 description 105
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 94
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 84
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 82
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 73
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 72
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 56
- 230000002354 daily effect Effects 0.000 description 56
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 54
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 49
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 41
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 41
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 41
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 37
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 35
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 28
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 25
- 101001059454 Homo sapiens Serine/threonine-protein kinase MARK2 Proteins 0.000 description 22
- 102100028904 Serine/threonine-protein kinase MARK2 Human genes 0.000 description 22
- 108010093470 monomethyl auristatin E Proteins 0.000 description 22
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 22
- 102100024952 Protein CBFA2T1 Human genes 0.000 description 21
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 20
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 20
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 18
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 18
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 18
- 108090000744 Mitogen-Activated Protein Kinase Kinases Proteins 0.000 description 17
- 102000004232 Mitogen-Activated Protein Kinase Kinases Human genes 0.000 description 17
- 102100024193 Mitogen-activated protein kinase 1 Human genes 0.000 description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 17
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 17
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 17
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 16
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 16
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 15
- 101100262697 Mus musculus Axl gene Proteins 0.000 description 15
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 15
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 15
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 14
- 230000000981 bystander Effects 0.000 description 13
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 13
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 13
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 13
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 13
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 13
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 13
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 13
- 102100031480 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Human genes 0.000 description 12
- 101710146526 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 1 Proteins 0.000 description 12
- 108010044540 auristatin Proteins 0.000 description 12
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 12
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 12
- 108010007457 Extracellular Signal-Regulated MAP Kinases Proteins 0.000 description 11
- 102000009516 Protein Serine-Threonine Kinases Human genes 0.000 description 11
- 108010009341 Protein Serine-Threonine Kinases Proteins 0.000 description 11
- 102000004022 Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 11
- 108090000412 Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 11
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 11
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 10
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 10
- MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N (2s)-2-[[(2r,3r)-3-methoxy-3-[(2s)-1-[(3r,4s,5s)-3-methoxy-5-methyl-4-[methyl-[(2s)-3-methyl-2-[[(2s)-3-methyl-2-(methylamino)butanoyl]amino]butanoyl]amino]heptanoyl]pyrrolidin-2-yl]-2-methylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoic acid Chemical compound CN[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N(C)[C@@H]([C@@H](C)CC)[C@H](OC)CC(=O)N1CCC[C@H]1[C@H](OC)[C@@H](C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 MFRNYXJJRJQHNW-DEMKXPNLSA-N 0.000 description 9
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 9
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 9
- 102000029749 Microtubule Human genes 0.000 description 9
- 108091022875 Microtubule Proteins 0.000 description 9
- 210000004688 microtubule Anatomy 0.000 description 9
- 108010059074 monomethylauristatin F Proteins 0.000 description 9
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 9
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 9
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 8
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000005723 MEK inhibition Effects 0.000 description 8
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 8
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 8
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 7
- 102000019149 MAP kinase activity proteins Human genes 0.000 description 7
- 108040008097 MAP kinase activity proteins Proteins 0.000 description 7
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 7
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 7
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 7
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 7
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 7
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 7
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 7
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 7
- 229940125374 mitogen-activated extracellular signal-regulated kinase inhibitor Drugs 0.000 description 7
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 7
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 7
- 101000876610 Dictyostelium discoideum Extracellular signal-regulated kinase 2 Proteins 0.000 description 6
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 101001052493 Homo sapiens Mitogen-activated protein kinase 1 Proteins 0.000 description 6
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 6
- 102220084711 rs863225115 Human genes 0.000 description 6
- DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 2-aminopropane-1,3-dithiol Chemical group SCC(N)CS DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 102100023266 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 2 Human genes 0.000 description 5
- 101710146529 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 2 Proteins 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 5
- 230000006870 function Effects 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[[6-amino-2-[[2-[[2-[[5-amino-2-[[2-[[1-[2-[[6-amino-2-[(2,5-diamino-5-oxopentanoyl)amino]hexanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)p Chemical compound C1CCN(C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CCC(N)=O)C1C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NC(CO)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(=O)NC(CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 KISWVXRQTGLFGD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 4
- 102000002090 Fibronectin type III Human genes 0.000 description 4
- 108050009401 Fibronectin type III Proteins 0.000 description 4
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 4
- 125000003412 L-alanyl group Chemical group [H]N([H])[C@@](C([H])([H])[H])(C(=O)[*])[H] 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 4
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 4
- 102100033479 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Human genes 0.000 description 4
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 4
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 4
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 4
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009830 antibody antigen interaction Effects 0.000 description 4
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 4
- 238000012575 bio-layer interferometry Methods 0.000 description 4
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 4
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 4
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 4
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 4
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 4
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 238000011221 initial treatment Methods 0.000 description 4
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 4
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 4
- 125000003588 lysine group Chemical class [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 4
- 238000009115 maintenance therapy Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N pyrrolo[2,3-i][1,2]benzodiazepine Chemical compound C1=CN=NC2=C3C=CN=C3C=CC2=C1 YUOCYTRGANSSRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 4
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 4
- 230000004044 response Effects 0.000 description 4
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MSNVESLISHTIRS-UHFFFAOYSA-N 9h-pyrrolo[2,1-c][1,4]benzodiazepine Chemical compound N1=C2C=CC=CC2=CN2CC=CC2=C1 MSNVESLISHTIRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 3
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 3
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101000606129 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3 Proteins 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 102000001291 MAP Kinase Kinase Kinase Human genes 0.000 description 3
- 108060006687 MAP kinase kinase kinase Proteins 0.000 description 3
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 102000047918 Myelin Basic Human genes 0.000 description 3
- 101710107068 Myelin basic protein Proteins 0.000 description 3
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 3
- 241000239226 Scorpiones Species 0.000 description 3
- 108091005729 TAM receptors Proteins 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Chemical compound CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 3
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 3
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 3
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 3
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 3
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 3
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 3
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 3
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 3
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 3
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 3
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 3
- UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N gamma-carboxy-L-glutamic acid Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC(C(O)=O)C(O)=O UHBYWPGGCSDKFX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 102000050152 human BRAF Human genes 0.000 description 3
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 3
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 3
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 3
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 3
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 3
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 108091008598 receptor tyrosine kinases Proteins 0.000 description 3
- 102000027426 receptor tyrosine kinases Human genes 0.000 description 3
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 3
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 3
- ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N (2s)-2-amino-3-phenylpropanoic acid;(2s)-2,6-diaminohexanoic acid Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O.OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 ALBODLTZUXKBGZ-JUUVMNCLSA-N 0.000 description 2
- IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N (S)-colchicine Chemical compound C1([C@@H](NC(C)=O)CC2)=CC(=O)C(OC)=CC=C1C1=C2C=C(OC)C(OC)=C1OC IAKHMKGGTNLKSZ-INIZCTEOSA-N 0.000 description 2
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 101100476210 Caenorhabditis elegans rnt-1 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000000989 Complement System Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010069112 Complement System Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 2
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 101000666856 Homo sapiens Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1 Proteins 0.000 description 2
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 2
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 2
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- 125000000393 L-methionino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])[*])C([H])([H])C(SC([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 2
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 125000000510 L-tryptophano group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2N([H])C([H])=C(C([H])([H])[C@@]([H])(C(O[H])=O)N([H])[*])C2=C1[H] 0.000 description 2
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 2
- 239000012820 MEK1 Inhibitor Substances 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- 241001436793 Meru Species 0.000 description 2
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 2
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 2
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 2
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 2
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 102000038030 PI3Ks Human genes 0.000 description 2
- 108091007960 PI3Ks Proteins 0.000 description 2
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 2
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 240000007643 Phytolacca americana Species 0.000 description 2
- 235000009074 Phytolacca americana Nutrition 0.000 description 2
- 101710141955 RAF proto-oncogene serine/threonine-protein kinase Proteins 0.000 description 2
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102100039127 Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3 Human genes 0.000 description 2
- VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N UNPD55612 Natural products N1C(O)C2CC(C=CC(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100038388 Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1 Human genes 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N anthramycin Chemical compound N1[C@@H](O)[C@@H]2CC(\C=C\C(N)=O)=CN2C(=O)C2=CC=C(C)C(O)=C12 VGQOVCHZGQWAOI-HYUHUPJXSA-N 0.000 description 2
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 2
- 230000005888 antibody-dependent cellular phagocytosis Effects 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 230000035578 autophosphorylation Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 2
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 2
- 230000005779 cell damage Effects 0.000 description 2
- 208000037887 cell injury Diseases 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 2
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 230000007705 epithelial mesenchymal transition Effects 0.000 description 2
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 2
- 208000015486 malignant pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N mithramycin Chemical compound O([C@@H]1C[C@@H](O[C@H](C)[C@H]1O)OC=1C=C2C=C3C[C@H]([C@@H](C(=O)C3=C(O)C2=C(O)C=1C)O[C@@H]1O[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2O[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O[C@@H]3O[C@H](C)[C@@H](O)[C@@](C)(O)C3)C2)C1)[C@H](OC)C(=O)[C@@H](O)[C@@H](C)O)[C@H]1C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 CFCUWKMKBJTWLW-BKHRDMLASA-N 0.000 description 2
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 2
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 231100000590 oncogenic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002246 oncogenic effect Effects 0.000 description 2
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N oxalonitrile Chemical compound N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 2
- 201000002528 pancreatic cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000008443 pancreatic carcinoma Diseases 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- 229960003171 plicamycin Drugs 0.000 description 2
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N rachelmycin Chemical compound C1([C@]23C[C@@H]2CN1C(=O)C=1NC=2C(OC)=C(O)C4=C(C=2C=1)CCN4C(=O)C1=CC=2C=4CCN(C=4C(O)=C(C=2N1)OC)C(N)=O)=CC(=O)C1=C3C(C)=CN1 UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N 0.000 description 2
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 230000020347 spindle assembly Effects 0.000 description 2
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 2
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 2
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 2
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 2
- JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N vincaleukoblastine Chemical compound C([C@@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 2
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 2
- GTBCXYYVWHFQRS-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(pyridin-2-yldisulfanyl)pentanoate Chemical group C=1C=CC=NC=1SSC(C)CCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O GTBCXYYVWHFQRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-amino-3-methylbutanoyl]amino]-5-(carbamoylamino)pentanoic acid Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCNC(N)=O AGGWFDNPHKLBBV-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- RAHLDBGBLYIYDN-OQWDZDEYSA-N (z)-n-[(2,6-dichlorophenyl)methoxy]-1-[1-[3-[4-[(z)-(2,6-dichlorophenyl)methoxyiminomethyl]pyridin-1-ium-1-yl]propyl]pyridin-1-ium-4-yl]methanimine Chemical compound ClC1=CC=CC(Cl)=C1CO\N=C/C(C=C1)=CC=[N+]1CCC[N+](C=C1)=CC=C1\C=N/OCC1=C(Cl)C=CC=C1Cl RAHLDBGBLYIYDN-OQWDZDEYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 1-oxidanylurea Chemical compound N[14C](=O)NO VSNHCAURESNICA-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 2-amino-1-methyl-7h-purine-6-thione Chemical compound S=C1N(C)C(N)=NC2=C1NC=N2 FBUTXZSKZCQABC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4,6-dichloropyrimidine-5-carbaldehyde Chemical group NC1=NC(Cl)=C(C=O)C(Cl)=N1 GOJUJUVQIVIZAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010066676 Abrin Proteins 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 241000269350 Anura Species 0.000 description 1
- 102000015790 Asparaginase Human genes 0.000 description 1
- 108010024976 Asparaginase Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000669426 Aspergillus restrictus Ribonuclease mitogillin Proteins 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100027453 Bcl2-associated agonist of cell death Human genes 0.000 description 1
- 101710081085 Bcl2-associated agonist of cell death Proteins 0.000 description 1
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 1
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RAXZSEGXMBWYQK-SNVBAGLBSA-N C[C@H](C1=CC=CC=C1)NC(=O)NC2=NC(=C3C=NNC3=C2)CO Chemical compound C[C@H](C1=CC=CC=C1)NC(=O)NC2=NC(=C3C=NNC3=C2)CO RAXZSEGXMBWYQK-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 1
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 1
- 108050004290 Cecropin Proteins 0.000 description 1
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N Cladribine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(Cl)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 PTOAARAWEBMLNO-KVQBGUIXSA-N 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 1
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 1
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 1
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 1
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010016626 Dipeptides Proteins 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- 102100023272 Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5 Human genes 0.000 description 1
- AZVARJHZBXHUSO-UHFFFAOYSA-N Duocarmycin A Natural products COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3CC4CC44C5=C(C(C=C43)=O)NC(C5=O)(C)C(=O)OC)=CC2=C1 AZVARJHZBXHUSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-UHFFFAOYSA-N Duocarmycin SA Natural products COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C(C64CC6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150033452 Elk1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N Emetamine Natural products O(C)c1c(OC)cc2c(c(C[C@@H]3[C@H](CC)CN4[C@H](c5c(cc(OC)c(OC)c5)CC4)C3)ncc2)c1 MBYXEBXZARTUSS-QLWBXOBMSA-N 0.000 description 1
- 206010014733 Endometrial cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010014759 Endometrial neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 102100030323 Epigen Human genes 0.000 description 1
- 108010016906 Epigen Proteins 0.000 description 1
- 208000000461 Esophageal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 101710089384 Extracellular protease Proteins 0.000 description 1
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100181195 Gallus gallus RPS6KA gene Proteins 0.000 description 1
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108010026389 Gramicidin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000936277 Homo sapiens Copper-transporting ATPase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001115390 Homo sapiens Dual specificity mitogen-activated protein kinase kinase 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000973901 Homo sapiens Tyrosine-protein kinase Mer Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 1
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 1
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 1
- FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N L-Phenylalanyl-L-lysin Natural products NCCCCC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FADYJNXDPBKVCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126560 MAPK inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101800004761 Magainin-2 Proteins 0.000 description 1
- 108010036176 Melitten Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 108010050345 Microphthalmia-Associated Transcription Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000013760 Microphthalmia-Associated Transcription Factor Human genes 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- VIUAUNHCRHHYNE-JTQLQIEISA-N N-[(2S)-2,3-dihydroxypropyl]-3-(2-fluoro-4-iodoanilino)-4-pyridinecarboxamide Chemical compound OC[C@@H](O)CNC(=O)C1=CC=NC=C1NC1=CC=C(I)C=C1F VIUAUNHCRHHYNE-JTQLQIEISA-N 0.000 description 1
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 101710149892 Nucleoside diphosphate kinase B Proteins 0.000 description 1
- 206010030155 Oesophageal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010081690 Pertussis Toxin Proteins 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 101000762949 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 101100287693 Rattus norvegicus Kcnh4 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100287705 Rattus norvegicus Kcnh8 gene Proteins 0.000 description 1
- 108090000873 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Proteins 0.000 description 1
- 102000004278 Receptor Protein-Tyrosine Kinases Human genes 0.000 description 1
- 206010038111 Recurrent cancer Diseases 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N SJ000285215 Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2C1CC1CC2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2CC1CC AUVVAXYIELKVAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- 108010091769 Shiga Toxin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010090763 Shiga Toxin 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 108091077436 Tam family Proteins 0.000 description 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 description 1
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N UNPD149280 Natural products N1C(=O)C23OC(=O)C=CC(O)CCCC(C)CC=CC3C(O)C(=C)C(C)C2C1CC1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229930003448 Vitamin K Natural products 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 230000002152 alkylating effect Effects 0.000 description 1
- 108010001818 alpha-sarcin Proteins 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N anthracene Chemical compound C1=CC=CC2=CC3=CC=CC=C3C=C21 MWPLVEDNUUSJAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 239000003080 antimitotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940045988 antineoplastic drug protein kinase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 229960003272 asparaginase Drugs 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M asparaginate Chemical compound [O-]C(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002774 b raf kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000007348 bcl-Associated Death Protein Human genes 0.000 description 1
- 108010007734 bcl-Associated Death Protein Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000003185 biochemical assay format Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 1
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N boldenone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 230000001925 catabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 1
- NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N chembl557217 Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C4=CC=CC=C4NC=3)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC=O)C(C)C)CC(C)C)C(=O)NCCO)=CNC2=C1 NDAYQJDHGXTBJL-MWWSRJDJSA-N 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 1
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007813 chromatographic assay Methods 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- 229960002436 cladribine Drugs 0.000 description 1
- 230000002566 clonic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 229960001338 colchicine Drugs 0.000 description 1
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 1
- 238000002591 computed tomography Methods 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 1
- 150000001945 cysteines Chemical class 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N cytochalasin B Chemical compound C([C@H]1[C@@H]2[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]3/C=C/C[C@H](C)CCC[C@@H](O)/C=C/C(=O)O[C@@]23C(=O)N1)=C)C)C1=CC=CC=C1 GBOGMAARMMDZGR-TYHYBEHESA-N 0.000 description 1
- GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N cytochalasin B Natural products C[C@H]1CCC[C@@H](O)C=CC(=O)O[C@@]23[C@H](C=CC1)[C@H](O)C(=C)[C@@H](C)[C@@H]2[C@H](Cc4ccccc4)NC3=O GBOGMAARMMDZGR-JREHFAHYSA-N 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N dehydrotestosterone Natural products O=C1C=CC2(C)C3CCC(C)(C(CC4)O)C4C3CCC2=C1 RSIHSRDYCUFFLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- CEJLBZWIKQJOAT-UHFFFAOYSA-N dichloroisocyanuric acid Chemical compound ClN1C(=O)NC(=O)N(Cl)C1=O CEJLBZWIKQJOAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 238000000375 direct analysis in real time Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical group SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 1
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 239000003118 drug derivative Substances 0.000 description 1
- 238000012063 dual-affinity re-targeting Methods 0.000 description 1
- 229960005519 duocarmycin A Drugs 0.000 description 1
- 229960005510 duocarmycin SA Drugs 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N emetine Chemical compound N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-CKBKHPSWSA-N 0.000 description 1
- 229960002694 emetine Drugs 0.000 description 1
- AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N emetine Natural products N1CCC2=CC(OC)=C(OC)C=C2[C@H]1C[C@H]1C[C@H]2C3=CC(OC)=C(OC)C=C3CCN2C[C@H]1CC AUVVAXYIELKVAI-UWBTVBNJSA-N 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 210000001163 endosome Anatomy 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 108010028531 enomycin Proteins 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 201000004101 esophageal cancer Diseases 0.000 description 1
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 1
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical group O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- GJMUCSXZXBCQRZ-UHFFFAOYSA-N geraniin Natural products Oc1cc(cc(O)c1O)C(=O)OC2OC3COC(=O)c4cc(O)c(O)c(O)c4c5cc(C(=O)C67OC3C(O6)C2OC(=O)c8cc(O)c(O)c9OC%10(O)C(C(=CC(=O)C%10(O)O)C7=O)c89)c(O)c(O)c5O GJMUCSXZXBCQRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930194078 geranin Natural products 0.000 description 1
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 235000019410 glycyrrhizin Nutrition 0.000 description 1
- 208000024200 hematopoietic and lymphoid system neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- 238000005734 heterodimerization reaction Methods 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000045684 human MERTK Human genes 0.000 description 1
- 102000053534 human TYRO3 Human genes 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 1
- 239000012133 immunoprecipitate Substances 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 1
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 1
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 1
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 229940004975 interceptor Drugs 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 150000002669 lysines Chemical class 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- MGIUUAHJVPPFEV-ABXDCCGRSA-N magainin ii Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 MGIUUAHJVPPFEV-ABXDCCGRSA-N 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N melittin Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(N)=O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 VDXZNPDIRNWWCW-JFTDCZMZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- AZVARJHZBXHUSO-DZQVEHCYSA-N methyl (1R,4R,12S)-4-methyl-3,7-dioxo-10-(5,6,7-trimethoxy-1H-indole-2-carbonyl)-5,10-diazatetracyclo[7.4.0.01,12.02,6]trideca-2(6),8-diene-4-carboxylate Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C[C@H]4C[C@]44C5=C(C(C=C43)=O)N[C@@](C5=O)(C)C(=O)OC)=CC2=C1 AZVARJHZBXHUSO-DZQVEHCYSA-N 0.000 description 1
- 230000008880 microtubule cytoskeleton organization Effects 0.000 description 1
- 230000029115 microtubule polymerization Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 230000036456 mitotic arrest Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- KSERXGMCDHOLSS-LJQANCHMSA-N n-[(1s)-1-(3-chlorophenyl)-2-hydroxyethyl]-4-[5-chloro-2-(propan-2-ylamino)pyridin-4-yl]-1h-pyrrole-2-carboxamide Chemical compound C1=NC(NC(C)C)=CC(C=2C=C(NC=2)C(=O)N[C@H](CO)C=2C=C(Cl)C=CC=2)=C1Cl KSERXGMCDHOLSS-LJQANCHMSA-N 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000005445 natural material Substances 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 208000002154 non-small cell lung carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical group 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N phylloquinone Natural products CC(C)CCCCC(C)CCC(C)CCCC(=CCC1=C(C)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SHUZOJHMOBOZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 229950002592 pimasertib Drugs 0.000 description 1
- 229940012957 plasmin Drugs 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 230000023603 positive regulation of transcription initiation, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 208000037821 progressive disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 239000003909 protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 102000009929 raf Kinases Human genes 0.000 description 1
- 108010077182 raf Kinases Proteins 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 102000016914 ras Proteins Human genes 0.000 description 1
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000002864 sequence alignment Methods 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 description 1
- 229960002372 tetracaine Drugs 0.000 description 1
- GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N tetracaine Chemical compound CCCCNC1=CC=C(C(=O)OCCN(C)C)C=C1 GKCBAIGFKIBETG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 150000003568 thioethers Chemical group 0.000 description 1
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 1
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000029729 tumor suppressor gene on chromosome 11 Diseases 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-GHYRFKGUSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 1
- 235000019168 vitamin K Nutrition 0.000 description 1
- 239000011712 vitamin K Substances 0.000 description 1
- 150000003721 vitamin K derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940046010 vitamin k Drugs 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
- A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
- A61K39/001102—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6855—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from breast cancer cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6857—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from lung cancer cell
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
- A61K47/6869—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of the reproductive system: ovaria, uterus, testes, prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- C07K16/2863—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against receptors for growth factors, growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/33—Crossreactivity, e.g. for species or epitope, or lack of said crossreactivity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
- C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
- C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/77—Internalization into the cell
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Abstract
Description
本発明は、少なくとも1種の治療剤と組み合わせて治療に使用するための、特にメラノーマの治療に使用するための、ヒトAXLに結合する抗体-薬物コンジュゲート(ADC)に関する。
AXLは、哺乳動物の受容体型チロシンキナーゼ(RTK)のTAMサブファミリーに属する104〜140kDaの膜貫通タンパク質であり、形質転換する能力がある(Paccez et al., 2014)。AXLの高度発現またはデノボ(de novo)発現は胃癌、前立腺癌、卵巣癌、肺癌などの様々な癌において報告されている(Paccez et al., 2014)。注目すべきことに、チロシンキナーゼ阻害剤、セリン/トレオニンキナーゼ阻害剤および/または化学療法に対して耐性を示す数種類の癌は、AXLタンパク質の高度発現またはデノボ発現を示すことが見出されている(Wilson et al., 2014; Brand et al., 2015; Zhang et al., 2012; Blakely et al., 2012)。特に、セリン/トレオニンキナーゼB-raf (BRAF)、MEKおよびERK (MEKはチロシンキナーゼでもある)の阻害剤に対する耐性を有するメラノーマ細胞は、増大したまたはデノボのAXL発現を示した(Mueller et al., 2014; Konieczkowski et al., 2014)。BRAF、MEKおよびERKは全て、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ(MAPK)経路の一部である。悪性メラノーマの大部分は、BRAFまたはNRASに発癌性の変異を有しており、これは構成的に活性なMAPK経路をもたらし得る(Sullivan et al., 2016)。
本発明は、少なくとも一部には、次のような驚くべき発見に基づいている:すなわち、BRAF阻害剤に対して耐性のメラノーマのインビボ腫瘍モデルにおいて、AXL-ADCとBRAF阻害剤(ダブラフェニブ)とMEK阻害剤(トラメチニブ)の3剤併用は、例えば、AXL-ADC単独、BRAF阻害剤とMEK阻害剤のみの組み合わせ(実施例19)、またはBRAF阻害剤とMEK阻害剤と対照ADCとの組み合わせ(実施例20)よりも効果的であった。このことは、該メラノーマモデルが、インビトロ(1μg/mL)でまたはインビボ(実施例20)で、単一の薬剤としてのAXL-ADCによる処置に感受性でなかった場合でも、そうであった。さらに、BRAF阻害剤感受性メラノーマ細胞とBRAF阻害剤(PLX4720)耐性メラノーマ細胞との混合物のインビトロ研究は、AXL-ADCとBRAF阻害剤(PLX4720もしくはダブラフェニブ)の併用、またはAXL-ADCとBRAF阻害剤(ダブラフェニブ)とMEK阻害剤(トラメチニブ)の3剤併用が、BRAF阻害剤感受性細胞とBRAF阻害剤耐性細胞の両方を根絶したことを示した(実施例17)。最後に、進行期のNRAS変異型メラノーマ患者からの10個の腫瘍サンプルのうち9個において、AXL発現が該腫瘍細胞の少なくとも一部で検出された(実施例22)。
本発明は、MAPK経路の1種以上の阻害剤(例えば、1種以上のセリン/トレオニン/チロシンキナーゼ阻害剤)と組み合わせて対象のメラノーマの治療に使用するためのAXL-ADC(例えば、HuMax-AXL-ADC)を提供する。特定の態様において、1種以上のセリン/トレオニン/チロシンキナーゼ阻害剤は、BRAF阻害剤、MEK阻害剤、およびBRAF阻害剤とMEK阻害剤の組み合わせから選択される。AXL-ADCと阻害剤は、同時に、別々に、または逐次的に投与することができる。しかしながら、典型的には、それらは異なる投薬レジメンに従って別々に投与される。投薬レジメンの例が本明細書に記載される。しかし、本開示および当分野の技術レベルに基づいて、当業者、例えば医師、が他の適切な投薬レジメンを計画して実施することもできる。
野生型RAFおよび変異体のキナーゼ活性は、ビオチン化BADタンパク質(Bcl2-Associated Agonist Of Cell Death)のリン酸化を測定することによって決定される。各酵素(0.01ng)について、20μLの反応物を、20mM Hepes (pH7.0)、10mM MgCl2、1mM DTT、0.01%(v/v)Tween-20、50nMビオチン-BADタンパク質、および1mM ATP中にて室温で実施する。20mM Hepes (pH7.0)、200mM NaCl、80mM EDTA、0.3%(w/v)ウシ血清アルブミン(BSA)を含有する溶液5μLを用いて、反応を5分で停止させる。停止溶液には、ホスホ-BAD (Ser112)抗体、ストレプトアビジン被覆ドナービーズ、およびプロテインAアクセプタービーズも含まれる。抗体およびビーズを停止溶液中で暗所にて室温で30分間プレインキュベートする。抗体の最終希釈は1/2000であり、各ビーズの最終濃度は10μg/mLである。アッセイプレートを室温で1時間インキュベートし、次いでPerkinElmer AlphaQuestリーダーで読み取る。変異体の活性は、3つの異なる実験において2つ組でアッセイされた精製タンパク質の2つの異なるバッチの平均である。あるいは、絶対IC50値を決定する代わりに、基準化合物(例えば、ベムラフェニブまたはダブラフェニブ)を対照として使用して、基準薬物の阻害活性と比較した相対的阻害活性を、典型的には%で、算出することができる。
抗MEK1抗体を用いてMEK1分子を免疫沈降させる。MEKキナーゼ活性は、アッセイのエンドポイントとしてMBP(ミエリン塩基性タンパク質)を用いた結合アッセイにおいて、免疫分離したMEK1が組換えERK1を活性化する能力として測定される。リン酸化MBPを14%SDS-PAGEゲル上で分離し、真空乾燥してからX線フィルムに感光させる。あるいは、絶対IC50値を決定する代わりに、基準化合物(例えば、トラメチニブ)を対照として使用して、基準薬物の阻害活性と比較した相対的阻害活性を、典型的には%で、算出することができる。MBPよりも特異的な基質、例えば、精製された組換えRSK、MNKまたはElk1、およびこのタンパク質のリン酸化部位に従って作製されたペプチド、を使用することもできる。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはベムラフェニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはダブラフェニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはエンコラフェニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはソラフェニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはトラメチニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはコビメチニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはビニメチニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはセルメチニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはウリキセルチニブである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはVTXKIIEである。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはLTT-462である。
一つの特定の実施態様において、S/Th KIはPLX4720である。
(a) ベムラフェニブおよびトラメチニブ;
(b) ベムラフェニブおよびコビメチニブ;
(c) ベムラフェニブおよびビニメチニブ;
(d) ベムラフェニブおよびセルメチニブ;
(e) ダブラフェニブおよびトラメチニブ;
(f) ダブラフェニブおよびコビメチニブ;
(g) ダブラフェニブおよびビニメチニブ;
(h) ダブラフェニブおよびセルメチニブ;
(i) エンコラフェニブおよびトラメチニブ;
(j) エンコラフェニブおよびコビメチニブ;
(k) エンコラフェニブおよびビニメチニブ;
(l) エンコラフェニブおよびセルメチニブ;
(m) ソラフェニブおよびトラメチニブ;
(n) ソラフェニブおよびコビメチニブ;
(o) ソラフェニブおよびビニメチニブ;または
(p) ソラフェニブおよびセルメチニブ。
(a) 対象がS/Th KIによる治療(処置)の基準を満たすかどうかを判定する段階;
(b) メラノーマにおけるAXL発現がS/Th KIに対する耐性と関連するかどうかを判定する段階;および
(c) S/Th KIによる治療(処置)の基準を満たしており、かつAXL発現がS/Th KIに対する耐性と関連するメラノーマに罹患している対象を選択する段階。
本発明において使用するのに適したADCは、任意の抗AXL抗体から調製することができ、典型的には、ヒトAXLの細胞外領域に結合する抗体から調製することができる。一態様において、AXL抗体は、カニクイザルAXLの細胞外領域にも結合する。好ましい抗AXL抗体は、以下の局面および態様に示される、AXL結合特性、可変もしくは超可変配列、または結合特性と配列特性の組み合わせのうちの1つ以上によって特徴付けられる。特定の局面では、該抗体はAXLに結合するが、そのリガンドであるGrowth Arrest-Specific 6 (Gas6)とAXL結合について競合しない。最も好ましいのは、表2に配列が記載される特定の抗AXL抗体、特に107と表示された抗体、ならびに抗体107と1つ以上のAXL結合特性またはCDR、VHおよび/またはVL配列を共有する抗体である。
i) 抗ヒトFc Captureバイオセンサに抗AXL抗体をロードする工程;および
ii) 可溶性組み換えAXL細胞外ドメインの会合および解離を様々な濃度でバイオレイヤー干渉法により測定する工程。
i) 抗ヒトFc Captureバイオセンサに抗AXL抗体をロードする工程;および
ii) 組み換えAXL細胞外ドメインの会合および解離を様々な濃度でバイオレイヤー干渉法により測定する工程。
i) AXL発現細胞をGas6と共にインキュベートする工程;
ii) 試験すべき抗AXL抗体を添加する工程;
iii) 抗AXL抗体を検出する蛍光標識二次試薬を添加する工程;および
iv) FACSにより該細胞を分析する工程。
i) AXL発現細胞を抗AXL抗体と共にインキュベートする工程;
ii) Gas6を添加する工程;
iii) Gas6を検出する蛍光標識二次試薬を添加する工程;および
iv) FACSにより該細胞を分析する工程。
(a) SEQ ID No: 1を含むVH領域およびSEQ ID No: 2を含むVL領域[107];
(b) SEQ ID No: 5を含むVH領域およびSEQ ID No: 6を含むVL領域[148];
(c) SEQ ID No:34を含むVH領域およびSEQ ID No:35を含むVL領域[733];
(d) SEQ ID No: 7を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154];
(e) SEQ ID No:10を含むVH領域およびSEQ ID No:11を含むVL領域[171];
(f) SEQ ID No:16を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183];
(g) SEQ ID No:25を含むVH領域およびSEQ ID No:26を含むVL領域[613];
(h) SEQ ID No:31を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726];
(i) SEQ ID No: 3を含むVH領域およびSEQ ID No: 4を含むVL領域[140];
(j) SEQ ID No: 8を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154-M103L];
(k) SEQ ID No:12を含むVH領域およびSEQ ID No:13を含むVL領域[172];
(l) SEQ ID No:14を含むVH領域およびSEQ ID No:15を含むVL領域[181];
(m) SEQ ID No:17を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183-N52Q];
(n) SEQ ID No:19を含むVH領域およびSEQ ID No:20を含むVL領域[187];
(o) SEQ ID No:21を含むVH領域およびSEQ ID No:22を含むVL領域[608-01];
(p) SEQ ID No:23を含むVH領域およびSEQ ID No:24を含むVL領域[610-01];
(q) SEQ ID No:27を含むVH領域およびSEQ ID No:28を含むVL領域[613-08];
(r) SEQ ID No:29を含むVH領域およびSEQ ID No:30を含むVL領域[620-06];ならびに
(s) SEQ ID No:32を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726-M101L]。
(a)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [107];
(b)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [148];
(c)それぞれ、SEQ ID NO:114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [733];
(d)それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および53のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [154];
(e)それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および54のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [154-M103L];
(f)それぞれ、SEQ ID NO:57、58、および59のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [171];
(g)それぞれ、SEQ ID NO:62、63、および64のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:65、GAS、およびSEQ ID NO:66のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [172];
(h)それぞれ、SEQ ID NO:67、68、および69のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:70、GAS、およびSEQ ID NO:71のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [181];
(i)それぞれ、SEQ ID NO:72、73、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [183];
(j)それぞれ、SEQ ID NO:72、74、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [183-N52Q];
(k)それぞれ、SEQ ID NO:78、79、および80のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:81、AAS、およびSEQ ID NO:82のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [187];
(l)それぞれ、SEQ ID NO:83、84、および85のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:86、GAS、およびSEQ ID NO:87のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [608-01];
(m)それぞれ、SEQ ID NO:88、89、および90のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:91、GAS、およびSEQ ID NO:92のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [610-01];
(n)それぞれ、SEQ ID NO:93、94、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613];
(o)それぞれ、SEQ ID NO:98、99、および100のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:10、DAS、およびSEQ ID NO:102のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613-08];
(p)それぞれ、SEQ ID NO:103、104、および105のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:106、GAS、およびSEQ ID NO:107のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [620-06];
(q)それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および110のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726];
(r)それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および111のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726-M101L];
(s)それぞれ、SEQ ID NO:41、42、および43のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:44、AAS、およびSEQ ID NO:45のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [140];
(t)それぞれ、SEQ ID NO:93、94、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:128、XAS(配列中、XはDまたはGである)、およびSEQ ID NO:129のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613 / 613-08];
(u)それぞれ、SEQ ID NO:46、119、および120のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [148 / 140];
(v)それぞれ、SEQ ID NO:123、124、および125のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [171 / 172 / 181];ならびに
(w)それぞれ、SEQ ID NO:121、109、および122のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726 / 187];ならびに
(x)それぞれ、SEQ ID NO:93、126、および127のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613 / 608-01 / 610-01 / 620-06]。
(a)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [107];
(b)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [148];
(c)それぞれ、SEQ ID NO:114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [733];
(d)それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および53のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [154];
(e)それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および54のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [154-M103L];
(f)それぞれ、SEQ ID NO:57、58、および59のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [171];
(g)それぞれ、SEQ ID NO:62、63、および64のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:65、GAS、およびSEQ ID NO:66のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [172];
(h)それぞれ、SEQ ID NO:67、68、および69のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:70、GAS、およびSEQ ID NO:71のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [181];
(i)それぞれ、SEQ ID NO:72、73、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [183];
(j)それぞれ、SEQ ID NO:72、74、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [183-N52Q];
(k)それぞれ、SEQ ID NO:78、79、および80のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:81、AAS、およびSEQ ID NO:82のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [187];
(l)それぞれ、SEQ ID NO:83、84、および85のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:86、GAS、およびSEQ ID NO:87のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [608-01];
(m)それぞれ、SEQ ID NO:88、89、および90のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:91、GAS、およびSEQ ID NO:92のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [610-01];
(n)それぞれ、SEQ ID NO:93、94、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613];
(o)それぞれ、SEQ ID NO:98、99、および100のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:101、DAS、およびSEQ ID NO:102のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613-08];
(p)それぞれ、SEQ ID NO:103、104、および105のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:106、GAS、およびSEQ ID NO:107のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [620-06];
(q)それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および110のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726];
(r)それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および111のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726-M101L];
(s)それぞれ、SEQ ID NO:41、42、および43のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:44、AAS、およびSEQ ID NO:45のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [140];
(t)それぞれ、SEQ ID NO:93、94、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:128、XAS(配列中、XはDまたはGである)、およびSEQ ID NO:129のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613 / 613-08];
(u)それぞれ、SEQ ID NO:46、119、および120のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [148 / 140];
(v)それぞれ、SEQ ID NO:123、124、および125のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [171 / 172 / 181];ならびに
(w)それぞれ、SEQ ID NO:121、109、および122のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [726 / 187];ならびに
(x)それぞれ、SEQ ID NO:93、126、および127のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含むVL領域 [613 / 608-01 / 610-01 / 620-06]。
(a)SEQ ID NO:1を含むVH領域、およびSEQ ID NO:2を含むVL領域 [107];
(b)SEQ ID NO:5を含むVH領域、およびSEQ ID NO:6を含むVL領域 [148];
(c)SEQ ID NO:34を含むVH領域、およびSEQ ID NO:35を含むVL領域 [733];
(d)SEQ ID NO:7を含むVH領域、およびSEQ ID NO:9を含むVL領域 [154];
(e)SEQ ID NO:10を含むVH領域、およびSEQ ID NO:11を含むVL領域 [171];
(f)SEQ ID NO:16を含むVH領域、およびSEQ ID NO:18を含むVL領域 [183];
(g)SEQ ID NO:25を含むVH領域、およびSEQ ID NO:26を含むVL領域 [613];
(h)SEQ ID NO:31を含むVH領域、およびSEQ ID NO:33を含むVL領域 [726];
(i)SEQ ID NO:3を含むVH領域、およびSEQ ID NO:4を含むVL領域 [140];
(j)SEQ ID NO:8を含むVH領域、およびSEQ ID NO:9を含むVL領域 [154-M103L];
(k)SEQ ID NO:12を含むVH領域、およびSEQ ID NO:13を含むVL領域 [172];
(l)SEQ ID NO:14を含むVH領域、およびSEQ ID NO:15を含むVL領域 [181];
(m)SEQ ID NO:17を含むVH領域、およびSEQ ID NO:18を含むVL領域 [183-N52Q];
(n)SEQ ID NO:19を含むVH領域、およびSEQ ID NO:20を含むVL領域 [187];
(o)SEQ ID NO:21を含むVH領域、およびSEQ ID NO:22を含むVL領域 [608-01];
(p)SEQ ID NO:23を含むVH領域、およびSEQ ID NO:24を含むVL領域 [610-01];
(q)SEQ ID NO:27を含むVH領域、およびSEQ ID NO:28を含むVL領域 [613-08];
(r)SEQ ID NO:29を含むVH領域、およびSEQ ID NO:30を含むVL領域 [620-06];ならびに
(s)SEQ ID NO:32を含むVH領域、およびSEQ ID NO:33を含むVL領域 [726-M101L]。
(同一残基×100)/(アラインメントの長さ-アラインメント中のギャップの総数)
(a) SEQ ID No: 1を含むVH領域およびSEQ ID No: 2を含むVL領域[107];
(b) SEQ ID No: 5を含むVH領域およびSEQ ID No: 6を含むVL領域[148];
(c) SEQ ID No:34を含むVH領域およびSEQ ID No:35を含むVL領域[733];
(d) SEQ ID No: 7を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154];
(e) SEQ ID No:10を含むVH領域およびSEQ ID No:11を含むVL領域[171];
(f) SEQ ID No:16を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183];
(g) SEQ ID No:25を含むVH領域およびSEQ ID No:26を含むVL領域[613];
(h) SEQ ID No:31を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726];
(i) SEQ ID No: 3を含むVH領域およびSEQ ID No: 4を含むVL領域[140];
(j) SEQ ID No: 8を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154-M103L];
(k) SEQ ID No:12を含むVH領域およびSEQ ID No:13を含むVL領域[172];
(l) SEQ ID No:14を含むVH領域およびSEQ ID No:15を含むVL領域[181];
(m) SEQ ID No:17を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183-N52Q];
(n) SEQ ID No:19を含むVH領域およびSEQ ID No:20を含むVL領域[187];
(o) SEQ ID No:21を含むVH領域およびSEQ ID No:22を含むVL領域[608-01];
(p) SEQ ID No:23を含むVH領域およびSEQ ID No:24を含むVL領域[610-01];
(q) SEQ ID No:27を含むVH領域およびSEQ ID No:28を含むVL領域[613-08];
(r) SEQ ID No:29を含むVH領域およびSEQ ID No:30を含むVL領域[620-06];ならびに
(s) SEQ ID No:32を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726-M101L]。
(t) SEQ ID No: 1を含むVH領域およびSEQ ID No: 2を含むVL領域[107];
(u) SEQ ID No: 5を含むVH領域およびSEQ ID No: 6を含むVL領域[148];
(v) SEQ ID No:34を含むVH領域およびSEQ ID No:35を含むVL領域[733];
(w) SEQ ID No: 7を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154];
(x) SEQ ID No:10を含むVH領域およびSEQ ID No:11を含むVL領域[171];
(y) SEQ ID No:16を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183];
(z) SEQ ID No:25を含むVH領域およびSEQ ID No:26を含むVL領域[613];
(aa) SEQ ID No:31を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726];
(bb) SEQ ID No: 3を含むVH領域およびSEQ ID No: 4を含むVL領域[140];
(cc) SEQ ID No: 8を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域[154-M103L];
(dd) SEQ ID No:12を含むVH領域およびSEQ ID No:13を含むVL領域[172];
(ee) SEQ ID No:14を含むVH領域およびSEQ ID No:15を含むVL領域[181];
(ff) SEQ ID No:17を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域[183-N52Q];
(gg) SEQ ID No:19を含むVH領域およびSEQ ID No:20を含むVL領域[187];
(hh) SEQ ID No:21を含むVH領域およびSEQ ID No:22を含むVL領域[608-01];
(ii) SEQ ID No:23を含むVH領域およびSEQ ID No:24を含むVL領域[610-01];
(jj) SEQ ID No:27を含むVH領域およびSEQ ID No:28を含むVL領域[613-08];
(kk) SEQ ID No:29を含むVH領域およびSEQ ID No:30を含むVL領域[620-06];ならびに
(ll) SEQ ID No:32を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域[726-M101L]。
元のアミノ酸-位置-置換されたアミノ酸。
元のアミノ酸-位置;または例えば「K409」。
「Lys409Arg,Ala,Phe」または「Lys409Arg/Ala/Phe」または「K409R,A,F」または「K409R/A/F」または「K409をR、A、またはFへ」。
(a)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [148];
(b)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [733];
(c)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:41、42、および43のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:44、AAS、およびSEQ ID NO:45のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [140];
(d)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および55のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154];
(e)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および54のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154-M103L];
(f)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:57、58、および59のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [171];
(g)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:62、63、および64のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:65、GAS、およびSEQ ID NO:66のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [172];
(h)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:67、68、および69のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:70、GAS、およびSEQ ID NO:71のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [181];
(i)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:72、73、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183];
(j)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:72、74、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183-N52Q];
(k)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:78、79、および80のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:81、AAS、およびSEQ ID NO:82のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [187];
(l)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:83、84、および85のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:86、GAS、およびSEQ ID NO:87のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [608-01];
(m)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:88、89、および90のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:91、GAS、およびSEQ ID NO:92のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [610-01];
(n)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:94、95、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613];
(o)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:98、99、および100のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:101、DAS、およびSEQ ID NO:102のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613-08];
(p)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:103、104、および105のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:106、GAS、およびSEQ ID NO:107のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [620-06];
(q)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および110のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726];
(r)それぞれ、SEQ ID NO:36、37、および38のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:39、GAS、およびSEQ ID NO:40のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [107];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および111のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726-M101L];
(s)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [733];
(t)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:41、42、および43のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:44、AAS、およびSEQ ID NO:45のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [107];
(u)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および55のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154];
(v)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:51、52、および54のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154-M103L];
(w)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:57、58、および59のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [171];
(x)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:62、63、および64のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:65、GAS、およびSEQ ID NO:66のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [172];
(y)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:67、68、および69のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:70、GAS、およびSEQ ID NO:71のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [181];
(z)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:72、73、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183];
(aa)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:72、74、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183-N52Q];
(bb)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:78、79、および80のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:81、AAS、およびSEQ ID NO:82のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [187];
(cc)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:83、84、および85のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:86、GAS、およびSEQ ID NO:87のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [608-01];
(dd)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:88、89、および90のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:91、GAS、およびSEQ ID NO:92のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [610-01];
(ee)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:94、95、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613];
(ff)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:98、99、および100のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:101、DAS、およびSEQ ID NO:102のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613-08];
(gg)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:103、104、および105のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:106、GAS、およびSEQ ID NO:107のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [620-06];
(hh)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および110のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726];
(ii)それぞれ、SEQ ID NO:46、47、および48のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:49、AAS、およびSEQ ID NO:50のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [148];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:108、109、および111のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726-M101L];
(jj)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 41、42、および43のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:44、AAS、およびSEQ ID NO:45のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [140];
(kk)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 51、52、および55のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154];
(ll)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 51、52、および54のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:55、GAS、およびSEQ ID NO:56のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [154-M103L];
(mm)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 57、58、および59のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:60、GAS、およびSEQ ID NO:61のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [171];
(nn)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 62、63、および64のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:65、GAS、およびSEQ ID NO:66のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [172];
(oo)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 67、68、および69のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:70、GAS、およびSEQ ID NO:71のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [181];
(pp)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 72、73、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183];
(qq)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 72、74、および75のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:76、ATS、およびSEQ ID NO:77のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [183-N52Q];
(rr)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 78、79、および80のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:81、AAS、およびSEQ ID NO:82のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [187];
(ss)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 83、84、および85のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:86、GAS、およびSEQ ID NO:87のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [608-01];
(tt)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 88、89、および90のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:91、GAS、およびSEQ ID NO:92のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [610-01];
(uu)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 94、95、および95のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:96、GAS、およびSEQ ID NO:97のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613];
(vv)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 98、99、および100のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:101、DAS、およびSEQ ID NO:102のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [613-08];
(ww)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 103、104、および105のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:106、GAS、およびSEQ ID NO:107のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [620-06];
(xx)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 108、109、および110のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726];ならびに
(yy)それぞれ、SEQ ID NO: 114、115、および116のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:117、DAS、およびSEQ ID NO:118のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第1のVL領域 [733];ならびに、それぞれ、SEQ ID NO: 108、109、および111のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVH領域;ならびに、それぞれ、SEQ ID NO:112、AAS、およびSEQ ID NO:113のCDR1、CDR2、およびCDR3配列を含む第2のVL領域 [726-M101L]。
i)バイスタンダー殺傷能力を有する、切断可能なリンカーおよび細胞傷害性薬剤;
ii)バイスタンダー殺傷能力を有さない、切断可能なリンカーおよび細胞傷害性薬剤;
iii)バイスタンダー殺傷能力を有する、切断不可能なリンカーおよび細胞傷害性薬剤;または
iv)バイスタンダー殺傷能力を有さない、切断不可能なリンカーおよび細胞傷害性薬剤。
を有し、式中、MAbは抗体である。
を有し、式中、MAbは抗体である。
(a) それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[107];
(b) それぞれSEQ ID No:46、47および48のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:49、AAS、およびSEQ ID No:50のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[148];
c) それぞれSEQ ID No:114、115および116のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:117、DAS、およびSEQ ID No:118のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[733];
(d) それぞれSEQ ID No:51、52および53のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:55、GAS、およびSEQ ID No:56のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[154];
(e) それぞれSEQ ID No:51、52および54のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:55、GAS、およびSEQ ID No:56のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[154-M103L];
(f) それぞれSEQ ID No:57、58および59のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:60、GAS、およびSEQ ID No:61のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[171];
(g) それぞれSEQ ID No:62、63および64のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:65、GAS、およびSEQ ID No:66のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[172];
(h) それぞれSEQ ID No:67、68および69のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:70、GAS、およびSEQ ID No:71のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[181];
(i) それぞれSEQ ID No:72、73および75のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:76、ATS、およびSEQ ID No:77のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[183];
(j) それぞれSEQ ID No:72、74および75のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:76、ATS、およびSEQ ID No:77のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[183-N52Q];
(k) それぞれSEQ ID No:78、79および80のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:81、AAS、およびSEQ ID No:82のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[187];
(l) それぞれSEQ ID No:83、84および85のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:86、GAS、およびSEQ ID No:87のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[608-01];
(m) それぞれSEQ ID No:88、89および90のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:91、GAS、およびSEQ ID No:92のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[610-01];
(n) それぞれSEQ ID No:93、94および95のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:96、GAS、およびSEQ ID No:97のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[613];
(o) それぞれSEQ ID No:98、99および100のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:101、DAS、およびSEQ ID No:102のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[613-08];
(p) それぞれSEQ ID No:103、104および105のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:106、GAS、およびSEQ ID No:107のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[620-06];
(q) それぞれSEQ ID No:108、109および110のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[726];
(r) それぞれSEQ ID No:108、109および111のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[726-M101L];
(s) それぞれSEQ ID No:41、42および43のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:44、AAS、およびSEQ ID No:45のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[140];
(t) それぞれSEQ ID No:93、94および95のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:128、XAS(配列中、XはDまたはGである)、およびSEQ ID No:129のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[613/613-08];
(u) それぞれSEQ ID No:46、119および120のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:49、AAS、およびSEQ ID No:50のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[148/140];
(v) それぞれSEQ ID No:123、124および125のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:60、GAS、およびSEQ ID No:61のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[171/172/181];
(w) それぞれSEQ ID No:121、109および122のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[726/187];ならびに
(x) それぞれSEQ ID No:93、126および127のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:96、GAS、およびSEQ ID No:97のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域[613/608-01/610-01/620-06]。
(a) ベムラフェニブおよびトラメチニブ;
(b) ベムラフェニブおよびコビメチニブ;
(c) ベムラフェニブおよびビニメチニブ;
(d) ベムラフェニブおよびセルメチニブ;
(e) ダブラフェニブおよびトラメチニブ;
(f) ダブラフェニブおよびコビメチニブ;
(g) ダブラフェニブおよびビニメチニブ;
(h) ダブラフェニブおよびセルメチニブ;
(i) エンコラフェニブおよびトラメチニブ;
(j) エンコラフェニブおよびコビメチニブ;
(k) エンコラフェニブおよびビニメチニブ;
(l) エンコラフェニブおよびセルメチニブ;
(m) ソラフェニブおよびトラメチニブ;
(n) ソラフェニブおよびコビメチニブ;
(o) ソラフェニブおよびビニメチニブ;および
(p) ソラフェニブおよびセルメチニブ。
本発明に従って使用されるAXL-ADCは、組成物の形態で投与することができる。一局面において、該組成物は、AXL-ADCおよび薬学的担体を含む薬学的組成物である。
(a) ベムラフェニブおよびトラメチニブ;
(b) ベムラフェニブおよびコビメチニブ;
(c) ベムラフェニブおよびビニメチニブ;
(d) ベムラフェニブおよびセルメチニブ;
(e) ダブラフェニブおよびトラメチニブ;
(f) ダブラフェニブおよびコビメチニブ;
(g) ダブラフェニブおよびビニメチニブ;
(h) ダブラフェニブおよびセルメチニブ;
(i) エンコラフェニブおよびトラメチニブ;
(j) エンコラフェニブおよびコビメチニブ;
(k) エンコラフェニブおよびビニメチニブ;
(l) エンコラフェニブおよびセルメチニブ;
(m) ソラフェニブおよびトラメチニブ;
(n) ソラフェニブおよびコビメチニブ;
(o) ソラフェニブおよびビニメチニブ;または
(p) ソラフェニブおよびセルメチニブ。
本発明によるADCとして使用するための抗体は、典型的には1つ以上の発現ベクターの形態の核酸構築物を用いて、宿主細胞において組み換え的に調製することができる。一態様では、該核酸構築物は表1に示す1つ以上の配列をコードする。さらなる態様では、該発現ベクターは、抗体、例えばヒトIgG1,κモノクローナル抗体、の軽鎖、重鎖、または軽鎖と重鎖の両方の定常領域をコードする核酸配列をさらに含む。
第1のセットのAXL特異的抗体
第1のセットのAXL特異的モノクローナル抗体(抗体IgG1-AXL-061、IgG1-AXL-107、IgG1-AXL-183、IgG1-AXL-613、IgG1-AXL-726、IgG1-AXL-511、IgG1-AXL-137、IgG1-AXL-148、IgG1-AXL-154、IgG1-AXL-171、IgG1-AXL-733)は、以下に記載されるAXLタンパク質構築物または細胞でトランスジェニックマウスを免疫することによって産生された。免疫化の手順、ハイブリドーマの作製、および精製抗体の質量分析法の詳細については、WO 2016/005593 A1の実施例1を参照されたい。
種々の完全長AXLバリアントの発現用の以下のコドン最適化構築物を生成した:ヒト(ホモ・サピエンス)AXL(Genbankアクセッション番号NP_068713.2)、ヒト細胞外ドメイン(ECD)がカニクイザル(マカカ・ファスシクラリス(Macaca fascicularis))AXLのECD(GenbankアクセッションHB387229.1の翻訳;アミノ酸1〜447)で置き換えられたヒト-カニクイザルキメラAXL、ヒトECDがマウス(ハツカネズミ)AXLのECD(GenbankアクセッションNP_033491.2;アミノ酸1〜441)で置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトIg様ドメインI(アミノ酸1〜134、本明細書において「Ig1ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのIg様ドメインIで置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトIg様ドメインII(アミノ酸148〜194、本明細書において「Ig2ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのIg様ドメインIIにより置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトFNIII様ドメインI(アミノ酸227〜329、本明細書において「FN1ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのFNIII様ドメインIで置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトFNIII様ドメインII(アミノ酸340〜444、本明細書において「FN2ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのFNIII様ドメインIIにより置き換えられたヒト-マウスキメラAXL。加えて、種々のAXL ECDバリアント用の以下のコドン最適化構築物を生成した:C末端Hisタグを有するヒトAXLの細胞外ドメイン(ECD)(アミノ酸1〜447)(AXLECDHis)、N末端シグナルペプチドおよびC末端Hisタグを有するヒトAXLのFNIII様ドメインII(アミノ酸327〜447)(AXL-FN2ECDHis)、ならびに、C末端Hisタグを有するヒトAXLのIg1ドメインおよびIg2ドメイン(アミノ酸1〜227)(AXL-Ig12ECDHis)。
EL4細胞に、完全ヒトAXLコード配列を含有するpcDNA3.3ベクターを安定にトランスフェクトして、抗生剤G418(Geneticin)での選択後に、安定なクローンを選択した。
AXLECDHis、AXL-FN2ECDHis、およびAXL-Ig12ECDHisを、HEK-293F細胞において発現させた。Hisタグにより、固定化金属親和性クロマトグラフィーでの精製が可能になる。このプロセスにおいて、クロマトグラフィー樹脂上に固定されたキレーターは、Co2+カチオンを充填している。Hisタグ付加タンパク質を含有する上清を、バッチモード(すなわち、溶液)において樹脂とインキュベートした。Hisタグ付加タンパク質は、樹脂ビーズに強く結合し、他方、培養上清中に存在する他のタンパク質は結合しないか、またはHisタグ付加タンパク質と比較して弱く結合する。インキュベーション後に、ビーズを上清から回収して、カラム中に詰める。弱く結合したタンパク質を除去するために、カラムを洗浄する。次いで、強く結合したHisタグ付加タンパク質を、Co2+に対するHisの結合と競合するイミダゾールを含有する緩衝液で溶出する。脱塩カラム上の緩衝液交換により、溶出剤をタンパク質から除去する。
免疫化マウスの血清中、またはHuMab(ヒトモノクローナル抗体)ハイブリドーマもしくはトランスフェクトーマの培養上清中の抗AXL抗体の存在を、Fluorometric Micro volume Assay Technology(FMAT; Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)を用いた均質抗原特異的スクリーニングアッセイによって判定した。このために、4細胞ベースアッセイまたは8細胞ベースアッセイのいずれかの組み合わせを有する、2つの異なる試験設計を使用した。
全RNAを0.2〜5×106個のハイブリドーマ細胞から調製して、5'-RACE-相補DNA(cDNA)を、SMART RACE cDNA Amplificationキット(Clontech)を用い、製造業者の説明書にしたがって100 ng全RNAから調製した。VHおよびVLをコードする領域を、PCRにより増幅し、ライゲーション非依存性クローニング(Aslanidis, C. and P.J. de Jong, Nucleic Acids Res 1990;18(20): 6069-74)によってpG1fおよびpKappa発現ベクターにインフレームで直接クローニングした。各抗体について、12種のVLクローンおよび12種のVHクローンを配列決定した。結果として生じた配列を、表2に示す。CDR配列を、IMGT(Lefranc MP. et al., 1999 および Brochet, 2008)にしたがって定義した。正確なオープンリーディングフレーム(ORF)を有するクローンを、さらなる研究および発現のために選択した。見出された重鎖および軽鎖のすべての組み合わせのベクターを、293fectinを用いてFreestyle 商標 293-F細胞に、一過性に共発現させた。
実施例のいくつかにおいて、以前に記載されている、AXLに対する比較抗体(IgG1-YW327.6S2)を使用した(EP 2 220 131, U3 Pharma;WO 2011/159980, Genentech)。これらのAXL特異的抗体のVHおよびVLの配列を、pG1fおよびpKappa発現ベクター中にクローニングした。
実施例のいくつかにおいて、gp120特異的抗体である抗体b12(Barbas, 1993)を、陰性対照として使用した。
抗体を、IgG1,κとして発現させた。抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードするプラスミドDNA混合物を、293fectin(Invitrogen, US)を用いてFreestyle HEK293F細胞(Invitrogen, US)に、本質的に製造業者により記載されているように、一過性にトランスフェクトした。
培養上清を、0.2μmデッドエンドフィルターを通して濾過し、5 mL MabSelect SuReカラム(GE Health Care)上にロードして、0.1 M酢酸ナトリウム-NaOH、pH 3で溶出した。溶出液を、直ちに2Mトリス-HCl、pH 9で中和し、12.6 mM NaH2PO4、140 mM NaCl、pH 7.4(B.Braun)に対して一晩透析した。あるいは、精製に続いて、溶出液をHiPrep脱塩カラム上にロードして、抗体を12.6 mM NaH2PO4、140 mM NaCl、pH 7.4(B.Braun)緩衝液中に交換した。透析または緩衝液の交換の後、試料を、0.2μmデッドエンドフィルターを通して滅菌濾過した。純度をSDS-PAGEにより測定し、IgG濃度をOctet(Fortebio, Menlo Park, USA)を用いて測定した。精製抗体は、4℃で保存した。
抗体IgG1-AXL-511は、後述の選択手順を用いて、以下に記載されるAXLタンパク質構築物または細胞でトランスジェニックマウスを免疫化することによって産生された。免疫化の手順、ハイブリドーマの作製、脾臓細胞からのRNAの分離、プライマー配列、LEE PCR、ならびにHCおよびLC配列の決定と選択の詳細については、WO 2016/005593 A1を参照されたい。
種々の完全長AXLバリアントの発現用の以下のコドン最適化構築物を生成した:ヒト(ホモ・サピエンス)AXL(Genbankアクセッション番号NP_068713.2)、ヒト細胞外ドメイン(ECD)がカニクイザル(マカカ・ファスシクラリス)AXLのECD(GenbankアクセッションHB387229.1の翻訳;アミノ酸1〜447)で置き換えられたヒト-カニクイザルキメラAXL、ヒトECDがマウス(ハツカネズミ)AXLのECD(GenbankアクセッションNP_033491.2;アミノ酸1〜441)で置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトIg様ドメインI(アミノ酸1〜147、本明細書において「Ig1ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのIg様ドメインIで置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトIg様ドメインII(アミノ酸148〜227、本明細書において「Ig2ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのIg様ドメインIIにより置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトFNIII様ドメインI(アミノ酸228〜326、本明細書において「FN1ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのFNIII様ドメインIで置き換えられたヒト-マウスキメラAXL、ヒトFNIII様ドメインII(アミノ酸327〜447、本明細書において「FN2ドメイン」とも呼ばれる)がマウスAXLのFNIII様ドメインIIにより置き換えられたヒト-マウスキメラAXL。加えて、種々のAXL ECDバリアント用の以下のコドン最適化構築物を生成した:C末端Hisタグを有するヒトAXLの細胞外ドメイン(ECD)(アミノ酸1〜447)(AXLECDHis)、N末端シグナルペプチドおよびC末端Hisタグを有するヒトAXLのFNIII様ドメインII(アミノ酸327〜447)(AXL-FN2ECDHis)、ならびに、C末端Hisタグを有するヒトAXLのIg1ドメインおよびIg2ドメイン(アミノ酸1〜227)(AXL-Ig12ECDHis)。
EL4細胞に、完全長ヒトAXLコード配列を含有するpcDNA3.3ベクターを安定にトランスフェクトして、抗生剤G418(Geneticin)での選択後に、安定なクローンを選択した。
AXLECDHis、AXL-FN2ECDHis、およびAXL-Ig12ECDHisを、HEK293F細胞において発現させ、固定化金属親和性クロマトグラフィーで精製した。
抗体を、IgG1,κとして発現させた。抗体の重鎖および軽鎖の両方をコードするプラスミドDNA混合物を、本質的にVink, T., et al. (2014) ('A simple, robust and highly efficient transient expression system for producing antibodies', Methods, 65 (1), 5-10)により記載されているように、293fectin(Life technologies)を用いてFreestyle 293-F(HEK293F)細胞(Life technologies, USA)に、一過性にトランスフェクトした。
ELISAプレート(Greiner, オランダ)を、100μl/ウェルのリン酸緩衝生理食塩水(PBS)中の0.5μg/ml AXLECDHisでコーティングし、室温(RT)で16時間インキュベートした。コーティング溶液を除去して、150μl PBSTC(0.1% tween-20および2%ニワトリ血清を含有するPBS)をウェルに添加し、RTで1時間インキュベートすることによって、ウェルをブロッキングした。プレートを、300μl PBST(0.1% tween-20を含有するPBS)/ウェルで3回洗浄して、100μlの試験溶液を添加し、その後RTで1時間のインキュベーションを行った。300μlのPBST/ウェルで3回洗浄した後、100μlの西洋ワサビペルオキシダーゼとカップリングした抗体ヤギ抗ヒトIgG(1/3000に希釈)を添加して、RTで1時間インキュベートした。300μlのPBST/ウェルで3回洗浄した後、100μlのABTS(1mg/ml)溶液を添加し、十分なシグナルが観察されるまでRTでインキュベートして、100μlの2%シュウ酸溶液を添加することによって反応を停止した。96ウェルプレートを、ELISAリーダー上で405 nmで測定した。
試料を、それぞれ、TH1021-hAXL(ヒトAXLを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-cAXL(ヒトECDがカニクイザルAXLのECDで置き換えられているヒト-カニクイザルAXLキメラを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-mAXL(ヒトECDがマウスAXLのECDで置き換えられているヒト-マウスAXLキメラを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-mIg1(マウスAXLのIg様ドメインIにより置き換えられているIg様ドメインIを有するヒトAXLを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-mIg2(マウスAXLのIg様ドメインIIにより置き換えられているIg様ドメインIIを有するヒトAXLを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-mFN1(マウスAXLのFNIII様ドメインIにより置き換えられているFNIII様ドメインIを有するヒトAXLを一過性に発現するHEK293F細胞)、TH1021-mFN2(マウスAXLのFNIII様ドメインIIにより置き換えられているFNIII様ドメインIIを有するヒトAXLを一過性に発現するHEK293F細胞)、およびHEK293F細胞(AXLを発現しない陰性対照)に対する抗体の結合について解析した。
1つの抗AXL抗体(クローン511)の親和性を測定した。
化合物3の調製:
30 mLの塩化メチレン(DCM)中のBoc-L-フェニルアラニン1(5.36 g、20.2 mmol)の溶液に、カルボニルジイミダゾール(CDI、4.26 g、26.3 mmol)を添加して、1時間撹拌した。次いで、15 mLのDCM中の2(3.67 g、30.3 mmol)および2,4-ジアミノ酪酸(DBU、4.5 mL、30 mmol)の溶液を添加した。混合物を、40℃で16時間加熱した、混合物を、60 mLのDCMおよび40 mLの水で希釈し、次いで、濃HClでpH 7に中和した。DCM抽出物を収集して、0.2M HCl(60 mL)で、次いで塩水(60 mL)で洗浄し、Na2SO4の上で乾燥し、蒸発させて、7.47 gのBoc保護されたスルホンアミドを生み出した。この材料を、40 mLのメタノールに懸濁し、次いで、200 mLの6N HCl/イソプロパノールを添加して、混合物を2時間撹拌した。溶媒を、真空下で蒸発させ、次いで、100 mLのエーテルを添加した。沈殿を、濾過により収集し、乾燥して、化合物3をHCl塩(5.93 g、96%);MS m/z 269.1(M+H)として生み出した。
10 mLのN,N-ジメチルホルムアミド(DMF)中の化合物4(1.09 g、1.6 mmol)の溶液に、2-(1H-7-アザベンゾトリアゾール-1-イル)-1,1,3,3-テトラメチルウラニウムヘキサフルオロホスファート(HATU、0.61 g、1.6 mmol)、ジイソプロピルエチルアミン(DIEA、0.56 mL)、および化合物3(0.49 g、1.6 mmol)をその順序で添加した。混合物を1時間撹拌して、100 mLの水および4 mLの酢酸で希釈した。沈殿を、濾過により収集し、真空下で乾燥して、10 mLの4M HCl/ジオキサンに添加した。30分後、200 mLのエーテルを添加して、不溶性沈殿を収集し、HPLCにより精製して、化合物5をテトラヒドロフラン塩(TFA、1.3 g、88%);MS m/z 835.5 (M+H)として生み出した。化合物5を、本原稿を通してデュオスタチン-3と呼ぶ。
5 mLのDMF中の化合物5(500 mg、0.527 mmol)の溶液に、化合物6(483 mg、0.631 mmol)、N-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt、40 mg、0.296 mmol)、およびDIEA(0.27 mL)を添加した。混合物を16時間撹拌し、その後、0.4 mLのピペリジンを添加した。1時間後、混合物を100 mLのエーテルで希釈して、沈殿を収集し、乾燥して、化合物7をHCl塩(640 mg、95%);MS m/z 1240.7 (M+H)として生み出した。
5 mLのDMF中の化合物8(219 mg、0.62 mmol)の溶液に、HATU(236 mg、0.62 mmol)、DIEA(0.15 mL)、および化合物7(316 mg、1.6 mmol)をそれぞれ添加した。1時間後、0.2 mLのピペリジンを添加して、混合物を30分間撹拌し、次いで、HPLCにより精製して、化合物9をTFA塩(235 mg、64%);MS m/z 1353.8 (M+H)として生み出した。
2 mLのメタノールおよび1 mLの水中の化合物9(235 mg、0.16 mmol)の溶液に、ジアルデヒド10(1.6 mLのiPrOH中0.3M)およびNaCNBH3(180 mg、2.85 mmol)の溶液を添加した。混合物をRTで2時間撹拌し、次いで、HPLCにより精製して、化合物11をTFA塩(126 mg、50%);MS m/z 1465.8 (M+H)として生じさせた。
精製AXL抗体IgG1-AXL-148、IgG1-AXL-183、およびIgG1-AXL-726、ならびに陰性対照抗体IgG1-b12を、K-lock AV1-バリン-シトルリン(vc)リンカーを用いた共有結合性コンジュゲーションを通して、Concortis Biosystems, Inc.(San Diego, CA)によりデュオスタチン-3とコンジュゲートした(Concortis Biosystemsによる、WO 2013/173391、WO 2013/173392、および WO 2013/173393)。
AXL抗体の結合親和性
9種の抗AXL抗体、ならびに可変ドメイン中に単一のアミノ酸変異を有するこれらの抗体の3種のバリアント(IgG1-AXL-154-M103L、IgG1-AXL-183-N52Q、IgG1-AXL-726-M101L)のパネルの親和性を測定した。
HEK293T細胞に、完全長ヒトAXL、カニクイザル細胞外ドメイン(ECD)を有するヒトAXL、またはマウスECDを有するヒトAXL用の発現構築物を一過性にトランスフェクトした(実施例1を参照されたい)。これらの細胞に対するHuMab-AXL抗体の結合を、フローサイトメトリーにより評定した。トランスフェクトしたHEK293細胞を、AXL抗体の連続希釈液(最終濃度範囲0.0024〜10μg/mL)と4℃で30分間インキュベートした。PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で3回洗浄した後、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で1/100に希釈したR-フィコエリスリン(PE)コンジュゲートヤギ抗ヒトIgG F(ab')2(Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA;カタログ番号109-116-098)とインキュベートした(最終体積100μL)。次に、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で2回洗浄し、120μL PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中に再懸濁して、FACS Cantoll(BD Biosciences)上で解析した。
AXLリガンドであるGas6が、AXLに対するAXL抗体の結合を干渉するかどうかを試験した。そのために、AXL陽性A431細胞を、10μg/mLの組み換えヒトGas6(R&D Systems, Abingdon, UK;カタログ番号885-GS)と4℃で15分間インキュベートした。その後、AXL抗体の連続希釈液を調製し(最終濃度範囲0.014〜10μg/mL)、細胞に添加して、4℃で30分間インキュベートした。PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で3回洗浄した後、細胞を、100μLにおいて二次抗体と4℃で30分間、暗所でインキュベートした。Fc領域に結合する二次抗体として、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で1/100に希釈したR-フィコエリスリン(PE)コンジュゲートヤギ抗ヒトIgG F(ab')2(Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA;カタログ番号109-116-098)を使用した。次に、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で2回洗浄し、120μL PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中に再懸濁して、FACS Cantoll(BD Biosciences)上で解析した。
ヒト-マウスAXLキメラ分子を用いたAXLドメイン特異性の測定
AXL抗体のAXLドメイン特異性を、ヒト-マウスキメラAXL変異体のパネルを用いて測定した。ヒトIg様ドメインI(Ig1)、Ig様ドメインII(Ig2)、ヒトFNIII様ドメインI(FN1)、またはヒトFNIII様ドメインIIドメイン(FN2)のいずれかがそれらのマウスホモログで置き換えられた、5種の異なるキメラAXL分子を生成した。
ヒト(Homo sapiens)AXL(p33-HAHs-AXL):(SEQ ID NO: 148)
マウス(Mus musculus)AXL(p33-HAMm-AXL):(SEQ ID NO: 149)
ヒト(Homo sapiens)AXL - マウス(Mus musculus)Ig1ドメイン(p33-AXL-mIg1):(SEQ ID NO: 150)
ヒト(Homo sapiens)AXL - マウス(Mus musculus)Ig2ドメイン(p33-AXL-mIg2):(SEQ ID NO: 151)
ヒト(Homo sapiens)AXL - マウス(Mus musculus)FN1ドメイン(p33-AXL-mFN1):(SEQ ID NO: 152)
ヒト(Homo sapiens)AXL - マウス(Mus musculus)FN2ドメイン(p33-AXL-mFN2):(SEQ ID NO: 153)
抗AXL抗体の結合に関与するAXL細胞外ドメイン中のアミノ酸を特定するために、細胞外ドメイン中にヒトAXL配列と変動するレベルの相同性を有する種に由来するAXL配列の組み換えによって、AXL配列バリアントのライブラリーを生成した。簡潔に言うと、ヒトAXL(Hs)をコードする発現プラスミドを、ハツカネズミ(Mm)、ハイイロジネズミオポッサム(Monodelphis domestica)(Md;フクロネズミ)、グリーンアノール(Anolis carolinensis)(Ac;トカゲ)、およびミドリフグ(Tetraodon nigroviridis)(Tn;フグ)のAXLホモログをコードするクローニングプラスミドと混合するか、またはその逆を行った。クローニングベクターまたは発現ベクターのいずれかに特異的な2種のプライマーの組み合わせを使用して、PCRサイクリング中に新生DNA複製鎖の融解およびリアニーリングを強要する、伸長時間が省略された、AXL細胞外ドメイン(ECD)を増幅するPCRを行った。両方のベクターから生じた終端を含有する組み換え産物に再び特異的な、ネスティッドPCRを用いて、完全長ECDを増幅した。
抗体依存性細胞媒介性細胞傷害(ADCC)
A431類表皮癌細胞のADCCを誘導する抗AXL抗体の能力を、下記に説明するように測定した。エフェクター細胞として、健常ボランティア由来の末梢血単核細胞(UMC Utrecht, オランダ)を使用した。
A431細胞を、培養培地(10%ウシ胎児血清(FSC)を補給したRPMI 1640培養培地)中に収集(5×106細胞)して、それに100μCi 51Cr(クロム-51;Amersham Biosciences Europe GmbH, Roosendaal, オランダ)を添加し、混合物を、37℃の水浴において1時間(hr)、振盪しながらインキュベートした。細胞の洗浄(PBS中で2回、1200 rpm、5分)後に、細胞を、RPMI1640/10% FSC中に再懸濁して、トリパンブルー排除により計数した。細胞を、1×105細胞/mLの密度に希釈した。
末梢血単核細胞(健常ボランティア、UMC Utrecht, Utrecht, オランダ)を、Ficoll(Bio Whittaker;リンパ球分離媒体、カタログ17-829E)により製造業者の説明書にしたがって、45 mLの新しく採取したヘパリン血から単離した。細胞のRPMI1640/10% FSC中への再懸濁後に、細胞を、トリパンブルー排除により計数し、1×107細胞/mLの密度に希釈した。
50μlの51Cr標識標的細胞を、96ウェルプレート中にピペットで移し、RPMI1640/10% FSC中に希釈した(最終濃度範囲0.01〜10μg/mLの3倍希釈液)50μLの抗体を添加した。細胞をインキュベート(室温(RT)、15分)して、50μlのエフェクター細胞を添加し、100:1のエフェクター対標的比を結果として生じた(最大溶解の決定のために、エフェクター細胞の代わりに100μlの5% Triton-X100を添加し;自然溶解の決定のために、50μLの標的細胞および100μLのRPMI1640/10% FSCを使用した)。細胞を、37℃および5% CO2で一晩インキュベートした。細胞をスピンダウン(1200 rpm、10分)した後、70μLの上清をmicronicチューブ中に採集して、γカウンターにおいてカウントした。特異的溶解のパーセンテージを、以下のように算出した:
特異的溶解%=(試料のcpm-標的細胞のみのcpm)/(最大溶解のcpm-標的細胞のみのcpm)
式中、cpmは1分あたりのカウント数である。
HEK293T細胞に、完全長ヒトAXL用の発現構築物を一過性にトランスフェクトした(実施例1を参照されたい)。これらの細胞に対する抗AXL抗体およびAXL-ADCの結合を、フローサイトメトリーにより評定した。一過性にトランスフェクトしたHEK293細胞を、抗AXL抗体またはAXL-ADCの連続希釈液(4倍希釈液;最終濃度範囲0.003〜10μg/mL)と4℃で30分間インキュベートした。PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で3回洗浄した後、細胞を、100μLにおいて二次抗体と4℃で30分間、暗所でインキュベートした。二次抗体としては、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で1/100に希釈したR-フィコエリスリン(PE)コンジュゲートヤギ抗ヒトIgG F(ab')2(Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA;カタログ番号109-116-098)を使用した。次に、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で2回洗浄し、120μL PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中に再懸濁して、FACS Cantoll(BD Biosciences)上で解析した。
LCLC-103H細胞(ヒト大細胞肺癌)細胞を、10%(体積/体積)熱不活化Cosmic Calf Serum(Perbio;カタログ番号SH30087.03)、2 mM L-グルタミン(Cambrex;カタログ番号US17-905C)、50 IU/mLペニシリン、および50μg/mLストレプトマイシン(Cambrex;カタログ番号DE17-603E)を補給した、L-グルタミンを含むRPMI1640(Cambrex;カタログ番号BE12-115F)中で培養した。MDA-MB-231細胞(ヒト乳癌)を、10%(体積/体積)熱不活化Cosmic Calf Serum(Perbio;カタログ番号SH30087.03)、1 mMピルビン酸ナトリウム(Cambrex;カタログ番号BE13-115E)、2 mM L-グルタミン(Cambrex;カタログ番号US17-905C)、100μM MEM NEAA(Invitrogen;カタログ番号11140)、50 IU/mLペニシリン、および50μg/mLストレプトマイシン(Cambrex;カタログ番号DE17-603E)を補給した、DMEM(Cambrex;カタログ番号BE12-709F)中で培養した。細胞株は、37℃で、5%(体積/体積)CO2加湿インキュベーターにおいて維持した。LCLC-103HおよびMDA-MB-231細胞を、コンフルエント近くまで培養し、その後、細胞をトリプシン処理して、培養培地中に再懸濁し、セルストレーナー(BD Falcon、カタログ番号352340)を通過させて、単一細胞懸濁液を取得した。1×103細胞を、96ウェル培養プレートの各ウェルに播種し、細胞を、室温で30分間、その後37℃、5% CO2で5時間インキュベートして、プレートに接着させた。
VHまたはVL領域におけるアミノ酸残基の決定的または許容的な変化を特定するために、(実施例1に記載されている)抗AXL抗体パネルのVHおよびVL領域のタンパク質配列を、整列させて、AXL結合について比較した。そのために、同一のVHまたはVL領域を有する抗体を、グループ化して、それぞれ、ヒトAXLに対する結合およびVLまたはVH配列における差について比較した。HEK-293F細胞により一過性に発現されるヒトAXLに対する結合を、実施例1に記載されているような均質抗原特異的スクリーニングアッセイにおいて評価した。本実施例において行われたアラインメントについてのアミノ酸位置のナンバリングは、図6に提示される配列に基づいて行われ、すなわち、示される配列における1番目のアミノ酸を位置「1」とナンバリングし、2番目を位置「2」とする、などであった。
抗AXL抗体へのMMAEのコンジュゲーション
抗AXL抗体を、標準的な手順にしたがってプロテインAクロマトグラフィーにより精製し、vcMMAEにコンジュゲートした。文献に記載されている手順にしたがって(Sun et al., 2005、McDonagh et al., 2006、および Alley et al., 2008 を参照されたい)、薬物-リンカーvcMMAEを、還元された抗体のシステインにアルキル化した。過剰量のN-アセチルシステインの添加によって、反応を終息させた。いずれの残りのコンジュゲートされていない薬物も、精製によって除去し、最終的な抗AXL抗体薬物コンジュゲートを、PBSにおいて製剤化した。抗AXL抗体薬物コンジュゲートを、その後、濃度(280 nmでの吸光度により)、逆相クロマトグラフィー(RP-HPLC)および疎水性相互作用クロマトグラフィー(HIC)により薬物対抗体の比(DAR)、コンジュゲートされていない薬物の量(逆相クロマトグラフィーにより)、凝集のパーセンテージ(サイズ排除クロマトグラフィー、SEC-HPLCにより)、ならびにエンドトキシンレベル(LALにより)について解析した。結果を、下記の表9に示す。
LCLC-103H細胞(ヒト大細胞肺癌)およびA431細胞(DMSZ, Braunschweig, ドイツ)を、10%(体積/体積)熱不活化Cosmic Calf Serum(Perbio;カタログ番号SH30087.03)、2 mM L-グルタミン(Cambrex;カタログ番号US17-905C)、50 IU/mLペニシリン、および50μg/mLストレプトマイシン(Cambrex;カタログ番号DE17-603E)を補給した、L-グルタミンを含むRPMI1640(Cambrex;カタログ番号BE12-115F)中で培養した。MDA-MB231細胞を、高グルコースおよびHEPESを含むDMEM(Lonza #BE12-709F)、Donor Bovine Serum with Iron(Life Technologies #10371-029)、2 mM L-グルタミン(Lonza #BE17-605E)、1 mMピルビン酸ナトリウム(Lonza #BE13-115E)、およびMEM Non-Essential Amino Acids Solution(Life Technologies #11140)中で培養した。細胞株は、37℃で、5%(体積/体積)CO2加湿インキュベーターにおいて維持した。LCLC-103H、A431、およびMDA-MB231細胞を、コンフルエント近くまで培養し、その後、細胞をトリプシン処理して、培養培地中に再懸濁し、セルストレーナー(BD Falcon、カタログ番号352340)を通過させて、単一細胞懸濁液を取得した。1×103細胞を、96ウェル培養プレートの各ウェルに播種し、細胞を、室温で30分間、その後37℃、5% CO2で5時間インキュベートして、プレートに接着させた。
MMAEコンジュゲートAXL抗体の連続希釈液(0.00015〜10μg/mLの範囲にわたる最終濃度)を培養培地中で調製し、プレートに添加した。細胞と1μMスタウロスポリン(#S6942-200, Sigma)とのインキュベーションを、100%腫瘍細胞殺傷用の参照として使用した。無処置の細胞を、100%細胞成長用の参照として使用した。プレートを、37℃、5% CO2で5日間インキュベートした。次に、CellTiter-Glo Reagent(Promega;カタログ番号G7571)をウェルに添加して(ウェルあたり20μL)、プレートを37℃、5% CO2で1.5時間インキュベートした。その後、ウェルあたり180μLを、白色96ウェルOptiplate(商標)プレート(PerkinElmer, Waltham, MA;カタログ番号6005299)に移して、室温で30分間インキュベートした。最後に、発光を、EnVisionマルチプレートリーダー(Envision, Perkin Elmer)上で測定した。
*IgG1-AXL-vcMMAEは、本明細書では「HuMax-AXL-ADC」とも呼ばれる。
MMAEコンジュゲート抗AXL抗体のインビボ効力を、確立されたSCIDマウスにおける皮下(SC)LCLC-103H異種移植腫瘍において測定した。200μL PBS中の5×106個のLCLC-103H(大細胞肺癌)腫瘍細胞(Leibniz-Institut DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH (DSMZ)から取得)を、雌SCIDマウスの右側腹部の皮下に注射した。平均腫瘍サイズが100〜200 mm3よりも大きく、明瞭な腫瘍成長が観察された、腫瘍細胞接種の14〜21日後に開始して、1 mg/kg(20μg/マウス)のIgG1-AXL-vcMMAE抗体(補足的な実施例1に記載されている)または対照(コンジュゲートされていないIgG1-b12)での単回注射を、腹腔内に与えた(100μL/マウス)。腫瘍体積を、少なくとも週あたり2回測定した。腫瘍体積(mm3)を、キャリパー(PLEXX)測定値から0.52×(長さ)×(幅)2として算出した。
IgG1-AXL-107-vcMMAE、IgG1-AXL-148-vcMMAE、およびIgG1-AXL-733-vcMMAEの抗腫瘍活性を、PAXF1657膵臓癌PDXモデルにおいて測定した(Oncotest, Freiburg, ドイツにより行われた実験)。ヒト膵臓腫瘍組織を、5〜7週齢の雌NMRI nu/nuマウスの左側腹部の皮下に移植した。動物の無作為化を、以下のように行った:50〜250 mm3、好ましくは80〜200 mm3の間の体積の腫瘍を有する動物を、群腫瘍体積の比較可能な中央値および平均値を考慮して、7種の実験群(群あたり8匹の動物)に分配した。無作為化の日(0日目)に、3種のADCを、4 mg/kgまたは2 mg/kgのいずれかで静脈内に(i.v.)投与し、対照群は、単一用量のIgG1-b12(4 mg/kg)を受けた。腫瘍体積(mm3)を、週に2回モニターして、キャリパー(PLEXX)測定値から0.52×(長さ)×(幅)2として算出した。
AXL抗体IgG1-AXL-061、IgG1-AXL-107、IgG1-AXL-137、およびIgG1-AXL-613のAXLドメイン特異性を、ヒト-マウスキメラAXL変異体のパネルを用いて測定した。ヒト-マウス交差反応性モノクローナルAXL抗体であるYW327.6S2を、hsAXL-mmECDの発現を確認するために含めた。IgG1-b12を、アイソタイプ対照抗体として含めた。実施例3に記載されているように、5種の異なるキメラAXL分子を生成して、HEK293Fにおいて発現させた。簡潔に言うと、ヒトIg様ドメインI(Ig1)、Ig様ドメインII(Ig2)、ヒトFNIII様ドメインI(FN1)、またはヒトFNIII様ドメインIIドメイン(FN2)を、それらのマウスホモログで置き換えた。実施例2に記載されているように、ヒト-マウスAXLキメラに対する1μg/mL抗AXL抗体の結合を、フローサイトメトリーにより測定した。
AXL抗体IgG1-AXL-061、IgG1-AXL-107、IgG1-AXL-137、またはIgG1-AXL-613の結合が、AXLリガンドであるGas6のAXLに対する結合を干渉するかどうかを試験した。そのために、実施例2に記載されているように、10μg/mL AXL抗体とプレインキュベートしていたA431細胞に対するGas6の結合を試験した。AXL結合についてGas6と競合することが記載されたAXL抗体YW327.6S2、IgG1-b12(アイソタイプ対照)、または培地(陰性対照)とのプレインキュベーションを、対照として含めた。
A431およびLCLC-103H腫瘍細胞のGas6産生
A431細胞およびLCLC-103H細胞がGas6を産生するかどうかを試験した。そのために、細胞を、完全培養培地中で3日間成長させた。上清中のGas6レベルを、Quantikine Human Gas6 ELISA(R&D Systems, Minneapolis, MN)を用い、製造業者の説明書にしたがって決定した。このアッセイは、定量的サンドイッチELISA技術を使用する。ヒトGas6に特異的なモノクローナルAbが、マイクロプレート上にプレコーティングされている。標準品および試料をウェル中にピペットで移すと、存在する任意のヒトGas6が、固定されたAbによって結合される。任意の結合していない物質を洗浄して除去した後、ヒトGas6に特異的な酵素連結ポリクローナルAbをウェルに添加する。任意の結合していないAb-酵素試薬を除去するための洗浄後に、基質をウェルに添加すると、最初の工程において結合したヒトGas6の量に比例して色が顕出する。顕色を停止して、色の強度を測定する。
IgG1-AXL-061-vcMMAE(Ig1結合剤)、IgG1-AXL-107-vcMMAE(Ig1結合剤)、IgG1-AXL-137-vcMMAE(Ig1結合剤)、IgG1-AXL-148-vcMMAE(Ig2結合剤)、IgG1-AXL-183-vcMMAE(FN1結合剤)、およびIgG1-AXL-726-vcMMAE(FN2結合剤)のインビボ抗腫瘍活性を、高レベルのGas6を産生するA431(類表皮癌)腫瘍モデル、および、低レベルのGas6を産生するLCLC-103H(大細胞肺癌)腫瘍モデルにおいて測定した。
AXLの発現を、甲状腺癌、食道癌、卵巣癌、膵臓癌、肺癌、乳癌、子宮頸癌もしくは子宮内膜癌、または悪性メラノーマを有する患者由来の組織コアを含む、新しく切ったパラフィン包埋、ホルマリン固定(FFPE)の腫瘍組織マイクロアレイ(TMA)において評定した。TMAは、US BioMaxから取得した。
HEK-293F細胞におけるヒトAXL、MER、およびTYRO3の発現
種々の完全長タンパク質の発現用の以下のコドン最適化構築物を生成した:ヒト(ホモ・サピエンス)AXL(Genbankアクセッション番号NP_068713.2)、ヒトMER(Genbankアクセッション番号EAW52096.1)、およびヒトTYRO3(Genbankアクセッション番号Q06418.1)。 構築物は、クローニングに適している制限酵素部位および最適コザック(GCCGCCACC)配列(Kozak et al., 1999)を含有した。構築物を、哺乳動物発現ベクターpcDNA3.3(Invitrogen)にクローニングした。
完全長ヒトAXL、MER、またはTYRO3用の発現構築物を一過性にトランスフェクトしたHEK-293F細胞を、HuMab-AXL抗体の結合についてフローサイトメトリーにより評定した。トランスフェクトしたHEK-293F細胞を、AXL抗体の連続希釈液(4倍希釈液;最終濃度範囲0.002〜10μg/mL)と4℃で30分間インキュベートした。PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で3回洗浄した後、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で1/100に希釈したR-フィコエリスリン(PE)コンジュゲートヤギ抗ヒトIgG F(ab')2(Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA;カタログ番号109-116-098)とインキュベートした(最終体積100μL)。次に、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で2回洗浄し、120μL PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中に再懸濁して、FACS Cantoll(BD Biosciences)上で解析した。マウス抗ヒトMer(R&D Systems、カタログMab8912)およびマウス抗ヒトTyro3(Dtk)(R&D Systems、カタログMAB859)での染色を、発現についての対照として含め、IgG1-b12を、非結合アイソタイプ対照抗体として含めた。結合曲線を、GraphPad Prism V5.04ソフトウェア(GraphPad Software, San Diego, CA, USA)を使用し、非線形回帰(可変の勾配を有するシグモイド用量応答)を用いて解析した。
フローサイトメトリーにより評定した、細胞表面に結合したHuMab-AXLの内部移行
MDA-MB-231およびCalu-1細胞(ヒト肺癌細胞株;ATCC、カタログ番号HTB-54)に対する、細胞表面に結合したHuMab-AXL抗体の内部移行を、フローサイトメトリーにより評定した。50,000細胞を、96ウェル組織培養プレートに播種して、37℃で6時間付着させた。プレートを、AXL抗体の連続希釈液(最終濃度範囲0.0032〜10μg/mL)との4℃で1時間のインキュベーション前に、4℃で30分間インキュベートした。その後、培地を、抗体を含まない組織培養培地により置き換え、細胞を、37℃または4℃で一晩(16〜18時間)インキュベートした。その後、細胞表面上のAXL抗体を検出するために、細胞を、40μLの温かいトリプシン溶液で剥離し、氷冷PBS/0.1% BSA/0.02%アジドで洗浄し、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で1/100に希釈したR-フィコエリスリン(PE)コンジュゲートヤギ抗ヒトIgG F(ab')2(Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA;カタログ番号109-116-098)と4℃で30分間インキュベートした(最終体積100μL)。最後に、細胞を、PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中で2回洗浄し、120μL PBS/0.1% BSA/0.02%アジド中に再懸濁して、FACS Cantoll(BD Biosciences)上で解析した。
AXL抗体の内部移行を、Fab-TAMRA/QSY7内部移行アッセイにおいて評価した。このアッセイは、蛍光体(TAMRA)と消光剤(QSY7)のペアを使用する。きわめて接近すると、例えば、同じタンパク質へのコンジュゲーション時に、TAMRA蛍光はQSY7によって消光される。この実施例においては、ヤギ抗ヒトIgG Fab断片(Jackson Immunoresearch)を、記載されているように(Ogawa et al. Mol Pharm 2009;6(2):386-395)TAMRA/QSY7とコンジュゲートして(Fab-TAMRA/QSY7)、AXL HuMab(1.5μg/mL)を、Fab-TAMRA/QSY7とプレインキュベートした(12μg/mL;30分、4℃)。複合体をその後、LCLC-103H細胞に添加して、振盪条件(200 rpm、37℃)下で、24時間のインキュベートの間、暗所でインキュベートした。HuMab-Fab-TAMRA/QSY7複合体の内部移行、ならびにエンドソームおよびリソソームにおける細胞内分解は、TAMRA/QSY7の解離を引き起こし、TAMRAの脱消光(dequenching)を結果としてもたらす。Fab-TAMRA/QSY7と複合体形成したAXL抗体とインキュベートしていたLCLC-103H細胞のTAMRA蛍光を、FACS CantoII(BD Biosciences)上で測定した。
樹立ヒトメラノーマ細胞株(CDX)および患者由来の低継代メラノーマ細胞株(PDX)のパネルにおいて、Axlタンパク質の発現レベルを、BRAF阻害剤PLX4720(臨床的に承認されたBRAF阻害剤ベムラフェニブの類似体)での処置による増殖抑制に対するそれらの内因性耐性または獲得耐性との関連で、評価した。さらに、IgG1-AXL-107-vcMMAEでの処置に対するメラノーマ細胞の感受性をインビトロおよびインビボにおいて評価した。
SKMEL147は、オランダ癌研究所(Netherlands Cancer Institute)のReuven Agami研究室から入手した。A875はThermo Fisher社から、COLO679はSigma社から、SKMEL28およびA375細胞はATCCから入手した。メラノーマ細胞株は、10%ウシ胎仔血清(Sigma社)、100U/mlペニシリンおよび0.1mg/mlストレプトマイシン(全てGibco社)を補充したDMEM中で培養した。これらの細胞株は、5%(vol/vol)CO2加湿インキュベータ内で37℃に維持した。
BRAF阻害剤感受性細胞株(SKMEL28およびA375)を3μMまでの漸増濃度のBRAF阻害剤PLX4720(会社: Selleck Chemicals, Houston, TX, 米国, カタログ番号: S1152)の存在下で培養して、対応するPLX4720耐性SKMEL28RおよびA375Rを樹立した。全ての薬剤耐性細胞株は、3μMのPLX4720の存在下で永続的に培養した。
オランダ癌研究所のAntoni van Leeuwenhoek病院の医療倫理委員会は、ヒト組織の採取と使用を承認した。動物実験は、同研究所の動物実験委員会によって承認され、適用すべき規則および法規に従って実施した。ヒト腫瘍材料は、手術中に取得するか、または14ゲージ針を用いて悪性メラノーマ患者から腫瘍生検を採ることによって得た。約5mm3の腫瘍断片をNOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1wjl/SzJマウスの皮下移植に使用し、移植を麻酔下で行った。腫瘍の成長をキャリパーで週2回測定した。腫瘍サイズが1000mm3に達する前に、マウスを犠牲にし、腫瘍を摘出し、腫瘍片を単細胞懸濁液へと解離させ、10cm培養皿上にプレーティングして、DMEM+10%FBS(Sigma社)+100U/mlペニシリンおよび0.1mg/mlストレプトマイシン(全てGibco社)中で初代細胞培養物として増殖させた。
AxlおよびMITFの発現を、ウェスタンブロット分析を用いて測定した。細胞溶解物中のタンパク質を4〜12%のSDS-PAGEゲル上で分離し、PVDFメンブレンに移した後、PBS-Tween中の5%BSA中でAxlに特異的な抗体(sc-1096, Santa Cruz社)により染色するか、またはニトロセルロース膜に移して、PBS-Tween中の5%無脂肪粉乳中でMITF (abl2039, Abcam社)により染色した。ゲルローディングを調整するために、ビンキュリンまたはβ-アクチンに対する抗体を使用した。
ヒト腫瘍細胞株の形質膜上のAXL発現は、QIFIKIT分析(DAKO社, カタログ番号K0078)を用いた間接免疫蛍光法により定量した。マウスモノクローナル抗体ab89224(Abcam社, Cambridge, 英国)を用いてAxlを検出した。接着細胞をトリプシン処理し、細胞ストレーナーに通して単細胞懸濁液を得た。細胞を1200rpmで5分間遠心分離してペレット化し、PBSで洗浄し、1×106細胞/mLの濃度で再懸濁した。次の工程は氷上で行った。100μLの単細胞懸濁液(ウェルあたり100,000細胞)をポリスチレン96ウェル丸底プレート(Greiner Bio-One社, カタログ番号650101)に播種した。細胞を300×gで3分間遠心分離してペレット化し、10μg/mLの濃度の抗体サンプルまたはマウスIgG1アイソタイプ対照サンプル(カタログ番号QF2040741, ロット番号MA1-10406, Pierce社)50μL中に再懸濁した。4℃で30分間インキュベートした後、細胞をペレット化し、150μLのFACS緩衝液(0.1%BSAを含むPBS)に再懸濁した。セットアップ用およびキャリブレーション用ビーズをメーカーの説明書に従ってプレートに添加した。並行して細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回以上洗浄し、50μLのFITC結合ヤギ抗マウスIgG (1/50; DAKO社, カタログ番号K0078)に再懸濁した。二次抗体を暗所にて4℃で30分間インキュベートした。細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回洗浄し、100μLのFACS緩衝液に再懸濁した。生細胞ゲート内で10,000事象を記録することにより、FACS Calibur (BD Biosciences社)上で免疫蛍光を測定した。キャリブレーション用ビーズの平均蛍光強度は、GraphPad Prismソフトウェア(GraphPad Software社, San Diego, CA, 米国)を用いてキャリブレーション曲線を作成するために使用した。各細胞株について、形質膜上に発現されたAXL分子の数の推定値である抗体結合能(ABC)は、キャリブレーション曲線の式(GraphPadソフトウェアを用いて、標準曲線からの未知数の補間)に基づいて、AXL抗体で染色された細胞の平均蛍光強度を用いて算出した。
細胞をほぼコンフルエントになるまで培養した後、細胞をトリプシン処理し、培地に再懸濁し、細胞ストレーナー(BD Falcon社, カタログ番号352340)に通して単細胞懸濁液を得た。細胞を、次の播種密度を用いて96ウェルフォーマットで培養した:樹立細胞株については2000細胞/ウェル、PDX由来細胞株については4000細胞/ウェル。播種の4時間後にIgG1-AXL-107-vcMMAEを添加した。IgG1-AXL-107-vcMMAEの連続希釈液(10倍;最終濃度0.0001〜10μg/mLの範囲)を培地中に調製して、プレートに添加した。37℃、5%CO2での5日間(CDサンプルについて)または8日間(PDXサンプル)のインキュベーション後に、CellTiter-Glo試薬(Promega社; カタログ番号G7571)をウェルに加え、発光細胞生存率アッセイ(Luminescent Cell Viability Assay; Promega社, Madison, WI)をメーカーのプロトコルに従って行った。発光(ルミネセンス)をInfinite M200マイクロプレートリーダー(Tecan社)で測定し、生存率を次のように計算した:生存率%=(ルミネセンス対象サンプル-ルミネセンスPAO)/(処理された対照ビヒクルの平均ルミネセンス-ルミネセンスPAO)、ここでPAOは100%細胞死滅のための5μMフェニルアルシンオキシドを表す。
IgG1-AXL-107-vcMMAEの抗腫瘍活性は、NMRIヌードマウスの皮下メラノーマモデルSKMEL147において評価した。マウスの左脇腹に、マトリゲル中1:1に再懸濁した2.5×105個のSKMEL147メラノーマ細胞(高レベルのAxlを発現する;図21および表15参照)を全量100μLで皮下注入した。腫瘍をキャリパーで週3回測定し、腫瘍が100mm3になったとき、動物を次の処置群に無作為化した:IgG1-b12 (4mg/kg)、IgG1-b12-vcMMAE (4mg/kg)、IgG1-107 (4mg/kg)、IgG1-107-vcMMAE (2mg/kg)、およびIgG1-107-vcMMAE (4mg/kg)。
SKMEL28野生型細胞およびPLX4720に耐性のSKMEL28細胞(SKMEL28-R)を、それぞれ、蛍光色素分子mCherry(赤色)またはGFP(緑色)の発現ベクターでトランスフェクトした。続いて、6ウェルプレートに各細胞株50,000個(合計で100,000細胞/ウェル)を用いて、1:1の比で細胞を播種した。3時間後、次の化合物をウェルに加えた:IgG1-AXL-107-vcMMAE (1μg/mL)、IgG1-b12-MMAE (1μg/mL; アイソタイプ対照ADC)、PLX4720 (10μM; BRAF阻害剤)、ダブラフェニブ(1μM; BRAF阻害剤)、および/またはトラメチニブ(0.1μM; MEK阻害剤)。4日後、細胞をトリプシン処理し、PBS+1%BSAで1回洗浄し、フローサイトメトリーで分析した。
AXLの発現は、新たに切除してパラフィン包埋し、ホルマリン固定した(FFPE)、悪性メラノーマを含む全組織(WT)において評価した。染色はSequenzaスライドラック(Ted Pella社, Redding, CA, 米国; カタログ番号36105)で手作業により行った。
AXL発現:
AXL発現は、樹立メラノーマ細胞株(表15)および低継代初代メラノーマ株(PDX、表16)のパネルにおいて評価した。ウェスタンブロットで測定されたAXL発現(図21)は、樹立細胞株(図21A)でも臨床患者由来サンプル(図21B)でもMITF発現に逆相関した。樹立細胞株のパネルでは、Axl発現を定量的フローサイトメトリーによっても測定した。AXL陰性および陽性細胞株の例を図22に示す。全ての細胞株についてのAxl発現レベル(ABCとして表される)を、これらの細胞株のBRAF変異状態と共に、表15に示す。
次に、樹立メラノーマ細胞株およびPDXのパネルのIgG1-AXL-107-vcMMAEに対する感受性を生存率アッセイで評価した。細胞をIgG1-AXL-107-vcMMAEの漸増濃度(範囲1×10-4〜10μg/mL)に5日間曝露した後、細胞生存率を測定した。結果を表15および16に要約し、用量応答曲線を図23および24に示す。図23は、4つ全てのAXL発現細胞株(SKMEL147、A875、A375R、SKMEL28R)が、そのうちの3つはPLX4720に耐性であったものの、IgG1-AXL-107-vcMMAE処置に感受性であることを示す。2つのAXL陰性細胞株COL0679およびSKMEL28は、IgG1-AXL-107-vcMMAEで処置した際に生存率の変化を示さなかった。3つのPLX4720耐性PDXサンプルを、IgG1-AXL-107-vcMMAEを用いて生存率アッセイで試験した。図24に示すように、2つのAXL高発現PDX培養物MO16およびMO19RはIgG1-AXL-107-vcMMAEによる処置に感受性であったのに対し、AXL低発現PDX培養物M082はIgG1-b12-vcMMAE対照処置で見られた応答と異なる応答を示さなかった。
SKMEL147メラノーマ異種移植片モデルにおいて、IgG1-b12、IgG1-b12-vcMMAE、またはIgG1-AXL-107で処置したマウスは腫瘍増殖の抑制を示さなかった。IgG1-AXL-107-vcMMAEは2mg/kgで腫瘍増殖の抑制を誘導し、4mg/kgの用量では強い腫瘍退縮を誘導し、これは50日目頃まで持続した(図25A)。
SKMEL28野生型(wt)細胞とSKMEL28 PLX4720耐性細胞の混合集団では、細胞混合物をIgG1-AXL-107-vcMMAE、PLX4720、またはダブラフェニブで処置した場合に、未処置の対照と比較して、総細胞数が74〜62%減少した(図26A)。細胞混合物をIgG1-AXL-107-vcMMAEとPLX4720、IgG1-AXL-107-vcMMAEとダブラフェニブ、ダブラフェニブとトラメチニブ、またはダブラフェニブとトラメチニブとIgG1-AXL-107-vcMMAEの組み合わせで処置すると、未処置の細胞と比較して、総細胞数の81〜92%の減少が誘導された(図26A)。
全部で45個のサンプルを分析し、そのうちの3個は腫瘍材料を含まなかったので、分析から除外した。さらに、同じ患者からの対応するベムラフェニブ処置前および処置後のサンプル7つと、対応するダブラフェニブ/トラメチニブ処置前および処置後のサンプル1つが含まれていた。42個のうちの41個のサンプルにおいて、Axl発現がメラノーマ領域のサブセットで検出された。染色強度は患者腫瘍ごとに異なっていた(表17)。
患者由来の低継代(PDX)メラノーマ細胞培養物の作製
オランダ癌研究所のAntoni van Leeuwenhoek病院の医療倫理委員会は、ヒト組織の採取と使用を承認した。動物実験は、同研究所の動物実験委員会によって承認され、適用すべき規則および法規に従って実施した。ヒト腫瘍材料は、手術中に取得するか、または14ゲージ針を用いて悪性メラノーマ患者から腫瘍生検を採取することによって得た。約5mm3の腫瘍断片をNOD.Cg-Prkdcscid Il2rgtm1Wjl/SzJマウスの皮下移植に用いたが、移植は麻酔下で行った。腫瘍の成長をキャリパーで週2回測定した。腫瘍サイズが1000mm3に達する前に、マウスを犠牲にし、腫瘍を摘出し、腫瘍片を単細胞懸濁液へと解離させ、10cm培養皿上に播種して、DMEM+10%FBS(Sigma社)+100U/mlペニシリンおよび0.1mg/mlストレプトマイシン(全てGibco社)中で初代細胞培養物として増殖させた。M019R細胞培養物は、もともとベムラフェニブに耐性であったBRAF V600E変異を含むメラノーマ患者の腫瘍材料に由来した。
ヒト腫瘍細胞株の形質膜上のAXL発現は、QIFIKIT分析(DAKO社, カタログ番号K0078)を用いた間接免疫蛍光法により定量した。マウスモノクローナル抗体ab89224 (Abcam社, Cambridge, 英国)を用いてAxlを検出した。接着細胞をトリプシンで処理し、細胞ストレーナーに通して単細胞懸濁液を得た。細胞を1200rpmで5分間遠心分離してペレット化し、PBSで洗浄し、1×106細胞/mLの濃度で再懸濁した。次の工程は氷上で行った。100μLの単細胞懸濁液(ウェルあたり100,000細胞)をポリスチレン96ウェル丸底プレート(Greiner Bio-One社, カタログ番号650101)に播種した。細胞を300×gで3分間遠心分離してペレット化し、10μg/mLの濃度の抗体サンプルまたはマウスIgG1アイソタイプ対照サンプル(カタログ番号QF2040741, ロット番号MA1-10406, Pierce社)50μL中に再懸濁した。4℃で30分間インキュベートした後、細胞をペレット化し、150μLのFACS緩衝液(0.1%BSAを含むPBS)に再懸濁した。セットアップ用およびキャリブレーション用ビーズをメーカーの説明書に従ってプレートに添加した。並行して細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回以上洗浄し、50μLのFITC結合ヤギ抗マウスIgG (1/50; DAKO社, カタログ番号K0078)に再懸濁した。二次抗体を暗所にて4℃で30分間インキュベートした。細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回洗浄し、100μLのFACS緩衝液に再懸濁した。生細胞ゲート内で10,000事象を記録することにより、FACS Calibur (BD Biosciences社)上で免疫蛍光を測定した。キャリブレーション用ビーズの平均蛍光強度は、GraphPad Prismソフトウェア(GraphPad Software社, San Diego, CA, 米国)を用いてキャリブレーション曲線を作成するために使用した。各細胞株について、形質膜上に発現されたAXL分子の数の推定値である抗体結合能(ABC)は、キャリブレーション曲線の式(GraphPadソフトウェアを用いて、標準曲線からの未知数の補間)に基づいて、AXL抗体で染色された細胞の平均蛍光強度を用いて算出した。
細胞をほぼコンフルエントになるまで培養した後、細胞をトリプシンで処理し、培地に再懸濁し、細胞ストレーナー(BD Falcon社, カタログ番号352340)に通して単細胞懸濁液を得た。PDX由来の細胞培養物を96ウェルフォーマットで4000細胞/ウェルの密度にて播種した。播種の4時間後にIgG1-AXL-107-vcMMAE、PLX4720 (Selleck Chemicals社, Houston, TX, 米国;カタログ番号:S1152)、またはトラメチニブ(Selleck Chemicals社;カタログ番号S2673)を添加した。テスト試薬の連続希釈物を培地中に調製して、プレートに添加した。37℃、5%CO2での8日間のインキュベーション後に、CellTiter-Glo試薬(Promega社; カタログ番号G7571)をウェルに加え、発光細胞生存率アッセイ(Luminescent Cell Viability Assay; Promega社, Madison, WI)をメーカーのプロトコルに従って行った。発光(ルミネセンス)をInfinite M200マイクロプレートリーダー(Tecan社)で測定し、生存率を次のように計算した:生存率%=(対象サンプルのルミネセンス-PAOのルミネセンス)/(処理された対照ビヒクルの平均ルミネセンス-PAOのルミネセンス)、ここでPAOは100%細胞死滅のための5μMフェニルアルシンオキシドによる処理を表す。
PDX由来メラノーマ細胞培養物M019RおよびM009Rを上記のように取得して、Axl発現レベル、BRAFおよびNRAS変異状態、ならびにPLX4720、トラメチニブまたはIgG1-AXL-107-vcMMAEに対するインビトロ感受性について特性評価した。結果を表18に要約する。M009RにおけるAxl発現レベルは不均一であり、これは、フローサイトメトリーで評価して、細胞の部分集団のみがAxlの検出可能なレベルを有したことを意味する。
使用略語:FACS,蛍光活性化セルソーティング;ABC,抗体結合能;wt,野生型;n.a.
a感受性のない細胞株は3μMのPLX4720または0.1μMのトラメチニブの濃度で有意な細胞死を示さない。
b感受性のない細胞株は、1μg/mLのIgG1-AXL-107-vcMMAE濃度で、有意な細胞死またはIgG1-b12-vcMMAEに匹敵する細胞死を示さない。
悪性メラノーマ患者由来のBRAF変異型M019R異種移植片モデル
IgG1-AXL-107-vcMMAEの抗腫瘍活性を、NMRIヌードマウスの皮下メラノーマモデルM019Rにおいて評価した。マウスの左脇腹に、マトリゲル中に1:1で再懸濁した2.5×105個のM019Rメラノーマ細胞を全量100μLで皮下注入した。腫瘍をキャリパーで週2回測定し、腫瘍細胞の接種後62日目に腫瘍が100mm3になったとき、動物を無作為に次の3つの処置群(1群7または8匹のマウス)に分けた:IgG1-b12-vcMMAE (「対照ADC」; 4mg/kg, i.v.)、IgG1-AXL-107-vcMMAE (4mg/kg, i.v.)、およびBRAF阻害剤ダブラフェニブ(30mg/kg,強制経口投与)+MEK阻害剤トラメチニブ(0.1mg/kg,強制経口投与)。
インビトロデータは、BRAF変異型PDX由来細胞培養物M019RがAxlを細胞表面上に発現し(実施例17)、かつBRAF阻害剤PLX4720に耐性であることを示した;これは、このモデルの由来となった患者のベムラフェニブに対する臨床的耐性と一致する。さらに、IgG1-AXL-107-vcMMAEはインビトロでM019R細胞の死滅を効率的に誘導した(実施例17)。
悪性メラノーマ患者由来のBRAF変異型M009R異種移植片モデル
IgG1-AXL-107-vcMMAEの抗腫瘍活性を、NMRIヌードマウスの皮下メラノーマモデルM009Rにおいて評価した。M009R PDX由来細胞培養物を実施例18に記載したようにして取得した;該培養物は、初めはベムラフェニブに対する応答を示したが、ベムラフェニブに対する耐性を獲得した、BRAF V600E変異を有するメラノーマ患者の腫瘍材料に由来した。マウスの左脇腹に、マトリゲル中に1:1で再懸濁した2.5×105個のM009Rメラノーマ細胞を全量100μLで皮下注入した。腫瘍をキャリパーで週2回測定し、腫瘍細胞の接種後62日目に腫瘍が100mm3になったとき、動物を無作為に次の4つの処置群(1群7または8匹のマウス)に分けた:IgG1-b12-vcMMAE (「対照ADC」; 4mg/kg, i.v.)、IgG1-AXL-107-vcMMAE (4mg/kg, i.v.)、BRAF阻害剤ダブラフェニブ(30mg/kg,強制経口投与)+MEK阻害剤トラメチニブ(0.1mg/kg,強制経口投与)+IgG1-b12-vcMMAE (「対照ADC」; 4mg/kg, i.v.)、およびダブラフェニブ(30mg/kg,強制経口投与)+トラメチニブ(0.1mg/kg,強制経口投与)+IgG1-AXL-107-vcMMAE (4mg/kg, i.v.)。
M009R細胞は不均一なAxl発現を示し(実施例18)、このモデルの由来となった患者の臨床的耐性と一致している。さらに、IgG1-AXL-107-vcMMAEは、1μg/mLの濃度でM009R細胞の死滅をインビトロで誘導しなかった。
細胞培養
SKMEL2、FM6およびBLM細胞株は、全てがNRASコドン61に変異を有するものであり(表19)、Thermo Fischer社またはATCCから入手した。メラノーマ細胞株を、10%ウシ胎仔血清(Sigma社)、100U/mlのペニシリンおよび0.1mg/mlのストレプトマイシン(全てGibco社)を補充したDMEM中で培養した。これらの細胞株を5%(vol/vol)CO2加湿インキュベータ内で37℃に維持した。
MEK阻害剤感受性細胞株SKMEL2は、対応するトラメチニブ耐性SKMEL2R細胞株を樹立するために、濃度0.1μMまで次第に増加させた濃度のMEK阻害剤トラメチニブ(Selleck Chemicals社;カタログ番号:S2673)の存在下で2〜3ヶ月間培養した。
ヒト腫瘍細胞株の形質膜上のAxl発現は、QIFIKIT分析(DAKO社, カタログ番号K0078)を用いた間接免疫蛍光法により定量した。マウスモノクローナル抗体ab89224(Abcam社, Cambridge, 英国)を用いてAxlを検出した。接着細胞をトリプシンで処理し、細胞ストレーナーに通して単細胞懸濁液を得た。細胞を1200rpmで5分間遠心分離してペレット化し、PBSで洗浄し、1×106細胞/mLの濃度で再懸濁した。次の工程は氷上で行った。100μLの単細胞懸濁液(ウェルあたり100,000細胞)をポリスチレン96ウェル丸底プレート(Greiner Bio-One社, カタログ番号650101)に播種した。細胞を300×gで3分間遠心分離してペレット化し、10μg/mLの濃度の抗体サンプルまたはマウスIgG1アイソタイプ対照サンプル(カタログ番号QF2040741, ロット番号MA1-10406, Pierce社)50μL中に再懸濁した。4℃で30分間インキュベートした後、細胞をペレット化し、150μLのFACS緩衝液(0.1%BSAを含むPBS)に再懸濁した。セットアップ用およびキャリブレーション用ビーズをメーカーの説明書に従ってプレートに添加した。並行して細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回以上洗浄し、50μLのFITC結合ヤギ抗マウスIgG (1/50; DAKO社, カタログ番号K0078)に再懸濁した。二次抗体を暗所にて4℃で30分間インキュベートした。細胞およびビーズを150μLのFACS緩衝液で2回洗浄し、100μLのFACS緩衝液に再懸濁した。免疫蛍光は、FACS Calibur (BD Biosciences社)上で、生細胞ゲート内の10,000事象を記録することにより測定した。キャリブレーション用ビーズの平均蛍光強度は、GraphPad Prismソフトウェア(GraphPad Software社, San Diego, CA, 米国)を用いてキャリブレーション曲線を作成するために使用した。各細胞株について、形質膜上に発現されたAxl分子の数の推定値である抗体結合能(ABC)は、キャリブレーション曲線の式(GraphPadソフトウェアを用いて、標準曲線からの未知数の補間)に基づいて、Axl抗体で染色された細胞の平均蛍光強度を用いて算出した。
細胞をほぼコンフルエントになるまで培養した後、細胞をトリプシンで処理し、培地に再懸濁し、細胞ストレーナー(BD Falcon社, カタログ番号352340)に通して単細胞懸濁液を得た。細胞を96ウェルフォーマットに2000細胞/ウェルで播種し、播種の4時間後にIgG1-AXL-107-vcMMAEを添加した。IgG1-AXL-107-vcMMAEの連続希釈物(10倍;最終濃度0.0001〜10μg/mLの範囲)を培地中に調製して、プレートに添加した。37℃、5%CO2での5日間のインキュベーション後に、CellTiter-Glo試薬(Promega社; カタログ番号G7571)をウェルに加え、発光細胞生存率アッセイ(Promega社, Madison, WI)をメーカーのプロトコルに従って行った。発光(ルミネセンス)をInfinite M200マイクロプレートリーダー(Tecan社)で測定し、生存率を次のように算出した:生存率%=(対象サンプルのルミネセンス-PAOのルミネセンス)/(処理された対照ビヒクルの平均ルミネセンス-PAOのルミネセンス)、ここでPAOは100%細胞死滅のための5μMフェニルアルシンオキシドによる処置を表す。
Axl発現は、ウェスタンブロッティングまたはフローサイトメトリーで測定したとき、3つのうち2つのNRAS変異型細胞株に認められた(表19)。興味深いことに、第4の細胞株(SKMEL2R)は、インビトロでMEK阻害剤トラメチニブに連続曝露することによってSKMEL2細胞株に由来したものであった。トラメチニブ耐性を獲得したSKMEL2R細胞株は強いAxl発現を示したが、トラメチニブに感受性であった親SKMEL2細胞は細胞表面上に検出可能なレベルのAxlを発現しなかった(表19)。図30は、IgG1-AXL-107-vcMMAEがAxl発現の高いメラノーマ細胞株SKMEL2R、FM6およびBLMを特異的に死滅させたが、Axl発現を欠くSKMEL2細胞はIgG1-AXL-107-vcMMAEによる処置に感受性でなかったことを示している。
使用略語:FACS,蛍光活性化セルソーティング;ABC,抗体結合能;BLQ,定量下限値未満(<3300,キャリブレーションビーズの最低ABC値);wt,野生型;n.a.,評価せず
a感受性のない細胞株は3μMのPLX4720または0.1μMのトラメチニブの濃度で有意な細胞死を示さない。
b感受性のない細胞株は、1μg/mLのIgG1-AXL-107-vcMMAE濃度で、有意な細胞死またはIgG1-b12-vcMMAEに匹敵する細胞死を示さない。
免疫組織化学
Axlの発現は、NRAS変異を含む進行期悪性メラノーマ患者(n=10)から得られた新鮮なホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)全組織切片において評価した。染色はSequenzaスライドラック(Ted Pella社, Redding, CA, 米国; カタログ番号36105)で手作業により行った。
Hスコア=(1+細胞の%×1)+(2+細胞の%×2)+(3+細胞の%×3)
Axl発現は、少なくとも腫瘍細胞のサブセットにおいて、進行期NRAS変異型メラノーマ組織の9/10に検出された(表20;図31)。Axl陽性腫瘍細胞の染色強度および割合は、患者間で異なっていた。
Claims (88)
- MAPキナーゼ(MAPK)経路の1種以上の阻害剤と組み合わせて対象におけるメラノーマの治療に使用するための、ヒトAXLに結合する抗体を含む抗体-薬物コンジュゲート(ADC)。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、B-RAF(BRAF)阻害剤、MEK阻害剤、ERK阻害剤、またはそれらのうちのいずれか2つ以上の組み合わせを含む、請求項1記載の使用のためのADC。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、セリン/トレオニンキナーゼ阻害剤、チロシンキナーゼ阻害剤、または両方を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、BRAF阻害剤を含むか、またはBRAF阻害剤からなる、請求項1〜3のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF阻害剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ、ソラフェニブ、PLX4720、GDC-0879、RAF265、SB590885、AZ628、AB-024、TAK-580、BAL-3833、BGB-283、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択され、任意で、前記メラノーマがBRAFに変異を示し、該変異が該BRAF阻害剤による変異型BRAFのキナーゼ活性の阻害をもたらす、請求項4記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF阻害剤が、ベムラフェニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項5記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF阻害剤が、ダブラフェニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項5記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF阻害剤が、エンコラフェニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項5記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF阻害剤が、ソラフェニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項5記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマがBRAFに変異を示す、請求項5〜9のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記変異がV600、L597およびK601から選択されるBRAF残基にあり、例えばV600にある、請求項10記載の使用のためのADC。
- BRAFにおける前記変異がV600E、V600K、V600D、L597RおよびK601Eから選択され、例えばV600Eである、請求項11記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、残基Q61、G12およびG13から選択されるNRASにおける変異を示さない、請求項5〜12のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、NRASにおける活性化変異を示さない、請求項13記載の使用のためのADC。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、MEK阻害剤を含むか、またはMEK阻害剤からなる、請求項1〜3のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、レファメチニブ、ピマセルチブ、U0126-EtOH、PD184352、BIX 02189、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択される、請求項15記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、トラメチニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項16記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、コビメチニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項16記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、ビニメチニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項16記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、セルメチニブまたはその治療上有効な類似体もしくは誘導体である、請求項16記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、NRASに変異を示し、例えばQ61、G12およびG13から選択されるNRAS残基に、例えばQ61に、変異を示す、請求項15〜20のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記NRASにおける変異が、Q61R、Q61K、Q61L、G12D、G12S、G12C、G12V、G13DおよびG13Rから選択される、請求項21記載の使用のためのADC。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、ERK阻害剤を含むか、またはERK阻害剤からなる、請求項1〜3のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記ERK阻害剤が、LTT-462、ウリキセルチニブ、SCH772984、VTX11E、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択される、請求項23記載の使用のためのADC。
- BRAF阻害剤およびMEK阻害剤との組み合わせでの、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- (a) 前記BRAF阻害剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ、ソラフェニブ、GDC-0879、RAF265、SB590885、AZ628、AB-024、TAK-580、BAL-3833、BGB-283、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択され;かつ/または
(b) 前記MEK阻害剤が、トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、レファメチニブ、ピマセルチブ、U0126-EtOH、PD184352、BIX 02189、またはそれらの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択される
請求項25記載の使用のためのADC。 - 任意で、前記メラノーマが、前記BRAF阻害剤による変異型BRAFのキナーゼ活性の阻害をもたらすBRAF変異を示す、
(a) ベムラフェニブおよびトラメチニブ;
(b) ベムラフェニブおよびコビメチニブ;
(c) ベムラフェニブおよびビニメチニブ;
(d) ベムラフェニブおよびセルメチニブ;
(e) ダブラフェニブおよびトラメチニブ;
(f) ダブラフェニブおよびコビメチニブ;
(g) ダブラフェニブおよびビニメチニブ;
(h) ダブラフェニブおよびセルメチニブ;
(i) エンコラフェニブおよびトラメチニブ;
(j) エンコラフェニブおよびコビメチニブ;
(k) エンコラフェニブおよびビニメチニブ;
(l) エンコラフェニブおよびセルメチニブ;
(m) ソラフェニブおよびトラメチニブ;
(n) ソラフェニブおよびコビメチニブ;
(o) ソラフェニブおよびビニメチニブ;または
(p) ソラフェニブおよびセルメチニブ
との組み合わせでの、請求項25および26のいずれか一項記載の使用のためのADC。 - ベムラフェニブおよびトラメチニブとの組み合わせでの、請求項27記載の使用のためのADC。
- ダブラフェニブおよびトラメチニブとの組み合わせでの、請求項27記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF変異が、V600、L597およびK601から選択されるBRAF残基にあり、例えばV600にある、請求項26〜28のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記BRAF変異が、V600E、V600K、V600D、L597RおよびK601Eから選択され、例えばV600Eである、請求項30記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、Q61、G12およびG13から選択される残基にNRAS変異を示さない、請求項26〜28のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが活性化NRAS変異を示さない、請求項32記載の使用のためのADC。
- 前記ADCおよび前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、同時に、別々に、または逐次的に投与される、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記少なくとも1種の阻害剤で以前に治療されたことがない、請求項34記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記MAPK経路の1種以上の阻害剤による治療を受けている、請求項1〜34のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記MAPK経路の1種以上の阻害剤で以前に治療されたことがある、請求項1〜34のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記MAPK経路の1種以上の阻害剤に耐性である、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記MAPK経路の1種以上の阻害剤に対して内因性耐性を有する、請求項38記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、前記MAPK経路の1種以上の阻害剤に対して獲得耐性を有する、請求項38記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが再発したメラノーマである、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブおよびソラフェニブのうちの少なくとも1つに耐性である、請求項38〜41のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブおよびセルメチニブのうちの少なくとも1つに耐性である、請求項38〜41のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが前記1種以上の阻害剤に対して耐性でない、請求項1〜37のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 1週間に1回、2週間に1回、3週間に1回、または4週間にわたって3回投与される、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 0.02〜30mg/kg、例えば約0.05〜10mg/kgの用量で投与される、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体に連結された細胞傷害性物質、化学療法剤、または放射性同位体を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 治療部分が、任意でリンカーを用いて前記ADCに連結された、細胞傷害性物質である、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記リンカーがmc-vc-PABであり、前記細胞傷害性物質がMMAEである、請求項48記載の使用のためのADC。
- 前記抗体が、ヒトAXLへの結合についてGrowth Arrest-Specific 6(Gas6)と競合しない、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- ヒトAXLに結合する前記抗体とGas6との間の競合をGas6と共におよびGas6なしでプレインキュベートされたA431細胞で測定する競合アッセイによって測定した場合に、Gas6の存在下でのヒトAXLへの最大抗体結合が、Gas6の非存在下での結合の少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%、例えば100%である、請求項50記載の使用のためのADC。
- 以下からなる群より選択されるVH領域およびVL領域を含む少なくとも1つの結合領域を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC:
(a) それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107];
(b) それぞれSEQ ID No:46、47および48のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:49、AAS、およびSEQ ID No:50のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [148];
(c) それぞれSEQ ID No:114、115および116のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:117、DAS、およびSEQ ID No:118のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [733];
(d) それぞれSEQ ID No:51、52および53のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:55、GAS、およびSEQ ID No:SEQ ID No:56のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [154];
(e) それぞれSEQ ID No:51、52および54のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:55、GAS、およびSEQ ID No:56のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [154-M103L];
(f) それぞれSEQ ID No:57、58および59のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:60、GAS、およびSEQ ID No:61のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [171];
(g) それぞれSEQ ID No:62、63および64のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:65、GAS、およびSEQ ID No:66のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [172];
(h) それぞれSEQ ID No:67、68および69のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:70、GAS、およびSEQ ID No:71のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [181];
(i) それぞれSEQ ID No:72、73および75のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:76、ATS、およびSEQ ID No:77のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [183];
(j) それぞれSEQ ID No:72、74および75のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:76、ATS、およびSEQ ID No:77のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [183-N52Q];
(k) それぞれSEQ ID No:78、79および80のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:81、AAS、およびSEQ ID No:82のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [187];
(l) それぞれSEQ ID No:83、84および85のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:86、GAS、およびSEQ ID No:87のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [608-01];
(m) それぞれSEQ ID No:88、89および90のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:91、GAS、およびSEQ ID No:92のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [610-01];
(n) それぞれSEQ ID No:93、94および95のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:96、GAS、およびSEQ ID No:97のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [613];
(o) それぞれSEQ ID No:98、99および100のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:101、DAS、およびSEQ ID No:102のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [613-08];
(p) それぞれSEQ ID No:103、104および105のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:106、GAS、およびSEQ ID No:107のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [620-06];
(q) それぞれSEQ ID No:108、109および110のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [726];
(r) それぞれSEQ ID No:108、109および111のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [726-M101L];
(s) それぞれSEQ ID No:41、42および43のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:44、AAS、およびSEQ ID No:45のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [140];
(t) それぞれSEQ ID No:93、94および95のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:128、XAS(配列中、XはDまたはG)、およびSEQ ID No:129のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [613/613-08];
(u) それぞれSEQ ID No:46、119および120のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:49、AAS、およびSEQ ID No:50のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [148/140];
(v) それぞれSEQ ID No:123、124および125のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:60、GAS、およびSEQ ID No:61のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [171/172/181];
(w) それぞれSEQ ID No:121、109および122のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:112、AAS、およびSEQ ID No:113のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [726/187];ならびに
(x) それぞれSEQ ID No:93、126および127のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:96、GAS、およびSEQ ID No:97のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [613/608-01/610-01/620-06]。 - 以下を含む少なくとも1つの結合領域を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC:
(a) それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域、ならびに
(b) それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107]。 - 前記抗体が、以下からなる群より選択されるVH領域およびVL領域を含む少なくとも1つの結合領域を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC:
(a) SEQ ID No: 1と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No: 2と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [107];
(b) SEQ ID No: 5と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No: 6と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [148];
(c) SEQ ID No:34と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:35と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [733];
(d) SEQ ID No: 7と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No: 9と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [154];
(e) SEQ ID No:10と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:11と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [171];
(f) SEQ ID No:16と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:18と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [183];
(g) SEQ ID No:25と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:26と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [613];
(h) SEQ ID No:31と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:33と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [726];
(i) SEQ ID No: 3と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No: 4と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [140];
(j) SEQ ID No: 8と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No: 9と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [154-M103L];
(k) SEQ ID No:12と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:13と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [172];
(l) SEQ ID No:14と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:15と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [181];
(m) SEQ ID No:17と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:18と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [183-N52Q];
(n) SEQ ID No:19と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:20と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [187];
(o) SEQ ID No:21と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:22と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [608-01];
(p) SEQ ID No:23と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:24と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [610-01];
(q) SEQ ID No:27と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:28と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [613-08];
(r) SEQ ID No:29と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:30と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [620-06];ならびに
(s) SEQ ID No:32と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVH領域、およびSEQ ID No:33と少なくとも90%、例えば少なくとも95%、例えば少なくとも97%、例えば少なくとも99%同一であるVL領域 [726-M101L]。 - 前記少なくとも1つの結合領域が、以下からなる群より選択されるVH領域およびVL領域を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC:
(a) SEQ ID No: 1を含むVH領域およびSEQ ID No: 2を含むVL領域 [107];
(b) SEQ ID No: 5を含むVH領域およびSEQ ID No: 6を含むVL領域 [148];
(c) SEQ ID No:34を含むVH領域およびSEQ ID No:35を含むVL領域 [733];
(d) SEQ ID No: 7を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域 [154];
(e) SEQ ID No:10を含むVH領域およびSEQ ID No:11を含むVL領域 [171];
(f) SEQ ID No:16を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域 [183];
(g) SEQ ID No:25を含むVH領域およびSEQ ID No:26を含むVL領域 [613];
(h) SEQ ID No:31を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域 [726];
(i) SEQ ID No: 3を含むVH領域およびSEQ ID No: 4を含むVL領域 [140];
(j) SEQ ID No: 8を含むVH領域およびSEQ ID No: 9を含むVL領域 [154-M103L];
(k) SEQ ID No:12を含むVH領域およびSEQ ID No:13を含むVL領域 [172];
(l) SEQ ID No:14を含むVH領域およびSEQ ID No:15を含むVL領域 [181];
(m) SEQ ID No:17を含むVH領域およびSEQ ID No:18を含むVL領域 [183-N52Q];
(n) SEQ ID No:19を含むVH領域およびSEQ ID No:20を含むVL領域 [187];
(o) SEQ ID No:21を含むVH領域およびSEQ ID No:22を含むVL領域 [608-01];
(p) SEQ ID No:23を含むVH領域およびSEQ ID No:24を含むVL領域 [610-01];
(q) SEQ ID No:27を含むVH領域およびSEQ ID No:28を含むVL領域 [613-08];
(r) SEQ ID No:29を含むVH領域およびSEQ ID No:30を含むVL領域 [620-06];ならびに
(s) SEQ ID No:32を含むVH領域およびSEQ ID No:33を含むVL領域 [726-M101L]。 - 前記少なくとも1つの結合領域が、SEQ ID No: 1を含むVH領域およびSEQ ID No: 2を含むVL領域 [107] を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体が、それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107] を含む少なくとも1つの結合領域を含み、
前記リンカーがmc-vc-PABであり、かつ
前記細胞傷害性物質がMMAEである、
前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。 - 前記抗体が、それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107] を含む少なくとも1つの結合領域を含み、
前記リンカーがSSPであり、かつ
前記細胞傷害性物質がDM1である、
請求項1〜56のいずれか一項記載の使用のためのADC。 - 前記抗体がAXL上のエピトープに結合し、該エピトープが、請求項55において定義される抗体のうちのいずれかによって認識される、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体がAXLのIg1ドメイン内のエピトープに結合し、該エピトープが、ヒトAXLの位置L121〜Q129またはT112〜Q124に対応する1つまたは複数のアミノ酸を含むかまたは必要とする、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体がAXLのIg2ドメイン内のエピトープに結合し、該エピトープが、ヒトAXLの位置D170またはD179の組み合わせに対応するアミノ酸、および位置T182〜R190に対応する1つまたは複数のアミノ酸を含むかまたは必要とする、請求項1〜55のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体がヒトAXLのFN1ドメイン内のエピトープに結合し、該エピトープが、ヒトAXLの位置Q272〜A287およびG297〜P301に対応する1つまたは複数のアミノ酸を含むかまたは必要とする、請求項1〜55のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体がヒトAXLのFN2ドメイン内のエピトープに結合し、該エピトープが、ヒトAXLの位置A359、R386に対応するアミノ酸、および位置Q436〜K439に対応する1つまたは複数のアミノ酸を含むかまたは必要とする、請求項1〜55のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体が、IgG1、IgG2、IgG3およびIgG4からなる群より選択されるアイソタイプの重鎖を含む、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記アイソタイプが、IgG1、任意でアロタイプIgG1m(f)である、請求項64記載の使用のためのADC。
- 完全長モノクローナル抗体、例えば完全長モノクローナルIgG1,κ抗体である、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記抗体が、薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物中に含まれる、前記請求項のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- BRAF阻害剤およびMEK阻害剤から選択される阻害剤と組み合わせて対象におけるメラノーマの治療に使用するための、ヒトAXLに結合する抗体を含むADCであって、
該ADCが、mc-vc-PABリンカーを介してMMAEに連結された、それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびにそれぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107] を含む少なくとも1つの結合領域を含む抗体を含み、
該AXL-ADCおよび該阻害剤が、同時に、別々に、または逐次的に投与される、
前記ADC。 - BRAF阻害剤およびMEK阻害剤と組み合わせて対象におけるメラノーマの治療に使用するための、ヒトAXLに結合する抗体を含むADCであって、
該ADCが、MMAEにmc-vc-PABリンカーを介して連結された、それぞれSEQ ID No:36、37および38のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVH領域;ならびに、それぞれSEQ ID No:39、GAS、およびSEQ ID No:40のCDR1、CDR2およびCDR3配列を含むVL領域 [107] を含む少なくとも1つの結合領域を含む抗体を含み、
該AXL-ADC、該BRAF阻害剤、および該MEK阻害剤が、同時に、別々に、または逐次的に投与される、
前記ADC。 - 前記BRAF阻害剤が、ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ、ソラフェニブ、およびそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体または誘導体からなる群より選択され、前記メラノーマが、V600、L597およびK601から選択されるBRAF残基に、例えばV600に、変異を示す、請求項68および69のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、V600E、V600K、V600D、L597RおよびK601Eから選択されるBRAFにおける変異、例えばV600E、を示す、請求項70記載の使用のためのADC。
- 前記MEK阻害剤が、トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、およびそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体または誘導体からなる群より選択される、請求項68〜71のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記組み合わせが、以下からなる群より選択されるBRAF阻害剤およびMEK阻害剤を含む、請求項69〜72のいずれか一項記載の使用のためのADC:
(a) ベムラフェニブおよびトラメチニブ;
(b) ベムラフェニブおよびコビメチニブ;
(c) ベムラフェニブおよびビニメチニブ;
(d) ベムラフェニブおよびセルメチニブ;
(e) ダブラフェニブおよびトラメチニブ;
(f) ダブラフェニブおよびコビメチニブ;
(g) ダブラフェニブおよびビニメチニブ;
(h) ダブラフェニブおよびセルメチニブ;
(i) エンコラフェニブおよびトラメチニブ;
(j) エンコラフェニブおよびコビメチニブ;
(k) エンコラフェニブおよびビニメチニブ;
(l) エンコラフェニブおよびセルメチニブ;
(m) ソラフェニブおよびトラメチニブ;
(n) ソラフェニブおよびコビメチニブ;
(o) ソラフェニブおよびビニメチニブ;ならびに
(p) ソラフェニブおよびセルメチニブ。 - ベムラフェニブおよびトラメチニブとの組み合わせでの、請求項73記載の使用のためのADC。
- ダブラフェニブおよびトラメチニブとの組み合わせでの、請求項73記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマが、Q61R、Q61K、Q61L、G12D、G12S、G12C、G12V、G13DおよびG13Rから選択されるNRASにおける変異を示さない、請求項68〜75のいずれか一項記載の使用のためのADC。
- 前記メラノーマがNRASにおける活性化変異を示さない、請求項76記載の使用のためのADC。
- (i)ヒトAXLに結合する抗体を含むADC、および(ii)MAPK経路の1種以上の阻害剤を含むキットであって、該ADCおよび該1種以上の阻害剤が同時に、別々に、または逐次的に投与されるためのものである、前記キット。
- 対象におけるメラノーマを治療する方法であって、該対象に、(i)ヒトAXLに結合する抗体を含むADC、および(ii)MAPK経路の1種以上の阻害剤を投与することを含み、該ADCおよび該1種以上の阻害剤が、治療に有効な量で同時に、別々に、または逐次的に投与される、前記方法。
- 前記MAPK経路の1種以上の阻害剤が、B-RAF(BRAF)阻害剤、MEK阻害剤、ERK阻害剤、またはそれらのうちのいずれか2つ以上の組み合わせを含むかまたはそれらからなる、請求項79記載の方法。
- 対象におけるメラノーマを治療する方法であって、該対象に、
- ヒトAXLに結合する抗体を含むADC;
- BRAF阻害剤;および
- MEK阻害剤
を投与することを含み、
該ADC、該BRAF阻害剤、および該MEK阻害剤が、治療に有効な量で同時に、別々に、または逐次的に投与される、
前記方法。 - 対象におけるメラノーマを治療する方法であって、該対象に、
- ヒトAXLに結合する抗体を含むADC;および
- ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ、ソラフェニブ、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択されるBRAF阻害剤
を投与することを含み、
該メラノーマが、該BRAF阻害剤による変異型BRAFのキナーゼ活性の阻害をもたらすBRAFにおける変異を示し、かつ
該ADCおよびBRAF阻害剤が、治療に有効な量で同時に、別々にまたは逐次的に投与される、
前記方法。 - 対象におけるメラノーマを治療する方法であって、該対象に、
- ヒトAXLに結合する抗体を含むADC;
- ベムラフェニブ、ダブラフェニブ、エンコラフェニブ、ソラフェニブ、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択されるBRAF阻害剤;および
- トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択されるMEK阻害剤
を投与することを含み、
該メラノーマが、該BRAF阻害剤による変異型BRAFのキナーゼ活性の阻害をもたらすBRAFにおける変異を示し、かつ
該ADC、該BRAF阻害剤、および該MEK阻害剤が、治療に有効な量で同時に、別々に、または逐次的に投与される、
前記方法。 - 前記変異が、V600、L597およびK601から選択されるBRAF残基にあり、例えば、V600E、V600K、V600D、L597RおよびK601Eから選択される変異、例えばV600Eである、請求項82および83のいずれか一項記載の方法。
- 対象におけるメラノーマを治療する方法であって、該対象に、
- ヒトAXLに結合する抗体を含むADC;および
- トラメチニブ、コビメチニブ、ビニメチニブ、セルメチニブ、またはそれらのうちのいずれかの治療上有効な類似体もしくは誘導体から選択されるMEK阻害剤
を投与することを含み、
該ADCおよび該MEK阻害剤が、同時に、別々に、または逐次的に投与される、
前記方法。 - 前記メラノーマが、NRASに変異を示し、例えば、Q61、G12、およびG13から選択されるNRAS残基に変異を示し、例えば、Q61R、Q61K、Q61L、G12D、G12S、G12C、G12V、G13D、およびG13Rから選択されるNRASにおける変異を示す、請求項85記載の方法。
- 前記メラノーマが、前記AXL-ADCの投与前において、少なくとも1種のBRAF阻害剤、MEK阻害剤、または両方に耐性である、請求項79〜86のいずれか一項記載の方法。
- 請求項1〜77のいずれか一項記載の特徴をさらに含む、請求項78記載のキットまたは請求項79〜87のいずれか一項記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2021207104A JP2022037170A (ja) | 2016-01-13 | 2021-12-21 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662278283P | 2016-01-13 | 2016-01-13 | |
US62/278,283 | 2016-01-13 | ||
PCT/EP2016/066353 WO2017009258A1 (en) | 2015-07-10 | 2016-07-08 | Axl-specific antibody-drug conjugates for cancer treatment |
EPPCT/EP2016/066353 | 2016-07-08 | ||
PCT/EP2017/050718 WO2017121877A1 (en) | 2016-01-13 | 2017-01-13 | Axl-specific antibody-drug conjugates for cancer treatment |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021207104A Division JP2022037170A (ja) | 2016-01-13 | 2021-12-21 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019509257A true JP2019509257A (ja) | 2019-04-04 |
JP2019509257A5 JP2019509257A5 (ja) | 2020-02-20 |
Family
ID=57756861
Family Applications (5)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018500605A Active JP6892431B2 (ja) | 2015-07-10 | 2016-07-08 | 癌治療用のaxl特異的抗体−薬物コンジュゲート |
JP2018536482A Pending JP2019509257A (ja) | 2016-01-13 | 2017-01-13 | 癌治療用のaxl特異的抗体−薬物コンジュゲート |
JP2021088877A Active JP7428680B2 (ja) | 2015-07-10 | 2021-05-27 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
JP2021207104A Withdrawn JP2022037170A (ja) | 2016-01-13 | 2021-12-21 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
JP2024009200A Pending JP2024038480A (ja) | 2015-07-10 | 2024-01-25 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2018500605A Active JP6892431B2 (ja) | 2015-07-10 | 2016-07-08 | 癌治療用のaxl特異的抗体−薬物コンジュゲート |
Family Applications After (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2021088877A Active JP7428680B2 (ja) | 2015-07-10 | 2021-05-27 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
JP2021207104A Withdrawn JP2022037170A (ja) | 2016-01-13 | 2021-12-21 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
JP2024009200A Pending JP2024038480A (ja) | 2015-07-10 | 2024-01-25 | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US20180326084A1 (ja) |
EP (3) | EP3319993B1 (ja) |
JP (5) | JP6892431B2 (ja) |
KR (1) | KR20180033523A (ja) |
CN (3) | CN108368171A (ja) |
AU (3) | AU2016292762B2 (ja) |
CA (2) | CA2991805A1 (ja) |
CY (1) | CY1123983T1 (ja) |
DK (1) | DK3319993T3 (ja) |
EA (2) | EA201890272A1 (ja) |
ES (1) | ES2784685T3 (ja) |
HK (1) | HK1255412A1 (ja) |
HR (1) | HRP20200551T1 (ja) |
HU (1) | HUE049072T2 (ja) |
IL (2) | IL256790B (ja) |
LT (1) | LT3319993T (ja) |
ME (1) | ME03772B (ja) |
PL (1) | PL3319993T3 (ja) |
PT (1) | PT3319993T (ja) |
RS (1) | RS60141B1 (ja) |
SI (1) | SI3319993T1 (ja) |
WO (2) | WO2017009258A1 (ja) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PT3169706T (pt) | 2014-07-11 | 2020-03-13 | Genmab As | Anticorpos que se ligam a axl |
EP3319993B1 (en) * | 2015-07-10 | 2020-01-15 | Genmab A/S | Axl-specific antibody-drug conjugates for cancer treatment |
KR20220130249A (ko) | 2016-05-26 | 2022-09-26 | 리커리엄 아이피 홀딩스, 엘엘씨 | Egfr 억제제 화합물 |
WO2018007592A1 (en) | 2016-07-08 | 2018-01-11 | Genmab A/S | New dosage regimens for antibody drug conjugates based on anti-axl antibodies |
CA3049926A1 (en) | 2017-01-17 | 2018-07-26 | Heparegenix Gmbh | Protein kinase inhibitors for promoting liver regeneration or reducing or preventing hepatocyte death |
EP3679159A1 (en) | 2017-09-08 | 2020-07-15 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Diagnostic and therapeutic methods for cancer |
AU2018333290A1 (en) * | 2017-09-13 | 2020-04-16 | National Research Council Of Canada | AXL-specific antibodies and uses thereof |
MA52657A (fr) * | 2018-04-10 | 2021-02-17 | Genmab As | Anticorps spécifiques d'axl pour le traitement du cancer |
CN110483639A (zh) * | 2018-05-15 | 2019-11-22 | 复旦大学 | 靶向axl的抗体及抗体-药物偶联物及其制备方法和用途 |
CN110540592B (zh) * | 2018-05-29 | 2022-08-09 | 杭州尚健生物技术有限公司 | 结合axl蛋白的抗体及其应用 |
JP2022502411A (ja) * | 2018-09-26 | 2022-01-11 | ゲンマブ エー/エス | 非小細胞肺がんの処置のためのaxl特異的抗体 |
BR112021018611A2 (pt) * | 2019-03-20 | 2021-11-23 | Imcheck Therapeutics Sas | Anticorpos tendo especificidade para btn2 e usos dos mesmos |
US20220177593A1 (en) * | 2019-03-29 | 2022-06-09 | Celldex Therapeutics, Inc. | Anti-axl antibodies and methods of use thereof |
WO2021154156A1 (en) * | 2020-01-31 | 2021-08-05 | Agency For Science, Technology And Research | Anti-axl antibody and uses thereof |
MX2022010670A (es) | 2020-02-28 | 2022-09-23 | Servier Lab | Anticuerpos anti-axl y composiciones. |
EP4149472A1 (en) * | 2020-05-12 | 2023-03-22 | Novartis AG | Therapeutic combinations comprising a craf inhibitor |
WO2022026807A2 (en) * | 2020-07-30 | 2022-02-03 | Albert Einstein College Of Medicine | Antibodies targeting sars-cov-2 and uses thereof |
KR20230107606A (ko) * | 2020-11-06 | 2023-07-17 | 데이 원 바이오파마슈티칼즈, 인크. | 저등급 신경교종 치료를 위한 raf 억제제 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014174111A1 (en) * | 2013-04-26 | 2014-10-30 | Pierre Fabre Medicament | Axl antibody-drug conjugate and its use for the treatment of cancer |
WO2015161230A1 (en) * | 2014-04-19 | 2015-10-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods of reducing kinase inhibitor resistance |
WO2015193430A1 (en) * | 2014-06-18 | 2015-12-23 | Bergenbio As | Anti-axl antibodies |
Family Cites Families (96)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US761218A (en) | 1899-10-05 | 1904-05-31 | U S Standard Voting Machine Co | Register or counter. |
US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
JPS5896026A (ja) | 1981-10-30 | 1983-06-07 | Nippon Chemiphar Co Ltd | 新規ウロキナ−ゼ誘導体およびその製造法ならびにそれを含有する血栓溶解剤 |
DE3380726D1 (en) | 1982-06-24 | 1989-11-23 | Japan Chem Res | Long-acting composition |
US4681581A (en) | 1983-12-05 | 1987-07-21 | Coates Fredrica V | Adjustable size diaper and folding method therefor |
US4766106A (en) | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
US5776093A (en) | 1985-07-05 | 1998-07-07 | Immunomedics, Inc. | Method for imaging and treating organs and tissues |
US5101827A (en) | 1985-07-05 | 1992-04-07 | Immunomedics, Inc. | Lymphographic and organ imaging method and kit |
US4735210A (en) | 1985-07-05 | 1988-04-05 | Immunomedics, Inc. | Lymphographic and organ imaging method and kit |
US5057313A (en) | 1986-02-25 | 1991-10-15 | The Center For Molecular Medicine And Immunology | Diagnostic and therapeutic antibody conjugates |
US5648471A (en) | 1987-12-03 | 1997-07-15 | Centocor, Inc. | One vial method for labeling antibodies with Technetium-99m |
GB8823869D0 (en) | 1988-10-12 | 1988-11-16 | Medical Res Council | Production of antibodies |
US5703055A (en) | 1989-03-21 | 1997-12-30 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery |
ATE172879T1 (de) | 1989-08-09 | 1998-11-15 | Rhomed Inc | Direkte radioetikettierung von antikörpern und sonstigen proteinen mittels technetium oder rhenium |
US5633425A (en) | 1990-08-29 | 1997-05-27 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5661016A (en) | 1990-08-29 | 1997-08-26 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
ES2246502T3 (es) | 1990-08-29 | 2006-02-16 | Genpharm International, Inc. | Animales no humanos transgenicos capaces de producir anticuerpos heterologos. |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5874299A (en) | 1990-08-29 | 1999-02-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5625126A (en) | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US6300129B1 (en) | 1990-08-29 | 2001-10-09 | Genpharm International | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5194594A (en) | 1990-09-07 | 1993-03-16 | Techniclone, Inc. | Modified antibodies |
WO1992022645A1 (en) | 1991-06-14 | 1992-12-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic immunodeficient non-human animals |
JPH06508880A (ja) | 1991-07-08 | 1994-10-06 | ユニバーシティ オブ マサチューセッツ アット アムハースト | サーモトロピック液晶セグメント化ブロックコポリマー |
US5635483A (en) | 1992-12-03 | 1997-06-03 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides |
US5780588A (en) | 1993-01-26 | 1998-07-14 | Arizona Board Of Regents | Elucidation and synthesis of selected pentapeptides |
AU6819494A (en) | 1993-04-26 | 1994-11-21 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
US6214345B1 (en) | 1993-05-14 | 2001-04-10 | Bristol-Myers Squibb Co. | Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates |
US6077835A (en) | 1994-03-23 | 2000-06-20 | Case Western Reserve University | Delivery of compacted nucleic acid to cells |
US5663149A (en) | 1994-12-13 | 1997-09-02 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Human cancer inhibitory pentapeptide heterocyclic and halophenyl amides |
KR970029803A (ko) | 1995-11-03 | 1997-06-26 | 김광호 | 반도체 메모리장치의 프리차지 회로 |
IL132560A0 (en) | 1997-05-02 | 2001-03-19 | Genentech Inc | A method for making multispecific antibodies having heteromultimeric and common components |
US6355271B1 (en) | 1999-02-03 | 2002-03-12 | Biosante Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic calcium phosphate particles and methods of manufacture and use |
US6281005B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-08-28 | Copernicus Therapeutics, Inc. | Automated nucleic acid compaction device |
IL147765A0 (en) | 1999-07-29 | 2002-08-14 | Medarex Inc | HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES TO HER2/neu |
DE10043437A1 (de) | 2000-09-04 | 2002-03-28 | Horst Lindhofer | Verwendung von trifunktionellen bispezifischen und trispezifischen Antikörpern zur Behandlung von malignem Aszites |
EP1243276A1 (en) | 2001-03-23 | 2002-09-25 | Franciscus Marinus Hendrikus De Groot | Elongated and multiple spacers containing activatible prodrugs |
EP1434778A4 (en) | 2001-05-31 | 2005-07-13 | Medarex Inc | CYTOTOXINS, PROMEDICAMENTS, BINDERS AND STABILIZERS USEFUL THEREFOR |
EP1523496B1 (en) | 2002-07-18 | 2011-06-29 | Merus B.V. | Recombinant production of mixtures of antibodies |
ATE516818T1 (de) | 2002-07-31 | 2011-08-15 | Seattle Genetics Inc | Auristatin-konjugate und ihre verwendung zur behandlung von krebs, einer autoimmunkranheit oder einer infektionskrankheit |
CA2506080A1 (en) | 2002-11-14 | 2004-05-27 | Syntarga B.V. | Prodrugs built as multiple self-elimination-release spacers |
BR122018071808B8 (pt) | 2003-11-06 | 2020-06-30 | Seattle Genetics Inc | conjugado |
US7741568B2 (en) | 2005-01-13 | 2010-06-22 | The Wiremold Company | Downward facing receptacle assembly for cable raceway |
KR101374454B1 (ko) | 2005-03-31 | 2014-03-17 | 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 | 회합제어에 의한 폴리펩티드 제조방법 |
JP2009509918A (ja) | 2005-08-05 | 2009-03-12 | シンタルガ・ビーブイ | トリアゾール含有放出可能なリンカー、これらの共役体、および製造方法 |
US7612181B2 (en) | 2005-08-19 | 2009-11-03 | Abbott Laboratories | Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof |
JP5525729B2 (ja) | 2005-11-28 | 2014-06-18 | ゲンマブ エー/エス | 組換え一価抗体およびその作製方法 |
EP1994000B1 (en) | 2006-02-02 | 2017-08-23 | Syntarga B.V. | Water-soluble cc-1065 analogs and their conjugates |
CN103073639A (zh) | 2006-03-17 | 2013-05-01 | 比奥根艾迪克Ma公司 | 稳定的多肽组合物 |
AU2007229698B9 (en) | 2006-03-24 | 2012-11-08 | Merck Patent Gmbh | Engineered heterodimeric protein domains |
AT503902B1 (de) | 2006-07-05 | 2008-06-15 | F Star Biotech Forsch & Entw | Verfahren zur manipulation von immunglobulinen |
EP2070956A1 (en) | 2007-12-14 | 2009-06-17 | Total Petrochemicals Research Feluy | Process for the production of a bimodal polypropylene having low ash content |
CN107226864A (zh) | 2007-06-21 | 2017-10-03 | 宏观基因有限公司 | 共价双抗体及其用途 |
EP2173739B1 (en) | 2007-08-01 | 2013-07-31 | Syntarga B.V. | Substituted cc-1065 analogs and their conjugates |
EP2050764A1 (en) | 2007-10-15 | 2009-04-22 | sanofi-aventis | Novel polyvalent bispecific antibody format and uses thereof |
CN101939336B (zh) * | 2007-11-12 | 2014-05-14 | U3制药有限公司 | Axl抗体 |
RU2559530C2 (ru) | 2007-11-15 | 2015-08-10 | Чугаи Сейяку Кабусики Кайся | Моноклональные антитела, способные связываться с белком axl, и их применение |
US20090162359A1 (en) | 2007-12-21 | 2009-06-25 | Christian Klein | Bivalent, bispecific antibodies |
US8227577B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-07-24 | Hoffman-La Roche Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
US8242247B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-08-14 | Hoffmann-La Roche Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
US9266967B2 (en) | 2007-12-21 | 2016-02-23 | Hoffmann-La Roche, Inc. | Bivalent, bispecific antibodies |
CA2709847C (en) | 2008-01-07 | 2018-07-10 | Amgen Inc. | Method for making antibody fc-heterodimeric molecules using electrostatic steering effects |
WO2010015792A1 (en) | 2008-08-06 | 2010-02-11 | Argenta Discovery Limited | Nitrogen containing heterocyclic compounds useful as bifunctional modulators of m3 receptors and beta-2 receptors |
JP5397668B2 (ja) | 2008-09-02 | 2014-01-22 | ソニー株式会社 | 記憶素子および記憶装置 |
HUE035798T2 (en) | 2008-11-03 | 2018-05-28 | Syntarga Bv | CC-1065 analogues and conjugates |
AU2009335798B2 (en) | 2008-12-19 | 2014-11-27 | Macrogenics, Inc. | Covalent diabodies and uses thereof |
JP2012525149A (ja) | 2009-04-27 | 2012-10-22 | オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | ヘテロ多量体分子を作製するための方法 |
TW201105348A (en) | 2009-05-11 | 2011-02-16 | U3 Pharma Gmbh | Humanized axl antibodies |
PE20120562A1 (es) | 2009-05-15 | 2012-06-06 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | Anticuerpo anti-axl |
CN102471378B (zh) | 2009-06-26 | 2014-04-02 | 瑞泽恩制药公司 | 容易地分离的具有天然免疫球蛋白形式的双特异性抗体 |
WO2011028952A1 (en) | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Xencor, Inc. | Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens |
AR080794A1 (es) | 2010-03-26 | 2012-05-09 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos bivalentes biespecificos anti- vegf/ anti-ang-2 |
NZ701825A (en) | 2010-04-20 | 2016-06-24 | Genmab As | Heterodimeric antibody fc-containing proteins and methods for production thereof |
CA2797981C (en) | 2010-05-14 | 2019-04-23 | Rinat Neuroscience Corporation | Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them |
EP2582729A4 (en) | 2010-06-18 | 2014-05-28 | Hoffmann La Roche | ANTI-AXL ANTIBODIES AND METHOD FOR THEIR USE |
ES2537207T3 (es) | 2010-08-16 | 2015-06-03 | Novimmune S.A. | Métodos para la generación de anticuerpos multiespecíficos y multivalentes |
WO2012025530A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Bispecific antibodies comprising a disulfide stabilized - fv fragment |
CA2807269A1 (en) | 2010-08-24 | 2012-03-01 | Roche Glycart Ag | Activatable bispecific antibodies |
DK2635607T3 (da) | 2010-11-05 | 2019-11-18 | Zymeworks Inc | Stabilt heterodimert antistofdesign med mutationer i fc-domænet |
CN102250246A (zh) | 2011-06-10 | 2011-11-23 | 常州亚当生物技术有限公司 | 抗VEGF/PDGFRβ双特异性抗体及其应用 |
US9249228B2 (en) * | 2011-06-22 | 2016-02-02 | Oribase Pharma | Anti-Axl antibodies and uses thereof |
JP6120833B2 (ja) * | 2011-06-22 | 2017-04-26 | インサーム(インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシェ メディカル)Inserm(Institut National Dela Sante Et De La Recherche Medicale) | 抗Axl抗体及びその使用 |
EP2589609A1 (en) | 2011-11-03 | 2013-05-08 | Pierre Fabre Medicament | Antigen binding protein and its use as addressing product for the treatment of cancer |
US9879061B2 (en) | 2011-12-15 | 2018-01-30 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Inhibition of AXL/GAS6 signaling in the treatment of liver fibrosis |
RS60499B1 (sr) | 2011-12-20 | 2020-08-31 | Medimmune Llc | Modifikovani polipeptidi za bispecifične skelete antitela |
SG10201607371UA (en) | 2012-04-20 | 2016-10-28 | Merus Nv | Methods and means for the production of ig-like molecules |
EP3925627A1 (en) | 2012-05-15 | 2021-12-22 | Concortis Biosystems, Corp | Drug-conjugates and uses thereof |
ES2871815T3 (es) * | 2012-11-05 | 2021-11-02 | Pf Medicament | Nuevas proteínas de unión a antígeno y su utilización como producto de direccionamiento para el tratamiento del cáncer |
WO2014093707A1 (en) | 2012-12-14 | 2014-06-19 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Inhibition of axl signaling in primary tumor therapy |
US20160097370A1 (en) * | 2013-03-26 | 2016-04-07 | James L. Rodgers | High-torque wind turbine |
PT3169706T (pt) * | 2014-07-11 | 2020-03-13 | Genmab As | Anticorpos que se ligam a axl |
EP3319993B1 (en) * | 2015-07-10 | 2020-01-15 | Genmab A/S | Axl-specific antibody-drug conjugates for cancer treatment |
-
2016
- 2016-07-08 EP EP16739079.8A patent/EP3319993B1/en active Active
- 2016-07-08 PL PL16739079T patent/PL3319993T3/pl unknown
- 2016-07-08 WO PCT/EP2016/066353 patent/WO2017009258A1/en active Application Filing
- 2016-07-08 AU AU2016292762A patent/AU2016292762B2/en active Active
- 2016-07-08 EP EP20151844.6A patent/EP3730520A1/en not_active Withdrawn
- 2016-07-08 ES ES16739079T patent/ES2784685T3/es active Active
- 2016-07-08 HU HUE16739079A patent/HUE049072T2/hu unknown
- 2016-07-08 DK DK16739079.8T patent/DK3319993T3/da active
- 2016-07-08 CA CA2991805A patent/CA2991805A1/en active Pending
- 2016-07-08 ME MEP-2020-74A patent/ME03772B/me unknown
- 2016-07-08 EA EA201890272A patent/EA201890272A1/ru unknown
- 2016-07-08 LT LTEP16739079.8T patent/LT3319993T/lt unknown
- 2016-07-08 RS RS20200419A patent/RS60141B1/sr unknown
- 2016-07-08 PT PT167390798T patent/PT3319993T/pt unknown
- 2016-07-08 US US15/742,818 patent/US20180326084A1/en not_active Abandoned
- 2016-07-08 SI SI201630699T patent/SI3319993T1/sl unknown
- 2016-07-08 CN CN201680052378.3A patent/CN108368171A/zh active Pending
- 2016-07-08 KR KR1020187004011A patent/KR20180033523A/ko not_active Application Discontinuation
- 2016-07-08 JP JP2018500605A patent/JP6892431B2/ja active Active
-
2017
- 2017-01-13 EA EA201891607A patent/EA201891607A1/ru unknown
- 2017-01-13 CN CN202310359872.6A patent/CN116617410A/zh active Pending
- 2017-01-13 JP JP2018536482A patent/JP2019509257A/ja active Pending
- 2017-01-13 AU AU2017206967A patent/AU2017206967B2/en active Active
- 2017-01-13 EP EP17701812.4A patent/EP3402822A1/en active Pending
- 2017-01-13 CN CN201780017252.7A patent/CN108884165A/zh active Pending
- 2017-01-13 US US16/069,395 patent/US20190022243A1/en not_active Abandoned
- 2017-01-13 CA CA3010887A patent/CA3010887A1/en active Pending
- 2017-01-13 WO PCT/EP2017/050718 patent/WO2017121877A1/en active Application Filing
-
2018
- 2018-01-08 IL IL256790A patent/IL256790B/en active IP Right Grant
- 2018-06-17 IL IL260065A patent/IL260065A/en unknown
- 2018-11-15 HK HK18114575.4A patent/HK1255412A1/zh unknown
-
2020
- 2020-04-04 HR HRP20200551TT patent/HRP20200551T1/hr unknown
- 2020-04-13 CY CY20201100339T patent/CY1123983T1/el unknown
- 2020-06-03 US US16/891,796 patent/US20200397913A1/en active Pending
-
2021
- 2021-05-27 JP JP2021088877A patent/JP7428680B2/ja active Active
- 2021-12-21 JP JP2021207104A patent/JP2022037170A/ja not_active Withdrawn
-
2022
- 2022-09-30 US US17/957,302 patent/US20230321261A1/en active Pending
- 2022-10-28 AU AU2022259847A patent/AU2022259847A1/en active Pending
-
2024
- 2024-01-25 JP JP2024009200A patent/JP2024038480A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2014174111A1 (en) * | 2013-04-26 | 2014-10-30 | Pierre Fabre Medicament | Axl antibody-drug conjugate and its use for the treatment of cancer |
WO2015161230A1 (en) * | 2014-04-19 | 2015-10-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods of reducing kinase inhibitor resistance |
WO2015193430A1 (en) * | 2014-06-18 | 2015-12-23 | Bergenbio As | Anti-axl antibodies |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ESTHER C.W. BREIJ, ET AL.: "Novel antibody-drug conjugates targeting Axl show anti-tumor activity in solid cancer xenograft mode", AMERICAN ASSOCIATION FOR CANCER RESEARCH, JPN6020027546, 18 April 2015 (2015-04-18), pages 1 - 2, XP055296816, ISSN: 0004575133, DOI: 10.1158/1538-7445.AM2015-634 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7428680B2 (ja) | 癌治療用のaxl特異的抗体-薬物コンジュゲート | |
US10500276B2 (en) | Antibodies binding AXL |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20180713 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200108 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20200108 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20201221 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20210219 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210621 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20210728 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20210823 |