JP2002171962A - サルモネラ分離用培地 - Google Patents
サルモネラ分離用培地Info
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- JP2002171962A JP2002171962A JP2000369689A JP2000369689A JP2002171962A JP 2002171962 A JP2002171962 A JP 2002171962A JP 2000369689 A JP2000369689 A JP 2000369689A JP 2000369689 A JP2000369689 A JP 2000369689A JP 2002171962 A JP2002171962 A JP 2002171962A
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 糖類の利用性により大腸菌群とサルモネ
ラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産生能の有無を確認で
きる腸内細菌分離用培地であって、発色性α-ガラクト
シダーゼ基質を含有することを特徴とするサルモネラ分
離用培地；当該サルモネラ分離用培地に、検体を接種し
て培養した後、当該培地上の着色コロニーの有無によ
り、硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産生又は弱
産生性サルモネラを区別して検出することを特徴とする
サルモネラの検出法。 【効果】 本発明のサルモネラ分離用培地は、食品、
水、環境及び臨床材料から硫化水素非産生又は弱産生性
サルモネラを分離・検出する場合に特に有用である。
ラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産生能の有無を確認で
きる腸内細菌分離用培地であって、発色性α-ガラクト
シダーゼ基質を含有することを特徴とするサルモネラ分
離用培地；当該サルモネラ分離用培地に、検体を接種し
て培養した後、当該培地上の着色コロニーの有無によ
り、硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産生又は弱
産生性サルモネラを区別して検出することを特徴とする
サルモネラの検出法。 【効果】 本発明のサルモネラ分離用培地は、食品、
水、環境及び臨床材料から硫化水素非産生又は弱産生性
サルモネラを分離・検出する場合に特に有用である。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、食品、水、環境及
び臨床材料からサルモネラを分離・検出するためのサル
モネラ分離用培地に関する。
び臨床材料からサルモネラを分離・検出するためのサル
モネラ分離用培地に関する。
【０００２】
【従来の技術】サルモネラは食中毒原因菌、ヒト及び動
物のチフス症原因菌として広く知られており、その検出
は日常検査として重要である。特に鶏肉、豚肉、牛肉、
卵、惣菜、飲料水、牛乳等の食品がサルモネラに汚染さ
れているか否かの検査は食品衛生法による規制もあり、
日常検査として義務づけられている。
物のチフス症原因菌として広く知られており、その検出
は日常検査として重要である。特に鶏肉、豚肉、牛肉、
卵、惣菜、飲料水、牛乳等の食品がサルモネラに汚染さ
れているか否かの検査は食品衛生法による規制もあり、
日常検査として義務づけられている。
【０００３】従来、サルモネラを分離・検出するための
培地としては、サルモネラの硫化水素産生能を利用し、
硫化鉄等の生成によるコロニーの黒色化の有無を観察す
るものが一般的であり、例えばＳＳ寒天培地、ＤＨＬ寒
天培地、ＭＬＣＢ寒天培地、ＸＬＤ寒天培地等が知られ
ている。しかし、近年、硫化水素非産生又は弱産生性サ
ルモネラの存在が報告され、上記の培地を用いただけで
はサルモネラを完全に検出することは不可能となってい
る。
培地としては、サルモネラの硫化水素産生能を利用し、
硫化鉄等の生成によるコロニーの黒色化の有無を観察す
るものが一般的であり、例えばＳＳ寒天培地、ＤＨＬ寒
天培地、ＭＬＣＢ寒天培地、ＸＬＤ寒天培地等が知られ
ている。しかし、近年、硫化水素非産生又は弱産生性サ
ルモネラの存在が報告され、上記の培地を用いただけで
はサルモネラを完全に検出することは不可能となってい
る。
【０００４】一方、酵素基質含有培地でサルモネラを検
出する方法も知られており、例えば、サルモネラの特異
酵素を利用する「クロモアガーサルモネラ」（関東化学
（株））や、エスクレチン誘導体（３，４−シクロヘキ
セノエスクレチン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド）とイ
ンドキシル誘導体（Ｘ−α−ガラクトピラノシド）の２
種類の酵素基質を組み合わせたサルモネラ検出培地（Ｗ
Ｏ９８／５５６４４号公報）等が報告されている。しか
し、このような酵素基質含有培地では、サルモネラの存
在は確認できるものの、当該サルモネラが硫化水素産生
性のものであるか否かは判定することはできない。
出する方法も知られており、例えば、サルモネラの特異
酵素を利用する「クロモアガーサルモネラ」（関東化学
（株））や、エスクレチン誘導体（３，４−シクロヘキ
セノエスクレチン−β−Ｄ−ガラクトピラノシド）とイ
ンドキシル誘導体（Ｘ−α−ガラクトピラノシド）の２
種類の酵素基質を組み合わせたサルモネラ検出培地（Ｗ
Ｏ９８／５５６４４号公報）等が報告されている。しか
し、このような酵素基質含有培地では、サルモネラの存
在は確認できるものの、当該サルモネラが硫化水素産生
性のものであるか否かは判定することはできない。
【０００５】従って、サルモネラを完全に検出でき、し
かも硫化水素産生性のサルモネラと硫化水素非産生又は
弱産生性のサルモネラを区別して分離・検出できる培地
の開発が望まれている。
かも硫化水素産生性のサルモネラと硫化水素非産生又は
弱産生性のサルモネラを区別して分離・検出できる培地
の開発が望まれている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、食品、環境
及び臨床材料から硫化水素産生性サルモネラと硫化水素
非産生又は弱産生性サルモネラを区別して分離・検出で
きるサルモネラ分離用培地を提供することを目的とす
る。
及び臨床材料から硫化水素産生性サルモネラと硫化水素
非産生又は弱産生性サルモネラを区別して分離・検出で
きるサルモネラ分離用培地を提供することを目的とす
る。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、斯かる実
状に鑑み、サルモネラの有する酵素特異性に着目し、鋭
意研究したところ、従来サルモネラの分離・検出に用い
られている腸内細菌分離用培地に、特定の発色酵素基質
を含有させた培地を用いることにより、硫化水素産生性
サルモネラと硫化水素非産生又は弱産生性サルモネラを
簡易且つ確実に分離・検出できることを見出し、本発明
を完成した。
状に鑑み、サルモネラの有する酵素特異性に着目し、鋭
意研究したところ、従来サルモネラの分離・検出に用い
られている腸内細菌分離用培地に、特定の発色酵素基質
を含有させた培地を用いることにより、硫化水素産生性
サルモネラと硫化水素非産生又は弱産生性サルモネラを
簡易且つ確実に分離・検出できることを見出し、本発明
を完成した。
【０００８】すなわち、本発明は、糖類の利用性により
大腸菌群とサルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産
生能の有無を確認できる腸内細菌分離用培地であって、
発色性α-ガラクトシダーゼ基質を含有することを特徴
とするサルモネラ分離用培地を提供するものである。
大腸菌群とサルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産
生能の有無を確認できる腸内細菌分離用培地であって、
発色性α-ガラクトシダーゼ基質を含有することを特徴
とするサルモネラ分離用培地を提供するものである。
【０００９】また本発明は、当該サルモネラ分離用培地
に、検体を接種して培養した後、当該培地上の着色コロ
ニーの有無により、硫化水素産生性サルモネラと硫化水
素非産生又は弱産生性サルモネラを区別して検出するこ
とを特徴とするサルモネラの検出法を提供するものであ
る。
に、検体を接種して培養した後、当該培地上の着色コロ
ニーの有無により、硫化水素産生性サルモネラと硫化水
素非産生又は弱産生性サルモネラを区別して検出するこ
とを特徴とするサルモネラの検出法を提供するものであ
る。
【００１０】
【発明の実施の形態】本発明のサルモネラ分離用培地
は、基礎培地として、糖類の利用性により大腸菌群とサ
ルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産生能の有無を
確認できる腸内細菌分離用培地を用い、これに発色性α
-ガラクトシダーゼ基質を含有させてなるものである。
は、基礎培地として、糖類の利用性により大腸菌群とサ
ルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産生能の有無を
確認できる腸内細菌分離用培地を用い、これに発色性α
-ガラクトシダーゼ基質を含有させてなるものである。
【００１１】本発明の発色性α-ガラクトシダーゼ基質
とは、α-ガラクトシダーゼによって色原体化合物を培
地中に遊離し発色するものであり、例えば、インドキシ
ル−α−ガラクトシド誘導体、ナフチル−α−ガラクト
シド誘導体、具体的には、マジェンタ-α-Ｇａｌ（５−
ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラ
クトピラノシド）、Ｘ-α-Ｇａｌ（５−ブロモ−４−ク
ロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ド）、サーモン-α-Ｇａｌ（６−クロロ−３−インドキ
シル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド）、１−ナフチル−
α−Ｄ−ガラクトピラノシド等が挙げられ、培地中にお
ける鑑別性の点からマジェンタ-α-Ｇａｌ及びＸ-α-Ｇ
ａｌが特に好ましい。
とは、α-ガラクトシダーゼによって色原体化合物を培
地中に遊離し発色するものであり、例えば、インドキシ
ル−α−ガラクトシド誘導体、ナフチル−α−ガラクト
シド誘導体、具体的には、マジェンタ-α-Ｇａｌ（５−
ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラ
クトピラノシド）、Ｘ-α-Ｇａｌ（５−ブロモ−４−ク
ロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ド）、サーモン-α-Ｇａｌ（６−クロロ−３−インドキ
シル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド）、１−ナフチル−
α−Ｄ−ガラクトピラノシド等が挙げられ、培地中にお
ける鑑別性の点からマジェンタ-α-Ｇａｌ及びＸ-α-Ｇ
ａｌが特に好ましい。
【００１２】斯かる発色性α-ガラクトシダーゼ基質の
培地への配合量は、当該基質の濃度が０．０１〜０．５
ｇ／Ｌになるように添加することが好ましく、特にサル
モネラの硫化水素産生の有無を確認するには０．０５〜
０．２ｇ／Ｌが好ましい。
培地への配合量は、当該基質の濃度が０．０１〜０．５
ｇ／Ｌになるように添加することが好ましく、特にサル
モネラの硫化水素産生の有無を確認するには０．０５〜
０．２ｇ／Ｌが好ましい。
【００１３】本発明サルモネラ分離用培地の基礎培地と
して用いられる腸内細菌分離用培地は、糖類の利用性に
より大腸菌群とサルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水
素産生能を確認できるものであれば特に限定されるもの
ではなく、通常サルモネラや大腸菌群等の確認用培地又
は選択分離培地等として使用されているものをそのま
ま、或いは応用して使用することができる。
して用いられる腸内細菌分離用培地は、糖類の利用性に
より大腸菌群とサルモネラを鑑別でき且つ細菌の硫化水
素産生能を確認できるものであれば特に限定されるもの
ではなく、通常サルモネラや大腸菌群等の確認用培地又
は選択分離培地等として使用されているものをそのま
ま、或いは応用して使用することができる。
【００１４】「糖類の利用により大腸菌群とサルモネラ
を鑑別できる」とは、例えばサルモネラによって分解さ
れず大腸菌群によって分解され酸を生成し得る糖類を用
いて、大腸菌群とサルモネラを鑑別するものが挙げられ
る。斯かる糖類としては、例えばソルビット、ラクトー
ス、シュークロース（白糖）、マルトース、トレハロー
ス、ラフィノース、アスパルテーム、ラクツロース及び
パラチニット等が挙げられ、大腸菌群の中の多くの菌種
が利用する点から特にラクトース、シュークロース（白
糖）及びラフィノースが好ましい。また、これらの糖類
は２種以上を組み合せて用いることができる。
を鑑別できる」とは、例えばサルモネラによって分解さ
れず大腸菌群によって分解され酸を生成し得る糖類を用
いて、大腸菌群とサルモネラを鑑別するものが挙げられ
る。斯かる糖類としては、例えばソルビット、ラクトー
ス、シュークロース（白糖）、マルトース、トレハロー
ス、ラフィノース、アスパルテーム、ラクツロース及び
パラチニット等が挙げられ、大腸菌群の中の多くの菌種
が利用する点から特にラクトース、シュークロース（白
糖）及びラフィノースが好ましい。また、これらの糖類
は２種以上を組み合せて用いることができる。
【００１５】また、この場合における大腸菌群とサルモ
ネラの鑑別は、大腸菌群により糖類から分解されて生じ
た酸を確認することにより行うことができる。具体的に
は、ｐＨ指示薬の添加による培地色の変化や胆汁酸塩
（例えばコール酸ナトリウム、デソキシコール酸ナトリ
ウム等）の添加による培地の混濁等が挙げられる。この
うち胆汁酸塩を用いることが、同時に腸内細菌以外の菌
種、例えばグラム陽性菌等の生育を抑制する効果を併せ
持つことから好ましい。尚、胆汁酸塩を用いる場合に
は、ニュートラルレッド等の色素を併存させると、これ
らと胆汁酸が結合して培地又はコロニーに沈着すること
から、コロニーの確認が容易となり好ましい。
ネラの鑑別は、大腸菌群により糖類から分解されて生じ
た酸を確認することにより行うことができる。具体的に
は、ｐＨ指示薬の添加による培地色の変化や胆汁酸塩
（例えばコール酸ナトリウム、デソキシコール酸ナトリ
ウム等）の添加による培地の混濁等が挙げられる。この
うち胆汁酸塩を用いることが、同時に腸内細菌以外の菌
種、例えばグラム陽性菌等の生育を抑制する効果を併せ
持つことから好ましい。尚、胆汁酸塩を用いる場合に
は、ニュートラルレッド等の色素を併存させると、これ
らと胆汁酸が結合して培地又はコロニーに沈着すること
から、コロニーの確認が容易となり好ましい。
【００１６】これら糖類の培地への配合量は、生成した
酸が確実に確認できる量であれば特に限定されるもので
はないが、４．０〜１２ｇ／Ｌの範囲で添加することが
好ましく、本発明においては、特に５．０ｇ／Ｌ以上と
することにより、大腸菌群が発色性α-ガラクトシダー
ゼ基質よりも糖類を優先的に利用することになり好まし
い。
酸が確実に確認できる量であれば特に限定されるもので
はないが、４．０〜１２ｇ／Ｌの範囲で添加することが
好ましく、本発明においては、特に５．０ｇ／Ｌ以上と
することにより、大腸菌群が発色性α-ガラクトシダー
ゼ基質よりも糖類を優先的に利用することになり好まし
い。
【００１７】一方、「細菌の硫化水素産生能の有無を確
認できる」とは、硫化水素産生性の細菌と硫化水素非産
生又は弱産生性の細菌を分離・検出できるものであれば
よく、例えばチオ硫酸塩（チオ硫酸ナトリウム等）、硫
酸塩、亜硫酸塩、ペプトン又は含硫アミノ酸（シスチ
ン、システイン、メチオニン）、ハイドロサルファイ
ト、イオウ末等の含硫成分と、鉄、ビスマス、ニッケ
ル、鉛等の金属イオン（例えばクエン酸鉄アンモニウ
ム、硫酸第一鉄、酢酸第二鉄等）を含有し、細菌により
発生した硫化水素と金属イオンから生成した硫化物（Ｆ
ｅＳ等）によって黒色に着色したコロニーの存在から硫
化水素産生菌の存在を確認するものが挙げられる。
認できる」とは、硫化水素産生性の細菌と硫化水素非産
生又は弱産生性の細菌を分離・検出できるものであれば
よく、例えばチオ硫酸塩（チオ硫酸ナトリウム等）、硫
酸塩、亜硫酸塩、ペプトン又は含硫アミノ酸（シスチ
ン、システイン、メチオニン）、ハイドロサルファイ
ト、イオウ末等の含硫成分と、鉄、ビスマス、ニッケ
ル、鉛等の金属イオン（例えばクエン酸鉄アンモニウ
ム、硫酸第一鉄、酢酸第二鉄等）を含有し、細菌により
発生した硫化水素と金属イオンから生成した硫化物（Ｆ
ｅＳ等）によって黒色に着色したコロニーの存在から硫
化水素産生菌の存在を確認するものが挙げられる。
【００１８】硫化水素産生能を確認できる培地として
は、例えばＴＳＩ培地、ＳＳ寒天培地、ＳＳＢ寒天培
地、ＳＩＭ培地、ＤＨＬ寒天培地、ＭＬＣＢ寒天培地、
ＸＬＤ寒天培地等が挙げられるが、このうちＤＨＬ寒天
培地、ＸＬＤ寒天培地、ＳＳ寒天培地及びＳＳＢ寒天培
地は、上記の大腸菌群とサルモネラを鑑別できる糖類を
含有することから、本発明のサルモネラ分離用培地の基
礎培地としてそのまま使用することができ、好ましい。
は、例えばＴＳＩ培地、ＳＳ寒天培地、ＳＳＢ寒天培
地、ＳＩＭ培地、ＤＨＬ寒天培地、ＭＬＣＢ寒天培地、
ＸＬＤ寒天培地等が挙げられるが、このうちＤＨＬ寒天
培地、ＸＬＤ寒天培地、ＳＳ寒天培地及びＳＳＢ寒天培
地は、上記の大腸菌群とサルモネラを鑑別できる糖類を
含有することから、本発明のサルモネラ分離用培地の基
礎培地としてそのまま使用することができ、好ましい。
【００１９】本発明のサルモネラ分離用培地には、上記
成分以外に本発明の効果を妨げない範囲で、腸内細菌分
離用培地に通常配合される他の成分、例えば、グラム陽
性菌の発育やプロテウスの遊走を阻止する物質（胆汁酸
塩等）、界面活性剤、クリスタルバイオレット等を配合
することができる。
成分以外に本発明の効果を妨げない範囲で、腸内細菌分
離用培地に通常配合される他の成分、例えば、グラム陽
性菌の発育やプロテウスの遊走を阻止する物質（胆汁酸
塩等）、界面活性剤、クリスタルバイオレット等を配合
することができる。
【００２０】本発明のサルモネラ分離培地を用いて、被
検体中のサルモネラの存在を検出するには、当該培地に
被検体を加えて３０〜４５℃で数時間〜数十時間培養し
た後に、コロニーの着色を肉眼観察すればよく、硫化水
素産生性サルモネラは硫化水素の発生により、硫化水素
非産生又は弱産生性サルモネラは発色性α−ガラクトシ
ダーゼにより、大腸菌群は糖類の利用により、それぞれ
異なる色に着色し鑑別することができる。すなわち、一
枚の平板で、硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産
生性サルモネラを検出することができる。
検体中のサルモネラの存在を検出するには、当該培地に
被検体を加えて３０〜４５℃で数時間〜数十時間培養し
た後に、コロニーの着色を肉眼観察すればよく、硫化水
素産生性サルモネラは硫化水素の発生により、硫化水素
非産生又は弱産生性サルモネラは発色性α−ガラクトシ
ダーゼにより、大腸菌群は糖類の利用により、それぞれ
異なる色に着色し鑑別することができる。すなわち、一
枚の平板で、硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産
生性サルモネラを検出することができる。
【００２１】本発明のサルモネラ分離培地に適用される
検体としては、尿、血漿等の臨床材料、食品、薬品、化
粧品、飲料等が挙げられるが、これらの検体を予めトリ
プトソーヤブイヨン等の培地で培養した培養液やさらに
これを増菌用培地で培養した培養液を用いることもでき
る。
検体としては、尿、血漿等の臨床材料、食品、薬品、化
粧品、飲料等が挙げられるが、これらの検体を予めトリ
プトソーヤブイヨン等の培地で培養した培養液やさらに
これを増菌用培地で培養した培養液を用いることもでき
る。
【００２２】
【実施例】以下、実施例を挙げて、本発明を更に詳細に
説明する。 実施例１ 以下に示す発色酵素基質について、表１に示すサルモネ
ラ及び大腸菌群（C.freundii）に対する反応（３５℃、
２４時間培養）を確認した。基礎培地として、ハートイ
ンフュージョン寒天培地（日水製薬（株）社製）及びマ
ッコンキー寒天基礎培地（ＤＩＦＣＯ社製）を用い、基
質は０．１ｇ／Ｌ添加し作製した。接種菌についてはい
ずれも画線培養した。結果（コロニー色）を表２及び表
３に示す。
説明する。 実施例１ 以下に示す発色酵素基質について、表１に示すサルモネ
ラ及び大腸菌群（C.freundii）に対する反応（３５℃、
２４時間培養）を確認した。基礎培地として、ハートイ
ンフュージョン寒天培地（日水製薬（株）社製）及びマ
ッコンキー寒天基礎培地（ＤＩＦＣＯ社製）を用い、基
質は０．１ｇ／Ｌ添加し作製した。接種菌についてはい
ずれも画線培養した。結果（コロニー色）を表２及び表
３に示す。
【００２３】（基質の種類）１． ５−ブロモ−６−ク
ロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（マジェンタ−α−Ｇａｌ） ２． ５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｘ−α−Ｇａｌ） ３． ５−ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−ガラクトピラノシド（マジェンタ−β−Ｇａｌ） ４． ５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｘ−β−Ｇａｌ）
ロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（マジェンタ−α−Ｇａｌ） ２． ５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｘ−α−Ｇａｌ） ３． ５−ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−ガラクトピラノシド（マジェンタ−β−Ｇａｌ） ４． ５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−ガラクトピラノシド（Ｘ−β−Ｇａｌ）
【００２４】
【表１】
【００２５】
【表２】
【００２６】
【表３】
【００２７】これより、マジェンタ−α−Ｇａｌ及びＸ
−α−Ｇａｌが、サルモネラでそれぞれ赤紫色及び緑色
を呈し、サルモネラ検出のための発色酵素基質となるこ
とが確認された。
−α−Ｇａｌが、サルモネラでそれぞれ赤紫色及び緑色
を呈し、サルモネラ検出のための発色酵素基質となるこ
とが確認された。
【００２８】実施例２ 表４に示す各成分を必要量を計り取り、加温溶解して、
本発明サルモネラ分離用培地を作製し、当該培地に標準
株及び食品分離株（表５、表６）を、画線培養及びミク
ロプランター法で接種培養し３５℃、２４時間培養後の
発育コロニーを観察した。画線培養結果を表７に、ミク
ロプランター法による結果を表８に記した。
本発明サルモネラ分離用培地を作製し、当該培地に標準
株及び食品分離株（表５、表６）を、画線培養及びミク
ロプランター法で接種培養し３５℃、２４時間培養後の
発育コロニーを観察した。画線培養結果を表７に、ミク
ロプランター法による結果を表８に記した。
【００２９】
【表４】
【００３０】
【表５】
【００３１】
【表６】
【００３２】本願発明の上記サルモネラ分離用培地にお
いて、サルモネラは黒又は緑色に着色し、他菌種との鑑
別が容易であった。
いて、サルモネラは黒又は緑色に着色し、他菌種との鑑
別が容易であった。
【００３３】
【表７】
【００３４】
【表８】
【００３５】実施例３ 市販鶏肉１０ｇに硫化水素非産生性サルモネラ（S.Cuba
na FDA由来株）を５．５×１０2cfu/１０ｇ接種したも
のを試料とした。この試料に緩衝ペプトン水「ニッス
イ」（日水製薬（株）製）９０mLを加え、３５℃、２２
時間培養後テトラチオネート培地「ニッスイ」（ＴＴ培
地：日水製薬（株）製））１０mL及びラパポート・バシ
リアディス培地「ニッスイ」（ＲＶ培地：日水製薬
（株）製）１０mLに０．５mLずつ接種し４２℃、２２時
間培養した。この培養液の１エーゼを画線培養しサルモ
ネラの分離を試みた。分離培地に本発明サルモネラ分離
用培地（Ｘ−α−Ｇａｌ使用）、比較として市販のサル
モネラ分離培地であるランバック寒天培地（メルク社
製）及びクロモアガーサルモネラ（関東化学（株）製）
を用い、サルモネラと思われるコロニーを釣菌し、簡易
同定キットＩＤテストＥＢ−２０（日水製薬（株）製）
に供試し同定を行った。結果を表９及び表１０に示す。
na FDA由来株）を５．５×１０2cfu/１０ｇ接種したも
のを試料とした。この試料に緩衝ペプトン水「ニッス
イ」（日水製薬（株）製）９０mLを加え、３５℃、２２
時間培養後テトラチオネート培地「ニッスイ」（ＴＴ培
地：日水製薬（株）製））１０mL及びラパポート・バシ
リアディス培地「ニッスイ」（ＲＶ培地：日水製薬
（株）製）１０mLに０．５mLずつ接種し４２℃、２２時
間培養した。この培養液の１エーゼを画線培養しサルモ
ネラの分離を試みた。分離培地に本発明サルモネラ分離
用培地（Ｘ−α−Ｇａｌ使用）、比較として市販のサル
モネラ分離培地であるランバック寒天培地（メルク社
製）及びクロモアガーサルモネラ（関東化学（株）製）
を用い、サルモネラと思われるコロニーを釣菌し、簡易
同定キットＩＤテストＥＢ−２０（日水製薬（株）製）
に供試し同定を行った。結果を表９及び表１０に示す。
【００３６】
【表９】
【００３７】
【表１０】
【００３８】本願発明のサルモネラ分離用培地において
は、問題なくサルモネラの分離検出が可能であった。
は、問題なくサルモネラの分離検出が可能であった。
【００３９】
【発明の効果】本発明のサルモネラ分離用培地を用いる
ことにより、一枚の平板で、サルモネラを他菌種と区別
し、且つ硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産生又
は弱産生性サルモネラを分離して検出することができ
る。従って、本発明のサルモネラ分離用培地は、食品、
水、環境及び臨床材料から硫化水素非産生又は弱産生性
サルモネラを分離・検出する場合に特に有用である。
ことにより、一枚の平板で、サルモネラを他菌種と区別
し、且つ硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非産生又
は弱産生性サルモネラを分離して検出することができ
る。従って、本発明のサルモネラ分離用培地は、食品、
水、環境及び臨床材料から硫化水素非産生又は弱産生性
サルモネラを分離・検出する場合に特に有用である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） (Ｃ１２Ｑ 1/04 (Ｃ１２Ｑ 1/04 Ｃ１２Ｒ 1:42） Ｃ１２Ｒ 1:42） (Ｃ１２Ｑ 1/54 (Ｃ１２Ｑ 1/54 Ｃ１２Ｒ 1:04） Ｃ１２Ｒ 1:04） (72)発明者 韮塚 貞宣 茨城県結城市北南茂呂1075−２ 日水製薬 株式会社診断薬研究部内 (72)発明者 水落 慎吾 茨城県結城市北南茂呂1075−２ 日水製薬 株式会社診断薬研究部内 (72)発明者 小高 秀正 茨城県結城市北南茂呂1075−２ 日水製薬 株式会社診断薬研究部内 Ｆターム(参考） 4B063 QA01 QA18 QQ16 QQ17 QQ18 QQ35 QR66 QR75 QS02 QS28 QX02 4B065 AA46X AC20 BB02 BB03 BB12 BB14 BB16 BB40 CA46 CA60
Claims (7)
- 【請求項１】 糖類の利用性により大腸菌群とサルモネ
ラを鑑別でき且つ細菌の硫化水素産生能の有無を確認で
きる腸内細菌分離用培地であって、発色性α-ガラクト
シダーゼ基質を含有することを特徴とするサルモネラ分
離用培地。 - 【請求項２】 腸内細菌分離用培地が、サルモネラによ
って分解されず大腸菌群によって分解され酸を生成し得
る糖類を含有し且つ細菌の硫化水素産生能の有無を確認
できるものである請求項１記載のサルモネラ分離用培
地。 - 【請求項３】 腸内細菌分離用培地が、ラクトース、シ
ュークロース及びラフィノースから選ばれる糖類、胆汁
酸塩、チオ硫酸塩及び鉄イオンを含むものである請求項
１又は２記載のサルモネラ分離用培地。 - 【請求項４】 発色性α-ガラクトシダーゼ基質が、５
−ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガ
ラクトピラノシド（マジェンタ−α−Ｇａｌ）又は５−
ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル−α−Ｄ−ガラ
クトピラノシド（Ｘ−α−Ｇａｌ）である請求項１〜３
の何れか１項記載のサルモネラ分離用培地。 - 【請求項５】 マジェンタ−α−Ｇａｌ又はＸ−α−Ｇ
ａｌの濃度が、０．０１〜０．５ｇ／Ｌである請求項４
記載のサルモネラ分離用培地。 - 【請求項６】 硫化水素産生性サルモネラと硫化水素非
産生又は弱産生性サルモネラを分離して検出するもので
ある請求項１〜５の何れか１項記載のサルモネラ分離用
培地。 - 【請求項７】 請求項１記載のサルモネラ分離用培地
に、検体を接種して培養した後、当該培地上の着色コロ
ニーの有無により、硫化水素産生性サルモネラと硫化水
素非産生又は弱産生性サルモネラを区別して検出するこ
とを特徴とするサルモネラの検出法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2000369689A JP2002171962A (ja) | 2000-12-05 | 2000-12-05 | サルモネラ分離用培地 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2002171962A true JP2002171962A (ja) | 2002-06-18 |
Family
ID=18839693
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2000369689A Pending JP2002171962A (ja) | 2000-12-05 | 2000-12-05 | サルモネラ分離用培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2002171962A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008017712A (ja) * | 2006-07-10 | 2008-01-31 | Chisso Corp | 微生物培地 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0662833A (ja) * | 1992-08-19 | 1994-03-08 | Nitsusui Seiyaku Kk | サルモネラ分離用培地 |
| JPH09511917A (ja) * | 1995-03-24 | 1997-12-02 | オリオン−ユヒチュメ オサケ ユキチュア | サルモネラ菌の同定法および培地 |
| WO1998055644A1 (en) * | 1997-06-04 | 1998-12-10 | Freeman Group Of Hospitals Nhs Trust | Identification of salmonella |
| JP2000116395A (ja) * | 1998-10-09 | 2000-04-25 | Eiken Chem Co Ltd | サルモネラ分離用培地 |
| JP2001061495A (ja) * | 1999-08-30 | 2001-03-13 | Iatron Lab Inc | 微生物の鑑別方法 |
-
2000
- 2000-12-05 JP JP2000369689A patent/JP2002171962A/ja active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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