JP2019504822A5 - - Google Patents
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Claims (19)
- CD40Lへの結合がCD40Lの活性を調節する、
CD40Lに特異的に結合する少なくとも1つの免疫グロブリン単一可変ドメイン(ISVD)を含み、および任意に血清アルブミンに結合するISVDおよび/またはC末端延長を含むポリペプチド。 - CD40Lに特異的に結合するISVDが、本質的に4つのフレームワーク領域(それぞれFR1からFR4)と3つの相補性決定領域(それぞれCDR1からCDR3)とからなり、
(i)CDR1が、
配列番号33、61、40、および68;ならびに
1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号33、61、40、または68に対して有するアミノ酸配列、
からなる群から選ばれ;
(ii)CDR2が、
配列番号35、63、42、および70;ならびに
1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号35、63、42、または70に対して有するアミノ酸配列、
からなる群から選ばれ;
(iii)CDR3が、
配列番号37、65、44、および72;ならびに
1、2、3、または4個のアミノ酸の違いを配列番号37、65、44、または72に対して有するアミノ酸配列、
からなる群から選ばれる、
請求項1に記載のポリペプチド。 - CDR1が、
(a)配列番号61、ならびに
(b)1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号61に対して有し、
− 位置1においてはGがEもしくはRに変化しており;
− 位置2においてはRがHもしくはGに変化しており;
− 位置3においてはTがI、A、S、もしくはPに変化しており;
− 位置4においてはPがSに変化しており;
− 位置5においてはLがPに変化しており;
− 位置6においてはNがS、D、もしくはIに変化しており;
− 位置7においてはYがHに変化しており;
− 位置8においてはHがNに変化しており;
− 位置9においてはMがK、T、もしくはVに変化しており;および/または
− 位置10においてはAがG、S、もしくはTに変化している、
アミノ酸配列、
および/または
CDR2が、
(a)配列番号63;ならびに
(b)1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号63に対して有し、
− 位置1においてはAがGに変化しており;
− 位置2においてはIがVに変化しており;
− 位置4においてはSがN、R、もしくはGに変化しており;
− 位置6においてはLがIに変化しており;
− 位置7においてはGがSもしくはDに変化しており;
− 位置8においてはSがG、I、もしくはFに変化しており;および/または
− 位置9においてはTがPもしくはSに変化している、
アミノ酸配列、
および/または
CDR3が、
(a)配列番号65;ならびに
(b)1、2、3、または4個のアミノ酸の違いを配列番号65に対して有し、
− 位置1においてはRがQもしくはLに変化しており;
− 位置2においてはEがDもしくはKに変化しており;
− 位置3においてはTがS、M、A、もしくはKに変化しており;
− 位置4においてはTがI、S、A、もしくはRに変化しており;
− 位置5においてはHがYもしくはNに変化しており;
− 位置6においてはYがI、H、もしくはNに変化しており;
− 位置7においてはSがT、G、N、もしくはIに変化しており;
− 位置8においてはTがIもしくはAに変化しており;
− 位置9においてはSがNもしくはRに変化しており;
− 位置10においてはDがAに変化しており;
− 位置11においてはRがSもしくはGに変化しており;
− 位置13においてはNがD、Y、もしくはSに変化しており;
− 位置14においてはEがV、A、D、もしくはNに変化しており;
− 位置15においてはMがI、V、K、もしくはTに変化しており;
− 位置16においてはRがK、S、W、M、G、もしくはTに変化しており;
− 位置17においてはHがN、L、Q、R、もしくはDに変化しており;
− 位置19においてはDがNに変化しており;および/または
− 位置20においてはYがH、F、もしくはNに変化している、
アミノ酸配列、
からなる群から選ばれる、
請求項2に記載のポリペプチド。 - CDR1が配列番号33であり、CDR2が配列番号35であり、CDR3が配列番号37であるか;または
CDR1が配列番号61であり、CDR2が配列番号63であり、CDR3が配列番号65である、
請求項2または3に記載のポリペプチド。 - ISVDが配列番号8または配列番号6である、
請求項2〜4のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - CDR1が、
(a)配列番号40;ならびに
(b)1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号40に対して有し、
− 位置3においてはTがS、N、A、もしくはIに変化しており;
− 位置4においてはLがQ、S、M、もしくはGに変化しており;
− 位置8においてはAがNもしくはVに変化しており;
− 位置9においてはIがLもしくはVに変化しており;および/または
− 位置10においてはGがAに変化している、
アミノ酸配列、
および/または
CDR2が、
配列番号42;ならびに
1、2、または3個のアミノ酸の違いを配列番号42に対して有し、
− 位置2においてはIがVに変化しており;
− 位置3においてはSがGに変化しており;
− 位置5においてはEがGに変化しており;
− 位置6においてはGがSに変化しており;
− 位置7においてはSがG、N、T、もしくはIに変化しており;
− 位置8においてはTがA、P、I、もしくはSに変化しており;および/または
− 位置9においてはSがI、R、もしくはGに変化している、
アミノ酸配列、
および/または
CDR3が、
(a)配列番号44;ならびに
(b)1、2、3、または4個のアミノ酸の違いを配列番号44に対して有し、
− 位置4においてはRがSに変化しており;
− 位置7においてはLがF、M、もしくはWに変化しており;
− 位置8においてはGがD、A、もしくはSに変化しており;
− 位置9においてはSがG、N、もしくはRに変化しており;
− 位置10においてはSがG、N、T、もしくはRに変化しており;
− 位置12においてはDがG、N、E、もしくはVに変化しており;
− 位置13においてはTがNもしくはAに変化しており;
− 位置14においてはQがH、K、L、もしくはRに変化しており;
− 位置15においてはSがPもしくはTに変化しており;
− 位置16においてはHがNもしくはYに変化しており;
− 位置17においてはQがL、R、もしくはHに変化しており;
− 位置18においてはYがFに変化しており;
− 位置19においてはDがGに変化しており;および/または
− 位置20においてはYがFもしくはNに変化している、
アミノ酸配列、
からなる群から選ばれる、
請求項2に記載のポリペプチド。 - CDR1が配列番号40であり、CDR2が配列番号42であり、CDR3が配列番号44であり、
好ましくは
ISVDが配列番号7または配列番号3である、
請求項2または6に記載のポリペプチド。 - ポリペプチドがCD40Lに結合し、1E−07Mおよび1E−13Mの間の、例えば1E−08Mおよび1E−12Mの間の、好ましくは多くても1E−07M、好ましくは1E−08Mもしくは1E−09Mよりも低い、またはさらには1E−10Mよりも低い、例えば5E−11M、4E−11M、3E−11M、2E−11M、1.7E−11M、1E−11、またはさらには5E−12M、4E−12M、3E−12M、1E−12MというKDを有し、例えばKinExAによって決定され、
1E−07Mおよび1E−12Mの間の、例えば1E−08Mおよび1E−11Mの間のIC50を有し、例えばB細胞増殖アッセイによって決定またはB細胞シグナル伝達アッセイによって決定され、
多くても1E−07M、好ましくは1E−08M、1E−09M、または5E−10M、4E−10M、3E−10M、2E−10M、例えば1E−10MというIC50を有し、
ポリペプチドがCD40Lに結合し、5E−04(s−1)未満のoff−rateを有し、例えばSPRによって決定される、
請求項1〜7のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - CD40Lが好ましくはヒトCD40L、好ましくは配列番号1である、
請求項1〜8のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - 活性の調節がCD40Lの活性に拮抗することであり、
少なくとも20%、例えば少なくとも30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%、またはさらにはより多くの、CD40へのCD40Lの結合をブロックすることであり、これが例えばリガンド競合、B細胞活性化アッセイ、AlphaScreen、または競合的結合アッセイ、例えば競合ELISAもしくは競合FACS)によって決定され、
CD80およびCD86などのT細胞共刺激分子ならびに/またはIL12などの免疫刺激性分子のCD40によって媒介される誘導に拮抗することであり、
例えばTT−IgGアッセイによって決定されるB細胞活性化を阻害することであり、 ジャーカットT細胞におけるJNKリン酸化を実質的に誘導しないことであり、
抗CD3抗体によって共刺激されたジャーカットT細胞によるIFNγ分泌を実質的に誘導しないことであり、
初代内皮細胞の活性化を実質的に誘導しないことであり、および/または
ポリペプチドが、例えば血小板活性化アッセイまたは血小板凝集アッセイによって決定される血小板活性化または血小板凝集を実質的に誘導しないことである、
請求項1〜9のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - 血清アルブミンに結合するISVDが、本質的に4つのフレームワーク領域(それぞれF1からFR4)と3つの相補性決定領域(それぞれCDR1からCDR3)とからなり、
CDR1が配列番号74であり、CDR2が配列番号75であり、CDR3が配列番号76であり、
好ましくは
血清アルブミンに結合するISVDが、ALB135(配列番号15)、ALB129(配列番号13)、ALB8(配列番号11)、ALB23(配列番号12)、およびALB132(配列番号14)からなる群から選ばれる、
請求項1〜10のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - C末端延長がC末端延長(X)nであり、式中、nが1から10、好ましくは1から5、例えば1、2、3、4、または5であり(好ましくは1または2、例えば1);各Xが独立して選ばれる(好ましくは天然に存在する)アミノ酸残基であり、好ましくは、アラニン(A)、グリシン(G)、バリン(V)、ロイシン(L)、またはイソロイシン(I)からなる群から独立して選ばれる、
請求項1〜11のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - ポリペプチドが、少なくとも80%、90%、95%、または100%の配列同一性をC010003318(配列番号9)またはC010003313(配列番号78)に対して有する、
請求項1〜12のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - 例えばCD40L/CD40によって媒介される経路の不適切な活性化が関わる個体の疾患または障害の処置、防止の方法であって、請求項1〜13のいずれか一項に記載のポリペプチドを、疾患または障害の症状を処置または防止するために有効な量で個体に投与することを含む、前記方法。
- 疾患または障害が、自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、ループス腎炎、免疫性血小板減少性紫斑病(ITP)、移植拒絶、クローン病、シェーグレン症候群、炎症性腸疾患(IBD)、大腸炎、喘息/アレルギー、動脈硬化症、重症筋無力症、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、強直性脊椎炎、冠動脈性心疾患、1型糖尿病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、および組換え医薬品、例えば血友病における第VII因子に対する免疫応答からなる群から選ばれる、
請求項14に記載の方法。 - 医薬としての使用のための、
請求項1〜13のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - 自己免疫疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、ループス腎炎、免疫性血小板減少性紫斑病(ITP)、移植拒絶、クローン病、シェーグレン症候群、炎症性腸疾患(IBD)、大腸炎、喘息/アレルギー、動脈硬化症、重症筋無力症、多発性硬化症、乾癬、関節リウマチ、強直性脊椎炎、冠動脈性心疾患、1型糖尿病、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、および/または組換え医薬品、例えば血友病における第VII因子に対する免疫応答の症状を処置または防止することへの使用のための、
請求項1〜13のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - ポリペプチドが、ポリペプチド46B03(配列番号6)、28B02(配列番号3)、C010003290(配列番号8)、およびC010003318(配列番号9)の少なくとも1つのCD40Lへの結合を交差ブロックし、ならびに/またはポリペプチド46B03(配列番号6)、28B02(配列番号3)、C010003290(配列番号8)、およびC010003318(配列番号9)の少なくとも1つによってCD40Lへの結合を交差ブロックされる、
請求項1〜13のいずれか一項に記載のポリペプチド。 - ポリペプチドが、CD40Lに特異的に結合する少なくとも1つのVH、VL、dAb、免疫グロブリン単一可変ドメイン(ISVD)を含み、
CD40Lへの結合がCD40Lの活性を調節する、
46B03(配列番号6)、28B02(配列番号3)、C010003290(配列番号8)、およびC010003318(配列番号9)の少なくとも1つによるCD40Lへの結合を交差ブロックし、ならびに/または46B03(配列番号6)、28B02(配列番号3)、C010003290(配列番号8)、およびC010003318(配列番号9)の少なくとも1つによってCD40Lへの結合を交差ブロックされる、ポリペプチド。
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