RU2451085C2 - Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis - Google Patents

Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis Download PDF

Info

Publication number
RU2451085C2
RU2451085C2 RU2010122594/10A RU2010122594A RU2451085C2 RU 2451085 C2 RU2451085 C2 RU 2451085C2 RU 2010122594/10 A RU2010122594/10 A RU 2010122594/10A RU 2010122594 A RU2010122594 A RU 2010122594A RU 2451085 C2 RU2451085 C2 RU 2451085C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
bacillus subtilis
antibacterial activity
tnp
dept
petri dishes
Prior art date
Application number
RU2010122594/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2010122594A (ru
Inventor
Михаил Петрович Неустроев (RU)
Михаил Петрович Неустроев
Надежда Петровна Тарабукина (RU)
Надежда Петровна Тарабукина
Нелли Ильинична Прокопьева (RU)
Нелли Ильинична Прокопьева
Светлана Ивановна Парникова (RU)
Светлана Ивановна Парникова
Original Assignee
Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии filed Critical Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии
Priority to RU2010122594/10A priority Critical patent/RU2451085C2/ru
Publication of RU2010122594A publication Critical patent/RU2010122594A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2451085C2 publication Critical patent/RU2451085C2/ru

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Способ может быть использован в биотехнологии и ветеринарии. Для определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов Bacillus subtilis проводят посев тест-культур по всей поверхности мясопептонного агара в чашках Петри. Подготавливают гранулы цеолита Хонгуринского месторождения в течение 60 мин при комнатной температуре и обрабатывают их суспензией штаммов бактерий-антагонистов Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП. Помещают их на чашки Петри. Инкубируют и учитывают результаты посева по силе роста бактерий антагонистов после 72 ч инкубирования. Это обеспечивает эффективность определения антибактериальной активности бактерий. 1 табл.

Description

Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов рода Bacillus.
Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к лабораторным методам определения свойств микробов-антагонистов.
Известен способ определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам путем диффузии в мясопептонный агар с бумажного диска в чашках Петри (Справочник по микробиологическим и вирусологическим исследованиям. - М.: Медицина, 1982. - С.180-181).
Известен способ профилактики болезней органов дыхания и повышения продуктивности молодняка оленей путем использования пробиотика «Сахабактисубтил» из штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП, адсорбированных на цеолите (RU 2385729 C1, 10.04.2010 г.). Однако данный способ не применяется для определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов в лабораторных условиях.
В основу изобретения положена задача разработки способа определения антибактериальной активности микробов-антагонистов в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.
Технический результат изобретения - способ эффективного определения антагонистических свойств микробного препарата путем помещения цеолита Хонгуринского месторождения, адсорбировавшего микробы-антагонисты, на Чашки Петри с тест-культурами. В качестве микробов-антагонистов используют штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП. Гранулы цеолита, обработанные суспензией штаммов бактерий, обладают антагонистическими свойствами в отношении тест-культур Е. coli, Str. aureas, Sal. Typhimurium.
Технический результат изобретения достигается следующим образом.
Штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП адсорбируют на цеолите Хонгуринского месторождения. Гранулы цеолита, адсорбировавшие микроорганизмы, помещают в чашки Петри посеянными с тест-культурами микроорганизмов и учитывают антибактериальную активность микробов-антагонистов по зоне задержки роста условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.
Микроорганизмы, адсорбированные на цеолите, задерживают рост и развитие условно-патогенных и патогенных микроорганизмов.
В качестве микроба-антагониста используют штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП, депонированные в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ). Справки о депонировании выданы 6 февраля 2001 г. за №180/15 и №181/15.
Штаммы бактерий могут быть получены в лаборатории по разработке микробных препаратов ГНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии и ВГНКИ.
Штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП выращивают в мясопептонном агаре рН 7,0-7,2 в течение 5 суток при 37°C, а затем суспензируют в равных соотношениях в физиологическом растворе хлористого натрия в концентрации 2 млрд KOE/мл.
Цеолит Хонгуринского месторождения фракции 2-5 мм отмывают, сушат при 150°C. Затем цеолит помещают в суспензию, содержащую 2 млрд KOE/мл штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THР-5-ДЕП на 60 минут при комнатной температуре из расчета 5 г цеолита на 20 мл суспензии микроорганизмов.
В качестве тест-культур используют штаммы бактерий Е. coli-1257, Str. aureas-209P, Sal. Typhimurium. Посев тест-культур производят по всей поверхности мясопептонного агара в чашках Петри.
Гранулы цеолита после выдержанной экспозиции помещают на середину чашки Петри и ставят в термостат при 37°C. Просмотр роста микроорганизмов в чашках проводят через 72 часа.
В качестве контроля на чашки Петри помещают цеолит, обработанный дистиллированной водой, и бумажные диски с адсорбированными штаммами бактерий-антагонистов Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП.
В чашках Петри с микробами-антагонистами, адсорбированными на цеолите, отсутствует рост условно-патогенных и патогенных микроорганизмов. Отмечается рост штаммов бактерий subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП.
В чашках с цеолитом, обработанным только дистиллированной водой, отмечается рост тест-культур. В пробах с бумажными дисками отмечается рост тест-объектов по краям чашек и рост микробов-антагонистов вокруг дисков.
Таким образом, гранулы цеолита Хонгуринского месторождения, адсорбировавшего штаммы бактерий-антагонистов Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis THП-5-ДЕП, можно использовать для определения антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.
Результаты по изучению антагонистических свойств штаммов Bacillus subtilis, адсорбированных на цеолите-хонгурине
Тест-культуры Результаты просмотра посевов
2 млрд КОЕ/мл
24 ч 72 ч 5 суток
Цеолит + Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП
1 E. coli - - -
2 Sal. typhimurium ± - -
3 Str. aureas - - -
Контроль (цеолит+вода)
1 E. coli + + +
2 Sal. typhimurium + + +
3 Str. aureas + + +
Контроль (бумажные диски+Bacillus subtilis)
1 E. coli ± ± ±
2 Sal. typhimurium ± ± ±
3 Str. aureus ± ± ±
Обозначение: (-) - сплошной рост микроба антагониста; (+) - рост тест-культуры; (±) - единичный рост колоний тест-культуры и сплошной рост антагониста.

Claims (1)

  1. Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов Bacillus subtilis, включающий посев тест-культур по всей поверхности мясо-пептонного агара в чашках Петри, приготовление суспензии штаммов-антагонистов Bacillus subtilis ТНП-3-ДЕП и Bacillus subtilis ТНП-5-ДЕП, содержащей 2 млрд KOE/мл, обработку полученной суспензией приготовленных гранул цеолита Хонгуринского месторождения в течение 60 мин при комнатной температуре с последующим помещением их на чашки Петри, инкубацию и учет результатов посева по силе роста бактерий антагонистов после 72 ч инкубирования.
RU2010122594/10A 2010-06-02 2010-06-02 Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis RU2451085C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010122594/10A RU2451085C2 (ru) 2010-06-02 2010-06-02 Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010122594/10A RU2451085C2 (ru) 2010-06-02 2010-06-02 Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2010122594A RU2010122594A (ru) 2011-12-10
RU2451085C2 true RU2451085C2 (ru) 2012-05-20

Family

ID=45405223

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010122594/10A RU2451085C2 (ru) 2010-06-02 2010-06-02 Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2451085C2 (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2537271C1 (ru) * 2013-09-06 2014-12-27 Республика Саха (Якутия), от имени которой выступает уполномоченное Государственным комитетом Республики Саха (Якутия) по инновационной политике и науке лицо-Государственное бюджетное учреждение "Академия наук Республики Саха (Якутия)" (ГБУ АН РС(Я)) Способ подавления жизнеспособности патогенных лептоспир
US9567259B2 (en) 2013-02-11 2017-02-14 Corning Incorporated Antimicrobial glass articles and methods of making and using same

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2177152C2 (ru) * 1999-12-02 2001-12-20 Пермское научно-производственное объединение "Биомед" Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов
RU2328734C1 (ru) * 2006-09-14 2008-07-10 Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Сибирского отделения Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН) Способ определения антагонистически активных штаммов бактерий
RU2385729C1 (ru) * 2008-09-08 2010-04-10 Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства РАСХН Способ профилактики болезней органов дыхания и повышения продуктивности молодняка оленей

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2177152C2 (ru) * 1999-12-02 2001-12-20 Пермское научно-производственное объединение "Биомед" Способ контроля антагонистической активности препаратов для лечения и профилактики дисбактериозов
RU2328734C1 (ru) * 2006-09-14 2008-07-10 Государственное научное учреждение Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока Сибирского отделения Россельхозакадемии (ГНУ ИЭВСиДВ СО РАСХН) Способ определения антагонистически активных штаммов бактерий
RU2385729C1 (ru) * 2008-09-08 2010-04-10 Государственное научное учреждение Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства РАСХН Способ профилактики болезней органов дыхания и повышения продуктивности молодняка оленей

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
МЕДЖИДОВ М.М. Справочник по микробиологическим питательным средам. - Махачкала: Дагестанское книжное издательство, 1989, с.74, 75. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US9567259B2 (en) 2013-02-11 2017-02-14 Corning Incorporated Antimicrobial glass articles and methods of making and using same
US10155691B2 (en) 2013-02-11 2018-12-18 Corning Incorporated Antimicrobial glass articles and methods of making and using same
RU2537271C1 (ru) * 2013-09-06 2014-12-27 Республика Саха (Якутия), от имени которой выступает уполномоченное Государственным комитетом Республики Саха (Якутия) по инновационной политике и науке лицо-Государственное бюджетное учреждение "Академия наук Республики Саха (Якутия)" (ГБУ АН РС(Я)) Способ подавления жизнеспособности патогенных лептоспир

Also Published As

Publication number Publication date
RU2010122594A (ru) 2011-12-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101974450B (zh) 一株肠膜明串珠菌及其应用
CN101974449B (zh) 一株植物乳杆菌及其应用
US10221440B2 (en) Method for determining the sensitivity of microorganisms to antimicrobial substances
CN105176874B (zh) 凝结芽孢杆菌fm603及其应用
CN105175518B (zh) 凝结芽孢杆菌fm603产生的细菌素及其制备方法
CN109439577A (zh) 一株广谱抗菌解淀粉芽孢杆菌及其应用
CN104946574B (zh) 一株抑制植物病原真菌的枯草芽孢杆菌Baisha2C
Kim et al. Growth inhibition of Cronobacter sakazakii in experimentally contaminated powdered infant formula by kefir supernatant
CN113186139B (zh) 一株植物乳杆菌lr002及其应用
JP6598086B2 (ja) バチルス属の新規細菌およびその使用
Sharma et al. Isolation and characterization of bacteria from cow dung of desi cow breed on different morpho-biochemical parameters in Dehradun, Uttarakhand, India
CN117535169B (zh) 地衣芽孢杆菌zlp-81及其应用
RU2451085C2 (ru) Способ определения антибактериальной активности аэробных споровых микроорганизмов bacillus subtilis
CN117327626A (zh) 一种植物乳杆菌ts1及其培养方法与应用
RU2398872C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus licheniformis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ, ПРЕДНАЗНАЧЕННОЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ВЫСОКОКАЧЕСТВЕННЫХ КОРМОВ, ПОВЫШАЮЩИХ ПРОДУКТИВНОСТЬ И СНИЖАЮЩИХ РИСК ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ, ПТИЦЫ И РЫБ
RU2558293C1 (ru) ШТАММ МИКРОМИЦЕТА Trichoderma hamatum, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ Bacillus anthracis
Ayitso et al. Antimicrobial activities of microorganisms obtained from the gut of Macrotermes michaelseni in Maseno, Kenya
RU2733431C2 (ru) Способ контроля ингибирующих свойств в отношении бактериальной флоры питательной среды для выделения бруцелл
US6817317B2 (en) Animal papilla disinfectants and method of improving microbial environment
Shi et al. Biocontrol of bacterial spot diseases of muskmelon using Paenibacillus polymyxa G-14
Rakovskaya et al. Anti mycoplasmal activity of the concentrate from Trichoderma
RU2571852C2 (ru) ШТАММ БАКТЕРИЙ Enterococcus faecium, ОБЛАДАЮЩИЙ АНТАГОНИСТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ В ОТНОШЕНИИ БАКТЕРИЙ РОДА Listeria И ВИДА Enterococcus faecalis
Shirisha et al. Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and Minimum Bacterial Concentration (MBC) Evaluation of Green Synthesised Silver Nanoparticles on Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactiae
CN117535168B (zh) 巨大芽孢杆菌zlp-21及其应用
RU2422150C1 (ru) Способ подавления корд-фактора патогенности микобактерий туберкулеза

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140603