FI98379C - Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi - Google Patents

Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI98379C
FI98379C FI951431A FI951431A FI98379C FI 98379 C FI98379 C FI 98379C FI 951431 A FI951431 A FI 951431A FI 951431 A FI951431 A FI 951431A FI 98379 C FI98379 C FI 98379C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
bacteria
nutrient medium
salmonella
medium according
medium
Prior art date
Application number
FI951431A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI951431A (fi
FI951431A0 (fi
FI98379B (fi
Inventor
Helena Tuompo
Leena Scheinin
Marita Jussila
Irmeli Laine
Original Assignee
Orion Yhtymae Oy
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Orion Yhtymae Oy filed Critical Orion Yhtymae Oy
Publication of FI951431A0 publication Critical patent/FI951431A0/fi
Priority to FI951431A priority Critical patent/FI98379C/fi
Priority to PL96317322A priority patent/PL317322A1/xx
Priority to PCT/FI1996/000163 priority patent/WO1996030543A1/en
Priority to US08/737,990 priority patent/US5786167A/en
Priority to JP8528972A priority patent/JP2831474B2/ja
Priority to AU50060/96A priority patent/AU5006096A/en
Priority to EP96906783A priority patent/EP0760866A1/en
Publication of FI951431A publication Critical patent/FI951431A/fi
Priority to NO964957A priority patent/NO964957D0/no
Publication of FI98379B publication Critical patent/FI98379B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI98379C publication Critical patent/FI98379C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C12Q1/10—Enterobacteria
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
    • C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
    • C12Q1/045—Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2334/00—O-linked chromogens for determinations of hydrolase enzymes, e.g. glycosidases, phosphatases, esterases
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/195—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria
    • G01N2333/24—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from bacteria from Enterobacteriaceae (F), e.g. Citrobacter, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella, Yersinia
    • G01N2333/255—Salmonella (G)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/879—Salmonella
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/968—High energy substrates, e.g. fluorescent, chemiluminescent, radioactive

Description

1 98379
ELATUSAINE JA MENETELMÄ SALMONELLOJEN TUNNISTAMISEKSI
Keksinnön kohteena on elatusaine ja menetelmä, jonka avulla voidaan tunnistaa ja erottaa sekä arvioida Salmo-5 neliä sp.:n määrä näytteen muista Gram-negatiivisista, erityisesti Enterobacteriaceae-heimon bakteereista. Keksinnölle on tunnusomaista se, mikä määritellään patenttivaatimuksissa .
10 Infektioita aiheuttavan organismin nopea lajin määritys on tärkeää valittaessa joko sopivaa hoitomuotoa lääkinnässä tai torjuntamuotoa elintarviketeollisuudessa ja muualla ympäristöhygieniassa. Erityisesti salmonellojen jatkuvalla seurannalla ruoka- ja vesinäytteissä pyritään 15 estämään ruokamyrkytysepidemioiden puhkeaminen.
Nykyisin on olemassa ainakin kahdeksan erilaista kaupallisesti saatavaa agarpohjaista alustaa salmonellan kasvattamiseksi ja tunnistamiseksi (Difco Manual, 1984, 20 Difco Laboratories, Detroit, Michigan). Useimmat niistä perustuvat laktoosin käyttökyvyn määrittämiseen ja/tai rikkivedyn tuoton mittaamiseen. Koska useimmat salmonellat ovat laktoosinegatiivisia, eivätkä siis sisällä β-galaktosidaasientsyymiä, kuten useimmat muut Enterobacte- 25 riaceae-heimon bakteerit, voidaan ne helposti erottaa suuresta osasta muita bakteereja β-galaktosidaasinega-tiivisina.
Käytössä oleviin elatusaineisiin on lisätty erilaisia 30 määriä muiden bakteerien kasvua estäviä aineita ts. niis- ’ tä on tehty selektiivisiä siten että vain salmonellat kasvaisivat alustalla. Nämä elatusaineet sisältävät kuitenkin useita rajoituksia. Gram-negatiivisten bakteerien kasvua estävien inhibiittoreiden käyttö ei ole suotavaa, 35 koska ne estävät osittain myös salmonellojen kasvua. Toisinsanoen ne ovat liian selektiivisiä ja siksi joudutaan käyttämään kahta erilaista elatusainetta, joista toinen 2 98379 on vähemmän selektiivinen. Selektiivisemmällä elatusai-neella mitataan rikkivedyn muodostumista, joka ei yksinään ole luotettava menetelmä, koska siihen vaikuttavat monet ulkoiset tekijät kuten hapen määrä ja pH, lisäksi 5 useat kannat muodostavat eri määriä rikkivetyä. Rikkivedyn tuoton mittaaminen yhdistettynä laktoosin tuottoon vähemmän selektiivisellä elatusaineella on myös riittämätön salmonellojen erottamiseen muista luonnossa esiintyvistä bakteereista. Koska mm. Proteus spp. ovat, kuten 10 salmonellat, laktoosinegatiivisia ja tuottavat rikkivetyä, niitä ei tästä syystä voida erottaa salmonelloista kaupallisilla elatusaineilla (Difco Manual).
Edellä mainituilla kaupallisilla elatusaineilla ei voida 15 erottaa pesäkkeitä niiden ulkomuodon perusteella, koska bakteerit kasvavat niillä keskenään samanvärisinä pesäkkeinä. Toisaalta äskettäin kehitetyllä Rambach-agarilla on pyritty parantamaan bakteerien erottumista toisistaan suoraan pesäkkeen värin perusteella (E. Merck, Darmstadt, 20 Germany). Tällä agarilla Salmonella spp. kasvavat vaaleanpunaisina, muut Enterobacteriaceae-heimon bakteerit, kuten useat koliformit kasvavat sinisinä, vihreinä, violetteina tai värittöminä. Rarobach-agarin toiminnassa on hyödynnetty β-galaktosidaasinegatiivisten salmonellojen 25 kykyä käyttää propyleeniglykolia. Propyleeniglykolin hajotessa muodostuu punainen väri indikaattorin läsnäollessa eikä esimerkiksi sinistä väriä. Rambach-agar on hyvin spesifinen muille kuin ryhmän B Salmonella typhi-kannoille. Vääriä positiivisia saadaan vähän Rambach-30 agarilla (Garrick R.G. ja A.D. Smith, Letters Appi.
Microbiol. 18:187-189, 1994). Menetelmän haittana on kuitenkin typhikantojen havaitsematta jääminen.
Näihin havaintoihin perustuen olemme kehittäneet edelleen 35 bakteerien osoitusmenetelmää biologisista näytteistä.
Osoitus voidaan tehdä näytteestä joko suoraan tai esiri-kastuksen jälkeen. Salmonellojen nopeaan tunnistamiseen 3 98379 biologisista näytteistä voidaan myös käyttää muita biokemiallisia reaktioita. Näitä ovat sokerien ja sokerialko-holien käyttökykyyn perustuvat menetelmät kuten melibi-oosin, mannitolin ja sorbitolin käyttö bakteerien identi-5 fioinnissa (Bergey's Manual of Systematic Bacteriology,
Voi. 1. s. 408. Toim. R.G.E. Murray ym. Kust. William & Wilkins, Baltimore, USA, 1984) . Kehitystyön tuloksena totesimme, että myös Salmonella typhi-kannat voidaan saada tunnistettua koska ne fermentoivat mannitolia ja sorbito-10 lia.
Salmonellojen melibioosin, mannitolin ja sorbitolin käyttö yhdistettynä β-galaktosidaasiaktiivisuuden puuttumiseen erottaa ne muista Enterobacteriaceae-heimon jäsenis-15 tä. Agariin lisätyn pH-indikaattorin avulla, kuten neut- raalipunalla, salmonellat värjäytyvät kirkkaanpunaisiksi tuottaessaan happoa melibioosista ja sokerialkoholeista. Hapot laskevat pH:ta Salmonella spp. pesäkkeiden ympärillä ja ainoastaan salmonellat näkyvät kirkkaanpunaisina 20 pesäkkeinä neutraalipunan läsnäollessa. Tunnusomaista muille Enterobacteriaceae-heimon β-galaktosidaasinega-tiivisille bakteereille, kuten esim. Proteus sp.-kannoille on se, että ne näkyvät viljelyalustalla värittöminä, koska ne eivät fermentoi melibioosia tai edellä 25 mainittuja sokerialkoholeja. β-galaktosidaasipositiiviset
Enterobacteriaceae-heimon bakteerit värjäytyvät toisenvä-risiksi kuin salmonellat. Esittämässämme menetelmässä ne värjäytyvät ruskeiksi käytettäessä kromogeenista 8- hydroksikinoliini^-D-galaktosidia, galaktosidaasiaktii-30 visuutta mittaavaa substraattia.
t
Kehitetyn menetelmän etuna on myös se, että kaikki ela-tusaineeseen tarvittavat aineet voidaan sekoittaa etukäteen keskenään kuivaseokseksi ns. valmisjauheseokseksi, 35 johon lisätään vain vesi ennen autoklavointia ja valua maljoiksi. Markkinoilla olevien vastaavien tuotteiden kaikkia komponentteja ei voida sekoittaa etukäteen keske- 4 98379 nään kuivaseokseksi. Esimerkiksi Rambach-agar koostuu jauheesta ja nestemäisestä propyleeniglykolista. Toinen kehitetyn menetelmän etu on valmiin elatusaineen säilyvyys. Elatusaine säilyy ainakin yli seitsemän kuukautta.
5 Hyvin pakattuna se säilyy myös valmiina alustana, joko maljoina tai kastolevyinä. Erityisesti 8-hydroksikino-liini-P-D-galaktosidi on säilyvä, toisin kuin muut esimerkiksi Rambach-agarilla käytetty kromogeeninen indoli-substraatti.
10
Seuraavassa keksintöä kuvataan yksityiskohtaisesti esimerkkien valossa.
15 Esimerkki l.
Kokeissa käytettiin bakteereita, jotka ovat ripulitaudeissa yleisesti esiintyviä kliinisiä kantoja. Salmonel-lakannat (212 kpl), niiden identifiointi- ja lajityypi-20 tystulokset oli saatu Suomen Kansanterveyslaitoksen bak-teriologian osastolta. Salmonelloista 100 kpl kuului ryhmään Salmonella enterica ssp. enterica (serotyypit Ente-ritidis, Typhimurium ja Infantis) , jotka ovat yleisimpiä ripulitaudeissa esiintyviä bakteerikantoja. Lisäksi 112 25 kpl kuului useisiin muihin eri salmonellaserotyyppeihin.
Elatusaine- ja menetelmäkehityksessä käytettiin myös American Type Culture Collection (ATCC) tyyppikantoja seuraavasti: Gram-negatiivisia bakteereja kuten, Salmonella typhimurium (ATCC 14028), Escherichia coli (ATCC 27922), 30 Klebsiella pneumoniae (ATCC 13883), Proteus mirabilis (ATCC 12453), Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Ente-robacter aerogenes (ATCC 13048) , ja Gram-positiivisia bakteereja kuten, Staphylococcus aureus (ATCC 25922), Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus epidermidis,
35 Streptococcus agalactiae, Streptococcus faecium (ATCC
9790), beta-hemolyyttinen Streptococcus sp., B-ryhmä, Enterococcus sp. ja Corynebcterium sp.
5 98379
Bakteerit kasvatettiin 24 tuntia Brain Heart Infusion liuoksessa (BHI, Difco, Detroit), 37 °C lämpötilassa. Bakteeritiheys säädettiin BHIrsta laimentamalla konsent-
Q
5 raatioon 10 bakteeria/ml steriiliä 0.9 % NaCl, josta suspenssiota laimennettiin edelleen 0.9% NaCl:lla. Näitä laimennoksia siirrostettiin keksinnön kohteena olevalle kiinteälle agarpohjaiselle elatusaineelle, jonka koostumus on esitetty Taulukossa 1. Keksinnön kohteena olevalle 10 elatusaineelle on tunnusomaista mm. se, että elatusaine sisältää tunnettujen komponenttien lisäksi mannitolia, melibioosia, sorbitolia ja 8-hydroksikinoliini-beta-D-galaktosidia. Siirrostettuja bakteereja inkuboitiin 37 °C:ssa 24 tunnista 48 tuntiin. Siirrosten bakteerimäärä 15 tarkistettiin tekemällä käytettävistä laimennussarjoista viljely myös yleiselatusaineelle ilman selektiivisiä aineita kuten ravintoagarille, jolta bakteerit laskettiin pesäkeluku/ml kohti.
20 Taulukko 1. Elatusaineen koostumus, pH 7.5-8.0.
Ravinteet ja muut Määrä g/1 lisäaineet . Tryptoni (Difco) 15.0
Soija peptoni (Oxoid) 5.0
Mannitoli (Fluka) 10.0
Melibioosi (Fluka) 10.0
Sorbitoli (Fluka) 10.0 , Agar agar (Oxoid) 22.0
Sappisuoloja (BBL) 1.8 8-hydroksikino1iini-beta-D-galaktosidi (Biosynth) 0.5
Ferrisitraatti (Merck) 1.0
Neutraalipuna (Merck) 0.02
Tislattu vesi 1000 ml 98379
Elatusaineen pH voi olla välillä 7.5-8.0., suotavammin 7.8-8.0.
5 Esimerkki 2.
Taulukon 1 mukaiset aineet punnittiin, sekoitettiin tislattuun veteen, liuotettiin kuumentamalla ja autoklavoi-tiin 15 min 121 °C, jonka jälkeen agarseos valettiin mal- 10 joille. Bakteerit esikasvatettiin suspensioina ja laimen nettiin sopivaan käyttökonsentraatioon Esimerkki l:n mukaan.
Taulukosta 2 voimme todeta, että Gram-negatiiviset bak-15 teerit kasvoivat yhtä hyvin keksinnön kohteena olevalla elatusaineella kuin ravintoagarilla. Lisäksi taulukosta nähdään, että Gram-positiivisten bakteereiden kasvu estyi sappisuolojen vaikutuksesta. Punaisina pesäkkeinä näkyi vain Salmonella typhimurium kun muut β-galaktosidaasi-20 negatiiviset Proteus mirabilis- ja Pseudomonas aerugin- osa-pesäkkeet olivat värittömiä, β-galaktosidaasiposi-tiiviset koliformit kuten Echerichia coli ja Klebsiella pneumoniae näkyivät elatusaineella ruskeina pesäkkeinä.
25 30 35 5 98379
Taulukko 2. Gram-negatiivisten ja Gram-positiivisten bak-teeripesäkkeiden väri ja bakteerien lukumäärä Taulukon 1 mukaisella elatusaineella verrattuna ravintoagariin.
UUSI RAVINTO-
ELATUSAINE AGAR
pesäkkeen BAKTEERI bakt/ml väri bakt/ml
Gram-negatiiviset bakteerit:
Salmonella typhimurium (ATCC 14028) 105 punainen 105
Escherichia coli (ATCC 27922) 105 ruskea 105
Klebsiella pneumoniae (ATCC 13883) 105 ruskea 105
Proteus mirabilis (ATCC 12453) 105 väritön 105
Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853) 105 väritön 105
Enterobacter aerogenes (ATCC 13048) 105 ruskea 105
Gram-positiiviset bakteerit:
Staphylococcus aureus (ATCC 25922) 0 105
Staphylococcus saprophyticus 0 105 ‘ Staphylococcus epidermidis 0 105
Streptococcus agalactiae 0 105
Streptococcus faecium (ATCC 9790) 0 105
Streptococcus sp., B-ryhmä, 0 105 5
Enterococcus sp. O 10
Corynebcterium sp. O 105 8 98379
Esimerkki 3.
Taulukossa 3 on esitetty Gram-negatiivisten bakteerien kasvutulokset ja värireaktiot keksinnön kohteena olevalla 5 elatusaineella.
Taulukko 3. Testattujen bakteerikantojen lukumäärä ja pesäkkeiden väri kasvualustalla.
10
Baktee- Kirkkaan- Ruskea Väritön rien lu- punainen pesäke pesäke kumäärä pesäke
Salmonella sp. 213 211 2** o
Muut
Enterobacteriaceae-heiraoon kuuluvat:
Escherichia coli 33 0 33 0
Proteus sp. 13 0 0 13
Klebsiella sp. 8 2* 6 0
Enterobacter sp. 3 0 30
Citrobacter sp. 2 0 20
Serratia sp. l 0 01 * vaaleanpunertava pesäke ** β-galaktosidaasipositiivinen kanta
Taulukosta voidaan todeta, että 211 kpl Salmonella sp. kantaa kasvoi kirkkaanpunaisina pesäkkeinä ja kaksi Klebsiella sp. kantaa kasvoi vaaleanpunertavina pesäkkeinä 15 » 98379 keksinnön kohteena olevalla elatusaineella. Kaksi salmonella kantaa oli β-galaktosidaasipositiivisia ja ne kas- voivat ruskeina pesäkkeinä kuten muut β-galaktosidaasipositiiviset bakteerikannat, mm. Escherich-5 ia coli sp. Galaktosidaasinegatiiviset bakteerit, kuten Proteus sp. , ja Serratia sp. kasvoivat värittöminä pesäkkeinä .
10 15 20 25 30 35

Claims (13)

98379 10
1. Menetelmä Salmonella spp. bakteerien erottamiseksi muista Enterobacteriaceae-heimon bakteereista, tunnettu siitä, 5 että - maljataan analyysinäyte kiinteälle elatusaineelle, joka sisältää melibioosia, mannitolia ja sorbitolia, pH-indi-kaattoria ja kromogeenista substraattia, joka ilmaisee kaikki /3-galaktosidaasipositiiviset bakteerit, 10. viljellään mainittuja bakteereita ja tunnistetaan Salmonella spp. bakteerit kirkkaanpunaisina pesäkkeinä.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu 15 siitä, että kromogeeninen substraatti on 8-hydroksikinolii- ni-jS-D-galaktosidi.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että elatusaine lisäksi sisältää Gram-posi- 20 tiivisten bakteerien kasvua estäviä aineita.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kasvua estävät aineet ovat sappisuoloja tai anionisia detergenttejä. 25
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että käytetty pH-indikaattori on neutraalipuna.
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu 30 siitä, että analyysinäyte on kehon elin- tai nestenäyte tai elintarvike-, ympäristö- tai teollisuusnäyte.
7. Kiinteä elatusaine Salmonella spp. bakteerien erottamiseksi muista Enterobacteriaceae-heimon bakteereista, tun- 35 nettu siitä, että elatusaine sisältää melibioosia, mannito lia ja sorbitolia, kromogeenista substraattia, joka ilmaisee kaikki jS-galaktosidaasipositiiviset bakteerit, pH-indi- 11 98379 kaattoria ja tavanomaisia kiinteytysaineita ja kasvutekijöitä.
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen elatusaine, tunnettu 5 siitä, että kromogeeninen substraatti on 8-hydroksikinolii- ni-/3-D-galaktosidi.
9. Patenttivaatimuksen 7 tai 8 mukainen elatusaine, tunnettu siitä, että se lisäksi sisältää Gram-positiivisten 10 bakteerien kasvua estäviä aineita.
10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen elatusaine, tunnettu siitä, että kasvua estävät aineet ovat sappisuoloja tai anionisia detergenttejä. 15
11. Patenttivaatimuksen 7 mukainen elatusaine, tunnettu siitä, että sen pH on 7,5 - 8,0.
12. Jonkin patenttivaatimuksista 7-11 mukainen elatusaine, 20 tunnettu siitä, että se on kuivaseoksena, eli ns. valmis- j auheseoksena.
13. Jonkin patenttivaatimuksista 7-11 mukainen elatusaine, tunnettu siitä, että se on käyttövalmiina kasvualustana 25 joko petrimaljalla tai kastolevyllä. 98379 12
FI951431A 1995-03-24 1995-03-24 Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi FI98379C (fi)

Priority Applications (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI951431A FI98379C (fi) 1995-03-24 1995-03-24 Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi
JP8528972A JP2831474B2 (ja) 1995-03-24 1996-03-20 サルモネラ菌の同定法および培地
PCT/FI1996/000163 WO1996030543A1 (en) 1995-03-24 1996-03-20 Method and culture medium for identification of salmonellae
US08/737,990 US5786167A (en) 1995-03-24 1996-03-20 Method and culture medium for identification of salmonellae
PL96317322A PL317322A1 (en) 1995-03-24 1996-03-20 Method of identifying bacteria of salmonella type and culture medium therefor
AU50060/96A AU5006096A (en) 1995-03-24 1996-03-20 Method and culture medium for identification of salmonellae
EP96906783A EP0760866A1 (en) 1995-03-24 1996-03-20 Method and culture medium for identification of salmonellae
NO964957A NO964957D0 (no) 1995-03-24 1996-11-21 Fremgangsmåte og kulturmedium for identifisering av salmonellae

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI951431 1995-03-24
FI951431A FI98379C (fi) 1995-03-24 1995-03-24 Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI951431A0 FI951431A0 (fi) 1995-03-24
FI951431A FI951431A (fi) 1996-09-25
FI98379B FI98379B (fi) 1997-02-28
FI98379C true FI98379C (fi) 1997-06-10

Family

ID=8543126

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI951431A FI98379C (fi) 1995-03-24 1995-03-24 Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi

Country Status (8)

Country Link
US (1) US5786167A (fi)
EP (1) EP0760866A1 (fi)
JP (1) JP2831474B2 (fi)
AU (1) AU5006096A (fi)
FI (1) FI98379C (fi)
NO (1) NO964957D0 (fi)
PL (1) PL317322A1 (fi)
WO (1) WO1996030543A1 (fi)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9617495D0 (en) * 1996-08-21 1996-10-02 Univ Lincolnshire & Humberside Method of and growth medium for detecting micro-organisms in a sample
FR2763342B1 (fr) * 1997-05-13 2000-11-03 Biochimie Appliquee Soc Milieu de culture pour la detection specifique des enterobacteries, procede pour son obtention et son utilisation
DK0961834T3 (da) 1997-06-04 2003-09-01 Newcastle Upon Tyne Hospitals Identifikation af salmonella
US6821770B1 (en) 1999-05-03 2004-11-23 Gen-Probe Incorporated Polynucleotide matrix-based method of identifying microorganisms
AU5267800A (en) 1999-05-03 2000-11-17 Gen-Probe Incorporated Polynucleotide probes for detection and quantitation of bacteria in the family enterobacteriaceae
GB9913856D0 (en) * 1999-06-15 1999-08-11 Int Diagnostics Group Plc Detection of microorganisms
US6350588B1 (en) * 1999-07-20 2002-02-26 Micrology Laboratories, Llc Test media and quantitative or qualitative method for identification and differentiation of biological materials in a test sample
US7344854B2 (en) 1999-07-20 2008-03-18 Micrology Laboratories, Llc Test media for quantitative or qualitative identification and differentiation of general coliforms, E. coli, Aeromonas spp and Salmonella spp in a test sample
US7273719B2 (en) * 1999-07-20 2007-09-25 Micrology Laboratories, Llc Test media for quantitative or qualitative identification and differentiation of general coliforms, E coli, Aeromonas spp and Salmonella spp materials in a test sample
CU22808A1 (es) * 2000-04-18 2005-06-24 Ct Nac Biopreparados Composición y método para la detección y recuento diferenciado y temprano de organismos microscópicos gram-negativos
CU22789A1 (es) * 2000-06-29 2002-07-24 Ct Nac Biopreparados Mezcla nutritiva y procedimiento para la identificación y recuento temprano de organismos gram-negativos
CU22844A1 (es) * 2000-09-07 2004-02-20 Ct Nac Biopreparados Medio de cultivo y método para la identificación de microorgnismos gram-negativos
DE60144483D1 (de) 2000-09-18 2011-06-01 Newcastle Upon Tyne Hospitals Nat Health Service Trust Selektive wachstumsmedien
FR2816956B1 (fr) * 2000-11-17 2004-08-20 Bio Merieux Procede et milieu de detection/identification de bacteries a activite esterasique
JP2002171962A (ja) * 2000-12-05 2002-06-18 Nissui Pharm Co Ltd サルモネラ分離用培地
BRPI0818959B8 (pt) 2007-11-20 2018-10-30 3M Innovative Properties Co método para detecção de espécies de listeria em uma superfície ambiental
WO2009082667A1 (en) 2007-12-21 2009-07-02 3M Innovative Properties Company Microbiological systems and methods of fluid sample analysis
GB0820398D0 (en) * 2008-11-07 2008-12-17 Oxoid Ltd Semi-opaque medium for culture of microorganisms
US8846334B2 (en) 2009-06-15 2014-09-30 3M Innovative Properties Company Detection of acid-producing bacteria
BR112012016132A2 (pt) 2009-12-30 2020-09-08 3M Innovative Properties Company artigo de detecção microbiana
RU2013130657A (ru) 2010-12-30 2015-02-10 Эм Инновейтив Пропертиз Компани Изделие и способ для обнаружения целевого микроорганизма
FR2970974B1 (fr) 2011-02-01 2013-02-08 Biomerieux Sa Milieu de culture de microorganismes comprenant l'acide para-aminobenzoique comme agent selectif
WO2012161992A1 (en) * 2011-05-20 2012-11-29 3M Innovative Properties Company Salmonella detection articles and methods of use
JP2013039063A (ja) * 2011-08-12 2013-02-28 Nissui Pharm Co Ltd サルモネラ検出用培地
EP2798075B1 (en) 2011-12-28 2018-08-15 3M Innovative Properties Company Method of detecting a salmonella microorganism
AU2012362716A1 (en) * 2011-12-28 2014-07-17 3M Innovative Properties Company Method of detecting a Salmonella microorganism
US10604783B2 (en) 2013-09-30 2020-03-31 Mississippi State University Vibrio assay methods and kits
JP2019024418A (ja) * 2017-07-31 2019-02-21 公立大学法人大阪府立大学 選択分離用培地

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3879601A (en) * 1973-01-29 1975-04-22 Veeder Industries Inc Electromagnetically powered drive for a high speed counter
US3936356A (en) * 1973-04-10 1976-02-03 Analytab Products Inc. Profile recognition method and apparatus for identifying bacteria
US3957584A (en) * 1974-09-30 1976-05-18 Warner-Lambert Company Detection of beta-galactosidase producing micro-organisms
FR2457323A1 (fr) * 1979-05-25 1980-12-19 Api Labor Test permettant la mise en evidence des bacteries du genre salmonella et serratia et leur distinction des genres proteus et providencia
US4279995A (en) * 1979-12-03 1981-07-21 Mcdonnell Douglas Corporation Selective salmonella carbohydrate and medium constructed therefrom
ATE78516T1 (de) * 1988-02-04 1992-08-15 Biolife Italiana Srl Verfahren zur unmittelbaren identifikation von salmonella.
US5208150A (en) * 1989-03-30 1993-05-04 The University Of Maryland Salmonella-Selective plating medium
US5194374A (en) * 1989-04-27 1993-03-16 Eurec Isolating medium for identifying the salmonella bacterium
FR2649410B2 (fr) * 1989-04-27 1994-08-19 Eurec Perfectionnement d'un milieu d'isolement pour l'identification de la bacterie salmonella
FR2671100B1 (fr) * 1990-12-28 1993-03-05 Bio Merieux Procede d'analyse bacteriologique, et milieu de detection des bacteries genre salmonella.
FR2697028B1 (fr) * 1992-10-20 1995-01-06 Alain Rambach Milieu de culture pour la mise en évidence de Salmonella et procédé pour son utilisation.
DK63093D0 (da) * 1993-06-02 1993-06-02 Foss Electric As Improved method
US5464755A (en) * 1994-04-29 1995-11-07 Biolog, Inc. Microbiological medium and method of assay

Also Published As

Publication number Publication date
PL317322A1 (en) 1997-04-01
FI951431A (fi) 1996-09-25
NO964957L (no) 1996-11-21
FI951431A0 (fi) 1995-03-24
AU5006096A (en) 1996-10-16
FI98379B (fi) 1997-02-28
NO964957D0 (no) 1996-11-21
JPH09511917A (ja) 1997-12-02
JP2831474B2 (ja) 1998-12-02
US5786167A (en) 1998-07-28
EP0760866A1 (en) 1997-03-12
WO1996030543A1 (en) 1996-10-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI98379C (fi) Elatusaine ja menetelmä salmonellojen tunnistamiseksi
Paul Culture media
Shungu et al. Gelrite as an agar substitute in bacteriological media
US8404460B2 (en) Method for detecting and/or identifying Clostridium difficile
RU2342435C2 (ru) Селективная культуральная среда для выделения и выявления видов рода streptococcus
EP1970450B1 (en) Nutrient medium for yeast culture
EP1300471B1 (en) Nutritional mixture and method for early identification and count of gram-negative organisms
EP1323832B1 (en) Culture medium and method for identifying gram-negative microorganisms
Mandal et al. Isolation and characterization of multi-drug resistance proteus vulgaris from clinical samples of UTI infected patients from midnapore, west bengal
US5132288A (en) Method for controlling Salmonella enteritidis in poultry
Kayser et al. Growth inhibition of staphylococci by sodium thiosulphate
Magalhães et al. Traditional methods for isolation of Listeria monocytogenes
KR100955884B1 (ko) 살리신을 이용한 엔테로박터 사카자키의 검출방법 및 이를이용한 엔테로박터 사카자키의 선택배지
RU2812423C1 (ru) Дифференциально-селективная питательная среда для выделения шигелл и сальмонелл сухая (Гектоеновый энтеро-агар)
US20030044882A1 (en) Composition and method for detecting and early and differentiated counting of gram-negative microorganisms
RU2715329C1 (ru) Питательная среда для выделения и идентификации неферментирующих бактерий
JP3380956B2 (ja) 黄色ブドウ球菌の検出培地
RU2233885C2 (ru) Питательная среда для выделения шигелл и сальмонелл
RU2710160C1 (ru) Питательная среда для выделения Pseudomonas aeruginosa из водных объектов
Ketbumrung Lactic acid bacteria inhibition on foodborne pathogenic biofilm formation
Zaki Probiotics’ Antibacterial Activity on Beef and Camel Minced Meat at Altered Ranges of Temperature
SU1693062A1 (ru) Питательна среда дл вы влени тиолзависимых гемолизинов энтеробактерий
CZ33338U1 (cs) Kultivační půda pro odlišení Staphylococcus epidermidis od jiných druhů rodu Staphylococcus
Liter Directions for Preparation from Dehydrated Product
HU194302B (en) New plate culture medium and process for improved isolating salmonella species

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application