JP2015155811A - 自動電界免疫組織染色装置 - Google Patents
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Abstract
Description
前記試料載置ユニットに、他方の電極が配設されていることが好ましい。
前記他方の電極が、前後又は左右に搬送可能であることが好ましい。
前記他方の電極が、前記ステージの内部に配設されていることが好ましい。
前記収容部が、カセット体に備えられていることが好ましい。
前記一方の電極が、貫通穴を有していることが好ましい。
前記排出管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能であることが好ましい。
前記試料載置ユニットが搬送され、前記溶液供給ユニットの前記収容部の直下に前記組織標本が固定された基板が位置したときに、前記組織標本に対して前記溶液が滴下されることが好ましい。
前記試料載置ユニットが搬送され、前記電界撹拌ユニットの前記一方の電極の直下に前記組織標本が固定された基板が、前記溶液が滴下された上で位置したときに、前記組織標本に滴下された前記溶液に対して電界が与えられ、前記溶液が撹拌されて前記反応が進められることが好ましい。
前記反応が進められた前記組織標本に対し、前記洗浄ユニットの前記排出管により前記溶液が排出されることが好ましい。
前記洗浄ユニットが、前記基板上の前記組織標本へ向けて前記組織標本を洗浄する洗浄液を供給する供給管を備え、前記反応が進められた前記組織標本に対し、前記供給管により前記洗浄液が供給されることが好ましい。
前記供給管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能であることが好ましい。
前記基板に、区分される複数の領域が形成され、この領域毎に前記組織標本が載置可能であり、前記一方の電極及び前記他方の電極が、前記領域に対応させて複数設けられていることが好ましい。
前記基板に、前記抗原と前記抗体との抗原抗体反応が進行したかどうかの指標となる陽性コントロール又は陰性コントロールが固定されていることが好ましい。
特に、前記自動電界免疫組織染色方法において、前記抗原と前記一次抗体との抗原抗体反応の後に、前記第一の溶液を吸引して排出する工程を含むことが好ましい。
前記第一の溶液を吸引して排出した後に、前記組織標本へ向けて、前記一次抗体と反応する二次抗体を含む第二の溶液を滴下し、この第二の溶液に対して電界を与えて前記第二の溶液を撹拌し、前記一次抗体と前記二次抗体との抗原抗体反応を進める工程を含むことが好ましい。
前記一次抗体と前記二次抗体との抗原抗体反応の後に、前記第二の溶液を吸引して排出する工程を含むことが好ましい。
前記抗原と前記一次抗体との抗原抗体反応を進めることから前記第二の溶液を吸引して排出することまでを自動化することが好ましい。
また、前記一方の電極が、貫通穴を有し、前記供給管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能であることが好ましい。
前記基板に、区分される複数の領域が形成され、この領域毎に前記組織標本が載置可能であり、前記一方の電極及び前記他方の電極が、前記領域に対応させて複数設けられていることが好ましい。
前記基板に、前記抗原と前記抗体との抗原抗体反応が進行したかどうかの指標となる陽性コントロール又は陰性コントロールが固定されていることが好ましい。
なお、前記自動電界免疫組織染色方法は、前記一方の電極及び前記他方の電極の間に、前記組織標本が固定された基板を載置し、前記組織標本に対して電界を与え、前記抗原を賦活化する工程を備えるが好ましい。この場合、本発明において、抗原を賦活化することから第二の溶液を吸引して排出することまでを自動化することができる。
実施例1では、ポジティブコントロールに対して本発明に係る自動電界免疫組織染色装置を利用し、免疫組織染色を行った。その基本プロトコールは、上記[表1]のとおりである。実施例1における免疫組織染色の結果である顕微鏡写真を、図15(b)に示す。図15(a)には、比較例4として示したプロトコールにより免疫組織染色を行い、その結果である顕微鏡写真を示している。
実施例2では、リンパ節組織に対して本発明に係る自動電界免疫組織染色装置を利用し、免疫組織染色を行った。その基本プロトコールは、上記[表1]のとおりである。実施例2における免疫組織染色の結果である顕微鏡写真を、図16(b)に示す。図16(a)は、比較例5として行った免疫組織染色の例であり、その結果である顕微鏡写真を示している。比較例5では、上記[表1]の基本プロトコールにおいて、抗原抗体反応やPBSによる洗浄時に電界を付与せず、溶液や洗浄液を撹拌しないで免疫組織染色を進めた。
2・・・・試料載置ユニット
21・・・ステージ
21A・・載置部
22・・・下部電極(他方の電極)
23・・・ステージ搬送部
24・・・はっ水リング
24A・・2穴タイプのはっ水リング
24A1・タグ
3・・・・溶液供給ユニット
31・・・シリンジ
31A・・フランジ部
31B・・本体部
31C・・筒先部
32・・・カセット体
32A・・シリンダ収容部
33・・・プランジャロッド
34・・・ピストン
35・・・カセット搬送部
4・・・・電界撹拌ユニット
41・・・上部電極(一方の電極)
41A・・貫通穴
410・・電界集中型上部電極
42・・・上部電極搬送部
5・・・・洗浄ユニット
51・・・排出管
52・・・供給管
53・・・洗浄管搬送部
G・・・・ガラス基板
S・・・・一次抗体を含む溶液
T・・・・組織標本
NC・・・ネガティブコントロール
PC・・・ポジティブコントロール
Claims (25)
- 所定の抗体を用い、被験対象となる組織標本中の抗原を検出する免疫組織染色を構成する一連の反応が、電界付与に基づく撹拌現象によって迅速化され、かつ自動化される自動電界免疫組織染色装置であって、
前記組織標本が固定された基板が載置されるステージを有する試料載置ユニットと、
前記抗体を含んだ溶液が収容される収容部及び、前記収容部から前記溶液を前記基板上の前記組織標本へ向けて滴下する滴下部材を備える溶液供給ユニットと、
板状又は環状の一方の電極を備えた電界撹拌ユニットと、
前記基板上の前記組織標本へ向けて滴下された前記溶液を排出する排出管を備えた洗浄ユニットと、
を有することを特徴とする自動電界免疫組織染色装置。 - 前記試料載置ユニットが、前後又は左右に搬送可能である、
ことを特徴とする請求項1に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記試料載置ユニットに、他方の電極が配設されている、
ことを特徴とする請求項1に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記他方の電極が、前後又は左右に搬送可能である、
ことを特徴とする請求項3に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記他方の電極が、前記ステージの内部に配設されている、
ことを特徴とする請求項3に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記収容部が、カセット体に備えられている、
ことを特徴とする請求項1に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記一方の電極が、貫通穴を有している、
ことを特徴とする請求項1に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記排出管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能である、
ことを特徴とする請求項7に自動電界免疫組織染色装置。 - 前記試料載置ユニットが搬送され、前記溶液供給ユニットの前記収容部の直下に前記組織標本が固定された基板が位置したときに、前記組織標本に対して前記溶液が滴下される、
ことを特徴とする請求項2に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記試料載置ユニットが搬送され、前記電界撹拌ユニットの前記一方の電極の直下に、前記組織標本が固定された基板が、前記溶液が滴下された上で位置したときに、前記組織標本に滴下された前記溶液に対して電界が与えられ、前記溶液が撹拌されて前記反応が進められる、
ことを特徴とする請求項9に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記反応が進められた前記組織標本に対し、前記洗浄ユニットの前記排出管により前記溶液が排出される、
ことを特徴とする請求項10に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記洗浄ユニットが、前記基板上の前記組織標本へ向けて前記組織標本を洗浄する洗浄液を供給する供給管を備え、
前記反応が進められた前記組織標本に対し、前記供給管により前記洗浄液が供給される、
ことを特徴とする請求項11に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記供給管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能である、
ことを特徴とする請求項12に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記基板に、区分される複数の領域が形成され、この領域毎に前記組織標本が載置可能であり、
前記一方の電極が、前記領域に対応させて複数設けられている、
ことを特徴とする請求項1乃至請求項13に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記基板に、前記抗原と前記抗体との抗原抗体反応が進行したかどうかの指標となる陽性コントロール又は陰性コントロールが固定されている、
ことを特徴とする請求項1乃至請求項14の何れか1項に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 前記一方の電極に、前記貫通穴を中心点として対称に突部が形成されている、
ことを特徴とする請求項1乃至請求項15の何れか1項に記載の自動電界免疫組織染色装置。 - 請求項1に記載の自動電界免疫組織染色装置を用いて行われる自動電界免疫組織染色方法であって、
前記組織標本へ向けて、前記抗原と反応する一次抗体を含む第一の溶液を滴下し、この第一の溶液に対して電界を与えて前記第一の溶液を撹拌し、前記抗原と前記一次抗体との抗原抗体反応を進める工程を含む、
ことを特徴とする自動電界免疫組織染色方法。 - 前記抗原と前記一次抗体との抗原抗体反応の後に、前記第一の溶液を吸引して排出する工程を含む、
ことを特徴とする請求項17に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記第一の溶液を吸引して排出した後に、前記組織標本へ向けて、前記一次抗体と反応する二次抗体を含む第二の溶液を滴下し、この第二の溶液に対して電界を与えて前記第二の溶液を撹拌し、前記一次抗体と前記二次抗体との抗原抗体反応を進める工程を含む、
ことを特徴とする請求項18に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記一次抗体と前記二次抗体との抗原抗体反応の後に、前記第二の溶液を吸引して排出する工程を含む、
ことを特徴とする請求項19に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記抗原と前記一次抗体との抗原抗体反応を進めることから前記第二の溶液を吸引して排出することまでを自動化した、
ことを特徴とする請求項20に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記洗浄ユニットが、前記基板上の前記組織標本へ向けて前記組織標本を洗浄する洗浄液を供給する供給管を備え、
前記第一の溶液を吸引して排出した後であって、前記一次抗体と前記二次抗体との抗原抗体反応を進める前に、前記組織標本へ向けて前記供給管により前記洗浄液を供給し、この洗浄液に対して電界を与えて前記洗浄液を撹拌し、前記組織標本を洗浄し、
前記第二の溶液を吸引して排出した後に、前記組織標本へ向けて前記供給管により前記洗浄液を供給し、この洗浄液に対して電界を与えて前記洗浄液を撹拌し、前記組織標本を洗浄する、
ことを特徴とする請求項21に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記一方の電極が、貫通穴を有し、
前記供給管が、前記一方の電極の前記貫通穴に出し入れ可能である、
ことを特徴とする請求項22に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記基板に、区分される複数の領域が形成され、この領域毎に前記組織標本が載置可能であり、
前記一方の電極が、前記領域に対応させて複数設けられている、
ことを特徴とする請求項17乃至請求項23の何れか1項に記載の自動電界免疫組織染色方法。 - 前記基板に、前記抗原と前記抗体との抗原抗体反応が進行したかどうかの指標となる陽性コントロール又は陰性コントロールが固定されている、
ことを特徴とする請求項17乃至請求項24の何れか1項に記載の自動電界免疫組織染色方法。
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