JP6422068B1 - 反応デバイス、電界撹拌装置、及び検出方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、複数の微小容量容器2を有するマイクロプレート1と、前記微小容量容器2内の溶液6に変動電界を印加するために用いる電界撹拌用電極とを含む反応デバイスにおいて、
前記電界撹拌用電極は上部電極8と下部電極7とを有しており、前記下部電極7の上部に前記マイクロプレート1を載置し、前記マイクロプレート1を前記上部電極8によって上部から押さえ付けることができる構造を有する反応デバイスを提供する。
【選択図】図1
Description
さらに、本発明者らは、電界撹拌に適した複数の微小容量容器を有するマイクロプレートに関する発明を開発した。この発明は、従来の微小容量容器の構造では、液滴の分子が微小容量容器の側壁に引き付けられてメニスカスになってしまう割合が大きく、ドーム形状の液滴を形成することができないという欠点を克服するため、微小容量容器内の液滴が側壁と接することがないように底面に台座を設けたものであり、液滴を台座の高さを超えるまで注ぎ入れて、ドーム状の液滴を形成することにより、液滴に変動電界を印加して電界撹拌を行うことを可能としている。(特許文献2)
さらに、本発明者らは、電界撹拌を用いた迅速免疫染色法を自動で行う装置を開発している(特許文献4)。
本発明者らは、また、電界撹拌を用いて洗浄を行う方法(特許文献5)、電界撹拌用電極(特許文献6)、電界撹拌に用いる液滴形成用シャーレ(特許文献7)を開発している。
そこで、本発明は、マイクロプレートの歪みを無くし、複数の微小容量容器内の溶液に対して均一な変動電界を加えて、同一条件の電界撹拌を行うことを目的とする。
(1) 第1の発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートと、前記微小容量容器内の溶液に変動電界を印加するために用いる電界撹拌用電極とを含む反応デバイスに関するものであり、
前記電界撹拌用電極は上部電極と下部電極とを有しており、前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることができる構造を有することにより、
前記マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の前記溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことを特徴とする。
(2) 第1の発明の反応デバイスにおいては、前記微小容量容器は、底面と、前記底面の外周に位置する側壁とを有しており、
前記側壁よりも内周側の前記底面上に、囲み枠を有しており、
前記囲み枠の内周側に存在する前記底面は、吸光度の測定のため平面形状であることが好ましい。
(3) 前記(2)の反応デバイスにおいては、前記囲み枠の高さと、前記囲み枠の内周側に存在する底面の径との比が、1:2〜1:20であり、
前記底面と前記囲み枠とで形成される容器の容量が、10〜300μlであることが好ましい。
(4) 前記(2)又は(3)の反応デバイスにおいては、前記上部電極は、前記マイクロプレートの各微小容量容器の位置に対応する、複数の凸部を有しており、
前記複数の凸部が、前記側壁の内周側に挿入できる形状であることが好ましい。
(5) 前記(4)の反応デバイスにおいては、前記凸部が円柱形状であり、前記側壁の内周側が円筒形状であることが好ましい。
(6) 第2の発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートに変動電界を印加する電界撹拌装置に関するものであり、
上部電極及び下部電極と、
前記上部電極及び/又は下部電極に変動電圧を供給する電源装置と、
前記微小容量容器内の溶液の吸光度を測定する吸光光度計と
を有し、
前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることができる構造を有することにより、前記マイクロプレートの形状歪みを抑制することで、前記微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行い、
前記微小容量容器内の溶液の吸光度を測定することにより、
複数の被検試料について同時に検査を行うことができることを特徴とする。
(7) 第2の発明の電界撹拌装置においては、前記微小容量容器内への被検試料又は試薬の分注、前記微小容量容器内の溶液への変動電界の印加、前記微小容量容器内の洗浄、及び前記微小容量容器内の溶液の吸光度の測定を自動で行う機構を有することが好ましい。
(8) 第3の発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートの各微小容量容器内に、被検試料と試薬を分注し、変動電界を印加することにより前記被検試料と前記試薬との反応を促進し、前記被検試料内の目的物質を検出する検出方法に関するものであり、
変動電界を印加するための電極として、上部電極と下部電極を使用し、
前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることにより、
前記マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の前記微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことを特徴とする。
(9) 第3の発明の検出方法においては、
前記マイクロプレートとして、
前記微小容量容器内に、底面と、前記底面の外周に位置する側壁とを有しており、
前記側壁よりも内周側の前記底面上に、囲み枠を有しており、
前記囲み枠の内周側に存在する前記底面が、平面形状である
マイクロプレートを使用することにより、
前記底面と前記囲み枠とにより形成される容器の中の溶液について、位置による深さのバラツキを小さくし、
前記溶液の深さ方向に測定光を透過させて、前記溶液の吸光度を測定することが好ましい。
1−1. 電界撹拌用電極の構造
本発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートと、複数の微小容量容器内の溶液に変動電界を印加するために用いる電界撹拌用電極とを含む反応デバイスに関するものである。
本発明の反応デバイスの電界撹拌用電極は、上部電極と下部電極とを有しており、これらの電極が対電極となっている。電源装置を用いて上部電極と下部電極の間に変動電界を発生させることで、微小容量容器内の溶液に変動電界を印加して、溶液の液滴を高速に振動させることで撹拌を行うことが可能である。
このような構造を有することにより、本発明の反応デバイスは、マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の微小容量容器内の溶液に対して、それぞれ同一条件の電界撹拌を行うことができる。
マイクロプレートの微小容量容器内に強い電界を印加するためには、下部電極の表面に直接マイクロプレートを載置することが好ましいが、感電や電極への溶液の付着を防止するために、下部電極とマイクロプレートとの間に絶縁性のシートや板を設けてもよい。
一方の電極に変動電圧を供給し、他方の電極をアース電位とする場合には、変動電圧を印加する電極のみに凸部を設け、他方の電極は平面形状の平板電極とすることが好ましい。尚、一方の電極に変動電圧を供給する場合においても、上部電極及び下部電極の両方の電極に変動電圧を供給する場合においても、両方の電極に凸部を設ける形態は有り得る。
図1(A)は、下部電極の上部にマイクロプレートを載置した状態を示す断面図であり、図1(B)は、マイクロプレートを上部電極によって上部から押さえ付けた状態を示す断面図である。
マイクロプレート1は、プラスチック製のため、形状歪みは成形時に加わる応力によって少なからず存在するものであるため、平板状の下部電極7の上部にマイクロプレート1を載置した場合でも、歪みが生じてしまう。図1(A)の例では、微小容量容器2bにおいて、底面3bは下部電極7から僅かに浮いた状態となっており、微小容量容器2a,2cにおいて、底面3a,3cは、僅かに傾いた状態となっている。このような歪みが生じた状態で、微小容量容器内の溶液6a,6b,6cに対して変動電界を印加すると、それぞれ傾きの異なる液滴に対して変動電界を印加することとなり均一な撹拌性が維持できなくなる。液滴の僅かな傾きによっても、微小液滴のため、振動挙動が大きく異なり、同一条件の電界撹拌を行うことが難しくなる。歪みが生じた状態で電界撹拌を行った場合に、反応結果にバラツキが生じてしまうことは、後記実施例2の比較例の実験からも明らかである。
上部電極8は、上下に駆動することができ、上部電極8を下方向に移動させることによって、マイクロプレート1を上部から押さえ付けることができる。
上部電極の凸部9a,9b,9cは、円柱形状であり、円筒形状である側壁4a,4b,4cの内周側に挿入できる形状となっている。
これにより、凸部9a,9b,9cを溶液6a,6b,6cに近づけることができ、さらに強い電界を溶液に印加することができる。
凸部9a,9b,9cの直径は、側壁4a,4b,4cの内径よりも小さくし、両者の間に僅かな隙間を設けることが好ましい。これにより、凸部によって側壁に強い力が加わることを防ぎ、マイクロプレートの歪みや破損を防止することができる。
本発明において、マイクロプレートとは、複数の微小容量容器を有しており、その容器内で溶液の反応、混合、撹拌等を行うものであれば、どのようなものであってもよい。
マイクロプレートの微小容量容器の容量は、通常、1個あたり0.1〜2000μlである。マイクロプレートは、通常、微小容量容器を2〜10000個有することができる。微小容量容器(ウェル)の数を、用途に応じて、6、12、24、48、96、384、1536等とし、これらを縦横に整列したマイクロプレートが市販されている。
しかしながら、本発明においては、微小容量容器の側壁よりも内周側の底面上に、囲み枠を有したマイクロプレートを用いることが好ましい。
このような囲み枠を設けることにより、溶液の分子が側壁に引きつけられてメニスカスを形成してしまうことを防ぎ、溶液を囲み枠の高さを若干越えるまで注ぎ入れることにより、中央が盛り上がった形状の液滴を形成することが可能となる。このような液滴は、変動電界を印加することにより、上下に振動させて効率良く撹拌を行うことが可能である。
囲み枠とその内周側の底面とにより溶液が収容される容器が形成されることから、その底面を平面形状とすることによって、位置による溶液の深さのバラツキを小さくすることができる。位置による溶液の深さのバラツキを小さくすることによって、吸光光度計を用いて溶液の深さ方向に測定光を透過させて溶液の濃度や発色の程度を測定する際に、測定光を透過させる位置の違いによる光が溶液を透過する距離のバラツキを小さくすることができるため、精度良く吸光度の測定を行うことができる。
ここで、吸光光度計による測定を行う場合には、溶液を透過する透過光の経路長を十分に確保するために、微小容量容器の底面と囲み枠で形成される容器の容量を10μl以上とすることが好ましい。また、試薬を節約し、より多くの被検試料を同時に測定することを可能とするためには、容器の容量を300μl以下とすることが好ましい。
図2(A)は、底面と、側壁と、囲み枠とを有し、底面を平面形状とした微小容量容器の構造を示す断面図である。図2(B)は、特許文献2の図1(A)に記載された底面が湾曲形状の微小容量容器の断面図である。
微小容量容器2の側壁4よりも内周側の底面上には、囲み枠5が設けられている。囲み枠5は、円形のリング状であり、囲み枠5と底面3とにより容器が形成されている。この容器内に溶液6を注入すると、溶液6は側壁4に接触しないため、メニスカスを形成せず、囲み枠5の高さまで溶液を注ぎ入れると、表面張力により中央が少し盛り上がった形状の液滴となる。
また、囲み枠5は溶液を注入し過ぎた場合には、囲み枠を越えて溶液があふれ出すことができ、側壁4と囲み枠5との間には空間が設けられているため、囲み枠5からあふれた溶液を収容できるようになっている。
図2(B)に示されるように、微小容量容器2は、底面3とその外周に位置する側壁4とを有している。底面3は円形であり、側壁4は円筒形状となっている。
そして、側壁4の内周側に隣接して撥水性の囲み枠(台座)5が設けられている。囲み枠(台座)5は、円形のリング状であり、囲み枠5と底面3とにより容器が形成されている。この容器内に溶液6を注入すると、溶液6は側壁4に接触しないため、メニスカスを形成しない。囲み枠(台座)は撥水性であるため、囲み枠5の高さを大きく越えて溶液を注ぎ入れることができ、表面張力により中央が大きく盛り上がったドーム形状の液滴となる。
図3(A)は、マイクロプレートの断面図を示し、図3(B)は、マイクロプレートの平面図を示す。
図3(A)の断面図に示されるように、マイクロプレート1は、横方向に5個の微小容量容器2を有している。それぞれの微小容量容器2は、底面3と、底面の外周に位置する側壁4を有しており、側壁4よりも内周側の底面上に囲み枠5を有している。底面3は円形であり、側壁4は円筒形状である。底面3と囲み枠5とで形成される容器内に溶液6が収容されている。
本発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートに変動電界を印加する電界撹拌装置を提供する。
本発明の電界撹拌装置は、
i)上部電極及び下部電極と、
ii)上部電極及び/又は下部電極に変動電圧を供給する電源装置と、
iii)微小容量容器内の溶液の吸光度を測定する吸光光度計と
を有している。
このような上部電極と下部電極の構造は、前記1−1.において詳述したとおりである。
本発明の電界撹拌装置は、下部電極の上部に載置したマイクロプレートを、上部電極によって上部から押さえ付けることにより、マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことができるため、反応のバラツキを少なくして、複数の被検試料の検査を精度良く行うことができる。
上部電極と下部電極のどちらか一方に変動電圧を供給する場合には、他方の電極はアース電位とすることができる。
上部電極に変動電圧を供給する場合には、例えば、これらに限定されるわけではないが、電源装置として、高圧アンプとファンクションジェネレータを用い、ファクションジェネレータから周期的に変化する波形の信号を高圧アンプに供給して、高圧アンプから上部電極に対して周期的に変化する電圧を供給することができる。また、高電圧発生装置として、これらのそれぞれの機能を一台にまとめて装置化し、周期的に変化する電圧を供給することもできる。
図4(A)は、上部電極に供給される正の電圧が最も大きくなった状態を示し、図4(B)は、上部電極に供給される正の電圧が最も小さくなった状態を示す。
図4(A)に示されるように、上部電極8には高圧アンプ11から正の電圧が供給される。ここで、高圧アンプ11には、ファンクションジェネレータ12からプラス側に偏って周期的に変化する波形の信号が供給されることにより、高圧アンプ11から上部電極8に対して、電圧が周期的に変化する正の電圧が供給される。
図4(B)は、上部電極8に供給される正の電圧が最も小さくなった状態を示しており、上部電極8に蓄積したプラス電荷13の量は、この時点で最小となる。そして、上部電極8に蓄積したプラス電荷13の量が少ないため、液滴6を引きつける上向きの力が極めて弱くなり、液滴6は自重により下方向に落ちて平たい形状となる。
上部電極8に供給される正の電圧は周期的に変化して、図4(A)の状態と図4(B)の状態の間を周期的に往復する。図4(B)に示されるように、液滴6は、自重により下方向に落ちるが、底面3での反作用によりバウンドして、電界の変化にあわせて図4(A)の状態にすみやかに戻ることができる。このため、液滴6は、変動電界の周期に従って振動することとなり、液滴内部が撹拌される。液滴の振幅は小さいが、液滴の振動速度(周波数)は大きいため、液滴を効率良く撹拌することができる。
本発明の電界撹拌装置では、被検試料と試薬を反応させた後、反応の程度に応じて増大する発色の程度や濃度を、吸光光度計で測定することができ、これにより、被検試料中の特定の物質の検出すること(測定を含む)や、目的の機能を有する物質のスクリーニングを行うこと等が可能となる。
このような機構を有することにより、多数の被検試料についての試験を人手によらずに迅速に行うことができ、また、ELISAのような多段階の反応を必要とする試験であっても、試薬の分注と洗浄を繰り返すことにより、人手によらずに迅速に行うことが可能となる。本発明の電界撹拌装置は、電界撹拌により反応や洗浄の時間を短縮することが可能であるため、自動化との相乗効果により、極めて迅速に多数の被検試料について試験を行うことが可能であり、吸光度の測定によって、検出結果まで自動で得ることが可能である。
本発明は、複数の微小容量容器を有するマイクロプレートの各微小容量容器内に、被検試料と試薬を分注し、変動電界を印加することにより被検試料と試薬との反応を促進し、被検試料内の目的物質を検出する検出方法を提供する。
本発明の検出方法においては、変動電界を印加するための電極として、上部電極と下部電極を使用する。そして、下部電極の上部にマイクロプレートを載置し、マイクロプレートを上部電極によって上部から押さえ付けることにより、マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことができるため、反応のバラツキを少なくして、複数の被検試料の検査を精度良く行うことができる。
i) 微小容量容器内に、底面と、底面の外周に位置する側壁とを有している。
ii) 側壁よりも内周側の底面上に、囲み枠を有している。
iii) 囲み枠の内周側に存在する底面が、平面形状である。
このような構造を有するマイクロプレートの一例は、図2(A)に示されるとおりであり、前記1−2.で詳述したように、前記i)及びii)の構造により、中央が盛り上がった形状の液滴を形成できることから、変動電界を印加することにより、上下に振動させて効率良く撹拌を行うことが可能である。また、前記iii)の構造により、位置による溶液の深さのバラツキを小さくすることができる。位置による溶液の深さのバラツキを小さくすることによって、吸光光度計を用いて溶液の深さ方向に測定光を透過させて溶液の濃度や発色の程度を測定する際に、測定光を透過させる位置の違いによる、光が溶液を透過する距離のバラツキを小さくすることができるため、精度良く吸光度の測定を行うことができる。
本発明において、「検出」とは、目的となる物質が存在するか否かを判別することのみならず、目的となる物質の量を測定することも含む。
図2(A)と同一の構造の微小容量容器を8個有するマイクロプレートを作製した。微小容量容器は、底面と側壁とにより、内寸直径7.5mm、内寸高4.0mmの空間を有するものである。そして、底面上に、内寸直径4.0mm、高さ0.8mmの囲み枠を設けた。微小容量容器の断面の設計図を図5(A)に示す。
また、上記の微小容量容器の側壁の内周側に挿入出来る凸部を8個有する上部電極を製造した。各凸部は、直径6.0mm、高さ0.5mmである。上部電極の断面の設計図を図5(B)に、平面の設計図を図5(C)に示す。
作製したマイクロプレートは、平面上に載置しても歪みが生じるものであったが、作製した上部電極で上部から押さえ付けることにより、形状歪みを抑制することが出来た。
実施例1で作製したマイクロプレートと上部電極、そして、平板状の下部電極を用い、抗原抗体反応と発色反応において電界撹拌を行うことにより、ELISAを行った。下部電極の上にマイクロプレートを載置し、その上部から上部電極によって押さえ付けることで、マイクロプレートの形状歪みを抑制した状態でELISAを行った。
ELISAは、セルスペクトル株式会社製のトラスツズマブELISAキット(商品名:クオンテスト)を使用し、次のプロトコールに従って行った。
1)既知濃度のトラスツズマブを含有する被検試料(12μl)をマイクロプレートに注入して、被検試料中のトラスツズマブを、微小容量容器内の底面に固相化された1次抗体へ反応させた。
2)被検試料を取り除き、洗浄液で微小容量容器内を洗浄した。
3)トラスツズマブに結合する2次抗体(標識酵素結合)の溶液(12μl)を微小容量容器内に注入して、2次抗体反応を行った。
4)2次抗体溶液を取り除き、洗浄液で微小容量容器内を洗浄した。
5)標識酵素の発色基質の溶液(10μl)を微小容量容器内に注入して、発色反応を行った。
6)反応停止剤の溶液(5μl)を微小容量容器内に注入して、発色反応を停止し、波長450nmにおける吸光度の測定を行った。
上記のプロトコールに従い、電界撹拌を行わないELISA(従来法)と、1次抗体反応、2次抗体反応、及び発色反応で電界撹拌を行うELISA(電界撹拌法)を行った。電界撹拌は、4kV、40Hzの変動電圧を上下の電極間に印加することにより行った。
トラスツズマブELISAキットの通常のプロトコールでは、1次抗体反応と2次抗体反応の時間は、どちらも1時間であり、発色反応の時間は30分であるが、今回の実験では、1次抗体反応と2次抗体反応の時間をどちらも10分間とし、発色反応の時間を10分間とする、短時間での反応とした。
従来法と電界撹拌法において、被検試料中のトラスツズマブの濃度が0ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/mlである被検試料を用いて、それぞれ試験を行った。その結果を図6(A)のグラフに示す。図6(A)において、横軸は、被検試料中のトラスツズマブの濃度を示し、縦軸は、吸光度を測定した結果を示す。
図6(A)のグラフに示されるとおり、従来法では、トラスツズマブELISAキットの通常のプロトコールよりも短い時間で反応を行っているため、十分な発色ができず、吸光度の値は低いものであった。一方、電界撹拌法では、1次抗体反応、2次抗体反応、及び発色反応を電界撹拌により促進したため、反応時間が短いにもかかわらず、十分な発色が得られた。測定された吸光度の値は、トラスツズマブの濃度に比例したものであり、検量線を引くことができた。
次に、比較例として、マイクロプレートを上部電極によって押さえ付けず、マイクロプレートとの間に僅かな隙間を設けて上部電極を設置し、それ以外の条件は、前記と同じ条件としてELISAを行った。その結果を、図6(B)のグラフに示す。図6(B)において、横軸は、被検試料中のトラスツズマブの濃度を示し、縦軸は、吸光度を測定した結果を示す。
図6(B)のグラフに示されるように、電界撹拌法では、十分な発色が得られたものの、測定された吸光度の値は、トラスツズマブの濃度に比例したものではなく、検量線を引くことができなかった。これは、マイクロプレートの歪みにより、各微小容量容器における電界撹拌の条件が同一とはならず、反応にバラツキが生じたためであると考えられた。
2 微小容量容器
3 底面
4 側壁
5 囲み枠
6 溶液、液滴
7 下部電極
8 上部電極
9 凸部
10 測定光
11 高圧アンプ
12 ファンクションジェネレータ
13 プラス電荷
14 マイナス電荷
A 囲み枠の高さ
B 囲み枠の内周側に存在する底面の径
Claims (9)
- 複数の微小容量容器を有するマイクロプレートと、前記微小容量容器内の溶液に変動電界を印加するために用いる電界撹拌用電極とを含む反応デバイスにおいて、
前記電界撹拌用電極は上部電極と下部電極とを有しており、前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることができる構造を有することにより、
前記マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の前記溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことを特徴とする反応デバイス。 - 前記微小容量容器は、底面と、前記底面の外周に位置する側壁とを有しており、
前記側壁よりも内周側の前記底面上に、囲み枠を有しており、
前記囲み枠の内周側に存在する前記底面は、平面形状であることを特徴とする、請求項1に記載の反応デバイス。 - 前記囲み枠の高さと、前記囲み枠の内周側に存在する底面の径との比が、1:2〜1:20であり、
前記底面と前記囲み枠とで形成される容器の容量が、10〜300μlであることを特徴とする、請求項2に記載の反応デバイス。 - 前記上部電極は、前記マイクロプレートの各微小容量容器の位置に対応する、複数の凸部を有しており、
前記複数の凸部が、前記側壁の内周側に挿入できる形状であることを特徴とする、請求項2又は3に記載の反応デバイス。 - 前記凸部が円柱形状であり、前記側壁の内周側が円筒形状であることを特徴とする、請求項4に記載の反応デバイス。
- 複数の微小容量容器を有するマイクロプレートに変動電界を印加する電界撹拌装置であって、
上部電極及び下部電極と、
前記上部電極及び/又は下部電極に変動電圧を供給する電源装置と、
前記微小容量容器内の溶液の吸光度を測定する吸光光度計と
を有し、
前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることができる構造を有することにより、
前記マイクロプレートの形状歪みを抑制することで、前記微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行い、
前記微小容量容器内の溶液の吸光度を測定することにより、
複数の被検試料について同時に検査を行うことができる電界撹拌装置。 - 前記微小容量容器内への被検試料又は試薬の分注、前記微小容量容器内の溶液への変動電界の印加、前記微小容量容器内の洗浄、及び前記微小容量容器内の溶液の吸光度の測定を自動で行う機構を有する、請求項6に記載の電界撹拌装置。
- 複数の微小容量容器を有するマイクロプレートの各微小容量容器内に、被検試料と試薬を分注し、変動電界を印加することにより前記被検試料と前記試薬との反応を促進し、前記被検試料内の目的物質を検出する検出方法において、
変動電界を印加するための電極として、上部電極と下部電極を使用し、
前記下部電極の上部に前記マイクロプレートを載置し、前記マイクロプレートを前記上部電極によって上部から押さえ付けることにより、
前記マイクロプレートの形状歪みを抑制し、複数の前記微小容量容器内の溶液に対して同一条件の電界撹拌を行うことを特徴とする、検出方法。 - 前記マイクロプレートとして、
前記微小容量容器内に、底面と、前記底面の外周に位置する側壁とを有しており、
前記側壁よりも内周側の前記底面上に、囲み枠を有しており、
前記囲み枠の内周側に存在する前記底面が、平面形状である
マイクロプレートを使用することにより、
前記底面と前記囲み枠とにより形成される容器の中の溶液について、位置による深さのバラツキを小さくし、
前記溶液の深さ方向に測定光を透過させて、前記溶液の吸光度を測定することを特徴とする、請求項8に記載の検出方法。
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