JP2015513897A5 - - Google Patents
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Claims (29)
- a.少なくとも1つのオープンリーディングフレーム(ORF)と、
b.アルブミン遺伝子の3’UTR又はアルブミン遺伝子の3’UTRの変異体に由来する核酸配列を含む少なくとも1つの3’−非翻訳領域エレメント(3’UTRエレメント)と、
ヒストンステムループと、
を含むことを特徴とする人工核酸分子。 - オープンリーディングフレームが、特に、3’UTRエレメントがラットアルブミン遺伝子の3’UTRに由来する場合、ベータ−グロビンをコードしておらず、
オープンリーディングフレームが、特に、3’UTRエレメントがヒトアルブミン遺伝子の3’UTRに由来する場合、ヒト第IX因子をコードしていない請求項1に記載の人工核酸分子。 - 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、脊椎動物のアルブミン遺伝子の3’UTR又はその変異体、好ましくは、哺乳類のアルブミン遺伝子(例えば、マウスのアルブミン遺伝子)の3’UTR又はその変異体、より好ましくは、霊長類のアルブミン遺伝子(特に、ヒトのアルブミン遺伝子又はアヌビスヒヒ由来のアルブミン遺伝子)の3’UTR又はその変異体、更により好ましくはGenbankアクセッション番号NM_000477.5に係るヒトのアルブミン遺伝子の3’UTR又はその変異体に由来する核酸配列を含む請求項1から2のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、配列番号1、配列番号2、配列番号32、配列番号33、配列番号34、又は配列番号35に係る核酸配列に対して少なくとも約40%、好ましくは少なくとも約50%、好ましくは少なくとも約60%、好ましくは少なくとも約70%、より好ましくは少なくとも約80%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%、更により好ましくは少なくとも約99%の同一性を有する核酸配列を含むか又はからなる、或いは、少なくとも1つの3’UTRエレメントが、配列番号1、配列番号2、配列番号32、配列番号33、配列番号34、又は配列番号35に係る核酸配列に対して少なくとも約40%、好ましくは少なくとも約50%、好ましくは少なくとも約60%、好ましくは少なくとも約70%、より好ましくは少なくとも約80%、より好ましくは少なくとも約90%、更により好ましくは少なくとも約95%、更により好ましくは少なくとも約99%の同一性を有する核酸配列の断片を含むか又はからなる請求項1から3のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 断片が、少なくとも約50ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約75ヌクレオチド、より好ましくは少なくとも約100ヌクレオチド、更により好ましくは少なくとも約125ヌクレオチド、最も好ましくは少なくとも約150ヌクレオチドの長さを有する請求項4に記載の人工核酸分子。
- 少なくとも1つの3’UTRエレメントが、少なくとも約50ヌクレオチド、好ましくは少なくとも約75ヌクレオチド、より好ましくは少なくとも約100ヌクレオチド、更により好ましくは少なくとも約125ヌクレオチド、最も好ましくは少なくとも約150ヌクレオチドの長さを有する請求項1から5のいずれかに記載の人工核酸分子。
- c.ポリ(A)配列及びポリアデニル化シグナルの少なくともいずれか
を更に含む請求項1から6のいずれかに記載の人工核酸分子。 - ポリアデニル化シグナルが、3’UTRエレメント内に位置する請求項7に記載の人工核酸分子。
- ポリアデニル化シグナルが、コンセンサス配列NN(U/T)ANA(Nは、A又はUである)、好ましくは、AA(U/T)AAA又はA(U/T)(U/T)AAAを含む請求項7から8のいずれかに記載の人工核酸分子。
- ポリアデニル化シグナル、好ましくはコンセンサス配列NNUANAが、3’UTRの3’末端の約50ヌクレオチド未満上流に位置する請求項7から9のいずれかに記載の人工核酸分子。
- ポリ(A)配列が、約20アデニンヌクレオチド〜約300アデニンヌクレオチド、好ましくは約40アデニンヌクレオチド〜約200アデニンヌクレオチド、より好ましくは約50アデニンヌクレオチド〜約100アデニンヌクレオチド、更により好ましくは約60アデニンヌクレオチド〜約70アデニンヌクレオチドの長さを有する請求項7から10のいずれかに記載の人工核酸分子。
- オープンリーディングフレームが、アルブミン、好ましくはヒトアルブミンをコードしていない請求項1から11のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 5’−キャップ構造、ポリ(C)配列、及びIRESモチーフの少なくともいずれかを更に含む請求項1から12のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 核酸が、更なる5’−エレメント(好ましくは、5’UTR)、プロモーター、又は5’UTRとプロモーター含有配列とを含む請求項1から13のいずれかに記載の人工核酸分子。
- 人工核酸分子、好ましくはオープンリーディングフレームが、少なくとも部分的にG/C改変されており、好ましくは、前記オープンリーディングフレームのG/C含量が、野生型オープンリーディングフレームに比べて増加している請求項1から14のいずれかに記載の人工核酸分子。
- オープンリーディングフレームが、コドンが最適化されている領域を含み、好ましくは、前記オープンリーディングフレームのコドンが最適化されている請求項1から15のいずれかに記載の人工核酸分子。
- RNA分子、好ましくはmRNA分子である請求項1から16のいずれかに記載の人工核酸分子。
- a.オープンリーディングフレーム及びクローニングサイトの少なくともいずれかと、
b.アルブミン遺伝子の3’UTR又はアルブミン遺伝子の3’UTRの変異体に由来する核酸配列を含む少なくとも1つの3’−非翻訳領域エレメント(3’UTRエレメント)と、
ヒストンステムループと、
を含むことを特徴とするベクター。 - オープンリーディングフレームが、特に、3’UTRエレメントがラットアルブミン遺伝子の3’UTRに由来する場合、ベータ−グロビンをコードしておらず、
オープンリーディングフレームが、特に、3’UTRエレメントがヒトアルブミン遺伝子の3’UTRに由来する場合、ヒト第IX因子をコードしていない請求項18に記載のベクター。 - DNAベクターである請求項18から19のいずれかに記載のベクター。
- プラスミドベクター又はウイルスベクター、好ましくは、プラスミドベクターである請求項18から20のいずれかに記載のベクター。
- 請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子を含む請求項18から21のいずれかに記載のベクター。
- 環状分子である請求項18から22のいずれかに記載のベクター。
- 5’→3’方向において、コード鎖のポリ(A)配列又は3’UTRエレメントに続いて、環状ベクター分子を線形化するための制限酵素部位が配置されている請求項23に記載のベクター。
- 請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子又は請求項18から24のいずれかに記載のベクターを含み、好ましくは哺乳類細胞であることを特徴とする細胞。
- 請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子、請求項18から24のいずれかに記載のベクター、又は請求項25に記載の細胞を含むことを特徴とする医薬組成物。
- 1以上の薬学的に許容できる希釈剤、賦形剤、及び1以上のアジュバントの少なくともいずれかを更に含む請求項26に記載の医薬組成物。
- 医薬として使用するための請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子、請求項18から24のいずれかに記載のベクター、請求項25に記載の細胞、又は請求項26から27のいずれかに記載の医薬組成物。
- ワクチンとして又は遺伝子治療において使用するための請求項1から17のいずれかに記載の人工核酸分子、請求項18から24のいずれかに記載のベクター、請求項25に記載の細胞、又は請求項26から27のいずれかに記載の医薬組成物。
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