JP3380956B2 - 黄色ブドウ球菌の検出培地 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 【０００１】 【発明の属する技術分野】 黄色ブドウ球菌の検出培地
に関するもので、従来の識別条件である耐塩性およびマ
ンニットからの酸生成の有無に加え、黄色ブドウ球菌の
生理学的な特徴を利用して、コロニーを着色し当該菌の
レシトビテリン反応（卵黄反応）を容易に観察できる、
あるいは反対に、当該菌の以外のコロニーを着色し、当
該菌の検出を容易にする特異性の高い黄色ブドウ球菌の
選択培地の組成に関する。 【０００２】 【従来の技術】 黄色ブドウ球菌は人や動物の化膿蒼に
由来する食中毒菌である。そのため、黄色ブドウ球菌検
査は、食品の微生物検査で高頻度で実施される項目であ
り、食肉検査協会の検査項目でもある。 【０００３】従来の黄色ブドウ球菌の検出培地として、
卵黄加マンニット食塩寒天培地、スタフィロコッカス１
１０寒天培地（チャップマン寒天培地）、ベアードパー
カー寒天培地、クラネップ寒天培地、コアグラーゼ−マ
ンニット寒天培地、テルライト−グリシン寒天培地、Ｔ
ＧＳＥ寒天培地など多種類の培地が市販されている。 【０００４】＜従来培地の選択原理＞以下にすでに市販
されている黄色ブドウ球菌検出培地７種の検出原理を述
べる。 【０００５】マンニット食塩寒天培地は耐塩性とマンニ
ット分解性（マンニットからの酸生成）、および黄色色
素の生成を識別条件とした培地である（新 細菌培地学
講座下II（第二版） 近代出版 294、295ページ 1992
年）。この培地に卵黄溶液を含有させれば、卵黄反応が
観察可能となる。よってマンニット食塩寒天培地に卵黄
を含有させた卵黄加マンニット食塩寒天培地は、食品微
生物の公定検出法を記載した食品衛生検査指針 微生物
編（厚生省生活衛生局 監修 160〜163ページ（社）日
本食品衛生協会 1990年）に記載され、一般に用いられ
ている。 【０００６】スタフィロコッカス１１０寒天培地（チャ
ップマン寒天培地）は、黄色ブドウ球菌の識別原理とし
て、耐塩性、マンニット分解性、ゼラチン液化能、黄色
色素生成能を利用した培地である（新 細菌培地学講座
下II（第二版） 380、381ページ）。 【０００７】ベアードパーカー寒天培地は黄色ブドウ球
菌の識別原理として、卵黄反応、亜テルル酸塩還元性を
利用した培地である。この培地はピルビン酸ナトリウム
を含有する。ピルビン酸ナトリウムは、過酸化水素分解
作用とともに黄色ブドウ球菌の発育促進作用をもつ。よ
って、ベアードパーカー寒天培地は、加熱した食品や乾
燥食品のように菌の活性が低下した状態のサンプルから
でも黄色ブドウ球菌の検出が可能である（新 細菌培地
学講座 下II（第二版） 62、63ページ）。 【０００８】クラネップ寒天培地の選択原理は、含有さ
れているチオシアン酸カリウムがグラム陰性菌の生育を
抑制し、アクチジオンが芽胞形成菌を生育を抑制し、塩
化リチウムと窒化ナトリウムが他の細菌の発育を阻止す
る。これらに加えて卵黄反応によって黄色ブドウ球菌を
識別する（微生物培地マニュアル メルク・ジャパン
（株） 114ページ 1995年）。 【０００９】コアグラーゼマンニット寒天培地は、ブレ
インハートインフュージョンを含むのが特徴である。ブ
レインハートインフュージョンは、コアグラーゼの産生
を促進させる（新 細菌培地学講座 下II（第二版）
242、243ページ）。 【００１０】テルライトグリシン寒天培地の選択原理
は、亜テルル酸塩と塩化リチウムによりブドウ球菌以外
の菌の生育を抑制し、亜テルル酸塩とグリシンにより黄
色ブドウ球菌以外のブドウ球菌を抑制する。黄色ブドウ
球菌は亜テルル酸塩を還元し、金属テルルとするので集
落は黒色となる（新 細菌培地学講座 下II（第二版）
414〜416ページ）。 【００１１】ＴＧＳＥ寒天には亜テルル酸カリウム、塩
化リチウム、グリシン、卵黄および食塩が含まれている
のが特徴である（製品要覧I（第十六版） 日水製薬 1
02、103ページ 1996年）。亜テルル酸塩と塩化リチウ
ムによりブドウ球菌以外の菌の生育を抑制し、亜テルル
酸塩とグリシンにより黄色ブドウ球菌以外のブドウ球菌
を抑制する。黄色ブドウ球菌は亜テルル酸塩を還元し、
金属テルルとするので集落は黒色となる。さらに卵黄お
よび食塩が含まれるため、卵黄反応および耐塩性によっ
ても黄色ブドウ球菌が識別される。 【００１２】 【発明が解決しようとする課題】従来の検出法には問題
が存在する。まず、マンニット食塩寒天培地およびスタ
フィロコッカス１１０寒天培地においては、黄色ブドウ
球菌の示す黄色色素の産生能力は黄色ブドウ球菌に属す
る株の中においても差がある（食品衛生検査指針微生物
編 165ページ）。よって、株によっては黄色色素の生
成が少なく、コロニーは白色に近い呈色を示す。この場
合に卵黄反応によってコロニーの周囲に生じる油膜（白
濁環）とのコントラストが悪くなる。そのため色素の生
成と卵黄反応を識別条件とする卵黄加マンニット食塩寒
天培地およびスタフィロコッカス１１０寒天培地におい
ては、黄色ブドウ球菌の識別が困難となる。 【００１３】また、標準株をポジティブコントロールと
して試験株と同時にマンニット食塩培地に接種しても、
卵黄反応の有無による識別は必ずしも容易ではない。ま
してや、標準株を持たない多くの食品企業の検査室のス
タッフでは判定が困難なことが多い。さらにスタフィロ
コッカス１１０寒天培地は、選択性が強くないので他の
菌もかなり増殖し、黄色ブドウ球菌の判別が困難な場合
がある。スタフィロコッカス１１０寒天培地上での黄色
ブドウ球菌の色素産生は３０℃で培養した場合に観察し
やすいが、培養時間を４８時間程度に延長しないと、他
の黄色ブドウ球菌特有の性質が観察しにくい（新 細菌
培地学講座 下II（第二版） 301ページ） 【００１４】プロテウス属に属する株はベアードパーカ
ー寒天培地上においてもしばしば生育し、しかも黄色ブ
ドウ球菌と同様の呈色を示すため判定を誤ることがあ
る。一方、ベアードパーカー寒天培地に含まれる亜テル
ル酸塩は選択力が強く、黄色ブドウ球菌に属する株の中
でも亜テルル酸塩耐性の弱い株は、生育が阻害される
（ジャーナル・オブ・アプライド・バクテリオロジー
（Journal of Applied Bacteriology）61巻 149ページ
1986年）。テルライトグリシン寒天培地は、ベアード
パーカー寒天培地と同様に亜テルル酸塩を含み、黄色ブ
ドウ球菌の株によっては、生育が抑制される可能性があ
る。よって、食品のような黄色ブドウ球菌の少ないサン
プルからの黄色ブドウ球菌の検出に用いるのはやや危険
で、食中毒の原因食のような大量のブドウ球菌を含む、
あるいは雑菌の多いサンプルからの黄色ブドウ球菌の検
出に適する（新 細菌培地学講座 下II（第二版） 41
4〜416ページ）。 【００１５】ＴＧＳＥ寒天培地は、ベアードパーカー寒
天と同様に亜テルル酸塩（0.1g/l）、グリシン（5g/
l）、塩化リチウム（5g/l）を含有する。したがって、
ベアードパーカー寒天培地と同様の問題を抱えている。
すなわち、黄色ブドウ球菌の株によっては、生育が抑制
される可能性がある。しかも、ベアードパーカー寒天培
地には含まれていない食塩（6.5%）を含み（製品要覧I
（第十六版） 日水製薬 102、103ページ）、さらに黄
色ブドウ球菌の生育を抑制する可能性がある。 【００１６】コアグラーゼマンニット寒天培地は、黄色
ブドウ球菌の重要な識別条件であるコアグラーゼ反応を
観察した場合に、コアグラーゼ陰性の株が誤って陽性と
判定されることが多い（アメリカン・ジャーナル・オブ
・クリニカル・パソロジー（American Journal of Clin
ical Pathology）48巻 153ページ 1978年）。黄色ブ
ドウ球菌はコアグラーゼ陽性であることから、黄色ブド
ウ球菌の数が実際より多く計数されてしまう（新 細菌
培地学講座 下II（第二版） 242、243ページ)。ま
た、血清を使用するので、検査コストが高くなる。 【００１７】また、ベアードパーカー寒天培地、クラネ
ップ寒天培地、コアグラーゼマンニット寒天培地、およ
びテルライトグリシン寒天培地は価格が高く、食品の検
査などの頻度が多い検査にはよりコストの安い検出培地
が求められている。 【００１８】黄色ブドウ球菌の確定試験は、ラテックス
試薬による凝集テストを用いる。抗体を用いるラテック
ス試薬はコストが高い。よって、より特異性の高い選択
培地で黄色ブドウ球菌を絞りこんでおくのが望ましい。 【００１９】したがって、本発明の課題は、黄色ブドウ
球菌の識別が従来の培地よりも容易で、しかも安価な黄
色ブドウ球菌の検出培地を提供することにある。 【００２０】 【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、本発明の培地では従来の卵黄加マンニット食塩寒天
培地に亜テルル酸塩を含有させる処方あるいはβ−ガラ
クトシダーゼの発色基質を含有させる処方の２通りの処
方で黄色ブドウ球菌の識別を容易にした。 【００２１】本発明の２種類の培地いずれを用いても、
黄色ブドウ球菌のコロニーは発色基質で着色するために
卵黄反応の油膜とのコントラストをより明瞭にできる。
また、本発明で到達した２番目の方法は、ブドウ球菌
（Staphylococcus属）には属するが、黄色ブドウ球菌
（S.aureus）ではない株のコロニーを発色基質で着色
し、黄色ブドウ球菌の識別を容易にする方法である。さ
らに本発明の２種類の培地は、価格が安く、かつ多用さ
れている卵黄加マンニット食塩寒天培地に特定の試薬を
添加した培地であるので、低コストで生産が可能であ
る。 【００２２】本発明の第１番目の処方は亜テルル酸塩卵
黄加マンニット食塩寒天培地と名付けた培地で、卵黄加
マンニット食塩寒天培地に亜テルル酸塩を加える処方で
ある。亜テルル酸塩は選択力が強いため、黄色ブドウ球
菌であっても亜テルル酸塩耐性の弱い株は、生育が阻害
される（ジャーナル・オブ・アプライド・バクテリオロ
ジー 61巻 149ページ）。卵黄加マンニット食塩寒天培
地に含有される食塩は7.5%と高濃度である。発明者の実
験によれば、卵黄加マンニット食塩寒天培地に亜テルル
酸カリウムをベアードパーカー寒天培地と同じ濃度（0.
1g/l）で含有させた培地を調製黄色ブドウ球菌を接種し
たところ、生育は著しく抑制された。生育が阻害された
ために卵黄反応が抑制され、黄色ブドウ球菌の識別が困
難となり実用性はなかった。よって、単に卵黄加マンニ
ット食塩寒天培地とベアードパーカー寒天培地の組成の
組み合わせでは、本発明の目的を達成することができな
いことがわかった。そこで、生育阻害が起きず、しかも
短時間（24時間前後）で金属テルルの黒色が卵黄反応の
白濁環とコントラストが良好に現れる濃度を鋭意検討し
た。その結果、亜テルル酸カリウム濃度が10〜50mg/lの
場合にコロニーがよく染色され、生育阻害も軽減される
ことが判明した。 【００２３】本発明の第２番目の処方は、Ｘ−ｇａｌ卵
黄加マンニット食塩寒天培地と名付けた培地で、卵黄加
マンニット食塩寒天培地にβ−ガラクトシダーゼの発色
基質であるＸ−ｇａｌを含有させる処方である。黄色ブ
ドウ球菌の生理学的性質では、β−ガラクトシダーゼが
無い。ブドウ球菌には属するが、黄色ブドウ球菌ではな
い種、例えばスタフィロコッカス・サプロフィティカス
（S.saprophyticus）やスタフィロコッカス・キシロサ
ス（S.xylosus）の種に属する株は、β−ガラクトシダ
ーゼ活性を持つ。β−ガラクトシダーゼ活性を持つ株は
合成発色基質であるＸ−ｇａｌを分解するため、Ｘ−ｇ
ａｌが存在するとコロニーが青く着色する。この性質を
利用すれば、Ｘ−ｇａｌを含有させた培地上に生育した
青いコロニーは全て黄色ブドウ球菌ではないと判定でき
る。しかし、本発明者の実験によれば、卵黄加マンニッ
ト食塩寒天培地にＸ−ｇａｌのみを含有させた処方で
は、24時間培養後のコロニーの色は薄かった。そこで発
色が明瞭になるように、β−ガラクトシダーゼの誘導物
質であるＩＰＴＧを含有させβ−ガラクトシダーゼの産
生を促進させた。ＩＰＴＧを含有させた卵黄加マンニッ
ト食塩寒天培地で、発色基質（Ｘ−ｇａｌ）濃度を検討
した結果、Ｘ−ｇａｌの濃度を30〜60mg/lとした場合に
限って、37℃24時間培養後にコロニーが十分に青く着色
された。また、Ｘ−ｇａｌとＩＰＴＧを共に添加したこ
とによる生育阻害は認められなかった。 【００２４】以上の２通りの処方のいずれによっても、
黄色ブドウ球菌の生育、卵黄反応の出現、ならびにマン
ニットからの酸生成を損なうことなく、黄色ブドウ球菌
の検出が容易となり本発明に到達した。 【００２５】本発明において、亜テルル酸塩は、カリウ
ム塩であるかその他の金属塩であるかを問わない。β−
ガラクトシダーゼの合成発色基質の発色団は、５−ブロ
モ−４−クロロ−３−インドリル基に限定されない。本
発明による培地は、卵黄反応、耐塩性、およびマンニッ
ト資化性の識別項目に加えて、亜テルル酸塩還元力、も
しくはβ−ガラクトシダーゼの作用による発色基質分解
によってコロニーを着色するものが該当する。 【００２６】 【発明の実施の形態】本発明の第１の処方は、卵黄加マ
ンニット食塩寒天培地に亜テルル酸塩を加える処方であ
る。黄色ブドウ球菌のコロニーは、当該菌の持つ亜テル
ル酸塩還元力により培地中の亜テルル酸塩を金属テルル
に還元し、黒く着色する。黄色ブドウ球菌のコロニーが
黒く着色し、当該菌が培地中の卵黄に反応して生じる白
い油膜（卵黄反応）を明瞭に確認できる。よって、容易
に培地上のコロニーから当該菌を検出できる。 【００２７】また、本発明の第２の処方は、卵黄加マン
ニット食塩培地にβ−ガラクトシダーゼ活性により分解
されるＸ−ｇａｌなどの発足気質を加える処方である。
Ｘ−ｇａｌを発色基質として用いた場合、β−ガラクト
シダーゼ活性を有する株は青く着色する。黄色ブドウ球
菌はβ−ガラクトシダーゼ活性を持たない。よって、青
いコロニーは黄色ブドウ球菌ではないと容易に判定でき
る。 【００２８】 【実施例】以下に黄色ブドウ球菌の検出培地の概略を示
す。本実験の目的は、従来使用されている卵黄加マンニ
ット寒天培地の選択性を損なうことなく、黄色ブドウ球
菌のコロニーを着色することで卵黄反応により生じるコ
ロニー周囲の白色の皮膜を観察しやすくすることにあ
る。また、黄色ブドウ球菌がβ−ガラクトシダーゼ活性
を持たないことを利用して、合成基質（Ｘ−ｇａｌ）に
よって黄色ブドウ球菌以外のブドウ球菌のコロニーを着
色し、黄色ブドウ球菌の識別を容易にすることにある。 【００２９】培地の調製方法は、マンニット食塩寒天培
地（肉エキス1g、ポリペプトン10g、食塩75g、マンニッ
ト10g、寒天培地15g、フェノールレッド25mg、精製水10
00ml、pH7.4）を121℃で15分間滅菌後、卵黄溶液（50%
乳剤、メルク社）50mlとともに亜テルル酸カリウム溶
液、あるいはＩＰＴＧ溶液とＸ−ｇａｌ溶液（ジメチル
ホルムアミドに溶解した）を無菌的に別途添加した。 【００３０】培地の調製にあたっては、卵黄の変性とＸ
−ｇａｌの分解を防ぎ、Ｘ−ｇａｌ溶液の溶媒であるジ
メチルホルムアミドを揮発させるために、滅菌後の培地
を50〜70℃に冷却してから、卵黄溶液（50%乳剤）50ml
とともに亜テルル酸カリウム溶液、あるいはＩＰＴＧ溶
液とＸ−ｇａｌ溶液を加えるのが望ましい。 【００３１】以下実施例により本発明の内容を詳細に説
明する。ただし、本発明はこれらの例に限定されない。 【実施例１】卵黄加マンニット食塩寒天培地に亜テルル
酸カリウムを含有させた黄色ブドウ球菌検出培地 【００３２】亜テルル酸カリウムを含有させた寒天培地
の有効性を実験によって示した。まず、亜テルル酸カリ
ウムの至適含有濃度を求める試験を行った。被検株は黄
色ブドウ球菌であるS.aureus IFO13276P（Ｐはアメリカ
食品医薬品局における基準株であるFDA209Pと同一の株
であることを示す)を用いた。 【００２９】および 【００３０】に記述した方法にしたがって、亜テルル酸
カリウムを含む寒天培地（以下、亜テルル酸塩卵黄加マ
ンニット食塩寒天培地と称する）を調製した。亜テルル
酸カリウムの濃度は0〜100mg/lまで変化させた。 【００３３】被検株を液体培地（ポリペプトン0.5%、肉
エキス0.3%、食塩0.5%、pH7.0）に接種し、24時間培養
後、濁度（OD660）が0.1となるように滅菌した生理食塩
水（0.85%食塩水溶液）で希釈した。次に希釈液を、生
理食塩水で１万倍、および10万倍希釈した菌液を卵黄加
マンニット食塩寒天培地および亜テルル酸塩卵黄加マン
ニット食塩寒天培地に0.1ml塗抹し、37℃で24時間培養
した。培地の評価は、培地に出現したコロニー数および
大きさ、卵黄反応の明瞭さ（反応の出現程度とコントラ
ストの明瞭さ）、マンニットからの酸生成（コロニー周
囲の培地の黄変）、およびコロニーの着色度合い（黒
さ）について項目別に評価した。評価は３点法（最高２
点、最低０点）とし、培地上のコロニー数、培地上のコ
ロニーの大きさ、とし、数値が高い方を良好とした。卵
黄加マンニット食塩寒天培地と亜テルル酸塩卵黄加マン
ニット食塩寒天培地では、培地に出現したコロニーの数
は、亜テルル酸カリウム濃度によらず差がなかった。よ
って、他の４項目について、結果を表１および表２に示
した。 【００３４】 【表１】枠０１ 【００３５】 【表２】 枠０２ 【００３６】亜テルル酸カリウム濃度と黄色ブドウ球菌
の出現状況の関係について、次の結果を得た。亜テルル
酸カリウム濃度を10mg/l以上とした場合にコロニーを黒
く着色できた。よって、コロニー周囲に見られる卵黄反
応を明瞭にする目標は達成できた。しかし、亜テルル酸
カリウムを40mg/l以上含有させるとマンニットからの酸
の生成、および50mg/l以上含有させると卵黄反応が抑制
された。よって、亜テルル酸カリウムの含有量としては
10〜35mg/lが適し、特にコロニーの発色が良好な25〜35
mg/lが最適であった。 【００３７】次に亜テルル酸塩卵黄加マンニット食塩寒
天培地の黄色ブドウ球菌の選択性を調べた。実験に用い
た株は、黄色ブドウ球菌４株、黄色ブドウ球菌以外のブ
ドウ球菌11株、ミクロコッカス（Micrococcus）属菌
（しばしば黄色ブドウ球菌の検出培地上に出現すること
が知られている）、およびエンテロコッカス（Enteroco
ccus）属菌各１株、グラム陰性菌として大腸菌１株であ
る。すなわち、４株の黄色ブドウ球菌の生育と発色が14
株の非黄色ブドウ球菌の生育と発色を明瞭に識別できる
かを調べた。被検菌は液体培地（ポリペプトン0.5%、肉
エキス0.3%、食塩0.5%、pH7.0）で24時間培養後、菌液
を各10μｌずつ培地上に接種した。培地の製法は 【００２９】および 【００３０】記載の方法で行った。なお、亜テルル酸カ
リウムの濃度は30mg/lとした。この試験に用いた亜テル
ル酸塩卵黄加マンニット食塩寒天培地の組成を表３に示
した。評価は、培地上のコロニーの色（黒さ）、卵黄反
応の有無とマンニットからの酸生成（コロニー周囲の培
地の黄変）について行った。結果を表４および表５に示
した。 【００３８】 【表３】 枠０３ 【００３９】 【表４】枠０４ 【００４０】 【表５】 枠０５ 【００４１】亜テルル酸塩卵黄加マンニット食塩寒天培
地における黄色ブドウ球菌の選択性について次の結果を
得た。亜テルル酸塩卵黄加マンニット食塩寒天培地で
は、卵黄反応が卵黄加マンニット食塩寒天培地に較べて
見やすくなった。具体的には、S. aureus IFO 14462は
この株のもともとの特徴の１つとして黄色色素の産生能
力が弱いので、卵黄加マンニット食塩寒天培地ではコロ
ニーが白色になり、卵黄反応の白濁環とのコントラスト
が不明瞭だった。一方、亜テルル酸塩卵黄加マンニット
食塩寒天培地では、コロニーが黒くなり、卵黄反応の確
認が容易であった。また、MicrococcusおよびEnterococ
cusの発育は卵黄加マンニット食塩寒天培地の場合と同
様に僅かであった。また、亜テルル酸塩卵黄加マンニッ
ト食塩寒天培地では、卵黄加マンニット食塩寒天培地の
場合と同様に大腸菌は全く生育しなかった。 【００４２】以上より、卵黄加マンニット食塩寒天培地
の選択性を損なうことなく、さらに黄色ブドウ球菌の識
別が明瞭な新規培地（亜テルル酸塩卵黄加マンニット食
塩寒天培地）の発明に到った。 【００４３】 【実施例２】卵黄加マンニット食塩寒天培地にＸ−ｇａ
ｌを含有させた黄色ブドウ球菌検出培地 【００４４】Ｘ−ｇａｌの至適含有濃度を求める試験を
行った。被検菌株はβ−ガラクトシダーゼ活性を有する
ブドウ球菌であるS.saprophyticus JCM2427Tを用いた。 【００２９】および 【００３０】に記載した方法にしたがって培地を調製し
た。培地にはＩＰＴＧを25mg/l含有させた。Ｘ−ｇａｌ
の含有量は0〜80mg/lまで変化させて試験を行った。以
下、Ｘ−ｇａｌおよびＩＰＴＧを含有させた卵黄加マン
ニット食塩寒天培地をＸ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩
寒天培地と呼ぶ。 【００４５】Ｘ−ｇａｌの濃度決定試験は、 【００３３】と同様に行った。Ｘ−ｇａｌ卵黄加マンニ
ット食塩寒天培地と卵黄加マンニット食塩寒天培地で
は、培地に出現したコロニーの数や大きさは、Ｘ−ｇａ
ｌ濃度によらず差がなかった。しかし、コロニーの色の
濃さとマンニットからの酸生成には差が認められた。こ
の２項目について、結果を表６に示した。 【００４６】 【表６】 枠０６ 【００４７】Ｘ−ｇａｌ濃度と黄色ブドウ球菌の出現状
況の関係について、次の結果を得た。すなわち、Ｘ−ｇ
ａｌ濃度が30mg/l以上でS.saprophyticus のコロニーは
青く発色し、β−ガラクトシダーゼ陽性ブドウ球菌（黄
色ブドウ球菌は陰性）のコロニーを着色するという目的
が達成された。しかし、Ｘ−ｇａｌ濃度が60mg/l以上含
有すると、マンニットからの酸の生成が抑制された。よ
って、Ｘ−ｇａｌの添加量としては、30mg/l以上が適
し、特にコロニーの発色が良好な40〜60mg/lが最適であ
った。 【００４８】次にＸ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩寒天
培地の黄色ブドウ球菌の選択性を調べた。試験方法およ
び評価方法は 【００３７】と同様とした。Ｘ−ｇａｌは50mg/l、ＩＰ
ＴＧは25mg/lを卵黄加マンニット食塩寒天培地に添加し
た。この試験に用いたＸ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩
寒天培地の組成を表７に示した。選択性試験の結果を表
８および表９に示した。 【００４９】 【表７】 枠０７ 【００５０】 【表８】枠０８ 【００５１】 【表９】枠９ 【００５２】Ｘ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩寒天培地
の黄色ブドウ球菌の選択性について次の結果を得た。Ｘ
−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩寒天培地では、黄色ブド
ウ球菌の色は黄色ないし白色であった。黄色ブドウ球菌
以外のブドウ球菌は、S.saprophyticus JCM2427Tおよび
S.xylosus JCM2427Tの２菌株がコロニーが青くなり、他
の菌株は白色であった。このことは従来の培地よりも黄
色ブドウ球菌の絞り込みが容易になったことを意味す
る。さらに、培養時間を48時間とすると、S.saprophyti
cus JCM2427T、スタフィロコッカス・スキウリー（S.sc
iuri） JCM2425T、およびスタフィロコッカス・シミュ
ランス（S.simulans） JCM2424Tのコロニーが緑色がか
って発色し、さらに絞り込みが容易となった。また、Ｘ
−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩寒天培地ではMicrococcu
s、およびEnterococcusの生育は抑制され、大腸菌の生
育は完全に阻止された。 【００５３】以上より、卵黄加マンニット食塩寒天培地
の選択性を損なうことなく、さらに黄色ブドウ球菌の識
別が明瞭な新規培地（Ｘ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩
寒天培地Ｘ−ｇａｌ卵黄加マンニット食塩寒天培地）が
できたといえる。 【００５４】 【発明の効果】本発明によれば、従来の培地では確認が
困難だった黄色ブドウ球菌を識別する決め手となる卵黄
反応による白濁環（油膜）が明瞭となり、識別が容易か
つ低コストで可能となる。

フロントページの続き (72)発明者 田村吉史 北海道江別市文京台緑町589番地４ 北 海道立食品加工研究センター内

Claims (1)

1. (57)【特許請求の範囲】 【請求項１】 亜テルル酸塩を１０〜２０ｍｇ／ｌ添加
   し、培地上の黄色ブドウ球菌を着色することにより、黄
   色ブドウ球菌コロニーの識別を明瞭にした卵黄加マンニ
   ット食塩寒天培地。