JPH0662833A - サルモネラ分離用培地 - Google Patents
サルモネラ分離用培地Info
- Publication number
- JPH0662833A JPH0662833A JP22025492A JP22025492A JPH0662833A JP H0662833 A JPH0662833 A JP H0662833A JP 22025492 A JP22025492 A JP 22025492A JP 22025492 A JP22025492 A JP 22025492A JP H0662833 A JPH0662833 A JP H0662833A
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- Japan
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- medium
- salmonella
- decomposed
- thiosulfate
- bacteria
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 チオ硫酸塩及び第二鉄イオンを含有する培地
に、サルモネラによって分解されず、サイトロバクター
によって分解されて酸を生成しうる糖類を０．１〜１．
０重量％配合したサルモネラ分離用培地、並びにこの分
離用培地を用いたサルモネラ検出法。 【効果】 この分離用培地を用いれば、食品、臨床材料
等の検体中のサルモネラがサイトロバクターと明確に鑑
別して検出される。
に、サルモネラによって分解されず、サイトロバクター
によって分解されて酸を生成しうる糖類を０．１〜１．
０重量％配合したサルモネラ分離用培地、並びにこの分
離用培地を用いたサルモネラ検出法。 【効果】 この分離用培地を用いれば、食品、臨床材料
等の検体中のサルモネラがサイトロバクターと明確に鑑
別して検出される。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は食品、環境、臨床材料か
らサルモネラを選択的に分離して検出するための培地及
び検出法に関する。
らサルモネラを選択的に分離して検出するための培地及
び検出法に関する。
【０００２】
【従来の技術】サルモネラは食中毒原因菌、ヒト及び動
物のチフス症原因菌として広く知られており、その検出
は日常検査として重要である。特に鶏肉、豚肉、牛肉、
卵、惣菜、飲料水、牛乳等の食品がサルモネラに汚染さ
れているか否かの検査は食品衛生法による規制もあり、
日常検査として義務づけられている。
物のチフス症原因菌として広く知られており、その検出
は日常検査として重要である。特に鶏肉、豚肉、牛肉、
卵、惣菜、飲料水、牛乳等の食品がサルモネラに汚染さ
れているか否かの検査は食品衛生法による規制もあり、
日常検査として義務づけられている。
【０００３】サルモネラの検出法としては、サルモネラ
がチオ硫酸塩含有培地（ＴＳＩ培地）において硫化水素
を産生する性質を利用し、当該培地中に第二鉄イオンを
含有せしめておき、硫化水素と第二鉄イオンとの反応に
より硫化鉄を生成させ、コロニーの黒色化の有無を観察
する方法が最も一般的である。かかるサルモネラ分離用
培地としてはＭＬＣＢ寒天培地が広く使用されている。
がチオ硫酸塩含有培地（ＴＳＩ培地）において硫化水素
を産生する性質を利用し、当該培地中に第二鉄イオンを
含有せしめておき、硫化水素と第二鉄イオンとの反応に
より硫化鉄を生成させ、コロニーの黒色化の有無を観察
する方法が最も一般的である。かかるサルモネラ分離用
培地としてはＭＬＣＢ寒天培地が広く使用されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、従来の
ＭＬＣＢ培地を用いたサルモネラ検査法においては、サ
イトロバクターに代表される他の硫化水素産生菌との鑑
別ができないという問題があった。従って、本発明はサ
イトロバクターとサルモネラを感度良く鑑別し得るサル
モネラ分離用培地を提供することを目的とする。
ＭＬＣＢ培地を用いたサルモネラ検査法においては、サ
イトロバクターに代表される他の硫化水素産生菌との鑑
別ができないという問題があった。従って、本発明はサ
イトロバクターとサルモネラを感度良く鑑別し得るサル
モネラ分離用培地を提供することを目的とする。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで本発明者らはサル
モネラをサイトロバクターと区別して検出し得る培地を
見出すべく鋭意検討した結果、従来のチオ硫酸塩と第二
鉄イオンを含有する培地に、サルモネラによっては分解
されず、サイトロバクターによって分解されて酸を生成
しうる糖類を一定量添加した培地を用いれば、サイトロ
バクターは硫化水素を産生するが、同時に当該糖類を分
解して酸を生成するため培地のpHが低下し硫化水素と第
二鉄イオンとの反応が進行しないため黒色のコロニーを
つくらないことから、サルモネラが選択的に検出できる
ことを見出し、本発明を完成するに至った。
モネラをサイトロバクターと区別して検出し得る培地を
見出すべく鋭意検討した結果、従来のチオ硫酸塩と第二
鉄イオンを含有する培地に、サルモネラによっては分解
されず、サイトロバクターによって分解されて酸を生成
しうる糖類を一定量添加した培地を用いれば、サイトロ
バクターは硫化水素を産生するが、同時に当該糖類を分
解して酸を生成するため培地のpHが低下し硫化水素と第
二鉄イオンとの反応が進行しないため黒色のコロニーを
つくらないことから、サルモネラが選択的に検出できる
ことを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】すなわち、本発明はチオ硫酸塩及び第二鉄
イオンを含有する培地に、サルモネラによって分解され
ずサイトロバクターによって分解されて酸を生成しうる
糖類を０．１〜３．０重量％配合したことを特徴とする
サルモネラ分離用培地を提供するものである。
イオンを含有する培地に、サルモネラによって分解され
ずサイトロバクターによって分解されて酸を生成しうる
糖類を０．１〜３．０重量％配合したことを特徴とする
サルモネラ分離用培地を提供するものである。
【０００７】また、本発明は当該サルモネラ分離用培地
に被検体を接種して培養した後、当該培地上の黒色コロ
ニーの有無を検出することを特徴とするサルモネラの検
出法を提供するものである。
に被検体を接種して培養した後、当該培地上の黒色コロ
ニーの有無を検出することを特徴とするサルモネラの検
出法を提供するものである。
【０００８】本発明のサルモネラ分離用培地（以下、分
離用培地と略す）の基礎培地は、チオ硫酸塩及び第二鉄
イオンを含有する培地であれば特に制限されないが、Ｍ
ＬＣＢ培地、ＤＨＬ培地、ＳＳ培地、ＸＬ培地、ＸＬＤ
培地、ＸＬＢＧ培地、ＨＥ培地等が用いられる。具体的
には、重量で、酵母エキス０．４〜０．６％、ハートエ
キス末０．２５〜０．３５％、ペプトン１．０〜２．５
％、塩化ナトリウム０．３５〜０．４５％、マンニット
０．２５〜０．３％、Ｌ−リジン塩酸塩０．４５〜０．
５５％、チオ硫酸ナトリウム０．３５〜０．４５％、ク
エン酸鉄アンモニウム０．０８〜０．１２％、ブリリア
ントグリン０．０００１〜０．００１２５％及びクリス
タルバイオレット０．０００９〜０．００１％を含有す
る培地が好ましい。
離用培地と略す）の基礎培地は、チオ硫酸塩及び第二鉄
イオンを含有する培地であれば特に制限されないが、Ｍ
ＬＣＢ培地、ＤＨＬ培地、ＳＳ培地、ＸＬ培地、ＸＬＤ
培地、ＸＬＢＧ培地、ＨＥ培地等が用いられる。具体的
には、重量で、酵母エキス０．４〜０．６％、ハートエ
キス末０．２５〜０．３５％、ペプトン１．０〜２．５
％、塩化ナトリウム０．３５〜０．４５％、マンニット
０．２５〜０．３％、Ｌ−リジン塩酸塩０．４５〜０．
５５％、チオ硫酸ナトリウム０．３５〜０．４５％、ク
エン酸鉄アンモニウム０．０８〜０．１２％、ブリリア
ントグリン０．０００１〜０．００１２５％及びクリス
タルバイオレット０．０００９〜０．００１％を含有す
る培地が好ましい。
【０００９】また、サルモネラによって分解されず、サ
イトロバクターによって分解されて酸を生成しうる糖類
としては、例えばソルビット、ラクトース、マルトー
ス、トレハロース、ラフィノース、ガラクトシド誘導
体、アスパルテーム、ラクツロース及びパラチニット等
が挙げられる。ここで、ガラクトシド誘導体としては、
例えば５−ブロモ−３−インドリル−β−Ｄ−ガラクト
シド、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−
Ｄ−ガラクトシド等の合成基質が挙げられる。これらの
糖類は１種でも２種以上を組み合せて用いても良い。
イトロバクターによって分解されて酸を生成しうる糖類
としては、例えばソルビット、ラクトース、マルトー
ス、トレハロース、ラフィノース、ガラクトシド誘導
体、アスパルテーム、ラクツロース及びパラチニット等
が挙げられる。ここで、ガラクトシド誘導体としては、
例えば５−ブロモ−３−インドリル−β−Ｄ−ガラクト
シド、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドリル−β−
Ｄ−ガラクトシド等の合成基質が挙げられる。これらの
糖類は１種でも２種以上を組み合せて用いても良い。
【００１０】これらの糖類の分離用培地への配合量は、
０．１〜３．０重量％（以下、単に％で示す）、特に
０．２〜１．０％が好ましい。０．１％未満では、サイ
トロバクターによる黒色コロニーの発生を充分に抑制で
きない場合がある。
０．１〜３．０重量％（以下、単に％で示す）、特に
０．２〜１．０％が好ましい。０．１％未満では、サイ
トロバクターによる黒色コロニーの発生を充分に抑制で
きない場合がある。
【００１１】本発明の分離用培地には上記成分以外に本
発明の効果を妨げない範囲で他の成分を配合することが
できる。また、本発明の分離用培地は、用時寒天１．３
〜１．５％及び水を配合し、寒天平板培地として使用す
るのが好ましい。
発明の効果を妨げない範囲で他の成分を配合することが
できる。また、本発明の分離用培地は、用時寒天１．３
〜１．５％及び水を配合し、寒天平板培地として使用す
るのが好ましい。
【００１２】本発明の分離培地を用いて、被検体中のサ
ルモネラの存在を検出するには、当該培地に被検体を加
えて３０〜４４．５℃で数時間〜数十時間培養した後、
当該培地上の黒色コロニーの有無を肉眼観察すれば良
い。
ルモネラの存在を検出するには、当該培地に被検体を加
えて３０〜４４．５℃で数時間〜数十時間培養した後、
当該培地上の黒色コロニーの有無を肉眼観察すれば良
い。
【００１３】ここで被検体としては尿、血漿等の臨床材
料、食品、薬品、化粧品、飲料等が挙げられるが、これ
らの検体を予めトリプトソーヤブイヨン等の培地で培養
した培養液やさらにこれを増菌用培地で培養した培養液
を用いることもできる。
料、食品、薬品、化粧品、飲料等が挙げられるが、これ
らの検体を予めトリプトソーヤブイヨン等の培地で培養
した培養液やさらにこれを増菌用培地で培養した培養液
を用いることもできる。
【００１４】
【実施例】以下、実施例を挙げてさらに詳細に説明する
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
が、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００１５】実施例１ 表１の組成を有するＭＬＣＢ培地の粉末（日水製薬）に
乳糖を表２に示した濃度になるように加え、精製水でよ
く混和した後、１０５℃、３０分加温溶解し、平板を作
製し分離用培地とした。供試菌株は、表２に示した１０
株をトリプトソーヤブイヨン（日水製薬）で３７℃、２
４時間培養した培養液を用いた。この培養液を１０μｌ
のループで画線塗抹し、３７℃、２４時間培養後、黒色
コロニーの有無を肉眼観察により判定した。その結果、
表２から明らかなように乳糖を０．２％以上配合した培
地を用いればサルモネラとサイトロバクターが分離して
検出できることが判った。
乳糖を表２に示した濃度になるように加え、精製水でよ
く混和した後、１０５℃、３０分加温溶解し、平板を作
製し分離用培地とした。供試菌株は、表２に示した１０
株をトリプトソーヤブイヨン（日水製薬）で３７℃、２
４時間培養した培養液を用いた。この培養液を１０μｌ
のループで画線塗抹し、３７℃、２４時間培養後、黒色
コロニーの有無を肉眼観察により判定した。その結果、
表２から明らかなように乳糖を０．２％以上配合した培
地を用いればサルモネラとサイトロバクターが分離して
検出できることが判った。
【００１６】
【表１】
【００１７】
【表２】
【００１８】実施例２ 表３〜５に記載の糖類をＭＬＣＢ培地に添加して分離用
培地を調製し、実施例１と同様にして黒色コロニーの有
無を判定した。その結果、表３〜５に記載の糖を０．１
％以上配合した培地を用いればサルモネラとサイトロバ
クターが分離して検出できることが判った。
培地を調製し、実施例１と同様にして黒色コロニーの有
無を判定した。その結果、表３〜５に記載の糖を０．１
％以上配合した培地を用いればサルモネラとサイトロバ
クターが分離して検出できることが判った。
【００１９】
【表３】
【００２０】
【表４】
【００２１】
【表５】
【００２２】実施例３ ＭＬＣＢと乳糖添加ＭＬＣＢを供試培地として、表６に
示した各サルモネラを実施例１と同様に培養し、その培
養液を滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈したもの０．１
mlを培地に接種し、コンラージ棒で塗抹した。３７℃、
２４時間培養後、菌数及びコロニーの大きさを実体顕微
鏡で計測した。その結果、１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地で
も、乳糖無添加の場合に比較してサルモネラの発育に大
差はみられなかった。
示した各サルモネラを実施例１と同様に培養し、その培
養液を滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈したもの０．１
mlを培地に接種し、コンラージ棒で塗抹した。３７℃、
２４時間培養後、菌数及びコロニーの大きさを実体顕微
鏡で計測した。その結果、１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地で
も、乳糖無添加の場合に比較してサルモネラの発育に大
差はみられなかった。
【００２３】
【表６】
【００２４】実施例４ 食品から分離したＣｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ ｆｒｅｕｎ
ｄｉｉ３６株を１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地とＭＬＣＢ培
地に接種し、実施例１と同様にして黒色コロニーの有無
を検討したところ１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地では全菌株
において黒色コロニーを認めなかったがＭＬＣＢ培地で
は全菌株において黒色コロニーを認めた。
ｄｉｉ３６株を１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地とＭＬＣＢ培
地に接種し、実施例１と同様にして黒色コロニーの有無
を検討したところ１％乳糖添加ＭＬＣＢ培地では全菌株
において黒色コロニーを認めなかったがＭＬＣＢ培地で
は全菌株において黒色コロニーを認めた。
【００２５】実施例５ トリプトソーヤ寒天培地（ＴＰＳ）、ＭＬＣＢ培地、及
び乳糖添加ＭＬＣＢを供試培地として、表７〜９に示し
た各サルモネラを実施例１と同様に培養し、その培養液
を滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈し約１０4 ／０．１
mlになるように調製し、その０．１mlを培地に接種し、
コンラージ棒で塗抹した。３７℃、２４時間培養後、菌
数を計測した。その結果、いずれの培地においてもサル
モネラの発育には大差は認められなかった。
び乳糖添加ＭＬＣＢを供試培地として、表７〜９に示し
た各サルモネラを実施例１と同様に培養し、その培養液
を滅菌生理食塩水で１０倍段階希釈し約１０4 ／０．１
mlになるように調製し、その０．１mlを培地に接種し、
コンラージ棒で塗抹した。３７℃、２４時間培養後、菌
数を計測した。その結果、いずれの培地においてもサル
モネラの発育には大差は認められなかった。
【００２６】
【表７】
【００２７】
【表８】
【００２８】
【表９】
【００２９】
【発明の効果】本発明の分離用培地を用いれば、食品、
臨床材料等の検体中のサルモネラがサイトロバクターと
明確に鑑別して検出される。
臨床材料等の検体中のサルモネラがサイトロバクターと
明確に鑑別して検出される。
Claims (4)
- 【請求項１】 チオ硫酸塩及び第二鉄イオンを含有する
培地に、サルモネラによって分解されずサイトロバクタ
ーによって分解されて酸を生成しうる糖類を０．１〜
３．０重量％配合したことを特徴とするサルモネラ分離
用培地。 - 【請求項２】 チオ硫酸塩及び第二鉄イオンを含有する
培地が、重量で酵母エキス０．４〜０．６％、ハートエ
キス末０．２５〜０．３５％、ペプトン１．０〜２．５
％、塩化ナトリウム０．３５〜０．４５％、マンニット
０．２５〜０．３％、Ｌ−リジン塩酸塩０．４５〜０．
５５％、チオ硫酸ナトリウム０．３５〜０．４５％、ク
エン酸鉄アンモニウム０．０８〜０．１２％、ブリリア
ントグリン０．０００１〜０．００１２５％及びクリス
タルバイオレット０．０００９〜０．００１％を含有す
る培地である請求項１記載のサルモネラ分離用培地。 - 【請求項３】 サルモネラによって分解されずサイトロ
バクターによって分解されて酸を生成しうる糖類が、ソ
ルビット、ラクトース、マルトース、トレハロース、ラ
フィノース、ガラクトシド誘導体、アスパルテーム、ラ
クツロース及びパラチニットから選ばれる１種又は２種
以上である請求項１記載のサルモネラ分離用培地。 - 【請求項４】 請求項１記載の分離用培地に被検体を接
種して培養した後、当該培地上の黒色コロニーの有無を
検出することを特徴とするサルモネラの検出法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22025492A JP3274716B2 (ja) | 1992-08-19 | 1992-08-19 | サルモネラ分離用培地 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22025492A JP3274716B2 (ja) | 1992-08-19 | 1992-08-19 | サルモネラ分離用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0662833A true JPH0662833A (ja) | 1994-03-08 |
| JP3274716B2 JP3274716B2 (ja) | 2002-04-15 |
Family
ID=16748309
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22025492A Expired - Lifetime JP3274716B2 (ja) | 1992-08-19 | 1992-08-19 | サルモネラ分離用培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3274716B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002171962A (ja) * | 2000-12-05 | 2002-06-18 | Nissui Pharm Co Ltd | サルモネラ分離用培地 |
| WO2005078120A1 (ja) * | 2004-02-12 | 2005-08-25 | Mie Tlo Co., Ltd. | サルモネラ菌検出用デバイス及びその利用方法 |
| WO2008120570A1 (ja) * | 2007-03-19 | 2008-10-09 | National University Corporation Okayama University | タンパク質産生用およびウイルス増殖用の培地 |
| JP2013106587A (ja) * | 2011-11-24 | 2013-06-06 | Yu Midorikawa | 塩化ナトリウムを含むサルモネラ菌検出用培地 |
| JP2014239677A (ja) * | 2013-05-16 | 2014-12-25 | 裕 翠川 | 抗菌性検査方法 |
-
1992
- 1992-08-19 JP JP22025492A patent/JP3274716B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002171962A (ja) * | 2000-12-05 | 2002-06-18 | Nissui Pharm Co Ltd | サルモネラ分離用培地 |
| WO2005078120A1 (ja) * | 2004-02-12 | 2005-08-25 | Mie Tlo Co., Ltd. | サルモネラ菌検出用デバイス及びその利用方法 |
| WO2008120570A1 (ja) * | 2007-03-19 | 2008-10-09 | National University Corporation Okayama University | タンパク質産生用およびウイルス増殖用の培地 |
| JP2013106587A (ja) * | 2011-11-24 | 2013-06-06 | Yu Midorikawa | 塩化ナトリウムを含むサルモネラ菌検出用培地 |
| JP2014239677A (ja) * | 2013-05-16 | 2014-12-25 | 裕 翠川 | 抗菌性検査方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3274716B2 (ja) | 2002-04-15 |
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|---|---|---|---|
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