JP2016026303A5 - - Google Patents
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Claims (18)
- ａ．確立された細胞株由来の細胞を再標的化エンドペプチダーゼを含む試料を用いて処理すること、ここで該確立された細胞株由来の細胞は、再標的化エンドペプチダーゼによる再標的化エンドペプチダーゼ活性に感受性である；
ｂ．前記処理した細胞から、ＢｏＮＴ／Ａ（ボツリヌス血清型A）切断部位切断可能結合のＰ １ 残基にカルボキシル末端を有するＳＮＡＰ−２５（シナプトソーム結合蛋白質２５）開裂産物を単離すること；
ｃ．前記ＳＮＡＰ−２５開裂産物を、固相担体に結合させたα−ＳＮＡＰ−２５抗体に接触させること、ここで前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体はＳＮＡＰ−２５開裂産物由来のＢｏＮＴ／Ａ切断部位切断可能結合のＰ1残基にカルボキシル末端を含むエピトープに結合し、
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９ならびに配列番号：１０１の少なくとも１つのアミノ酸配列を含む相補性決定領域（CDR）を含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８ならびに配列番号：１１３の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む
ｄ．前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体、及び前記ＳＮＡＰ−２５開裂産物を含む抗体−抗原複合体の存在を検出すること、ここで該抗体−抗原複合体の検出が、再標的化エンドペプチダーゼの活性を示す、
を含む、再標的化エンドペプチダーゼ活性を検出する方法。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９もしくは配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８もしくは配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０もしくは配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１もしくは配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列もしくは、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２もしくは配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１に記載の方法。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９ならびに配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８ならびに配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１に記載の方法。 - 前記ＳＮＡＰ−２５開裂産物がＳＮＡＰ−２５１９７である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
- 前記抗体−抗原複合体の存在がサンドイッチＥＬＩＳＡを用いて検出される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
- ＳＮＡＰ−２５開裂産物由来のＢｏＮＴ／Ａ切断部位切断可能結合のＰ 1 残基にカルボキシル末端を含むエピトープに結合するα−ＳＮＡＰ−２５抗体の、再標的化エンドペプチダーゼ活性を検出する為の細胞をベースとしたアッセイにおける使用であって、
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９ならびに配列番号：１０１の少なくとも１つのアミノ酸配列を含む相補性決定領域（CDR）を含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８ならびに配列番号：１１３の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
前記使用。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９もしくは配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８もしくは配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０もしくは配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１もしくは配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列もしくは、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２もしくは、配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項６に記載の使用。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９５、配列番号：９９ならびに配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８ならびに配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含み；又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項６に記載の使用。 - 前記ＳＮＡＰ−２５開裂産物がＳＮＡＰ−２５ １９７ である、請求項６〜８のいずれか１項に記載の使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９５、配列番号：９９もしくは配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８もしくは配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９５、配列番号：９９ならびに配列番号：１０１のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０３、配列番号：１０８ならびに配列番号：１１３のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９３、配列番号：９６もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０もしくは配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列もしくは配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２もしくは配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、請求項１〜９に記載の方法又は使用。
- ＳＮＡＰ−２５開裂産物由来のＢｏＮＴ／Ａ切断部位切断可能結合のＰ 1 残基にカルボキシル末端を含むエピトープに結合するα−ＳＮＡＰ−２５抗体であって、
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列の少なくとも１つを含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、前記抗体。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９３、配列番号：９６もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０もしくは配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７もしくは配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１もしくは配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列もしくは、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２もしくは配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１６に記載の抗体。 - 前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体が、配列番号：９３、配列番号：９６ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０５、配列番号：１１０ならびに配列番号：１１５のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９３、配列番号：９７ならびに配列番号：１００のアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０６、配列番号：１１１ならびに配列番号：１１６のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記α−ＳＮＡＰ−２５抗体は、配列番号：９４、配列番号：９８のアミノ酸配列ならびに、配列番号：１０２、配列番号：１３４及び配列番号：１３５から選択されるアミノ酸配列を含むCDRを含む重鎖可変領域及び配列番号：１０７、配列番号：１１２ならびに配列番号：１１７のアミノ酸配列を含むCDRを含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１６に記載の抗体。
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