JP2015130894A - 環境試料採取物品及び方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、表面から試料を回収するための物品、この試料の微生物分析のための物品、及びこの物品を使用する方法に関する。この物品は、試料回収具と、所望によるバリア層を有する試料ハウジングと、微生物を増殖させ検出するために親水性の作用剤を含む試料準備の整った試薬ストリップと、を含む。
【選択図】なし
Description
本出願は、米国特許出願第60/989,356号(2007年11月20日出願)の利益を請求するものであり、この開示内容全体が本明細書に参照により組み込まれている。
図1は、環境表面又は患者表面を試料採取するための比較的平滑な基材112を有する試料回収具110の1つの実施形態を示す。基材112は、上方主表面114及び下方主表面116を有する。基材112の主表面の少なくとも1つは、水不透過性であり、並びに/又は、水不透過性コーティングを含んでもよい。いくつかの実施形態では、試料回収具110は、比較的可撓性であり、不均一表面にぴったり一致し、そのまま接触を維持することができる。試料回収具110の主表面の少なくとも1つは、試料領域と接触させられると、試料領域から試料回収具110への、液体、固体、準固体、又はこれらの組み合わせなどの物質の移動をもたらす。試料回収具110は、分析されるべき食品接触表面又は表在性創傷などの試料領域から物質を回収するために、使用されてもよい。
試料ハウジングを、その中に試料回収具を試料回収具上に位置する試料物質と共に配置することができ、所望によりある期間にわたって保存することができる物品である。試料ハウジングは更に、中に溶液及び/又は試薬を加えて微生物の増殖、検出又は計数を促進し得る物品として使用してもよい。ある実施形態では、試料ハウジングは、中で試料が試薬ストリップ及び/又は試薬と共にインキュベートされて微生物の増殖、検出又は計数を促進する物品として使用されてもよい。
図5は、本発明による試薬ストリップ580の1つの実施形態を示す。試薬ストリップ580は、上方及び下方主表面を有する基材582を含む。この実施形態では、基材582の両方の主表面の少なくとも一部は、所望による接着剤584及び親水性作用剤586でコーティングされる。いくつかの実施形態では、表面582の1つの主表面の少なくとも一部は、所望による接着剤584及び/又は親水性の作用剤586でコーティングされる。いくつかの実施形態では、試薬ストリップ580は、所望によるタブ588を含む。タブは、所望による穿孔589を含んでもよく、これはタブ588が試薬ストリップ580から分離されるようにする。
本発明は、表面試料中の微生物を検出及び/又は計数するために使用される物品を含む。上記試料ハウジングを含むこのような物品は、上記要素(例えば、カバーシート、試料回収具、バリア層、底部材)の様々な組み合わせを含む。
本発明の1つの態様は、非常に様々な表面上に存在する生物を検出するのに使用してもよいものである。本発明の器具及び方法は、種々の用途のために使用してもよく、食品表面(例えば、牛屠殺体、農産物外表面)、食品加工表面、水又は水膜表面、患者表面、患者処理表面、病院環境表面、診療所環境表面及び法医学的環境表面が挙げられるが、これらに限定されない表面上に存在する生物を試験するために望ましい。試料は、固体、半固体、ゼラチン状又は液体の材料から、単独又は種々の組み合わせで、実質的になる。本発明の器具及びシステム、並びに本発明の方法は、対象の1つ以上の微生物の存在を質的又は量的に判定するために、使用され得る。
本発明の試料ハウジング及び/又は物品は、梱包材料と組み合わせて、表面上の微生物を試料採取及び検出するためのキットとして販売することができる。例えば、キットは、一緒に梱包された2つ以上の構成要素(例えば、底部材、スペーサ、バリア層、カバーシート及び/又は試薬ストリップ、上記のような構成要素)を含んでもよい。いくつかの実施形態では、2つ以上の構成要素(例えば、底部材、バリア層及びカバーシート)は、例示された実施形態で示されるように、互いに取り付けられて、好ましくは蝶番領域を形成して、提供されてもよい。これらの実施形態では、特定の構成要素(例えば、試料回収具、試薬ストリップ及び/又はバリア層)は着脱可能であってもよい。他の実施形態では、構成要素は別々に提供されてもよく、使用時に組み立てることができる。キットは、試料懸濁培地、ピペット、標識、試料キャリア又は手袋などの、試料採取及び試験付属品を更に含んでもよい。
本開示は、環境表面上で微生物を検出するための方法を含む。この方法は、標的微生物の微生物的増殖の指示薬を観察することにより、標的微生物の存在又は不在を検出するために使用され得る。この方法は、更に、試料中の微生物を計数するために使用され得る。これらの方法に使用される要素(例えば、試料回収具、カバーシート、バリア層など)は、別々に提供されてもよく、又は上記試料ハウジングのように、組立体の部品であってもよい。更に、個々の要素及び/又は組立体は、上記のように、キットで提供されてもよい。実施形態は本明細書に記載される。
表面からのリステリア・イノキュアの検出及び計数
試薬ストリップの調製
表1に挙げた処方により、リステリア種の増殖及び検出のための液体増殖培地を作製した。酵素誘導剤(1−O−メチル−α−D−マンノピラノシド)及び発色酵素基質(6−クロロ−3−インドキシル−α−D−マンノピラノシド)をBiosynth International(Naperville,IL)から入手した。M150のエタノールで洗浄したグアーをDanisco(Kreutzlingen,Switzerland)から入手した。
以下の構成要素を1つのユニットに組み立てることにより、試料ハウジング器具を作製した:底部材、発泡体スペーサ、バリア層及びカバーシート。下記のように底部材上にコーティングした接着剤により、発泡体スペーサを底部材に取り付けた。幅3/8インチ(9.5mm)の両面接着テープを使用して、バリア層を発泡体スペーサの1つの端部に沿って取り付けた。両面接着テープを使用して、カバーフィルムをバリア層に(同一の端部に沿って)取り付けた。この構成体の図は、図3A及び3Bに見ることができる。
2つのタイプの試料回収具を作製した。透明な76マイクロメートル(3mil)のポリエステルフィルムを使用して、タイプI試料回収具を作製した。このフィルムを直径7.3cm(2.875インチ)の円形にダイカットした。不織布材料をプラスチック基材に積層することにより、タイプII試料回収具を作製した。タイプII試料回収具のために、粘着付与高感圧性イソオクチルアクリレート/アクリル酸コポリマー接着剤(96重量%のイソオクチルアクリレート及び4重量%のアクリル酸、品番AZ−1229、3M Company,St.Paul,MN、コーティング厚さはおよそ0.05mm(2mil)であった)を厚さ0.13mm(5mil)の白色ポリエステルフィルム(226Melinex、DuPont Teijin Films,Hopewell,VAから入手)に積層し、引き続いて、吸収性材料(図2に示す)をこの接着剤上に積層した。積層体を作製した後に、タイプII試料回収具を直径7.24cm(2.875インチ)の円形にダイカットした。表2にこれらの実験で使用した試料回収具を挙げる。
0.6%の酵母抽出物を有するトリプティックソイブロス中で大豆リステリア・イノキュア(ATCC#33091)を35℃で一晩増殖した。75マイクロリットルの一晩培養物を0.6%の酵母抽出物を有する50mLのトリプティックソイブロスに希釈した。懸濁液を振盪し、無菌Dacronポリエステルチップを取り付けたアプリケータを使用して、2つの0.5mL試料を平らな無菌ステンレス鋼の10×10cm(4×4インチ)区域上に広げた。ステンレス鋼表面を室温で乾燥させた。鋼表面が乾燥した後で、上記器具を使用して、ステンレス鋼の表面上の微生物を回収及び定量した。
標準的な方法と比較して下記実験手順を評価した。標準的な方法は以下から構成された:i)中和バッファで予め湿らせたスポンジ(Nasco,18−oz.Whirl−Pak Hydrated Speci−Sponge Bag、製品ID−BO1422WA、Hardy Diagnostics,Santa Maria,CAから)を10cm(4インチ)×10cm(4インチ)(103cm2)の接種領域上に擦り付け、それを取り出した元の袋の中に配置した、ii)5ミリリットルの緩衝化ペプトン水をこのスポンジを含有する袋に加え、この袋をおよそ30秒にわたって手で揉んで、スポンジから細菌を放出させた、iii)このスポンジを含有する袋と緩衝化ペプトン水を1〜1.5時間にわたって室温で放置した、iv)ピペットを使用して、3ミリリットルの懸濁液をこの袋から取り出し、Petrifilm(商標)Environmental Listeria plate(3M Company,St.Paul,MN)に分配した、並びにv)このPetrifilmプレートをインキュベートし、任意の細菌コロニーの出現を製造者の取り扱い説明に従って解釈した。
表面からの黄色ブドウ球菌の検出及び計数
試料ハウジング器具の調製
この実験で使用される試料ハウジング器具は、3M Company(St.Paul,MN)から入手される3M PETRIFILM Staph Express(STX)Count Systemプレートであった。各プレート内の乾燥している培地を1ミリリットルのButterfieldのリン酸塩希釈剤で水和し、この実験におけるプレートの使用に先立って、ゲル化させておいた。
実施例1に記載しているように、透明な76マイクロメートル(3mil)のポリエステルフィルムを使用することにより、タイプI試料回収具を作製した。感圧性アクリル系接着剤を使用して、指定の接合された材料(例えば、チーズクロス)を透明な76マイクロメートル(3mil)のポリエチレンフィルムに積層することにより、タイプII試料回収具を作製した。CEREX G192988不織布材料は、CEREX Advanced Fabrics(Cantonment,FL)から入手した。Hanes Wetlaid Hydroguard 150 HEM PET/セルロースは、Hanes Industries(Conover,NC)から入手した。Hanes材料をSPAN 20(Uniquema,Stanford,FLから入手)で前処理して、親水性にした。前処理は、SPAN−20の溶液(97.5%(重量/体積)のイソプロピルアルコール中、2.5%(重量/体積)のSPAN−20−ソルビタンモノラウレート)で布地材料を、布地が溶液で飽和するまで拭くことから構成された。この布地を室温で空気乾燥させた。数滴の水を布地の表面上に移して布地の中に水が吸収される(逃がれる)のを観察することにより、この処理された布地の一部を試験した。
35℃において18時間にわたってトリプティックソイブロス中で黄色ブドウ球菌ATCC 25923を増殖させた。20マイクロリットルの一晩培養物を99mLのButterfieldのリン酸塩希釈剤に希釈し、得られた混合物を振盪して、懸濁液中で細菌を均一に分布させた。1ミリリットルの緩衝化細菌懸濁液をButterfieldのリン酸塩希釈剤の第2の瓶(99mL)に移した。希釈した懸濁液を振盪し、無菌ガラススプレッダーを使用して3つの0.5mL試料を別々の平たい無菌ステンレス鋼試片の10×10cm(4×4インチ)区域上に広げた。層流フードの中で30〜60分にわたって室温においてステンレス鋼表面を乾燥させた。この手順で各ステンレス鋼試片を黄色ブドウ球菌細胞の約60のコロニー形成単位(CFU)で接種したと推定した。鋼表面が乾燥した後で、上記試料回収具を使用して、ステンレス鋼の表面上の微生物を回収及び定量した。
スプレーボトルを使用して、試料回収具にButterfieldのリン酸塩希釈剤の軽エアゾール(約0.5〜1.0mL)を塗布することにより、試料回収具を湿らせた。接種し、乾燥させたステンレス鋼表面の10cm(4インチ)×10cm(4インチ)(103cm2)区域上に試料回収具の表面を激しく擦り付けることにより、試料を回収した。表面を1つの方向で側方に擦り付け、次に表面を最初に擦り付けた方向と垂直である方向で側方に擦り付けた。
Claims (63)
- 表面微生物を試料採取及び検出するための物品において、前記物品は、
親水性の作用剤が実質的にない上方及び下方主表面を有する試料回収具であって、
少なくとも1つの主表面は水不透過性であり、
少なくとも1つの主表面は多孔質材料を含む、試料回収具と、
前記試料回収具に取り付けられた試薬ストリップであって、
前記試薬ストリップは、上方及び下方主表面を有する自立型基材を含み、
1つの主表面の少なくとも一部分は、冷水に可溶なゲル化剤と、微生物を増殖させるための栄養素、選択的作用剤、バッファ、指示薬、及び上記の2つ以上の組み合わせからなる群から選択される親水性の作用剤と、でコーティングされている、試薬ストリップと、
を含む、物品。 - バリア層を更に含む、請求項1に記載の物品。
- 前記試料回収具及び前記試薬ストリップが水不透過性基材の一体成形物から形成される、請求項1に記載の物品。
- 微生物を検出及び計数するための物品において、前記物品は、
上方及び下方主表面を有する自立型水不透過性基材を含む底部材であって、上方主表面が取り付け構造を含む底部材と、
前記底部材に取り付けられたカバーシートであって、
前記カバーシートは上方及び下方主表面を含み、
前記カバーシートの前記下方主表面の少なくとも一部分は、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、カバーシートと、
を含み、前記底部材の前記上方主表面は、前記カバーシートの前記下方主表面に面する、物品。 - 前記物品に着脱可能に取り付けられる試料回収具を更に含む、請求項4に記載の物品。
- 前記底部材と前記カバーシートとの間に配置されたバリア層を更に含み、前記バリア層の少なくとも一部が前記物品に着脱可能に取り付けられる、請求項4に記載の物品。
- 環境表面試料を回収するための試料回収具において、前記試料回収具は上方及び下方主表面を有する基材を含み、
少なくとも1つの主表面は水不透過性であり、
少なくとも1つの主表面は多孔質材料を含み、
前記試料回収具は親水性の作用剤が実質的にない、試料回収具。 - 前記基材が、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、紙又は厚紙を含む、請求項7に記載の試料回収具。
- 接合された材料を更に含む、請求項7に記載の試料回収具。
- 前記接合された材料が、不織布材料、ガラス繊維材料、発泡体、布地及びセルロース系材料からなる群から選択される、請求項9に記載の試料回収具。
- 上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む底部材と、
開口を含むスペーサであって、前記スペーサが前記底部材の前記上方主表面に接着されている、スペーサと、
上方及び下方主表面を有する基材を含むカバーシートであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、カバーシートと、
前記カバーシートと前記スペーサとの間に配置された耐水性バリア層であって、カバーシートのコーティングされた表面が前記バリア層に面する、耐水性バリア層と、
を含む、試料ハウジング。 - 底部材、スペーサ、カバーシート及びバリア層からなる群からの任意の組み合わせが、互いに取り付けられる、請求項11に記載の試料ハウジング。
- 前記底部材が取り付け構造を更に含む、請求項11に記載の試料ハウジング。
- 前記底部材又は前記カバーシートが、コロニーの数え上げを促進するために格子を更に含む、請求項11に記載の試料ハウジング。
- 前記耐水性バリア層がタブを更に含む、請求項11に記載の試料ハウジング。
- 微生物を検出するための試薬ストリップにおいて、前記試薬ストリップは、
上方及び下方主表面を有する自立型基材、及び
微生物を増殖させるための栄養素及び指示薬を含む親水性の作用剤と、冷水に可溶なゲル化剤と、を含む乾燥コーティング
を含み、前記基材は、両方の主表面の少なくとも一部上にコーティングされている、試薬ストリップ。 - コロニーの数え上げを促進するために格子を更に含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 少なくとも1つの選択的阻害剤を更に含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 前記選択的阻害剤が、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム、ポリミキシンB硫酸塩及び上記の任意の2つ以上からなる群から選択される、請求項18に記載の試薬ストリップ。
- 前記選択的阻害剤が、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム及びポリミキシンB硫酸塩からなる、請求項19に記載の試薬ストリップ。
- バッファ系を更に含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 有効量のペプトン、バッファ系、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム及びポリミキシンB硫酸塩を含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 前記指示薬が酵素基質を含む、請求項22に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素基質がα−D−マンノシダーゼ基質である、請求項23に記載の試薬ストリップ。
- 酵素誘導剤を更に含む、請求項23に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素基質が6−クロロ−3−インドキシル−α−D−マンノピラノシドである、請求項25に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素誘導剤が1−O−メチル−α−D−マンノピラノシドである、請求項25又は26に記載の試薬ストリップ。
- タブを更に含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 前記タブが着脱可能である、請求項28に記載の試薬ストリップ。
- 表面微生物を試料採取及び検出するためのキットにおいて、前記キットは、
上方及び下方主表面を有する水不透過性基材を含む、親水性の作用剤が実質的にない試料回収具であって、少なくとも1つの主表面が多孔質材料を含む、試料回収具、並びに
上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む試薬ストリップであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、冷水に可溶なゲル化剤と、微生物を増殖させるための栄養素、選択的作用剤、バッファ、指示薬、及び上記の任意の2つ以上の組み合わせからなる群から選択される親水性の作用剤と、でコーティングされている、試薬ストリップを含む、キット。 - 微生物を試料採取及び計数するためのキットにおいて、前記キットは、
親水性の作用剤が実質的にない上方及び下方主表面を有する試料回収具であって、
少なくとも1つの主表面は水不透過性であり、
少なくとも1つの主表面は多孔質材料を含む、試料回収具、並びに
試料ハウジングであって、
上方及び下方主表面を有する自立型水不透過性基材を含む底部材と、
上方及び下方主表面を有する基材を含むカバーシートであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、カバーシートと、を含む試料ハウジング、
を含む、キット。 - 前記カバーシートが前記底部材に取り付けられ、前記カバーシートのコーティングされた表面が前記底部材の上方主表面に面する、請求項31に記載のキット。
- 上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む試薬ストリップであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、冷水に可溶なゲル化剤と、微生物を増殖させるための栄養素、選択的作用剤、指示薬、及び上記の任意の2つ以上の組み合わせからなる群から選択される親水性の作用剤と、でコーティングされている、試薬ストリップを更に含む、請求項31に記載のキット。
- 前記試料ハウジングがバリア層を更に含む、請求項31に記載のキット。
- 前記バリア層が前記カバーシートと前記底部材との間に配置される、請求項34に記載のキット。
- 前記バリア層が前記試料ハウジングに着脱可能に取り付けられる、請求項35に記載のキット。
- 試料回収具の少なくとも1つの主表面が、多孔質材料を更に含む、請求項31に記載のキット。
- 前記試料ハウジングが開口を含有するスペーサを更に含み、前記スペーサが前記底部材の前記上方表面に接着されている、請求項31に記載のキット。
- 前記試料回収具がタブを更に含む、請求項31に記載のキット。
- 前記タブが着脱可能である、請求項39に記載のキット。
- 微生物を試料採取及び計数するためのキットにおいて、前記キットは、
上方及び下方主表面を有する基材から本質的になる試料回収具であって、少なくとも1つの主表面が水不透過性である、試料回収具と、
上方表面及び下方主表面を有する基材を含むカバーシートであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、カバーシートと、
上方及び下方主表面を有する自立型水不透過性基材、並びに取り付け構造を含む底部材と、
を含む、キット。 - 前記試料回収具が、基材及び多孔質材料から本質的になる、請求項41に記載のキット。
- 前記試料回収具基材が、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリカーボネート、ポリスチレン、紙又は厚紙からなる群から選択される、請求項41に記載のキット。
- 前記試料回収具が、前記カバーシートに取り付けられる、請求項43に記載のキット。
- 環境表面上の微生物を検出するための方法において、
液体試料懸濁培地、
上方及び下方主表面を有する基材を含む試料回収具であって、少なくとも1つの主表面が水不透過性である、試料回収具、
底部材と、上方及び下方主表面を有する基材を含むカバーシートと、を含む試料ハウジングであって、前記カバーシートの1つの主表面の少なくとも一部分が、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、試料ハウジング、並びに
上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む試薬ストリップであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、冷水に可溶なゲル化剤と、微生物を増殖させるための栄養素、選択的作用剤、指示薬、及び上記の任意の2つ以上の組み合わせからなる群から選択される親水性の作用剤と、でコーティングされている、試薬ストリップ
を提供する工程、
前記試料回収具の少なくとも1つの主表面上に試料を獲得する工程、
前記試料を含む前記少なくとも1つの主表面を前記カバーシートに向けて前記試料ハウジングの中に前記試料回収具を配置することにより組立体を形成する工程、
前記試料を含む前記試料回収具主表面に試料懸濁培地を適用する工程、
水和ゲルを形成するために、前記試料懸濁培地に前記カバーシートの前記下方主表面を接触させる工程、
前記試薬ストリップのコーティングされた表面を前記水和ゲルに接触させて配置する工程、
ある期間にわたって前記組立体をインキュベートする工程、並びに
微生物増殖の指示薬を観察する工程、
を含む、方法。 - 環境表面上の微生物を検出するための方法において、前記方法は、
バリア層、
試料懸濁培地、
上方及び下方主表面を有する基材を含む試料回収具であって、少なくとも1つの主表面が水不透過性である、試料回収具、
試料ハウジングであって、
上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む底部材と、
上方及び下方主表面を有する基材を含むカバーシートであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、少なくとも1つのゲル化剤を含む冷水に可溶な粉末でコーティングされている、カバーシートと、
を含む、試料ハウジング、並びに
上方及び下方主表面を有する自立型基材を含む試薬ストリップであって、1つの主表面の少なくとも一部分が、冷水に可溶なゲル化剤と、微生物を増殖させるための栄養素、選択的作用剤、指示薬、及び上記の任意の2つ以上の組み合わせからなる群から選択される親水性の作用剤と、でコーティングされている、試薬ストリップ
を提供する工程、
前記試料回収具の少なくとも1つの主表面上に試料を獲得する工程、
前記試料を含む前記少なくとも1つの主表面を前記カバーシートに向けて前記試料ハウジングの中に前記試料回収具を配置することにより組立体を形成する工程、
前記試料を含む前記試料回収具主表面に試料懸濁培地を適用する工程、
前記試料回収具と前記カバーシートとの間に前記耐水性バリア層を挿入し、これにより、前記試料懸濁培地が前記カバーシートの少なくとも一部と接触するのを防止する工程、
ある期間にわたって前記組立体をインキュベートする工程、
前記試料ハウジングから少なくとも一部の前記バリア層を取り外す工程、
水和ゲルを形成するために、前記試料懸濁培地に前記カバーシートの前記下方主表面を接触させる工程、
前記試薬ストリップのコーティングされた表面を前記水和ゲルに接触させて配置する工程、
ある期間にわたって前記試料ハウジングをインキュベートする工程、並びに
微生物増殖の指示薬を観察する工程、
を含む、方法。 - 前記キットがバリア層を更に含む、請求項46に記載の方法。
- 前記バリア層が前記底部材と前記カバーシートとの間に配置され、前記試料を獲得した後で前記試料回収具が前記底部材と前記バリア層との間の前記試料ハウジングの中に配置される、請求項47に記載の方法。
- 前記耐水性バリア層が着脱可能に前記試料ハウジングに取り付けられる、請求項47に記載の方法。
- 前記方法が、前記試料中の微生物を計数する工程を更に含む、請求項45又は46に記載の方法。
- 微生物増殖の指示薬を観察する工程が、リステリア種、サルモネラ種、腸内細菌科の種、クロストリジウム種、腸球菌種、エルニシア種、バチルス種、大腸菌、ブドウ球菌種及びESBL含有微生物からなる群から選択される微生物の増殖の指示薬を観察することを含む、請求項45又は46に記載の方法。
- 環境試料中のリステリア種を検出する方法において、前記方法は、
表面を有する試料回収具、試料懸濁培地及び試薬ストリップを提供する工程であって、
前記試薬ストリップが、微生物を増殖させるための栄養素及び指示薬を含む親水性の作用剤と、冷水に可溶なゲル化剤と、を含む乾燥コーティングを含む、提供する工程、
前記試料回収具の前記表面上に試料を獲得する工程、
前記試料又は前記試薬ストリップを水和する工程、並びに
前記試薬ストリップと前記試料とを接触させる工程、
を含む、方法。 - 少なくとも1つの選択的阻害剤を更に含む、請求項52に記載の試薬ストリップ。
- 前記選択的阻害剤が、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム、ポリミキシンB硫酸塩及び上記の任意の2つ以上からなる群から選択される、請求項53に記載の試薬ストリップ。
- 前記選択的阻害剤が、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム及びポリミキシンB硫酸塩からなる、請求項54に記載の試薬ストリップ。
- バッファ系を更に含む、請求項52に記載の試薬ストリップ。
- 有効量のペプトン、バッファ系、塩化ナトリウム、塩化リチウム、ナリジキシン酸(naladixic acid)、アクリフラビン、モキサラクタム及びポリミキシンB硫酸塩を含む、請求項52に記載の試薬ストリップ。
- 前記指示薬が酵素基質を含む、請求項16に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素基質がα−D−マンノシダーゼ基質である、請求項58に記載の試薬ストリップ。
- 酵素誘導剤を更に含む、請求項58に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素基質が6−クロロ−3−インドキシル−α−D−マンノピラノシドである、請求項60に記載の試薬ストリップ。
- 前記酵素誘導剤が1−O−メチル−α−D−マンノピラノシドである、請求項58又は59に記載の試薬ストリップ。
- 環境試料中のリステリア種を検出する方法において、前記方法は、
表面を有する試料回収具、試料懸濁培地、試料ハウジング及び試薬ストリップを提供する工程であって、
前記試薬ストリップが、微生物を増殖させるための栄養素及び指示薬を含む親水性の作用剤と、冷水に可溶なゲル化剤と、を含む乾燥コーティングを含む、提供する工程、
前記試料回収具の前記表面上に試料を獲得する工程、
前記試料ハウジングの中に前記試料回収具を配置する工程、
前記試料又は前記試薬ストリップを水和する工程、並びに
前記試薬ストリップと前記試料とを接触させる工程、
を含む、方法。
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