JP2018143180A - 細胞培養用袋状容器 - Google Patents
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Abstract
長期間の細胞培養でも、抗体タンパクの吸着性が抑制でき、細胞の増殖を阻害しない細胞接着性の低い表面性状を有し、冷蔵保存性、透明性、ヒートシール性、遮光性に優れた細胞培養用袋状容器を提供すること。
【解決手段】
内容物として細胞培養液を封入するための細胞培養用袋状容器であって、袋状容器内面の細胞培養液と接する表面が、撥水剤および熱可塑性樹脂を含んでなる撥水性材料からなり、撥水剤と熱可塑性樹脂との質量比が、撥水剤:熱可塑性樹脂=1:5〜1:1000の範囲内である細胞培養用袋状容器。
【選択図】なし
Description
また、特許文献3には、支持体上に含フッ素ポリマー等を含む表面層を有する細胞培養器材が開示されている。しかし、特許文献3に記載された技術は、専ら含フッ素ポリマー等を含む溶液をキャスト法等によってウェルプレート上に表面層を形成しているものであり、表面層を形成する際の残留有機溶剤が細胞の生存に悪影響を及ぼす懸念があるだけでなく、袋状容器として必要な酸素ガス透過性、冷蔵保存性、透明性、ヒートシール性といった細胞培養袋状容器に必要とされる特性が不十分であるという問題があった。
撥水剤は、本発明の課題を解決できるものであれば、特に制限はないが、表面層の撥水性を発現し易いフッ素樹脂および/またはシリコーン樹脂が好ましく、ポリテトラフルオロエチレン(PTFE)、ポリクロロトリフルオロエチレン(PCTFE)、ポリフッ化ビニリデン(PVDF)、ポリフッ化ビニル(PVF)、フッ素含有アクリル共重合体、ポリオルガノシロキサン基含有アクリル共重合体、シリコーンオイルがより好ましく、フッ素含有アクリル共重合体、ポリオルガノシロキサン基含有アクリル共重合体、シリコーンオイルが更に好ましい。
撥水剤は、数平均分子量が2000以上1000000万以下であることが好ましい。
また、撥水剤は、単独で用いても良いし、2種以上を組み合わせて用いても良い。
熱可塑性樹脂は、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリエチレンテレフレート、ポリオレフィン等の熱可塑性樹脂が挙げられるが、ポリオレフィン、ポリシクロオレフィン、エチレン−酢酸ビニル共重合体が好ましい。ポリオレフィンの具体例としては、低密度ポリエチレン(LDPE)、高密度ポリエチレン(HDPE)等のポリエチレン、ポリプロピレン(PP)、ポリ(4−メチルペンテン)等が挙げられる。ポリオレフィンの中でも、高圧重合法で製造される直鎖状低密度ポリエチレンが好ましく、具体例としては、東ソ―社製のポリエチレンのニポロン―Zグレード:TZ250B;日本ポリエチレン社製のUF420、UF421等が挙げられる。また、エチレン−酢酸ビニル共重合体としては、エチレン−酢酸ビニル共重合体およびエチレン−酢酸ビニル共重合体のケン化物が挙げられる。熱可塑性樹脂は、数平均分子量が2000以上1000000万以下であることが好ましい。また、熱可塑性樹脂は、単独で用いても良いし、2種以上を組み合わせて用いても良い。
本明細書でいう撥水性材料とは、撥水剤および熱可塑性樹脂を含んでなり、撥水剤と熱可塑性樹脂との質量比が、撥水剤:熱可塑性樹脂=1:5〜1:1000の範囲内であるものを指す。このような配合比率をとることによって、本発明が解決しようとする課題を解決できるものである。撥水性材料中の撥水剤と熱可塑性樹脂との質量比は、撥水剤:熱可塑性樹脂=1:5〜1:100が好ましく、1:10〜1:100が好ましい。撥水性材料の製造は、特に限定されるものではない。例えば、撥水剤と熱可塑性化樹脂とを混合し、ヘンシェルミキサーやタンブラー、ディスパー等で混合しニーダー,ロールミル,スーパーミキサー,ヘンシェルミキサー,シュギミキサー,バーティカルグラニュレーター,ハイスピードミキサー,ファーマトリックス,ボールミル,スチールミル,サンドミル,振動ミル,アトライター,バンバリーミキサーのような回分式混練機、二軸押出機、単軸押出機で混合や溶融混練し、ペレット状、粉体状、顆粒状あるいはビーズ状等の形状の撥水性材料を得ることができる。これらはしばしば、マスターバッチまたはコンパウンドと呼ばれる。本発明では、二軸押出機による溶融混錬して製造することが好ましい。
本発明の細胞培養用袋状容器中で細胞培養液と接する表面層は、上記撥水剤と熱可塑性樹脂とを含有する撥水性材料からなる層である。また、表面層の厚みは、特に制限はないが、概ね20〜200μmが好ましく、シート状であることが好ましい。表面層は、後述する基材層と同時に成形して作成しても良いし、別途作製した基材層と貼り合わせても良い。成形方法としては、カレンダー成形、インフレーション成形、Tダイフィルムによる成形、ブロー成形、ラミネート等が挙げられる。
基材層は、細胞培養用袋状容器を作成できるものであれば特に制限はなく、上述した表面層で使用される熱可塑性樹脂と同じものを使用することができる。特に、ポリオレフィン、ポリシクロオレフィン、エチレン−酢酸ビニル共重合体は、酸素透過性が優れているため、好ましく使用することができる。また、基材層の厚みは、特に制限はないが、概ね20〜200μmが好ましく、シート状であることが好ましい。基材層は、上述した表面層と同時に成形して作成しても良いし、別途作製した表面層と貼り合わせても良い。成形方法としては、表面層と同じ成形方法が挙げられる。
本発明の細胞培養用袋状容器は、上記シートを袋状にした容器であり、細胞液を導入、導出するポートをそれぞれ設けることが、取り扱いの上で好ましい。容器を構成するシートは、表面層のみからなる単層であってもよいし、基材層および表面層を含む二層以上を含む積層シートであってもよいが、酸素ガス透過性や強度面から、二層以上を含む積層シートであることが好ましい。シートの厚みは、10〜500μmが好ましいが、各層の厚みは、特に制限されるものではなく、用途に応じて適宜変更することができる。シートを袋状にして容器を作成する場合、ヒートシール法によりシートを熱融着して容器を作成することが好ましい。
(細胞)
上記製造方法によって得られた細胞培養用袋状容器を用いた細胞培養は、常法に従って実施できる。培養できる細胞は、臍帯血細胞、造血幹細胞、リンパ球細胞、ハイブリドーマなどの浮遊細胞、肝細胞などの臓器を形成する足場非依存性細胞等が挙げられる。
(培地)
用いることができる培地としては、当業者に良く知られた基礎培地を用いることができ、イーグルMEM培地、DMEM培地、RPMI1640 、HamF10培地、HamF12培地等が挙げられる。
撥水剤A1部と熱可塑性樹脂A1000部とをスーパーミキサー( カワタ社製)に投入し、25℃にて3分間撹拌して混合物を得た。次いで、この混合物を二軸押出し機(日本プラコン社製)に投入し、160℃で溶融混練して押し出し、ペレタイザーでカットすることで、コンパウンド状の撥水性材料を得た。次に、表面層となる材料として上記コンパウンド状の撥水性材料、基材層となる材料として熱可塑性樹脂Bを用い、160℃で水冷式共押出インフレーション成形機により、表面層と基材層とを有する筒状の積層シートを製造した。その際、表面層の厚さが50μm、基材層の厚さが50μmとなるような条件で成形した。この積層シートを10cm角に切断した。次いで、細胞懸濁液の流入ポートおよび流出ポートを設けた配置にして表面層が袋状容器の内側となるように2枚の積層シートを重ね合わせ、積層シートの縁部をヒートシール法により密着させて細胞培養袋状容器を作成した。
表面層および基材層を構成する撥水剤および熱可塑性樹脂の種類と配合、ならびに表面層および基材層の厚みが表2に示すように成形条件を変更した以外は、実施例1と同様にして、細胞培養袋状容器をそれぞれ作成した。尚、実施例4、9、13、18、22、27、31、36、40、45、49、54、58、63および比較例1は、コンパウンド状の撥水性材料のみ使用して作製した基材層を有さない単層シートの細胞培養袋状容器であるが、表2中では、便宜上、表面層として記載していることを断っておく。
上記で得られた細胞培養用袋状容器を、以下に示す評価方法に従い評価を行った。評価結果を表2〜4に示す。
評価項目1.<水との接触角>
上記シートの表面層における水との接触角を、JISK6788( ISO8296)の方法に基づいて測定した。
評価項目2.<有機溶剤残存量測定>
上記シート10cm角を測定用試料に用いて、ガスクロマトグラフGC−8A(島津製作所社製、FID検出器使用、キャリアーガス:窒素、カラム充填物質(ジーエルサイエンス社製):PEG−HT(5%)−UNIPORT HP(60/80メッシュ)、カラムサイズ:直径3mm×3m、試料投入温度(インジェクション温度):150℃、カラム温度:60℃、内部標準物質:n‐ブタノール)を用いて有機溶剤の残存量を求め、以下の基準で評価した。
○:有機溶剤の残存量が1ppm以下である。良好。
×:有機溶剤の残存量が1ppm以上である。不良。
上記シートについて、JISK7126−2(差圧法)に準じて23℃での酸素透過度(cc/m2・24hr・atm)を測定した。酸素透過度が大きいものほど良好であり、以下の基準で評価した。
評価基準:
◎:酸素透過度が20cc/m2・24hr・atm以上である。極めて良好。
○:酸素透過度が10cc/m2・24hr・atm以上、20cc/m2・24hr・atm未満である。良好。
△:酸素透過度が1cc/m2・24hr・atm以上、10cc/m2・24hr・atm未満である。使用可能。
×:酸素透過度が1cc/m2・24hr・atm未満である。不良。
上記シートについて、紫外分光光度計を用いて,450nmにおける光透過率を測定した。光透過率が高いほど透明性が良好であり、以下の基準で評価した。
◎:光透過率が95%以上である。極めて良好。
○:光透過率が90%以上、95%未満である。良好。
△:光透過率が85%以上、90%未満である。使用可能。
×:光透過率が85%以下。不良。
(試験条件)
プレート:96ウェルプレート
酵素、抗体:HPR-IgG(HORSERADIH PEROXIDASE IMMUNOGLOBULING)
染色液:TMBZ(3,3',5,5'-テトラメチルベンジジン)
反応停止液:StopSolution タカラバイオ社製 WASH and Stop Solution For ELISA With Solution for ELISA without Sulfuric Acid使用
測定機器:MITHRAS2 LD943−M2Mマイクロプレートリーダー
(手順)
1.細胞培養用袋試料を11mm角にカットし、PBSで10000倍希釈したHPR-IgG溶液1mlずつに浸漬させた。
2.室温で1時間インキュベートした。
3.PBS-T(0.1% Tween20)を用いて各ウェルを4回洗浄した。
4.TMBZ溶液を各ウェルに1mlずつ分注し、室温で10分間インキュベートする。
5.StopSolutionを各ウェルに1mlずつ分注後、450nm(副波長650nm)の吸光度Aλを測定した。吸光度Aλが小さいほど良好であり、以下の基準で評価した。
評価基準:
◎:吸光度Aλ≦0.2。極めて良好。
○:0.2<Aλ≦0.6。良好。
△:0.6<Aλ≦0.8。使用可能。
×:0.8<Aλ。不良。
ヒト白血病細胞株のMOLT−4細胞を懸濁した10%牛胎児血清を含んだRPMI1640培地(MOLT−4細胞株の播種濃度:1.0×105cells/ml)5mlをそれぞれ加え、37℃/5%二酸化炭素/99%RH(相対湿度)で14日間培養を行い、袋状容器から培養液の一部をサンプリングし、ヘモサイトメーターにより袋内の細胞濃度、細胞増殖倍率(評価結果を表3に示す)を算出した。細胞増殖倍率が大きいほど良好であり、以下の基準で評価した。
評価基準:
◎:細胞増殖倍率>30倍。極めて良好。
○:26倍≦細胞増殖倍率≦30倍。良好。
△:21倍<細胞増殖倍率≦26倍。使用可能。
×:細胞増殖倍率≦21倍。不良。
上記細胞培養袋状容器を5℃の冷蔵庫に移し、一年間保管した。下記に示す基準で細胞培養袋状容器の表面層の状態を視覚により判定した。ひび割れの大きさが小さく、ひび割れの数が少ないものほど良好であり、以下の基準で評価した。
評価基準:
◎:ひび割れがない。極めて良好。
○:長さ1mm未満の小さなひび割れが4箇所以下認められる。良好。
△:長さ1mm未満の小さなひび割れが5箇所以上10箇所以下認められる。使用可能。
×:長さ1mm未満の小さなひび割れが11箇所以上認められる。または長さ1mm以上の大きなひび割れが認められる。不良。
上記シートの表面層同士を接触させた状態で、140℃、0.4MPa、および1秒間の条件下でヒートシールを行い、試験片を作製した。この試験片を用いて「インストロン3345」(インストロン社製)にて、300mm/分の条件下にて、JIS K6854‐2に基づいて180°剥離試験を行った。得られた剥離力をヒートシール強度とした。ヒートシール強度が大きいものほど良好であり、以下の基準で評価した。
評価基準:
◎:ヒートシール強度>70N/25mm。極めて良好。
○:40N/25mm≦ヒートシール強度≦70N/25mm。良好。
△:25N/25mm<ヒートシール強度≦40N/25mm。使用可能。
×:ヒートシール強度≦25N/25mm。不良。
評価項目9.<遮光性>
D65標準光源の照射下で上記の細胞増殖倍率と同じ方法及び基準で評価を行った。
Claims (8)
- 内容物として細胞培養液を封入するための細胞培養用袋状容器であって、袋状容器内面の細胞培養液と接する表面が、撥水剤および熱可塑性樹脂を含んでなる撥水性材料からなり、撥水剤と熱可塑性樹脂との質量比が、撥水剤:熱可塑性樹脂=1:5〜1:1000の範囲内である細胞培養用袋状容器。(ただし、熱可塑性樹脂は撥水剤を除く。)
- 撥水剤が、ポリテトラフルオロエチレン、ポリクロロトリフルオロエチレン、ポリフッ化ビニリデン、ポリフッ化ビニル、フッ素含有アクリル共重合体、ポリオルガノシロキサン基含有アクリル共重合体およびシリコーンオイルからなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項1記載の細胞培養用袋状容器。
- 撥水剤が、フッ素含有アクリル共重合体、ポリオルガノシロキサン基含有アクリル共重合体およびシリコーンオイルからなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項2記載の細胞培養用袋状容器。
- 熱可塑性樹脂が、ポリオレフィン、ポリシクロオレフィンおよびエチレン−酢酸ビニル共重合体からなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項1〜3いずれか記載の細胞培養用袋状容器。
- 細胞培養用袋状容器が、少なくとも基材層および表面層を含む二層以上の積層からなり、表面層が、袋状容器内面に配置されており、表面層を構成する材料が、撥水性材料である請求項1〜4いずれか記載の細胞培養用袋状容器。
- 基材層が、ポリオレフィン、ポリシクロオレフィンおよびエチレン−酢酸ビニル共重合体からなる群より選ばれる少なくとも1種を含む層である請求項5記載の細胞培養用袋状容器。
- 請求項1〜6いずれか記載の細胞培養用袋状容器の製造方法であって、撥水剤および熱可塑性樹脂を含んでなる撥水性材料を溶融混練して成形する細胞培養用袋状容器の製造方法。
- 内容物として細胞培養液を封入する細胞培養用袋状容器を形成するため撥水性材料であって、袋状容器内面の細胞培養液と接する表面が、撥水剤および熱可塑性樹脂を含んでなる撥水性材料からなり、撥水剤と熱可塑性樹脂との質量比が、撥水剤:熱可塑性樹脂=1:5〜1:1000の範囲内である撥水性材料。(ただし、熱可塑性樹脂は撥水剤を除く。)
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CN113321835B (zh) * | 2021-05-21 | 2024-04-05 | 江苏康进医疗器材有限公司 | 一种用于细胞培养袋的薄膜、制备工艺及细胞培养袋 |
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Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63198972A (ja) * | 1988-02-17 | 1988-08-17 | Daikin Ind Ltd | 培養器 |
JPH0365177A (ja) * | 1989-08-01 | 1991-03-20 | Nissho Corp | 細胞培養用バッグ |
JPH07289235A (ja) * | 1994-04-21 | 1995-11-07 | Dainippon Printing Co Ltd | シート状培養用容器 |
JPH1128083A (ja) * | 1997-07-11 | 1999-02-02 | Menicon Co Ltd | 細胞培養用容器 |
JP2003079360A (ja) * | 2001-07-02 | 2003-03-18 | Yamanashi Tlo:Kk | 細胞の培養容器及び細胞の培養方法 |
JP2005218444A (ja) * | 2004-01-09 | 2005-08-18 | Nipro Corp | 細胞培養容器 |
WO2015163043A1 (ja) * | 2014-04-22 | 2015-10-29 | 株式会社日本触媒 | フッ素含有ポリマーを表面に含む細胞培養用基材 |
WO2016121994A1 (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | ダイキン工業株式会社 | 細胞培養器材 |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004085606A1 (ja) * | 2003-03-24 | 2004-10-07 | National Institute For Environmental Studies | 細胞培養基質および細胞接着蛋白質またはペプチドの固相化標品 |
US20060252096A1 (en) * | 2005-04-26 | 2006-11-09 | Glycofi, Inc. | Single chain antibody with cleavable linker |
EP1874916A2 (en) * | 2005-04-29 | 2008-01-09 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Multi-step process for the manufacture of therapeutic protein |
JP2008228585A (ja) * | 2007-03-16 | 2008-10-02 | Canon Inc | 細胞培養容器および細胞培養装置 |
WO2012032761A1 (ja) * | 2010-09-06 | 2012-03-15 | 東洋製罐株式会社 | 多層フィルム、及び細胞培養容器 |
WO2012133803A1 (ja) * | 2011-03-30 | 2012-10-04 | 独立行政法人 国立長寿医療研究センター | 膜分取培養器、膜分取培養キット、およびこれを用いた幹細胞分取方法、ならびに分離膜 |
JP2016146777A (ja) * | 2015-02-12 | 2016-08-18 | ダイキン工業株式会社 | 細胞培養用バッグ及びそれを用いた細胞培養方法 |
JP6594066B2 (ja) * | 2015-07-02 | 2019-10-23 | 富士フイルム株式会社 | 細胞培養容器、細胞培養装置および細胞培養方法 |
JP6766349B2 (ja) * | 2015-12-07 | 2020-10-14 | 東洋インキScホールディングス株式会社 | 細胞培養用部材 |
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Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS63198972A (ja) * | 1988-02-17 | 1988-08-17 | Daikin Ind Ltd | 培養器 |
JPH0365177A (ja) * | 1989-08-01 | 1991-03-20 | Nissho Corp | 細胞培養用バッグ |
JPH07289235A (ja) * | 1994-04-21 | 1995-11-07 | Dainippon Printing Co Ltd | シート状培養用容器 |
JPH1128083A (ja) * | 1997-07-11 | 1999-02-02 | Menicon Co Ltd | 細胞培養用容器 |
JP2003079360A (ja) * | 2001-07-02 | 2003-03-18 | Yamanashi Tlo:Kk | 細胞の培養容器及び細胞の培養方法 |
JP2005218444A (ja) * | 2004-01-09 | 2005-08-18 | Nipro Corp | 細胞培養容器 |
WO2015163043A1 (ja) * | 2014-04-22 | 2015-10-29 | 株式会社日本触媒 | フッ素含有ポリマーを表面に含む細胞培養用基材 |
WO2016121994A1 (ja) * | 2015-01-29 | 2016-08-04 | ダイキン工業株式会社 | 細胞培養器材 |
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