WO2018043655A1 - 病理標本作製装置、病理標本作製システム - Google Patents

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WO2018043655A1
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stage
reagent
pathological specimen
specimen preparation
unit
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PCT/JP2017/031401
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太朗 青木
佐藤 正
鈴木 洋一
正幸 門田
遼 佐藤
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秋田エプソン株式会社
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    • G01NINVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N1/00Sampling; Preparing specimens for investigation
    • G01N1/28Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
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    • GPHYSICS
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    • G01N33/48Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers

Definitions

  • the present invention relates to a pathological specimen preparation device and a pathological specimen preparation system.
  • the discharge pipe and the supply pipe of the cleaning unit can be inserted into and removed from the through hole in one electrode of the electric field stirring unit.
  • the discharge tube can discharge not only the solution dropped on the tissue specimen but also the cleaning liquid supplied to the tissue specimen by the supply pipe.
  • the discharge tube is inserted into the through hole of one electrode at a distance that does not contact the tissue specimen on the substrate. It is difficult to completely discharge the dropped solution and the supplied cleaning liquid. If a solution containing an antibody or a washing solution remains, staining using a color former may not be performed properly.
  • Patent Document 1 it is necessary to collect a tissue specimen in a size that can be fixed inside the water-repellent ring formed on the substrate. Depending on how the tissue specimen is collected, the tissue specimen needs to be collected inside the water-repellent ring. It may not fit. If it does so, there existed a subject that it became more difficult to perform sufficient electric field stirring of the solution dripped at the required part of the tissue sample, and reliable discharge
  • the present invention has been made to solve at least a part of the problems described above, and can be realized as the following forms or application examples.
  • the pathological specimen preparation apparatus can supply a reagent to a stage unit including a stage on which a substrate on which a tissue specimen is fixed is placed, and to the substrate placed on the stage A reagent supply unit, a cleaning unit capable of supplying a cleaning liquid to the substrate placed on the stage, and an electric field applied to the reagent or the cleaning solution supplied to the substrate placed on the stage.
  • An electric field stirring unit capable of being stirred, the control unit, the cleaning unit, the reagent supply unit, and the electric field stirring unit are sequentially arranged in the first direction, and the stage is moved in the first direction.
  • stage tilt mechanism that tilts the stage in a second direction that intersects the first direction when the stage is located in the cleaning unit
  • the control unit includes a pathology Specimen preparation proto Based on the Le
  • the control unit drives and controls the stage conveyance mechanism based on the pathological specimen preparation protocol, so that the cleaning unit is arranged in the first direction with the substrate on which the tissue specimen is fixed.
  • the reagent supply unit and the electric field stirring unit can be arranged. For example, after the stage is positioned in the reagent supply unit and the reagent containing the antibody is supplied to the tissue specimen, the stage is positioned in the electric field stirring unit and the reagent is stirred to perform the antigen-antibody reaction. Thereafter, the tissue specimen after the completion of the antigen-antibody reaction can be washed by placing the stage in the washing section and supplying the washing solution.
  • the stage when the stage is positioned in the cleaning unit, the stage is tilted in the second direction intersecting the first direction by the stage tilting mechanism, so that the supplied reagent or cleaning liquid can be reliably discharged from the substrate. it can. That is, it is possible to provide a pathological specimen preparation device that can appropriately prepare a pathological specimen based on a pathological specimen preparation protocol.
  • the stage tilting mechanism has a support mechanism that tilts the stage by pushing it up from below as the stage moves to the cleaning unit. According to this configuration, the stage can be inclined in the second direction with a relatively simple configuration.
  • the stage unit includes the stage, the stage transport mechanism, and the stage tilt mechanism. According to this configuration, it is possible to exchange the stage unit including the stage conveyance mechanism and the stage tilting mechanism, so that the maintainability of the stage unit is improved.
  • a plurality of the stage units are arranged in parallel in the second direction, and the reagent supply unit is placed on the stage for each of the plurality of stage units.
  • the reagent can be supplied to the substrate, and the cleaning unit can supply the cleaning liquid to the substrate placed on the stage for each of the plurality of stage units, and the electric field stirring unit Is provided across the plurality of stage portions in the second direction, and includes one electrode capable of applying an electric field to the reagent or the cleaning liquid supplied to the substrate placed on the stage.
  • an apparatus can be provided.
  • the reagent is filled in a cartridge capable of discharging the reagent
  • the reagent supply unit includes a plurality of holding units to which the cartridge can be attached and detached, and the plurality of holding units.
  • a transport unit capable of transporting the transport unit in the second direction, and the control unit drives and controls the transport unit based on the pathological specimen preparation protocol, and the plurality of the control units are positioned at positions facing the stage. It is preferable to move at least one of the holding portions.
  • a plurality of types of reagents can be independently supplied to the tissue specimen based on the pathological specimen preparation protocol.
  • a pathological specimen preparation protocol using a plurality of types of reagents can be executed by one apparatus.
  • the pathological specimen preparation device described in the application example further includes a barcode reader capable of reading the barcode attached to the cartridge. According to this configuration, it is possible to achieve traceability between the reagent used when preparing the pathological specimen and the pathological specimen.
  • the cartridge includes a light-transmitting storage unit that can store the reagent, and a remaining amount detection that can optically detect the presence or absence of the reagent in the storage unit It is preferable to provide a sensor. According to this configuration, since the presence or absence of the reagent in the cartridge can be detected by the remaining amount detection sensor, it is possible to provide a pathological specimen preparation device that can effectively use the reagent.
  • the cleaning unit includes a nozzle, a plurality of cleaning liquid tanks, and a valve capable of switching a connection destination of the nozzle to the plurality of cleaning liquid tanks, and the control unit
  • the valve is driven and controlled, and the nozzle is connected to one of the plurality of cleaning liquid tanks.
  • one of the plurality of cleaning liquid tanks is filled with pure water as the cleaning liquid.
  • the reagent supplied to the tissue specimen can be washed with pure water. That is, the cleanability of the tissue specimen is improved.
  • the supply path such as the nozzle may be clogged with the foreign substances, but by cleaning the cleaning liquid supply path with pure water, The foreign matter can be removed and stable supply of the cleaning liquid can be realized.
  • the cleaning unit includes a nozzle connected to a gas supply unit through a valve, and the control unit is configured to use the pathological specimen preparation protocol based on the pathological specimen preparation protocol. It is preferable to control the opening and closing of the valve so that gas is blown from the nozzle to the substrate placed on the stage when positioned in the cleaning unit.
  • the control unit is configured to use the pathological specimen preparation protocol based on the pathological specimen preparation protocol. It is preferable to control the opening and closing of the valve so that gas is blown from the nozzle to the substrate placed on the stage when positioned in the cleaning unit.
  • the reagent or the cleaning liquid that flows down from the substrate on the inclined stage is placed in the waste liquid tank. It is preferable to further include a discharge flow path that discharges toward. According to this configuration, the reagent or the cleaning liquid flowing down from the substrate on the stage can be collected in the waste liquid tank without leakage.
  • the waste liquid tank includes a first waste liquid tank and a second waste liquid tank, and the discharge flow path is a first discharge flow path toward the first waste liquid tank;
  • the reagent or the cleaning liquid flowing down from the substrate on the inclined stage, and flowing into the first discharge channel or the second discharge channel.
  • a flow path switching mechanism that is capable of controlling the flow path switching mechanism according to the type of the reagent or the cleaning liquid based on the pathological specimen preparation protocol. It is preferable to switch the discharge destination to the first discharge channel or the second discharge channel.
  • the handling of the waste liquid can be managed for each reagent as compared with the case where all the reagents are mixed and collected in the waste liquid tank.
  • the pathological specimen preparation protocol includes a display unit that can display information related to the pathological specimen preparation protocol and includes an input unit related to the operation of the pathological specimen preparation protocol.
  • the pathological specimen is separately obtained using a computer having an input means such as a keyboard. The operation can be performed more efficiently than in the case of operating the manufacturing apparatus.
  • a pathological specimen preparation system includes the pathological specimen preparation apparatus according to the application example described above and a computer having a storage unit in which a pathological specimen preparation protocol is stored, and the pathological specimen preparation protocol Based on the above, the computer drives and controls the pathological specimen preparation apparatus.
  • the reagent is ejected from a cartridge having a translucent storage unit that can store the reagent, and the pathological sample preparation apparatus determines whether the reagent is present in the storage unit.
  • An optically detectable remaining amount detection sensor wherein the computer detects the remaining amount of the reagent by the remaining amount detection sensor at least before starting the preparation of the pathological sample based on the pathological sample preparation protocol It is preferable to do. According to this configuration, since the remaining amount of the reagent in the cartridge can be detected by the remaining amount detection sensor, in preparation of the pathological specimen, for example, there is no problem such that the preparation is interrupted due to insufficient reagent in the middle.
  • the computer has reached a predetermined time after coloring and washing the tissue specimen fixed to the substrate based on the pathological specimen preparation protocol.
  • the substrate is transported to the cleaning unit and pure water is supplied from the cleaning unit to the substrate as the cleaning liquid.
  • the computer acquires an image of a substrate and a tissue specimen fixed to the substrate, and executes an operation of associating the acquired image with the pathological specimen preparation protocol. It is preferable. According to this configuration, the pathological specimen preparation protocol and the information of the pathological specimen prepared based on the pathological specimen preparation protocol can be managed in association with each other, and traceability in pathological specimen preparation can be improved.
  • FIG. 10 is a table showing a pathological specimen preparation process in In situ hybridization of Comparative Example 3.
  • FIG. The schematic plan view which shows the structure of the board
  • the tissue specimen Ts used for the preparation of the pathological specimen is fixed to the substrate 1.
  • the substrate 1 is a colorless and transparent microscope slide glass having a width of 26 mm, a length of 76 mm, and a thickness of 1.1 mm, which is standardized by JIS R 3703: 1998.
  • a water repellent ring 2 is formed on the substrate 1 in order to hold a solution such as a reagent supplied to the fixed tissue specimen Ts within a predetermined range.
  • the tissue specimen Ts is, for example, a sliced tissue section, and is fixed inside the water-repellent ring 2.
  • the substrate 1 is provided with a marking region 3 for identifying the fixed tissue specimen Ts on one end side in the longitudinal direction of the substrate 1.
  • a sticker in which the name or management number of the fixed tissue specimen Ts is written may be attached to the marking region 3, or the name or management number of the fixed tissue specimen Ts can be described.
  • a smooth coating surface may be formed.
  • the water-repellent ring 2 is not limited to being formed on the substrate 1 and may be formed, for example, two.
  • a positive tissue sample may be fixed in one water repellent ring 2 and a comparative negative tissue sample may be fixed in the other water repellent ring 2.
  • the substrate 1 on which the tissue specimen Ts is fixed is referred to as a substrate W.
  • an electric field stirring step in which stirring is performed by applying an electric field to the solution S such as the reagent Rs dropped on the substrate W in order to efficiently advance the preparation of the pathological specimen. It is adopted.
  • the substrate W goes through these cleaning steps, reaction steps, and electric field stirring steps.
  • a pathological specimen is prepared using a pathological specimen preparation system including a pathological specimen preparation apparatus.
  • cleaning is performed by dropping a predetermined amount of the cleaning liquid Cs from the nozzle 131 onto the substrate W as droplets.
  • reaction step a predetermined amount of the reagent Rs is dropped as a droplet from the cartridge 50 filled with the reagent Rs onto the substrate W to perform the reaction.
  • electric field agitation step the solution S is agitated by arranging the substrate W between the pair of opposed electrodes 10 and 20 and generating an electric field between the pair of electrodes 10 and 20.
  • the substrate W is placed on the lower electrode 10 among the pair of electrodes 10 and 20 that are vertically opposed to each other.
  • An electric field is generated between the lower electrode 10 and the upper electrode 20 that are arranged to face each other at a predetermined interval, for example, by applying a rectangular potential whose potential changes between 0 kv and 4 kv at a predetermined cycle. .
  • the solution S is attracted to the upper electrode 20 side by the Coulomb force generated as the potential increases. As the electric potential decreases, the Coulomb force weakens, and the solution S drawn to the upper electrode 20 side falls due to gravity. By repeating such deformation of the solution S, the solution S is stirred.
  • the lower electrode 10 on which the substrate W is placed functions as a stage on which the substrate W is placed in the cleaning process and the reaction process. It will be called stage 10.
  • FIG. 4 is a schematic perspective view showing the configuration of the pathological specimen preparation apparatus.
  • the pathological specimen preparation apparatus 100 of this embodiment includes four tanks 106, 107, 108, 109, a stage unit 110, a cleaning unit 130, a reagent supply unit 150, an electric field stirring unit 170, and a circuit unit. 180 and a frame 105, which is a structure in which these parts are arranged.
  • the frame 105 has a substantially square first plate 101 and second plate 102, two rectangular third plates 103, and a plurality of supports for supporting these plates in order from the first plate 101. And a pillar 104.
  • the frame 105 is made of aluminum, for example.
  • the left-right direction when the cleaning unit 130 is in front is the X direction
  • the front-rear direction is the Y direction
  • the vertical direction will be described as the Z direction.
  • the Y direction corresponds to the first direction of the present invention
  • the X direction corresponds to the second direction that intersects the first direction of the present invention.
  • the tank 106 is a buffer solution that prevents the tissue specimen Ts from being dried.
  • the tank 107 stores pure water (H 2 O) as another cleaning liquid.
  • resin containers such as polyethylene and polypropylene are used in consideration of chemical resistance and weight.
  • the tanks 106 and 107 are examples of the cleaning liquid tank in the present invention.
  • tanks 106 and 107 for example, resin containers such as polyethylene and polypropylene are used for the tanks 108 and 109.
  • the tanks 108 and 109 are examples of waste liquid tanks (first waste liquid tank and second waste liquid tank) in the present invention.
  • the number of tanks is not limited to four, and the number may be increased according to the type of cleaning liquid Cs used.
  • a circuit unit 180 is disposed on the rear side of the first plate 101 in the Y direction.
  • the circuit unit 180 includes a power supply unit that supplies power to an electrical drive system included in the stage unit 110, the cleaning unit 130, the reagent supply unit 150, and the electric field stirring unit 170, and a control unit that controls each unit. ing.
  • the electrical configuration of the circuit unit 180 will be described in a pathological specimen preparation system described later.
  • the stage unit 110 includes a stage 10 on which the substrate W is placed, a stage transport mechanism that moves the stage 10 in the Y direction, and a stage tilt mechanism that tilts the stage 10 in the X direction.
  • a plurality of (six in this embodiment) stage portions 110 extending in the Y direction are arranged on the second plate 102 in parallel in the X direction. Details of the stage transport mechanism and the stage tilt mechanism will be described later. Note that the number of stage units 110 is not limited to six.
  • the third plate 103 extending in the Y direction is supported by the support pillar 104 at one end and the other end in the X direction and the Y direction so as to sandwich a plurality of (six) stage portions 110 arranged in parallel in the X direction. It is supported.
  • the cleaning unit 130, the reagent supply unit 150, and the electric field stirring unit 170 straddle the two third plates 103 in the X direction and are arranged on the third plate 103 in this order in the Y direction.
  • the cleaning unit 130 has a plurality (six) of nozzles 131 corresponding to the number of stages 10, and each of the plurality (six) of stages 10 receives cleaning liquid Cs necessary for cleaning from two types of cleaning liquids Cs. It can be supplied.
  • the reagent supply unit 150 is configured to be able to supply a reagent Rs necessary for the reaction from a plurality of types of reagents Rs to each of a plurality (six) of stages 10.
  • the electric field stirring unit 170 includes the upper electrode 20 of the pair of electrodes 10 and 20 described above. The upper electrode 20 is arranged extending in the X direction so as to straddle a plurality (six) of stage portions 110.
  • the stage 10 is moved in the Y direction by the stage transport mechanism, and is arranged corresponding to each of the cleaning unit 130, the reagent supply unit 150, and the electric field stirring unit 170.
  • a pathological specimen preparation apparatus 100 it is possible to prepare a pathological specimen using a maximum of six substrates W. Further, in the frame 105, four tanks 106, 107, 108, 109, a circuit unit 180, a stage unit 110, a cleaning unit 130, a reagent supply unit 150, and an electric field stirring unit 170 are arranged in a superimposed state. Therefore, a small pathological specimen preparation apparatus 100 with a small footprint (installation area) is realized.
  • the configuration and structure of each part in the pathological specimen preparation apparatus 100 will be described. It should be noted that the frame 105 that can be arranged by overlapping the respective parts in this way is not limited to the three-stage configuration including the first plate 101, the second plate 102, and the third plate 103. It may be a step.
  • FIG. 6 is a schematic perspective view showing the stage
  • FIG. 7 is a schematic perspective view showing the liquid discharge guide portion
  • FIGS. 8 and 9 are main portions for explaining the stage tilting mechanism. It is a perspective view.
  • the stage unit 110 includes a stage 10, a support frame 111, a motor 115, a linear guide 117, a first support unit 119, a second support unit 120, a liquid discharge guide unit 126, and the like.
  • the stage 10 is a substantially rectangular parallelepiped, and the longitudinal direction is arranged along the Y direction.
  • the stage 10 includes an upper surface 11 on which the substrate W is placed, a notch portion 13 in which a part of the front right corner of the upper surface 11 is notched, a long side portion on the left side of the upper surface 11, and front and rear short side portions. And an edge portion 14 provided along the edge.
  • the notch 13 is notched so that the tweezers do not hit the stage 10 when the end of the substrate W is gripped by tweezers or the like and set / reset with respect to the upper surface 11. That is, the substrate W can be easily set and reset with respect to the stage 10.
  • the stage 10 has the inclination part 14a which protruded outside from the long side part of the left side of the edge part 14, and inclined.
  • the stage 10 is supported by the second support portion 120 on the short side portion side in a state in which the stage 10 can rotate in a certain direction.
  • two screw holes 10 b and 10 c relating to the support of the stage 10 by the second support part 120 are provided on the side surface of the stage 10 on the short side part side.
  • the support frame 111 has an upper surface portion 113 extending in the Y direction, a pair of leg portions 111a and 111b and a pair of bottom surface portions 112a and 112b that support the upper surface portion 113 at both ends in the Y direction. ing.
  • the support frame 111 is formed by integrally forming a pair of leg portions 111a and 111b, a pair of bottom surface portions 112a and 112b, and an upper surface portion 113, for example, by bending an SUS plate after external processing.
  • a linear guide 117 is provided on the lower surface of the upper surface portion 113 in the Z direction so as to extend in the Y direction.
  • the motor 115 is, for example, a stepping motor, and is attached to the leg 111b located on the rear side in the Y direction of the pair of legs 111a and 111b so that the rotation axis is directed upward in the Z direction.
  • a timing pulley 116b is attached to the rotating shaft.
  • Another timing pulley 116a is rotatably supported on the lower side in front of the upper surface 113 in the Y direction.
  • a timing belt 118 is bridged between the two timing pulleys 116a and 116b.
  • the first support portion 119 is fixed to the right side portion in the X direction of the bridged timing belt 118.
  • the first support portion 119 has a T-shaped outer shape, and is attached with a square columnar support rod 121 extending in the Z direction.
  • a cylindrical rod 122 is attached to the lower end of the support rod 121 via a miniature bearing in a rotatable state.
  • the support bar 121 is formed so that its upper end is formed larger than the other parts, so that the upper end is received by the first support part 119 and the lower end protrudes downward from the first support part 119. It is incorporated in the first support part 119 so as to be movable only upward.
  • a pair of guide portions 124 extending to the left side in the X direction are attached to the first support portion 119.
  • the pair of guide portions 124 are attached to the first support portion 119 so as to sandwich the upper surface portion 113 of the support frame 111 and the linear guide 117 in the Z direction.
  • a slider 117a is attached to the lower guide portion 124 in the Z direction of the pair of guide portions 124.
  • the slider 117 a is fitted to the linear guide 117 and is movable in the Y direction along the linear guide 117. That is, when the motor 115 is driven, the first support part 119 can be moved in the Y direction along the linear guide 117.
  • the second support part 120 is attached to the upper guide part 124 in the Z direction of the pair of guide parts 124.
  • the second support portion 120 has side portions 120a that are bent upward in the Z direction at both ends in the Y direction, and the stage 10 is sandwiched and supported between the opposing side portions 120a along the Y direction. ing. Therefore, when the motor 115 is driven, the stage 10 can be moved in the Y direction along the linear guide 117 of the support frame 111.
  • the stage transport mechanism of this embodiment includes at least the support frame 111, the motor 115, the two timing pulleys 116a and 116b, the linear guide 117, the slider 117a, the timing belt 118, the first support portion 119, and the second support portion 120.
  • a pair of guide portions 124 is included.
  • an L-shaped frame 114 is erected at a rear corner of the front surface bottom surface portion 112a in the Y direction.
  • the L-shaped frame 114 is arranged such that the L-shaped long side portion 114b extends along the Y direction, and the upper end of the long side portion 114b is bent to the right in the X direction to form an upper surface portion 114a.
  • a substantially trapezoidal cam 125 is attached to the long side portion 114b. The cam 125 is attached at a position corresponding to the cleaning unit 130 in the pathological specimen preparation device 100 in the Y direction.
  • the first protrusion 123 a is attached to the upper surface 113 of the support frame 111 on the upper side of the cam 125 in the Z direction. That is, the liquid discharge guide part 126 is attached at a position corresponding to the cleaning part 130 in the pathological specimen preparation device 100, similarly to the cam 125. For example, even if the cleaning liquid supplied from the cleaning unit 130 leaks into the first protrusion 123a, the liquid discharge guide unit 126 can discharge the cleaning liquid from the gap 123c.
  • the liquid discharge guide part 126 forms a part of a discharge channel for discharging the reagent or the cleaning liquid flowing down from the substrate on the inclined stage of the present invention toward the waste liquid tank.
  • a micro switch 128 is attached to the leg 111a on the front side in the Y direction.
  • the micro switch 128 is provided at a position in contact with the first support part 119 when the motor 115 is driven and the first support part 119 moves forward in the Y direction.
  • the micro switch 128 is provided to detect the position of the first support portion 119 that moves in the Y direction, that is, the stage 10.
  • the motor 115 stops when the micro switch 128 is turned on. That is, the stage 10 stops in front of the Y direction.
  • the position where the first support part 119 contacts the micro switch 128 is the origin of the movement of the stage 10, and the substrate W is set / reset with respect to the stopped stage 10 (see FIG. 2).
  • the stage tilt mechanism of this embodiment will be described with reference to FIGS.
  • the stage 10 is supported on the guide part 124 of the first support part 119 via the second support part 120.
  • a shaft portion 120 b that rotatably supports the stage 10 is provided on the side surface portion 120 a of the second support portion 120.
  • a locking portion 17 that locks one of the springs 18 is provided on the side surface of the short side of the stage 10, and a locking portion that locks the other of the springs 18 is provided inside the side surface portion 120 a of the second support portion 120.
  • a stop 120c is provided. Accordingly, the stage 10 is urged downward in the Z direction by the spring 18, and the rotation is stopped by the stopper 124 a erected on the guide portion 124.
  • the cam 125 is attached to the long side portion 114b so that the bottom surface 125a of the cam 125 faces the top surface portion 114a of the L-shaped frame 114.
  • the cam 125 has a substantially trapezoidal shape in which the rear slope in the Y direction has a smaller inclination angle than the front slope.
  • the cam 125 is normally urged on the front side in the Y direction upward in the Z direction so that the end portion of the rear slope is in contact with the upper surface part 114 a of the L-shaped frame 114. That is, there is a gap between the end portion of the front slope and the upper surface portion 114a.
  • the rod 122 at the lower end of the support rod 121 enters the gap and forms a gap between the upper surface portion 114a and the cam 125. Go through. That is, in the movement toward the rear in the Y direction from the origin of the stage 10, the movement of the support bar 121 in the upper direction in the Z direction does not occur.
  • the stage tilting mechanism of this embodiment includes at least the L-shaped frame 114, the support rod 121, the cam 125, and the second support part 120, and these are examples of the support mechanism in the present invention.
  • the stage 10 can be inclined with a simple configuration because a dedicated drive unit such as a motor or a piston is not provided.
  • FIG. 10 is a diagram showing the positional relationship between the tilted stage and other configurations. Specifically, it is a view when viewing the stage 10 inclined from the Y direction side.
  • the upper surface 11 of the stage 10 is inclined from the horizontal state to the left side in the X direction by the stage inclination mechanism described above.
  • the inclined portion 14 a of the edge portion 14 of the stage 10 stops with a slight gap between the inclined portion 14 a and the second protruding portion 123 b of the liquid discharge guide portion 126.
  • the inclination angle ⁇ of the upper surface 11 of the stage 10 is preferably 60 degrees or more from the viewpoint of easily and reliably discharging the reagent Rs and the cleaning liquid Cs supplied to the substrate W from the substrate W.
  • the length of the stage 10 in the Y direction is L1
  • the length of the first protrusion 123a of the liquid discharge guide portion 126 in the Y direction is L2, as shown in FIG.
  • L3 when the length of the upper surface 125b of the cam 125 in the Y direction is L3, L1, L2, and L3 satisfy the following formula (1).
  • the inclination angle ⁇ of the stage 10 is determined by how much the bottom surface 12 of the stage 10 is pushed up by the support rod 121.
  • the upper surface portion 125 b of the cam 125 extends from the upper surface portion 114 a of the L-shaped frame 114.
  • the inclination angle ⁇ can be adjusted by adjusting the height h leading to.
  • FIG. 11 is a schematic perspective view showing the configuration of the cleaning unit
  • FIG. 12 is a schematic perspective view showing the configuration of the flow path switching mechanism.
  • the cleaning unit 130 includes a plurality of (six) T-shaped nozzles 131, a valve group 132 and a valve group 133 having a plurality of valves that are paired with each other, and a cleaning liquid switching 2.
  • Two valves 134 and 135 and a support plate 136 that supports the plurality of nozzles 131 are provided.
  • the support plate 136 is rectangular and, as described above, is supported by the support pillar so that the longitudinal direction extends along the X direction across the two third plates 103 of the pathological specimen preparation device 100 (see FIG. 4). ).
  • the support plate 136 is provided with a plurality of (six) holes 136a, 136b, 136c, 136d, 136e, 136f at equal intervals in the X direction. These holes 136a, 136b, 136c, 136d, 136e, 136f are provided corresponding to the number and position of the stage portions 110 (stage 10) arranged in the X direction.
  • the nozzles 131 are inserted into the holes 136a, 136b, 136c, 136d, 136e, and 136f, the nozzles 131a, They are referred to as 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f.
  • the valve group 132 and the valve group 133 also include a plurality of valves provided according to the number of nozzles 131.
  • the valve group 132 includes a plurality (six) of valves 132a, 132b, 132c, 132d, 132e, and 132f arranged in the Y direction.
  • the valve group 133 also has a plurality (six) of valves 133a, 133b, 133c, 133d, 133e, and 133f arranged in the Y direction.
  • the valve group 132 and the valve group 133 are separately arranged on the two third plates 103 of the pathological specimen preparation device 100 so as to face each other with the support plate 136 interposed therebetween (see FIG. 4).
  • the valve group 132, the valve group 133, and the valves 134 and 135 are electromagnetic valves that can be electrically opened and closed, and the opening and closing are controlled by a control unit included in the circuit unit 180. Specifically, the rod is pushed from the lower side in the Z direction into the opening / closing part provided on the upper side in the Z direction, and the flexible tube inserted into the through hole is pushed and crushed by the rod. As a result, the liquid flow path in the tube can be closed. The liquid flow path in the tube can be opened by lowering the rod to release the pressure on the tube.
  • a flexible tube is connected to one end of the nozzle 131a via the valve 132a.
  • a flexible tube is connected to the other end of the nozzle 131a via the valve 133a.
  • the connection of the tube to the other nozzle 131 through another valve is the same.
  • a tube passing through the valve group 132 is inserted into one of the two valves 134 and 135 for switching the cleaning liquid, and a tube passing through the valve group 133 is inserted into the other valve 135.
  • the two valves 134 and 135 for switching the cleaning liquid are respectively connected to different cleaning liquid tanks via a pump.
  • two types of cleaning liquids can be discharged from each of the plurality of nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f. A detailed cleaning liquid supply method will be described later.
  • the barcode reader 162 is attached to the support plate 136 of the cleaning unit 130 at a place where the plurality of nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f are not obstructed.
  • the barcode reader 162 is related to the reagent supply unit 150 and will be described in detail later.
  • the flow path switching mechanism 140 of the present embodiment includes a first discharge flow path 141 having a first discharge opening 141a, a second discharge flow path 142 having a second discharge opening 142a, and a rotating shaft. 143 and a motor 144.
  • the first discharge flow channel 141 and the second discharge flow channel 142 are ridges having a substantially pentagonal outer shape, and the first discharge flow channel is in a state where the long side portions are along the X direction and are shifted from each other in the Y direction.
  • the second discharge channel 142 is superimposed on the 141. In this way, by overlapping the first discharge channel 141 and the second discharge channel 142, the first discharge port 141a and the second discharge port 142a are also shifted from each other in the X direction and the Y direction. Be placed.
  • the first discharge port 141a is positioned above the tank 108 in the Z direction
  • the second discharge port 142a is positioned above the tank 109 in the Z direction.
  • the rotary shaft 143 is disposed so as to extend in the X direction along the boundary between the superimposed first discharge flow path 141 and second discharge flow path 142.
  • One end of the rotating shaft 143 is rotatably supported, and the other end is connected to the motor 144.
  • a plurality of (six) holes 143a, 143b, 143c, 143d, 143e, 143f are provided in the rotation shaft 143 at equal intervals in the X direction. These holes 143a, 143b, 143c, 143d, 143e, 143f are provided corresponding to the number and position of the plurality of stage portions 110 arranged in the X direction.
  • a flexible tube 127 connected to the liquid discharge guide portion 126 in the leftmost stage portion 110 among the plurality of stage portions 110 arranged in the X direction passes through the hole 143a and extends downward from the rotation shaft 143. It is inserted so as to protrude.
  • the tubes 127b, 127c, 127d, 127e, and 127f in the other stage portions 110 are similarly inserted into the corresponding holes 143b, 143c, 143d, 143e, and 143f.
  • the positions of the tips of the tubes 127a, 127b, 127c, 127d, 127e, 127f protruding downward from the rotation shaft 143 are in the first direction in the first direction.
  • the second discharge channel 142 side That is, the flow path of the liquid discharged through the tubes 127a, 127b, 127c, 127d, 127e, and 127f can be switched between the first discharge flow path 141 and the second discharge flow path 142.
  • Such a flow path switching mechanism 140 is disposed on the second plate 102 of the frame 105 (see FIG. 4).
  • FIGS. 13 to 15 are schematic views showing how the cleaning liquid is supplied.
  • FIG. 13 shows a method of supplying a cleaning liquid other than pure water
  • FIG. 14 shows a method of supplying pure water
  • FIG. 15 shows a method of cleaning the supply channel of the cleaning liquid with pure water.
  • the arrangement of the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f is opposite to the arrangement in the actual cleaning unit 130 because of the relationship between the pumps P1 and P2 and the cleaning liquid tanks 106 and 107. It is facing.
  • the arrangement of the valve groups 132 and 133 related to the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f is also the same.
  • a tube 138 passing through the valve group 132 is connected to one end of each of the T-shaped nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f, and the other end passes through the valve group 133.
  • a tube 137 is connected.
  • the tube 137 is connected to the pump P1 via a cleaning liquid switching valve 135.
  • the tube 138 is connected to the pump P2, and is connected to the tube 137 via a cleaning liquid switching valve 134.
  • a cleaning liquid other than pure water is stored in the tank 106 and fed into the tube 137 by the pump P1. Pure water is stored in the tank 107 and fed into the tube 138 by the pump P2.
  • the pumps P1 and P2 may employ a system such as a rotary pump that sucks and delivers cleaning liquid, or a compressor that pumps the cleaning liquid by pressurizing the tanks 106 and 107, for example.
  • valves 132a, 132b, 132c, 132d, 132e, 132f and the valve 134 of the valve group 132 are closed, all the valves 133a, 133b, 133c, 133d, 133e, 133f and the valve 135 of the valve group 133 are opened, If the pump P1 is operated, the cleaning liquid stored in the tank 106 can be supplied from all the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f.
  • valves 132a, 132b, 132c, 132d, 132e, 132f of the valve group 132 are opened, and all the valves 133a, 133b, 133c, 133d, 133e, 133f and the valve 134 of the valve group 133 are opened. If the valve 135 is closed and the pump P2 is operated, the pure water stored in the tank 107 can be supplied from all the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f.
  • valves 132a, 132b, 132c, 132d, 132e, 132f and the valve 134 of the valve group 132 are opened, and all the valves 133a, 133b, 133c, 133d, 133e of the valve group 133 are opened.
  • 133f is opened, the valve 135 is closed, and the pump P2 is operated, the pure water stored in the tank 107 is passed through the tube 137 and the tube 138 to all the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e. , 131f.
  • the cleaning liquid supply flow paths for all the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f can be cleaned with pure water.
  • the cleaning liquid supplied from all the nozzles 131a, 131b, 131c, 131d, 131e, and 131f is supplied to the substrate W located in the cleaning unit 130 in the pathological specimen preparation apparatus 100.
  • the substrates W are not placed on all the stages 10 of the plurality of stage portions 110, if the number of substrates W to be produced is placed in order from the left side in the X direction, the stage W on which the substrates W are placed is placed.
  • the cleaning liquid can be supplied to each substrate W by opening and closing the corresponding valve.
  • the stage 10 can be tilted by the stage tilting mechanism.
  • the reagent Rs dropped onto the substrate W placed on the stage 10 and the supplied cleaning liquid Cs can be discharged via the liquid discharge guide portion 126.
  • the cleaning liquid Cs containing the reagent Rs is caused to flow through the second discharge channel 142 by driving the motor 144 of the channel switching mechanism 140. It can be stored in the tank 109.
  • the cleaning liquid Cs containing the reagent Rs is caused to flow through the first discharge channel 141 by driving the motor 144 of the channel switching mechanism 140, so that the tank 108 can be stored.
  • FIGS. 16 is a schematic perspective view showing the configuration of the reagent supply unit
  • FIG. 17 is a perspective view showing the cartridge
  • FIG. 18 is a schematic plan view for explaining the movement of the reagent supply unit.
  • the reagent supply unit 150 is a device that supplies the reagent Rs filled in the cartridge 50 to the substrate W placed on the stage 10 of the stage unit 110.
  • the reagent supply unit 150 includes a support frame 151, a cartridge holder 155 as a plurality of holding units to which the cartridge 50 can be attached and detached, a timing belt 156, a pair of timing pulleys 154a and 154b, a motor 157, and an electric pusher 158. .
  • the support frame 151 is a structure that supports the pair of timing pulleys 154a and 154b, the motor 157, and the electric pusher 158, and extends in the X direction across the two third plates 103 of the pathological specimen preparation apparatus 100. And a top surface portion 153 disposed to face the pier portion 152 in the Z direction. A pair of timing pulleys 154a and 154b are provided on both ends in the X direction between the bridge pier 152 and the upper surface 153. A motor 157 is disposed on the upper surface portion 153. One (right side in the X direction) of the pair of timing pulleys 154a and 154b is rotatably supported between the bridge pier portion 152 and the upper surface portion 153. The other (left side in the X direction) timing pulley 154b is connected to a motor 157, and its rotation is electrically controlled.
  • the motor 157 is, for example, a stepping motor.
  • a timing belt 156 is stretched between a pair of timing pulleys 154a and 154b.
  • a plurality (nine) of cartridge holders 155 are attached to the timing belt 156.
  • a total of 18 cartridges 50 can be attached to a plurality (9) of cartridge holders 155.
  • a plurality (9) of cartridge holders 155 mounted on the timing belt 156 can be moved freely in the X direction.
  • the configuration including the pair of timing pulleys 154a and 154b, the timing belt 156, and the motor 157 is an example of the conveying unit of the present invention.
  • the upper surface portion 153 is attached to the pier portion 152 so as to protrude to the rear side in the Y direction.
  • a plurality (six) of electric pushers 158 are provided on the upper surface portion 153 protruding from the pier portion 152.
  • the electric pusher 158 includes a motor 158a, a male screw 158b, and a support column 158c for the male screw 158b.
  • the motor 158a is, for example, a direct-acting stepping motor, and is screwed into the male screw 158b to move the male screw 158b up and down in the Z direction. Accordingly, the electric pusher 158 can pressurize the cartridge 50 mounted on the cartridge holder 155 from the upper side in the Z direction to the lower side with the male screw 158b.
  • the timing belt 156 is provided with not only the cartridge holder 155 but also a CCD 161 as an imaging unit in the present invention via a support member.
  • the cartridge 50 capable of discharging the reagent Rs will be described with reference to FIG.
  • the cartridge 50 includes a first case 51 filled with the reagent Rs, a cylindrical second case 52 provided with a nozzle portion 52 a on the bottom surface, and a lid portion of the first case 51. 53.
  • a rectangular opening 52 b is provided on the side of the second case 52 on the side close to the accommodation opening.
  • a locking portion 52c is provided on the side near the bottom of the side surface provided with the opening 52b.
  • a locking portion 51 b is also provided on the side surface of the first case 51.
  • the first case 51 has an accommodating portion 51a capable of storing the reagent Rs and a communicating portion that communicates with the accommodating portion 51a and can be connected to the nozzle portion 52a of the second case 52.
  • a predetermined amount of reagent Rs is injected into the storage part 51 a from the storage port of the first case 51, and the cover part 53 closes the lid.
  • the lid 53 After injecting the reagent Rs into the first case 51 and sealing the cartridge 50, the lid 53 is pressed and the first case 51 is pushed down with respect to the second case 52. Thus, a predetermined amount of reagent Rs can be discharged from the nozzle portion 52a.
  • the cartridge holder 155 is provided with square holes 155a and 155b, and as shown in FIG. 17, a locking portion 52c is provided on the side surface of the second case 52 of the cartridge 50. ing. Therefore, when the cartridge 50 is inserted into the cartridge holder 155, one of the two holes 155a and 155b and the locking portion 52c are locked, and the cartridge 50 is mounted on the cartridge holder 155 and the second case 52 is mounted. Can be fixed so that it does not move.
  • the cartridge 50 mounted on the cartridge holder 155 can be moved to a position overlapping the electric pusher 158.
  • the electric pusher 158 presses the lid portion 53 of the cartridge 50 as described above, and discharges the reagent Rs from the nozzle portion 52a of the cartridge 50.
  • a predetermined amount of the reagent Rs is accurately applied to the tissue sample Ts of the substrate W placed on the stage 10. Can be dripped.
  • the timing belt 156 is equipped with the CCD 161 as an imaging unit. Therefore, by driving the motor 157, the CCD 161 can be freely moved in the X direction. Therefore, in the plurality of stage units 110 arranged in the X direction, it is possible to image the substrate W placed on the stage 10 by the CCD 161. By imaging the substrate W with the CCD 161, the state of the tissue specimen Ts fixed to the substrate W and the information related to the tissue specimen Ts described in the marking region 3 can be obtained as an image.
  • the cartridge 50 can be opposed to the barcode reader 162 attached to the support plate 136 of the cleaning unit 130 described above. If a barcode associated with the information of the reagent Rs accommodated on the side surface of the cartridge 50 facing the barcode reader 162 is given, the barcode reader 162 can read the barcode.
  • the barcode given to the cartridge 50 is a one-dimensional barcode or a two-dimensional barcode, and a device capable of reading these barcodes is selected as the barcode reader 162.
  • FIG. 19 is a schematic perspective view showing the configuration of the electric field stirring unit
  • FIG. 20 is a schematic cross-sectional view showing the shape of the electrode of the electric field stirring unit.
  • the electric field stirring unit 170 includes the upper electrode 20 and a support frame 171.
  • the upper electrode 20 has a rectangular shape in which one side is longer than the other side.
  • the support frame 171 is used to bridge the long thin upper electrode 20 across the two third plates 103 of the pathological specimen preparation apparatus 100 (see FIG. 4).
  • the support frame 171 is fixed to a pair of leg portions 172a and 172b that are opposed to each other with an interval in the X direction, and a pair of guides that are fixed to the pair of leg portions 172a and 172b and that are opposed to each other with an interval in the Y direction. Parts 173a and 173b.
  • Each of the pair of guide portions 173a and 173b has a structure having a groove into which the upper electrode 20 can be inserted from the right side in the X direction.
  • a support plate 174 is bridged in the Y direction at the left ends of the pair of guide portions 173a and 173b, and a micro switch 175 is provided on the support plate 174.
  • the micro switch 175 is provided to detect whether or not the left end in the X direction of the upper electrode 20 is disposed at a predetermined position when the upper electrode 20 is inserted along the pair of guide portions 173a and 173b. ing. That is, the plate-like upper electrode 20 can be attached to and removed from the support frame 171 at a predetermined position.
  • a groove 21 is provided on the surface of the upper electrode 20 facing the stage 10 (that is, the lower electrode 10).
  • the groove 21 is formed to extend in the short side direction of the upper electrode 20, that is, in the Y direction when the upper electrode 20 is set on the support frame 171 so as to cross the upper electrode 20.
  • the stage 10 and the upper electrode 20 may be electrically short-circuited and electric field stirring may be stopped.
  • the direction of the Coulomb force acting on the solution S is a direction toward the edge portion of the groove 21 and changes compared to the case where the groove 21 is not provided, the solution S can be more effectively stirred. . Therefore, the position of the upper electrode 20 in the X direction so that the groove 21 formed in the upper electrode 20 faces the central portion in the X direction of the stage 10 on which the substrate W on which the solution S is formed is placed. Must be positioned securely.
  • FIG. 21 is a schematic perspective view showing an exterior cover of the pathological specimen preparation apparatus.
  • the exterior cover 190 of the pathological specimen preparation apparatus 100 has a structure that can protect the pathological specimen preparation apparatus 100 from the surrounding environment.
  • the four tanks 106, 107, 108, 109 and the circuit unit 180 disposed on the lower first plate 101 in the frame 105 are not covered and exposed to the surroundings. That is, the four tanks 106, 107, 108, 109 can be set / reset, and the circuit unit 180 having a heat source such as a power supply unit can dissipate heat to the surroundings.
  • the exterior cover 190 includes a front plate 191 that covers a middle front portion of the pathological specimen preparation apparatus 100, a side plate 192 that covers a side surface in the X direction, a middle plate 193 that covers a middle step portion in the Z direction, and a Z direction. And an upper surface plate 194 that covers the upper side.
  • a first opening / closing portion 195 that covers the stepped portion between the front plate 191 and the middle plate 193 so as to be opened and closed
  • a second opening / closing portion 196 that covers the stepped portion between the middle plate 193 and the upper surface plate 194 so as to be opened and closed.
  • the side plate 197 configured to be openable and closable so that the upper electrode 20 can be set and reset, and the rear side in the Y direction of the pathological specimen preparation device 100 are provided. It has a rear plate (not shown in FIG. 21) for covering.
  • the front plate 191 has a width that covers the space between the second plate 102 and the third plate 103 of the frame 105.
  • Examples of the member used for the exterior cover 190 include a resin plate such as transparent polyethylene terephthalate (PET). Further, in order to prevent unnecessary electromagnetic waves from being emitted to the outside from the electric field stirring unit 170, the circuit unit 180, and the like, it is preferable to provide an electromagnetic shield capable of shielding electromagnetic waves on the resin plate.
  • a resin plate such as transparent polyethylene terephthalate (PET).
  • FIG. 22 is a block diagram showing an electrical and mechanical configuration of the pathological specimen preparation system.
  • the pathological specimen preparation apparatus 100 includes the stage unit 110, the cleaning unit 130, the reagent supply unit 150, and the electric field stirring unit 170. Further, a motor driver 181, a high voltage generation unit 182, an I / O 183, a Peltier controller 184, a control unit 185, a DC power supply unit 186, a USB hub 187, a CCD 161 as an imaging unit, and a barcode reader 162 are provided.
  • the motor driver 181 is a circuit board on which a circuit for driving and controlling motors included in each of the stage unit 110, the cleaning unit 130, and the reagent supply unit 150 is mounted.
  • the high voltage generation unit 182 is a device that generates a periodically changing potential as described above and applies the potential to the pair of electrodes 10 and 20 of the electric field stirring unit 170.
  • a Peltier element 15 as a heating element for heating the stage 10 and a temperature sensor 16 for detecting the temperature of the stage 10 are attached to the stage 10 of the stage unit 110.
  • the Peltier controller 184 is connected to the control unit 185 via the USB hub 187.
  • the temperature sensor 16 is connected to the control unit 185 via the I / O 183.
  • the Peltier controller 184 controls the temperature of the Peltier element 15 by controlling the current flowing through the Peltier element 15 based on the control signal from the control unit 185.
  • the Peltier controller 184 of this embodiment includes a microcomputer related to the temperature control of the Peltier element 15, but the microcomputer may be included in the control unit 185.
  • the CCD 161 and the barcode reader 162 are connected to the control unit 185 via the USB hub 187.
  • the CCD 161 is provided so as to be able to image the substrate W placed on the stage 10 as described above.
  • the control unit 185 can obtain information on the tissue specimen Ts fixed to the substrate W from the image information of the substrate W imaged by the CCD 161.
  • the barcode reader 162 is provided so as to be able to read the barcode attached to the cartridge 50 mounted on the reagent supply unit 150 as described above.
  • the control unit 185 can obtain information on the reagent Rs filled in the cartridge 50 from the barcode read by the barcode reader 162.
  • the circuit unit 180 includes at least a motor driver 181, a high voltage generation unit 182, an I / O 183, a Peltier controller 184, a control unit 185, a DC power supply unit 186, and a USB hub 187.
  • the DC power supply unit 186 generates and supplies a DC voltage required as a power supply in each part of the circuit unit 180 from an AC power supply of 100 V supplied from the outside.
  • the control unit 185 is connected to the computer 500 via a USB hub 187 and a USB terminal.
  • the computer 500 includes a main body 501 having a CPU 502, a memory 503 as a storage unit, and terminals (HDMI (registered trademark), LAN, USB) for connecting to various peripheral devices.
  • a mouse 504 and a keyboard 505 related to an input operation to the computer 500 are connected to the USB terminal.
  • a barcode reader 506 and a label printer 507 different from the barcode reader 162 provided in the pathological specimen preparation apparatus 100 are connected to the other USB terminals.
  • a monitor 508 is connected to the HDMI terminal.
  • the monitor 508 may be a display device that displays various types of information sent from the computer 500, or may be a display device and an input device. For example, a network related to information management in the pathology department is connected to the LAN terminal.
  • the barcode reader 506 is mainly used to read a barcode attached to a reagent container such as a bottle containing the reagent Rs.
  • the computer 500 obtains information about the reagent Rs from the read barcode, and can print a barcode label to be attached to the cartridge 50 filled with the reagent Rs with the label printer 507.
  • the memory 503 of the computer 500 stores various pathological specimen preparation protocols related to the above-described pathological specimen preparation method.
  • the memory 503 in which the pathological specimen preparation protocol is stored may be an internal storage device such as a ROM, a RAM, or an HDD, or an external storage device that is connected to a USB terminal.
  • the operator can specify a pathological specimen preparation protocol stored in the computer 500 and drive and control the pathological specimen preparation apparatus 100 by the computer 500 to prepare a pathological specimen.
  • the computer 500 causes the information on the reagent Rs filled in the cartridge 50 and the designated pathological specimen preparation protocol. Collation with the information of the reagent Rs in can be executed. Thereby, it is possible to thoroughly manage whether or not the reagent Rs used for the preparation of the pathological specimen is correctly applied.
  • the computer 500 can acquire an image of the substrate W imaged by the CCD 161 and execute an operation for associating the image with the designated pathological specimen preparation protocol. Thereby, traceability of the pathological specimen prepared by the designated pathological specimen preparation protocol can be established. That is, the traceability of the pathological specimen can be improved as compared with the visual confirmation by the operator.
  • the configuration of the pathological specimen preparation system 1000 is not limited to this, and may include other apparatuses used for pathological diagnosis such as an apparatus that performs image analysis on the staining state of tissues and cells.
  • UPS uninterruptible power supply
  • FIG. 23 is a table showing a pathological specimen preparation process by immunohistochemical staining in Example 1
  • FIG. 24 is a table showing a pathological specimen preparation process in immunohistochemical staining of Comparative Example 1.
  • the pathological specimen preparation process by IHC of Example 1 includes a first process of fixing the sliced tissue specimen Ts to the substrate W, a second process of cleaning the fixed tissue specimen Ts, A third step for removing endogenous PO (Peroxidase) from the tissue specimen Ts, a fourth step for washing the tissue specimen Ts from which the endogenous PO has been removed, a fifth step for performing a primary antibody reaction, and a primary antibody reaction treatment are performed. A sixth step for washing the tissue specimen Ts, a seventh step for carrying out a secondary antibody reaction, an eighth step for washing the tissue specimen Ts subjected to the secondary antibody reaction, and a step for coloring the washed tissue specimen Ts.
  • endogenous PO Peroxidase
  • a tenth step for washing the developed tissue specimen Ts an eleventh step for nuclear staining the washed tissue specimen Ts, a twelfth step for washing the nuclear tissue specimen Ts, and a washed tissue specimen Ts 13th step of sealing, sealed
  • These steps are stored in the memory 503 of the computer 500 as a pathological specimen preparation protocol on the assumption that the pathological specimen preparation system 1000 is used.
  • the computer 500 sends a control signal based on the pathological specimen preparation protocol to the control section 185 of the pathological specimen preparation apparatus 100 in each of the second to twelfth processes, and the control section 185 drives and controls the pathological specimen preparation apparatus 100. Then, the processes of the second process to the twelfth process are performed.
  • Example 1 After placing a frozen section obtained by slicing a porcine liver block as a tissue specimen Ts inside the water-repellent ring 2 of the substrate 1, the substrate 1 is immersed in acetone for 2 minutes. As a result, the frozen section is attached to the substrate 1 and fixed. That is, the substrate W on which the tissue specimen Ts is fixed is obtained. Then, the process proceeds to the second step.
  • the substrate W is placed on the stage 10 of the pathological specimen preparation apparatus 100.
  • the control unit 185 drives and controls the stage transport mechanism (motor 115), and transports the stage 10 from the origin once to the cleaning unit 130 after passing the cleaning unit 130 once.
  • the control unit 185 drives and controls the valve associated with the pump P1, discharges the cleaning liquid Cs stored in the tank 106 from the nozzle 131, and drips for 30 seconds.
  • PBS-T PBS containing Tween 20, which is a nonionic surfactant having a blocking action
  • PBS-T is supplied to the substrate W and cleaning is performed with the stage 10 tilted by the stage tilting mechanism.
  • the PBS-T used for cleaning is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 126 to the first discharge channel 141 by the channel switching mechanism 140 and is discharged and stored in the tank 108. Then, the process proceeds to the third step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • a reagent (3% by volume hydrogen peroxide) for removing endogenous PO is selected based on the pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the amount of the reagent (3% by volume of hydrogen peroxide solution) dropped is, for example, 150 ⁇ L (microliter) although it depends on the size of the water repellent ring 2.
  • the substrate W After supplying a predetermined amount of reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) to the substrate W, it is allowed to stand for 1 minute on the spot to remove endogenous PO from the tissue specimen Ts (blocking endogenous PO). And it progresses to a 4th process.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • stage conveyance mechanism motor 115
  • the cleaning unit 130 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. And it progresses to a 5th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • a primary antibody reagent Hep-par1 that binds to a protein contained in hepatocytes
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the primary antibody reagent so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 150 ⁇ L of the primary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 In the electric field stirring unit 170, the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the solution S of the primary antibody reagent supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring is 5 minutes. Then, the process proceeds to the sixth step.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • stage conveyance mechanism motor 115
  • cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • a secondary antibody reagent (Envision + Dual Link, which is a sensitizing reagent using dextran polymer and peroxidase) is selected based on a pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the secondary antibody reagent so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 150 ⁇ L of the secondary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 In the electric field stirring unit 170, the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the secondary antibody reagent solution S supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring is 5 minutes. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • stage conveyance mechanism motor 115
  • cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the ninth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the reagent supply unit 150 selects a reagent (3,3′-Diaminobenzidine; DAB) that causes color development based on the pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the reagent (DAB) so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (DAB) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (DAB) is, for example, 150 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts is allowed to react with the reagent (DAB) to stand for 3 minutes to develop a color. And it progresses to a 10th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • the control unit 185 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W in a state where the stage 10 is tilted.
  • pure water used for cleaning contains a reagent (DAB) containing a carcinogenic substance
  • DAB reagent
  • the pure water is secondly discharged from the inclined substrate W via the liquid discharge guide portion 126 by the flow path switching mechanism 140. It is guided to the flow path 142 and discharged to the tank 109 for storage. And it progresses to the 11th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • a reagent hematoxylin
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the reagent (hematoxylin) so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (hematoxylin) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (hematoxylin) is, for example, 150 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts and the reagent (hematoxylin) are reacted with each other by allowing to stand for 1 minute on the spot to perform nuclear staining (counter staining). And it progresses to a 12th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • the control unit 185 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W in a state where the stage 10 is tilted.
  • the pure water containing the reagent (hematoxylin) is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide part 126 to the first discharge channel 141 by the channel switching mechanism 140 and is discharged and stored in the tank 108.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the origin. Then, the process proceeds to the thirteenth step.
  • the substrate W is taken out of the stage 10 and a water-insoluble encapsulant is dropped onto the substrate W and covered with a cover glass in order to prevent drying of the tissue specimen Ts that has been cleaned. Perform the encapsulation process.
  • the time required for the thirteenth step is approximately 1 minute. And it progresses to 14th process.
  • an image analysis apparatus having an imaging unit is used to capture an image of the sealed tissue sample Ts and perform image analysis, and the staining intensity is digitized.
  • the time required for the 14th step is approximately 1 minute.
  • a pathological diagnosis is performed by preparing a tissue sample Ts with a positive finding and a tissue sample Ts with a negative finding and digitizing and comparing the staining intensity by image analysis. Through the above steps, the preparation of the pathological specimen by the IHC of Example 1 is completed. The time required for preparation of the pathological specimen of Example 1 was about 25 minutes.
  • the pathological specimen preparation process using the IHC of Comparative Example 1 also includes the first to fourteenth processes for manufacturing the substrate W on which the tissue specimen Ts is fixed, as in Example 1. is doing. However, the first to fourteenth steps are performed manually without using the pathological specimen preparation system 1000.
  • the pathological specimen preparation protocol in this case is different from that in the first embodiment.
  • the work contents of each process will be specifically described.
  • the pathological specimen of Comparative Example 1 may be prepared using another pathological specimen preparation apparatus.
  • the first step (fixation of the tissue specimen Ts) of Comparative Example 1 is the same as the first step of Example 1, and a frozen section obtained from a continuous section of the same porcine liver block as Example 1 is used as the tissue specimen Ts.
  • the substrate 1 disposed in the water repellent ring 2 is immersed in acetone for 2 minutes to obtain a substrate W on which the tissue specimen Ts is fixed. Then, the process proceeds to the second step.
  • the substrate W is immersed in 3% by volume of hydrogen peroxide for 1 minute to remove the endogenous PO from the tissue specimen Ts. And it progresses to a 4th process.
  • the primary antibody reaction for example, 150 ⁇ L of the primary antibody reagent (Hep-par1) having the same concentration as in Example 1 is dropped on the tissue specimen Ts of the washed substrate W.
  • the primary antibody reagent is dropped by a method using a micropipette or the like. After dripping the primary antibody reagent, the primary antibody reaction is carried out by standing for 30 minutes. Then, the process proceeds to the sixth step.
  • the seventh step (secondary antibody reaction) of Comparative Example 1 for example, 150 ⁇ L of the secondary antibody reagent (Envision + Dual Link) having the same concentration as in Example 1 is dropped on the tissue specimen Ts of the washed substrate W.
  • the method for dropping the secondary antibody reagent may also be a method using a micropipette or the like, similar to the method for dropping the primary antibody reagent.
  • the secondary antibody reaction is carried out by leaving still for 30 minutes. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • the ninth step (coloring reaction) of Comparative Example 1 for example, 150 ⁇ L of a coloring reagent (DAB) having the same concentration as in Example 1 is dropped on the tissue specimen Ts of the washed substrate W.
  • a coloring reagent DAB
  • Examples of the dropping method of the coloring reagent (DAB) include a method using a micropipette or the like. After dropping the coloring reagent (DAB), the reaction is allowed to stand for 3 minutes to carry out the coloring reaction. And it progresses to a 10th process.
  • hematoxylin a counterstaining reagent having the same concentration as that of Example 1
  • the method for dropping hematoxylin include a method using a micropipette or the like. After dripping hematoxylin, it is allowed to stand for 1 minute to carry out a nuclear dyeing reaction. And it progresses to a 12th process.
  • Example 1 In the twelfth step (cleaning) of Comparative Example 1, pure water is poured over the substrate W for which the nuclear dyeing reaction has been completed for 2 minutes to perform running water cleaning.
  • the thirteenth step (encapsulation) and the fourteenth step (analysis) of Comparative Example 1 are the same as those in Example 1.
  • the time required for preparation of the pathological specimen of Comparative Example 1 was about 75 minutes, which was three times longer than that for Example 25 of about 25 minutes. There was almost no difference in the staining results between Example 1 and Comparative Example 1.
  • electric field agitation was performed in the fifth step (primary antibody reaction) and the seventh step (secondary antibody reaction), thereby significantly reducing the reaction time.
  • IHC using a frozen section is suitably used, for example, when a tissue is collected during surgery for pathological diagnosis. If the operation is stopped during the pathological diagnosis, the patient may be burdened. Therefore, it is preferable that the time required for preparing the pathological specimen is as short as possible.
  • FIG. 25 is a table showing a pathological specimen preparation process by immunohistochemical staining in Example 2
  • FIG. 26 is a table showing a pathological specimen preparation process in immunohistochemical staining of Comparative Example 2.
  • the use of a paraffin-embedded section is superior to the case of using a frozen section in that a collected tissue can be embedded in paraffin and stored for a long period of time, and a pathological specimen can be repeatedly prepared.
  • a deparaffinization process and an antigen activation process are required to restore the moisture in the tissue replaced with paraffin. These processing steps require heating.
  • preparation of a pathological specimen by IHC using the paraffin-embedded section of Example 2 will be described.
  • the pathological specimen preparation method of Example 2 includes a first step of performing deparaffinization processing on a paraffin-embedded section, a second step of cleaning the deparaffinized tissue specimen Ts, and cleaning.
  • a third step of subjecting the tissue specimen Ts to antigen activation processing a fourth step of washing the tissue specimen Ts subjected to antigen activation treatment, a fifth step of removing endogenous PO from the tissue specimen Ts, and an endogenous PO
  • a sixth step for washing the removed tissue specimen Ts a seventh step for conducting a primary antibody reaction, an eighth step for washing the tissue specimen Ts subjected to the primary antibody reaction treatment, a ninth step for carrying out a secondary antibody reaction,
  • a tenth step of washing the tissue specimen Ts subjected to the secondary antibody reaction treatment an eleventh step of coloring the washed tissue specimen Ts, a twelfth step of washing the colored tissue specimen Ts, and the washed tissue specimen
  • steps are stored in the memory 503 of the computer 500 as a pathological specimen preparation protocol on the assumption that the pathological specimen preparation system 1000 is used.
  • the computer 500 sends a control signal based on the pathological specimen preparation protocol to the control section 185 of the pathological specimen preparation apparatus 100 in each of the first to fourteenth steps, and the control section 185 drives and controls the pathological specimen preparation apparatus 100. Then, the processes of the above steps are performed.
  • Example 2 After placing a paraffin-embedded section of a porcine liver block as a tissue specimen Ts inside the water-repellent ring 2 of the substrate 1, the substrate 1 is placed on the stage 10 of the stage unit 110.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the origin to the reagent supply unit 150.
  • the reagent supply unit 150 selects a reagent (deparaffinized solution; for example, EZ buffer (10 ⁇ ) (Roche; 950-102)) used for deparaffinization processing based on the pathological specimen preparation protocol, and the control unit 185 supplies the reagent.
  • the drive unit 150 (motor 157) is controlled to convey the cartridge 50 filled with the reagent (deparaffinized liquid) so as to face the substrate 1. Then, the control unit 185 controls the drive of the electric pusher 158, and the cartridge A reagent (deparaffinized liquid) is dropped from 50 on the substrate 1. In this case, the reagent (deparaffinized liquid) is dropped in an amount of 200 ⁇ L, for example.
  • the control unit 185 controls the Peltier controller 184 to pass a current through the Peltier element 15 to heat the stage 10 to about 75 ° C.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115). Then, the stage 10 is conveyed from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130. In the cleaning unit 130, the stage 10 is tilted by the stage tilting mechanism, and the reagent (deparaffinized liquid) passes from the substrate 1 through the liquid discharge guide unit 126. Then, the waste liquid discharged from the first discharge channel 141 to the tank 108 is processed, and in the first step, such deparaffinization processing and waste liquid processing are repeated three times, and the process proceeds to the second step. .
  • the control unit 185 drives and controls the valves related to the pump P1, and the cleaning liquid (PBS ⁇ ) stored in the tank 106 from the nozzle 131 is controlled. T) is discharged and allowed to flow for 30 seconds.
  • PBS-T is supplied to the substrate 1 and cleaning is performed with the stage 10 tilted by the stage tilting mechanism. PBS-T used for cleaning is guided from the inclined substrate 1 through the liquid discharge guide 126 to the first discharge channel 141 by the channel switching mechanism 140 and discharged to the tank 108.
  • the paraffin-embedded section is subjected to a deparaffinization process, and a substrate W in which the tissue specimen Ts is fixed to the substrate 1 is obtained.
  • the control unit 185 detects the output from the temperature sensor 16 attached to the stage 10 and controls the Peltier controller 184 so as to keep the temperature of the stage 10 at 75 ° C. Then, the process proceeds to the third step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • a reagent (activation liquid) used for the antigen activation process is selected based on the pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) and transports the cartridge 50 filled with the reagent (activation liquid) so as to face the substrate W. Then, the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (activation liquid) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (activation liquid) is, for example, 200 ⁇ L.
  • the controller 185 controls the Peltier controller 184 to increase the temperature of the stage 10 from 75 ° C. to 95 ° C.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with oil (liquid paraffin) as a reagent so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop oil from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dripping amount of oil is, for example, 200 ⁇ L.
  • the activation liquid is coated with oil to prevent the activation liquid from being evaporated by heating. Then, the tissue specimen Ts and the reagent (activation liquid) are reacted after leaving still for 40 minutes on the spot to perform an antigen activation process.
  • the control unit 185 controls the Peltier controller 184 to stop energization of the Peltier element 15, and is allowed to stand for 20 minutes to naturally cool the stage 10. Note that the direction of the current flowing through the Peltier element 15 may be reversed by the Peltier controller 184 and the stage 10 may be cooled by the Peltier element 15. And it progresses to a 4th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the valves related to the pump P1, and discharges the cleaning liquid (PBS-T) stored in the tank 106 from the nozzle 131, for 30 seconds. Run down and wash.
  • the cleaning liquid (PBS-T) is discharged to the tank 108. And it progresses to a 5th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157), and is filled with a reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) for removing endogenous PO.
  • the cartridge 50 thus transferred is conveyed so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) is, for example, 200 ⁇ L.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • stage conveyance mechanism motor 115
  • the cleaning unit 130 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 controls the drive of the reagent supply unit 150 (motor 157) so that the cartridge 50 filled with the primary antibody reagent (Hep-par1) faces the substrate W. Transport as you do.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 200 ⁇ L of the primary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the solution S of the primary antibody reagent supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring is 10 minutes. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • the cleaning unit 130 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the ninth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 controls the drive of the reagent supply unit 150 (motor 157) so that the cartridge 50 filled with the secondary antibody reagent (Envision + Dual Link) faces the substrate W. Transport as you do.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 200 ⁇ L of the secondary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the secondary antibody reagent solution S supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring is 7 minutes. And it progresses to a 10th process.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • stage conveyance mechanism motor 115
  • the cleaning unit 130 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. And it progresses to the 11th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) based on the pathological specimen preparation protocol, and the cartridge 50 filled with the reagent (DAB) for performing color development is used as the substrate W. Transport to face each other.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (DAB) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (DAB) is, for example, 200 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts is allowed to react with the reagent (DAB) to stand for 3 minutes to develop a color. And it progresses to a 12th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • the control unit 185 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W in a state where the stage 10 is tilted.
  • Pure water containing a reagent (DAB) containing a carcinogenic substance is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 126 to the second discharge channel 142 by the channel switching mechanism 140 and discharged to the tank 109. Then, the process proceeds to the thirteenth step.
  • DAB reagent
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) and is a cartridge filled with a reagent (hematoxylin) for performing nuclear staining (counter-staining). 50 is transferred so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (hematoxylin) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (hematoxylin) is, for example, 200 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts and the reagent (hematoxylin) are reacted with each other by allowing to stand for 1 minute on the spot to perform nuclear staining (counter staining). And it progresses to 14th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W while the stage 10 is tilted by the stage tilting mechanism.
  • the pure water containing the reagent (hematoxylin) is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 126 to the first discharge channel 141 by the channel switching mechanism 140 and is discharged and stored in the tank 108.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the origin. And it progresses to 15th process.
  • the process up to the 14th step is executed using the pathological specimen preparation device 100.
  • the substrate W is taken out of the stage 10, and water is removed from the tissue specimen Ts using ethanol in order to further improve the contrast ratio in the staining of the tissue specimen Ts that has been subjected to nuclear staining.
  • a dehydration process and a penetration process for improving the transparency of the tissue specimen Ts by replacing ethanol with xylene are performed. Specifically, five tanks storing absolute ethanol (99.5% by volume or more) and the same five tanks storing xylene are prepared. Soak. Therefore, the time required for immersion is 100 seconds. And it progresses to the 16th process. In the dehydration process, five tanks of ethanol whose concentration is gradually changed from 75% by volume to 99.5% by volume or more may be used.
  • a water-insoluble encapsulant is dropped onto the substrate W, and an encapsulating process is performed to cover the cover glass.
  • the time required for the encapsulation process is approximately 1 minute. Then, the process proceeds to the 17th step.
  • an image analysis apparatus having an imaging unit is used to image a tissue sample Ts that has been subjected to penetration processing, image analysis is performed, and the staining intensity is digitized.
  • the time required for the analysis process is approximately one minute.
  • a pathological diagnosis is performed by preparing a tissue sample Ts with a positive finding and a tissue sample Ts with a negative finding and digitizing and comparing the staining intensity by image analysis.
  • the time required for preparation of the pathological specimen of Example 2 was about 96 minutes.
  • the pathological specimen preparation process by IHC in Comparative Example 2 also includes the first process for performing deparaffinization processing to the 17th process for performing analysis in the same manner as in Example 2.
  • the first to 17th steps are performed manually without using the pathological specimen preparation system 1000.
  • the pathological specimen preparation protocol in this case is different from that in Example 2.
  • the work contents of each process will be specifically described.
  • the pathological specimen of Comparative Example 2 may be prepared using another pathological specimen preparation apparatus.
  • the substrate 1 in which the paraffin-embedded section obtained from the continuous section of the same porcine liver block as in Example 2 is disposed in the water-repellent ring 2 as the tissue specimen Ts.
  • the time required for the first step is 14 minutes (9 minutes + 5 minutes). Then, the process proceeds to the second step.
  • the substrate W on which the tissue specimen Ts is fixed is immersed in an activation solution heated to 95 ° C. for 40 minutes. Then, the substrate W is taken out from the activation liquid and left at room temperature for 20 minutes to be naturally cooled. And it progresses to a 4th process.
  • the substrate W is immersed in 3% by volume of hydrogen peroxide for 5 minutes to remove the endogenous PO from the tissue specimen Ts. Then, the process proceeds to the sixth step.
  • the substrate W is cleaned by immersing the substrate W in three tanks in which PBS-T is stored in order for 10 seconds. Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the primary antibody reagent Hep-par1 at the same concentration as in Example 2 is used for the tissue specimen Ts of the washed substrate W using, for example, a micropipette. 200 ⁇ L is dropped. After dripping the primary antibody reagent, the primary antibody reaction is carried out by standing for 30 minutes. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • the secondary antibody reagent (Envision + Dual Link) having the same concentration as in Example 2 is applied to the tissue specimen Ts of the washed substrate W using, for example, a micropipette. For example, 200 ⁇ L is dropped. After the secondary antibody reagent is dropped, the secondary antibody reaction is carried out by leaving still for 30 minutes. And it progresses to a 10th process.
  • the substrate W is cleaned by immersing the substrate W in three tanks in which PBS-T is stored in order for 10 seconds in the same manner as in the second step. And it progresses to the 11th process.
  • Example 2 In the eleventh step (coloring reaction) of Comparative Example 2, for example, 200 ⁇ L of a coloring reagent (DAB) having the same concentration as in Example 2 is dropped onto the tissue specimen Ts of the washed substrate W using, for example, a micropipette. After dropping the coloring reagent (DAB), the reaction is allowed to stand for 3 minutes to carry out the coloring reaction. And it progresses to a 12th process.
  • DAB coloring reagent
  • the 14th step (cleaning) of Comparative Example 2 pure water is sprinkled over the substrate W after the nuclear dyeing reaction for 2 minutes to perform running water cleaning. And it progresses to 15th process.
  • the fifteenth step (transparent), the sixteenth step (encapsulation), and the seventeenth step (analysis) are the same as in the second embodiment.
  • the time required for the preparation of the pathological specimen of Comparative Example 2 was about 154 minutes, and it took an extra 58 minutes (about 1 hour) compared to about 96 minutes in Example 2. There was almost no difference in the staining results between Example 2 and Comparative Example 2.
  • the working time could be shortened by using the pathological specimen preparation system 1000 (pathological specimen preparation apparatus 100) from the first step to the fourteenth step.
  • FIG. 27 is a table showing a pathological specimen preparation process by in situ hybridization in Example 3
  • FIG. 28 is a table showing a pathological specimen preparation process in in situ hybridization of Comparative Example 3.
  • IHC immunohistochemical staining
  • mRNA messenger RNA
  • probes For the detection of mRNA, specific binding (hybridization) between single-stranded nucleic acid molecules using complementary base sequences is used. Nucleic acid molecules used for detection are called probes. Since the probe used as a reagent is relatively expensive, it is one of the important matters to reduce the size and thickness of the tissue specimen Ts to save the probe usage.
  • the method for preparing a pathological specimen by ISH of Example 3 is a method using a paraffin-embedded section, and is a first step of performing a deparaffinization process, and washing the deparaffinized tissue specimen Ts.
  • Step 6 Sixth step for performing hybridization, Seventh step for washing tissue specimen Ts subjected to hybridization, Eighth step for performing primary antibody reaction, First step for washing tissue specimen Ts subjected to primary antibody reaction treatment 9 steps, 10th step for performing secondary antibody reaction, 11th step for washing tissue specimen Ts subjected to secondary antibody reaction treatment, 12th step for coloring developed tissue specimen Ts, color development A thirteenth step of washing the washed tissue specimen Ts, a fourteenth step of nuclear staining the washed tissue specimen Ts, a fifteenth step of washing the nuclear tissue specimen Ts, and a first step of penetrating the washed tissue specimen Ts.
  • steps 16 steps, a 17th step of enclosing the transparent tissue specimen Ts, and an 18th step of analyzing the image of the encapsulated tissue specimen Ts to digitize the staining intensity.
  • steps are stored in the memory 503 of the computer 500 as a pathological specimen preparation protocol on the assumption that the pathological specimen preparation system 1000 is used.
  • the computer 500 sends a control signal based on the pathological specimen preparation protocol to the control section 185 of the pathological specimen preparation apparatus 100 in each of the fifth to fifteenth processes, and the control section 185 drives and controls the pathological specimen preparation apparatus 100. Then, the processes of the above steps are performed.
  • the first step (deparaffinization treatment), the second step (cleaning), the third step (removal of endogenous PO), and the fourth step (washing) of Example 3 are the first step (deparaffinization treatment) of Example 2 above. ), The second step (cleaning), the fifth step (endogenous PO removal), and the sixth step (cleaning).
  • the fifth step (thermal denaturation treatment) of Example 3 is a heat treatment for separating the double-stranded nucleic acid of the cells in the tissue specimen Ts into single strands.
  • the fifth step different from the second embodiment will be described.
  • the substrate W on which the tissue specimen Ts from which endogenous PO has been removed is fixed is placed on the stage 10 of the pathological specimen preparation apparatus 100.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the origin to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with the reagent (probe) so as to face the substrate W.
  • the controller 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (probe) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the amount of reagent (probe) dropped in this case is, for example, 10 ⁇ L.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with oil (liquid paraffin) as a reagent so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop oil from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the amount of oil dropped is 40 ⁇ L, for example. That is, the probe is covered with oil to prevent evaporation of the probe due to heating.
  • oil is added to the reagent (probe) to increase the volume of the solution S during electric field stirring.
  • the control unit 185 controls the Peltier controller 184 to flow a current through the Peltier element 15, thereby heating the stage 10 to 95 ° C. and allowing it to stand for about 10 minutes. Thereafter, the power supply to the Peltier element 15 is stopped and natural cooling is performed for 20 minutes. Then, the process proceeds to the sixth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 controls the Peltier controller 184 to flow current to the Peltier element 15, thereby heating the stage 10 to 37 ° C. and generating an electric field between the pair of electrodes 10 and 20.
  • the solution S containing the probe and oil is stirred in the electric field.
  • the time required for the electric field stirring is 180 minutes. Accordingly, hybridization (complementary binding reaction) is performed by reacting the heat-denatured tissue specimen Ts (ie, single-stranded nucleic acid) with the reagent (probe). Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage transport mechanism (motor 115), and transports the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 controls the drive of the pump P1 and related valves, and discharges the cleaning liquid (PBS-T) stored in the tank 106 from the nozzle 131. Then, it is washed for 30 seconds. The cleaning liquid (PBS-T) is discharged to the tank 108. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 controls the drive of the reagent supply unit 150 (motor 157) so that the cartridge 50 filled with the primary antibody reagent (Hep-par1) faces the substrate W. Transport as you do.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 30 ⁇ L of the primary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with oil (liquid paraffin) as a reagent so as to face the substrate W. Then, the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop oil from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the amount of oil dropped is, for example, 30 ⁇ L. That is, the primary antibody reagent is coated with oil to prevent the primary antibody reagent from evaporating. Further, in order to efficiently perform subsequent electric field stirring, oil is added to the primary antibody reagent to increase the volume of the solution S during electric field stirring.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 In the electric field stirring unit 170, the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the solution S containing the primary antibody reagent and oil supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring in this case is 5 minutes. Then, the process proceeds to the ninth step.
  • the control unit 185 drives and controls the stage transport mechanism (motor 115), and transports the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • the down-flow cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the seventh step (cleaning). And it progresses to a 10th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 controls the drive of the reagent supply unit 150 (motor 157) so that the cartridge 50 filled with the secondary antibody reagent (Envision + Dual Link) faces the substrate W. Transport as you do.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop, for example, 30 ⁇ L of the secondary antibody reagent from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) to transport the cartridge 50 filled with oil (liquid paraffin) as a reagent so as to face the substrate W. Then, the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop oil from the cartridge 50 onto the substrate W. In this case, the amount of oil dropped is, for example, 30 ⁇ L. That is, the secondary antibody reagent is coated with oil to prevent the secondary antibody reagent from evaporating. Further, in order to efficiently perform subsequent electric field stirring, oil is added to the secondary antibody reagent to increase the volume of the solution S during electric field stirring.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the electric field stirring unit 170.
  • the control unit 185 In the electric field stirring unit 170, the control unit 185 generates an electric field between the pair of electrodes 10 and 20 to stir the solution S containing the secondary antibody reagent and oil supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring in this case is 5 minutes. And it progresses to the 11th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage transport mechanism (motor 115), and transports the stage 10 from the electric field stirring unit 170 to the cleaning unit 130.
  • the down-flow cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the seventh step (cleaning). And it progresses to a 12th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) based on the pathological specimen preparation protocol, and the cartridge 50 filled with the reagent (DAB) for performing color development is used as the substrate W. Transport to face each other.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (DAB) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (DAB) is, for example, 60 ⁇ L.
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the washing unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • the control unit 185 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W in a state where the stage 10 is tilted.
  • Pure water containing a reagent (DAB) containing a carcinogenic substance is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 126 to the second discharge channel 142 by the channel switching mechanism 140 and discharged to the tank 109. The And it progresses to 14th process.
  • DAB reagent
  • the control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115), and conveys the stage 10 from the cleaning unit 130 to the reagent supply unit 150.
  • the control unit 185 drives and controls the reagent supply unit 150 (motor 157) and is a cartridge filled with a reagent (hematoxylin) for performing nuclear staining (counter-staining). 50 is transferred so as to face the substrate W.
  • the control unit 185 drives and controls the electric pusher 158 to drop the reagent (hematoxylin) from the cartridge 50 onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (hematoxylin) is, for example, 100 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts and the reagent (hematoxylin) are reacted with each other by allowing to stand for 1 minute on the spot to perform nuclear staining (counter staining). And it progresses to 15th process.
  • the control unit 185 drives and controls the stage transport mechanism (motor 115) to transport the stage 10 from the reagent supply unit 150 to the cleaning unit 130.
  • the control unit 185 drives and controls the pump P2 and related valves, discharges pure water stored in the tank 107 from the nozzle 131, and drips for 2 minutes.
  • cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W while the stage 10 is tilted by the stage tilting mechanism.
  • the pure water containing the reagent (hematoxylin) is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 126 to the first discharge channel 141 by the channel switching mechanism 140 and is discharged and stored in the tank 108.
  • control unit 185 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 115) to convey the stage 10 from the cleaning unit 130 to the origin. And it progresses to the 16th process. Note that the processes from the fifth process to the fifteenth process are executed using the pathological specimen preparation apparatus 100.
  • the 16th step (transparent), the 17th step (encapsulation), and the 18th step (analysis) of Example 3 are the 15th step (transparent), 16th step (encapsulation), and It is the same as 17 steps (analysis).
  • the time required for preparation of the pathological specimen of Example 3 was about 254 minutes.
  • the pathological specimen preparation process by ISH of Comparative Example 3 also includes the first process for performing the deparaffinization process to the 18th process for performing the analysis in the same manner as in Example 3.
  • the first to fourth steps and the sixteenth to eighteenth steps of Comparative Example 3 are the same as those of the third embodiment.
  • the fifth to fifteenth steps are performed manually without using the pathological specimen preparation system 1000.
  • the pathological specimen preparation protocol in this case is different from that in Example 3.
  • the work contents of the steps different from the third embodiment will be described in detail. If at least the fifth to fifteenth steps of Comparative Example 3 can be reproduced, the pathological specimen of Comparative Example 3 may be prepared using another pathological specimen preparation apparatus.
  • the tissue specimen Ts of Comparative Example 3 uses a paraffin-embedded section obtained from a continuous section of the same porcine liver block as in Example 3.
  • the substrate W is heated to 37 ° C. and allowed to stand for 720 minutes for hybridization. Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the substrate W is washed by rinsing PBS-T as a cleaning solution for 30 seconds. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • the primary antibody reagent (Hep-par1) at the same concentration as in Example 3 is applied to the tissue specimen Ts of the washed substrate W using, for example, a micropipette. For example, 30 ⁇ L is dropped. Subsequently, for example, 30 ⁇ L of oil is dropped. After the primary antibody reagent is coated with oil, the primary antibody reaction is carried out by standing for 20 minutes. Then, the process proceeds to the ninth step.
  • the substrate-W is washed with PBS-T for 30 seconds as in the seventh step (cleaning). And it progresses to a 10th process.
  • the secondary antibody reagent (Envision + Dual Link) having the same concentration as in Example 3 is used for the tissue specimen Ts of the washed substrate W using, for example, a micropipette. For example, 30 ⁇ L. Subsequently, for example, 30 ⁇ L of oil is dropped. After the secondary antibody reagent is coated with oil, it is allowed to stand for 20 minutes to carry out a secondary antibody reaction. And it progresses to the 11th process.
  • the pathological specimen preparation apparatus 100 and the pathological specimen preparation system 1000 including the pathological specimen preparation apparatus 100 the following effects can be obtained. (1) Since the pathological specimen preparation apparatus 100 includes the plurality of stage units 110, a pathological specimen can be prepared using the substrate W on which the maximum six tissue specimens Ts are fixed.
  • stage unit 110 Since the stage unit 110 is disposed on the second plate 102 of the frame 105 including the stage transport mechanism and the stage tilt mechanism, for example, if the stage unit 110 is defective, the stage transport mechanism, Maintenance including exchanging the stage unit 110 in a state including the stage tilting mechanism can be performed.
  • the support rod 121 that rides on the cam 125 pushes up the bottom surface 12 of the stage 10 from below by the movement of the stage 10 being transported toward the origin in the Y direction by the stage transport mechanism.
  • the stage 10 is inclined. Therefore, since a drive system such as a dedicated motor for tilting the stage 10 is not required, a simple apparatus configuration can be achieved.
  • the stage 10 tilts the stage 10 so that the upper surface 11 of the cleaning unit 130 is tilted by 60 degrees or more from the horizontal state. Therefore, the reagent Rs, the cleaning liquid Cs, or the cleaning liquid Cs containing the reagent Rs supplied to the substrate W The substrate W can be reliably discharged. In other words, the reagent Rs, the cleaning liquid Cs, or the cleaning liquid Cs containing the reagent Rs remains on the substrate W, thereby reducing or preventing the influence on various processes in the preparation of the pathological specimen, and appropriately preparing the pathological specimen. can do.
  • the pathological specimen preparation apparatus 100 includes the reagent Rs discharged from the substrate W by the liquid discharge guide unit 126 provided in the stage unit 110 and the flow path switching mechanism 140 disposed on the second plate 102.
  • the cleaning liquid Cs containing the cleaning liquid Cs or the reagent Rs can be discharged to either the tank 108 or the tank 109 which is a waste liquid tank. In other words, when the waste liquid treatment is different depending on the type of liquid to be discharged, the specific liquid can be separately discharged and stored in a specific tank.
  • the time required for the primary antibody reaction, the secondary antibody reaction, or the hybridization in the preparation of the pathological specimen can be shortened.
  • the process to which electric field agitation can be applied is not limited to the primary antibody reaction, the secondary antibody reaction or the hybridization, but may be applied to a color development reaction or a washing process. As a result, the processing time can be further shortened.
  • the Peltier element 15 and the temperature sensor 16 are attached to the stage 10. Further, the pathological specimen preparation apparatus 100 includes a Peltier controller 184. Therefore, it is possible to appropriately deal with the preparation of pathological specimens that require heating of the substrate W, such as deparaffinization, thermal denaturation, and hybridization.
  • the pathological specimen preparation system 1000 includes not only the barcode reader 162 provided in the pathological specimen preparation apparatus 100 but also a barcode reader 506 connected to the computer 500. Therefore, based on the pathological specimen preparation protocol, the management of the reagent Rs filled in the cartridge 50 and the management of the cartridge 50 used in the pathological specimen preparation process, that is, the reagent Rs can be reliably executed.
  • the reagent supply unit 150 of the pathological specimen preparation apparatus 100 is provided with a CCD 161 as an imaging unit so that the substrate W can be imaged. Therefore, the information on the tissue specimen Ts fixed on the substrate W and the tissue specimen Ts described in the marking region 3 can be obtained and managed as an image. That is, it is possible to realize high traceability in which the tissue specimen Ts and the pathological specimen preparation protocol (including information such as the reagent Rs and the cleaning liquid Cs) are reliably associated in the pathological specimen preparation process.
  • FIG. 29 is a schematic perspective view showing the appearance of the pathological specimen preparation apparatus of the second embodiment
  • FIG. 30 is a schematic perspective view showing the configuration of the pathological specimen preparation apparatus of the second embodiment.
  • the pathological specimen preparation apparatus of the second embodiment has basically the same configuration as that of the pathological specimen preparation apparatus 100 of the first embodiment, but the operability, reagent Rs, and washing liquid when pathological specimen preparation is performed. The configuration is improved so as to improve the Cs discharge performance and the remaining amount management of the reagent Rs in the cartridge.
  • symbol is attached
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 of the present embodiment includes a main body 201 having an exterior cover 290 that covers the periphery.
  • the exterior cover 290 is located in the lower front portion of the main body 201, and includes a front plate 291 to which the power switch 202 is attached, a first opening / closing portion 293 located in the upper front portion, an upper surface plate 294, and a pair of side plates. 296.
  • the first opening / closing portion 293 covers the opening 292 that is surrounded by the front plate 291, the upper surface plate 294, and the pair of side plates 296 and opens to the front side so as to be opened and closed.
  • the front plate 291 is provided with an opening 291a that enables setting and resetting of four tanks 205 to 208 described later.
  • One of the pair of side plates 296 is provided with a second opening / closing portion 297 that opens and closes an opening that enables setting and resetting of the upper electrode 20 of an electric field stirring portion 270 (see FIG. 30) described later. Further, a notch 296 a is provided on the lower rear side of the pair of side plates 296. Thereby, even if it arrange
  • the exterior cover 290 has a back plate that covers the back surface above the notch 296a.
  • the first opening / closing part 293 of the exterior cover 290 is formed using a resin material such as ABS, for example, and the front plate 291, the upper plate 294, the side plate 296, and the rear plate are, for example, steel plates plated or painted. It is formed using. Further, in order to prevent unnecessary electromagnetic waves from being emitted to the outside from the electric field stirring unit 270, the circuit unit 280, the high voltage generation unit 281 (see FIG. 30), and the like, which will be described later, It is preferable to provide an electromagnetic shield capable of shielding the above.
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 of the present embodiment includes a display unit 203 having a translucent T / K (touch key) as an input unit that enables an input operation to the apparatus.
  • the display unit 203 is a liquid crystal display device, for example, and is attached to a pair of turnable arm units 295 provided on the upper surface plate 294. Accordingly, the operator can move the display unit 203 to an arbitrary position between a position on the near side overlapping the first opening / closing unit 293 and a position above the upper surface plate 294.
  • the side that can face the display unit 203 of the pathological specimen preparation apparatus 200 is the front
  • the left-right direction is the X direction
  • the front-back direction is the Y direction
  • the up-down direction will be described.
  • the Y direction corresponds to the first direction of the present invention
  • the X direction corresponds to the second direction intersecting the first direction of the present invention.
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 of the present embodiment includes four tanks 205 to 208, a stage unit 210, a cleaning unit 230, a reagent supply unit 250, an electric field stirring unit 270, and a circuit unit. 280, a high voltage generation unit 281 and a frame 204 which is a structure in which these units are arranged.
  • the frame 204 includes, in order from the bottom in the Z direction, a first frame 204a, a second frame 204b, a third frame 204c, and a fourth frame 204d, which are frames that constitute the steps for arranging the above-described parts. Yes.
  • the frame 204 is made of aluminum, for example.
  • first frame 204a which is the lowermost stage of the frame 204, four tanks 205, 206, 207, 208 are arranged in this order in the X direction on the front side in the Y direction.
  • a tank receiving portion capable of arranging four tanks 205 to 208 side by side in the X direction is attached to the first frame 204a.
  • the tank 205 is a buffer solution for preventing the tissue specimen Ts from being dried.
  • phosphate buffered saline (PBS), Tris-Buffered-Saline (TBS), Standard-Saline-Citrate (SSC), etc. Is stored.
  • the tank 206 stores pure water (H 2 O) as another cleaning liquid.
  • the tanks 205 and 206 are examples of the cleaning liquid tank in the present invention.
  • the tank 207 and the tank 208 are prepared for storing the waste liquid of the cleaning liquid Cs and the reagent Rs.
  • the tanks 207 and 208 are examples of waste liquid tanks (first waste liquid tank and second waste liquid tank) in the present invention.
  • the capacity of the tanks 205, 206, 208 is, for example, 3L (liter), and the capacity of the tank 207 is, for example, 5L, which is approximately twice the capacity of other tanks.
  • a resin container such as polyethylene or polypropylene is used in consideration of chemical resistance and weight.
  • some of the reagents Rs include a carcinogenic substance (coloring agent) such as a coloring reagent, and when mixed with other liquids, a predetermined waste liquid treatment is performed.
  • a carcinogenic substance such as a coloring reagent
  • the tank 207 in which the waste liquid of the cleaning liquid Cs and the waste liquid of the reagent Rs are mixed and stored, and the tank 208 that stores the waste liquid containing the color reagent are provided separately.
  • the capacity of the tank 207 is increased with respect to the four tanks 106 to 109 of the pathological specimen preparation apparatus 100 of the first embodiment.
  • This is configured to be able to cope with an increase in the use amount of the cleaning liquid Cs, that is, the amount of waste liquid, mainly depending on the type of pathological specimen preparation protocol.
  • the capacities of the tanks 205 to 208 may all be the same, or may be different as necessary. Further, the number of tanks for storing the cleaning liquid Cs and the waste liquid is not limited to four.
  • the remaining amount detection sensor 265 (not shown in FIG. 30) for detecting the remaining amount of various solutions (cleaning liquid and waste liquid containing pure water) stored in the tanks 205 to 208 is provided in the tanks 205 to 208. It is provided corresponding to each of.
  • a non-contact optical sensor can be used as the remaining amount detection sensor 265. The use of the remaining amount detection sensor 265 will be described later.
  • the circuit unit 280 is disposed on the rear side in the Y direction of the first frame 204a.
  • the circuit unit 280 includes a power supply unit that supplies power to an electrical drive system included in the stage unit 210, the cleaning unit 230, and the reagent supply unit 250, a control unit that controls each unit, and the like.
  • the electrical configuration of the circuit unit 280 will be described in a pathological specimen preparation system described later.
  • the high voltage generator 281 that supplies a high voltage to the electric field stirring unit 270 is attached to the fourth frame 204d above the electric field stirring unit 270. Thus, by arranging the high voltage generation unit 281 near the electric field stirring unit 270, the wiring to which a high voltage is applied can be made shorter than in the first embodiment.
  • the second frame 204b positioned above the first frame 204a is supplied with two pumps for supplying the cleaning liquid Cs from the tank 205 or the tank 206 and supplying the waste liquid of the cleaning liquid Cs and the reagent Rs to the tank 207.
  • a flow path switching mechanism 240 (see FIG. 37) for switching the discharge flow path for discharging separately into the tank 208. The two pumps and the flow path switching mechanism 240 will be described later.
  • the stage unit 210 includes a stage 10R on which the substrate W is placed, a stage transport mechanism that moves the stage 10R in the Y direction, and a stage tilt mechanism that tilts the stage 10R in the X direction.
  • a plurality of (six in this embodiment) stage portions 210 extending in the Y direction are arranged in parallel in the X direction. Details of the stage transport mechanism and the stage tilt mechanism will be described later. Note that the number of stage units 210 is not limited to six. Since each stage unit 210 is individually arranged with respect to the third frame 204c, it can be individually maintained.
  • the cleaning unit 230, the reagent supply unit 250, and the electric field stirring unit 270 are arranged on the third frame 204c in this order in the Y direction.
  • the cleaning unit 230 has a plurality of (six) nozzles corresponding to the number of stages 10R, and can supply each of the plurality of stages 10R with cleaning liquid Cs necessary for cleaning from two types of cleaning liquids Cs. It has become.
  • a plurality of (six) nozzles corresponding to the number of stages 10R are connected to the gas supply means, and gas can be blown from the nozzles to each of the plurality of stages 10R. That is, the cleaning unit 230 has two nozzles for one stage 10R, that is, a total of 12 nozzles.
  • the reagent supply unit 250 is configured to be able to supply a reagent Rs necessary for the reaction from a plurality of types of reagents Rs to each of the plurality (six) of stages 10R.
  • the electric field stirring unit 270 has the upper electrode 20 of the pair of electrodes.
  • the upper electrode 20 is arranged extending in the X direction so as to straddle a plurality (six) of stage portions 210.
  • the stage 10R is moved in the Y direction by the stage transport mechanism and is arranged corresponding to each of the cleaning unit 230, the reagent supply unit 250, and the electric field stirring unit 270.
  • a pathological specimen preparation apparatus 200 it is possible to prepare a pathological specimen by arranging a maximum of six substrates W on the stage 10R.
  • four tanks 205 to 208, a circuit unit 280, a stage unit 210, a cleaning unit 230, a reagent supply unit 250, an electric field stirring unit 270, and a high voltage generation unit 281 are superimposed on the frame 204. Since they are arranged, a small footprint preparation apparatus 200 with a small footprint (installation area) is realized.
  • the configuration and structure of each part in the pathological specimen preparation apparatus 200 will be described.
  • the frame 204 that can be arranged by superimposing the respective parts in this way is not limited to the four-stage configuration including the first frame 204a, the second frame 204b, the third frame 204c, and the fourth frame 204d. There may be five or more stages, for example.
  • FIG. 31 is a schematic perspective view showing the configuration of the stage portion of the second embodiment
  • FIG. 32 is a schematic perspective view showing the stage of the second embodiment
  • FIG. 33 is a schematic perspective view showing the liquid discharge guide portion of the second embodiment. It is.
  • the stage unit 210 includes a stage 10R, a support frame 211, a motor 215, a linear guide 217, a first stage support unit 221, a second stage support unit 223, a liquid discharge guide unit 226, and the like. Yes.
  • the support frame 211 includes an upper surface portion 211a extending in the Y direction, a pair of leg portions 211b and 211c that support the upper surface portion 211a at both ends in the Y direction, and a side portion 211d that supports the intermediate portion in the Y direction. ing.
  • the support frame 211 is formed by integrally forming an upper surface portion 211a, a pair of leg portions 211b and 211c, and a side portion 211d, for example, by bending the outer shape of the SUS plate.
  • a linear guide 217 is provided on the lower surface of the upper surface portion 211a in the Z direction so as to extend in the Y direction.
  • the motor 215 is, for example, a stepping motor, and is attached to one leg portion 211c located on the rear side in the Y direction of the pair of leg portions 211b and 211c so that the rotation axis is directed upward in the Z direction. .
  • a timing pulley 216b is attached to the rotating shaft.
  • Another timing pulley 216a is rotatably supported by the other leg 211b.
  • a timing belt 218 is bridged between the two timing pulleys 216a and 216b.
  • the first stage support portion 221 is fixed to the right side portion in the X direction of the bridged timing belt 218. When the motor 215 is driven, the timing belt 218 rotates and the first stage support portion 221 fixed to the timing belt 218 can be moved forward and backward in the Y direction.
  • the side part 211d that supports the upper surface part 211a of the support frame 211 at an intermediate position in the Y direction is provided at a position close to the other leg part 211b of the pair of leg parts 211b and 211c.
  • a liquid discharge guide portion 226 is provided along the upper surface portion 211a at the position where the side portion 211d is provided.
  • the stage 10R is a substantially rectangular parallelepiped, and the longitudinal direction is arranged along the Y direction.
  • the stage 10R includes a placement unit 11R on which the substrate W is placed and a pedestal 12R that supports the placement unit 11R from below.
  • the placement portion 11R includes a guide portion 11a and a guide portion 11b for placing the substrate W at predetermined positions in the X direction and the Y direction.
  • the guide portion 11a is provided on the right side in the X direction and the rear end side in the Y direction of the placement portion 11R.
  • the guide portion 11b is provided at the front left corner of the placement portion 11R.
  • An inclined portion 11d is provided on the left side in the X direction of the mounting portion 11R, and another guide portion 11e that is independent in an island shape is provided on the guide portion 11a side of the inclined portion 11d.
  • the mounting portion 11R has a cutout portion 11c with the front right corner cut out, and the base 12R also has a cutout portion 12c with the front right corner cut out. These notches 11c and 12c are notched so that the tweezers do not hit the stage 10R when the end of the substrate W is gripped by tweezers or the like and set / reset with respect to the mounting portion 11R. . That is, the substrate W can be easily set and reset with respect to the stage 10R.
  • the mounting portion 11R functions as a lower electrode among a pair of electrodes in the electric field stirring portion 270 described later, and is formed using, for example, aluminum.
  • the pedestal 12R is formed using an insulating material such as a resin.
  • the pedestal 12R is formed so as to be cut with a predetermined width in the X direction, and has a pair of groove portions 12a facing each other in the Y direction. In addition, two screw holes 12b and 12d are formed in the Y direction with respect to the pair of grooves 12a.
  • the pedestal 12R includes a slope 12e whose lower end on the right side in the X direction is chamfered, and an inclined portion 12f that protrudes outward from the slope 12e and the lower end opposite to the X direction and is inclined.
  • the stage 10 ⁇ / b> R is supported by the second stage support part 223 so that it can rotate in a certain direction from a horizontal state.
  • the pair of arm portions 223a and 223b of the second stage support portion 223 are inserted into the pair of groove portions 12a of the base 12R.
  • Holes corresponding to the screw holes 12b and 12d provided in the base 12R are formed on the distal ends of the pair of arm portions 223a and 223b.
  • a shaft is inserted into each of the screw holes 12b and 12d, and the shaft passes through the holes formed in the pair of arm portions 223a and 223b, so that the pedestal 12R can rotate around the shaft in the second stage. It is supported by the support part 223.
  • the stage 10 is supported on the outer side surface in the Y direction of the stage 10 in a rotatable state.
  • the second stage support portion is provided in the pair of grooves 12a of the base 12R.
  • a pair of arm portions 223a and 223b of 223 was inserted and supported rotatably.
  • a linear guide 217 is provided immediately below the upper surface portion 211 a of the support frame 211.
  • a slider 217a (see FIG. 34) is attached to the linear guide 217.
  • the slider 217a is fixed to the second stage support portion 223.
  • the second stage support part 223 is fixed to the first stage support part 221 attached to the timing belt 218. That is, when the motor 215 is driven to move the timing belt 218, the stage 10R supported by the first stage support part 221 and the second stage support part 223 can be moved in the Y direction along the linear guide 217. It has become.
  • the stage transport mechanism in this embodiment includes at least a motor 215 that is a driving source, timing pulleys 216a and 216b, a linear guide 217, a slider 217a, a timing belt 218, a first stage support 221 and a second stage support 223. Is included.
  • a sensor 228 is attached to the front side in the Y direction of the upper surface portion 211a of the support frame 211.
  • the sensor 228 has a role of stopping the motor 215 by detecting the position of the first stage support 221 that is fixed to the timing belt 218 and moves in the Y direction.
  • the position of the stage 10R when the sensor 228 stops the motor 215 is the origin in the Y direction.
  • the substrate W is set / reset with respect to the stage 10R.
  • the liquid discharge guide portion 226 of the present embodiment is a substantially pentagonal bag whose outer shape is similar to that of a baseball baseball when viewed from the X direction, and is a connection projecting from its lower end.
  • a flexible tube is attached to the portion 227.
  • the liquid discharge guide part 226 has a protruding part 226 d that protrudes in the X direction and can be screwed to the upper surface part 211 a of the support frame 211.
  • the protruding portion 226d is provided with a guide portion 226b whose shape including the side surface portion 226a is L-shaped when viewed from the Y direction.
  • the edge of the guide portion 226b extends upward in the Z direction from the protruding portion 226d.
  • the length L2 of the guide portion 226b in the Y direction is longer than the length L1 of the stage 10R in the Y direction (see FIG. 32).
  • the position where the liquid discharge guide portion 226 is attached to the upper surface portion 211a of the support frame 211 corresponds to the cleaning position in the Y direction. That is, even when the stage 10R is moved back and forth in the Y direction at the cleaning position and the substrate W placed on the stage 10R is cleaned with the cleaning liquid Cs, the cleaning liquid Cs discharged from the stage 10R is discharged by the liquid discharge guide unit 226. It has a configuration that can be received.
  • FIG. 34 is a schematic perspective view for explaining the stage tilting mechanism of the second embodiment
  • FIG. 35 is a diagram showing the positional relationship between the tilted stage of the second embodiment and other configurations.
  • FIG. 35 is a view of the tilted stage 10R as viewed from the Y direction.
  • a pair of inclined portions 211f and 211g that are inclined in different directions on the front side and the rear side are provided.
  • the wall surface 211e is provided with a pair of guide plates 214a and 214b facing the pair of inclined portions 211f and 211g on the front side and the rear side in the Y direction of the flat plate 214.
  • Each of the pair of guide plates 214a and 214b is supported by the wall surface 211e so as to be rotatable about the flat plate 214 side as a fulcrum.
  • one guide plate 214a on the front side in the Y direction is urged upward in the Z direction by a spring 211h spanned between the wall surface 211e.
  • the other guide plate 214b is urged downward in the Z direction by a spring 211i spanned between the wall surface 211e. Therefore, in the state of being biased by the springs 211h and 211i, one guide plate 214a is inclined in a state of being substantially horizontal and continues to the flat plate 214.
  • the other guide plate 214b is connected to the flat plate 214 in a state inclined to the rear side in the Y direction.
  • a lever 222 is pivotally supported on the first stage support 221 attached to the timing belt 218 so as to be rotatable.
  • the lever 222 has a first arm 222a extending downward in the Z direction and a second arm 222b extending in the Y direction and extending upward after being connected to the first arm 222a, when viewed from the X direction.
  • the external shape of is substantially T-shaped.
  • a rod is attached to the distal end portion 222c of the first arm 222a so as to be rotatable via a miniature bearing.
  • a rod is attached to the upper end portion 222d of the second arm 222b so as to be rotatable.
  • the end portion 222e of the second arm 222b of the lever 222 extending in the Y direction is pivotally supported with respect to the first stage support portion 221. Therefore, as shown in FIG. 31, for example, when the stage 10R is located at the origin in the Y direction, the portion extending in the Y direction of the second arm 222b is attached to the screw 221a fixed to the first stage support 221. By abutting, the rotation of the lever 222 around the end 222e is stopped. At this time, the upper end portion 222d of the lever 222 on the upper side of the second arm 222b is in contact with the bottom surface of the base 12R of the stage 10R.
  • the tip 222c of the first arm 222a of the lever 222 is moved to the inclined portion 211g. It is guided and rides on the flat plate 214 in contact with the rear guide plate 214b. Accordingly, the lever 222 rotates counterclockwise about the end portion 222e, and the tip end portion 222d of the second arm 222b pushes up the bottom surface of the base 12R.
  • the stage 10R with the bottom surface of the base 12R pushed up is inclined toward the liquid discharge guide portion 226 in the X direction.
  • the tip end portion 222c of the first arm 222a of the lever 222 comes into contact with the front inclined portion 211f from the flat plate 214 and pushes down the front guide plate 214a. Then, the distal end portion 222c of the first arm 222a moves away from the guide plate 214a and moves forward, so that the lever 222 rotates clockwise around the end portion 222e and contacts the screw 221a of the first stage support portion 221. Contact and rotation stops. As a result, the operation of the upper end portion 222d of the lever 222 on the upper side of the second arm 222b pushing up the bottom surface of the base 12R is released.
  • a locking portion 12h is fitted in a hole 12g provided in the bottom surface of the base 12R, and a spring 223d is bridged between the locking portion 12h and the second stage support portion 223.
  • the 2nd stage support part 223 has 223e for every time it stands in the Z direction under the base 12R.
  • the stage tilting mechanism of the present embodiment that tilts the stage 10R toward the liquid discharge guide portion 226 in the X direction includes a pair of inclined portions 211f and 211g, a flat plate 214, a pair of guide plates 214a and 214b, and a first stage support portion. 221 and lever 222 are included.
  • the flat plate 214, the pair of guide plates 214a and 214b, the pair of inclined portions 211f and 211g, the first stage support portion 221 and the lever 222 are examples of the support mechanism in the stage tilt mechanism of the present invention.
  • a sensor 228 is attached to the front side in the Y direction of the upper surface portion 211a of the support frame 211.
  • a detection plate 221b is attached to the end 222e of the lever 222 that is rotatably supported by the first stage support 221.
  • the sensor 228 is a gate type, and the sensor 228 detects the origin of the stage 10 ⁇ / b> R by inserting the detection plate 221 b into the gate-type detection unit as the first stage support unit 221 moves in the Y direction. It becomes the composition which is done.
  • the stage 10R is tilted toward the liquid discharge guide portion 226 by the stage tilting mechanism of the present embodiment. Further, the stage 10R is tilted so that the above-described inclined portion 12f of the pedestal 12R stops immediately before coming into contact with the guide portion 226b of the liquid discharge guide portion 226 or just before coming into contact with the guide portion 226b.
  • the tilt angle of the stage 10R at this time is an angle formed by the tilted substrate W placed on the stage 10R and the horizontal plane, and is set to be in the range of 45 degrees to 60 degrees. Specifically, as shown in FIG.
  • the tilt angle of the stage 10R can be adjusted.
  • the cleaning liquid Cs when the cleaning liquid Cs is discharged toward the substrate W from the nozzle 231 located above the stage 10R by inclining the stage 10R, the cleaning liquid Cs travels along the surface of the substrate W and the liquid discharge guide portion 226.
  • the guide portion 226b For example, even when the cleaning liquid Cs flows around the mounting portion 11R and flows to the side surface of the pedestal 12R, it flows along the inclined portion 12f provided on the pedestal 12R and flows down into the guide portion 226b.
  • another nozzle 234 is disposed above the stage 10R, and air is blown from the nozzle 234 toward the substrate W. Therefore, by blowing air from the nozzle 234 onto the surface of the inclined substrate W, the cleaning liquid Cs discharged from the nozzle 231 can be discharged to the liquid discharge guide portion 226 without leaving any excess.
  • the tilt angle of the stage 10R is more than 60 degrees. Even if it is small, the cleaning liquid Cs can be reliably discharged from the substrate W.
  • the configuration of the cleaning unit 230 having the nozzle 231 and the nozzle 234 will be described in detail.
  • FIGS. 36 is a schematic perspective view showing the configuration of the cleaning section of the second embodiment
  • FIG. 37 is a schematic perspective view showing the configuration of the flow path switching mechanism of the second embodiment
  • FIGS. 38 to 40 are cleaning liquids in the second embodiment. It is a piping system diagram showing how to supply.
  • the cleaning unit 230 includes a plurality (six) of nozzles 231 for discharging the cleaning liquid Cs, a plurality of (six) nozzles 234 for blowing air, and a plurality of valves.
  • the valve group 232 and the valve group 233 provided, and a support plate 204e that supports the plurality of nozzles 231 and the nozzles 234 are provided.
  • the support plate 204e has a rectangular shape, and is supported by the third frame 204c of the frame 204 of the pathological specimen preparation apparatus 200 described above so that the longitudinal direction is along the X direction (see FIG. 30).
  • a plurality of nozzles 231 and nozzles 234 are arranged at equal intervals in the X direction on the support plate 204e.
  • the plurality of nozzles 231 will be referred to as nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f, in order from the right side in the X direction.
  • nozzles 234a, 234b, 234c, 234d, 234e, and 234f with reference numerals sequentially from the right side in the X direction.
  • These nozzles 231 and 234 are provided corresponding to each stage 10 ⁇ / b> R of the stage unit 210.
  • the nozzle 234 is arranged slightly shifted to the left with respect to the nozzle 231.
  • the valve group 232 and the valve group 233 include a plurality of valves provided according to the number of nozzles 231.
  • the valve group 232 includes a plurality (six) of valves 232a, 232b, 232c, 232d, 232e, and 232f arranged in the Y direction.
  • the valve group 233 also has a plurality (six) of valves 233a, 233b, 233c, 233d, 233e, and 233f arranged in the Y direction.
  • the valve group 232 and the valve group 233 are arranged separately in the third frame 204c of the pathological specimen preparation device 200 so as to face each other with the support plate 204e interposed therebetween (see FIG. 30).
  • the valve group 232 and the valve group 233 are electromagnetic valves that can be electrically opened and closed, and the opening and closing is controlled by a control unit included in a circuit unit 280 described later.
  • the electromagnetic valve has a gate-type opening / closing part, and closes the liquid flow path in the tube by lowering and pressing the opening / closing part of the flexible tube inserted into the opening / closing part. Can do.
  • the liquid flow path in the tube can be opened by raising the opening / closing part to release the pressing of the tube.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231a via the valve 232a and the valve 232b.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231b via the valve 232c and the valve 232d.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231c via the valve 232e and the valve 232f.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231f via the valve 233a and the valve 233b.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231e via the valve 233c and the valve 233d.
  • a flexible tube is connected to the nozzle 231d via the valve 233e and the valve 233f.
  • the length of the flexible tube from the valve to the nozzle 231 can be made substantially the same for each nozzle 231. That is, the pressure loss at the time of supplying the cleaning liquid Cs to each nozzle 231 can be made uniform for each nozzle 231 to suppress variations in the supply amount of the cleaning liquid Cs.
  • Pure water (H 2 O) as another cleaning liquid Cs is supplied to the piping systems related to the valves 232a, 232c, 232e and the valves 233a, 233c, 233e, and is supplied to the valves 232b, 232d, 232f and the valves 233b, 233d, 233f.
  • a cleaning liquid Cs is supplied to the piping system. By controlling the opening and closing of each valve, two types of cleaning liquids Cs can be discharged from each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f. A detailed method of supplying the cleaning liquid Cs will be described later.
  • Each of the other plurality of nozzles 234a, 234b, 234c, 234d, 234e, and 234f supported by the support plate 204e is connected to a gas supply means via a valve 235.
  • the gas supply means in the present embodiment include a small pressure pump capable of compressing and sending air.
  • the valve 235 is also an electromagnetic valve, and its opening and closing is controlled by a control unit provided in the circuit unit 280.
  • the cleaning unit 230 has a flow path switching mechanism for discharging the cleaning liquid Cs discharged from the nozzle 231 to either the tank 207 or the tank 208 as waste liquid.
  • the flow path switching mechanism 240 of this embodiment includes a pair of leg portions 241a and 241b, a drainage receiving portion 242, a motor 245, and a diversion channel 246. .
  • the pair of leg portions 241a and 241b are attached so as to face the third frame 204c of the frame 204 described above in the X direction.
  • the drainage receiving part 242 has an elongated bowl shape, and is arranged along the X direction with both ends of the opening supported by a pair of leg parts 241a and 241b.
  • the bowl-shaped drainage receiving portion 242 has a tip of a tube attached to the connection portion 227 of the liquid discharge guide portion 226 provided in each of the plurality of stage portions 210 described above. Hangs down.
  • the bowl-shaped drainage receiving part 242 is formed to be deeper and wider on the right side than on the left side in the X direction.
  • a discharge port 242a is provided on the bottom right side in the X direction of the drainage receiving part 242 so as to extend downward in the Z direction.
  • a flexible tube 243 is attached to the discharge port 242a.
  • a branch channel 246 is disposed below the discharge port 242a.
  • the branch channel 246 is also bowl-shaped, and has openings (not shown in FIG. 37) at both ends in the X direction at the bottom.
  • a slope that is inclined toward each of the two openings is provided at the bottom of the diversion channel 246.
  • the shunt channel 246 has a slope portion supported from below by a side portion 241c.
  • the side portion 241c that supports the diversion channel 246 from below has a wall surface standing in the Z direction, and a motor 245 is attached to the wall surface so that the rotation axis is along the Y direction.
  • the motor 245 is, for example, a stepping motor, and a tube holder 244 that holds the distal end side of a tube 243 that extends downward in the Z direction in the branch channel 246 is attached to the rotation shaft of the motor 245.
  • the tip of the tube 243 held by the tube holder 244 is located at the boundary between the two slopes at the bottom of the branch channel 246.
  • one of the left openings in the X direction is located above the inlet 207a of the tank 207.
  • the other opening on the right side in the X direction is located above the inlet 208 a of the tank 208.
  • the tube connected to one of the two openings is inserted into the inlet 207a of the tank 207, and the tube connected to the other is connected to the inlet 208a of the tank 208. Has been inserted.
  • the cleaning liquid Cs is discharged from the nozzle 231 to the substrate W placed on the stage 10R in a state where the stage 10R is tilted by the stage tilting mechanism at the cleaning position, the cleaning liquid Cs is applied to the surface of the substrate W. After washing, it flows into the liquid discharge guide portion 226.
  • the cleaning liquid Cs that has flowed into the liquid discharge guide portion 226 passes through the tube attached to the connection portion 227 and flows into the bowl-shaped drainage receiving portion 242.
  • the cleaning liquid Cs that has flowed into the drainage receiver 242 flows to the right in the X direction and reaches the discharge port 242a. At this time, in FIG.
  • the tube 243 attached to the discharge port 242a is directed to the left side in the X direction.
  • the cleaning liquid Cs that has flowed into 242a is guided to the tank 207 from one opening on the left side in the X direction of the branch flow path 246 and discharged as waste liquid.
  • the tube 243 attached to the discharge port 242a is directed to the right side in the X direction.
  • the cleaning liquid Cs that has flowed into the discharge port 242a is guided to the tank 208 from the other opening on the right side in the X direction of the diversion channel 246 and discharged as waste liquid.
  • the flow path switching mechanism 240 of the present embodiment includes at least a drainage receiving part 242, a motor 245, a tube holder 244 attached to the rotating shaft of the motor 245, and a branch flow path 246.
  • the cleaning liquid Cs flowing into the drainage receiving part 242 does not contain the coloring reagent
  • the cleaning liquid Cs (waste liquid) is discharged to the tank 207 by driving the motor 245.
  • the cleaning liquid Cs flowing into the drainage receiving part 242 contains a coloring reagent
  • the cleaning liquid Cs (waste liquid) is discharged to the tank 208 by driving the motor 245.
  • the system that supplies the cleaning liquid Cs to the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f pumps the cleaning liquid stored in the tank 205 by the pump P1, and connects the pipe 237a and the valve 232b, 232d and 232f are sent to the nozzles 231a, 231b and 231c, and the pipe 237b and valves 233b, 233d and 233f are sent to the nozzles 231d, 231e and 231f.
  • Supply system As shown in FIG. 38, the system that supplies the cleaning liquid Cs to the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f pumps the cleaning liquid stored in the tank 205 by the pump P1, and connects the pipe 237a and the valve 232b, 232d and 232f are sent to the nozzles 231a, 231b and 231c, and the pipe 237b and valves
  • a fourth supply system that sends the nozzles 231d, 231e, and 231f via the pipe 238b and the valves 233a, 233c, and 233e.
  • a valve 236a is provided on the delivery side of the pump P1.
  • a relay valve 236b is provided in a pipe connecting the delivery side of the valve 236a and the delivery side of the pump P2.
  • valve 236b connected to the pump P2
  • the valves 232a, 232c, 232e and the valves 233a, 233c, 233e are closed, the valve 236a connected to the pump P1, the valves 232b, 232d, 232f, and the valves 233b,
  • the cleaning liquid Cs can be discharged from each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f.
  • the relay valve 236b, the valves 232b, 232d, 232f and the valves 233b, 233d, 233f are closed to connect the pump P1, the valves 232a, 232c, 232e, and the valves 233a, 233a, By opening 233c and 233e and driving the pump P2, pure water can be discharged from each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f.
  • the operation of discharging the cleaning liquid Cs or pure water from each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, 231f is a valve attached to each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, 231f. This is done by opening and closing.
  • the first supply system and the second supply system to which a buffer solution such as PBS is supplied are preferably washed with pure water periodically or appropriately.
  • the valve 236a connected to the pump P1 the valves 232a, 232c, and 232e and the valves 233a, 233c, and 233e are closed, and the relay valve 236b and the valves 232b, 232d, and 232f are closed.
  • the piping system in which a buffer solution such as PBS is supplied to each of the plurality of nozzles 231a, 231b, 231c, 231d, 231e, and 231f is divided into a first supply system and a second supply system.
  • the buffer solution can be stably discharged from each nozzle 231. In addition, it is less susceptible to clogging of the piping system.
  • the cleaning liquid Cs passing through the pipe is connected to the pipe between the first supply system and the second supply system and the valve 236a.
  • a pressure sensor for detecting pressure was provided. By detecting the pressure loss of the pipe with the pressure sensor, the clogging of the first supply system and the second supply system is detected, and pure water cleaning can be promoted.
  • FIG. 41 is a schematic perspective view showing the configuration of the reagent supply unit of the second embodiment
  • FIG. 42 is a perspective view showing the cartridge of the second embodiment
  • FIG. 43 shows the arrangement of each part related to the reagent supply unit of the second embodiment
  • FIG. 44 is a schematic side view showing the arrangement of each part according to the reagent supply unit of the second embodiment.
  • the reagent supply unit 250 of this embodiment is a device that supplies the reagent Rs filled in the cartridge 50R to the substrate W placed on the stage 10R of the stage unit 210.
  • the reagent supply unit 250 includes a bridge pier 251, a support frame 252, a front frame 253, a pair of timing pulleys 254 a and 254 b, a cartridge holder 255 as a plurality of holding units to which the cartridge 50 R can be attached and detached, and timing.
  • a belt 256, a motor 257, and an electric pusher 258 are provided.
  • the bridge pier 251 is a structure that supports a pair of timing pulleys 254a and 254b and a motor 257, and is spanned in the X direction on the third frame 204c of the pathological specimen preparation device 200.
  • a pair of timing pulleys 254a and 254b are provided on both ends of the portion of the bridge pier 251 that extends in the X direction.
  • one timing pulley 254a located on the right side in the X direction is rotatably supported by the bridge pier 251.
  • a motor 257 is attached to the other timing pulley 254b located on the left side in the X direction, and its rotation is electrically controlled.
  • the motor 257 is, for example, a stepping motor.
  • a timing belt 256 is stretched between a pair of timing pulleys 254a and 254b.
  • a plurality (nine) of cartridge holders 255 are attached to the timing belt 256.
  • a total of 18 cartridges 50R can be attached to a plurality (9) of cartridge holders 255.
  • the timing belt 256 is moved by driving the motor 257, a plurality (nine) of cartridge holders 255 mounted on the timing belt 256 can be freely moved in the X direction.
  • the configuration including the pair of timing pulleys 254a and 254b, the timing belt 256, and the motor 257 is an example of the conveying unit of the present invention.
  • a support frame 252 is provided so as to stand on the rear end in the Y direction of the pier 251 and extend in the X direction.
  • the support frame 252 has a shape extending in the Z direction after being bent backward in the Y direction.
  • a plurality (six) of electric pushers 258 are provided on the bent portion of the support frame 252.
  • the electric pusher 258 includes a motor 258a, a male screw 258b, and a support portion 258c of the male screw 258b.
  • the motor 258a is, for example, a direct-acting stepping motor, and is screwed into the male screw 258b to move the male screw 258b up and down in the Z direction.
  • the electric pusher 258 can pressurize the cartridge 50R mounted on the cartridge holder 255 from the upper side in the Z direction to the lower side with the male screw 258b.
  • the support portion 258c that supports the upper end side of the male screw 258b in the Z direction is provided for each electric pusher 258 in the support frame 252, and is attached to the upper end of a slit 252a formed to extend in the Z direction. Thereby, it has the structure which prevents the axial blurring by rotation of the external thread 258b by the support part 258c.
  • a front frame 253 that stands on the front end in the Y direction of the pier 251 and extends in the X direction is provided.
  • Three lamps 259 (259a, 259b, 259c) are attached to the central portion of the front frame 253 in the X direction with a space therebetween.
  • the lamp 259 is an LED that can emit light of at least two colors (for example, green and red).
  • the arrangement of the three lamps 259 in the X direction is set corresponding to the arrangement of the cartridge 50R mounted in the cartridge holder 255.
  • the state of the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R located in front of the lamp 259 can be known from the lighting state of the lamp 259, and the replacement of the cartridge 50R is prompted as necessary.
  • the central lamp 259b is turned on to instruct replacement of the cartridge 50R, and the replacement target cartridge 50R is conveyed in front of the central lamp 259b.
  • the lighting state for instructing the replacement of the cartridge 50R is a state in which the central lamp 259b is lit in a different color from the other lamps 259a and 259c, or the central lamp 259b blinks and the other lamps 259a and 259c are turned on. Is normally lit or not lit. The detection of the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R will be described later.
  • the cartridge 50R capable of discharging the reagent Rs of the present embodiment will be described.
  • the cartridge 50R can accommodate the first case 51 filled with the reagent Rs and the first case 51, and has a cylindrical second shape with a nozzle portion 52a provided on the bottom surface.
  • a case 52 and a lid 53 of the first case 51 are provided.
  • a rectangular opening 52 b is provided on the side of the second case 52 on the side close to the accommodation opening.
  • two openings 52c and 52d are provided at intervals on the lower side in the Z direction of the side surface provided with the opening 52b.
  • a locking portion 51b is provided on the side surface of the first case 51 facing the opening 52b.
  • 1st case 51 has the accommodating part 51a which can store the reagent Rs.
  • a lower side in the Z direction of the accommodating portion 51a is a narrowed portion 51c with a reduced volume.
  • the narrowed portion 51c has a valve structure that prevents the reagent Rs from leaking from the distal end side of the narrowed portion 51c.
  • the reagent Rs is injected into the storage part 51 a from the storage port of the first case 51, and the cover part 53 is put on the lid. After that, when the first case 51 is inserted and pushed into the second case 52, the narrowed portion 51c of the accommodating portion 51a and the communicating portion 52e connected to the nozzle portion 52a of the second case 52 are vertically moved in the Z direction.
  • a coil spring (not shown) is attached to the communication portion 52e as urging means for urging the first case 51 upward in the Z direction. Further, the locking portion 51 b of the first case 51 is locked to the opening 52 b of the second case 52, and the first case 51 is attached to the second case 52. As a result, it is difficult to easily remove the first case 51 from the second case 52, so that moisture or the like hardly enters the cartridge 50R from the outside.
  • the lid portion 53 is provided with a communication hole 53a that communicates with the housing portion 51a.
  • a predetermined amount of reagent Rs can be discharged from the nozzle portion 52a via the communication portion 52e. It has a structure.
  • the volume of the reagent Rs that fills the communication part 52e has a structure in which the discharge amount of the reagent Rs discharged from the nozzle part 52a is determined by a single press.
  • the first case 51 in which the reagent Rs of the cartridge 50R is stored is transparent or translucent, and is made of, for example, polypropylene or polyethylene in consideration of chemical resistance.
  • the openings 52 c and 52 d are provided on the side surface of the second case 52 that accommodates the first case 51.
  • the opening 52c is provided at a position where it can face a portion near the constriction 51c in the housing 51a of the first case 51.
  • the opening 52d is provided in the first case 51 at a position where it can face the narrowed portion 51c.
  • a hook 55 is provided on a side surface of the cartridge 50R that faces the side surface provided with the openings 52b, 52c, and 52d. Therefore, as shown in FIG. 41, when the cartridge 50R is inserted into the cartridge holder 255, a part of the cartridge holder 255 is sandwiched between the side surface of the cartridge 50R and the hook 55, and the cartridge 50R is inserted into the cartridge holder 255. So that the second case 52 does not move. Note that an opening is provided on the bottom surface of the cartridge holder 255 at a position corresponding to the nozzle portion 52a.
  • the cartridge 50R mounted on the cartridge holder 255 can be moved to a position overlapping the electric pusher 258.
  • the electric pusher 258 presses the lid portion 53 of the cartridge 50R as described above, and discharges the reagent Rs from the nozzle portion 52a of the cartridge 50R.
  • a predetermined amount of the reagent Rs is accurately applied to the tissue specimen Ts of the substrate W placed on the stage 10R. Can be dripped.
  • a barcode reader 262 and a plurality of sensors are provided side by side on the rear side in the Y direction of the reagent supply unit 250 and on the left side in the X direction.
  • the plurality of sensors include two remaining amount detection sensors 263 (263a, 263b) for detecting the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R, and a height detection sensor 268 for detecting the height of the cartridge 50R.
  • an imaging unit 260 capable of imaging the substrate W is provided on the front side in the Y direction of the reagent supply unit 250.
  • the imaging unit 260 includes a CCD 261 as an imaging unit, a pair of timing pulleys 264a and 264b, a timing belt 266, and a motor 267.
  • the pair of timing pulleys 264a and 264b are arranged side by side in the Y direction so as to partially overlap the pair of timing pulleys 254a and 254b of the reagent supply unit 250 in plan view.
  • a timing belt 266 is stretched between the pair of timing pulleys 264a and 264b in the X direction.
  • a CCD 261 is attached to the front side of the timing belt 266 spanned in the X direction so that the lower side in the Z direction can be imaged.
  • a motor 267 is attached to the timing pulley 264b on the left side in the X direction.
  • the CCD 261 fixed to the timing belt 266 can be moved in the X direction. That is, if the motor 267 is driven and controlled, the CCD 261 can be freely arranged at a position corresponding to the stage 10R moved to the reagent supply unit 250 by the stage conveyance mechanism in each of the plurality of (six) stage units 210 described above. Can do. Then, by imaging the substrate W placed on the stage 10R using the CCD 261, the state of the tissue specimen Ts fixed to the substrate W and the information related to the tissue specimen Ts described in the marking region 3 are used as images. It can be obtained.
  • a leg portion 251b is erected on the rear side in the Y direction with respect to the bridge pier portion 251 that supports the pair of timing pulleys 254a and 254b of the reagent supply unit 250 from the lower side.
  • the height of the leg portion 251b is set so as not to contact the cartridge holder 255.
  • a support portion 251c extending from the head of the leg portion 251b to the rear side in the Y direction is provided, and a barcode reader 262 and a plurality of sensors are provided on the support portion 251c.
  • the plurality of sensors are attached to a support plate 251d provided in the support portion 251c and extending in the Z direction in order of a height detection sensor 268, a remaining amount detection sensor 263a, and a remaining amount detection sensor 263b.
  • a seal indicating a barcode related to the reagent Rs is attached to the side surface between the opening 52c and the opening 52d of the second case 52 of the cartridge 50R. If the motor 257 is driven to move the cartridge holder 255, the cartridge 50R can be opposed to the barcode reader 262. The barcode attached to the cartridge 50R can be read by the barcode reader 262. The operation of reading a barcode using the barcode reader 262 is executed for each of a total of 18 cartridges 50R set in the plurality of cartridge holders 255 of the reagent supply unit 250.
  • the barcode given to the cartridge 50R is a one-dimensional barcode or a two-dimensional barcode, and the barcode reader 262 is selected as a device that can read these barcodes.
  • the position where the barcode is applied in the cartridge 50R is not limited to the side surface between the opening 52c and the opening 52d of the second case 52.
  • the position of the barcode reader 262 may be set so that the cartridge 50R and the barcode reader 262 face each other according to the position where the barcode is applied.
  • the cartridge 50R can be opposed to the two remaining amount detection sensors 263a and 263b and the height detection sensor 268.
  • the cartridge 50R facing the plurality of sensors is a cartridge 50R that can discharge the reagent Rs by the electric pusher 258 (see FIG. 43).
  • the remaining amount detection sensor 263a is attached to the support plate 251d at a position where it can face the opening 52c of the second case 52 of the cartridge 50R. Further, the remaining amount detection sensor 263b is attached to the support plate 251d at a position where it can face the opening 52d of the second case 52 of the cartridge 50R.
  • the two remaining amount detection sensors 263a and 263b each have a light emitting part and a light receiving part, and detect the intensity of the reflected light by receiving the reflected light reflected by the object from the light emitting part by the light receiving part. By doing so, the presence or absence of the reagent Rs is optically detected.
  • the first case 51 filled with the reagent Rs in the cartridge 50R is formed using a transparent or translucent translucent member. Therefore, by using the remaining amount detection sensor 263a, it is possible to detect the presence or absence of the reagent Rs in the housing portion 51a of the first case 51. Further, if the remaining amount detection sensor 263b is used, it is possible to detect the presence or absence of the reagent Rs in the narrowed portion 51c of the first case 51.
  • the remaining amount detection sensor 263a detects that the reagent Rs is absent. This shows that the amount of the reagent Rs in the storage portion 51a is considerably reduced and the replacement time of the cartridge 50R is approaching.
  • the amount of the reagent Rs Indicates that the cartridge 50R needs to be replaced.
  • the two remaining amount detection sensors 263a and 263b it is possible to accurately detect the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R and thoroughly manage the remaining amount of the reagent Rs.
  • the height detection sensor 268 is attached to the support plate 251d at a position where the upper surface of the lid portion 53 of the cartridge 50R set in the cartridge holder 255 can be detected.
  • the cartridge 50R is configured such that a predetermined amount of the reagent Rs can be discharged from the nozzle portion 52a by pressing the lid portion 53 from above with the electric pusher 258. If the cartridge 50R is not properly set in the cartridge holder 255 and the lid portion 53 is above a predetermined position in the Z direction, the nozzle portion 52a can be moved even if the lid portion 53 is pressed once by the electric pusher 258. There is a possibility that the predetermined amount of the reagent Rs may not be discharged accurately.
  • the male screw 258b of the electric pusher 258 may come into contact with the lid portion 53 of the cartridge 50R.
  • the CCD 261 of the imaging unit 260 is disposed on the front side in the Y direction with respect to the motor 267 that moves the CCD 261 in the X direction.
  • a plurality of (four) illumination elements 261 a are provided at positions (actually four corners) surrounding the CCD 261.
  • the illumination element 261a is, for example, an LED, and is provided to illuminate the substrate W that is an imaging target imaged by the CCD 261.
  • the number of the lighting elements 261a is not limited to a plurality (four), and at least one is sufficient.
  • FIG. 45 is a schematic perspective view showing the configuration of the electric field stirring unit of the second embodiment.
  • the electric field stirring unit 270 includes the upper electrode 20, the support frame 271, and a pair of legs 272a and 272b.
  • the upper electrode 20 has a rectangular shape in which one side is longer than the other side.
  • the support frame 271 is used to bridge the long thin upper electrode 20 in the X direction on the third frame 204c of the pathological specimen preparation apparatus 200 (see FIG. 30).
  • the support frame 271 includes guide portions 271a and 271b that are fixed to a pair of leg portions 272a and 272b that are arranged to face each other with an interval in the X direction, and that are arranged with an interval in the Y direction.
  • the guide portion 271a is longer than the guide portion 271b, and each of the guide portions 271a and 271b has a structure in which the upper electrode 20 can be inserted from the right side in the X direction.
  • a support plate 273 is bridged in the Y direction at the left end of the guide portion 271a, and a micro switch 275 is provided on the support plate 273.
  • the micro switch 275 is provided to detect whether or not the left end of the upper electrode 20 in the X direction is disposed at a predetermined position when the upper electrode 20 is inserted along the guide portion 271a. That is, the plate-like upper electrode 20 can be attached to and removed from the support frame 271 at a predetermined position.
  • a plurality of grooves 21 extending in the Y direction are formed on the lower surface of the upper electrode 20 in the Z direction.
  • the plurality of grooves 21 are formed at equal intervals in the X direction.
  • the method of arranging the stage 10R and the upper electrode 20, generating an electric field between the pair of electrodes, and stirring the droplet S on the substrate W placed on the stage 10R is the first method. This is the same as the method described in the embodiment. Therefore, detailed description of electric field stirring is omitted.
  • FIG. 46 is a block diagram showing an electrical and mechanical configuration of the pathological specimen preparation system according to the second embodiment.
  • the pathological specimen preparation system of the second embodiment adopts the features of the pathological specimen preparation apparatus 200 of the second embodiment with respect to the pathological specimen preparation system 1000 of the first embodiment. Accordingly, the same components as those of the pathological specimen preparation system 1000 are denoted by the same reference numerals and detailed description thereof is omitted.
  • the pathological specimen preparation system 2000 of the present embodiment includes a pathological specimen preparation apparatus 200, for example, a desktop computer 500, and peripheral devices connected to the computer 500.
  • a pathological specimen preparation apparatus 200 for example, a desktop computer 500, and peripheral devices connected to the computer 500.
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 includes the display unit 203, the stage unit 210, the cleaning unit 230, the reagent supply unit 250, the electric field stirring unit 270, the circuit unit 280, and the high voltage generation unit 281 as described above.
  • Various sensors such as a CCD 261 as an imaging unit, a barcode reader 262, and a remaining amount detection sensor 263 (263a, 263b) of the cartridge 50R, a remaining amount detection sensor 265 related to the tanks 205 to 208, and a height detection sensor 268. It has.
  • the circuit unit 280 includes a motor driver 282, a Peltier controller 283, a control unit 285, a DC power supply unit 286, and a USB hub 287.
  • the high voltage generation unit 281 is a device that generates a periodically changing potential as described above and applies it to the pair of electrodes 11R and 20 of the electric field stirring unit 270.
  • the motor driver 282 of the circuit unit 280 is a circuit on which circuits for driving and controlling motors included in the stage unit 210, the cleaning unit 230 (including the flow path switching mechanism 240), the reagent supply unit 250, and the imaging unit 260 are mounted. It is a substrate.
  • a Peltier element 15 as a heating element for heating the stage 10R and a temperature sensor 16 for detecting the temperature of the stage 10R are attached to the stage 10R of the stage unit 210.
  • the Peltier controller 283 and the temperature sensor 16 are connected to the control unit 285 via, for example, an I / O port.
  • the Peltier controller 283 controls the temperature of the Peltier element 15 by controlling the current flowing through the Peltier element 15 based on the control signal from the control unit 285.
  • the Peltier controller 283 of the present embodiment includes a microcomputer related to the temperature control of the Peltier element 15, but the microcomputer may be included in the control unit 285.
  • Various sensors such as remaining amount detection sensors 263 and 265 are also connected to the control unit 285 through, for example, an I / O port.
  • the CCD 261 and the barcode reader 262 are connected to the control unit 285 via the USB hub 287. As described above, the CCD 261 is provided so as to be able to image the substrate W placed on the stage 10R.
  • the control unit 285 can obtain information on the tissue specimen Ts fixed on the substrate W from the image information on the substrate W imaged by the CCD 261.
  • the barcode reader 262 is provided so as to be able to read the barcode applied to the cartridge 50R mounted on the reagent supply unit 250 as described above.
  • the control unit 285 can obtain information on the reagent Rs filled in the cartridge 50R from the barcode read by the barcode reader 262.
  • the circuit unit 280 includes at least a motor driver 282, a Peltier controller 283, a control unit 285, a DC power supply unit 286, and a USB hub 287.
  • the DC power source unit 286 generates and supplies a DC voltage required as a power source in each part of the circuit unit 280 and the high voltage generation unit 281 from an AC power source of 100 V supplied from the outside.
  • the control unit 285 is connected to the computer 500 via a USB hub 287 and a USB terminal.
  • the computer 500 includes a main body 501 including a CPU 502, a memory 503 as a storage unit, and terminals (HDMI, LAN, USB) for connecting to various peripheral devices.
  • a mouse 504 and a keyboard 505 related to an input operation to the computer 500 can be connected to the USB terminal.
  • a barcode reader 506 or a label printer 507 different from the barcode reader 262 provided in the pathological specimen preparation apparatus 200 can be connected to the other USB terminals.
  • a monitor 508 can be connected to the HDMI terminal.
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 is provided with the display unit 203 with T / K, the pathological specimen preparation apparatus is confirmed while confirming information related to the pathological specimen preparation protocol displayed on the display unit 203. It is possible to exchange with the computer 500 as well as the operation of the computer 200.
  • the monitor 508 can display various information sent from the computer 500. For example, a network related to information management in the pathology department is connected to the LAN terminal.
  • the barcode reader 506 is mainly used for reading a barcode attached to a reagent container such as a bottle containing the reagent Rs.
  • the computer 500 obtains information about the reagent Rs from the read barcode, and can print a barcode label to be attached to the cartridge 50R filled with the reagent Rs with the label printer 507.
  • the memory 503 of the computer 500 stores various pathological specimen preparation protocols related to the above-described pathological specimen preparation method.
  • the memory 503 in which the pathological specimen preparation protocol is stored may be an internal storage device such as a ROM, a RAM, or an HDD, or an external storage device that is connected to a USB terminal.
  • An operator designates a pathological specimen preparation protocol stored in the computer 500 via the display unit 203, and drives and controls the pathological specimen preparation apparatus 200 by the computer 500 via the display unit 203 to produce a pathological specimen. Can do. Further, by reading the barcode of the cartridge 50R actually attached to the reagent supply unit 250 with the barcode reader 262, the computer 500 causes the information of the reagent Rs filled in the cartridge 50R and the designated pathological specimen preparation protocol. Collation with the information of the reagent Rs in can be executed. Thereby, it is possible to thoroughly manage whether or not the reagent Rs used for the preparation of the pathological specimen is correctly applied.
  • the computer 500 can acquire an image of the substrate W imaged by the CCD 261 and execute an operation for associating the image with the designated pathological specimen preparation protocol. Thereby, traceability of the pathological specimen prepared by the designated pathological specimen preparation protocol can be established. That is, the traceability of the pathological specimen can be improved as compared with the visual confirmation by the operator.
  • the computer 500 can obtain information on the remaining amount of the reagent Rs accommodated in each cartridge 50R by the remaining amount detection sensor 263. Therefore, even if there is a difference between the usage amount of the reagent Rs obtained from the pathological specimen preparation protocol and the actual usage amount, the management of the replacement of the reagent Rs, that is, the cartridge 50R, etc. can be performed appropriately and accurately. it can.
  • the computer 500 can obtain information on the amount of the solution (cleaning liquid Cs containing pure water and its waste liquid) stored in each of the tanks 205 to 208 by the remaining amount detection sensor 265. Therefore, even if there is a difference between the usage amount of the cleaning liquid Cs containing pure water obtained from the pathological specimen preparation protocol and the actual usage amount, the cleaning liquid Cs can be managed appropriately and accurately. In addition, the amount of waste liquid stored in each of the tanks 205 to 208 can be managed appropriately and accurately.
  • the configuration of the pathological specimen preparation system 2000 is not limited to this, and may include other apparatuses used for pathological diagnosis such as an apparatus that performs image analysis on the staining state of tissue or cells.
  • UPS uninterruptible power supply
  • Example 4 of pathological specimen preparation using the pathological specimen preparation system 2000 of the second embodiment will be described with reference to FIG.
  • Example 4 is an example of immunohistochemical staining (IHC) using frozen sections, similar to Example 1 described in the first embodiment.
  • FIG. 47 is a table showing the steps of preparing a pathological specimen by immunohistochemical staining in Example 4.
  • the pathological specimen preparation process by IHC of Example 4 includes a first process of fixing the sliced tissue specimen Ts to the substrate W, a second process of cleaning the fixed tissue specimen Ts, A third step for removing endogenous PO (Peroxidase) from the tissue specimen Ts, a fourth step for washing the tissue specimen Ts from which the endogenous PO has been removed, a fifth step for performing a primary antibody reaction, and a primary antibody reaction treatment are performed.
  • a sixth step for washing the tissue specimen Ts a seventh step for carrying out a secondary antibody reaction, an eighth step for washing the tissue specimen Ts subjected to the secondary antibody reaction, and a step for coloring the washed tissue specimen Ts.
  • the computer 500 sends a control signal based on the pathological specimen preparation protocol to the control section 285 of the pathological specimen preparation apparatus 200 in each of the second to twelfth processes, and the control section 285 drives and controls the pathological specimen preparation apparatus 200. Then, the processes of the second process to the twelfth process are performed.
  • the pathological specimen preparation apparatus 200 of the second embodiment includes a remaining amount detection sensor 263 that can detect the remaining amount of the reagent Rs of the cartridge 50R, and solutions (pure water, cleaning solution, waste solution) in the tanks 205 to 208. And a remaining amount detection sensor 265.
  • the pathological specimen preparation system 2000 executes a process of confirming the remaining amount of the reagent Rs in each cartridge 50R using the remaining amount detection sensor 263 before starting the preparation of the pathological specimen. In addition, processing for confirming the remaining amount of the solution in the tanks 205 to 208 is executed using the remaining amount detection sensor 265.
  • the reagent Rs and the cleaning liquid (including pure water) necessary for the pathological specimen preparation to be performed are secured. If there are no problems, notify the worker that they are ready.
  • the notification is displayed on the display unit 203.
  • the worker confirms the notification and starts the preparation of the pathological specimen.
  • the display unit 203 displays a start button for starting the preparation of the pathological specimen, and the operator starts the preparation of the pathological specimen by touching the displayed start button.
  • the detection result obtained by the remaining amount detection sensor 263 is displayed on the display unit 203 and is insufficient.
  • a warning for prompting replacement of the cartridge 50R containing the reagent Rs and replenishment of the lacking cleaning liquid (including pure water) is displayed on the display unit 203.
  • the remaining amount of the tank 207, 208 in which the waste liquid is stored due to the preparation of the pathological specimen to be performed by the remaining amount detection sensor 265 the state of the waste liquid stored in the tank 207, 208 is displayed on the display unit 203.
  • a warning for prompting the discharge of the waste liquid is displayed on the display unit 203. After performing the treatment corresponding to these warnings, the worker cancels the warnings and starts pathological specimen preparation.
  • the reagent Rs and the cleaning liquid are insufficient during the preparation of the pathological specimen, or the tanks 207 to 208 in which the waste liquid is stored become full. It is possible to prevent the production from stopping in the middle.
  • processing using the remaining amount detection sensors 263 and 265 is not limited to being performed before starting the preparation of the pathological specimen, and may be performed after the preparation of the pathological specimen is completed. Furthermore, the processing using the remaining amount detection sensors 263 and 265 may be performed manually or may be incorporated in a pathological specimen preparation protocol. Then, the process proceeds to the first step.
  • Example 4 After placing a frozen section obtained by slicing a pig liver block as a tissue specimen Ts inside the water-repellent ring 2 of the substrate 1, the substrate 1 is immersed in acetone for 2 minutes. As a result, the frozen section is attached to the substrate 1 and fixed. That is, the substrate W on which the tissue specimen Ts is fixed is obtained. Then, the process proceeds to the second step.
  • the substrate W is placed on the stage 10R of the pathological specimen preparation apparatus 200.
  • the control unit 285 drives and controls the stage transport mechanism (motor 215) to transport the stage 10R from the origin once to the cleaning unit 230 after passing the cleaning unit 230 once.
  • the control unit 285 drives and controls the valve associated with the pump P1, discharges the cleaning liquid Cs stored in the tank 205 from the nozzle 231 and drips for 30 seconds.
  • PBS-T PBS containing Tween 20, which is a nonionic surfactant having a blocking action
  • PBS-T is supplied to the substrate W and cleaning is performed with the stage 10R tilted by the stage tilting mechanism.
  • control unit 285 opens the valve 235 and blows air from the nozzle 234 to the substrate W for 1 second.
  • PBS-T used for cleaning is guided from the inclined substrate W via the liquid discharge guide portion 226 by the flow path switching mechanism 240, and is discharged and stored in the tank 207. Then, the process proceeds to the third step.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the cleaning unit 230 to the reagent supply unit 250.
  • a reagent 3 by volume hydrogen peroxide solution
  • the control unit 285 drives and controls the reagent supply unit 250 (motor 257) to convey the cartridge 50R filled with the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) so as to face the substrate W.
  • the control unit 285 drives and controls the electric pusher 258 to drop the reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) from the cartridge 50R onto the substrate W.
  • the amount of the reagent (3% by volume of hydrogen peroxide solution) dropped is, for example, 150 ⁇ L (microliter) although it depends on the size of the water repellent ring 2.
  • the substrate W After supplying a predetermined amount of reagent (3% by volume hydrogen peroxide solution) to the substrate W, it is allowed to stand for 1 minute on the spot to remove endogenous PO from the tissue specimen Ts (blocking endogenous PO). And it progresses to a 4th process.
  • control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the reagent supply unit 250 to the cleaning unit 230.
  • the cleaning unit 230 performs cleaning using PBS-T, as in the second step. And it progresses to a 5th process.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the cleaning unit 230 to the reagent supply unit 250.
  • a primary antibody reagent Hep-par1 that binds to a protein contained in hepatocytes
  • the control unit 285 drives and controls the reagent supply unit 250 (motor 257) to transport the cartridge 50R filled with the primary antibody reagent so as to face the substrate W.
  • the control unit 285 drives and controls the electric pusher 258 to drop, for example, 150 ⁇ L of the primary antibody reagent from the cartridge 50R onto the substrate W.
  • control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the reagent supply unit 250 to the electric field stirring unit 270.
  • the control unit 285 generates an electric field between the pair of electrodes 11R and 20 and stirs the solution S of the primary antibody reagent supplied to the substrate W.
  • the time required for electric field stirring is 5 minutes. Then, the process proceeds to the sixth step.
  • control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the electric field stirring unit 270 to the cleaning unit 230.
  • cleaning unit 230 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the seventh step.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the cleaning unit 230 to the reagent supply unit 250.
  • a secondary antibody reagent (Envision + Dual Link, which is a sensitizing method reagent using dextran polymer and peroxidase) is selected based on a pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 285 drives and controls the reagent supply unit 250 (motor 257) to transport the cartridge 50R filled with the secondary antibody reagent so as to face the substrate W.
  • control unit 285 drives and controls the electric pusher 258 to drop, for example, 150 ⁇ L of the secondary antibody reagent onto the substrate W from the cartridge 50R. Thereafter, the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the reagent supply unit 250 to the electric field stirring unit 270. In the electric field stirring unit 270, the control unit 285 generates an electric field between the pair of electrodes 11R and 20 and stirs the solution S of the secondary antibody reagent supplied to the substrate W. The time required for electric field stirring is 5 minutes. Then, the process proceeds to the eighth step.
  • control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the electric field stirring unit 270 to the cleaning unit 230.
  • cleaning unit 230 cleaning using PBS-T is performed in the same manner as in the second step. Then, the process proceeds to the ninth step.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the cleaning unit 230 to the reagent supply unit 250.
  • the reagent supply unit 250 selects a reagent (3,3'-Diaminobenzidine; DAB) that causes color development based on a pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 285 drives and controls the reagent supply unit 250 (motor 257) to convey the cartridge 50R filled with the reagent (DAB) so as to face the substrate W.
  • the control unit 285 drives and controls the electric pusher 258 to drop the reagent (DAB) from the cartridge 50R onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (DAB) is, for example, 150 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts is allowed to react with the reagent (DAB) to stand for 3 minutes to develop a color. And it progresses to a 10th process.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the reagent supply unit 250 to the cleaning unit 230.
  • the control unit 285 drives and controls the valve associated with the pump P2, discharges pure water stored in the tank 206 from the nozzle 231 and drips down for 2 minutes.
  • the control unit 285 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W in a state where the stage 10R is tilted. Then, the control unit 285 opens the valve 235 and blows air from the nozzle 234 onto the substrate W for 1 second. The pure water thus supplied is discharged to the liquid discharge guide portion 226.
  • pure water used for cleaning contains a reagent (DAB) containing a carcinogenic substance
  • pure water is guided from the inclined substrate W through the liquid discharge guide portion 226 by the flow path switching mechanism 240. It is discharged and stored in the tank 208. And it progresses to the 11th process.
  • DAB reagent
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215), and conveys the stage 10R from the cleaning unit 230 to the reagent supply unit 250.
  • the reagent supply unit 250 selects a reagent (hematoxylin) that causes nuclear staining (counter-staining) based on a pathological specimen preparation protocol.
  • the control unit 285 drives and controls the reagent supply unit 250 (motor 257) to transport the cartridge 50R filled with the reagent (hematoxylin) so as to face the substrate W. Then, the controller 285 controls the electric pusher 258 to drop the reagent (hematoxylin) from the cartridge 50R onto the substrate W.
  • the dropping amount of the reagent (hematoxylin) is, for example, 150 ⁇ L.
  • the tissue specimen Ts and the reagent (hematoxylin) are reacted with each other by allowing to stand for 1 minute on the spot to perform nuclear staining (counter staining). And it progresses to a 12th process.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the reagent supply unit 250 to the cleaning unit 230.
  • the control unit 285 drives and controls the valve associated with the pump P2, discharges pure water stored in the tank 206 from the nozzle 231 and drips down for 2 minutes.
  • the control unit 185 drives and controls the stage tilting mechanism, and cleaning is performed by supplying pure water to the substrate W with the stage 10R tilted. Then, the control unit 285 opens the valve 235 and blows air from the nozzle 234 onto the substrate W for 1 second.
  • the pure water containing the reagent (hematoxylin) is guided from the inclined substrate W via the liquid discharge guide part 226 by the flow path switching mechanism 240 and is discharged and stored in the tank 207.
  • the control unit 285 drives and controls the stage conveyance mechanism (motor 215) to convey the stage 10R from the cleaning unit 230 to the origin. Then, the process proceeds to the thirteenth step.
  • the substrate W is taken out from the stage 10R, and a water-insoluble encapsulant is dropped onto the substrate W and covered with a cover glass to prevent drying of the tissue specimen Ts that has been cleaned. Perform the encapsulation process.
  • the time required for the thirteenth step is approximately 1 minute. And it progresses to 14th process.
  • an image analysis apparatus having an imaging unit is used to capture an image of the tissue sample Ts that has been subjected to the encapsulation process, and image analysis is performed to digitize the staining intensity.
  • the time required for the 14th step is approximately 1 minute.
  • a pathological diagnosis is performed by preparing a tissue sample Ts with a positive finding and a tissue sample Ts with a negative finding and digitizing and comparing the staining intensity by image analysis. Through the above steps, the preparation of the pathological specimen by the IHC of Example 4 is completed. The time required for preparation of the pathological specimen of Example 4 was about 25 minutes.
  • processing can be automatically performed from the second process to the twelfth process using the pathological specimen preparation apparatus 200. Therefore, the operator does not need to monitor the pathological specimen preparation apparatus 200 during this period, and can perform other work during the pathological specimen preparation.
  • the tissue specimen Ts that has undergone the nuclear staining process on the substrate W placed on the stage 10R is dried. There is a risk. Therefore, in the pathological specimen preparation system 2000 of this embodiment, the time after the end of the twelfth step is measured, and when the predetermined time has passed, the control unit 285 does not proceed to the thirteenth step.
  • a water-insoluble encapsulant is dropped onto the substrate W and covered with a cover glass.
  • Water-insoluble encapsulants are easy to adapt to xylene.
  • the cleaning liquid Cs dripped from the nozzle 231 is pure water that can be easily replaced with ethanol to prevent drying after the twelfth step is completed.
  • the pure water as the cleaning liquid Cs used for preventing the tissue specimen Ts from being dried is preferably, for example, distilled water sterilized by an autoclave or the like, unlike ultrapure water used for manufacturing a semiconductor device. It is done.
  • the pathological specimen preparation using the pathological specimen preparation system 2000 is not limited to the immunohistochemical staining (IHC) using the frozen section of Example 4 described above.
  • the present invention can also be applied to immunohistochemical staining (IHC) using the paraffin-embedded section of Example 2 shown in the first embodiment and in situ hybridization (ISH) similarly shown in Example 3. That is, pathological specimen preparation is started after confirming in advance the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R and the amount of the solution in the tanks 205 to 208.
  • the cleaning liquid Cs (which may contain the reagent Rs) discharged by blowing gas (air) onto the inclined substrate W is surely discharged.
  • the stage tilting mechanism of the present embodiment is a lever that is pivotally supported by the first stage support 221 as the stage 10R is transported to the cleaning unit 230 toward the origin in the Y direction by the stage transport mechanism. 222 rides on the flat plate 214 and rotates counterclockwise, and the tip 222d of the second arm 222b of the lever 222 pushes up the pedestal 12R of the stage 10R.
  • the stage 10 ⁇ / b> R pivotally supported by the second stage support portion 222 is inclined toward the liquid discharge guide portion 226. Therefore, since a drive system such as a dedicated motor for tilting the stage 10R is not required, a simple device configuration can be achieved.
  • the stage 10R is tilted in the range of 45 to 60 degrees from the horizontal state of the mounting portion 11R by the stage tilting mechanism.
  • the cleaning liquid Cs or the cleaning liquid Cs containing the reagent Rs supplied to the substrate W flows into the liquid discharge guide portion 226.
  • the cleaning liquid Cs can be discharged without leaving because it is supplied onto the substrate W.
  • the cleaning liquid Cs containing the cleaning liquid Cs or the reagent Rs remains on the substrate W, it is possible to reduce or prevent the influence on various processes in the preparation of the pathological specimen, and to properly prepare the pathological specimen. .
  • the inclined part 12f is inside the guide part 226b of the liquid discharge guide part 226. It was set as the structure located in. Thereby, even if the cleaning liquid Cs is transmitted from the mounting portion 11R to the pedestal 12R, the cleaning liquid Cs can be reliably poured into the liquid discharge guide portion 226. That is, it is possible to prevent the cleaning liquid Cs from leaking from the stage 10R to a place other than the liquid discharge guide portion 226 to cause a mechanical or electrical failure.
  • the pathological specimen preparation device 200 includes a remaining amount detection sensor 263 that detects the remaining amount of the reagent Rs in the cartridge 50R, and a remaining amount detection sensor 265 that detects the remaining amount of the solution stored in each of the tanks 205 to 208. It has. Therefore, it is possible to provide the pathological specimen preparation device 200 capable of appropriately and accurately managing the reagent Rs accommodated in the cartridge 50R and the solutions stored in the tanks 205 to 208.
  • the pathological specimen preparation system 2000 provided with the pathological specimen preparation apparatus 200 includes at least information on the remaining amount of the reagent Rs in each cartridge 50R and the solutions stored in the tanks 205 to 208 before starting the preparation of the pathological specimen. Information on the remaining amount of the information can be obtained.
  • the CCD 161 as the imaging unit is attached to the timing belt 156 that conveys the cartridge holder 155.
  • the CCD 261 as the imaging unit of the imaging unit 260 of the second embodiment is fixed to the timing belt 266 and can be freely moved in the X direction independently of the cartridge holder 255. In other words, since the CCD 261 can be transported to a predetermined location and the substrate W can be imaged without being affected by the transport of the cartridge 50R, it is possible to reduce the work related to the imaging and the load on the apparatus.
  • the pathological specimen preparation system 2000 transports the stage 10R on which the substrate W is placed again to the cleaning unit 230, and pure water from the nozzle 231. Is discharged onto the substrate W. Therefore, it is possible to prevent the tissue specimen Ts from being dried due to the leaving of the substrate W in the twelfth step of performing the nuclear dyeing process. In other words, since it is possible to prevent the tissue specimen Ts after the nuclear staining process from being dried, it is not necessary for the operator to always monitor the pathological specimen preparation apparatus 200, while the second process to the twelfth process are performed. Work can be done.
  • the present invention is not limited to the above-described embodiment, and can be appropriately changed without departing from the spirit or idea of the invention that can be read from the claims and the entire specification, and a pathological specimen preparation apparatus with such a change
  • a pathological specimen preparation system is also included in the technical scope of the present invention.
  • Various modifications other than the above embodiment are conceivable. Hereinafter, a modification will be described.
  • the configuration of the substrate 1 used for preparing the pathological specimen is not limited to the provision of the water-repellent ring 2 on the substrate 1 shown in FIG.
  • modified examples of the substrate 1 will be described with reference to FIGS. 48 to 50 are schematic plan views showing configurations of substrates of modified examples.
  • two water-repellent seals 2 a and 2 b may be attached on the substrate 1.
  • the two water-repellent seals 2a and 2b each have a circular opening.
  • the two water-repellent seals 2 a and 2 b are connected by a connection portion 2 c that is narrower than the width of the substrate 1.
  • each water repellent seal is formed with the same width as the width of the substrate 1, the reagent Rs and the cleaning liquid Cs dropped on the substrate 1 can be easily discharged by tilting the substrate 1.
  • the water-repellent seal 2d may be configured to surround a predetermined rectangular area on the substrate 1. According to this, a region where the tissue specimen Ts is arranged can be ensured wider than the water repellent ring 2. In other words, a pathological specimen can be produced without preparing the water repellent ring 2 that matches the size of the tissue specimen Ts.
  • the water-repellent seal 2e in which one long side portion on the side on which the stage 10 is inclined is eliminated from the water-repellent seal 2d in FIG. According to this, by inclining the substrate 1 by the stage 10, the reagent Rs and the cleaning liquid Cs dropped on the substrate 1 can be easily discharged.
  • FIG. 51 is a schematic perspective view showing a modified stage.
  • the modified stage 10RB is different from the above-described stage 10R in the form of the notch.
  • the stage 10RB includes a placement unit 11RB on which the substrate W is placed and a base 12RB that supports the placement unit 11RB from below.
  • the placement portion 11RB includes a guide portion 11a, a guide portion 11b, a guide portion 11e, and a guide portion 11f for placing the substrate W at predetermined positions in the X direction and the Y direction.
  • the guide portion 11a is provided on the right side in the X direction of the placement portion 11RB and on the rear end side in the Y direction.
  • the guide portion 11b is provided at the front left corner of the placement portion 11RB
  • the guide portion 11f is provided at the front right corner of the placement portion 11RB.
  • An inclined portion 11d is provided on the left side in the X direction of the placement portion 11RB.
  • a guide portion 11e that is formed integrally with the guide portion 11a and extends along the inclined portion 11d is provided.
  • the mounting portion 11RB has a notch portion 11h cut out between the guide portion 11b and the guide portion 11f on the front side, and the pedestal 12RB is also cut off at the front side overlapping the guide portion 11b and the guide portion 11f.
  • stage 10RB It has a notch 12h.
  • These notches 11h and 12h are formed with the right hand even when the operator holds the tweezers with the left hand when the end of the substrate W is gripped with the tweezers and set / reset with respect to the placement part 11RB.
  • the tweezers are notched so as not to hit the pedestal 12RB even when gripped. That is, the substrate W can be easily set and reset with respect to the stage 10RB.
  • the configuration of other parts of stage 10RB is the same as that of stage 10R described above.
  • the DAB used in the color development process of the first to fourth embodiments is not limited to one type.
  • a coloring buffer reagent (DAB1) and a concentrated coloring reagent (DAB2) may be used.
  • the ratio of DAB1 and DAB2 is set appropriately.
  • the pathological specimen preparation apparatus 100 was not used from the first step (deparaffinization) to the fourth step (washing). If the amount of the reagent Rs dropped from 50 can be adjusted more precisely, the first step (deparaffinization) to the fourth step (washing) can also be performed using the pathological specimen preparation apparatus 100 or the pathological specimen preparation apparatus 200. Processing is possible.
  • reagent supply section 155, 255 ... cartridge holders as holding sections, 161, 261 ... CCD as an imaging unit, 162, 262 ... Bar code reader, 170, 270 ... Electric field stirring unit, 18 , 285 ... controller, 203 ... display unit, 500 ... Computer, 503 ... memory as a storage unit, Cs ... cleaning liquid, Rs ... reagent, Ts ... tissue specimen, W ... substrate tissue specimen is fixed.

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Abstract

適正な病理標本の作製が可能な病理標本作製装置、該病理標本作製装置を備えた病理標本作製システムを提供すること。 病理標本作製装置100は、ステージ10を含むステージ部110と、ステージ10に載置された基板Wに対して試薬を供給可能な試薬供給部150と、同じく基板Wに対して洗浄液を供給可能な洗浄部130と、基板Wに供給された試薬または洗浄液に電界を印加して撹拌可能な電界撹拌部170と、制御部とを有し、洗浄部130と、試薬供給部150と、電界撹拌部170とが、第1の方向としてのY方向に順に配置され、Y方向にステージ10を移動させるステージ搬送機構と、ステージ10が洗浄部130に位置するときに、ステージ10をY方向と交差する第2の方向としてのX方向に傾斜させるステージ傾斜機構と、を備えた。

Description

病理標本作製装置、病理標本作製システム
 本発明は、病理標本作製装置、病理標本作製システムに関する。
 病理標本作製装置として、例えば、特許文献1には、組織標本が固定された基板が載置されるステージを有する試料載置ユニットと、抗体を含んだ溶液が収容された収容部から溶液を基板上の組織標本へ向けて滴下する滴下部材を備える溶液供給ユニットと、環状の一方の電極を備えた電界撹拌ユニットと、組織標本に向けて滴下された溶液を排出する排出管と、組織標本に向けて洗浄液を供給する供給管とを備えた洗浄ユニットと、を有する自動電界免疫組織染色装置が開示されている。
 上記特許文献1の自動電界免疫組織染色装置において、洗浄ユニットの排出管及び供給管は、電界撹拌ユニットの一方の電極における貫通穴に出し入れ可能となっている。また、排出管は、組織標本に滴下された溶液だけでなく、供給管によって組織標本に供給された洗浄液もまた排出可能となっている。
特開2015-155811号公報
 しかしながら、上記特許文献1の自動電界免疫組織染色装置では、基板上の組織標本に対して接触しない程度の距離を置いて、排出管が一方の電極の貫通穴に挿入されるので、組織標本に滴下された溶液や供給された洗浄液を余すことなく排出し難い。抗体を含む溶液や洗浄液が残存すると発色剤を用いた染色が適正に行われないおそれがある。
 また、上記特許文献1では、基板上に形成された撥水リングの内側に固定できる大きさで組織標本を採取する必要があるが、組織標本の採取の仕方によっては、撥水リングの内側に収まらない場合がある。そうすると、組織標本の必要な部分に滴下された溶液の十分な電界撹拌や、溶液及び洗浄液の確実な排出を排出管によって行うことがさらに困難となるという課題があった。
 本発明は、上述の課題の少なくとも一部を解決するためになされたものであり、以下の形態または適用例として実現することが可能である。
 [適用例]本適用例に係る病理標本作製装置は、組織標本が固定された基板が載置されるステージを含むステージ部と、前記ステージに載置された前記基板に対して試薬を供給可能な試薬供給部と、前記ステージに載置された前記基板に対して洗浄液を供給可能な洗浄部と、前記ステージに載置された前記基板に供給された前記試薬または前記洗浄液に電界を印加して撹拌可能な電界撹拌部と、制御部と、前記洗浄部と、前記試薬供給部と、前記電界撹拌部とが、第1の方向に順に配置され、前記第1の方向に前記ステージを移動させるステージ搬送機構と、前記ステージが前記洗浄部に位置するときに、前記ステージを前記第1の方向と交差する第2の方向に傾斜させるステージ傾斜機構と、を備え、前記制御部は、病理標本作製プロトコルに基づいて、前記ステージ搬送機構を駆動制御して、前記基板が載置された前記ステージを前記第1の方向に移動させる。
 本適用例の構成によれば、制御部が病理標本作製プロトコルに基づいて、ステージ搬送機構を駆動制御することで、組織標本が固定された基板を、第1の方向に配置された、洗浄部、試薬供給部、電界撹拌部のそれぞれに対して配置させることができる。
 例えば、ステージを試薬供給部に位置させて、抗体が含まれた試薬を組織標本に供給した後に、ステージを電界撹拌部に位置させて試薬を撹拌し、抗原抗体反応を行うことができる。その後に、ステージを洗浄部に位置させて洗浄液を供給すれば、抗原抗体反応が終了した組織標本を洗浄することができる。加えて、ステージが洗浄部に位置するとき、ステージ傾斜機構によってステージは第1の方向と交差する第2の方向に傾斜するので、供給された試薬あるいは洗浄液を確実に基板上から排出することができる。すなわち、病理標本作製プロトコルに基づいて、病理標本を適正に作製可能な病理標本作製装置を提供することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記ステージ傾斜機構は、前記ステージを水平な状態から前記第2の方向に60度以上傾斜させることが好ましい。
 この構成によれば、供給された試薬あるいは洗浄液をより確実に基板上から排出することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記ステージ傾斜機構は、前記ステージの前記洗浄部への移動に伴って、前記ステージを下方から押し上げて傾ける支持機構を有することが好ましい。
 この構成によれば、比較的に簡素な構成で、ステージを第2の方向に傾斜させることができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記ステージ部は、前記ステージと、前記ステージ搬送機構と、前記ステージ傾斜機構とを含むことが好ましい。
 この構成によれば、ステージ搬送機構とステージ傾斜機構とを含めてステージ部を交換することが可能となるため、ステージ部のメンテナンス性が向上する。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記第2の方向に、複数の前記ステージ部が並列して配置され、前記試薬供給部は、複数の前記ステージ部ごとの前記ステージに載置された前記基板に対して前記試薬を供給可能であり、前記洗浄部は、複数の前記ステージ部ごとの前記ステージに載置された前記基板に対して前記洗浄液を供給可能であり、前記電界撹拌部は、前記第2の方向に複数の前記ステージ部に跨って設けられ、前記ステージに載置された前記基板に供給された前記試薬または前記洗浄液に電界を印加可能な一方の電極を備えることが好ましい。
 この構成によれば、例えば、同一の検体から採取された複数の組織標本、あるいは異なる検体から採取された複数の組織標本を用いて、同時に複数の病理標本を作製することが可能な病理標本作製装置を提供することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記試薬は、前記試薬を吐出可能なカートリッジに充填され、前記試薬供給部は、前記カートリッジを脱着可能な複数の保持部と、前記複数の保持部を前記第2の方向に搬送可能な搬送部と、を備え、前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記搬送部を駆動制御し、前記ステージに対向する位置に、前記複数の保持部のうちの少なくとも1つを移動させることが好ましい。
 この構成によれば、病理標本作製プロトコルに基づいて、複数種の試薬をそれぞれ独立して組織標本に供給することができる。言い換えれば、複数種の試薬を用いる病理標本作製プロトコルを1台の装置で実行することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置は、前記カートリッジに付与されたバーコードを読み取り可能なバーコードリーダーをさらに備えることが好ましい。
 この構成によれば、病理標本の作製時に使用された試薬と病理標本とのトレーサビリティーを図ることができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記カートリッジは、前記試薬を収容可能な透光性の収容部を有し、前記収容部における前記試薬の有無を光学的に検出可能な残量検出センサーを備えることが好ましい。
 この構成によれば、残量検出センサーによってカートリッジにおける試薬の有無を検出することが可能となることから、試薬を有効に利用可能な病理標本作製装置を提供できる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記洗浄部は、ノズルと、複数の洗浄液タンクと、前記複数の洗浄液タンクに前記ノズルの接続先を切り替え可能なバルブと、を備え、前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記バルブを駆動制御し、前記複数の洗浄液タンクのうちの1つに前記ノズルを接続させることが好ましい。
 この構成によれば、複数の洗浄液タンクに異なる種類の洗浄液を貯留することができ、異なる種類の洗浄液をそれぞれノズルから吐出して組織標本の洗浄が可能となる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記複数の洗浄液タンクのうちの1つに前記洗浄液として純水が充填されることが好ましい。
 この構成によれば、組織標本に供給された試薬を純水によって洗浄することが可能となる。すなわち、組織標本の洗浄性が向上する。また、例えば乾燥後に塩などの異物が生成される洗浄液を用いた場合、ノズルなどの供給経路が当該異物で閉塞されるおそれがあるが、純水を用いて洗浄液の供給経路を洗浄することにより当該異物を除去して、洗浄液の安定供給を実現できる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記洗浄部は、ガス供給手段にバルブを介して接続されたノズルを備え、前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記ステージが前記洗浄部に位置するときに、前記ステージに載置された前記基板に前記ノズルからガスを吹き付けるように前記バルブの開閉を制御することが好ましい。
 この構成によれば、ステージ傾斜機構によってステージを傾けることにより、ステージに載置された基板に供給された試薬あるいは洗浄液を排出するだけでなく、ガス供給手段に接続されたノズルからガスを基板に吹き付けて、より確実に試薬あるいは洗浄液を排出することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置は、廃液タンクと、前記ステージが前記洗浄部に位置しているときに、傾斜した前記ステージ上の前記基板から流れ落ちる前記試薬または前記洗浄液を前記廃液タンクに向けて排出する排出流路と、をさらに備えることが好ましい。
 この構成によれば、ステージ上の基板から流れ落ちる試薬または洗浄液を漏れなく廃液タンクに回収することができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記廃液タンクは、第1廃液タンクと、第2廃液タンクとを含み、前記排出流路は、前記第1廃液タンクに向かう第1排出流路と、前記第2廃液タンクに向かう第2排出流路とを含み、傾斜した前記ステージ上の前記基板から流れ落ちる前記試薬または前記洗浄液を、前記第1排出流路または前記第2排出流路に流すことが可能な流路切り替え機構をさらに備え、前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記試薬または前記洗浄液の種類によって、前記流路切り替え機構を制御して、前記試薬または前記洗浄液の排出先を前記第1排出流路または前記第2排出流路に切り替えることが好ましい。
 この構成によれば、病理標本作製プロトコルにおいて、例えば、廃液における取扱いが異なる試薬を用いたとしても、確実に分離して第1廃液タンクまたは第2廃液タンクに回収することができる。言い換えれば、すべての試薬を混ぜて廃液タンクに回収する場合に比べて、試薬ごとに廃液の取り扱いを管理できる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記ステージに載置された前記基板を撮像可能な撮像部をさらに備えることが好ましい。
 この構成によれば、撮像部によって組織標本が固定された基板を撮像可能であることから、撮像された基板の画像情報と病理標本作製プロトコルとを関連付けて管理することが可能となる。すなわち、病理標本作製におけるトレーサビリティーの向上を図ることができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製装置において、前記病理標本作製プロトコルに係る情報を表示可能であって、前記病理標本作製プロトコルの操作に係る入力手段を有する表示部を備えることが好ましい。
 この構成によれば、作業者は、病理標本作製プロトコルに係る情報を確認しながら、病理標本作製装置を操作することができるため、別途、キーボードなどの入力手段を有するコンピューターなどを使って病理標本作製装置を操作する場合に比べて、操作を効率的に行うことができる。
 [適用例]本適用例に係る病理標本作製システムは、上記適用例に記載の病理標本作製装置と、病理標本作製プロトコルが格納される記憶部を有するコンピューターと、を備え、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記コンピューターが前記病理標本作製装置を駆動制御する。
 本適用例の構成によれば、病理標本作製プロトコルに基づいて、病理標本を適正に作製可能な病理標本作製システムを提供することができる。また、病理標本作製装置にすべての制御機能を持たせずに、コンピューターに任せることができるので、病理標本作製装置を簡素化できる。さらに、コンピューターを指定のネットワークに組み入れれば、病理標本の作製結果及び作製過程を総合的に管理することも可能である。
 上記適用例に記載の病理標本作製システムにおいて、試薬は、前記試薬を吐出可能であって、バーコードが付与されたカートリッジに充填され、前記コンピューターは、前記カートリッジのバーコードに関連付けられた前記試薬の情報を入手して、前記病理標本作製プロトコルに基づく試薬の情報との照合を実行することが好ましい。
 この構成によれば、病理標本作製プロトコルにより指定される試薬の管理を徹底できる。
 上記適用例に記載の病理標本作製システムにおいて、試薬は、前記試薬を収容可能な透光性の収容部を有するカートリッジから吐出され、前記病理標本作製装置は、前記収容部の前記試薬の有無を光学的に検出可能な残量検出センサーを含み、前記コンピューターは、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、少なくとも病理標本の作製を開始する前に、前記残量検出センサーにより前記試薬の残量を検出することが好ましい。
 この構成によれば、カートリッジにおける試薬の残量を残量検出センサーによって検出することができることから、病理標本の作製にあたり、例えば途中で試薬が不足して作製が中断するなどの不具合が発生しないように、カートリッジにおける試薬の残量管理を徹底可能な病理標本作製システムを提供できる。また、カートリッジにおける試薬の残量管理を徹底することで、カートリッジの交換時期や在庫管理の精度を向上させることができることから、カートリッジの在庫管理に係るコストを低減することも可能である。
 上記適用例に記載の病理標本作製システムにおいて、前記コンピューターは、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記基板に固定された前記組織標本を発色させ洗浄した後の放置時間が所定の時間に到達したとき、前記基板を前記洗浄部に搬送して、前記洗浄部から前記基板に前記洗浄液として純水を供給させることが好ましい。
 この構成によれば、作業者が病理標本作製システムから離れている間に、病理標本の作製が終了したとしても、作製された病理標本には適宜洗浄液として純水が供給されるので、病理標本が乾燥して発色状態が変化するなどの不具合を防ぐことができる。
 上記適用例に記載の病理標本作製システムにおいて、前記コンピューターは、基板及び前記基板に固定された組織標本の画像を入手し、入手した前記画像と、前記病理標本作製プロトコルとを関連付ける操作を実行することが好ましい。
 この構成によれば、病理標本作製プロトコルと、病理標本作製プロトコルに基づいて作製された病理標本の情報とを関連付けて管理することができ、病理標本作製におけるトレーサビリティーの向上を図ることができる。
組織標本が固定されたワークを示す斜視図。 病理標本の作製工程を示す概略図。 電界撹拌工程における原理を説明する図。 第1実施形態の病理標本作製装置の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態のステージ部の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態のステージを示す概略斜視図。 第1実施形態の液体排出ガイド部を示す概略斜視図。 第1実施形態のステージ傾斜機構を説明する要部斜視図。 第1実施形態のステージ傾斜機構を説明する要部斜視図。 第1実施形態の傾斜したステージと他の構成との位置関係を示す図。 第1実施形態の洗浄部の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態の流路切り替え機構の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態の洗浄液の供給の仕方を示す概略図。 第1実施形態の洗浄液の供給の仕方を示す概略図。 第1実施形態の洗浄液の供給の仕方を示す概略図。 第1実施形態の試薬供給部の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態のカートリッジを示す斜視図。 第1実施形態の試薬供給部の動きを説明するための概略平面図。 第1実施形態の電界撹拌部の構成を示す概略斜視図。 第1実施形態の電界撹拌部の電極の形状を示す概略断面図。 第1実施形態の病理標本作製装置の外装カバーを示す概略斜視図。 第1実施形態の病理標本作製システムの電気的、機械的な構成を示すブロック図。 実施例1の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表。 比較例1の免疫組織化学染色における病理標本の作製工程を示す表。 実施例2の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表。 比較例2の免疫組織化学染色における病理標本の作製工程を示す表。 実施例3のIn situ ハイブリダイゼーションによる病理標本の作製工程を示す表。 比較例3のIn situ ハイブリダイゼーションにおける病理標本の作製工程を示す表。 第2実施形態の病理標本作製装置の外装を示す概略斜視図。 第2実施形態の病理標本作製装置の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態のステージ部の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態のステージを示す概略斜視図。 第2実施形態の液体排出ガイド部を示す概略斜視図。 第2実施形態のステージ傾斜機構を説明する概略斜視図。 第2実施形態の傾斜したステージと他の構成との位置関係を示す図。 第2実施形態の洗浄部の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態の流路切り替え機構の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態における洗浄液の供給の仕方を示す配管系統図。 第2実施形態における洗浄液の供給の仕方を示す配管系統図。 第2実施形態における洗浄液の供給の仕方を示す配管系統図。 第2実施形態の試薬供給部の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態のカートリッジを示す斜視図。 第2実施形態の試薬供給部に係る各部の配置を示す概略平面図。 第2実施形態の試薬供給部に係る各部の配置を示す概略側面図。 第2実施形態の電界撹拌部の構成を示す概略斜視図。 第2実施形態の病理標本作製システムの電気的、機械的な構成を示すブロック図。 実施例4の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表。 変形例の基板の構成を示す概略平面図。 変形例の基板の構成を示す概略平面図。 変形例の基板の構成を示す概略平面図。
 以下、本発明を具体化した実施形態について図面に従って説明する。なお、使用する図面は、説明する部分が認識可能な状態となるように、適宜拡大または縮小して表示している。
 (第1実施形態)
 <病理標本の作製方法>
 まず、本実施形態の病理標本の作製方法における基本的な工程について、図1~図3を参照して説明する。図1は組織標本が固定されたワークを示す斜視図、図2は病理標本の作製工程を示す概略図、図3は電界撹拌工程における原理を説明する図である。
 病理部門で作製される病理標本からは、患者の診断、予後及び医療処置選択に関する重要な情報を得ることができる。病理標本の作製方法には、組織標本としての組織や細胞の形状を見ながら、組織や細胞中のタンパク質の発現量を観察する免疫組織化学染色法(IHC)や、組織や細胞中の遺伝子の発現量を観察するIn situ ハイブリダイゼーション法(ISH)などが挙げられる。
 図1に示すように、病理標本の作製に用いられる組織標本Tsは、基板1に固定される。基板1は、JIS R 3703:1998にて規格化されている、幅26mm、長さ76mm、厚さ1.1mmの無色透明な顕微鏡用スライドガラスが用いられる。基板1には、固定された組織標本Tsに対して供給される試薬などの溶液を所定の範囲内で保持するため、例えば撥水リング2が形成されている。組織標本Tsは例えば薄切りされた組織の切片であって、撥水リング2の内側に固定される。撥水リング2は、基板1に撥水剤をリング状に塗布して形成してもよいし、撥水性を有するリング状のシールを基板1に貼り付けてもよい。組織標本Tsが固定された基板1に対して、組織標本Tsを囲むように撥水リング2を形成してもよい。なお、撥水部分の形状は、円形であることに限定されず、四角形などの多角形であってもよい。
 また、基板1には、固定された組織標本Tsを識別するためのマーキング領域3が基板1の長手方向における一方の端部側に設けられている。マーキング領域3に、例えば、固定された組織標本Tsの名称や管理番号などが記載されたシールを貼り付けてもよいし、固定された組織標本Tsの名称や管理番号などを記載することが可能な塗面を形成してもよい。
 撥水リング2は、基板1に対して1つ形成されることに限定されず、例えば2つ形成してもよい。一方の撥水リング2内にポジティブ組織標本を固定し、他方の撥水リング2内に比較用のネガティブ組織標本を固定してもよい。以降、組織標本Tsが固定された基板1を、基板Wと呼ぶこととする。
 上述したIHCやISHなどの病理標本の作製方法において、共通する工程としては、図2に示すように、基板Wに洗浄液Csを塗布して洗浄する洗浄工程や、基板Wに試薬Rsを塗布して組織標本Tsと試薬Rsとを反応させる反応工程が挙げられる。試薬Rsとしては、抗原抗体反応工程に用いられる1次抗体試薬や2次抗体試薬、発色反応工程に用いられる発色試薬などが挙げられる。洗浄工程はこれらの反応工程の前に行われるだけでなく、残留する余計な試薬Rsを取り除くために反応工程後にも行われる。本実施形態の病理標本の作製方法では、病理標本の作製を効率的に進めるために、基板W上に滴下された試薬Rsなどの溶液Sに電界を印加することで撹拌を行う電界撹拌工程が取り入れられている。基板Wはこれらの洗浄工程や反応工程、電界撹拌工程を行き交うことになる。
 詳しくは後述するが、本実施形態では、病理標本作製装置を含む病理標本作製システムを用いて病理標本の作製を行う。洗浄工程では、ノズル131から所定量の洗浄液Csを液滴として基板Wに滴下して洗浄を行う。反応工程では、試薬Rsが充填されたカートリッジ50から所定量の試薬Rsを液滴として基板Wに滴下して反応を行う。電界撹拌工程では、対向配置された一対の電極10,20間に基板Wを配置して、一対の電極10,20間に電界を発生させることにより溶液Sを撹拌する。
 図3に示すように、電界撹拌工程では、上下に対向配置された一対の電極10,20のうち下電極10に基板Wを載置する。所定の間隔を置いて対向配置された下電極10と上電極20との間に、例えば、0kv~4kvの間で電位が変化する矩形状の電位を所定の周期で印加して電界を発生させる。電位の上昇に伴って生ずるクーロン力によって、溶液Sが上電極20側に引き寄せられる。電位の下降に伴ってクーロン力が弱まり、上電極20側に引き寄せられた溶液Sは重力によって落ち込む。このような溶液Sの変形を繰り返すことで溶液Sの撹拌が行われる。なお、病理標本作製装置では、基板Wが載置される下電極10は、洗浄工程、反応工程において、基板Wが載置されるステージとして機能するようになっているため、以降の説明では、ステージ10と呼ぶこととする。
 上述した病理標本の作製工程における、例えば、洗浄液Csや試薬Rsの種類、洗浄や反応、電界撹拌の条件などの工程条件は、病理標本作製プロトコルとして予め設定され利用される。
 <病理標本作製装置>
 次に、本実施形態の病理標本作製装置の概要について、図4を参照して説明する。図4は病理標本作製装置の構成を示す概略斜視図である。
 図4に示すように、本実施形態の病理標本作製装置100は、4つのタンク106,107,108,109と、ステージ部110、洗浄部130、試薬供給部150、電界撹拌部170、回路部180と、これらの各部が配置される構造体であるフレーム105と、を備えている。フレーム105は、略正方形の第1プレート101及び第2プレート102と、長方形である2つの第3プレート103と、これらのプレートを第1プレート101から順に間隔をおいて支持するための複数の支持柱104とを有している。フレーム105は、例えばアルミニウムからなる。
 病理標本作製装置100を使用する際には、作業者に対して洗浄部130が手前に来るため、洗浄部130を手前にしたときの、左右方向をX方向とし、前後方向をY方向とし、上下方向をZ方向として、以降説明する。なお、本実施形態では、Y方向が本発明の第1の方向に相当し、X方向が本発明の第1の方向に交差する第2の方向に相当するものである。
 フレーム105の下段である第1プレート101には、Y方向の前方側に4つのタンク106,108,109,107がこの順にX方向に並んで配置されている。タンク106には、組織標本Tsの乾燥などを防ぐバッファー溶液であって、例えばリン酸緩衝生理食塩水(PBS)やTris-Buffered-Saline(TBS)、Standard-Saline-Citrate(SSC)などの洗浄液が貯留される。タンク107には、他の洗浄液としての純水(HO)が貯留される。タンク106,107は、耐薬品性や重量などを考慮して、例えばポリエチレンやポリプロピレンなどの樹脂容器が用いられる。タンク106,107は本発明における洗浄液タンクの一例である。
 2つのタンク106,107の間に配置されたタンク108,109は、洗浄液Csや試薬Rsの廃液を貯留するために用意されたものである。洗浄液Csの廃液と試薬Rsの廃液とを1つのタンクに排出して貯留してもよいが、試薬Rsには、前述した発色試薬のように発癌性を有する物質(発色剤)を含むものもあり、他の液体と混ぜてしまうと、所定の廃液処理を施すことが必要な廃液量が増えてしまう。そこで、本実施形態では、洗浄液Csの廃液と試薬Rsの廃液とを混ぜて貯留してもよいタンク108と、発色試薬を含む廃液を貯留するタンク109とを個別に設けた構成としている。タンク108,109もまた、タンク106,107と同様に、例えばポリエチレンやポリプロピレンなどの樹脂容器が用いられる。タンク108,109は本発明における廃液タンク(第1廃液タンク、第2廃液タンク)の一例である。なお、タンクの数は4つであることに限定されず、用いられる洗浄液Csの種類などに応じて数を増やしてもよい。
 第1プレート101におけるY方向の後方側には、回路部180が配置されている。回路部180は、ステージ部110、洗浄部130、試薬供給部150、電界撹拌部170に含まれる電気的な駆動系に電源を供給する電源ユニットや、各部の制御に係る制御部などが含まれている。回路部180の電気的な構成については、後述する病理標本作製システムにおいて説明する。
 第1プレート101のZ方向の上方に位置する第2プレート102には、ステージ部110と、洗浄液Csをタンク106あるいはタンク107から送り出して供給するための2つのポンプと、洗浄液Csや試薬Rsの廃液をタンク108またはタンク109のいずれかに分けて排出するための排出流路を切り替える流路切り替え機構とが配置されている。2つのポンプや流路切り替え機構については後述する。
 ステージ部110は、基板Wが載置されるステージ10と、ステージ10をY方向に移動させるステージ搬送機構と、ステージ10をX方向に傾斜させるステージ傾斜機構とを含むものである。第2プレート102には、Y方向に延びるステージ部110がX方向に並列して複数(本実施形態では6つ)配置されている。ステージ搬送機構及びステージ傾斜機構の詳細については後述する。なお、ステージ部110の数は6つに限定されるものではない。
 Y方向に延びる第3プレート103は、X方向に並列した複数(6つ)のステージ部110を挟むようにして、X方向及びY方向の一方の端部と他方の端部とにおいて、支持柱104によって支持されている。
 洗浄部130、試薬供給部150、電界撹拌部170は、X方向において2つの第3プレート103に跨ると共に、Y方向においてこの順に第3プレート103上に配置されている。洗浄部130は、ステージ10の数に対応した複数(6つ)のノズル131を有し、複数(6つ)のステージ10のそれぞれに2種の洗浄液Csの中から洗浄に必要な洗浄液Csを供給可能な構成となっている。試薬供給部150は、複数(6つ)のステージ10のそれぞれに複数種の試薬Rsの中から反応に必要な試薬Rsを供給可能な構成となっている。電界撹拌部170は、前述した一対の電極10,20のうち上電極20を有している。上電極20は、複数(6つ)のステージ部110に跨るようにX方向に延在して配置されている。
 各ステージ部110において、ステージ10は、ステージ搬送機構によってY方向に移動し、洗浄部130、試薬供給部150、電界撹拌部170のそれぞれに対応して配置される構成となっている。
 このような病理標本作製装置100によれば、最大で6つの基板Wを用いて病理標本を作製することが可能である。また、フレーム105において、4つのタンク106,107,108,109及び回路部180と、ステージ部110と、洗浄部130及び試薬供給部150並びに電界撹拌部170とが重畳された状態で配置されているので、フットプリント(設置面積)が小さく、小型な病理標本作製装置100が実現されている。以降、病理標本作製装置100における各部の構成や構造について説明する。なお、このように各部を重畳して配置可能なフレーム105は、第1プレート101、第2プレート102、第3プレート103を有する3段構成であることに限定されず、3段以上の例えば4段であってもよい。
 <ステージ部>
 図5はステージ部の構成を示す概略斜視図、図6はステージを示す概略斜視図、図7は液体排出ガイド部を示す概略斜視図、図8及び図9はステージ傾斜機構を説明する要部斜視図である。
 図5に示すように、ステージ部110は、ステージ10、支持フレーム111、モーター115、リニアガイド117、第1支持部119、第2支持部120、液体排出ガイド部126などを有している。
 図6に示すように、ステージ10は、略直方体であって、長手方向がY方向に沿って配置される。ステージ10は、基板Wが載置される上面11と、上面11のうち前方右隅の一部が切り欠かれた切欠き部13と、上面11の左側の長辺部、前後の短辺部に沿って設けられた縁部14とを有している。切欠き部13は、基板Wの端を例えばピンセットなどで把持して上面11に対してセット・リセットする際に、ピンセットがステージ10にぶつからないように切り欠かれている。つまり、ステージ10に対する基板Wのセット・リセットを容易に行える構成となっている。
 また、縁部14の左側の長辺部から外側に張り出して傾斜した傾斜部14aを有している。詳しくは後述するが、ステージ10は、第2支持部120によって、一定の方向に回転可能な状態で短辺部側が支持されている。また、ステージ10の短辺部側の側面には、第2支持部120によるステージ10の支持に係る2つのネジ孔10b,10cが設けられている。
 図5に示すように、支持フレーム111は、Y方向に延びる上面部113と、上面部113をY方向の両端において支える一対の脚部111a,111b及び一対の底面部112a,112bとを有している。支持フレーム111は、例えばSUS板を外形加工した後に折り曲げることで、これらの一対の脚部111a,111b、一対の底面部112a,112b、上面部113が一体的に形成されたものである。上面部113のZ方向の下側の面に、Y方向に延在するようにリニアガイド117が設けられている。
 モーター115は、例えばステッピングモーターであって、回転軸がZ方向の上側に向くように、一対の脚部111a,111bのうちY方向の後方側に位置する脚部111bに取り付けられている。回転軸にはタイミングプーリー116bが装着されている。もう一つのタイミングプーリー116aが上面部113のY方向の前方の下側に回転可能に軸支されている。2つのタイミングプーリー116a,116bにタイミングベルト118が架け渡されている。架け渡されたタイミングベルト118のX方向における右側部分に第1支持部119が固定されている。モーター115を駆動すると、タイミングベルト118が回り、タイミングベルト118に固定された第1支持部119をY方向において前方と後方とに移動させることができる。
 第1支持部119は、外形がT字状であって、Z方向に延びる四角柱状の支持棒121が取り付けられている。支持棒121の下方端には、ミニチュアベアリングを介して円柱状のロッド122が回転自在な状態で取り付けられている。支持棒121は、上方端を他の部分に比べて大きく形成することにより、上方端が第1支持部119で受け止められ、下方端が第1支持部119から下方に突出した状態から、Z方向の上方側にのみ移動可能な状態で第1支持部119に組み込まれている。
 また、第1支持部119には、X方向の左側に延びる一対のガイド部124が取り付けられている。一対のガイド部124は、Z方向において支持フレーム111の上面部113とリニアガイド117とを挟むように、第1支持部119に取り付けられている。一対のガイド部124のうちZ方向の下側のガイド部124にスライダー117aが取り付けられている。スライダー117aは、リニアガイド117に嵌合して、リニアガイド117に沿ってY方向に移動可能となっている。つまり、モーター115を駆動すると、第1支持部119をリニアガイド117に沿ってY方向に移動させることができる。一対のガイド部124のうちZ方向の上側のガイド部124に第2支持部120が取り付けられている。
 第2支持部120は、Y方向の両端側においてZ方向の上側に折り曲げられた側面部120aを有し、向かい合った側面部120aの間にステージ10がY方向に沿うように挟み込まれて支持されている。したがって、モーター115を駆動すると、ステージ10を支持フレーム111のリニアガイド117に沿ってY方向に移動させることができる。
 すなわち、本実施形態のステージ搬送機構は、少なくとも、支持フレーム111、モーター115、2つのタイミングプーリー116a,116b、リニアガイド117、スライダー117a、タイミングベルト118、第1支持部119、第2支持部120、一対のガイド部124を含むものである。
 支持フレーム111の一対の底面部112a,112bのうち、Y方向における前方側の底面部112aの後方側の隅にL字フレーム114が立設されている。L字フレーム114は、L字の長辺部114bがY方向に沿うように配置されており、長辺部114bの上端がX方向の右側に折り曲げられて上面部114aを成している。また、長辺部114bに略台形状のカム125が取り付けられている。また、カム125は、Y方向において、病理標本作製装置100における洗浄部130に対応した位置に取り付けられている。
 カム125に対して、架け渡されたタイミングベルト118を挟んだX方向の左側に、液体排出ガイド部126が設けられている。図7に示すように、液体排出ガイド部126は、X方向から見たときに外形が野球のホームベースに似た略5角形の樋であって、その下方端に可撓性のチューブ127が取り付けられている。また、液体排出ガイド部126は、X方向の右側に突出する突出部123を有している。突出部123は、X方向の右側に延びる第1突出部123aと、第1突出部123aに対しておよそ60度で傾斜している第2突出部123bと、を有している。第1突出部123aと第2突出部123bとの間には、隙間123cが設けられている。
 図5に示すように、第1突出部123aがカム125のZ方向における上方側において、支持フレーム111の上面部113に取り付けられている。すなわち、液体排出ガイド部126は、カム125と同様に、病理標本作製装置100における洗浄部130に対応した位置に取り付けられている。例えば、洗浄部130から供給される洗浄液が第1突出部123aに漏れたとしても、上記隙間123cから液体排出ガイド部126によって排出可能となっている。液体排出ガイド部126は、本発明の傾斜したステージ上の基板から流れ落ちる試薬または洗浄液を廃液タンクに向けて排出する排出流路の一部をなすものである。
 支持フレーム111の一対の脚部111a,111bのうち、Y方向の前方側の脚部111aにマイクロスイッチ128が取り付けられている。マイクロスイッチ128は、モーター115を駆動して第1支持部119がY方向の前方側に移動したときに、第1支持部119に接触する位置に設けられている。マイクロスイッチ128は、Y方向に移動する第1支持部119すなわちステージ10の位置を検出するために設けられたものである。マイクロスイッチ128に第1支持部119が接触することで、マイクロスイッチ128がON状態となるとモーター115が停止する。すなわち、ステージ10がY方向の前方において停止する。本実施形態では、マイクロスイッチ128に第1支持部119が接触した位置がステージ10の移動における原点であり、停止したステージ10に対して基板Wがセット・リセットされる(図2参照)。
 次に、本実施形態のステージ傾斜機構について、図8~図9を参照して説明する。
 図8に示すように、ステージ10は、第1支持部119のガイド部124上に第2支持部120を介して支持されている。第2支持部120の側面部120aには、ステージ10を回転可能に軸支する軸部120bが設けられている。ステージ10の短辺側の側面には、バネ18の一方を係止する係止部17が設けられ、第2支持部120の側面部120aの内側には、バネ18の他方を係止する係止部120cが設けられている。これにより、バネ18によってステージ10がZ方向の下方に向かって付勢され、ガイド部124に立設されたストッパー124aによって回転が止められる状態となっている。
 カム125は、カム125の底面125aが、L字フレーム114の上面部114aと向かい合うように、長辺部114bに取り付けられている。また、カム125は、Y方向における後方の斜面が前方の斜面に比べて傾斜角度が小さくなっている略台形状である。カム125は、通常では、後方の斜面の端部がL字フレーム114の上面部114aに接するように、Y方向における前方側がZ方向における上側に付勢されている。つまり前方の斜面の端部と上面部114aとの間には隙間が生じた状態となっている。モーター115が駆動され、第1支持部119が原点からY方向の後方に向かって移動すると、支持棒121の下方端のロッド122は、上記隙間に侵入して上面部114aとカム125との間をすり抜けて行く。つまり、ステージ10の原点からY方向の後方へ向かう移動では、支持棒121のZ方向の上方に向かった移動は起こらない。
 これに対して、図9に示すように、モーター115が駆動され、第1支持部119がY方向の後方から原点に向かって移動すると、支持棒121の下方端のロッド122は、カム125の後方の斜面125cに乗り移る。そうすると、支持棒121は、ステージ10の下方に位置しているため、支持棒121の上方端121aがステージ10の底面12を押し上げる。一方でステージ10は上述したように、バネ18によってZ方向の下方に付勢されているので、ステージ10の底面12に当接した支持棒121はカム125を押し下げる。カム125の底面125aはL字フレーム114の上面部114aと接して固定される。第1支持部119の移動によりロッド122がカム125の後方の斜面125cから上面125bに乗り上げることにより、支持棒121はさらにステージ10の底面12をZ方向の上方に押し上げる。これにより、ステージ10は第2支持部120の側面部120aに設けられた軸部120bを中心にしてX方向の左側に回転する。つまり、ステージ10の上面11に載置された基板WはX方向の左側に傾く。なお、図8及び図9に示すように、一対のガイド部124のうち上側のガイド部124には、上述したように棒状のストッパー124aが設けられている。ステージ10は、底面12がストッパー124aの先端部に当接しているとき、言い換えれば、ステージ10の底面12が支持棒121で押し上げられていないとき、ステージ10の上面11の姿勢は水平な状態となっている。ストッパー124aは、ステージ10の水平状態を調整するため、ガイド部124に取り付けられたときの長さを調整可能な状態で固定されている。
 すなわち、本実施形態のステージ傾斜機構は、少なくとも、L字フレーム114、支持棒121、カム125、第2支持部120を含むものであって、これらは本発明における支持機構の一例である。ステージ10を傾斜させるために、専用の例えばモーターやピストンなどの駆動部を有していないことから、簡素な構成でステージ10を傾斜可能となっている。
 図10は傾斜したステージと他の構成との位置関係を示す図である。詳しくは、Y方向側から傾斜したステージ10を見たときの図である。
 本実施形態では、上述したステージ傾斜機構により、ステージ10の上面11を水平な状態からX方向の左側に傾斜させている。ステージ10を傾斜させたときに、ステージ10の縁部14の傾斜部14aが液体排出ガイド部126における第2突出部123bとの間にわずかに隙間を有して止まるようになっている。ステージ10の上面11の傾斜角度θは、基板Wに供給された試薬Rsや洗浄液Csを基板W上から容易に且つ確実に排出する観点から、60度以上であることが好ましい。また、ステージ10を傾斜させたときに、洗浄部130のノズル131から吐出された洗浄液Csが基板Wの撥水リング2上に落ちるように、ステージ10に対するノズル131の相対的な位置が調整されている。洗浄部130において、ステージ10の上面11に載置された基板Wは水平の状態から60度に傾斜するので、基板Wに供給された試薬Rsや洗浄液Csは、基板Wから液体排出ガイド部126を経由して排出される。
 また、図6に示すようにステージ10のY方向の長さをL1とし、図7に示すように液体排出ガイド部126の第1突出部123aのY方向の長さをL2とし、図9に示すようにカム125の上面125bのY方向の長さをL3とすると、L1、L2、L3は以下の数式(1)を満たすようになっている。
 L2≧L1+L3・・・(1)
 本実施形態のステージ傾斜機構によれば、支持棒121の下端のロッド122がカム125の上面125bに乗り上げて、支持棒121の上方端121aが底面12を押し上げてステージ10を傾斜させた状態で、ステージ10をY方向にL3の長さの範囲で移動させることができる。このとき、基板Wに供給された試薬Rsや洗浄液Csが確実に液体排出ガイド部126に排出される構成となっている。基板Wに配置される組織標本Tsは、図1に示すように1つであるとは限らず、複数の組織標本Tsが配置される。また、組織標本Tsの大きさも一定であるとは限らない。すなわち、基板Wに配置された組織標本Tsの状態に合わせて供給された試薬Rsや洗浄液Csを確実に排出することができる各部の構成となっている。
 なお、ステージ10の傾斜角度θは、支持棒121によりステージ10の底面12をどの程度押し上げるかで決まる。本実施形態では、図9に示すように、支持棒121の下方端に設けられたロッド122がカム125の上面125bに乗り上げたときの、L字フレーム114の上面部114aからカム125の上面125bに至る高さhを調整することで、傾斜角度θを調整することができる。
 <洗浄部>
 次に、本実施形態の洗浄部130について、図11及び図12を参照して説明する。図11は洗浄部の構成を示す概略斜視図、図12は流路切り替え機構の構成を示す概略斜視図である。
 図11に示すように、洗浄部130は、複数(6つ)のT字型のノズル131と、互いに対となる複数のバルブを備えたバルブ群132及びバルブ群133と、洗浄液切り替え用の2つのバルブ134,135と、複数のノズル131を支持する支持プレート136と、を有している。
 支持プレート136は、長方形であって、前述したように、病理標本作製装置100の2つの第3プレート103に跨って長手方向がX方向に沿うように支持柱によって支持されている(図4参照)。支持プレート136には、X方向に等間隔で複数(6つ)の孔136a,136b,136c,136d,136e,136fが設けられている。これらの孔136a,136b,136c,136d,136e,136fは、X方向に配列するステージ部110(ステージ10)の数と位置とに対応して設けられている。これらの孔136a,136b,136c,136d,136e,136fにT字型のノズル131がそれぞれ挿入されることから、複数のノズル131についても、X方向の左側から符号を付して、ノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fと呼ぶこととする。
 バルブ群132及びバルブ群133もまた、ノズル131の数に応じて設けられた複数のバルブを含むものである。バルブ群132はY方向に配列した複数(6つ)のバルブ132a,132b,132c,132d,132e,132fを有する。バルブ群133もまたY方向に配列した複数(6つ)のバルブ133a,133b,133c,133d,133e,133fを有する。バルブ群132とバルブ群133とは、支持プレート136を挟んで互いに向かい合うように、病理標本作製装置100の2つの第3プレート103に分かれて配置されている(図4参照)。
 バルブ群132及びバルブ群133、バルブ134,135は、電気的に開閉を制御可能な電磁バルブであって、回路部180に含まれる制御部によって開閉が制御される。詳しくは、Z方向の上側に設けられ、貫通孔が設けられた開閉部にZ方向の下側からロッドを押し込んで、当該貫通孔に挿入された可撓性のチューブをロッドで押圧して潰すことによりチューブ内の液体流路を閉じることができる。ロッドを下降させてチューブの押圧を解除すれば、チューブ内の液体流路を開くことができる。
 例えば、図11に破線で示すように、バルブ132aを経由してノズル131aの一方の端に可撓性のチューブが接続される。同じくバルブ133aを経由してノズル131aの他方の端に可撓性のチューブが接続される。他のバルブを介した他のノズル131へのチューブの接続も同様である。洗浄液切り替え用の2つのバルブ134,135のうちの一方のバルブ134にはバルブ群132を経由するチューブが挿入され、他方のバルブ135にはバルブ群133を経由するチューブが挿入される。洗浄液切り替え用の2つのバルブ134,135は、それぞれ別の洗浄液タンクにポンプを介して接続される。これによって、複数のノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fのそれぞれから2種の洗浄液を吐出することが可能となっている。詳しい洗浄液の供給方法については後述する。
 なお、洗浄部130の支持プレート136には、複数のノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fの設置にじゃまにならない場所に、バーコードリーダー162が取り付けられている。このバーコードリーダー162は、試薬供給部150に関連するものであり、詳しくは後述する。
 図12に示すように、本実施形態の流路切り替え機構140は、第1排出口141aを有する第1排出流路141と、第2排出口142aを有する第2排出流路142と、回転軸143と、モーター144とを有するものである。
 第1排出流路141及び第2排出流路142は、外形が略5角形の樋であって、長辺部がX方向に沿うと共に、互いにY方向にずれた状態で、第1排出流路141に対して第2排出流路142が重畳されて配置されている。このように、第1排出流路141と第2排出流路142とを重畳することで、第1排出口141aと第2排出口142aもまた、X方向とY方向とにおいて互いにずれた位置に配置される。具体的には、病理標本作製装置100において、第1排出口141aは、タンク108のZ方向における上方に位置し、第2排出口142aは、タンク109のZ方向における上方に位置している。
 回転軸143は、重畳された第1排出流路141と第2排出流路142との境界に沿ってX方向に延びるように配置される。回転軸143の一方の端は回転自在に軸支されると共に、他方の端はモーター144に接続される。
 回転軸143には、X方向に等間隔で、複数(6つ)の孔143a,143b,143c,143d,143e,143fが設けられている。これらの孔143a,143b,143c,143d,143e,143fは、X方向に配列する複数のステージ部110の数と位置に対応して設けられている。具体的には、X方向に配列する複数のステージ部110のうち左端のステージ部110における液体排出ガイド部126に接続された可撓性のチューブ127が孔143aを通過して回転軸143から下方にはみ出るように挿入される。当該チューブ127をチューブ127aとすると、他のステージ部110におけるチューブ127b,127c,127d,127e,127fもまた同様に対応する孔143b,143c,143d,143e,143fに挿入される。
 モーター144を所定の軸角度範囲で回転させることにより、回転軸143から下方にはみ出たチューブ127a,127b,127c,127d,127e,127fの先端の位置が、Y方向において、第1排出流路141側と第2排出流路142側とに振り分けられる。つまり、チューブ127a,127b,127c,127d,127e,127fを伝わって排出される液体の流路を第1排出流路141と第2排出流路142とに切り替えることが可能である。このような流路切り替え機構140は、フレーム105の第2プレート102上に配置されている(図4参照)。
 次に、具体的な洗浄液の供給と排出の仕方について、図13~図15を参照して説明する。図13~図15は洗浄液の供給の仕方を示す概略図である。詳しくは、図13は純水以外の洗浄液の供給の仕方を示し、図14は純水の供給の仕方を示し、図15は洗浄液の供給流路を純水で洗浄する方法を示すものである。なお、図13~図15では、ポンプP1,P2や洗浄液のタンク106,107を示す関係から、ノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fの配置が、実際の洗浄部130における配置と逆向きになっている。また、ノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fに関連するバルブ群132,133の配置も同様である。
 図13に示すように、T字型のノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fの一方の端にバルブ群132を経由するチューブ138が接続され、他方の端にバルブ群133を経由するチューブ137が接続されている。チューブ137は洗浄液切り替え用のバルブ135を経由してポンプP1に接続されている。チューブ138はポンプP2に接続されると共に、洗浄液切り替え用のバルブ134を経由してチューブ137に接続されている。タンク106には純水以外の洗浄液が貯留され、ポンプP1によってチューブ137に送り込まれる。タンク107には純水が貯留され、ポンプP2によってチューブ138に送り込まれる。ポンプP1,P2は、例えばロータリーポンプのように洗浄液を吸引・送出する方式のものや、タンク106,107を加圧することで洗浄液を圧送するコンプレッサーなどの方式を採用してもよい。
 バルブ群132のすべてのバルブ132a,132b,132c,132d,132e,132fとバルブ134とを閉じ、バルブ群133のすべてのバルブ133a,133b,133c,133d,133e,133fとバルブ135を開けて、ポンプP1を稼働させれば、タンク106に貯留された洗浄液を、すべてのノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fから供給することができる。
 図14に示すように、バルブ群132のすべてのバルブ132a,132b,132c,132d,132e,132fを開けて、バルブ群133のすべてのバルブ133a,133b,133c,133d,133e,133fとバルブ134及びバルブ135を閉じて、ポンプP2を稼働させれば、タンク107に貯留された純水を、すべてのノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fから供給することができる。
 さらに、図15に示すように、バルブ群132のすべてのバルブ132a,132b,132c,132d,132e,132fとバルブ134を開けると共に、バルブ群133のすべてのバルブ133a,133b,133c,133d,133e,133fを開けて、バルブ135を閉じ、ポンプP2を稼働させれば、タンク107に貯留された純水を、チューブ137及びチューブ138を介して、すべてのノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fから供給することができる。言い換えれば、すべてのノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fに係る洗浄液の供給流路を純水で洗浄することができる。
 また、図13において、すべてのノズル131a,131b,131c,131d,131e,131fから供給された洗浄液は、病理標本作製装置100における洗浄部130に位置した基板Wに対して供給される。複数のステージ部110のすべてのステージ10に基板Wを載置しない場合には、X方向の左側から順に作製する数の基板Wを載置すれば、基板Wが載置されたステージ部110に対応するバルブを開閉することで、それぞれの基板Wに対して洗浄液を供給できる。また、ステージ部110のモーター115を駆動して、ステージ10をY方向の後方から原点に向かって移動させ洗浄部130に対応する位置に配置すれば、ステージ傾斜機構によりステージ10を傾斜させることができることから、ステージ10に載置された基板Wに滴下された試薬Rsや供給された洗浄液Csを液体排出ガイド部126を経由して排出することができる。さらに、試薬Rsに発癌性の物質が含まれる場合には、流路切り替え機構140のモーター144を駆動することで、当該試薬Rsが含まれる洗浄液Csを、第2排出流路142に流して、タンク109に貯留することができる。試薬Rsに発癌性の物質が含まれない場合には、流路切り替え機構140のモーター144を駆動することで、当該試薬Rsが含まれる洗浄液Csを、第1排出流路141に流して、タンク108に貯留することができる。
 <試薬供給部>
 次に、試薬供給部150について、図16~図18を参照して説明する。図16は試薬供給部の構成を示す概略斜視図、図17はカートリッジを示す斜視図、図18は試薬供給部の動きを説明するための概略平面図である。
 図16に示すように、試薬供給部150は、ステージ部110のステージ10に載置された基板Wにカートリッジ50に充填された試薬Rsを供給する装置である。試薬供給部150は、支持フレーム151、カートリッジ50を脱着可能な複数の保持部としてのカートリッジホルダー155、タイミングベルト156、一対のタイミングプーリー154a,154b、モーター157、電動プッシャー158、を有している。
 支持フレーム151は、一対のタイミングプーリー154a,154b、モーター157、電動プッシャー158を支持する構造体であって、病理標本作製装置100の2つの第3プレート103に跨ってX方向に延びて立設する橋脚部152と、Z方向において橋脚部152に対向して配置された上面部153とを有している。橋脚部152と上面部153との間において、X方向の両端側に一対のタイミングプーリー154a,154bが設けられている。上面部153には、モーター157が配置されている。一対のタイミングプーリー154a,154bのうち一方(X方向において右側)のタイミングプーリー154aは、橋脚部152と上面部153との間において回転自在に軸支されている。他方(X方向において左側)のタイミングプーリー154bはモーター157に接続され、その回転が電気的に制御される。モーター157は例えばステッピングモーターである。
 一対のタイミングプーリー154a,154bの間にタイミングベルト156が架け渡されている。タイミングベルト156には、複数(9個)のカートリッジホルダー155が取り付けられている。本実施形態では、1個のカートリッジホルダー155に2個のカートリッジ50を着脱可能となっていることから、複数(9個)のカートリッジホルダー155に、合計18個のカートリッジ50を装着できる構成となっている。モーター157を駆動すれば、タイミングベルト156に装着された複数(9個)のカートリッジホルダー155をX方向に自在に移動させることができる。本実施形態では、一対のタイミングプーリー154a,154b、タイミングベルト156、モーター157を含む構成が、本発明の搬送部の一例である。
 上面部153は、橋脚部152に対してY方向の後方側に張り出すように取り付けられている。橋脚部152から張り出した上面部153の部分に複数(6つ)の電動プッシャー158が設けられている。電動プッシャー158は、モーター158aと、雄ネジ158bと、雄ネジ158bの支持柱158cとを備えている。モーター158aは例えば直動型ステッピングモーターであり、雄ネジ158bに螺合して雄ネジ158bをZ方向に上下動させる。これにより、電動プッシャー158は、カートリッジホルダー155に装着されたカートリッジ50をZ方向の上方側から下方側に向かって雄ネジ158bにより加圧可能となっている。
 タイミングベルト156には、カートリッジホルダー155だけでなく、本発明における撮像部としてのCCD161が支持部材を介して取り付けられている。
 ここで、図17を参照して、試薬Rsを吐出可能なカートリッジ50について説明する。図17に示すようにカートリッジ50は、試薬Rsが充填される第1のケース51と、底面のノズル部52aが設けられた筒状の第2のケース52と、第1のケース51の蓋部53とを有している。第2のケース52の側面の収容口に近い側には長方形の開口部52bが設けられている。また、開口部52bが設けられた側面の底部に近い側に、係止部52cが設けられている。第1のケース51の側面にも係止部51bが設けられている。
 第1のケース51は、試薬Rsを貯留可能な収容部51aと、収容部51aに連通し、第2のケース52のノズル部52aに接続可能な連通部とを有している。第1のケース51の収容口から所定量の試薬Rsを収容部51aに注入して蓋部53により蓋をする。その後に、第2のケース52の収容口から第1のケース51を挿入して押し込むと、第2のケース52の開口部52bに第1のケース51の係止部51bが係止して、第2のケース52に第1のケース51が装着される。これにより、外部から水分などがカートリッジ50に侵入し難い構造となっている。
 第1のケース51に試薬Rsを注入してカートリッジ50を密閉状態とした後に、蓋部53を押圧して、第2のケース52に対して第1のケース51を押し下げれば、上記連通部によって、ノズル部52aから所定量の試薬Rsを吐出することができる構造となっている。
 図16に示すように、カートリッジホルダー155には、四角形の孔155a,155bが設けられ、図17に示すように、カートリッジ50の第2のケース52の側面には、係止部52cが設けられている。したがって、カートリッジホルダー155にカートリッジ50を挿入すれば、2つの孔155a,155bのうちいずれかと係止部52cとが係止して、カートリッジホルダー155にカートリッジ50を装着して第2のケース52が動かないように固定することができる。
 図18に示すように、モーター157を駆動してタイミングベルト156をX方向に移動させれば、カートリッジホルダー155に装着されたカートリッジ50を電動プッシャー158と重なる位置に移動させることができる。電動プッシャー158により、上述したようにカートリッジ50の蓋部53を押圧して、カートリッジ50のノズル部52aから試薬Rsを吐出する。このとき、ステージ部110によりステージ10を試薬供給部150に対向する位置まで移動させておけば、ステージ10に載置された基板Wの組織標本Tsに予め定められた量の試薬Rsを精度よく滴下可能である。
 上述したように、タイミングベルト156には撮像部としてのCCD161が装着されている。したがって、モーター157を駆動することによりCCD161をX方向に自在に移動させることができる。ゆえに、X方向に配列した複数のステージ部110において、それぞれステージ10に載置された基板WをCCD161により撮像することが可能である。基板WをCCD161で撮像することで、基板Wに固定された組織標本Tsの状態や、マーキング領域3に記載された組織標本Tsに係る情報を画像として入手することができる。
 また、モーター157を駆動してカートリッジホルダー155を移動させれば、上述した洗浄部130の支持プレート136に取り付けられたバーコードリーダー162に対して、カートリッジ50を対向させることができる。バーコードリーダー162に対向するカートリッジ50の側面に収容された試薬Rsの情報に関連付けられたバーコードを付与すれば、バーコードリーダー162により当該バーコードを読み込ませることができる。なお、カートリッジ50に付与されるバーコードは、1次元バーコードや2次元バーコードであり、バーコードリーダー162は、これらのバーコードを読み取り可能な機器が選ばれる。
 <電界撹拌部>
 次に、電界撹拌部170について、図19及び図20を参照して説明する。図19は電界撹拌部の構成を示す概略斜視図、図20は電界撹拌部の電極の形状を示す概略断面図である。
 図19に示すように、電界撹拌部170は、上電極20と、支持フレーム171とを有している。上電極20は一方の辺部が他方の辺部に比べて長い長方形である。支持フレーム171は、長細い上電極20を病理標本作製装置100の2つの第3プレート103に跨って架け渡すためのものである(図4参照)。支持フレーム171は、X方向に間隔を置いて対向配置された一対の脚部172a,172bと、一対の脚部172a,172bに固定され、Y方向に間隔を置いて対向配置された一対のガイド部173a,173bとを有する。一対のガイド部173a,173bのそれぞれは、上電極20をX方向の右側から挿入可能な溝を有する構造となっている。一対のガイド部173a,173bの左端には、支持板174がY方向に架け渡され、支持板174上にはマイクロスイッチ175が設けられている。マイクロスイッチ175は、上電極20を一対のガイド部173a,173bに沿って挿入したときに、上電極20のX方向の左端が、所定の位置に配置されたか否かを検出するために設けられている。つまり、板状の上電極20は、支持フレーム171に対して所定の位置に装着可能であると共に抜き差し可能となっている。
 図20に示すように、上電極20のステージ10(つまり下電極10)と対向する面には、溝21が設けられている。溝21は、上電極20の短辺方向に、つまり、上電極20を支持フレーム171にセットしたときにY方向に延びて上電極20を横切るように形成されている。ステージ10と上電極20との間に電界を発生させ、基板Wに付与された溶液Sにクーロン力を働かせると溶液Sが変形して撹拌される。本実施形態では、ステージ10と上電極20との間の電極間距離dは一定である。言い換えれば、電極間距離dは可変できない。電界撹拌時に変形した溶液Sが上電極20に接触するとステージ10と上電極20とが電気的に短絡して電界撹拌が停止するおそれがある。上電極20にこのような溝21を形成することにより、電界撹拌時における溶液Sと上電極20との接触を防ぐことができる。また、溶液Sに働くクーロン力の方向が、溝21のエッジ部に向かう方向となって、溝21を設けない場合に比べて変化することから、溶液Sをより効果的に撹拌することができる。ゆえに、溶液Sが形成された基板Wが載置されるステージ10のX方向における中央部に対して、上電極20に形成された溝21が対向するように、上電極20のX方向における位置を確実に位置決めする必要がある。そのため、上述したマイクロスイッチ175による上電極20の位置検出が重要となっている。本実施形態では、マイクロスイッチ175に上電極20が触れてオン状態とならなければ、ステージ10と上電極20との間に電界を生じさせない構成となっている。
 <外装カバー>
 次に、病理標本作製装置100の外装カバーについて、図21を参照して説明する。図21は病理標本作製装置の外装カバーを示す概略斜視図である。
 図21に示すように、病理標本作製装置100の外装カバー190は、病理標本作製装置100を周囲環境から隔てて保護可能な構造となっている。ただし、フレーム105における下段の第1プレート101に配置される、4つのタンク106,107,108,109及び回路部180は、覆わずに、その周囲に対して露出させた状態としている。つまり、4つのタンク106,107,108,109のセット・リセットを可能な状態とし、電源ユニットなど発熱源を有する回路部180は周囲への放熱が可能な状態としている。
 具体的には、外装カバー190は、病理標本作製装置100の中段正面部分を覆う正面板191と、X方向の側面を覆う側面板192と、Z方向の中段部分覆う中面板193と、Z方向の上方を覆う上面板194と、を有している。また、正面板191と中面板193との間の階段部分を開閉可能に覆う第1開閉部195と、中面板193と上面板194との間の階段部分を開閉可能に覆う第2開閉部196と、を有している。また、病理標本作製装置100の電界撹拌部170において、上電極20のセット・リセットを可能とするように、開閉可能に構成された側面板197と、病理標本作製装置100のY方向における後方を覆う後方板(図21では図示を省略)とを有している。
 正面板191は、フレーム105の第2プレート102から第3プレート103との間を覆う幅を有している。第1開閉部195を開けることで、ステージ部110のステージ10に基板Wをセット・リセット可能としている。また、第2開閉部196を開けることにより、試薬供給部150にカートリッジ50をセット・リセット可能としている。
 外装カバー190に用いられる部材としては、例えば透明なポリエチレンテレフタレート(PET)などの樹脂板を挙げることができる。また、電界撹拌部170や回路部180などから外部に不要な電磁波が放出されることを防ぐため、樹脂板には電磁波を遮蔽可能な電磁シールドを設けることが好ましい。
 <病理標本作製システム>
 次に、本実施形態の病理標本作製システムの概要について、図22を参照して説明する。図22は病理標本作製システムの電気的、機械的な構成を示すブロック図である。
 図22に示すように、本実施形態の病理標本作製システム1000は、病理標本作製装置100と、例えばデスクトップ型のコンピューター500と、コンピューター500に接続された周辺機器とを備えている。
 病理標本作製装置100は、上述したように、ステージ部110、洗浄部130、試薬供給部150、電界撹拌部170を有している。また、モータードライバー181、高電圧発生ユニット182、I/O183、ペルチェコントローラー184、制御部185、DC電源ユニット186、USBハブ187、撮像部としてのCCD161、バーコードリーダー162を備えている。
 モータードライバー181は、ステージ部110、洗浄部130、試薬供給部150のそれぞれに含まれるモーターを駆動制御する回路が実装された回路基板である。高電圧発生ユニット182は、上述したように周期的に変化する電位を発生させて電界撹拌部170の一対の電極10,20に印加する装置である。ステージ部110のステージ10には、ステージ10を加熱するための加熱素子としてのペルチェ素子15と、ステージ10の温度を検出する温度センサー16とが取り付けられている。ペルチェコントローラー184は、USBハブ187を介して制御部185に接続されている。温度センサー16は、I/O183を介して制御部185に接続されている。ペルチェコントローラー184は、制御部185からの制御信号に基づいてペルチェ素子15に流れる電流を制御してペルチェ素子15の温度を制御する。なお、本実施形態のペルチェコントローラー184は、ペルチェ素子15の温度の制御に係るマイコンを含んでいるが、当該マイコンは制御部185に含まれる構成としてもよい。
 CCD161やバーコードリーダー162は、USBハブ187を介して制御部185に接続されている。CCD161は、前述したようにステージ10に載置された基板Wを撮像可能に設けられている。制御部185はCCD161によって撮像された基板Wの画像情報から基板Wに固定された組織標本Tsの情報を入手することが可能となっている。
 バーコードリーダー162は、前述したように試薬供給部150に搭載されたカートリッジ50に付与されたバーコードを読み取り可能に設けられている。制御部185はバーコードリーダー162によって読み取られたバーコードからカートリッジ50に充填された試薬Rsの情報を入手することが可能となっている。
 回路部180は、少なくともモータードライバー181、高電圧発生ユニット182、I/O183、ペルチェコントローラー184、制御部185、DC電源ユニット186、USBハブ187を含むものである。DC電源ユニット186は、外部から供給される100Vの交流電源から、回路部180の各部で電源として必要とされるDC電圧を発生させて供給するものである。
 さらに、制御部185は、USBハブ187とUSB端子とを介して、コンピューター500に接続されている。コンピューター500は、CPU502、記憶部としてのメモリー503、各種の周辺機器との接続を図る端子類(HDMI(登録商標)、LAN、USB)を備えた本体501を有している。USB端子には、コンピューター500への入力操作に係るマウス504やキーボード505が接続される。また、他のUSB端子には、病理標本作製装置100に備わるバーコードリーダー162とは別のバーコードリーダー506やラベルプリンター507が接続される。HDMI端子には、モニター508が接続される。モニター508は、コンピューター500から送出される各種の情報を表示する表示装置であってもよいし、表示装置と入力装置とを兼ねるものであってもよい。LAN端子には、例えば病理部門の情報管理に係るネットワークが接続される。
 バーコードリーダー506は、主に試薬Rsが収容された瓶などの試薬容器に付与されたバーコードを読み取るために用いられる。コンピューター500は、読み取られたバーコードから試薬Rsの情報を入手して、試薬Rsが充填されるカートリッジ50に貼り付けるバーコードラベルをラベルプリンター507で印刷することが可能となっている。
 コンピューター500のメモリー503には、上述した病理標本の作製方法に係る各種の病理標本作製プロトコルが格納される。病理標本作製プロトコルが格納されるメモリー503は、ROMやRAM、HDDなどの内部記憶装置や、USB端子に接続されて用いられる外部記憶装置であってもよい。
 作業者は、コンピューター500に格納された病理標本作製プロトコルを指定し、コンピューター500によって病理標本作製装置100を駆動制御して、病理標本を作製することができる。また、実際に試薬供給部150に装着されたカートリッジ50のバーコードをバーコードリーダー162で読み込むことで、コンピューター500は、カートリッジ50に充填された試薬Rsの情報と、指定された病理標本作製プロトコルにおける試薬Rsの情報との照合を実行することができる。これによって、病理標本の作製に用いられる試薬Rsが正しく適用されているか否かの管理を徹底できる。
 また、コンピューター500は、CCD161によって撮像された基板Wの画像を入手して、当該画像と指定された病理標本作製プロトコルとを関連付ける操作を実行することができる。これによって、指定された病理標本作製プロトコルによって作製された病理標本のトレーサビリティーを確立することができる。すなわち、作業者による目視確認に比べて、病理標本のトレーサビリティーを向上させることができる。
 また、コンピューター500と病理部門のネットワークとを接続することで、病理標本の作製に係る一連の情報を共有して管理することができる。なお、病理標本作製システム1000の構成は、これに限定されず、例えば組織や細胞の染色状態を画像解析する装置など病理診断に用いられる他の装置を含んでいてもよい。また、停電に対応可能な無停電電源装置(Uninterruptible Power Supply;UPS)を備えることが好ましい。
 次に、病理標本作製装置100を含む病理標本作製システム1000を用いた各種の病理標本作製の実施例と、病理標本作製システム1000を用いない比較例とを挙げて、実施例の効果について具体的に説明する。
 <凍結切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)の実施例1及び比較例1>
 図23は実施例1の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表、図24は比較例1の免疫組織化学染色における病理標本の作製工程を示す表である。
 (実施例1)
 図23に示すように、実施例1のIHCによる病理標本の作製工程は、薄切された組織標本Tsを基板Wに固定する第1工程、固定された組織標本Tsを洗浄する第2工程、組織標本Tsの内因性PO(Peroxidase)を除去する第3工程、内因性POが除去された組織標本Tsを洗浄する第4工程、一次抗体反応を行う第5工程、一次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第6工程、二次抗体反応を行う第7工程、二次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第8工程、洗浄された組織標本Tsを発色させる第9工程、発色させた組織標本Tsを洗浄する第10工程、洗浄された組織標本Tsを核染する第11工程、核染された組織標本Tsを洗浄する第12工程、洗浄された組織標本Tsを封入する第13工程、封入された組織標本Tsを画像解析して染色の濃さを数値化する第14工程、を有している。これらの工程は、病理標本作製システム1000を用いることを前提とした病理標本作製プロトコルとしてコンピューター500のメモリー503に格納される。コンピューター500は、第2工程~第12工程の各工程において病理標本作製プロトコルに基づいた制御信号を病理標本作製装置100の制御部185に送出し、制御部185が病理標本作製装置100を駆動制御して第2工程~第12工程の処理を行う。
 実施例1の第1工程では、組織標本Tsとしてブタ肝臓ブロックを薄切りした凍結切片を基板1の撥水リング2の内側に配置した後に、基板1をアセトンに2分間浸漬する。これにより、凍結切片は、基板1に貼り付いて固定される。つまり、組織標本Tsが固定された基板Wが得られる。そして、第2工程へ進む。
 実施例1の第2工程では、病理標本作製装置100のステージ10に基板Wを載置する。制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を原点から一旦洗浄部130を過ぎた後に再び洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP1と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク106に貯留された洗浄液Csを吐出して30秒間垂れ流す。洗浄液CsとしてPBS-T(ブロッキング作用がある非イオン系界面活性剤であるTween20を含むPBS)を用いる。洗浄部130では、ステージ傾斜機構によりステージ10が傾斜した状態で基板WにPBS-Tが供給され洗浄が行われる。洗浄に用いられたPBS-Tは傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第1排出流路141に導かれてタンク108に排出され貯留される。そして、第3工程へ進む。
 実施例1の第3工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて内因性POを除去する試薬(3容量%過酸化水素水)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(3容量%過酸化水素水)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(3容量%過酸化水素水)の滴下量は、撥水リング2の大きさにもよるが、例えば150μL(マイクロリットル)である。所定量の試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsから内因性POを除去する(内因性POをブロッキングする)。そして、第4工程へ進む。
 実施例1の第4工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にして、PBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第5工程へ進む。
 実施例1の第5工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて一次抗体試薬(肝細胞中に含まれるタンパク質に結合するHep-par1)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して一次抗体試薬が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば150μLの一次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された一次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第6工程へ進む。
 実施例1の第6工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第7工程へ進む。
 実施例1の第7工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて二次抗体試薬(デキストランポリマーとペルオキシダーゼを用いる増感法試薬であるEnvision+Dual Link:ダコ社製)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して二次抗体試薬が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば150μLの二次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された二次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第8工程へ進む。
 実施例1の第8工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第9工程へ進む。
 実施例1の第9工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて発色を行わせる試薬(3,3’-Diaminobenzidine;DAB)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(DAB)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(DAB)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(DAB)の滴下量は例えば150μLである。所定量の試薬(DAB)を基板Wに供給した後に、その場で3分間静置して組織標本Tsと試薬(DAB)とを反応させて発色させる。そして、第10工程へ進む。
 実施例1の第10工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、制御部185がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。洗浄に用いられた純水には発癌性物質を含む試薬(DAB)が含まれることから、純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第2排出流路142に導かれてタンク109に排出され貯留される。そして、第11工程へ進む。
 実施例1の第11工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて核染(対比染色)を行わせる試薬(ヘマトキシリン)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(ヘマトキシリン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(ヘマトキシリン)の滴下量は例えば150μLである。所定量の試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsと試薬(ヘマトキシリン)とを反応させて核染(対比染色)を行う。そして、第12工程へ進む。
 実施例1の第12工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、制御部185がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。試薬(ヘマトキシリン)を含む純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第1排出流路141に導かれてタンク108に排出され貯留される。そして、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から原点に搬送する。そして、第13工程へ進む。
 実施例1の第13工程では、ステージ10から基板Wを取り出して、洗浄が施された組織標本Tsの乾燥を防ぐため、非水溶性の封入剤を基板Wに滴下して、カバーガラスを被せる封入処理を行う。第13工程の所要時間はおよそ1分である。そして、第14工程へ進む。
 実施例1の第14工程では、撮像部を有する画像解析装置を用いて、封入処理された組織標本Tsを撮像して画像解析を行い、染色の濃さを数値化する。第14工程の所要時間はおよそ1分である。なお、陽性所見の組織標本Tsと、陰性所見の組織標本Tsとを用意してそれぞれ画像解析による染色の濃さの数値化を行って比較することにより病理診断が行われる。
 以上の工程を経ることにより、実施例1のIHCによる病理標本の作製が終了する。実施例1の病理標本の作製に要した時間は約25分であった。
 (比較例1)
 比較例1のIHCによる病理標本の作製工程もまた、図24に示すように、実施例1と同じように組織標本Tsが固定された基板Wを作製する第1工程から第14工程までを有している。ただし、病理標本作製システム1000を用いずに、手作業で第1工程~第14工程までを行っている。この場合の病理標本作製プロトコルは実施例1と異なっている。以降、具体的に各工程の作業内容を説明する。なお、比較例1の少なくとも第2工程から第12工程を再現できれば、他の病理標本作製装置を用いて比較例1の病理標本の作製を行ってもよい。
 比較例1の第1工程(組織標本Tsの固定)は、実施例1の第1工程と同じであり、組織標本Tsとして実施例1と同じブタ肝臓ブロックの連続切片から得られた凍結切片が撥水リング2内に配置された基板1をアセトンに2分間浸漬して、組織標本Tsが固定された基板Wを得る。そして、第2工程に進む。
 比較例1の第2工程(洗浄)では、洗浄液CsとしてのPBS-Tを貯留した3つの槽を用意し、基板Wを3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。つまり、第2工程の洗浄に要する時間は30秒である。そして、第3工程に進む。
 比較例1の第3工程(内因性POのブロッキング工程)では、3容量%過酸化水素水に基板Wを1分間浸漬して、組織標本Tsから内因性POを除去する。そして、第4工程に進む。
 比較例1の第4工程(洗浄)では、比較例1の第2工程と同様にして洗浄を行う。つまり、第4工程の洗浄に要する時間は30秒である。そして、第5工程に進む。
 比較例1の第5工程(一次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して実施例1と同じ濃度の一次抗体試薬(Hep-par1)を例えば150μL滴下する。この場合の一次抗体試薬の滴下方法としては、マイクロピペットなどを用いる方法が挙げられる。一次抗体試薬を滴下した後に、30分間静置して一次抗体反応を行う。そして、第6工程に進む。
 比較例1の第6工程(洗浄)では、比較例1の第2工程と同様にして洗浄を行う。つまり、第6工程の洗浄に要する時間は30秒である。そして、第7工程に進む。
 比較例1の第7工程(二次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して実施例1と同じ濃度の二次抗体試薬(Envision+Dual Link)を例えば150μL滴下する。二次抗体試薬の滴下方法もまた一次抗体試薬の滴下方法と同様に、マイクロピペットなどを用いる方法が挙げられる。二次抗体試薬を滴下した後に、30分間静置して二次抗体反応を行う。そして、第8工程に進む。
 比較例1の第8工程(洗浄)では、比較例1の第2工程と同様にして洗浄を行う。つまり、第8工程の洗浄に要する時間は30秒である。そして、第9工程に進む。
 比較例1の第9工程(発色反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して実施例1と同じ濃度の発色試薬(DAB)を例えば150μL滴下する。発色試薬(DAB)の滴下方法もまた、マイクロピペットなどを用いる方法が挙げられる。発色試薬(DAB)を滴下した後に、3分間静置して発色反応を行う。そして、第10工程に進む。
 比較例1の第10工程(洗浄)では、発色反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。そして、第11工程に進む。
 比較例1の第11工程(核染)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して実施例1と同じ濃度の対比染色試薬(ヘマトキシリン)を例えば150μL滴下する。ヘマトキシリンの滴下方法もまた、マイクロピペットなどを用いる方法が挙げられる。ヘマトキシリンを滴下した後に、1分間静置して核染反応を行う。そして、第12工程に進む。
 比較例1の第12工程(洗浄)では、核染反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。比較例1の第13工程(封入)、第14工程(解析)は、実施例1と同じである。以上の工程を経ることにより、比較例1のIHCによる病理標本の作製が終了する。比較例1の病理標本の作製に要した時間は約75分であり、実施例1の約25分に比べて3倍以上の時間を要した。実施例1と比較例1とでは染色結果にほとんど差がなかった。実施例1では、第5工程(一次抗体反応)と第7工程(二次抗体反応)とにおいて電界撹拌を実施したことにより、反応時間を大幅に短縮できた。
 凍結切片を用いるIHCは、例えば術中に組織を採取して病理診断を行う場合に好適に用いられる。病理診断を行う間、手術を途中で停止すると、患者に負担が掛かるおそれがある。それゆえに、病理標本の作製に要する時間は、できるだけ短い方が好ましい。
 <パラフィン包埋切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)の実施例2及び比較例2>
 図25は実施例2の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表、図26は比較例2の免疫組織化学染色における病理標本の作製工程を示す表である。パラフィン包埋切片を用いることは、採取した組織をパラフィン包埋して長期に亘って保存でき、繰り返し病理標本を作製できる点が、凍結切片を用いる場合に比べて優れている。その一方で、実際に病理標本を作製するときには、パラフィンによって置換された組織中の水分を元に戻すため、脱パラフィン処理と、抗原賦活化処理とが必要となる。これらの処理工程では、加温が必要となる。まず、実施例2のパラフィン包埋切片を用いたIHCによる病理標本の作製について説明する。
 (実施例2)
 図25に示すように、実施例2の病理標本の作製方法は、パラフィン包埋切片に対して脱パラフィン処理を行う第1工程、脱パラフィン処理された組織標本Tsを洗浄する第2工程、洗浄された組織標本Tsに抗原賦活化処理を施す第3工程、抗原賦活化処理された組織標本Tsを洗浄する第4工程、組織標本Tsの内因性POを除去する第5工程、内因性POが除去された組織標本Tsを洗浄する第6工程、一次抗体反応を行う第7工程、一次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第8工程、二次抗体反応を行う第9工程、二次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第10工程、洗浄された組織標本Tsを発色させる第11工程、発色させた組織標本Tsを洗浄する第12工程、洗浄された組織標本Tsを核染する第13工程、核染された組織標本Tsを洗浄する第14工程、洗浄された組織標本Tsを透徹する第15工程、透徹された組織標本Tsを封入する第16工程、封入された組織標本Tsを画像解析して染色の濃さを数値化する第17工程、を有している。これらの工程は、病理標本作製システム1000を用いることを前提とした病理標本作製プロトコルとしてコンピューター500のメモリー503に格納される。コンピューター500は、第1工程~第14工程の各工程において病理標本作製プロトコルに基づいた制御信号を病理標本作製装置100の制御部185に送出し、制御部185が病理標本作製装置100を駆動制御して上記各工程の処理を行う。
 実施例2の第1工程では、組織標本Tsとしてブタ肝臓ブロックのパラフィン包埋切片を基板1の撥水リング2の内側に配置した後に、ステージ部110のステージ10に基板1を載置する。制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を原点から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて脱パラフィン処理に用いられる試薬(脱パラ液;例えばEZバッファー(10×)(Roche;950-102)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(脱パラ液)が充填されたカートリッジ50を基板1と対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(脱パラ液)を基板1に滴下する。この場合の試薬(脱パラ液)の滴下量は例えば200μLである。所定量の試薬(脱パラ液)を基板1に供給した後に、制御部185はペルチェコントローラー184を制御してペルチェ素子15に電流を流しステージ10をおよそ75℃まで加温する。そして、その場で1分間静置して組織標本Tsと試薬(脱パラ液)とを反応させて脱パラフィン処理を行う。1分間の静置を行った後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130ではステージ傾斜機構によりステージ10が傾斜して、基板1上から試薬(脱パラ液)が液体排出ガイド部126を経由して第1排出流路141からタンク108に排出される廃液処理が行われる。第1工程では、このような脱パラフィン処理と廃液処理とを3回繰り返して行う。そして、第2工程へ進む。
 実施例2の第2工程では、廃液処理が終了した後に、洗浄部130において、制御部185がポンプP1と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク106に貯留された洗浄液(PBS-T)を吐出し、30秒間垂れ流す。洗浄部130では、ステージ傾斜機構によりステージ10が傾斜した状態で基板1にPBS-Tが供給され洗浄が行われる。洗浄に用いられたPBS-Tは傾斜した基板1から液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第1排出流路141に導かれてタンク108に排出される。第1工程と第2工程とを経ることによりパラフィン包埋切片は、脱パラフィン処理が施され、基板1に組織標本Tsが固定された基板Wが得られる。なお、この間、制御部185はステージ10に取り付けられた温度センサー16からの出力を検知して、ステージ10の温度を75℃に保持するようにペルチェコントローラー184を制御する。そして、第3工程へ進む。
 実施例2の第3工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて抗原賦活化処理に用いられる試薬(賦活化液)が選択される。制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(賦活化液)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(賦活化液)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(賦活化液)の滴下量は例えば200μLである。所定量の試薬(賦活化液)を基板Wに供給した後に、制御部185はペルチェコントローラー184を制御してステージ10の温度を75℃から95℃まで上昇させる。次に、制御部185は、試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬としてオイル(流動パラフィン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50からオイルを基板Wに滴下する。この場合のオイルの滴下量は例えば200μLである。つまり、賦活化液をオイルで被覆して加温による賦活化液の蒸散を防ぐ。そして、その場で40分間静置して組織標本Tsと試薬(賦活化液)とを反応させて抗原賦活化処理を行う。40分間の静置後、制御部185はペルチェコントローラー184を制御してペルチェ素子15への通電を停止し、20分間静置してステージ10を自然冷却する。なお、ペルチェ素子15に流れる電流の向きをペルチェコントローラー184により反転させ、ペルチェ素子15によってステージ10を冷却してもよい。そして、第4工程へ進む。
 実施例2の第4工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、上記第2工程と同様に、制御部185がポンプP1と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク106に貯留された洗浄液(PBS-T)を吐出し、30秒間垂れ流して洗浄を行う。なお、洗浄液(PBS-T)はタンク108に排出される。そして、第5工程へ進む。
 実施例2の第5工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して、内因性POを除去する試薬(3容量%過酸化水素水)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(3容量%過酸化水素水)の滴下量は、例えば200μLである。所定量の試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsから内因性POを除去する(内因性POをブロッキングする)。そして、第6工程へ進む。
 実施例2の第6工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にして、PBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第7工程へ進む。
 実施例2の第7工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して一次抗体試薬(Hep-par1)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば200μLの一次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された一次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。この場合の電界撹拌に要する時間は10分である。そして、第8工程へ進む。
 実施例2の第8工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第9工程へ進む。
 実施例2の第9工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して二次抗体試薬(Envision+Dual Link)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば200μLの二次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された二次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。この場合の電界撹拌に要する時間は7分である。そして、第10工程へ進む。
 実施例2の第10工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第11工程へ進む。
 実施例2の第11工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して、発色を行わせる試薬(DAB)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(DAB)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(DAB)の滴下量は例えば200μLである。所定量の試薬(DAB)を基板Wに供給した後に、その場で3分間静置して組織標本Tsと試薬(DAB)とを反応させて発色させる。そして、第12工程へ進む。
 実施例2の第12工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、制御部185がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。発癌性物質を含む試薬(DAB)が含まれる純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第2排出流路142に導かれてタンク109に排出される。そして、第13工程へ進む。
 実施例2の第13工程では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して、核染(対比染色)を行わせる試薬(ヘマトキシリン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(ヘマトキシリン)の滴下量は例えば200μLである。所定量の試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsと試薬(ヘマトキシリン)とを反応させて核染(対比染色)を行う。そして、第14工程へ進む。
 実施例2の第14工程では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、ステージ傾斜機構によりステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。試薬(ヘマトキシリン)が含まれる純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第1排出流路141に導かれてタンク108に排出され貯留される。そして、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から原点に搬送する。そして、第15工程へ進む。なお、病理標本作製装置100を用いて第14工程までの処理を実行する。
 実施例2の第15工程では、ステージ10から基板Wを取り出して、核染が行われた組織標本Tsの染色におけるコントラスト比をさらに向上させるために、エタノールを用いて組織標本Tsから水分を取り除く脱水処理と、エタノールをキシレンに置換して組織標本Tsの透明性を向上させる透徹処理とを行う。具体的には、無水エタノール(99.5容量%以上)を貯留した5つの槽と、キシレンを貯留した同じく5つの槽とを用意して、無水エタノールから順に10秒ずつ合計10槽に基板Wを浸漬する。したがって、浸漬に要する時間は、100秒である。そして、第16工程へ進む。なお、脱水処理において、濃度を75容量%から99.5容量%以上まで段階的に変化させたエタノールの5つの槽を用いてもよい。
 実施例2の第16工程では、透徹処理が施された組織標本Tsの乾燥を防ぐため、非水溶性の封入剤を基板Wに滴下して、カバーガラスを被せる封入処理を行う。封入処理の所要時間はおよそ1分である。そして、第17工程へ進む。
 実施例2の第17工程では、撮像部を有する画像解析装置を用いて、透徹処理された組織標本Tsを撮像して画像解析を行い、染色の濃さを数値化する。解析処理の所要時間はおよそ1分である。なお、陽性所見の組織標本Tsと、陰性所見の組織標本Tsとを用意してそれぞれ画像解析による染色の濃さの数値化を行って比較することにより病理診断が行われる。
 実施例2の病理標本の作製(第1工程から第17工程)に要した時間は約96分であった。
 (比較例2)
 図26に示すように、比較例2のIHCによる病理標本の作製工程もまた、実施例2と同じように脱パラフィン処理を行う第1工程から解析を行う第17工程までを有している。ただし、病理標本作製システム1000を用いずに、手作業で第1工程~第17工程までを行っている。この場合の病理標本作製プロトコルは実施例2と異なっている。以降、具体的に各工程の作業内容を説明する。なお、比較例2の少なくとも第1工程から第14工程を再現できれば、他の病理標本作製装置を用いて比較例2の病理標本の作製を行ってもよい。
 比較例2の第1工程(脱パラフィン処理)は、組織標本Tsとして実施例2と同じブタ肝臓ブロックの連続切片から得られたパラフィン包埋切片が撥水リング2内に配置された基板1をキシレンが貯留された3つの槽にそれぞれ3分ずつ浸漬する処理と、エタノールが貯留された5つの槽にそれぞれ1分ずつ浸漬する処理を行う。第1工程に要する時間は14分(9分+5分)である。そして、第2工程に進む。
 比較例2の第2工程(洗浄)では、PBS-Tが貯留された3つの槽を用意し、基板Wを3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。つまり、第2工程の洗浄に要する時間は30秒である。これにより、組織標本Tsが固定された基板Wを得る。そして、第3工程に進む。
 比較例2の第3工程(抗原賦活化処理)では、組織標本Tsが固定された基板Wを95℃に加温した賦活化液に40分間浸漬する。そして、賦活化液から基板Wを取り出して20分間室温放置して自然冷却する。そして、第4工程に進む。
 比較例2の第4工程(洗浄)では、上記第2工程と同様にして、基板WをPBS-Tが収容された3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。そして、第5工程に進む。
 比較例2の第5工程(内因性POのブロッキング工程)では、3容量%過酸化水素水に基板Wを5分間浸漬して、組織標本Tsから内因性POを除去する。そして、第6工程に進む。
 比較例2の第6工程(洗浄)では、上記第2工程と同様にして、基板WをPBS-Tが貯留された3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。そして、第7工程に進む。
 比較例2の第7工程(一次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例2と同じ濃度の一次抗体試薬(Hep-par1)を例えば200μL滴下する。一次抗体試薬を滴下した後に、30分間静置して一次抗体反応を行う。そして、第8工程に進む。
 比較例2の第8工程(洗浄)では、上記第2工程と同様にして、基板WをPBS-Tが収容された3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。そして、第9工程に進む。
 比較例2の第9工程(二次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例2と同じ濃度の二次抗体試薬(Envision+Dual Link)を例えば200μL滴下する。二次抗体試薬を滴下した後に、30分間静置して二次抗体反応を行う。そして、第10工程に進む。
 比較例2の第10工程(洗浄)では、上記第2工程と同様にして、基板WをPBS-Tが貯留された3つの槽に順に10秒間ずつ浸漬して洗浄を行う。そして、第11工程に進む。
 比較例2の第11工程(発色反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例2と同じ濃度の発色試薬(DAB)を例えば200μL滴下する。発色試薬(DAB)を滴下した後に、3分間静置して発色反応を行う。そして、第12工程に進む。
 比較例2の第12工程(洗浄)では、発色反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。そして、第13工程に進む。
 比較例2の第13工程(核染)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例2と同じ濃度の対比染色試薬(ヘマトキシリン)を例えば200μL滴下する。ヘマトキシリンを滴下した後に、1分間静置して核染反応を行う。そして、第14工程に進む。
 比較例2の第14工程(洗浄)では、核染反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。そして、第15工程へ進む。第15工程(透徹)、第16工程(封入)、第17工程(解析)は、上記実施例2と同じである。以上の工程を経ることにより、比較例2のIHCによる病理標本の作製が終了する。比較例2の病理標本の作製に要した時間は約154分であり、実施例2の約96分に比べて、58分(およそ1時間)余計に時間を要した。実施例2と比較例2とでは染色結果にほとんど差がなかった。実施例2では、第1工程~第14工程まで病理標本作製システム1000(病理標本作製装置100)を用いたことにより、作業時間を短縮できた。
 <In situ ハイブリダイゼーション(ISH)の実施例3及び比較例3>
 図27は実施例3のIn situ ハイブリダイゼーションによる病理標本の作製工程を示す表、図28は比較例3のIn situ ハイブリダイゼーションにおける病理標本の作製工程を示す表である。組織や細胞中の遺伝子発現を調べる場合に、免疫組織化学染色(IHC)では、主に特定のタンパク質の分布や量を検出するのに対して、In situ ハイブリダイゼーションは、mRNA(伝令RNA)を検出するものである。mRNAの検出には、相補的塩基配列による一本鎖核酸分子間の特異的結合(ハイブリダイゼーション)を利用している。検出に用いられる核酸分子はプローブと呼ばれている。試薬として用いられるプローブは、比較的に高価であることから、組織標本Tsの大きさや厚さを小さくしてプローブの使用量を節約することが重要な事項の1つである。
 (実施例3)
 図27に示すように、実施例3のISHによる病理標本の作製方法は、パラフィン包埋切片を用いる方法であって、脱パラフィン処理を行う第1工程、脱パラフィン処理された組織標本Tsを洗浄する第2工程、洗浄された組織標本Tsの内因性POを除去する第3工程、内因性POが除去された組織標本Tsを洗浄する第4工程、組織標本Tsに熱変性処理を施す第5工程、ハイブリダイゼーションを行う第6工程、ハイブリダイゼーションが行われた組織標本Tsを洗浄する第7工程、一次抗体反応を行う第8工程、一次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第9工程、二次抗体反応を行う第10工程、二次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第11工程、洗浄された組織標本Tsを発色させる第12工程、発色させた組織標本Tsを洗浄する第13工程、洗浄された組織標本Tsを核染する第14工程、核染された組織標本Tsを洗浄する第15工程、洗浄された組織標本Tsを透徹する第16工程、透徹された組織標本Tsを封入する第17工程、封入された組織標本Tsを画像解析して染色の濃さを数値化する第18工程、を有している。これらの工程は、病理標本作製システム1000を用いることを前提とした病理標本作製プロトコルとしてコンピューター500のメモリー503に格納される。コンピューター500は、第5工程~第15工程の各工程において病理標本作製プロトコルに基づいた制御信号を病理標本作製装置100の制御部185に送出し、制御部185が病理標本作製装置100を駆動制御して上記各工程の処理を行う。
 実施例3の第1工程(脱パラフィン処理)、第2工程(洗浄)、第3工程(内因性PO除去)、第4工程(洗浄)は、上記実施例2の第1工程(脱パラフィン処理)、第2工程(洗浄)、第5工程(内因性PO除去)、第6工程(洗浄)と同じである。なお、実施例3の第5工程(熱変性処理)は、組織標本Tsにおける細胞の二本鎖の核酸を1本鎖に分離するために熱処理を施すものである。以降、実施例2と異なる第5工程から説明する。
 実施例3の第5工程(熱変性処理)では、内因性POが除去された組織標本Tsが固定された基板Wを病理標本作製装置100のステージ10に載置する。制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を原点から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬(プローブ)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(プローブ)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(プローブ)の滴下量は例えば10μLである。次に、制御部185は、試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬としてオイル(流動パラフィン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50からオイルを基板Wに滴下する。この場合のオイルの滴下量は例えば40μLである。つまり、プローブをオイルで被覆して加温によるプローブの蒸散を防ぐ。また、この後の電界撹拌を効率的に行うために、試薬(プローブ)にオイルを追加して電界撹拌時の溶液Sの容量を増やす。制御部185はペルチェコントローラー184を制御してペルチェ素子15に電流を流すことにより、ステージ10を95℃に加温しておよそ10分間の静置を行う。その後、ペルチェ素子15への通電を止めて、自然冷却を20分間行う。そして、第6工程へ進む。
 実施例3の第6工程(ハイブリダイゼーション)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を試薬供給部150から電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185はペルチェコントローラー184を制御してペルチェ素子15に電流を流すことにより、ステージ10を37℃に加温すると共に、一対の電極10,20間に電界を発生させてプローブとオイルとを含む溶液Sを電界撹拌する。この場合の電界撹拌に要する時間は180分である。これにより、熱変性処理された組織標本Ts(つまり一本鎖核酸)と試薬(プローブ)とを反応させてハイブリダイゼーション(相補的結合反応)を行う。そして、第7工程へ進む。
 実施例3の第7工程(洗浄)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、上記比較例2の第2工程と同様に、制御部185がポンプP1と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク106に貯留された洗浄液(PBS-T)を吐出し、30秒間垂れ流して洗浄を行う。なお、洗浄液(PBS-T)はタンク108に排出される。そして、第8工程へ進む。
 実施例3の第8工程(一次抗体反応)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して一次抗体試薬(Hep-par1)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば30μLの一次抗体試薬を基板Wに滴下する。次に、制御部185は、試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬としてオイル(流動パラフィン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50からオイルを基板Wに滴下する。この場合のオイルの滴下量は例えば30μLである。つまり、一次抗体試薬をオイルで被覆して一次抗体試薬の蒸散を防ぐ。また、この後の電界撹拌を効率的に行うために、一次抗体試薬にオイルを追加して電界撹拌時の溶液Sの容量を増やす。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された一次抗体試薬とオイルとを含む溶液Sを撹拌する。この場合の電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第9工程へ進む。
 実施例3の第9工程(洗浄)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、上記第7工程(洗浄)と同様にしてPBS-Tを用いた垂れ流し洗浄を行う。そして、第10工程へ進む。
 実施例3の第10工程(二次抗体反応)では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して二次抗体試薬(Envision+Dual Link)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から例えば30μLの二次抗体試薬を基板Wに滴下する。次に、制御部185は、試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して試薬としてオイル(流動パラフィン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50からオイルを基板Wに滴下する。この場合のオイルの滴下量は例えば30μLである。つまり、二次抗体試薬をオイルで被覆して二次抗体試薬の蒸散を防ぐ。また、この後の電界撹拌を効率的に行うために、二次抗体試薬にオイルを追加して電界撹拌時の溶液Sの容量を増やす。その後、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から電界撹拌部170に搬送する。電界撹拌部170では、制御部185は一対の電極10,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された二次抗体試薬とオイルとを含む溶液Sを撹拌する。この場合の電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第11工程へ進む。
 実施例3の第11工程(洗浄)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御して、ステージ10を電界撹拌部170から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、上記第7工程(洗浄)と同様にしてPBS-Tを用いた垂れ流し洗浄を行う。そして、第12工程へ進む。
 実施例3の第12工程(発色)では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して、発色を行わせる試薬(DAB)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(DAB)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(DAB)の滴下量は例えば60μLである。所定量の試薬(DAB)を基板Wに供給した後に、その場で3分間静置して組織標本Tsと試薬(DAB)とを反応させて発色させる。そして、第13工程へ進む。
 実施例3の第13工程(洗浄)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、制御部185がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。発癌性物質を含む試薬(DAB)が含まれる純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第2排出流路142に導かれてタンク109に排出される。そして、第14工程へ進む。
 実施例3の第14工程(核染)では、制御部185がステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から試薬供給部150に搬送する。試薬供給部150では、病理標本作製プロトコルに基づいて、制御部185は試薬供給部150(モーター157)を駆動制御して、核染(対比染色)を行わせる試薬(ヘマトキシリン)が充填されたカートリッジ50を基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部185は電動プッシャー158を駆動制御して、カートリッジ50から試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(ヘマトキシリン)の滴下量は例えば100μLである。所定量の試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsと試薬(ヘマトキシリン)とを反応させて核染(対比染色)を行う。そして、第15工程へ進む。
 実施例3の第15工程(洗浄)では、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を試薬供給部150から洗浄部130に搬送する。洗浄部130では、制御部185がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル131からタンク107に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部130では、ステージ傾斜機構によりステージ10が傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。試薬(ヘマトキシリン)が含まれる純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部126を経由し、流路切り替え機構140により第1排出流路141に導かれてタンク108に排出され貯留される。そして、制御部185はステージ搬送機構(モーター115)を駆動制御してステージ10を洗浄部130から原点に搬送する。そして、第16工程へ進む。なお、病理標本作製装置100を用いて第5工程~第15工程までの処理を実行する。
 実施例3の第16工程(透徹)、第17工程(封入)、第18工程(解析)は、上記実施例2あるいは比較例2の第15工程(透徹)、第16工程(封入)、第17工程(解析)と同じである。
 実施例3の病理標本の作製(第1工程から第18工程)に要した時間は約254分であった。
 (比較例3)
 図28に示すように、比較例3のISHによる病理標本の作製工程もまた、実施例3と同じように脱パラフィン処理を行う第1工程から解析を行う第18工程までを有している。比較例3の第1工程~第4工程、第16工程~第18工程は、実施例3と同じである。病理標本作製システム1000を用いずに、手作業で第5工程~第15工程までを行っている。この場合の病理標本作製プロトコルは実施例3と異なっている。以降、実施例3と異なる工程について、具体的に作業内容を説明する。なお、比較例3の少なくとも第5工程から第15工程を再現できれば、他の病理標本作製装置を用いて比較例3の病理標本の作製を行ってもよい。また、比較例3の組織標本Tsは実施例3と同じブタ肝臓ブロックの連続切片から得られたパラフィン包埋切片を用いる。
 比較例3の第5工程(熱変性処理)では、基板Wに固定された組織標本Tsに実施例3と同じ濃度の試薬(プローブ)を例えば10μL滴下する。続いて、オイルを例えば40μL滴下して、プローブをオイルで被覆する。プローブをオイルで被覆した状態で基板Wを95℃に加温して10分間静置して熱変性処理を行う。その後、20分放置して室温まで自然冷却する。なお、プローブやオイルを滴下する方法としては、例えばマイクロピペットを用いる。そして、第6工程へ進む。
 比較例3の第6工程(ハイブリダイゼーション)では、基板Wを37℃に加温し、720分間静置してハイブリダイゼーションを行う。そして、第7工程に進む。
 比較例3の第7工程(洗浄)では、基板Wに洗浄液としてのPBS-Tを30秒間垂れ流して洗浄を行う。そして、第8工程に進む。
 比較例3の第8工程(一次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて、実施例3と同じ濃度の一次抗体試薬(Hep-par1)を例えば30μL滴下する。続いて、オイルを例えば30μL滴下する。一次抗体試薬をオイルで被覆した後に、20分間静置して一次抗体反応を行う。そして、第9工程に進む。
 比較例3の第9工程(洗浄)では、上記第7工程(洗浄)と同様にして、基板WにPBS-Tを30秒間垂れ流して洗浄を行う。そして、第10工程に進む。
 比較例3の第10工程(二次抗体反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して、例えばマイクロピペットなどを用いて、実施例3と同じ濃度の二次抗体試薬(Envision+Dual Link)を例えば30μL滴下する。続いて、オイルを例えば30μL滴下する。二次抗体試薬をオイルで被覆した後に、20分間静置して二次抗体反応を行う。そして、第11工程に進む。
 比較例3の第11工程(洗浄)では、上記第7工程(洗浄)と同様にして、基板WにPBS-Tを30秒間垂れ流して洗浄を行う。そして、第12工程に進む。
 比較例3の第12工程(発色反応)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例3と同じ濃度の発色試薬(DAB)を例えば60μL滴下する。発色試薬(DAB)を滴下した後に、3分間静置して発色反応を行う。そして、第13工程に進む。
 比較例3の第13工程(洗浄)では、発色反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。そして、第14工程に進む。
 比較例3の第14工程(核染)では、洗浄された基板Wの組織標本Tsに対して例えばマイクロピペットなどを用いて実施例3と同じ濃度の対比染色試薬(ヘマトキシリン)を例えば100μL滴下する。ヘマトキシリンを滴下した後に、1分間静置して核染反応を行う。そして、第15工程に進む。
 比較例3の第15工程(洗浄)では、核染反応が終了した基板Wに純水を2分間掛け流して流水洗浄を行う。そして、第16工程へ進む。比較例3の第16工程(透徹)、第17工程(封入)、第18工程(解析)は、上記実施例3と同じである。以上の工程を経ることにより、比較例3のISHによる病理標本の作製が終了する。比較例3の病理標本の作製に要した時間は約824分であり、実施例3の約254分に比べて、570分(およそ9.5時間)余計に時間を要した。実施例3と比較例3とでは染色結果にほとんど差がなかった。実施例3では、第5工程~第15工程まで病理標本作製システム1000(病理標本作製装置100)を用いたことにより、作業時間を短縮できた。
 上記実施形態の病理標本作製装置100及び病理標本作製装置100を備えた病理標本作製システム1000によれば、以下の効果が得られる。
 (1)病理標本作製装置100は、複数のステージ部110を有していることから、最大で6つの組織標本Tsが固定された基板Wを用いて病理標本を作製することができる。
 (2)ステージ部110は、ステージ搬送機構と、ステージ傾斜機構とを含んでフレーム105の第2プレート102上に配置されていることから、例えばステージ部110に不具合があれば、ステージ搬送機構、ステージ傾斜機構とを含んだ状態で、ステージ部110を交換するといったメンテナンスができる。
 (3)ステージ傾斜機構は、ステージ搬送機構によりステージ10がY方向において原点に向かって洗浄部130に搬送される動きによって、カム125に乗り上がる支持棒121がステージ10の底面12を下方から押し上げることでステージ10が傾斜する。したがって、ステージ10を傾斜させるための専用のモーターなどの駆動系を必要としないので、簡素な装置構成とすることができる。
 (4)ステージ傾斜機構によりステージ10は、洗浄部130において上面11が水平な状態から60度以上に傾斜することから、基板Wに供給された試薬Rsや洗浄液Csあるいは試薬Rsを含む洗浄液Csを確実に基板Wから排出できる。言い換えれば、試薬Rsや洗浄液Csあるいは試薬Rsを含む洗浄液Csが基板Wに残存することで、病理標本の作製における各種の処理に影響を及ぼすことを低減あるいは防止して、適正に病理標本を作製することができる。
 (5)病理標本作製装置100は、ステージ部110に設けられた液体排出ガイド部126と、第2プレート102上に配置された流路切り替え機構140とにより、基板Wから排出された試薬Rsや洗浄液Csあるいは試薬Rsを含む洗浄液Csを、廃液タンクであるタンク108またはタンク109のいずれかに排出することができる。言い換えれば、排出される液体の種類によって廃液処理が異なる場合には、特定のタンクに特定の液体を分けて排出して貯留することができる。
 (6)電界撹拌部170を備えているので、病理標本の作製における一次抗体反応や二次抗体反応、あるいはハイブリダイゼーションに要する時間を短縮することができる。なお、電界撹拌を適用可能な工程は、一次抗体反応や二次抗体反応あるいはハイブリダイゼーションに限らず、発色反応や洗浄工程に適用してもよい。これにより処理時間をさらに短縮することが可能である。
 (7)ステージ10には、ペルチェ素子15と温度センサー16とが取り付けられている。また、病理標本作製装置100はペルチェコントローラー184を備えている。したがって、脱パラフィン処理、熱変性処理、ハイブリダイゼーションのように基板Wの加温が必要とされる病理標本の作製に対しても適正に対応可能である。
 (8)病理標本作製システム1000は、病理標本作製装置100に設けられたバーコードリーダー162だけでなく、コンピューター500に接続されたバーコードリーダー506を備えている。したがって、病理標本作製プロトコルに基づいて、カートリッジ50に充填される試薬Rsの管理や、病理標本の作製工程で用いられるカートリッジ50つまり試薬Rsの管理を確実に実行することができる。また、病理標本作製装置100の試薬供給部150に撮像部としてのCCD161が設けられ、基板Wを撮像可能となっている。したがって、基板Wに固定された組織標本Tsやマーキング領域3に記載された組織標本Tsの情報を画像として入手し、管理することができる。すなわち、病理標本の作製工程において組織標本Tsと病理標本作製プロトコル(試薬Rsや洗浄液Csなどの情報を含む)とを確実に関連づけた高いトレーサビリティーを実現できる。
 (第2実施形態)
 <病理標本作製装置>
 次に、第2実施形態の病理標本作製装置の概要について、図29及び図30を参照して説明する。図29は第2実施形態の病理標本作製装置の外観を示す概略斜視図、図30は第2実施形態の病理標本作製装置の構成を示す概略斜視図である。第2実施形態の病理標本作製装置は、上記第1実施形態の病理標本作製装置100と基本的に同様な構成を有するものであるが、病理標本作製を行う場合の操作性、試薬Rsや洗浄液Csの排出性、カートリッジにおける試薬Rsの残量管理などが向上するように改善を施した構成となっている。なお、上記第1実施形態の病理標本作製装置100と同じ構成には同じ符号を付して詳細な説明は省略する。
 図29に示すように、本実施形態の病理標本作製装置200は、周囲を覆う外装カバー290を備えた本体部201を有している。外装カバー290は、本体部201の正面下段部分に位置し、電源スイッチ202が取り付けられた正面板291と、正面上段部分に位置する第1開閉部293と、上面板294と、一対の側面板296と、を有している。第1開閉部293は、正面板291と上面板294と一対の側面板296とにより囲まれて正面側に開口する開口部292を開閉可能に覆うものである。
 正面板291には、後述する4つのタンク205~208のセット・リセットを可能とする開口291aが設けられている。
 一対の側面板296のうち一方には、後述する電界撹拌部270(図30参照)の上電極20のセット・リセットを可能とする開口部を開閉する第2開閉部297が設けられている。また、一対の側面板296の後方の下側には、切欠き部296aが設けられている。これにより、本体部201を例えば壁面に押し付けるように配置したとしても電源コードなどのコード類を切欠き部296aで逃がすことができる構造となっている。なお、図29には図示していないが、外装カバー290は、切欠き部296aよりも上方の背面を覆う背面板を有している。
 外装カバー290のうち第1開閉部293は、例えばABSなどの樹脂材料を用いて形成され、正面板291、上面板294、側面板296、背面板は、例えばメッキや塗装などが施された鋼板を用いて形成されている。また、後述する電界撹拌部270や回路部280、高電圧発生部281(図30参照)などから外部に不要な電磁波が放出されることを防ぐため、樹脂製の第1開閉部293には電磁波を遮蔽可能な電磁シールドを設けることが好ましい。
 本実施形態の病理標本作製装置200は、装置への入力操作を可能とする入力手段としての透光性のT/K(タッチキー)を有する表示部203を有している。表示部203は、例えば液晶表示装置であって、上面板294に設けられた回動可能な一対のアーム部295に取り付けられている。これにより、作業者が、第1開閉部293と重なる手前側の位置と、上面板294の上方の位置との間の任意の位置に表示部203を動かすことができる構成となっている。
 本実施形態においても、上記第1実施形態と同様に、病理標本作製装置200の表示部203を臨むことができる側を正面として、左右方向をX方向とし、前後方向をY方向とし、上下方向をZ方向として、以降説明する。なお、Y方向が本発明の第1の方向に相当し、X方向が本発明の第1の方向に交差する第2の方向に相当するものである。
 図30に示すように、本実施形態の病理標本作製装置200は、4つのタンク205~208と、ステージ部210と、洗浄部230と、試薬供給部250と、電界撹拌部270と、回路部280と、高電圧発生部281と、これらの各部が配置される構造体であるフレーム204と、を備えている。フレーム204は、Z方向において下から順に、上述した各部を配置するための段部を構成する枠組みである第1フレーム204a、第2フレーム204b、第3フレーム204c、第4フレーム204dを有している。フレーム204は、例えばアルミニウムからなる。
 フレーム204の最下段である第1フレーム204aには、Y方向の前方側に4つのタンク205,206,207,208がこの順にX方向に並んで配置されている。言い換えれば、4つのタンク205~208をX方向に並んで配置可能なタンク受け部が第1フレーム204aに取り付けられている。
 タンク205には、組織標本Tsの乾燥などを防ぐバッファー溶液であって、例えばリン酸緩衝生理食塩水(PBS)やTris-Buffered-Saline(TBS)、Standard-Saline-Citrate(SSC)などの洗浄液が貯留される。タンク206には、他の洗浄液としての純水(HO)が貯留される。タンク205,206は本発明における洗浄液タンクの一例である。
 タンク207及びタンク208は、洗浄液Csや試薬Rsの廃液を貯留するために用意されたものである。タンク207,208は本発明における廃液タンク(第1廃液タンク、第2廃液タンク)の一例である。タンク205,206,208の容量は例えば3L(リットル)であり、タンク207の容量は例えば他のタンクの容量のおよそ倍の5Lである。タンク205~208は、耐薬品性や重量などを考慮して、例えばポリエチレンやポリプロピレンなどの樹脂容器が用いられる。
 上記第1実施形態で説明したように、試薬Rsには、発色試薬のように発癌性を有する物質(発色剤)を含むものもあり、他の液体と混ぜてしまうと、所定の廃液処理を施すことが必要な廃液量が増えてしまう。そこで、本実施形態においても、洗浄液Csの廃液と試薬Rsの廃液とを混ぜて貯留してもよいタンク207と、発色試薬を含む廃液を貯留するタンク208とを個別に設けた構成としている。そして、本実施形態では、上記第1実施形態の病理標本作製装置100の4つのタンク106~109に対して、タンク207の容量を増やしている。これは、病理標本作製プロトコルの種類により主に洗浄液Csの使用量すなわち廃液量が増えたとしても対応可能となるように構成したものである。なお、タンク205~208の容量をすべて同じとしてもよいし、必要に応じて異ならせてもよい。また、洗浄液Csや廃液を貯留するタンクの数は、4つに限定されるものではない。
 また、本実施形態では、タンク205~208に貯留される各種の溶液(純水を含む洗浄液や廃液)の残量を検出する残量検出センサー265(図30では不図示)がタンク205~208のそれぞれに対応して設けられている。上述したように透明または半透明な樹脂容器を用いてタンク205~208を構成する場合、残量検出センサー265として、非接触の光学式センサーを用いることができる。残量検出センサー265の活用については後述する。
 第1フレーム204aにおけるY方向の後方側には、回路部280が配置されている。回路部280は、ステージ部210、洗浄部230、試薬供給部250に含まれる電気的な駆動系に電源を供給する電源ユニットや、各部の制御に係る制御部などが含まれている。回路部280の電気的な構成については、後述する病理標本作製システムにおいて説明する。なお、電界撹拌部270へ高電圧を供給する高電圧発生部281は、電界撹拌部270の上方において第4フレーム204dに取り付けられている。このように電界撹拌部270の近くに高電圧発生部281を配置することで、上記第1実施形態に比べて高電圧が印加される配線をより短くできる構成としている。
 Z方向において、第1フレーム204aの上方に位置する第2フレーム204bには、洗浄液Csをタンク205あるいはタンク206から送り出して供給するための2つのポンプと、洗浄液Csや試薬Rsの廃液をタンク207とタンク208とに分けて排出するための排出流路を切り替える流路切り替え機構240(図37参照)とが配置されている。2つのポンプや流路切り替え機構240については後述する。
 ステージ部210は、基板Wが載置されるステージ10Rと、ステージ10RをY方向に移動させるステージ搬送機構と、ステージ10RをX方向に傾斜させるステージ傾斜機構とを含むものである。第3フレーム204cには、Y方向に延びるステージ部210がX方向に並列して複数(本実施形態では6つ)配置されている。ステージ搬送機構及びステージ傾斜機構の詳細については後述する。なお、ステージ部210の数は6つに限定されるものではない。各ステージ部210は、第3フレーム204cに対して個別に配置されているため、個別にメンテナンス可能となっている。
 洗浄部230、試薬供給部250、電界撹拌部270は、Y方向においてこの順に第3フレーム204cに配置されている。洗浄部230は、ステージ10Rの数に対応した複数(6つ)のノズルを有し、複数のステージ10Rのそれぞれに2種の洗浄液Csの中から洗浄に必要な洗浄液Csを供給可能な構成となっている。また、ガス供給手段に接続され、ステージ10Rの数に対応した複数(6つ)のノズルを有し、複数のステージ10Rのそれぞれにノズルからガスを吹き付けることが可能な構成となっている。つまり、洗浄部230は、1つのステージ10Rに対して2つのノズル、すなわち合計12個のノズルを有している。試薬供給部250は、複数(6つ)のステージ10Rのそれぞれに複数種の試薬Rsの中から反応に必要な試薬Rsを供給可能な構成となっている。電界撹拌部270は、一対の電極のうち上電極20を有している。上電極20は、複数(6つ)のステージ部210に跨るようにX方向に延在して配置されている。
 各ステージ部210において、ステージ10Rは、ステージ搬送機構によってY方向に移動し、洗浄部230、試薬供給部250、電界撹拌部270のそれぞれに対応して配置される構成となっている。
 このような病理標本作製装置200によれば、最大で6つの基板Wをそれぞれステージ10Rに配置して、病理標本を作製することが可能である。また、フレーム204に、4つのタンク205~208及び回路部280と、ステージ部210と、洗浄部230及び試薬供給部250並びに電界撹拌部270と、高電圧発生部281とが重畳された状態で配置されているので、フットプリント(設置面積)が小さく、小型な病理標本作製装置200が実現されている。以降、病理標本作製装置200における各部の構成や構造について説明する。なお、このように各部を重畳して配置可能なフレーム204は、第1フレーム204a、第2フレーム204b、第3フレーム204c、第4フレーム204dを有する4段構成であることに限定されず、4段以上の例えば5段であってもよい。
 <ステージ部>
 次に、ステージ部210について、図31~図33を参照して説明する。図31は第2実施形態のステージ部の構成を示す概略斜視図、図32は第2実施形態のステージを示す概略斜視図、図33は第2実施形態の液体排出ガイド部を示す概略斜視図である。
 図31に示すように、ステージ部210は、ステージ10R、支持フレーム211、モーター215、リニアガイド217、第1ステージ支持部221、第2ステージ支持部223、液体排出ガイド部226などを有している。
 支持フレーム211は、Y方向に延びる上面部211aと、上面部211aをY方向の両端において支える一対の脚部211b,211cと、Y方向の中間的な位置で支持する側部211dとを有している。支持フレーム211は、例えばSUS板を外形加工した後に折り曲げることで、上面部211aと、一対の脚部211b,211cと、側部211dとが一体的に形成されたものである。上面部211aのZ方向の下側の面に、Y方向に延在するようにリニアガイド217が設けられている。
 モーター215は、例えばステッピングモーターであって、回転軸がZ方向の上側に向くように、一対の脚部211b,211cのうちY方向の後方側に位置する一方の脚部211cに取り付けられている。回転軸にはタイミングプーリー216bが装着されている。もう一つのタイミングプーリー216aは、他方の脚部211bに回転可能に軸支されている。2つのタイミングプーリー216a,216bにタイミングベルト218が架け渡されている。架け渡されたタイミングベルト218のX方向における右側部分に第1ステージ支持部221が固定されている。モーター215を駆動すると、タイミングベルト218が回り、タイミングベルト218に固定された第1ステージ支持部221をY方向において前方と後方とに移動させることができる。
 支持フレーム211の上面部211aをY方向の中間的な位置で支持する側部211dは、一対の脚部211b,211cのうち、他方の脚部211bに近い位置に設けられている。側部211dが設けられた位置において上面部211aに沿うように液体排出ガイド部226が設けられている。
 図32に示すように、ステージ10Rは、略直方体であって、長手方向がY方向に沿って配置される。ステージ10Rは、基板Wが載置される載置部11Rと、載置部11Rを下方から支持する台座12Rとを有している。載置部11Rは、X方向及びY方向において所定の位置に基板Wを載置するためのガイド部11a及びガイド部11bを有している。ガイド部11aは載置部11RのX方向の右辺側と、Y方向の後端側とに設けられている。ガイド部11bは、載置部11Rの前方左隅に設けられている。載置部11RのX方向の左辺側には傾斜部11dが設けられ、傾斜部11dのガイド部11a側に島状に独立したもう一つのガイド部11eが設けられている。載置部11Rは前方右隅が切り欠かれた切欠き部11cを有し、台座12Rもまた同じく前方右隅が切り欠かれた切欠き部12cを有している。これらの切欠き部11c,12cは、基板Wの端を例えばピンセットなどで把持して載置部11Rに対してセット・リセットする際に、ピンセットがステージ10Rにぶつからないように切り欠かれている。つまり、ステージ10Rに対する基板Wのセット・リセットを容易に行える構成となっている。なお、載置部11Rは、後述する電界撹拌部270における一対の電極のうち下電極として機能するものであって、例えばアルミニウムを用いて形成されている。これに対して台座12Rは、絶縁性の例えば樹脂などを用いて形成されている。
 台座12Rは、X方向に所定の幅で切り込むように形成され、Y方向において対向する一対の溝部12aを有している。また、一対の溝部12aに対しY方向に2つのネジ孔12b,12dが形成されている。台座12Rは、X方向の右側における下方端が面取りされた斜面12eと、斜面12eとX方向の反対側の下方端から外側に張り出して傾斜した傾斜部12fとを有している。
 図31に示すように、ステージ10Rは、第2ステージ支持部223によって、水平な状態から一定の方向に回転できるように支持されている。具体的には、台座12Rの一対の溝部12aに第2ステージ支持部223の一対のアーム部223a,223bが挿入されている。一対のアーム部223a,223bのそれぞれの先端側には、台座12Rに設けられたネジ孔12b,12dに対応する孔が形成されている。ネジ孔12b,12dのそれぞれに軸が挿入され、軸が一対のアーム部223a,223bに形成された孔を貫通することによって、台座12Rは、当該軸を中心に回転可能な状態に第2ステージ支持部223によって支持される。上記第1実施形態では、ステージ10のY方向における外側の側面において、ステージ10を回転可能な状態で支持していたが、本実施形態では、台座12Rの一対の溝12aに第2ステージ支持部223の一対のアーム部223a,223bを挿入して回転可能に支持した。これにより、上述した載置部11Rの切欠き部11cや台座12Rの切欠き部12cを上記第1実施形態のステージ10の切欠き部13よりも大きくすることができた。ゆえに、ステージ10Rに対する基板Wのセット・リセットの作業性がさらに向上した。
 支持フレーム211の上面部211aの直下には、リニアガイド217が設けられている。リニアガイド217にはスライダー217a(図34参照)が取り付けられている。また、スライダー217aは第2ステージ支持部223に固定されている。さらに、第2ステージ支持部223は、タイミングベルト218に取り付けられた第1ステージ支持部221に固定されている。つまり、モーター215を駆動してタイミングベルト218を動かすと、第1ステージ支持部221及び第2ステージ支持部223によって支持されたステージ10Rをリニアガイド217に沿ってY方向に移動させることができる構成となっている。すなわち、本実施形態におけるステージ搬送機構は、少なくとも、駆動源であるモーター215、タイミングプーリー216a,216b、リニアガイド217、スライダー217a、タイミングベルト218、第1ステージ支持部221、第2ステージ支持部223を含むものである。
 なお、支持フレーム211の上面部211aのY方向における手前側にセンサー228が取り付けられている。センサー228は、タイミングベルト218に固定されてY方向に移動する第1ステージ支持部221の位置を検出して、モーター215を停止させる役割を担っている。センサー228がモーター215を停止させたときのステージ10Rの位置がY方向における原点である。ステージ10Rが原点に位置しているときに、ステージ10Rに対して基板Wのセット・リセットが行われる。
 図33に示すように、本実施形態の液体排出ガイド部226は、X方向から見たときに外形が野球のホームベースに似た略5角形の樋であって、その下方端に突出した接続部227に可撓性のチューブが取り付けられる。また、液体排出ガイド部226は、X方向に突出して、支持フレーム211の上面部211aにねじ止め可能な突出部226dを有している。突出部226dには、Y方向から見たときに側面部226aを含めた形状がL字状をなすガイド部226bが設けられている。ガイド部226bの縁は突出部226dからZ方向の上方に向かって延びている。ガイド部226bのY方向における長さL2は、ステージ10RのY方向における長さL1(図32参照)よりも長い。支持フレーム211の上面部211aに液体排出ガイド部226が取り付けられた位置が、Y方向における洗浄の位置に相当するものである。つまり、洗浄の位置で、ステージ10RをY方向に前後させてステージ10Rに載置された基板Wを洗浄液Csで洗浄したとしても、ステージ10R上から排出される洗浄液Csを液体排出ガイド部226で受けることができる構成となっている。
 次に、本実施形態のステージ傾斜機構について、図34及び図35を参照して説明する。図34は第2実施形態のステージ傾斜機構を説明する概略斜視図、図35は第2実施形態の傾斜したステージと他の構成との位置関係を示す図である。なお、図35は、傾斜したステージ10RをY方向から見たときの図である。
 図34に示すように、支持フレーム211の側部211dには、タイミングベルト218の下方において立設した壁面211eと、当該壁面211eに接しY方向に延びる平板214と、当該壁面211eのY方向における前方側と後方側とにおいて互いに異なる方向に傾斜した一対の傾斜部211f,211gとが設けられている。また、当該壁面211eには、平板214のY方向における前方側と後方側とにおいて、上記一対の傾斜部211f,211gと向かい合う一対のガイド板214a,214bが設けられている。一対のガイド板214a,214bのそれぞれは平板214側を支点として回動可能な状態に壁面211eに支持されている。
 一対のガイド板214a,214bのうち、Y方向における前方側の一方のガイド板214aは、壁面211eとの間に架け渡されたバネ211hによって、前方側の先端がZ方向における上方側に付勢されている。他方のガイド板214bは、壁面211eとの間に架け渡されたバネ211iによって、後方側の先端がZ方向における下方側に付勢されている。したがって、各バネ211h,211iによって付勢された状態では、一方のガイド板214aはほぼ水平に近い状態で傾斜して平板214に連なっている。他方のガイド板214bはY方向における後方側に傾斜した状態で平板214に連なっている。
 タイミングベルト218に取り付けられた第1ステージ支持部221には、レバー222が回動可能に軸支されている。レバー222は、Z方向において、下方側に延びる第1アーム222aと、第1アーム222aに連なってY方向に延びた後に上方側に延びる第2アーム222bとを有し、X方向から見たときの外形は、略T字状である。第1アーム222aの先端部222cには、ミニチュアベアリングを介して回転可能な状態にロッドが取り付けられている。同じく、第2アーム222bの上方側の先端部222dにも回転可能な状態にロッドが取り付けられている。
 レバー222の第2アーム222bにおけるY方向に延びた部分の端部222eは、第1ステージ支持部221に対して軸支されている。したがって、図31に示すように、例えば、ステージ10RがY方向における原点に位置しているときには、第2アーム222bのY方向に延びた部分が第1ステージ支持部221に固定されたネジ221aに当接することによって、端部222eを中心としたレバー222の回転が止められた状態となっている。このとき、レバー222の第2アーム222bの上方側の先端部222dは、ステージ10Rの台座12Rの底面に当接している。この状態から、モーター215を駆動して、ステージ10Rを原点からY方向の後方側に移動させると、レバー222の第1アーム222aの先端部222cは、ガイド板214a及び平板214の下側を通過し、後方のガイド板214bを上方に跳ね上げて、モーター215側に移動する。
 モーター215の回転を駆動制御して、Y方向の後方側に移動したステージ10Rを再び原点に向けて前方側に移動させると、レバー222の第1アーム222aの先端部222cは、傾斜部211gにガイドされ、後方のガイド板214bに当接して平板214の上に乗り上げる。これによって、レバー222は、端部222eを中心として反時計回りに回動し、第2アーム222bの先端部222dが台座12Rの底面を押し上げる。台座12Rの底面が押し上げられたステージ10Rは、X方向において液体排出ガイド部226の方へ傾斜する。
 さらに、ステージ10Rを原点に向かって移動させると、レバー222の第1アーム222aの先端部222cは、平板214から前方の傾斜部211fに当接して前方のガイド板214aを押し下げる。そうすると、第1アーム222aの先端部222cがガイド板214aから外れて前方に移動することから、レバー222は端部222eを中心として時計回りに回転して第1ステージ支持部221のネジ221aに当接し回転が停止する。これにより、レバー222の第2アーム222bの上方側の先端部222dが台座12Rの底面を押し上げていた動作が解除される。台座12Rの底面に設けられた孔12gには係止部12hがはめ込まれており、係止部12hと第2ステージ支持部223との間にはバネ223dが架け渡されている。第2ステージ支持部223は、台座12Rの下方において、Z方向に立設する度当たり223eを有している。レバー222の第2アーム222bの上方側の先端部222dが台座12Rの底面を押し上げていた動作が解除されると、延びていたバネ223dによって台座12Rが引き付けられて度当たり223eに当接する。これにより、第2ステージ支持部222によって支持されたステージ10Rの回動が停止して、ステージ10Rの載置部11Rが水平な状態となる。
 すなわち、ステージ10RをX方向における液体排出ガイド部226側に傾斜させる本実施形態のステージ傾斜機構は、一対の傾斜部211f,211g、平板214、一対のガイド板214a,214b、第1ステージ支持部221、レバー222を含むものである。平板214、一対のガイド板214a,214b、一対の傾斜部211f,211g、第1ステージ支持部221、レバー222は、本発明のステージ傾斜機構における支持機構の一例である。
 なお、支持フレーム211の上面部211aのY方向の手前側にセンサー228が取り付けられている。また、第1ステージ支持部221に回動可能に支持されるレバー222の端部222eに検出板221bが取り付けられている。センサー228は門型であって、門型の検出部に、第1ステージ支持部221のY方向への移動に伴って検出板221bが挿入されることで、ステージ10Rの原点がセンサー228によって検出される構成となっている。
 図35に示すように、本実施形態のステージ傾斜機構によって、ステージ10Rは液体排出ガイド部226側に傾斜する。また、台座12Rの上述した傾斜部12fが、液体排出ガイド部226のガイド部226bと接触する状態、あるいはガイド部226bと接触する直前で止まるように、ステージ10Rを傾斜させる。このときのステージ10Rの傾斜角度は、ステージ10Rに載置され傾斜した基板Wと水平面とがなす角度であって、45度~60度の範囲となるように設定される。具体的には、図34に示した、側部211dの壁面211eにおける平板214の取り付け位置、レバー222の形状(すなわちレバー222の端部222eから第1アーム222aの先端部222cまでの長さ、及びレバー222の端部222eから第2アーム222bの先端部222dまでの長さ)を調整することにより、ステージ10Rの傾斜角度を調整可能である。
 上述したようにステージ10Rを傾斜させることで、ステージ10Rの上方に位置するノズル231から洗浄液Csが基板Wに向かって吐出されると、洗浄液Csは基板Wの表面を伝わって液体排出ガイド部226のガイド部226b内に流れ落ちる。また、例えば、洗浄液Csが載置部11Rを回りこんで台座12Rの側面に流れたとしても、台座12Rに設けられた傾斜部12fを伝わってガイド部226b内に流れ落ちる。さらに、本実施形態では、ステージ10Rの上方にもう一つのノズル234が配置されており、ノズル234から基板Wに向かってエアーが吹き付けられる構成となっている。したがって、傾斜した基板Wの表面にノズル234からエアーを吹き付けることによって、ノズル231から吐出された洗浄液Csを余すことなく液体排出ガイド部226に排出可能となっている。
 本実施形態では、上記第1実施形態のようにステージ10を傾けるだけでなく、ガス(エアー)をステージ10Rに向かって噴出するノズル234を設けたことから、ステージ10Rの傾斜角度が60度よりも小さくても、洗浄液Csを確実に基板W上から排出することができる。以降、ノズル231及びノズル234を有する洗浄部230の構成について、詳しく説明する。
 <洗浄部>
 本実施形態の洗浄部230について、図36~図40を参照して説明する。図36は第2実施形態の洗浄部の構成を示す概略斜視図、図37は第2実施形態の流路切り替え機構の構成を示す概略斜視図、図38~図40は第2実施形態における洗浄液の供給の仕方を示す配管系統図である。
 図36に示すように、洗浄部230は、洗浄液Csを吐出するための複数(6つ)のノズル231と、エアーを吹きつけるための複数の(6つ)のノズル234と、複数のバルブを備えたバルブ群232及びバルブ群233と、複数のノズル231及びノズル234を支持する支持プレート204eと、を有している。
 支持プレート204eは、長方形であって、前述した、病理標本作製装置200のフレーム204における第3フレーム204cに長手方向がX方向に沿うように支持されている(図30参照)。支持プレート204eには、X方向に等間隔で複数のノズル231及びノズル234が配置されている。複数のノズル231について、X方向の右側から順に符号を付して、ノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fと呼ぶこととする。同じく、複数のノズル234について、X方向の右側から順に符号を付して、ノズル234a,234b,234c,234d,234e,234fと呼ぶこととする。これらのノズル231,234は、ステージ部210の各ステージ10Rに対応して設けられている。X方向において、ノズル234は、ノズル231に対して左寄りにややずれて配置されている。
 バルブ群232及びバルブ群233は、ノズル231の数に応じて設けられた複数のバルブを含むものである。バルブ群232はY方向に配列した複数(6つ)のバルブ232a,232b,232c,232d,232e,232fを有する。バルブ群233もまたY方向に配列した複数(6つ)のバルブ233a,233b,233c,233d,233e,233fを有する。バルブ群232とバルブ群233とは、支持プレート204eを挟んで互いに向かい合うように、病理標本作製装置200の第3フレーム204cに分かれて配置されている(図30参照)。
 バルブ群232及びバルブ群233は、電気的に開閉を制御可能な電磁バルブであって、後述する回路部280に含まれる制御部によって開閉が制御される。詳しくは、電磁バルブは、門型の開閉部を有し、開閉部に挿入された可撓性のチューブを、開閉部を下降させ押圧して潰すことにより、チューブ内の液体流路を閉じることができる。開閉部を上昇させてチューブの押圧を解除すれば、チューブ内の液体流路を開くことができる。
 例えば、図36に実線で示すように、バルブ232a及びバルブ232bを経由してノズル231aに可撓性のチューブが接続される。同じく、バルブ232c及びバルブ232dを経由してノズル231bに可撓性のチューブが接続される。同じく、バルブ232e及びバルブ232fを経由してノズル231cに可撓性のチューブが接続される。同様に、バルブ233a及びバルブ233bを経由してノズル231fに可撓性のチューブが接続される。同じく、バルブ233c及びバルブ233dを経由してノズル231eに可撓性のチューブが接続される。同じく、バルブ233e及びバルブ233fを経由してノズル231dに可撓性のチューブが接続される。このように接続すれば、バルブからノズル231までの可撓性チューブの長さをノズル231ごとにほぼ同じとすることができる。つまり、各ノズル231に洗浄液Csを供給する際の圧損をノズル231ごとに均一化して、洗浄液Csの供給量のばらつきを抑えることができる。
 バルブ232a,232c,232eとバルブ233a,233c,233eに係る配管系統には他の洗浄液Csとしての純水(HO)が供給され、バルブ232b,232d,232fとバルブ233b,233d,233fに係る配管系統には洗浄液Csが供給される。各バルブの開閉を制御することにより、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれから2種の洗浄液Csを吐出することが可能となっている。詳しい洗浄液Csの供給方法については後述する。
 支持プレート204eによって支持されたもう一方の複数のノズル234a,234b,234c,234d,234e,234fのそれぞれは、バルブ235を介してガス供給手段に接続されている。本実施形態におけるガス供給手段は、例えば、空気を圧縮して送出可能な小型の加圧ポンプが挙げられる。バルブ235もまた電磁バルブであって、その開閉は回路部280に設けられた制御部によって制御される。
 洗浄部230は、ノズル231から吐出された洗浄液Csを廃液としてタンク207またはタンク208のいずれかに排出するための流路切り替え機構を有している。
 図37に示すように、本実施形態の流路切り替え機構240は、一対の脚部241a,241bと、排液受け部242と、モーター245と、分流路246と、を含んで構成されている。
 一対の脚部241a,241bは、前述したフレーム204の第3フレーム204cに対してX方向に向かい合うように取り付けられている。排液受け部242は、細長い樋状であって、一対の脚部241a,241bによって開口が水平となるように、開口の両端側が支持されてX方向に沿って配置されている。
 図37には図示していないが、樋状の排液受け部242には、上述した複数のステージ部210のそれぞれに設けられた液体排出ガイド部226の接続部227に取り付けられたチューブの先が垂れ下がるようになっている。
 樋状の排液受け部242は、X方向の左側よりも右側の方が深さが深く且つ幅広に形成されている。排液受け部242のX方向の右側底部にZ方向の下方に向かって排出口242aが設けられている。排出口242aには可撓性のチューブ243が取り付けられる。
 Z方向において排出口242aの下方に分流路246が配置されている。分流路246もまた樋状であって、底部におけるX方向の両端に開口(図37では図示を省略)が設けられている。また、分流路246の底部には、上記2つの開口のそれぞれに向かって傾斜する斜面が設けられている。分流路246は、斜面の部分が側部241cによって下方から支持されている。
 分流路246を下方から支える側部241cは、Z方向に立設された壁面を有し、当該壁面に対してY方向に回転軸が沿うようにモーター245が取り付けられている。モーター245は、例えばステッピングモーターであって、モーター245の回転軸には、分流路246内においてZ方向の下方に延びるチューブ243の先端側を保持するチューブホルダー244が取り付けられている。モーター245が停止しているとき、チューブホルダー244に保持されたチューブ243の先端は、分流路246の底部における2つの斜面の境界に位置している。
 分流路246の底部に設けられた2つの開口のうち、X方向における左側の一方の開口は、タンク207の注入口207aの上方に位置している。該2つの開口のうち、X方向における右側の他方の開口は、タンク208の注入口208aの上方に位置している。図37には図示を省略しているが、該2つの開口の一方に接続されたチューブは、タンク207の注入口207aに挿入され、他方に接続されたチューブは、タンク208の注入口208aに挿入されている。
 上述したように、洗浄の位置において、ステージ傾斜機構によりステージ10Rを傾斜させた状態で、ステージ10Rに載置された基板Wにノズル231から洗浄液Csを吐出すると、洗浄液Csは基板Wの表面を洗浄した後に液体排出ガイド部226に流れ込む。液体排出ガイド部226に流れ込んだ洗浄液Csは、接続部227に取り付けられたチューブを通過して樋状の排液受け部242へ流れ込む。排液受け部242に流れ込んだ洗浄液Csは、底部をX方向の右側に向かって流れてゆき排出口242aにたどり着く。このとき、図37において例えば回転軸が時計回りに所定の角度で回転するようにモーター245を駆動すれば、排出口242aに取り付けられたチューブ243はX方向において左側に向くことになり、排出口242aに流れ込んだ洗浄液Csは、分流路246のX方向における左側の一方の開口から、タンク207に導かれて廃液として排出される。
 また、例えば、図37において例えば回転軸が反時計回りに所定の角度で回転するようにモーター245を駆動すれば、排出口242aに取り付けられたチューブ243はX方向において右側に向くことになり、排出口242aに流れ込んだ洗浄液Csは、分流路246のX方向における右側の他方の開口から、タンク208に導かれて廃液として排出される。
 本実施形態の流路切り替え機構240は、排液受け部242と、モーター245と、モーター245の回転軸に取り付けられたチューブホルダー244と、分流路246と、を少なくとも含むものである。これによって、例えば、排液受け部242に流れ込む洗浄液Csが発色試薬を含まない場合には、モーター245を駆動することによって、洗浄液Cs(廃液)をタンク207に排出する。また、例えば、排液受け部242に流れ込む洗浄液Csが発色試薬を含む場合には、モーター245を駆動することによって、洗浄液Cs(廃液)をタンク208に排出する。
 図38に示すように、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fに洗浄液Csを供給する系統は、タンク205に貯留された洗浄液をポンプP1によって汲み出して、配管237aとバルブ232b,232d,232fとを経由してノズル231a,231b,231cに送出する第1の供給系統と、配管237bとバルブ233b,233d,233fとを経由してノズル231d,231e,231fに送出する第2の供給系統とを有している。また、タンク206に貯留された純水(HO)をポンプP2によって汲み出して、配管238aとバルブ232a,232c,232eとを経由してノズル231a,231b,231cに送出する第3の供給系統と、配管238bとバルブ233a,233c,233eとを経由してノズル231d,231e,231fに送出する第4の供給系統とを有している。また、ポンプP1の送出側にはバルブ236aが設けられている。さらに、バルブ236aの送出側と、ポンプP2の送出側とを繋ぐ配管に中継バルブ236bが設けられている。
 図38に示すように、ポンプP2に繋がるバルブ236bと、バルブ232a,232c,232e及びバルブ233a,233c,233eを閉じて、ポンプP1に繋がるバルブ236aと、バルブ232b,232d,232f及びバルブ233b,233d,233fとを開き、ポンプP1を駆動すれば、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれから洗浄液Csを吐出できる。
 また、図39に示すように、中継バルブ236bと、バルブ232b,232d,232f及びバルブ233b,233d,233fとを閉じて、ポンプP1に繋がるバルブ236aと、バルブ232a,232c,232e及びバルブ233a,233c,233eを開き、ポンプP2を駆動すれば、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれから純水を吐出できる。つまり、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれから洗浄液Csまたは純水を吐出する操作は、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれに付帯するバルブを開閉することにより行われる。
 洗浄液Csとして、前述したPBSなどのバッファー溶液を用いた場合、配管内でバッファー溶液が乾燥して固形分が析出すると配管を塞ぐおそれがある。それゆえに、PBSなどのバッファー溶液が供給される上記第1の供給系統及び上記第2の供給系統は、定期的にあるいは適宜に純水によって洗浄することが好ましい。そのような場合には、図40に示すように、ポンプP1に繋がるバルブ236aと、バルブ232a,232c,232e及びバルブ233a,233c,233eとを閉じ、中継バルブ236bと、バルブ232b,232d,232f及びバルブ233b,233d,233fとを開いて、ポンプP2を駆動すれば、第1の供給系統及び第2の供給系統に純水を供給して洗浄し、洗浄後の純水を複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれから排出することができる。洗浄に用いられノズル231から排出された純水は、液体排出ガイド部226から上述した流路切り替え機構240によって、他のタンクに比べて容量が大きなタンク207に導かれて排出される。
 本実施形態では、複数のノズル231a,231b,231c,231d,231e,231fのそれぞれにPBSなどのバッファー溶液が供給される配管系統を、第1の供給系統と第2の供給系統とに分けたため、上記第1実施形態のように1つの供給系統で複数のノズル131にバッファー溶液を供給する場合に比べて、バッファー溶液を各ノズル231から安定的に吐出できる。また、配管系統の目詰まりによる影響を受け難くなる。
 なお、図38~図40には図示していないが、本実施形態では、上記第1の供給系統及び上記第2の供給系統とバルブ236aとの間の配管に、当該配管を通る洗浄液Csの圧力を検出する圧力センサーを備えた。圧力センサーにより当該配管の圧損を検出することで、上記第1の供給系統及び上記第2の供給系統の目詰まりを検出して、純水洗浄を促すことができるようにした。
 <試薬供給部>
 次に、本実施形態の試薬供給部250について、図41~図44を参照して説明する。図41は第2実施形態の試薬供給部の構成を示す概略斜視図、図42は第2実施形態のカートリッジを示す斜視図、図43は第2実施形態の試薬供給部に係る各部の配置を示す概略平面図、図44は第2実施形態の試薬供給部に係る各部の配置を示す概略側面図である。
 本実施形態の試薬供給部250は、ステージ部210のステージ10Rに載置された基板Wにカートリッジ50Rに充填された試薬Rsを供給する装置である。図41に示すように、試薬供給部250は、橋脚部251、支持フレーム252、前面フレーム253、一対のタイミングプーリー254a,254b、カートリッジ50Rを脱着可能な複数の保持部としてのカートリッジホルダー255、タイミングベルト256、モーター257、電動プッシャー258、を有している。
 橋脚部251は、一対のタイミングプーリー254a,254b、モーター257を支持する構造体であって、病理標本作製装置200の第3フレーム204cにおいて、X方向に架け渡されている。橋脚部251のX方向に延びた部分の両端側に一対のタイミングプーリー254a,254bが設けられている。一対のタイミングプーリー254a,254bのうち、X方向において右側に位置する一方のタイミングプーリー254aは、橋脚部251において回転自在に軸支されている。X方向において左側に位置する他方のタイミングプーリー254bにモーター257が取り付けられ、その回転が電気的に制御される。モーター257は例えばステッピングモーターである。
 一対のタイミングプーリー254a,254bの間にタイミングベルト256が架け渡されている。タイミングベルト256には、複数(9個)のカートリッジホルダー255が取り付けられている。本実施形態では、1個のカートリッジホルダー255に2個のカートリッジ50Rを着脱可能となっていることから、複数(9個)のカートリッジホルダー255に、合計18個のカートリッジ50Rを装着できる構成となっている。モーター257を駆動してタイミングベルト256を移動させれば、タイミングベルト256に装着された複数(9個)のカートリッジホルダー255をX方向に自在に移動させることができる。本実施形態では、一対のタイミングプーリー254a,254b、タイミングベルト256、モーター257を含む構成が、本発明の搬送部の一例である。
 橋脚部251のY方向における後端上に立脚しX方向に延在するように支持フレーム252が設けられている。支持フレーム252は、途中でY方向の後方側に屈曲してからZ方向に延びた形状となっている。支持フレーム252の屈曲した部分に複数(6つ)の電動プッシャー258が設けられている。電動プッシャー258は、モーター258aと、雄ネジ258bと、雄ネジ258bの支持部258cとを備えている。モーター258aは例えば直動型ステッピングモーターであり、雄ネジ258bに螺合して雄ネジ258bをZ方向に上下動させる。これにより、電動プッシャー258は、カートリッジホルダー255に装着されたカートリッジ50RをZ方向の上方側から下方側に向かって雄ネジ258bにより加圧可能となっている。
 雄ネジ258bのZ方向における上端側を支える支持部258cは、支持フレーム252において、電動プッシャー258ごとに設けられ、Z方向に延びるように形成されたスリット252aの上端に取り付けられている。これにより、雄ネジ258bの回転による軸ブレを支持部258cによって防ぐ構造となっている。
 橋脚部251のY方向における前端上に立脚しX方向に延在する前面フレーム253が設けられている。前面フレーム253のX方向における中央部分に3つのランプ259(259a,259b,259c)が間隔を置いて取り付けられている。ランプ259は例えば、少なくとも2色(例えば緑と赤)の発光が得られるLEDが用いられている。X方向における3つのランプ259の配置は、カートリッジホルダー255に装着されたカートリッジ50Rの配置に対応して設定されている。ランプ259の点灯状態によって、当該ランプ259の前方に位置するカートリッジ50Rにおける試薬Rsの残量の状態を知ることができ、必要に応じてカートリッジ50Rの交換が促される構成となっている。例えば、3つのランプ259のうち中央のランプ259bが、カートリッジ50Rの交換を指示する点灯状態となり、中央のランプ259bの前方に交換対象のカートリッジ50Rが搬送される。これにより、交換対象のカートリッジ50Rを確実に交換することができる。なお、カートリッジ50Rの交換を指示する点灯状態としては、中央のランプ259bが他のランプ259a,259cと異なる色で点灯している状態、あるいは中央のランプ259bが点滅し、他のランプ259a,259cが通常点灯あるいは点灯していない状態などが挙げられる。カートリッジ50Rにおける試薬Rsの残量検出については後述する。
 ここで、図42を参照して、本実施形態の試薬Rsを吐出可能なカートリッジ50Rについて説明する。図42に示すようにカートリッジ50Rは、試薬Rsが充填される第1のケース51と、第1のケース51を収容可能であって、底面にノズル部52aが設けられた筒状の第2のケース52と、第1のケース51の蓋部53とを有している。第2のケース52の側面の収容口に近い側には長方形の開口部52bが設けられている。また、開口部52bが設けられた側面のZ方向における下方側に間隔を置いて2つの開口部52c,52dが設けられている。開口部52bと対向する第1のケース51の側面には、係止部51bが設けられている。
 第1のケース51は、試薬Rsを貯留可能な収容部51aを有している。収容部51aのZ方向における下方側は容積が絞られた狭窄部51cとなっている。狭窄部51cは、狭窄部51cの先端側から試薬Rsが漏れることを防ぐ弁構造となっている。第1のケース51の収容口から試薬Rsを収容部51aに注入して蓋部53により蓋をする。その後に、第2のケース52に第1のケース51を挿入して押し込むと、収容部51aの狭窄部51cと、第2のケース52のノズル部52aに繋がる連通部52eとがZ方向に上下動可能な状態で接続される構成となっている。連通部52eには第1のケース51をZ方向の上方に付勢する付勢手段としてコイルバネ(図示省略)が取り付けられている。さらに、第2のケース52の開口部52bに第1のケース51の係止部51bが係止して、第2のケース52に第1のケース51が装着される。これにより、第2のケース52から第1のケース51を容易に取り外すことが困難な状態となり、外部から水分などがカートリッジ50Rに侵入し難い構造となっている。なお、蓋部53には、収容部51aに連通する連通孔53aが設けられている。
 カートリッジ50Rの蓋部53を押圧して、第2のケース52に対して第1のケース51を押し下げれば、連通部52eを介してノズル部52aから所定量の試薬Rsを吐出することができる構造となっている。連通部52eを満たす試薬Rsの容積によって、1回の押圧でノズル部52aから吐出される試薬Rsの吐出量が決まる構造となっている。
 カートリッジ50Rの試薬Rsが貯留される第1のケース51は、透明あるいは半透明であると共に、耐薬品性を考慮して例えばポリプロピレンやポリエチレンなどからなる。第1のケース51を収容する第2のケース52の側面には、前述したように開口部52c,52dが設けられている。開口部52cは第1のケース51の収容部51aのうち狭窄部51c寄りの部分を臨むことができる位置に設けられている。開口部52dは第1のケース51のうち狭窄部51cを臨むことができる位置に設けられている。
 カートリッジ50Rにおける、開口部52b,52c,52dが設けられた側面と対向する側面にフック55が設けられている。したがって、図41に示すように、カートリッジホルダー255にカートリッジ50Rを挿入すれば、カートリッジ50Rの側面とフック55との間にカートリッジホルダー255の一部が挟まれた状態となり、カートリッジホルダー255にカートリッジ50Rを装着して第2のケース52が動かないように固定することができる。なお、カートリッジホルダー255の底面には、ノズル部52aに対応した位置に開口が設けられている。
 図43に示すように、モーター257を駆動してタイミングベルト256をX方向に移動させれば、カートリッジホルダー255に装着されたカートリッジ50Rを電動プッシャー258と重なる位置に移動させることができる。電動プッシャー258により、上述したようにカートリッジ50Rの蓋部53を押圧して、カートリッジ50Rのノズル部52aから試薬Rsを吐出する。このとき、ステージ部210によりステージ10Rを試薬供給部250に対向する位置まで移動させておけば、ステージ10Rに載置された基板Wの組織標本Tsに予め定められた量の試薬Rsを精度よく滴下可能である。
 また、図43に示すように、試薬供給部250のY方向における後方側であって、X方向における左側にバーコードリーダー262と、複数のセンサーとが並んで設けられている。複数のセンサーは、カートリッジ50Rにおける試薬Rsの残量を検出するための2つの残量検出センサー263(263a,263b)と、カートリッジ50Rの高さを検出する高さ検出センサー268を含んでいる。
 さらに、試薬供給部250のY方向における前方側に基板Wを撮像可能な撮像ユニット260が設けられている。撮像ユニット260は、撮像部としてのCCD261と、一対のタイミングプーリー264a,264bと、タイミングベルト266と、モーター267とを含んで構成されている。
 一対のタイミングプーリー264a,264bは、平面視で試薬供給部250の一対のタイミングプーリー254a,254bと部分的に重なり合うようにY方向に並んで配置されている。一対のタイミングプーリー264a,264bに対してX方向にタイミングベルト266が架け渡されている。X方向に架け渡されたタイミングベルト266のうち前方側にCCD261がZ方向の下方側を撮像可能な状態で取り付けられている。一対のタイミングプーリー264a,264bのうちX方向の左側のタイミングプーリー264bにモーター267が取り付けられている。
 モーター267を駆動すれば、タイミングベルト266に固定されたCCD261をX方向に移動させることができる。つまり、モーター267を駆動制御すれば、前述した複数(6つ)のステージ部210のそれぞれにおいて、ステージ搬送機構により試薬供給部250に移動したステージ10Rに対応した位置にCCD261を自在に配置することができる。そして、CCD261を用いてステージ10Rに載置された基板Wを撮像することにより、基板Wに固定された組織標本Tsの状態や、マーキング領域3に記載された組織標本Tsに係る情報を画像として入手することができる。
 次に、図44を参照して、カートリッジ50Rに係る、バーコードリーダー262及び複数のセンサーの各構成について説明する。
 図44に示すように、試薬供給部250の一対のタイミングプーリー254a,254bを下方側から支持する橋脚部251に対してY方向の後方側に、脚部251bが立設されている。脚部251bの高さは、カートリッジホルダー255と接触しないように設定されている。脚部251bの頭部からY方向の後方側に延びる支持部251cが設けられ、支持部251c上にバーコードリーダー262と、複数のセンサーとが設けられている。複数のセンサーは、支持部251cに設けられZ方向に延びる支持板251dに、上から高さ検出センサー268、残量検出センサー263a、残量検出センサー263bの順に取り付けられている。
 本実施形態では、カートリッジ50Rの第2のケース52の開口部52cと開口部52dとの間の側面に試薬Rsに係るバーコードを示すシールが貼り付けられている。
 モーター257を駆動してカートリッジホルダー255を移動させれば、バーコードリーダー262に対して、カートリッジ50Rを対向させることができる。バーコードリーダー262によりカートリッジ50Rに貼り付けられたバーコードを読み込ませることができる。なお、バーコードリーダー262を用いてバーコードを読み込ませる動作は、試薬供給部250の複数のカートリッジホルダー255にセットされた合計18個のカートリッジ50Rのそれぞれに対して実行される。カートリッジ50Rに付与されるバーコードは、1次元バーコードや2次元バーコードであって、バーコードリーダー262は、これらのバーコードを読み取り可能な機器が選ばれる。
 カートリッジ50Rにおいてバーコードが付与される位置は、第2のケース52の開口部52cと開口部52dとの間の側面に限定されるものではない。バーコードが付与された位置に応じて、カートリッジ50Rとバーコードリーダー262とが対向するようにバーコードリーダー262の位置を設定すればよい。
 また、モーター257を駆動してカートリッジホルダー255を移動させれば、2つの残量検出センサー263a,263bと、高さ検出センサー268とに対して、カートリッジ50Rを対向させることができる。なお、これらの複数のセンサーに対向するカートリッジ50Rは、電動プッシャー258によって試薬Rsの吐出が可能なカートリッジ50Rである(図43参照)。
 2つの残量検出センサー263a,263bのうち、残量検出センサー263aは、カートリッジ50Rの第2のケース52の開口部52cを臨むことが可能な位置において支持板251dに取り付けられている。また、残量検出センサー263bは、カートリッジ50Rの第2のケース52の開口部52dを臨むことが可能な位置において支持板251dに取り付けられている。
 2つの残量検出センサー263a,263bは、それぞれに発光部と受光部とを備え、発光部から発した発光が対象物によって反射した反射光を受光部で受光することで反射光の強度を検出することにより、試薬Rsの有無を光学的に検出するものである。
 前述したように、カートリッジ50Rにおいて試薬Rsが充填される第1のケース51は、透明または半透明な透光性部材を用いて形成されている。したがって、残量検出センサー263aを用いれば、第1のケース51の収容部51aにおける試薬Rsの有無を検出可能である。また、残量検出センサー263bを用いれば、第1のケース51の狭窄部51cにおける試薬Rsの有無を検出可能である。
 残量検出センサー263aが臨むカートリッジ50Rの開口部52cは、狭窄部51cに近い側の収容部51aに対して開口していることから、残量検出センサー263aによって試薬Rsが無いと検出された場合には、収容部51aにおける試薬Rsの量がかなり減少してカートリッジ50Rの交換時期が迫っていることを示すものである。
 残量検出センサー263bが臨むカートリッジ50Rの開口部52dは、狭窄部51cに対して開口していることから、残量検出センサー263bによって試薬Rsが無いと検出された場合には、試薬Rsの量が限界に達してカートリッジ50Rを交換する必要があることを示すものである。このように2つの残量検出センサー263a,263bを用いれば、カートリッジ50Rにおける試薬Rsの残量を精度よく検出して、試薬Rsの残量管理を徹底することが可能である。
 高さ検出センサー268は、カートリッジホルダー255にセットされたカートリッジ50Rの蓋部53の上面を検出可能な位置において支持板251dに取り付けられている。前述したように、カートリッジ50Rは電動プッシャー258によって蓋部53を上方から押圧することにより、ノズル部52aから所定量の試薬Rsを吐出できる構成となっている。カートリッジホルダー255にきちんとカートリッジ50Rがセットされておらず、蓋部53がZ方向において所定の位置よりも上方にあると、電動プッシャー258で蓋部53を1回押圧しても、ノズル部52aから所定量の試薬Rsが精度よく吐出されないおそれがある。また、モーター257を駆動してカートリッジホルダー255を移動させたときに、電動プッシャー258の雄ネジ258bとカートリッジ50Rの蓋部53とが接触するおそれがある。高さ検出センサー268を用いてカートリッジ50Rの蓋部53の位置、すなわち、カートリッジホルダー255にセットされたカートリッジ50Rの高さを検出することで、上述した不具合を防止可能な構成となっている。
 なお、図44に示すように、撮像ユニット260のCCD261は、CCD261をX方向に移動させるモーター267に対してY方向の前方側に配置されている。また、CCD261を取り囲む位置(実際には四隅)に複数(4つ)の照明素子261aが設けられている。照明素子261aは例えばLEDであって、CCD261によって撮像する撮像対象である基板Wを照明するために設けられている。照明素子261aの数は複数(4つ)であることに限定されず、少なくとも1つあればよい。
 <電界撹拌部>
 次に、電界撹拌部270について、図45を参照して説明する。図45は第2実施形態の電界撹拌部の構成を示す概略斜視図である。
 図45に示すように、電界撹拌部270は、上電極20と、支持フレーム271と、一対の脚部272a,272bとを有している。上電極20は一方の辺部が他方の辺部に比べて長い長方形である。支持フレーム271は、長細い上電極20を病理標本作製装置200の第3フレーム204cにおいてX方向に架け渡すためのものである(図30参照)。支持フレーム271は、X方向に間隔を置いて対向配置された一対の脚部272a,272bに固定され、Y方向に間隔を置いて配置されたガイド部271a,271bとを有する。ガイド部271aのほうがガイド部271bよりも長く、ガイド部271a,271bのそれぞれには、上電極20をX方向の右側から挿入可能な溝を有する構造となっている。ガイド部271aの左端には、支持板273がY方向に架け渡され、支持板273上にはマイクロスイッチ275が設けられている。マイクロスイッチ275は、上電極20をガイド部271aに沿って挿入したときに、上電極20のX方向の左端が、所定の位置に配置されたか否かを検出するために設けられている。つまり、板状の上電極20は、支持フレーム271に対して所定の位置に装着可能であると共に抜き差し可能となっている。
 上電極20のZ方向における下方の面には、Y方向に延びる複数の溝21が形成されている。複数の溝21は、X方向に等間隔で形成されている。上述したステージ搬送機構によりステージ10Rを電界撹拌部270に移動させると、ステージ10Rの下電極として機能する載置部11Rと、上電極20とが対向配置される。また、上述したマイクロスイッチ275によって、上電極20のX方向の左端の位置を検出することにより、載置部11Rと溝21とが対向するように上電極20が配置される。このように、ステージ10Rと上電極20とを配置して、一対の電極間に電界を発生させ、ステージ10Rに載置された基板W上の液滴Sを電界撹拌する方法は、上記第1実施形態で述べた方法と同じである。したがって、電界撹拌の詳細な説明は省略する。なお、本実施形態においても、マイクロスイッチ275に上電極20が触れてオン状態とならなければ、ステージ10Rの下電極として機能する載置部11Rと上電極20との間に電界を生じさせない構成となっている。
 <病理標本作製システム>
 次に、第2実施形態の病理標本作製システムについて、図46を参照して説明する。図46は、第2実施形態の病理標本作製システムの電気的、機械的な構成を示すブロック図である。第2実施形態の病理標本作製システムは、上記第1実施形態の病理標本作製システム1000に対して、第2実施形態の病理標本作製装置200を採用し、その特徴を取り入れたものである。したがって、病理標本作製システム1000と同じ構成については同じ符号を付して詳細な説明は省略する。
 図46に示すように、本実施形態の病理標本作製システム2000は、病理標本作製装置200と、例えばデスクトップ型のコンピューター500と、コンピューター500に接続された周辺機器とを備えている。
 病理標本作製装置200は、上述したように、表示部203、ステージ部210、洗浄部230、試薬供給部250、電界撹拌部270、回路部280、高電圧発生部281を有している。また、撮像部としてのCCD261、バーコードリーダー262、及び、カートリッジ50Rの残量検出センサー263(263a,263b)やタンク205~208に係る残量検出センサー265、高さ検出センサー268などの各種センサーを備えている。回路部280は、モータードライバー282、ペルチェコントローラー283、制御部285、DC電源ユニット286、USBハブ287を備えている。高電圧発生部281は、上述したように周期的に変化する電位を発生させて電界撹拌部270の一対の電極11R,20に印加する装置である。
 回路部280のモータードライバー282は、ステージ部210、洗浄部230(流路切り替え機構240を含む)、試薬供給部250、撮像ユニット260のそれぞれに含まれるモーターを駆動制御する回路が実装された回路基板である。ステージ部210のステージ10Rには、ステージ10Rを加熱するための加熱素子としてのペルチェ素子15と、ステージ10Rの温度を検出する温度センサー16とが取り付けられている。ペルチェコントローラー283及び温度センサー16は、例えばI/Oポートを介して制御部285に接続されている。ペルチェコントローラー283は、制御部285からの制御信号に基づいてペルチェ素子15に流れる電流を制御してペルチェ素子15の温度を制御する。なお、本実施形態のペルチェコントローラー283は、ペルチェ素子15の温度の制御に係るマイコンを含んでいるが、当該マイコンは制御部285に含まれる構成としてもよい。
 残量検出センサー263,265などの各種センサーもまた例えばI/Oポートを介して制御部285に接続されている。
 CCD261やバーコードリーダー262は、USBハブ287を介して制御部285に接続されている。CCD261は、前述したようにステージ10Rに載置された基板Wを撮像可能に設けられている。制御部285はCCD261によって撮像された基板Wの画像情報から基板Wに固定された組織標本Tsの情報を入手することが可能となっている。
 バーコードリーダー262は、前述したように試薬供給部250に搭載されたカートリッジ50Rに付与されたバーコードを読み取り可能に設けられている。制御部285はバーコードリーダー262によって読み取られたバーコードからカートリッジ50Rに充填された試薬Rsの情報を入手することが可能となっている。
 回路部280は、少なくともモータードライバー282、ペルチェコントローラー283、制御部285、DC電源ユニット286、USBハブ287を含むものである。DC電源ユニット286は、外部から供給される100Vの交流電源から、回路部280の各部と、高電圧発生部281とで電源として必要とされるDC電圧を発生させて供給するものである。
 さらに、制御部285は、USBハブ287とUSB端子とを介して、コンピューター500に接続されている。コンピューター500は、CPU502、記憶部としてのメモリー503、各種の周辺機器との接続を図る端子類(HDMI、LAN、USB)を備えた本体501を有している。USB端子には、コンピューター500への入力操作に係るマウス504やキーボード505を接続可能である。また、他のUSB端子には、病理標本作製装置200に備わるバーコードリーダー262とは別のバーコードリーダー506やラベルプリンター507を接続可能である。HDMI端子には、モニター508が接続可能である。本実施形態では、病理標本作製装置200側にT/K付きの表示部203を備えていることから、表示部203に表示された病理標本作製プロトコルに係る情報を確認しつつ、病理標本作製装置200の操作はもちろんのこと、コンピューター500とのやり取りも可能となっている。モニター508は、コンピューター500から送出される各種の情報を表示することができる。LAN端子には、例えば病理部門の情報管理に係るネットワークが接続される。
 バーコードリーダー506は、上記第1実施形態で説明したように、主に試薬Rsが収容された瓶などの試薬容器に付与されたバーコードを読み取るために用いられる。コンピューター500は、読み取られたバーコードから試薬Rsの情報を入手して、試薬Rsが充填されるカートリッジ50Rに貼り付けるバーコードラベルをラベルプリンター507で印刷することが可能となっている。
 コンピューター500のメモリー503には、上述した病理標本の作製方法に係る各種の病理標本作製プロトコルが格納される。病理標本作製プロトコルが格納されるメモリー503は、ROMやRAM、HDDなどの内部記憶装置や、USB端子に接続されて用いられる外部記憶装置であってもよい。
 作業者は、表示部203を介してコンピューター500に格納された病理標本作製プロトコルを指定し、表示部203を介してコンピューター500により病理標本作製装置200を駆動制御して、病理標本を作製することができる。また、実際に試薬供給部250に装着されたカートリッジ50Rのバーコードをバーコードリーダー262で読み込むことで、コンピューター500は、カートリッジ50Rに充填された試薬Rsの情報と、指定された病理標本作製プロトコルにおける試薬Rsの情報との照合を実行することができる。これによって、病理標本の作製に用いられる試薬Rsが正しく適用されているか否かの管理を徹底できる。
 また、コンピューター500は、CCD261によって撮像された基板Wの画像を入手して、当該画像と指定された病理標本作製プロトコルとを関連付ける操作を実行することができる。これによって、指定された病理標本作製プロトコルによって作製された病理標本のトレーサビリティーを確立することができる。すなわち、作業者による目視確認に比べて、病理標本のトレーサビリティーを向上させることができる。
 また、コンピューター500は、各カートリッジ50Rに収容された試薬Rsの残量に係る情報を残量検出センサー263によって入手することができる。したがって、病理標本作製プロトコルから得られる試薬Rsの使用量と、実際の使用量との間に差が生じたとしても、適正且つ精度よく試薬Rs、つまりカートリッジ50Rの交換などの管理を行うことができる。
 また、コンピューター500は、各タンク205~208に貯留された溶液(純水を含む洗浄液Csやその廃液)の量に係る情報を残量検出センサー265によって入手することができる。したがって、病理標本作製プロトコルから得られる純水を含む洗浄液Csの使用量と、実際の使用量との間に差が生じたとしても、適正且つ精度よく洗浄液Csの管理を行うことができる。また、各タンク205~208に貯留された廃液の量を適正且つ精度よく管理することができる。
 また、コンピューター500と病理部門のネットワークとを接続することで、病理標本作製に係る一連の情報を共有して管理することができる。なお、病理標本作製システム2000の構成は、これに限定されず、例えば組織や細胞の染色状態を画像解析する装置など病理診断に用いられる他の装置を含んでいてもよい。また、停電に対応可能な無停電電源装置(Uninterruptible Power Supply;UPS)を備えることが好ましい。
 <凍結切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)の実施例4>
 次に、第2実施形態の病理標本作製システム2000を用いた、病理標本作製の実施例4について、図47を参照して説明する。実施例4は、上記第1実施形態にて説明した実施例1と同じく、凍結切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)の例である。図47は実施例4の免疫組織化学染色による病理標本の作製工程を示す表である。
 図47に示すように、実施例4のIHCによる病理標本の作製工程は、薄切された組織標本Tsを基板Wに固定する第1工程、固定された組織標本Tsを洗浄する第2工程、組織標本Tsの内因性PO(Peroxidase)を除去する第3工程、内因性POが除去された組織標本Tsを洗浄する第4工程、一次抗体反応を行う第5工程、一次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第6工程、二次抗体反応を行う第7工程、二次抗体反応処理が施された組織標本Tsを洗浄する第8工程、洗浄された組織標本Tsを発色させる第9工程、発色させた組織標本Tsを洗浄する第10工程、洗浄された組織標本Tsを核染する第11工程、核染された組織標本Tsを洗浄する第12工程、洗浄された組織標本Tsを封入する第13工程、封入された組織標本Tsを画像解析して染色の濃さを数値化する第14工程、を有している。これらの工程は、病理標本作製システム2000を用いることを前提とした病理標本作製プロトコルとしてコンピューター500のメモリー503に格納される。コンピューター500は、第2工程~第12工程の各工程において病理標本作製プロトコルに基づいた制御信号を病理標本作製装置200の制御部285に送出し、制御部285が病理標本作製装置200を駆動制御して第2工程~第12工程の処理を行う。
 また、第2実施形態の病理標本作製装置200は、カートリッジ50Rの試薬Rsの残量を検出することができる残量検出センサー263と、タンク205~208における溶液(純水、洗浄液、廃液)の残量検出センサー265とを備えている。病理標本作製システム2000は、病理標本作製を開始する前に、残量検出センサー263を用いて各カートリッジ50Rの試薬Rsの残量を確認する処理を実行する。また、残量検出センサー265を用いて、タンク205~208における溶液の残量を確認する処理を実行する。そして、病理標本作製プロトコルを参照して、これから行う病理標本作製に必要な試薬Rsや洗浄液(純水を含む)が確保されているか判定する。問題が無ければ、作業者に準備が整っていることを通知する。通知は表示部203に表示される。作業者は通知を確認して、病理標本作製をスタートさせる。表示部203には、病理標本作製をスタートさせるスタートボタンが表示され、作業者は表示されたスタートボタンに触れることで病理標本作製をスタートさせる。
 一方で、試薬Rsや洗浄液(純水を含む)が不足するおそれがあると判断した場合には、残量検出センサー263によって得られた検出結果を表示部203に表示すると共に、不足している試薬Rsを含むカートリッジ50Rの交換や、不足している洗浄液(純水を含む)の補充を促す警告を表示部203に表示する。
 また、残量検出センサー265により、これから行われる病理標本作製によって廃液が貯留されるタンク207,208が満杯となるおそれがある場合、タンク207,208に貯留された廃液の状態を表示部203に表示すると共に、廃液の排出を促す警告を表示部203に表示する。作業者は、これらの警告に対応した処置を行った後に、警告を解除して、病理標本作製をスタートさせる。
 このような残量検出センサー263,265を用いた処理を行うことで、病理標本作製中に試薬Rsや洗浄液が不足したり、廃液が貯留されるタンク207~208が満杯になって、病理標本作製が途中で停止することを防止することができる。
 なお、このような残量検出センサー263,265を用いた処理は、病理標本作製を開始する前に実行することに限定されず、病理標本作製が終了した後に行うようにしてもよい。さらに、残量検出センサー263,265を用いた処理は、手動で行ってもよいし、病理標本作製プロトコルに組み込まれていてもよい。そして、第1工程に進む。
 実施例4の第1工程では、組織標本Tsとしてブタ肝臓ブロックを薄切りした凍結切片を基板1の撥水リング2の内側に配置した後に、基板1をアセトンに2分間浸漬する。これにより、凍結切片は、基板1に貼り付いて固定される。つまり、組織標本Tsが固定された基板Wが得られる。そして、第2工程へ進む。
 実施例4の第2工程では、病理標本作製装置200のステージ10Rに基板Wを載置する。制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを原点から一旦洗浄部230を過ぎた後に再び洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、制御部285がポンプP1と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル231からタンク205に貯留された洗浄液Csを吐出して30秒間垂れ流す。洗浄液CsとしてPBS-T(ブロッキング作用がある非イオン系界面活性剤であるTween20を含むPBS)を用いる。洗浄部230では、ステージ傾斜機構によりステージ10Rが傾斜した状態で基板WにPBS-Tが供給され洗浄が行われる。そして、制御部285がバルブ235を開いてノズル234から基板Wにエアーを1秒間吹き付ける。これにより、洗浄に用いられたPBS-Tは傾斜した基板Wから液体排出ガイド部226を経由し、流路切り替え機構240により導かれてタンク207に排出され貯留される。そして、第3工程へ進む。
 実施例4の第3工程では、制御部285がステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から試薬供給部250に搬送する。試薬供給部250では、病理標本作製プロトコルに基づいて内因性POを除去する試薬(3容量%過酸化水素水)が選択される。制御部285は試薬供給部250(モーター257)を駆動制御して試薬(3容量%過酸化水素水)が充填されたカートリッジ50Rを基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部285は電動プッシャー258を駆動制御して、カートリッジ50Rから試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(3容量%過酸化水素水)の滴下量は、撥水リング2の大きさにもよるが、例えば150μL(マイクロリットル)である。所定量の試薬(3容量%過酸化水素水)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsから内因性POを除去する(内因性POをブロッキングする)。そして、第4工程へ進む。
 実施例4の第4工程では、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御して、ステージ10Rを試薬供給部250から洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、第2工程と同様にして、PBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第5工程へ進む。
 実施例4の第5工程では、制御部285がステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から試薬供給部250に搬送する。試薬供給部250では、病理標本作製プロトコルに基づいて一次抗体試薬(肝細胞中に含まれるタンパク質に結合するHep-par1)が選択される。制御部285は試薬供給部250(モーター257)を駆動制御して一次抗体試薬が充填されたカートリッジ50Rを基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部285は電動プッシャー258を駆動制御して、カートリッジ50Rから例えば150μLの一次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを試薬供給部250から電界撹拌部270に搬送する。電界撹拌部270では、制御部285は一対の電極11R,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された一次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第6工程へ進む。
 実施例4の第6工程では、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御して、ステージ10Rを電界撹拌部270から洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第7工程へ進む。
 実施例4の第7工程では、制御部285がステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から試薬供給部250に搬送する。試薬供給部250では、病理標本作製プロトコルに基づいて二次抗体試薬(デキストランポリマーとペルオキシダーゼを用いる増感法試薬であるEnvision+Dual Link:ダコ社製)が選択される。制御部285は試薬供給部250(モーター257)を駆動制御して二次抗体試薬が充填されたカートリッジ50Rを基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部285は電動プッシャー258を駆動制御して、カートリッジ50Rから例えば150μLの二次抗体試薬を基板Wに滴下する。その後、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを試薬供給部250から電界撹拌部270に搬送する。電界撹拌部270では、制御部285は一対の電極11R,20間に電界を発生させて、基板Wに供給された二次抗体試薬の溶液Sを撹拌する。電界撹拌に要する時間は5分である。そして、第8工程へ進む。
 実施例4の第8工程では、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御して、ステージ10Rを電界撹拌部270から洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、第2工程と同様にしてPBS-Tを用いた洗浄を行う。そして、第9工程へ進む。
 実施例4の第9工程では、制御部285がステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から試薬供給部250に搬送する。試薬供給部250では、病理標本作製プロトコルに基づいて発色を行わせる試薬(3,3’-Diaminobenzidine;DAB)が選択される。制御部285は試薬供給部250(モーター257)を駆動制御して試薬(DAB)が充填されたカートリッジ50Rを基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部285は電動プッシャー258を駆動制御して、カートリッジ50Rから試薬(DAB)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(DAB)の滴下量は例えば150μLである。所定量の試薬(DAB)を基板Wに供給した後に、その場で3分間静置して組織標本Tsと試薬(DAB)とを反応させて発色させる。そして、第10工程へ進む。
 実施例4の第10工程では、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを試薬供給部250から洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、制御部285がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル231からタンク206に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部230では、制御部285がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10Rが傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。そして、制御部285は、バルブ235を開いてノズル234からエアーを基板Wに1秒間吹き付ける。これにより供給された純水は、液体排出ガイド部226に排出される。洗浄に用いられた純水には発癌性物質を含む試薬(DAB)が含まれることから、純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部226を経由し、流路切り替え機構240により導かれてタンク208に排出され貯留される。そして、第11工程へ進む。
 実施例4の第11工程では、制御部285がステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から試薬供給部250に搬送する。試薬供給部250では、病理標本作製プロトコルに基づいて核染(対比染色)を行わせる試薬(ヘマトキシリン)が選択される。制御部285は試薬供給部250(モーター257)を駆動制御して試薬(ヘマトキシリン)が充填されたカートリッジ50Rを基板Wと対向するように搬送する。そして、制御部285は電動プッシャー258を駆動制御して、カートリッジ50Rから試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに滴下する。この場合の試薬(ヘマトキシリン)の滴下量は例えば150μLである。所定量の試薬(ヘマトキシリン)を基板Wに供給した後に、その場で1分間静置して組織標本Tsと試薬(ヘマトキシリン)とを反応させて核染(対比染色)を行う。そして、第12工程へ進む。
 実施例4の第12工程では、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを試薬供給部250から洗浄部230に搬送する。洗浄部230では、制御部285がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル231からタンク206に貯留された純水を吐出して2分間垂れ流す。洗浄部230では、制御部185がステージ傾斜機構を駆動制御してステージ10Rが傾斜した状態で基板Wに純水が供給され洗浄が行われる。そして、制御部285は、バルブ235を開いてノズル234からエアーを基板Wに1秒間吹き付ける。これにより試薬(ヘマトキシリン)を含む純水は傾斜した基板Wから液体排出ガイド部226を経由し、流路切り替え機構240により導かれてタンク207に排出され貯留される。そして、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御してステージ10Rを洗浄部230から原点に搬送する。そして、第13工程へ進む。
 実施例4の第13工程では、ステージ10Rから基板Wを取り出して、洗浄が施された組織標本Tsの乾燥を防ぐため、非水溶性の封入剤を基板Wに滴下して、カバーガラスを被せる封入処理を行う。第13工程の所要時間はおよそ1分である。そして、第14工程へ進む。
 実施例4の第14工程では、撮像部を有する画像解析装置を用いて、封入処理された組織標本Tsを撮像して画像解析を行い、染色の濃さを数値化する。第14工程の所要時間はおよそ1分である。なお、陽性所見の組織標本Tsと、陰性所見の組織標本Tsとを用意してそれぞれ画像解析による染色の濃さの数値化を行って比較することにより病理診断が行われる。
 以上の工程を経ることにより、実施例4のIHCによる病理標本の作製が終了する。実施例4の病理標本の作製に要した時間は約25分であった。
 本実施形態の病理標本作製では、病理標本作製装置200を用いて第2工程から第12工程まで自動で処理を行うことができる。したがって、作業者はこの間に病理標本作製装置200を監視する必要がないことから、病理標本作製中に他の作業を実施することが可能である。しかしながら、第12工程から病理標本作製装置200を用いない第13工程に移行するまでの間に時間が経過すると、ステージ10Rに載置された基板Wにおいて核染処理が終了した組織標本Tsが乾燥するおそれがある。そこで、本実施形態の病理標本作製システム2000では、第12工程が終了してからの時間を計測し、所定の時間を過ぎても第13工程に進まない場合は、制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御して、ステージ10Rを洗浄部230に搬送する。そして、洗浄部230では、制御部285がポンプP2と関連するバルブとを駆動制御し、ノズル231からタンク206に貯留された純水を例えば10mL(ミリリットル)吐出して垂れ流す。制御部285はステージ搬送機構(モーター215)を駆動制御して、ステージ10Rを原点に搬送する。このような組織標本Tsの乾燥を防止する処理は、第13工程に移行するまでの間に、放置された時間に対応して繰り返し行われる。乾燥防止のために純水が滴下された場合、上記の第13工程では、基板Wを例えばエタノールに浸漬して純水をエタノールで置換する。その後、エタノールをキシレンで置換した後に、非水溶性の封入剤を基板Wに滴下して、カバーガラスを被せる。非水溶性の封入剤は、キシレンに馴染み易い。言い換えれば、第12工程が終了した後の乾燥防止のためノズル231から滴下する洗浄液Csはエタノールで容易に置換が可能な純水であることが好ましい。
 このように、組織標本Tsの乾燥防止にも用いられる洗浄液Csとしての純水は、例えば半導体装置の製造に用いられる超純水とは異なり、オートクレーブなどで滅菌処理された蒸留水が好適に用いられる。
 病理標本作製システム2000を用いた病理標本作製は、上述した実施例4の凍結切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)に限定されるものではない。上記第1実施形態に示した実施例2のパラフィン包埋切片を用いた免疫組織化学染色(IHC)や、同じく実施例3に示したIn situ ハイブリダイゼーション(ISH)においても適用することができる。すなわち、カートリッジ50Rにおける試薬Rsの残量やタンク205~208における溶液の量を予め確認してから、病理標本作製を開始する。また、PBS-Tや純水を用いた洗浄工程において、傾斜した基板Wにガス(エアー)を吹き付けて吐出された洗浄液Cs(試薬Rsを含む場合もある)を確実に排出する。
 上記第2実施形態の病理標本作製装置200とこれを備えた病理標本作製システム2000によれば、上記第1実施形態の効果(1)、(2)、(6)~(8)と同様な効果に加えて、以下の効果が得られる。
 (9)本実施形態のステージ傾斜機構は、ステージ搬送機構によりステージ10RがY方向において原点に向かって洗浄部230に搬送される動きに伴って、第1ステージ支持部221に軸支されたレバー222が平板214の上に乗り上げて反時計回りに回転し、レバー222の第2アーム222bの先端部222dが、ステージ10Rの台座12Rを押し上げる。これにより、第2ステージ支持部222に軸支されたステージ10Rが液体排出ガイド部226側に傾斜する。したがって、ステージ10Rを傾斜させるための専用のモーターなどの駆動系を必要としないので、簡素な装置構成とすることができる。
 (10)ステージ傾斜機構によりステージ10Rは、載置部11Rが水平な状態から45度~60度の範囲で傾斜する。基板Wに供給された洗浄液Csあるいは試薬Rsを含む洗浄液Csは、液体排出ガイド部226に流れ込む。また、傾斜したステージ10Rに対してノズル234からエアーが吹き付けられるので、基板W上に供給されたから洗浄液Csを余すことなく排出できる。言い換えれば、洗浄液Csあるいは試薬Rsを含む洗浄液Csが基板Wに残存することで、病理標本作製における各種の処理に影響を及ぼすことを低減あるいは防止して、適正に病理標本を作製することができる。
 (11)ステージ10Rの台座12RにおいてX方向の外側に張り出した傾斜部12fを設け、ステージ傾斜機構によりステージ10Rを傾斜させたときに、傾斜部12fが液体排出ガイド部226のガイド部226bの内側に位置する構成とした。これにより、載置部11Rから洗浄液Csが台座12R側に伝わったとしても、洗浄液Csを確実に液体排出ガイド部226に流し込むことができる。すなわち、洗浄液Csがステージ10Rから液体排出ガイド部226以外の場所に漏れて、機械的あるいは電気的な不具合が発生することを防止することができる。
 (12)病理標本作製装置200は、カートリッジ50Rの試薬Rsの残量を検出する残量検出センサー263と、各タンク205~208に貯留された溶液の残量を検出する残量検出センサー265とを備えている。したがって、カートリッジ50Rに収容された試薬Rsや各タンク205~208に貯留された溶液について適正且つ精度よく管理することが可能な病理標本作製装置200を提供できる。この病理標本作製装置200を備えた病理標本作製システム2000は、少なくとも病理標本作製を開始する前に、各カートリッジ50Rの試薬Rsの残量に係る情報と、各タンク205~208に貯留された溶液の残量に係る情報とを入手可能である。ゆえに、病理標本作製の途中で試薬Rsが不足したり、純水を含む洗浄液Csが不足したりして作製が中断することを防止することができる。同様に、廃液が貯留されるタンク207,208が満杯となって病理標本作製が中断することを防止できる。言い換えれば、病理標本作製が途中で中断することなく、安心して病理標本作製を行うことができる病理標本作製システム2000を提供できる。
 (13)上記第1実施形態では、撮像部としてのCCD161がカートリッジホルダー155を搬送するタイミングベルト156に取り付けられていた。これに対して、第2実施形態の撮像ユニット260の撮像部としてのCCD261は、タイミングベルト266に固定されカートリッジホルダー255とは別に独立してX方向に自在に移動可能なっている。言い換えれば、カートリッジ50Rの搬送に影響されずに、CCD261を所定の場所に搬送して基板Wを撮像できることから、撮像に係る作業や装置の負荷を軽減できる。
 (14)病理標本作製システム2000は、核染処理後の基板Wが所定の時間放置された場合、再び基板Wが載置されたステージ10Rを洗浄部230に搬送して、ノズル231から純水を基板Wに吐出する。したがって、核染処理を行う第12工程で基板Wの放置に伴う組織標本Tsの乾燥を防ぐことができる。言い換えれば、核染処理後の組織標本Tsの乾燥を防ぐことができるので、作業者は常に病理標本作製装置200を監視する必要はなく、第2工程から第12工程を実施する間、他の作業を行うことができる。
 本発明は、上記した実施形態に限られるものではなく、請求の範囲および明細書全体から読み取れる発明の要旨あるいは思想に反しない範囲で適宜変更可能であり、そのような変更を伴う病理標本作製装置及び病理標本作製システムもまた本発明の技術的範囲に含まれるものである。上記実施形態以外にも様々な変形例が考えられる。以下、変形例を挙げて説明する。
 (変形例1)病理標本作製に用いる基板1の構成は、図1に示した基板1上に撥水リング2を備えることに限定されない。以下、図48~図50を参照して基板1の変形例について説明する。図48~図50は変形例の基板の構成を示す概略平面図である。例えば、図48に示すように、基板1上に2つの撥水シール2a,2bが貼り付けられた構成としてもよい。2つの撥水シール2a,2bはそれぞれ円形の開口部を有する。また、2つの撥水シール2a,2bは、基板1の幅に比べて幅が狭い接続部2cによって接続されている。言い換えれば、接続部2cによって互いに接続された複数の撥水シールから必要な数の撥水シールを接続部2cで切り離して基板1に貼り付ける。各撥水シールは、基板1の幅と同じ幅で形成されているので、基板1に滴下された試薬Rsや洗浄液Csを基板1を傾けることで容易に排出することができる。
 また例えば、図49に示すように、基板1上の四角い所定の領域を囲むように撥水シール2dを構成してもよい。これによれば、組織標本Tsが配置される領域を撥水リング2に比べて広く確保できる。言い換えれば、組織標本Tsの大きさに合わせた撥水リング2を用意しなくても病理標本の作製を行える。
 また例えば、図50に示すように、図49の撥水シール2dに対して、ステージ10を傾斜させる側の一方の長辺部を無くした撥水シール2eとしてもよい。これによれば、ステージ10によって基板1を傾斜させることにより、基板1に滴下された試薬Rsや洗浄液Csを容易に排出することができる。
 (変形例2)上記第2実施形態の病理標本作製装置200において、組織標本Tsが固定された基板Wが載置されるステージ10Rの形状は、これに限定されない。図51は変形例のステージを示す概略斜視図である。図51に示すように、変形例のステージ10RBは、上述したステージ10Rに対して、切欠き部の形態を異ならせたものである。具体的には、ステージ10RBは、基板Wが載置される載置部11RBと、載置部11RBを下方から支持する台座12RBとを有している。載置部11RBは、X方向及びY方向において所定の位置に基板Wを載置するためのガイド部11a、ガイド部11b、ガイド部11e、ガイド部11fを有している。ガイド部11aは載置部11RBのX方向の右辺側と、Y方向の後端側とに設けられている。ガイド部11bは載置部11RBの前方左隅に設けられ、ガイド部11fは載置部11RBの前方右隅に設けられている。載置部11RBのX方向の左辺側には傾斜部11dが設けられている。また、ガイド部11aと一体的に形成され傾斜部11dに沿って延在するガイド部11eが設けられている。載置部11RBは前方側においてガイド部11bとガイド部11fとの間が切り欠かれた切欠き部11hを有し、台座12RBもまた、ガイド部11b及びガイド部11fと重なる前方側が切り欠かれた切欠き部12hを有している。これらの切欠き部11h,12hは、基板Wの端を例えばピンセットなどで把持して載置部11RBに対してセット・リセットする際に、作業者がピンセットを左手で把持しても、右手で把持してもピンセットが台座12RBにぶつからないように切り欠かれている。つまり、ステージ10RBに対する基板Wのセット・リセットを容易に行える構成となっている。なお、ステージ10RBの他の部分の構成は、上述したステージ10Rと同じである。
 (変形例3)上記実施例1~実施例4の発色工程において、用いられるDABは1種類であることに限定されない。例えば、発色用バッファー試薬(DAB1)と濃縮された発色用試薬(DAB2)とを用いてもよい。DAB1とDAB2の割合は適宜に設定される。
 (変形例4)上記実施例3のISHにおける病理標本作製において、第1工程(脱パラフィン)~第4工程(洗浄)まで病理標本作製装置100を用いなかったが、試薬供給部150において、カートリッジ50から滴下される試薬Rsの滴下量をより精密に調整可能であれば、第1工程(脱パラフィン)~第4工程(洗浄)もまた病理標本作製装置100または病理標本作製装置200を用いて処理が可能である。
 10,10R…ステージ、20…一方の電極としての上電極、21…溝、50,50R…カートリッジ、100,200…病理標本作製装置、106,107,205,206…洗浄液タンクとしてのタンク、108,109,207,208…廃液タンクとしてのタンク、110,210…ステージ部、121…支持棒、125…カム、130,230…洗浄部、131,231…洗浄液を吐出するノズル、234…ガスを吹き付けるノズル、140,240…流路切り替え機構、141…第1排出流路、142…第2排出流路、150,250…試薬供給部、155,255…保持部としてのカートリッジホルダー、161,261…撮像部としてのCCD、162,262…バーコードリーダー、170,270…電界撹拌部、185,285…制御部、203…表示部、500…コンピューター、503…記憶部としてのメモリー、Cs…洗浄液、Rs…試薬、Ts…組織標本、W…組織標本が固定された基板。

Claims (20)

  1.  組織標本が固定された基板が載置されるステージを含むステージ部と、
     前記ステージに載置された前記基板に対して試薬を供給可能な試薬供給部と、
     前記ステージに載置された前記基板に対して洗浄液を供給可能な洗浄部と、
     前記ステージに載置された前記基板に供給された前記試薬または前記洗浄液に電界を印加して撹拌可能な電界撹拌部と、
     制御部と、
     前記洗浄部と、前記試薬供給部と、前記電界撹拌部とが、第1の方向に順に配置され、
     前記第1の方向に前記ステージを移動させるステージ搬送機構と、
     前記ステージが前記洗浄部に位置するときに、前記ステージを前記第1の方向と交差する第2の方向に傾斜させるステージ傾斜機構と、を備え、
     前記制御部は、病理標本作製プロトコルに基づいて、前記ステージ搬送機構を駆動制御して、前記基板が載置された前記ステージを前記第1の方向に移動させる、病理標本作製装置。
  2.  前記ステージ傾斜機構は、前記ステージを水平な状態から前記第2の方向に60度以上傾斜させる、請求項1に記載の病理標本作製装置。
  3.  前記ステージ傾斜機構は、前記ステージの前記洗浄部への移動に伴って、前記ステージを下方から押し上げて傾ける支持機構を有する、請求項2に記載の病理標本作製装置。
  4.  前記ステージ部は、前記ステージと、前記ステージ搬送機構と、前記ステージ傾斜機構とを含む、請求項1乃至3のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  5.  前記第2の方向に、複数の前記ステージ部が並列して配置され、
     前記試薬供給部は、複数の前記ステージ部ごとの前記ステージに載置された前記基板に対して前記試薬を供給可能であり、
     前記洗浄部は、複数の前記ステージ部ごとの前記ステージに載置された前記基板に対して前記洗浄液を供給可能であり、
     前記電界撹拌部は、前記第2の方向に複数の前記ステージ部に跨って設けられ、前記ステージに載置された前記基板に供給された前記試薬または前記洗浄液に電界を印加可能な一方の電極を備える、請求項1乃至4のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  6.  前記試薬は、前記試薬を吐出可能なカートリッジに充填され、
     前記試薬供給部は、前記カートリッジを脱着可能な複数の保持部と、前記複数の保持部を前記第2の方向に搬送可能な搬送部と、を備え、
     前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記搬送部を駆動制御し、前記ステージに対向する位置に、前記複数の保持部のうちの少なくとも1つを移動させる、請求項1乃至5のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  7.  前記カートリッジに付与されたバーコードを読み取り可能なバーコードリーダーを備えた、請求項6に記載の病理標本作製装置。
  8.  前記カートリッジは、前記試薬を収容可能な透光性の収容部を有し、
     前記収容部における前記試薬の有無を光学的に検出可能な残量検出センサーを備えた、請求項6または7に記載の病理標本作製装置。
  9.  前記洗浄部は、ノズルと、複数の洗浄液タンクと、前記複数の洗浄液タンクに前記ノズルの接続先を切り替え可能なバルブと、を備え、
     前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記バルブを駆動制御し、前記複数の洗浄液タンクのうちの1つに前記ノズルを接続させる、請求項1乃至8のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  10.  前記複数の洗浄液タンクのうちの1つに前記洗浄液として純水が充填される、請求項9に記載の病理標本作製装置。
  11.  前記洗浄部は、ガス供給手段にバルブを介して接続されたノズルを備え、
     前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記ステージが前記洗浄部に位置するときに、前記ステージに載置された前記基板に前記ノズルからガスを吹き付けるように前記バルブの開閉を制御する、請求項1乃至10のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  12.  廃液タンクと、
     前記ステージが前記洗浄部に位置しているときに、傾斜した前記ステージ上の前記基板から流れ落ちる前記試薬または前記洗浄液を前記廃液タンクに向けて排出する排出流路と、をさらに備えた請求項1乃至11のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  13.  前記廃液タンクは、第1廃液タンクと、第2廃液タンクとを含み、
     前記排出流路は、前記第1廃液タンクに向かう第1排出流路と、前記第2廃液タンクに向かう第2排出流路とを含み、
     傾斜した前記ステージ上の前記基板から流れ落ちる前記試薬または前記洗浄液を、前記第1排出流路または前記第2排出流路に流すことが可能な流路切り替え機構をさらに備え、
     前記制御部は、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記試薬または前記洗浄液の種類によって、前記流路切り替え機構を制御して、前記試薬または前記洗浄液の排出先を前記第1排出流路または前記第2排出流路に切り替える、請求項12に記載の病理標本作製装置。
  14.  前記ステージに載置された前記基板を撮像可能な撮像部をさらに備えた、請求項1乃至13のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  15.  前記病理標本作成プロトコルに係る情報を表示可能であって、前記病理標本作成プロトコルの操作に係る入力手段を有する表示部を備えた、請求項1乃至14のいずれか一項に記載の病理標本作製装置。
  16.  請求項1乃至15のいずれか一項に記載の病理標本作製装置と、
     病理標本作製プロトコルが格納される記憶部を有するコンピューターと、を備え、
     前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記コンピューターが前記病理標本作製装置を駆動制御する、病理標本作製システム。
  17.  試薬は、前記試薬を吐出可能であって、バーコードが付与されたカートリッジに充填され、
     前記コンピューターは、前記カートリッジのバーコードに関連付けられた前記試薬の情報を入手して、前記病理標本作製プロトコルに基づく試薬の情報との照合を実行する、請求項16に記載の病理標本作製システム。
  18.  試薬は、前記試薬を収容可能な透光性の収容部を有するカートリッジから吐出され、
     前記病理標本作製装置は、前記収容部の前記試薬の有無を光学的に検出可能な残量検出センサーを含み、
     前記コンピューターは、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、少なくとも病理標本の作製を開始する前に、前記残量検出センサーにより前記試薬の残量を検出する、請求項16または17に記載の病理標本作製システム。
  19.  前記コンピューターは、前記病理標本作製プロトコルに基づいて、前記基板に固定された前記組織標本を発色させ洗浄した後の放置時間が所定の時間に到達したとき、前記基板を前記洗浄部に搬送して、前記洗浄部から前記基板に前記洗浄液として純水を供給させる、請求項16乃至18のいずれか一項に記載の病理標本作製システム。
  20.  前記コンピューターは、基板及び前記基板に固定された組織標本の画像を入手し、
     入手した前記画像と、前記病理標本作製プロトコルとを関連付ける操作を実行する、請求項16乃至19のいずれか一項に記載の病理標本作製システム。
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