JPH08336381A

JPH08336381A - 培養装置

Info

Publication number: JPH08336381A
Application number: JP16785695A
Authority: JP
Inventors: Kayoko Miyake; 佳代子三宅
Original assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Current assignee: Dai Nippon Printing Co Ltd
Priority date: 1995-06-12
Filing date: 1995-06-12
Publication date: 1996-12-24

Abstract

(57)【要約】【目的】菌数検査などに用いる微生物の培養装置にお
いて、その保存性、使用時の簡便性及び培養性能に優れ
ると共に釣菌も可能な培養装置を提供する。【構成】防水性の基材シート１と、これに被せられる
水分不透過性で透明なカバーフィルム６とを備え、その
いずれか一方の内面、又は両方の内面に吸水性樹脂層３
を積層し、更に、そのいずれか一方の内面に培養基層７
を積層した後、その基材シート側の内面に微生物が代謝
し得る染料を付着させた所定寸法の繊維質シート５a を
設けた構成。吸水性樹脂層３にはポリエチレンオキシド
を用いることが好ましく、培養基層７のバインダーには
ポリアクリルアミドが好ましい。吸水性樹脂層の積層の
際、接着が弱い時には接着層２a などを設けてもよい。
また、上記染料は培養基層７に含有させてもよく、水溶
性バインダーと共に単独の染料層としてカバーフィルム
側の内面等に積層してもよい。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、菌数検査などに用いら
れる微生物の培養装置に関し、更に詳しくは、長期保存
が可能で、且つ、使用時の操作が簡便な培養装置に関す
る。

【０００２】

【従来の技術】食品などの微生物の数を測定する方法と
して、従来から行われているものに寒天平板混釈法があ
る。この方法は、予め滅菌したシャーレに、高圧蒸気滅
菌した後温度を約４５℃とした寒天培地と、別に準備し
た試料液とをそれぞれ所定量分注し、十分に混釈して放
置後、培地が凝固したことを確認して、これを孵卵器な
どに入れて培養し、所定時間後にシャーレの中に発育し
たコロニー数を計数するものである。しかし、この方法
の場合、寒天培地を高圧蒸気滅菌するためのオートクレ
ーブや、一連の微生物検査を無菌的に行うことのできる
検査室が必要であり、また、微生物のサンプリングから
試料液の調整、分注、培地との混釈、培養、計数に至る
微生物検査の操作には熟練を要し、初心者が正確に行う
ことは難しいものであった。

【０００３】そこで、簡便に、且つ、高度の熟練を必要
とすることなく、微生物検査を行える方法が研究された
結果、培養装置の一つとして乾燥培地なるものが開発さ
れ、使用されている。このような培養装置としては、例
えばペトリフィルムプレート〔スリーエム社商品名〕や
ＢＡＣｃＴ〔島久薬品（株）商品名〕などがある。

【０００４】前者のペトリフィルムプレートは、防水性
の平板とこれに重なるカバーフィルムとからなり、相対
するそれぞれの内面には、接着剤を塗布し、更にその上
に冷水可溶物質（ゲル化剤）の粉末と培地成分、或い
は、冷水可溶物質（ゲル化剤）の粉末を散布し、その
後、余分な粉末を払い落とすことにより、乾燥培地を形
成したものであり、これを更に滅菌して製品としたもの
である。そして、その使用方法の概略は、先ず前記平板
に重ねられたカバーフィルムフィルムを持ち上げ、平板
上に接着剤層を介して形成された培地成分と冷水可溶物
質とからなる乾燥培地上に被検液を所定量接種し、接種
後、カバーフィルムを降ろし、その上からプラスチック
製のスプレッダーで押さえて被検液を円形且つ均等に広
げて吸収させる。約１分ほどで冷水可溶物質であるゲル
化剤が凝固するので、凝固したらそのままの状態で孵卵
器に収納し、所定の温度および時間で培養し、発生した
コロニー数を計数するものである。

【０００５】また、後者のＢＡＣｃＴは、防水性の平板
とこれを覆う透明カバーフィルムとを有し、その防水性
平板のカバーフィルムと相対する側の面には、固着剤の
溶液中に冷水可溶性ゲル化剤と微生物培養基の混合物を
添加して泥状に混練した塗布液を塗布、乾燥して被覆を
形成し、その上の少なくとも一部に繊維質吸水性シート
を積層し、また、カバーフィルムの防水性平板に相対す
る側の面には、固着剤の溶液中に、冷水可溶性ゲル化剤
と微生物培養基の混合物、または、冷水可溶性ゲル化剤
を添加して混練した塗布液を塗布、乾燥して被覆を形成
した後、これらを滅菌して製品としたものである。この
ＢＡＣｃＴの使用法は、防水性の平板を覆うカバーフィ
ルムを持ち上げ、防水性平板上の冷水可溶性ゲル化剤と
微生物培養基の混合物の被覆層上に積層された繊維質吸
水性シート上に被検液を所定量接種する。その後、カバ
ーフィルムを降ろす。これにより被検液は繊維質吸水性
シートの繊維の重なりによる毛細管現象により、吸水性
シート全体に拡散し、微生物の培養基が溶解し、冷水可
溶性ゲル化剤が吸水してゲル化する。この時繊維質吸水
性シートの繊維はゲルの中に包み込まれ、或いはゲルに
粘着する。その後、孵卵器に入れ、所定の温度と時間で
培養し、発生したコロニー数を計数するものである。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】上記のような培養装置
は、微生物の培養を行う際に、その都度ペトリ皿や培地
を用意する必要がない点で、使用上の便利性を有してい
る。しかし、前者のペトリフィルムプレートの場合、そ
の使用方法は、カバーフィルムを持ち上げ、平板上に接
着剤層を介して形成された培地成分と冷水可溶物質とか
らなる乾燥培地上に被検液を所定量接種し、カバーフィ
ルムを降ろした後、その上からプラスチック製のスプレ
ッダーで押さえて被検液を均一に広げ、スプレッダーを
約１分間乗せたままにして冷水可溶物質に水分を吸収さ
せゲルを形成すると同時に培地成分を溶解させるもので
ある。このためスプレッダー１個では、１分間に一つの
試料しか処理できず、また、スプレッダーがずれると被
検液が乾燥培地上に更に広がってしまうという不都合が
生じる。

【０００７】また、ＢＡＣｃＴの場合は、前記したよう
に防水性平板側の繊維質吸水性シート上に被検液を滴下
することにより、繊維間の毛細管現象でシート全体に被
検液が広がり、その下の冷水可溶性ゲル化剤のゲル化と
培養基の溶解が行われる。この時、繊維質吸水性シート
の繊維はゲルの中に包み込まれ、或いはゲルに粘着され
ている。従って、被検液の広がり領域は略一定にできる
が、菌体は、繊維質吸水性シートの繊維の中に入り込ん
でおり、シート内で増殖が進行する。この時ゲル化剤に
吸収されない固着剤により、発生したコロニーが滲んだ
状態に見え不鮮明となる傾向がある。このため特に、菌
体が接近して増殖した場合には、計数が難しくなるとい
う問題がある。また、繊維質吸水性シートがゲル中に包
み込まれ、或いはゲルに粘着しているため、培養後、釣
菌の必要がある場合でもカバーフィルムを持ち上げると
繊維質吸水性シートが破壊され釣菌ができないという問
題もある。

【０００８】本発明は、上記のような問題点に鑑みてな
されたものであり、その目的とするところは、培養装置
として保存性があり、培養に際してその都度、培地を調
整する必要がなく、操作も簡便で、特に、被検液を接種
した際、スプレッダーなどを必要とせず、容易に一定の
面積に均一に広げることができ、且つ、発生したコロニ
ーが明瞭に判別でき、培養の精度に優れると同時に、必
要な場合には釣菌も容易にできるという利用範囲の広い
微生物の培養装置を提供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】上記の課題は下記の本発
明により解決される。即ち、本請求項１の発明は、防水
性の基材シートと該基材シート上に被せられる水分不透
過性で透明なカバーフィルムとを備え、該基材シートと
カバーフィルムのいずれか一方の内面、または両方の内
面に吸水性樹脂層を積層し、更に、そのいずれか一方の
内面に微生物の培養基層を積層した後、該基材シート側
の内面に、所定寸法の繊維質シートを設けたことを特徴
とする微生物の培養装置からなる。

【００１０】本請求項２の発明は、前記吸水性樹脂層が
ポリエチレンオキシドからなることを特徴とする請求項
１記載の微生物の培養装置である。また、本請求項３の
発明は、前記培養基層がポリアクリルアミドを含有する
ことを特徴とする請求項１または２に記載の微生物の培
養装置からなる。

【００１１】

【作用】以上のように本発明の微生物の培養装置は、防
水性の基材シートと該基材シート上に被せられる水分不
透過性で透明なカバーフィルムとを備え、該基材シート
とカバーフィルムのいずれか一方の内面、または両方の
内面に吸水性樹脂層を積層し、更に、そのいずれか一方
の内面に微生物の培養基層を積層した後、該基材シート
側の内面に所定寸法の繊維質シートを設けた構成であ
る。従って、微生物の培養に際して、培養装置のカバー
フィルムを持ち上げて基材シート側の内面に設けられた
所定寸法の繊維質シート上に、ピペットなどを用いて一
定量の被検液を滴下し、カバーフィルムを降ろすことに
より、被検液が繊維質シートの全域に繊維間の毛細管現
象により拡散し、繊維質シートに吸収され、これと接す
る培養基層を溶解し、更に、吸水性樹脂層を膨潤、ゲル
化させ、微生物に栄養分と水分とを供給できるようにな
る。

【００１２】この時、被検液中の微生物は、繊維質シー
ト全体に均一に分散して捕捉されるので、そのまま孵卵
器に入れて培養することができ、培養により容易に計数
のできるシャープなコロニーを形成できる。そして、吸
水性樹脂層に、ポリエチレンオキシドなどを用いた場
合、被検液の水分を吸収して容易にゲルを形成し、微生
物に水分を供給でき、また、繊維質シートと強く粘着す
ることもないため、吸水性樹脂層をカバーフィルム側の
内面に積層した場合でも、培養後、自由にカバーフィル
ムを基材シート側に設けた繊維質シートから剥がすこと
ができ、釣菌が必要な場合には、容易にこれを実施する
ことができる。また、微生物の培養基層が、培養基のバ
インダーとして、ポリアクリルアミドを含有する場合に
は、その塗布面となる基材シート、カバーフィルム、或
いは吸水性樹脂層（例えばポリエチレンオキシド）など
に対して適度の接着性を有し、培養基をこれらの面に良
好に固定できると共に、被検液の水分により培養基層が
容易に溶解し、微生物に栄養分を供給できるようにな
る。尚、カバーフィルム自体は、培養操作中の落下菌な
どによる汚染を防止すると共に、ゲルなどから水分が蒸
発するのを防止する働きをする。

【００１３】

【実施例】次に、図面および実施例により、本発明を詳
細に説明する。図１、図２、図３は、それぞれ本発明の
培養装置の一実施例の構成を説明する模式断面図であ
る。尚、本発明はこれらに限定するものではない。図１
の培養装置20は、基材シート１上にコロニーの計数を容
易にするための枡目柄（図示せず）を印刷し、その上に
接着層２a 、吸水性樹脂層３を順に積層して本体シート
４a を作成し、更にその上に微生物が代謝し得る染料を
付着させた所定寸法の繊維質シート５a を設けて本体部
分を構成する。そして、その上にカバーフィルム６の一
方の面に培養基層７を積層したカバーシート８a を、そ
の培養基層７面が本体側の繊維質シート（染料付き）５
a に接するように重ね合わせて、該カバーシート８a が
開閉できるようにその一端の接合部10で本体シート４a
とカバーシート８a とを接合した構成である。

【００１４】上記の構成においてカバーシート８a は、
その接合部10の反対側の端部が本体シート４a から若干
突き出るように大きくしておいて、被検液の接種などの
際、カバーシート８a を摘んで持ち上げるための摘み部
とすることが培養装置20を使い易くする点で好ましい。
このことは本発明の培養装置全体に共通して言えること
である。また、図１の構成において接着層２a 、および
繊維質シート（染料付き）５aに付着させた染料は、必
要のない場合には除くこともできる。更に、カバーシー
ト８a は、本体シート４a と接合せずに別体として用い
ることもできる。只、培養中に位置ずれなどを生じた場
合には落下菌による汚染やゲルの水分蒸発などの問題が
でるため接合しておくことが好ましい。

【００１５】図２の培養装置20は、基材シート１上に、
図１の場合と同様、枡目柄（図示せず）を印刷し、その
上に培養基層７を積層して本体シート４b を作成し、更
にその上に微生物が代謝し得る染料を付着させた所定寸
法の繊維質シート５a を設けて本体部分を構成する。そ
して、その上にカバーフィルム６の一方の面に接着層２
b 、吸水性樹脂層３を順に積層したカバーシート８b
を、その吸水性樹脂層３面が本体側の繊維質シート（染
料付き）５a に接するように重ね合わせて、該カバーシ
ート８b が開閉できるようにその一端の接合部10で本体
シート４b とカバーシート８b とを接合した構成であ
る。尚、この構成においても接着層２b 、および繊維質
シート（染料付き）５a に付着させた染料は、必要のな
い場合には除くことができる。

【００１６】図３の培養装置20は、基材シート１上に図
１の場合と同様に枡目柄（図示せず）を印刷し、その上
に接着層２a 、吸水性樹脂層３、培養基層７を順に積層
して本体シート４c を作成し、更にその上に繊維質シー
ト５b を設けて本体部分を構成する。そして、その上に
カバーフィルム６の一方の面に微生物が代謝し得る染料
と固着剤からなる染料層９を積層したカバーシート８c
を、その染料層９面が本体側の繊維質シート５b に接す
るように重ね合わせて、該カバーシート８c が開閉でき
るようにその一端の接合部10で本体シート４c とカバー
シート８c とを接合した構成である。上記の構成におい
ても接着層２a 、および染料層９は、必要のない場合に
は除くことができる。

【００１７】以下に本発明の培養装置の構成材料等につ
いて説明する。基材シート基材シート１は、防水性を有することが必要であり、例
えば、ポリエステル、ポリプロピレン、ポリエチレン、
ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリ塩化ビニルなど
のプラスチックシートの単体、或いは、これらの積層体
が使用できる。これらのプラスチックシートは、無着色
の透明でもよいが、白色に着色したものが生育させたコ
ロニーを観察し易く、計数し易い点で好ましい。プラス
チックシート以外では、耐水加工を施した紙も使用可能
であり、例えば、紙に合成樹脂を塗布または押し出しコ
ートしたもの、或いは、プラスチックフィルムをラミネ
ートしたものなどが使用できる。

【００１８】基材シート１は、カールなどがなく平坦で
あることが好ましく、その厚さは、特に限定はされない
が、通常、５０〜５００μｍ程度の範囲であり、８０〜
３００μｍ程度がより好ましい。基材シート１には、予
め水に不溶性で微生物の生育に影響を与えないインキで
枡目柄を印刷しておくことが、コロニーの計数を容易に
する点で好ましい。印刷の版式は、特に限定されず何で
もよいが、着色剤、樹脂、溶剤などの選択範囲が広い
点、および、後加工で吸水性樹脂層３、培養基層７など
を積層する際、ロール状で連続的に加工する方が生産性
がよく、これらを考慮して巻取り印刷の可能な輪転グラ
ビア印刷などが好ましい。枡目の大きさは、通常１ｃｍ
角程度が適当である。

【００１９】カバーフィルムカバーフィルム６は、防水性、水蒸気不透過性を有する
と同時に、微生物の培養後、カバーフィルム６を通して
コロニーを計数するのが一般的であるため透明であるこ
とが好ましく、例えば、前記基材シート１で挙げたよう
なポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリ
スチレン、ポリカーボネート、ポリ塩化ビニルなどのプ
ラスチックフィルムを単体、或いは、これらの積層体で
使用することができる。また、培養試験の際、カバーフ
ィルム６は、基材シート１から持ち上げて被検液を滴下
するため、適度の柔軟性を有する材質および厚さのもの
が好ましい。従って、カバーフィルム６の厚さは、１０
〜２００μｍ程度が好ましく、２０〜１００μｍ程度が
更に好ましい。

【００２０】尚、上記基材シート１またはカバーフィル
ム６に吸水性樹脂層３、培養基層７、染料層９などを積
層する場合、これらが適度に接着する必要があり、接着
性が不足する場合には、基材シート１またはカバーフィ
ルム６の積層面にコロナ放電処理やアンカーコートなど
の前処理をしたり、接着層２a 、２b を設けることがで
きる。このほか、基材シート１およびカバーフィルム６
は、培養する微生物の種類により、適した気体透過性、
主に酸素透過性を有することが好ましく、前記水蒸気不
透過性と併せて判断すると、少なくとも基材シート１と
カバーフィルム６のいずれか一方には、ポリエチレン、
ポリプロピレンなどのポリオレフィンを用いることが好
ましい。

【００２１】吸水性樹脂層本発明において、基材シート１とカバーフィルム６のい
ずれか一方の内面、または両方の内面に積層する吸水性
樹脂層３は、培養に際して被検液の水分を吸収して微生
物の培養に適したゲルを形成し、微生物を捕捉すると共
に吸収した水分を微生物に供給する機能を果たすもので
ある。また、被積層材である基材シート１やカバーフィ
ルム６に対して適度の接着性を有することも必要であ
る。このような吸水性樹脂として、具体的にはポリエチ
レンオキシド、電子線架橋型ポリアクリルアミド、カル
ボキシメチルセルロースなどが使用できる。これらの
中、ポリエチレンオキシドの中には、溶液として塗布で
きるほか、インフレーション成形機やＴダイ押し出し機
により単体でフィルム化したり、他の樹脂とブレンドし
てフィルム化できるものもあり、加工性にも優れている
点で特に好ましい。従って、吸水性樹脂層３を積層する
方法は、吸水性樹脂の溶液を塗布、乾燥して積層する方
法のほか、吸水性樹脂を押し出しコーティングして積層
する方法、更には、吸水性樹脂をフィルム化し、これを
接着剤を使用してドライラミネーションにより積層する
方法など、いずれの方法も利用できる。

【００２２】このような吸水性樹脂層３の厚さは、樹脂
の種類によっても異なるが通常、２５〜１００μｍ程度
の範囲が好ましく、４０〜８０μｍの範囲がより好まし
い。只、吸水性樹脂層３を基材シート１とカバーフィル
ム６の両方の内面に設ける場合は、両者の総厚がこの範
囲であればよい。吸水性樹脂層３の厚さが２５μｍ未満
の場合は、水分吸収能力が不足し水分吸収に時間もかか
り好ましくない、また、厚さが１００μｍ以上は、その
必要性がなく、材料の無駄でもあり好ましくない。尚、
吸水性樹脂層３と基材シート１またはカバーフィルム６
との接着性が弱い場合には、両者の間に接着性を向上さ
せるための中間層として接着層２a 、２bを設けてもよ
い。

【００２３】培養基層本発明の培養装置20では、基材シート１とカバーフィル
ム６のいずれか一方の内面または両方の内面に前記吸水
性樹脂層３を積層した後、そのいずれか一方の内面に微
生物の培養基層７を積層する。従って、培養基層７を積
層する面は、基材シート１面、カバーフィルム６面、或
いは吸水性樹脂層３面のいずれかの面である。そして、
培養基層７の主成分は、微生物の栄養成分であり、例え
ば酵母エキス、ペプトン、リン酸水素二カリウム、ぶど
う糖、乳糖、塩化ナトリウムなどの中から発育させよう
とする微生物の種類に応じて適宜選択し、所定の割合で
混合した混合物を使用する。しかし、これだけでは上記
の各種の面に良好に接着させることができないため、例
えばポリアクリルアミドのような水溶性樹脂をバインダ
ーに使用し、その水溶液に所定の割合に混合した栄養成
分を添加し、これを塗布液として公知のコーティング手
段により塗布、乾燥することにより培養基層７を積層す
ることができる。このような培養基層７の塗布量は、通
常、微生物の栄養成分の量が４ｇ／ｍ²（固形分）程度
になるように調整して塗布することが好ましい。

【００２４】繊維質シート本発明の培養装置20において、本体側の最上層に一定の
大きさで設ける繊維質シート５a 、５b は、接種された
被検液を繊維間の毛細管現象により、その全体に均一に
拡散、浸透させて被検液の広がりを一定にすると共に、
これと直接または間接的に接する培養基層７、および、
繊維質シート５a に付着させた染料、またはカバーフィ
ルム６などに積層された染料層９を溶解し、また、吸水
性樹脂層３をゲル化させる機能を果たすものである。従
って、繊維質シート自体には、水分の吸収性の良好な不
織布や漉き紙などが使用できる。不織布では、レーヨン
のほかポリオレフィン系繊維を使用した不織布も使用で
きるが、レーヨン系の不織布が親水性に優れており、被
検液の拡散も迅速に行われる点で好ましい。漉き紙で
は、水分の吸収性のよいものが適しており、表面コート
のある紙やサイズ効果の強い紙は好ましくなく、フィル
ターペーパーのようなタイプの紙が適している。

【００２５】繊維質シート５a 、５b の厚さは、水分の
吸収能力、透明性（生育したコロニーの見やすさ）など
を考慮して決めればよく、不織布の場合の目付け量、紙
の場合の坪量で１０〜３０ｇ／ｍ²程度の範囲の比較的
薄いものが適している。このような繊維質シート５a 、
５b の大きさは、通常、その上に接種する被検液の量を
１mlとした場合、直径５cm程度の円形にすることが、被
検液を繊維質シート５a 、５b の全面に均一に拡散、浸
透させ培養に適した培地を形成できる点で好ましい。ま
た、繊維質シート５a 、５b は、培養装置20の本体シー
ト４a 、４b 、４c側の最上層に設けるが、その方法
は、例えばポリアクリルアミドやポリエチレンオキシド
などの溶液を接着剤の代わりに用いて本体側にスポット
状に塗布して貼り合わせて固定してもよく、また、単に
本体部分とカバーシート８a 、８b 、８c との間に挟ん
でおいて使用することもできる。

【００２６】染料について本発明の培養装置20において、微生物の増殖に必要な栄
養成分と水分とは別に、微生物に代謝され得る染料を添
加することによって、形成したコロニーを着色させ、計
数を容易にすることができる。このような染料として具
体的には、トリフェニルテトラゾリウムクロライド（以
下ＴＴＣと表示）、ｐ−トリルテトラゾリウムレッド、
テトラゾリウムバイオレット、ペテトリルテトラゾリウ
ムブルーなどが挙げられる。

【００２７】このような染料を培養装置20に適用する方
法は、特に限定されるものではなく、例えば、図１、図
２の場合には、繊維質シート５a に染料の水溶液を塗布
し、乾燥するか、或いは、染料の水溶液に繊維質シート
５a を浸漬した後、引き上げて乾燥させることにより、
染料を繊維質シート５a に付着させることができる。ま
た、図３の場合には、カバーフィルム６の内面に染料と
水溶性バインダーからなる水溶液を塗布、乾燥して染料
層９として積層することができ、更には、培養基層７を
積層する際、その塗布液に予め染料を添加しておいて培
養基層７に含有させて積層することもできる。このよう
に染料の添加は、培養装置20の構成に応じて適する方法
を採用すればよい。また、染料自体の添加量は、培養部
分の面積が直径５ｃｍの円形、即ち、略２０ｃｍ²の場
合、この部分に０．０１〜０．０４ｍｇ程度含有するよ
うに調整すればよく、平方メートル当たりに換算すれ
ば、５〜２０ｍｇ／ｍ²程度含有することが好ましい。

【００２８】本体シートとカバーシートの接合本発明の培養装置20において、本体シート４a 〜４c と
カバーシート８a 〜８c とは、それぞれ別体として使用
することもできるが、重ね合わせた位置がずれないよう
に一端で接合されていることが好ましい。その接合方法
は、特に限定はされず、接合部、即ち、本体シートとカ
バーシートの内面の材質に応じて適する方法を自由に選
択して接合することができる。例えば、比較的簡便な接
合方法として、テープ状粘着剤や両面粘着テープなどの
粘着剤による方法、或いは、ホットメルト剤による方法
などがあり、これらは比較的被着体の材質を選ばず汎用
的に使用できる。また、接合面同士が同一材質の場合
は、そのままヒートシールにより接合できる場合もあ
り、所謂パートコート剤などのヒートシール剤を塗布す
れば、一層確実にヒートシールすることができる。

【００２９】以下に、本発明の培養装置の具体的な実施
例を挙げ、実際に培養試験を行い、その性能を標準寒天
培地を用いた混釈法と比較して説明する。〔実施例１〕（本体シートの作成）坪量１６０ｇ／ｍ²の巻き取り状
のコップ原紙の表面に、ピッチが各１ｃｍの枡目柄をグ
ラビア輪転印刷機により印刷した後、その両面に低密度
ポリエチレン（以下ＬＤＰＥと表示）（ミラソン１６Ｓ
Ｐ三井石油化学工業製）を厚さ２０μｍで押し出しコ
ートした積層紙を基材シートとし、その枡目柄を印刷し
た側のＬＤＰＥコート面に接着層として、ＬＤＰＥ（ミ
ラソン１６ＳＰ）とポリエチレンオキシド（アクアコー
ク住友精化製）を重量比６：４でブレンドした樹脂を
厚さ２０μｍで押し出しコートして積層シートを作成
し、これを縦７ｃｍ×横８ｃｍの長方形にカットした。
次に、吸水性樹脂層としてポリエチレンオキシド（アク
アコーク）単体をインフレーション成形法により厚さ６
０μｍのフィルム状に製膜し、直径６ｃｍの円形に打ち
抜いた後、これを上記７ｃｍ×８ｃｍの長方形にカット
した積層シートの接着層面に、その長辺側の端部１ｃｍ
幅を接合部として残し、残りの７ｃｍ×７ｃｍの中央部
にヒートシーラーで熱接着させて培養装置の本体シート
を作成した。

【００３０】（カバーシートの作成）カバーシートの基
材となるカバーフィルムとして、厚さ５０μｍの２軸延
伸ポリプロピレンフィルム（ＯＰＵ−１トーセロ
製）（片面コロナ放電処理）を用い、そのコロナ放電処
理面に下記組成の培養基層用塗布液をロールコーターに
より乾燥時の塗布量が５．５ｇ／ｍ²となるように塗
布、乾燥して積層し、これを縦７ｃｍ×横８．５ｃｍの
長方形にカットしてカバーシートを作成した。培養基層用塗布液の組成ポリアクリルアミドの１０重量％水溶液１７０重量部ペプトン３０重量部酵母エキス１５重量部ぶどう糖６重量部

【００３１】（染料付き繊維質シートの作成）繊維質シ
ートとして目付け量３０ｇ／ｍ²のレーヨン不織布を用
い、これをＴＴＣの０．０２重量％水溶液に浸漬した
後、引き上げて両面をバーで軽くスクィーズして余分の
液を除き、８０℃で乾燥してＴＴＣを２０ｍｇ／ｍ²付
着させた。次に、これを直径５ｃｍの円形に打ち抜いて
染料付き繊維質シートとした。

【００３２】以上のように作成した本体シート、カバー
シート、染料付き繊維質シートを培養装置の部材とし
て、その本体シートとカバーシートとを、本体シートの
吸水性樹脂層面とカバーシートの培養基層面とが接する
ように長辺側と短辺側を合わせて重ね合わせ、カバーシ
ートの長辺側の一端が０．５cmだけ本体シートから突出
するように、もう一方の端で突き揃えて重ね、突き揃え
た側の端の内面同士を６mm幅の両面粘着テープで接合し
た。尚、本体シートから０．５cm突出したカバーシート
の突出部は、培養などに際してカバーシートを持ち上げ
るための把手とするものである。そして、上記のように
接合した本体シートとカバーシートの間の本体シートの
上の略中央部に染料付き繊維質シートを挿入した後、γ
線照射による滅菌を行って実施例１の培養装置とした。

【００３３】〔実施例２〕（本体シートの作成）基材シートとして、実施例１と同
様に坪量１６０ｇ／ｍ²のコップ原紙の表面にピッチが
各１ｃｍの枡目柄をグラビア印刷方式で印刷し、その両
面にＬＤＰＥ（ミラソン１６ＳＰ三井石油化学工業
製）を厚さ２０μｍに押し出しコートした積層紙を用
い、その枡目柄を印刷した側のＬＤＰＥコート面にコロ
ナ放電処理を施した後、その面に実施例１で用いた培養
基層用塗布液と同じ組成の培養基層用塗布液を乾燥時の
塗布量が５．５ｇ／ｍ²となるようにロールコーターで
塗布、乾燥して培養基層を積層し、これを縦７ｃｍ×横
８ｃｍの長方形にカットして本体シートを作成した。

【００３４】（カバーシートの作成）厚さ２５μｍの２
軸延伸ポリプロピレンフィルム（ＯＰＵ−１トーセ
ロ製）（片面コロナ放電処理）をカバーフィルムに用
い、そのコロナ放電処理面に接着層として、ポリプロピ
レン（ハイポールＬ−８４０三井石油化学工業製）と
ポリエチレンオキシド（アクアコーク住友精化製）を
重量比１０：４でブレンドした樹脂をインフレーション
成形法で厚さ２０μｍに製膜したフィルムをウレタン系
接着剤を用いてドライラミネーション方式で貼り合わせ
た。そして、この積層シートを縦７ｃｍ×横８．５ｃｍ
の長方形にカットした。次に、吸水性樹脂層としてポリ
エチレンオキシド（アクアコーク）単独をインフレーシ
ョン成形法で厚さ６０μｍに製膜したフィルムを直径６
ｃｍの円形に打ち抜き、これを上記７ｃｍ×８．５ｃｍ
の長方形にカットした積層シートの接着層面に、その長
辺側の一方の端部１ｃｍ幅を本体シートとの接合部とし
て残し、もう一方の端部０．５ｃｍ幅を本体シートから
突出させる把手部として残し、残りの７ｃｍ×７ｃｍの
中央部にヒートシーラーで熱接着させてカバーシートを
作成した。

【００３５】（染料付き繊維質シート）染料付き繊維質
シートには、実施例１で作成した染料付き繊維質シート
と同じものをそのまま使用した。以上のように作成した
本体シート、カバーシート、染料付き繊維質シートを培
養装置の部材として実施例１と同様に、本体シートの培
養基層とカバーシートの吸水性樹脂層面とが接するよう
に長辺側と短辺側を合わせて重ね合わせ、その長辺側の
一端で突き揃えた後、その突き揃えた側の端部の内面同
士を６mm幅の両面粘着テープで接合した。尚、突き揃え
た側と反対側の端部にはカバーシートが０．５ｃｍだけ
本体シートから突出しており、この部分はカバーシート
を持ち上げる際の把手部として利用するものである。上
記のように接合した本体シートとカバーシートの間の本
体シートの培養基層の上の略中央部に、直径５ｃｍの円
形にカットした染料付き繊維質シートを挿入した後、γ
線照射による滅菌を行って実施例２の培養装置とした。

【００３６】〔実施例３〕（本体シートの作成）基材シートには、実施例１と同じ
コップ原紙の表面に枡目柄を印刷し、その両面にＬＤＰ
Ｅを各２０μｍ押し出しコートした積層紙を使用し、そ
の枡目柄を印刷した側のＬＤＰＥコート面に、接着層と
してＬＤＰＥ（ミラソン１６ＳＰ）とポリエチレンオキ
シド（アクアコーク）を重量比６：４でブレンドした樹
脂を厚さ２０μｍで押し出しコートし、その上に吸水性
樹脂層としてポリエチレンオキシド（アクアコーク）単
体を厚さ６０μｍで押し出しコートして積層し、更にそ
の上に培養基層として実施例１のカバーシートで用いた
ものと同じ組成の培養基層用塗布液をロールコーターで
乾燥時の塗布量が５．５ｇ／ｍ²となるように塗布、乾
燥して培養基層を積層した後、これを縦７ｃｍ×横８ｃ
ｍの長方形にカットして本体シートを作成した。

【００３７】（カバーシートの作成）カバーシートの基
材となるカバーフィルムとして厚さ５０μｍの２軸延伸
ポリプロピレンフィルム（ＯＰＵ−１トーセロ製）
（片面コロナ放電処理）を使用し、そのコロナ放電処理
面に染料層として下記の組成の染料層用塗布液をリバー
スロールコーターにより乾燥前の溶剤込みの塗布量が１
０ｇ／ｍ²となるように塗布し、乾燥して積層シートと
した後、これを縦７ｃｍ×横８．５ｃｍの長方形にカッ
トしてカバーシートとした。染料層用塗布液の組成ポリアクリルアミド１０重量％水溶液１０００重量部染料ＴＴＣ１重量部

【００３８】（繊維質シート）繊維質シートには、目付
け量３０ｇ／ｍ²のレーヨン不織布を使用し、これを直
径５ｃｍの円形に打ち抜いて繊維質シートとした。以上
のように作成した本体シート、カバーシート、繊維質シ
ートを培養装置の部材として、実施例１および２の場合
と同様に、本体シートの培養基層面とカバーシートの染
料層面とが接するように両者の長辺側と短辺側同士を合
わせて重ね合わせ、その長辺側の一端で突き揃えてその
端部の内面同士を６mm幅の両面粘着テープで接合した。
この場合もカバーシートの接合部の反対側の端部は０．
５ｃｍだけ本体シートから突出した形状となり、この突
出部はカバーシートを持ち上げる際の把手部とするもの
である。次に、上記のように接合した本体シートとカバ
ーシートの本体シート側の最上層である培養基層の上の
略中央部に、上記繊維質シートを挿入して重ねた後、γ
線を照射して滅菌を行い実施例３の培養装置とした。

【００３９】〔培養試験およびその結果〕以上のように
作成した実施例１、２、３の培養装置各５個を使用し
て、下記の方法で作成した菌液を滅菌済みピペットで各
１ml宛、それぞれの培養装置の繊維質シート上に接種
し、カバーシートを被せた後、３７℃に調節した孵卵器
に入れて４８時間培養を行った。また、実施例とは別
に、比較用として実施例と同じ下記の方法で作成した菌
液を用いて、各１mlを従来の混釈法により、５個のペト
リ皿に準備した標準寒天培地各２０mlに混釈して比較試
料を作成し、実施例と同じ条件で培養を行った。

【００４０】菌液の作成菌株として大腸菌を使用し、液体培地（NUTRIENT BROT
H）にて３７℃で２４時間、振盪培養を行い、その菌液
を滅菌生理食塩水で菌数が１０²／mlとなるように希釈
して、培養試験に用いる菌液とした。上記の実施例１、
２、３および比較試料の培養試験により発生したコロニ
ーの数をそれぞれ計数し、各々のデータと平均値を表１
に示した。（以下余白）

【００４１】

【表１】菌数測定結果（大腸菌）〔単位：個〕

【００４２】表１に示した培養試験結果から明らかなよ
うに、本発明の実施例１、２、３の培養装置を用いた培
養試験の結果は、従来の混釈法による標準寒天培地を用
いた培養試験の結果と略一致しており、培養性能が良好
で、操作も容易で簡便な培養装置として十分実用性のあ
ることを示している。また、発生したコロニーも鮮明に
観察でき、計数も容易に実施できた。更に、実施例１〜
３の各試料は、培養後、そのカバーシートを容易に剥が
すことができ、釣菌することも容易であった。

【００４３】

【発明の効果】以上詳しく説明したように本発明によれ
ば、微生物の培養に際して、培養装置のカバーシートを
持ち上げて、本体シート上に設けられた繊維質シートの
上にピペットなどにより一定量の被検液を接種し、カバ
ーシートを降ろすだけで、被検液が所定寸法の繊維質シ
ートの全域に繊維間の毛細管現象により均一に拡散し、
近接する培養基や染料を溶解すると同時に、吸水性樹脂
層を膨潤、ゲル化させ、微生物に栄養分と水分とを供給
できるようになり、培養が可能となる。従って、培地を
調整するための加温溶解や高圧滅菌などの操作が不要で
あり、熟練した技術者でなくても容易に微生物検査など
の培養試験を行うことができる。そして、使用前は、滅
菌された乾燥状態であり長期保存も可能で、何時でも迅
速に試験することができる。

【００４４】また、繊維質シートは比較的薄く透視可能
であり、ゲルを形成する材料がポリエチレンオキシドな
どの吸水性樹脂であるため、ゲル化した場合も繊維質シ
ートと強く粘着することがなく、均一に分散したコロニ
ーを鮮明な状態に形成でき、計数も容易に実施できる。
また、培養後、カバーシートを本体シート側から容易に
剥がすことができるので自由に釣菌することもできる。
また、培養基層にバインダーとしてポリアクリルアミド
を含有させた場合には各種の被積層面に良好な接着性を
有するため培養基の積層が容易となり、また、被検液の
水分により容易に溶解するため培養基の溶解も速やかに
行われる。更に、使用後の廃棄性においても、容易に焼
却することもでき、使用適性と性能に優れた培養装置を
容易に提供できる効果を奏する。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の培養装置の一実施例の構成を説明する
模式断面図である。

【図２】本発明の培養装置の別の一実施例の構成を説明
する模式断面図である。

【図３】本発明の培養装置の更に別の一実施例の構成を
説明する模式断面図である。

【符号の説明】

１基材シート２a 、２b 接着層３吸水性樹脂層４a 、４b 、４c 本体シート５a 繊維質シート（染料付き）５b 繊維質シート６カバーフィルム７培養基層８a 、８b 、８c カバーシート９染料層１０接合部２０培養装置

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】防水性の基材シートと該基材シート上に
被せられる水分不透過性で透明なカバーフィルムとを備
え、該基材シートとカバーフィルムのいずれか一方の内
面、または両方の内面に吸水性樹脂層を積層し、更に、
そのいずれか一方の内面に微生物の培養基層を積層した
後、該基材シート側の内面に繊維質シートを設けたこと
を特徴とする微生物の培養装置。
【請求項２】前記吸水性樹脂層がポリエチレンオキシ
ドからなることを特徴とする請求項１記載の微生物の培
養装置。
【請求項３】前記培養基層がポリアクリルアミドを含
有することを特徴とする請求項１または２に記載の微生
物の培養装置。