SU1693062A1 - Питательна среда дл вы влени тиолзависимых гемолизинов энтеробактерий - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицинской микробиологии и может быть использовано в практике бактериологических лабораторий дл  вы влени  штаммов энтеробакте- рий, способных продуцировать важный фактор патогенности - тиолзависимые гемолизины . Цель изобретени  - удешевление среды. Навеску сухого питательного агара в количестве 30-40 г внос т в 1 л дистиллированной воды. После расплавлени  и стерилизации добавл ют 0,01-0,1 г L-цистеина, перемешивают и внос т 30-50 г отмытых эритроцитов кролика. Среду перемешивают и разливают в чашки Петри. Посев на чашки культуры производ т уколом и инкубируют 24-48 ч. В положительных случа х вокруг выросших колоний отмечаетс  зона гемолиза. 1 табл.

Description

ел

С

Изобретение относитс  к медицинской микробиологии и может быть использовано в практике бактериологических лабораторий дл  вы влени  штаммов энтеробакте- рий, способных продуцировать важный фактор патогенности - тиолзависимые гемолизины .

Известна питательна  среда дл  вы влени  тиолзависимых гемолизинов, содержаща  триптиказо-соевый aiap Дифко с 3-5% взвеси эритроцитов кролика 1.

Однако известна  среда дл  вы влени  тиолзависимых гемолизинов  вл етс  дорогой и малодоступной дл  микробиологических лабораторий.

Целью изобретени   вл етс  удешевление среды.

Пример. Питательную среду готов т следующим образом.

Навеску сухого питательного агара в количестве 30 г внос т в 1 л дистиллированной

воды, кип т т до расплавлени  агара и стерилизуют. К расплавленной стерильной среде добавл ют 0,01 г L-цистеина, растворенного в 1 мл стерильного физиологического раствора хлористого натри . После перемешивани  в охлажденный до 45°С агар внос т 30 г трижды отмытых в растворе Хенкса или среде 199 эритроцитов кролика. Среду перемешивают и разливают по 20 мл в чашки Петри. Посев бактерий производ т бактериологической петлей уколом, при этом следует избегать прокалывани  агара до стекла. Чашки инкубируют в термостате при 37°С в течение 24-48 ч, после чего производ т учет результатов, В положительных случа х вокруг выросших бактерий отмечаетс  зона гемолиза. Из испытанных 10 штаммов 1 штамм Citrobacter freundll Ns 1013 дал сливной гемолиз (при одновременном испытании на чашке нескольких колоний ), 2 штамма С. freundii Nk 78 и № 2591 не

О

о

OJ

о

ON

to

дали гемолиза, остальные 4 штамма С. freundll и все 3 испытанных штамма Klebsiella pneumoniae дали гемолиз.

П р и м е р 2. Питательную среду готов т, как описано в примере 1. При этом берут навеску сухого питательного агара 35 г, L- цистеин 0,02 г и эритроциты кролика 40 г на 1 л дистиллированной воды. Все 7 исследованных штаммов С. freundii и все 3 штамма К. pneumoniae дают гемолиз,

П р и м е р 3. Питательную среду готов т, как описано в примере 1. Сухой питательный агар берут в количестве 40 г, L-цистеин 0,1 г и эритроциты кролика 50 г на 1 л дис- тиллированной воды. 2 штамма С. freundii N5 35 и N2 1013 дали сливной гемолиз, остальные 5 штаммов С. freundii и все 3 штамма К. pneumoniae дали гемолиз.

П р и м е р 4. Предлагаема  питательна  среда испытана в сравнении с триптиказо- осевым агаром фирмы Дифко на 328 штаммах, принадлежащих к различным родам семейства энтеробактерий. Контролем служат среда того же состава, но без цисте- ина, на которой гемолиз заведомо отсутствует .

Результаты испытаний энтеробактерий на триптиказосоевом агаре и предлагаемой среде представлены в таблице.

Испытание на обеих питательных средах дало одинаковые результаты.

Claims (1)

1. Таким образом, предлагаема  питательна  среда дл  вы влени  тиол- зависимых гемолизинов не уступает триптиказо-соевому агару фирмы Дифко по своей чувствительности, но  вл етс  более доступной дл  широкого применени  в лабораторной практике и более дешевой. Формула изобретени  Питательна  среда дл  вы влени  ти- олзависимых гемолизинов энтеробактерий, содержаща  питательный агар, эритроциты кролика и дистиллированную воду, отличающа с  тем, что, с целью удешевлени  среды, она дополнительно содержит L-цистеин , в качестве питательного агара она содержит сухой питательный агар при следующем количественном соотношении компонентов, г/л:

   Сухой питательный агар30-40

   L-цистеин0,01-0,1

   Эритроциты кролика30-50

   Дистиллированна  водаДо 1 л.