RU2177152C2 - Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов - Google Patents
Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2177152C2 RU2177152C2 RU99125560/14A RU99125560A RU2177152C2 RU 2177152 C2 RU2177152 C2 RU 2177152C2 RU 99125560/14 A RU99125560/14 A RU 99125560/14A RU 99125560 A RU99125560 A RU 99125560A RU 2177152 C2 RU2177152 C2 RU 2177152C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antagonistic activity
- test
- strains
- dysbacteriosis
- controlling
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к области медицины. Сущность изобретения: предложен способ контроля антагонистической активности препаратов in vitro, исключающий использование патогенных и условно-патогенных тест-штаммов. Определение показателей отсроченного антагонизма на плотной питательной среде включает применение в качестве контрольных изо-, гомо- и гетерогенных бактериальных штаммов, используемых в производстве пробиотических препаратов. Способ обеспечивает упрощение, удешевление и снижение трудоемкости контроля антагонистической активности при исследовании. 2 табл.
Description
Изобретение относится к микробиологическому производству и может быть использовано при контроле биологической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов (пробиотиков) медицинского и ветеринарного назначения.
Известно, что одним из показателей специфической активности пробиотиков (колибактерин, бификол, лактобактерин и др.) и производственных штаммов бактерий для их изготовления является наличие антагонистического действия в отношении патогенной и условно-патогенной микрофлоры. Антагонистическую активность пробиотиков и бактериальных штаммов определяют in vitro регламентированными способами, которые включают совместное культивирование с тест-культурами в жидкой или на плотной питательной среде. Наиболее распространен способ отсроченного антагонизма, когда, подсев тест-штаммов на плотную питательную среду проводится через определенный период после посева испытуемой культуры. Подсев тест-штаммов, в качестве которых используют патогенные и условно-патогенные культуры шигелл, стафилококков, протея и др., проводят в виде перпендикулярных штрихов к выросшей испытуемой культуре. Антагонистическая активность последней количественно характеризуется величиной зоны подавления роста каждого тест-штамма, измеряемой в мм (ФС 42-3365-97 "Колибактерин сухой").
Недостатком данного способа контроля антагонистической активности является использование большого количества патогенных и условно-патогенных бактериальных штаммов, работа с которыми трудоемка и требует специальных условий.
Сущность изобретения заключается в следующем. Развитие in vitro на плотной питательной среде бактериальной культуры, обладающей антагонистической активностью, сопровождается диффузией комплекса метаболитов, продуцируемых в процессе роста в окружающую среду, которая специфически изменяется и становится непригодной для развития других популяций. В искусственно созданных условиях проявление антагонистической активности бактериальной культуры, в зависимости от таксономической принадлежности тест-штаммов, выражается в виде гетеро-, гомо- или изоантагонизма. Оценка антагонистической активности может быть основана на определении любой ее составляющей или их совокупности. Изоантагонизм представляет собой подавляющее влияние продуктов метаболизма на развитие того же штамма бактерий. Для определения гетеро- и гомоантагонизма, пробиотиков не обязательно использовать патогенные и условно-патогенные штаммы бактерий. Широкая номенклатура пробиотиков и, соответственно, принадлежность производственных штаммов для их изготовления к различным таксономическим группам позволяют применять их в качестве тест-культур для взаимного определения гетеро- и (или) гомоантагонизма in vitro. Предлагаемый способ позволяет объективно оценить антагонистическую активность по отдельным составляющим или их совокупности и исключить использование патогенных и условно-патогенных тест-штаммов при контроле данного показателя пробиотиков.
Достигаемый технический результат заключается в упрощении и удешевлении способа контроля и снижении трудоемкости, связанной с ведением и подготовкой тест-штаммов к проведению исследования антагонистической активности (см. табл. 1 в конце описания).
При осуществлении способа могут быть использованы обычные регламентированные условия проведения теста отсроченного антагонизма для каждого пробиотика или производственного штамма, включая продолжительность культивирования испытуемой культуры и время подсева тест-штаммов. Подготовка тест-штаммов заключается в растворении физиологическим раствором сухой биомассы пробиотика или производственного штамма с последующим разведением бактериальной взвеси до рекомендованной концентрации микробных клеток.
Пример 1. Определение антагонистической активности колибактерина.
Сухую биомассу колибактерина (на основе штамма E.coli М-17) в ампуле или флаконе растворяют 0,85% раствором натрия хлорида из расчета 1 мл на одну дозу препарата. Полученную взвесь высевают штрихом по диаметру чашки Петри бактериологической петлей на плотную питательную среду Гаузе N 2. После (48 ± 4) ч инкубации при температуре (37 ± 1)oC перпендикулярно к выросшей культуре 3 - 4 штрихами подсевают изогенную культуру штамма E.coli М-17 (концентрация взвеси составляет 5 • 108 кл/мл). Учет результатов проводят через (20±4) ч инкубирования при температуре (37 ± 1)oC по величине зон угнетения роста тест-культуры. Показатель угнетения роста тест-культуры во всех штрихах-посевах составляет (и должен составлять) не менее 15 мм.
Пример 2. Определение антагонистической активности лактобактерина.
Сухую биомассу лактобактерина (на основе штамма L.plantarum 8Р-А3) в ампуле или флаконе растворяют физиологическим раствором из расчета 1 мл на одну дозу препарата. Полученную взвесь высевают штрихом по диаметру чашки Петри на плотную питательную среду МРС - 5. После (96 ± 4) ч инкубации при температуре (37 ± 1)oC перпендикулярно к выросшей культуре подсевают изогенную культуру штамма L.plantarum 8Р-А3, гомогенную культуру штамма L.fermentum 90Т-С4 и гетерогенную культуру штамма E.coli М-17 (концентрация взвесей каждой из культур составляет 108 кл/мл). Учет результатов проводят через (36 ± 12) ч инкубирования при температуре (37 ± 1)oC по величине зон угнетения роста тест-культур. Показатель угнетения роста во всех штрих-посевах составляет (и должен составлять) не менее 20 мм.
Сравнительные результаты антагонистической активности колибактерина и бификола по отношению к различным тест-штаммам приведены в табл. 2. Представленные данные свидетельствуют о сопоставимости показателей антагонистической активности испытуемых культур по отношению к патогенным и непатогенным тест-штаммам.
Таким образом, предлагаемый способ, не уступая известному по информативности, позволяет сократить количество тест-штаммов, исключить работу с патогенными культурами и снизить затраты на проведение исследования.
Claims (1)
- Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов, включающий посев и инкубацию бактерийного препарата на плотной питательной среде с последующим подсевом тест-штаммов и определением зоны задержки их роста, отличающийся тем, что в качестве тест-штаммов используют непатогенные культуры изо-, гомо- и гетерогенных производственных штаммов бактерий, применяемых в производстве препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99125560/14A RU2177152C2 (ru) | 1999-12-02 | 1999-12-02 | Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU99125560/14A RU2177152C2 (ru) | 1999-12-02 | 1999-12-02 | Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU99125560A RU99125560A (ru) | 2001-08-27 |
RU2177152C2 true RU2177152C2 (ru) | 2001-12-20 |
Family
ID=20227735
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU99125560/14A RU2177152C2 (ru) | 1999-12-02 | 1999-12-02 | Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2177152C2 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2451085C2 (ru) * | 2010-06-02 | 2012-05-20 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии | Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis |
EP3760054A1 (en) | 2019-07-02 | 2021-01-06 | Pepticus s.r.o. | A method of preparing an individual probiotic composition according to analysis of the microbiome and medical history for human or veterinary use |
-
1999
- 1999-12-02 RU RU99125560/14A patent/RU2177152C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Инструкция по применению дисков для определения чувствительности к антибиотикам. - М., 1986. Лабораторные методы исследования в клинике. Справочник под ред. проф. В.В. МЕНЬШИКОВА. - М.: Медицина, 1987, с.341-343. * |
ФС 42-3365-97. Колибактерин сухой. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2451085C2 (ru) * | 2010-06-02 | 2012-05-20 | Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии | Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis |
EP3760054A1 (en) | 2019-07-02 | 2021-01-06 | Pepticus s.r.o. | A method of preparing an individual probiotic composition according to analysis of the microbiome and medical history for human or veterinary use |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Barry et al. | An improved single-disk method for testing the antibiotic susceptibility of rapidly-growing pathogens | |
Stepanović et al. | Staphylococcus sciuri as a part of skin, nasal and oral flora in healthy dogs | |
Mukhammadiev et al. | Antagonistic properties and biocompatibility as important principles for development of effective and biosafety probiotic drugs | |
Lochhead et al. | Aspects of antagonisms between micro-organisms in soil | |
RU2177152C2 (ru) | Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов | |
CN104946723B (zh) | 一种用于乳酸菌耐药性测定的通用培养基及其应用 | |
Waisbren et al. | Comparative action of aureomycin, chloromycetin, neomycin, Q-19, and polymyxin B against gram negative bacilli | |
CN114504106A (zh) | 乳双歧杆菌bl-99在抗衰老、提高先天免疫方面的新应用 | |
Bezirtzoglou et al. | Emerging antibiotic resistance in honey as a hazard for human health | |
Deneke et al. | Fibrinogen media for studies on staphylococci | |
Tzannetis et al. | Enterocinogeny and lysogeny in enterococci | |
Kosikowski et al. | Natural inhibitory characteristics of some irish manufacturing milks | |
El-Sherbiny et al. | Enhancement of Streptomyces sp. Mh-133 activity against some antibiotic resistant bacteria using biotic elicitation | |
Kamel et al. | Comparative Study of the Static Magnetic Field Effects on Growth Rate with Relative Antibiotic Susceptibility in Escherichia coli | |
RU2422150C1 (ru) | Способ подавления корд-фактора патогенности микобактерий туберкулеза | |
Hadke et al. | Anti-Microbial Activity of Antibiotic Produced From Fungi by Fermentation Process. | |
Zhao et al. | Characterization of Endophytes Isolated from Eclipta prostrate and Roles in Regulating the Gut Microbiota of C57BL/6J Mice | |
RU2187801C2 (ru) | Способ определения антагонистической активности пробиотиков | |
RU2048517C1 (ru) | Штамм бактерий bifidobacterium longum, используемый для приготовления бактериальных препаратов и кисломолочных продуктов | |
Czekalowski et al. | Observations on the nutrition of Leptospira based on the development of Dinger’s phenomenon | |
CN116869989A (zh) | 衣康酸在抑制大肠杆菌和沙门氏菌中的应用 | |
Brandberg et al. | Methodological aspects of an agar plate technique for determination of biologically active 5‐fluorouracil in blood, urine and bile | |
RU2253674C2 (ru) | Биопрепарат лечебно-профилактического действия при эндометритах животных | |
Agius et al. | The action of" Penbritin" on Brucella micro-organism | |
RU2608871C1 (ru) | Штамм бактерий Lactobacillus paracasei 1, используемый для приготовления пробиотического препарата |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
NF4A | Reinstatement of patent | ||
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20071203 |