JP2001008679A - 大腸菌ｏ２６分離用培地 - Google Patents
大腸菌ｏ２６分離用培地Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】本発明は食中毒菌である大腸菌Ｏ２６の分離用
培地に関し、食品をはじめとする種々の検体中の大腸菌
Ｏ２６を、特殊な熟練や技術を必要とせず、短時間にか
つ容易にまた正確に検出できる特定の培地組成物を提供
する。 【解決手段】本発明の課題は、ラムノース、ｐＨ指示
薬、および酵素発色基質を含有する選択性を高めた大腸
菌Ｏ２６分離用培地により達成された。
培地に関し、食品をはじめとする種々の検体中の大腸菌
Ｏ２６を、特殊な熟練や技術を必要とせず、短時間にか
つ容易にまた正確に検出できる特定の培地組成物を提供
する。 【解決手段】本発明の課題は、ラムノース、ｐＨ指示
薬、および酵素発色基質を含有する選択性を高めた大腸
菌Ｏ２６分離用培地により達成された。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は食中毒菌である腸管
出血性大腸菌血清型Ｏ２６（大腸菌Ｏ２６）の分離用培
地に関するものである。
出血性大腸菌血清型Ｏ２６（大腸菌Ｏ２６）の分離用培
地に関するものである。
【０００２】なお、本発明では次の略語を使用すること
がある。また、−Ｇｌｃで表される酵素発色基質は、グ
ルクロン酸体および適当な塩を含むものとする。
がある。また、−Ｇｌｃで表される酵素発色基質は、グ
ルクロン酸体および適当な塩を含むものとする。
Ｘ−Ｇｌｃ：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Glucop
yranoside Ｘ−Ｇａｌ：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galact
opyranoside Ｂｌｕｏ−Ｇｌｃ：5-Bromo-3-Indolyl-β-D-Glucopyra
noside Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ：5-Bromo-3-Indolyl-β-D-Galactopy
ranoside ＭＵ−Ｇｌｃ：4-Methyl-Umbelliferyl-β-D-Glucopyra
noside ＭＵ−Ｇａｌ：4-Methyl-Umbelliferyl-β-D-Galactopy
ranoside ＯＮＰ−Ｇｌｃ：o-Nitrophenyl-β-D-Glucopyranoside ＯＮＰ−Ｇａｌ：o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranosi
de Ｍａｇｅｎｔａ−Ｇｌｃ：5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl
-β-D-Glucopyranoside Ｍａｇｅｎｔａ−Ｇａｌ：5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl
-β-D-Galactopyranoside Ｓａｌｍｏｎ−Ｇｌｃ：6-Chloro-3-Indolyl-β-D-Gluc
opyranoside Ｓａｌｍｏｎ−Ｇａｌ：6-Chloro-3-Indolyl-β-D-Gala
ctopyranoside
yranoside Ｘ−Ｇａｌ：5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl-β-D-Galact
opyranoside Ｂｌｕｏ−Ｇｌｃ：5-Bromo-3-Indolyl-β-D-Glucopyra
noside Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ：5-Bromo-3-Indolyl-β-D-Galactopy
ranoside ＭＵ−Ｇｌｃ：4-Methyl-Umbelliferyl-β-D-Glucopyra
noside ＭＵ−Ｇａｌ：4-Methyl-Umbelliferyl-β-D-Galactopy
ranoside ＯＮＰ−Ｇｌｃ：o-Nitrophenyl-β-D-Glucopyranoside ＯＮＰ−Ｇａｌ：o-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranosi
de Ｍａｇｅｎｔａ−Ｇｌｃ：5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl
-β-D-Glucopyranoside Ｍａｇｅｎｔａ−Ｇａｌ：5-Bromo-6-Chloro-3-Indolyl
-β-D-Galactopyranoside Ｓａｌｍｏｎ−Ｇｌｃ：6-Chloro-3-Indolyl-β-D-Gluc
opyranoside Ｓａｌｍｏｎ−Ｇａｌ：6-Chloro-3-Indolyl-β-D-Gala
ctopyranoside
【０００３】
【従来の技術】大腸菌Ｏ２６は腸内細菌科に属し、グラ
ム陰性、通性嫌気性の無芽胞桿菌であり、菌体表面にあ
る抗原構造によって通常の大腸菌と区別される。大腸菌
Ｏ２６による食中毒は、本菌に汚染された食肉、牛乳、
卵及びこれらの加工食品を摂取し、腸管内で増殖するこ
とによって起こる感染型食中毒で、大腸菌Ｏ２６食中毒
は増加の傾向にあるとされている。
ム陰性、通性嫌気性の無芽胞桿菌であり、菌体表面にあ
る抗原構造によって通常の大腸菌と区別される。大腸菌
Ｏ２６による食中毒は、本菌に汚染された食肉、牛乳、
卵及びこれらの加工食品を摂取し、腸管内で増殖するこ
とによって起こる感染型食中毒で、大腸菌Ｏ２６食中毒
は増加の傾向にあるとされている。
【０００４】大腸菌Ｏ２６の検出は一般的には以下のよ
うに行われている。まず、検体をマッコンキー寒天培地
（ＭＡＣ）、デソキシコーレイト寒天培地（ＤＥＳＯ）
などの腸内細菌選択培地に塗抹する。３７℃、１８−２
４時間培養し、平板培地上の集落を観察する。さらに平
板培地上の大腸菌と思われる集落を釣菌し、大腸菌同定
キットや生化学性状検査鑑別培地に接種し、３７℃、１
８−２４時間培養し同定する。大腸菌と同定されたの
ち、これらの集落や増菌された菌を用いて、抗血清によ
る免疫学的試験により血清型Ｏ２６であることを確認す
る。菌数の少ない場合は、分離培養の前にｍｏｄｉｆｉ
ｅｄ ＥＣ（ｍＥＣ）培地やＥＣ培地による増菌培養を
行う場合がある。
うに行われている。まず、検体をマッコンキー寒天培地
（ＭＡＣ）、デソキシコーレイト寒天培地（ＤＥＳＯ）
などの腸内細菌選択培地に塗抹する。３７℃、１８−２
４時間培養し、平板培地上の集落を観察する。さらに平
板培地上の大腸菌と思われる集落を釣菌し、大腸菌同定
キットや生化学性状検査鑑別培地に接種し、３７℃、１
８−２４時間培養し同定する。大腸菌と同定されたの
ち、これらの集落や増菌された菌を用いて、抗血清によ
る免疫学的試験により血清型Ｏ２６であることを確認す
る。菌数の少ない場合は、分離培養の前にｍｏｄｉｆｉ
ｅｄ ＥＣ（ｍＥＣ）培地やＥＣ培地による増菌培養を
行う場合がある。
【０００５】このように従来の大腸菌Ｏ２６検出法は熟
練された技術と３〜５日間の長時間が必要であるという
問題があった。また、前述した各種の選択分離培地は大
腸菌のみの選択分離を目的としたものではなく、そのほ
とんどの培地では多くの腸内細菌が発育する。それ故、
このような選択分離培地から大腸菌を疑う菌株を鑑別す
るには熟練と経験が必要であり、大腸菌と確認された後
さらに血清型を特定する必要がある。通常検査される材
料中には食中毒の原因となる大腸菌Ｏ２６と同時に通常
の大腸菌が混在している場合が多く、そのため多くの集
落を釣菌して確認する必要があり、原因菌の特定は困難
を極めている。従って、大腸菌Ｏ２６のみを鑑別できる
選択分離培地での所見で大腸菌Ｏ２６の有無が判断でき
れば、汚染された食材や食品を早期に排除でき、また食
中毒患者の早期診断が可能になる。大腸菌Ｏ２６を短時
間で検出し、汚染された食品や加工原料を排除すること
は、食品会社や一般消費者にとって重要な問題であり、
また食中毒患者の糞便等の検体より、原因菌を迅速に発
見することは、患者の早期治療の一助となる。
練された技術と３〜５日間の長時間が必要であるという
問題があった。また、前述した各種の選択分離培地は大
腸菌のみの選択分離を目的としたものではなく、そのほ
とんどの培地では多くの腸内細菌が発育する。それ故、
このような選択分離培地から大腸菌を疑う菌株を鑑別す
るには熟練と経験が必要であり、大腸菌と確認された後
さらに血清型を特定する必要がある。通常検査される材
料中には食中毒の原因となる大腸菌Ｏ２６と同時に通常
の大腸菌が混在している場合が多く、そのため多くの集
落を釣菌して確認する必要があり、原因菌の特定は困難
を極めている。従って、大腸菌Ｏ２６のみを鑑別できる
選択分離培地での所見で大腸菌Ｏ２６の有無が判断でき
れば、汚染された食材や食品を早期に排除でき、また食
中毒患者の早期診断が可能になる。大腸菌Ｏ２６を短時
間で検出し、汚染された食品や加工原料を排除すること
は、食品会社や一般消費者にとって重要な問題であり、
また食中毒患者の糞便等の検体より、原因菌を迅速に発
見することは、患者の早期治療の一助となる。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】従って本発明の目的
は、食品をはじめとする種々の検体中の大腸菌Ｏ２６
を、特殊な熟練や技術を必要とせず、短時間にかつ容易
にまた正確に検出できる特定の培地組成物を提供するこ
とにある。
は、食品をはじめとする種々の検体中の大腸菌Ｏ２６
を、特殊な熟練や技術を必要とせず、短時間にかつ容易
にまた正確に検出できる特定の培地組成物を提供するこ
とにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】従来、細菌の識別にその
菌が保有する酵素を利用する方法が知られている。それ
はその酵素により分解され、色素を発生する酵素発色基
質を用いる方法である。例えば、１９７５年、１９７６
年に発表された文献[1][2]には、細菌由来の酵素により
分解されて黄色の色素であるオルトニトロフェノールを
発生するＯＮＰ−ＧａｌやＯＮＰ−Ｇｌｃ、蛍光性色素
であるメチルウンベリフェロンを発生するＭＵ−Ｇａｌ
やＭＵ−Ｇｌｃを酵素発色基質として添加した酵素発色
基質培地の記載があり、大腸菌等の微生物の識別に用い
られている。また、米国特許３８７０６０１号、特開昭
６４−２５９６号、特開平４−５１９００号等にはＭａ
ｇｅｎｔａ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃ、Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ、
Ｘ−Ｇａｌ等の酵素発色基質を添加した腸内細菌識別用
培地が記載されている。しかしながら、酵素発色基質を
大腸菌Ｏ２６の分離用・鑑別用に用いた培地の例は未だ
報告されていない。 [1] J. Clin. Pathol. (1975), 28(8), 686-7 [2] ACTA PATHOL. MICROBIOL. SCAND. SECTION B, (197
6 Oct) 84B (5) 245-51.
菌が保有する酵素を利用する方法が知られている。それ
はその酵素により分解され、色素を発生する酵素発色基
質を用いる方法である。例えば、１９７５年、１９７６
年に発表された文献[1][2]には、細菌由来の酵素により
分解されて黄色の色素であるオルトニトロフェノールを
発生するＯＮＰ−ＧａｌやＯＮＰ−Ｇｌｃ、蛍光性色素
であるメチルウンベリフェロンを発生するＭＵ−Ｇａｌ
やＭＵ−Ｇｌｃを酵素発色基質として添加した酵素発色
基質培地の記載があり、大腸菌等の微生物の識別に用い
られている。また、米国特許３８７０６０１号、特開昭
６４−２５９６号、特開平４−５１９００号等にはＭａ
ｇｅｎｔａ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃ、Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ、
Ｘ−Ｇａｌ等の酵素発色基質を添加した腸内細菌識別用
培地が記載されている。しかしながら、酵素発色基質を
大腸菌Ｏ２６の分離用・鑑別用に用いた培地の例は未だ
報告されていない。 [1] J. Clin. Pathol. (1975), 28(8), 686-7 [2] ACTA PATHOL. MICROBIOL. SCAND. SECTION B, (197
6 Oct) 84B (5) 245-51.
【０００８】かかる実状において本発明者は、大腸菌Ｏ
２６は他の大腸菌と同様にグルコシダーゼおよびガラク
トシダーゼを保有するが、大腸菌Ｏ２６は他の大腸菌と
は異なりラムノース分解能を有さないことに注目し、こ
の性質とｐＨ指示薬および酵素発色基質とを組み合わせ
ることにより、鋭意努力の結果、本発明を完成した。つ
まり、大腸菌Ｏ２６では、培地中のラムノースが分解さ
れないため、ｐＨ指示薬は中性色を示し、また、保有し
ている酵素により、酵素発色基質は分解され発色する
が、見かけ上の色はｐＨ指示薬の中性色と基質の発色と
の相加された発色となる。通常の大腸菌では、培地中の
ラムノースが分解され酸を生成するため、ｐＨ指示薬は
酸性色を示し、保有している酵素により、酵素発色基質
は分解され発色するが、見かけ上の色はｐＨ指示薬の酸
性色と基質の発色との相加された発色となる。この２者
の相加された発色の違いにより本発明では大腸菌Ｏ２６
を分離鑑別する。本発明に用いる基礎培地としては糖分
解能によって腸内細菌を鑑別するＳＳ寒天培地、マッコ
ンキー寒天培地、ＤＨＬ寒天培地、デソキシコーレート
寒天培地等が使用可能である。
２６は他の大腸菌と同様にグルコシダーゼおよびガラク
トシダーゼを保有するが、大腸菌Ｏ２６は他の大腸菌と
は異なりラムノース分解能を有さないことに注目し、こ
の性質とｐＨ指示薬および酵素発色基質とを組み合わせ
ることにより、鋭意努力の結果、本発明を完成した。つ
まり、大腸菌Ｏ２６では、培地中のラムノースが分解さ
れないため、ｐＨ指示薬は中性色を示し、また、保有し
ている酵素により、酵素発色基質は分解され発色する
が、見かけ上の色はｐＨ指示薬の中性色と基質の発色と
の相加された発色となる。通常の大腸菌では、培地中の
ラムノースが分解され酸を生成するため、ｐＨ指示薬は
酸性色を示し、保有している酵素により、酵素発色基質
は分解され発色するが、見かけ上の色はｐＨ指示薬の酸
性色と基質の発色との相加された発色となる。この２者
の相加された発色の違いにより本発明では大腸菌Ｏ２６
を分離鑑別する。本発明に用いる基礎培地としては糖分
解能によって腸内細菌を鑑別するＳＳ寒天培地、マッコ
ンキー寒天培地、ＤＨＬ寒天培地、デソキシコーレート
寒天培地等が使用可能である。
【０００９】（１)本発明はラムノース、ｐＨ指示薬、
および酵素発色基質を含有する大腸菌Ｏ２６分離用培地
である。 （２)ｐＨ指示薬としては中性色と酸性色が異なる指示
薬が本発明に使用可能であり、フェノールレッド、ニュ
ートラルレッド、ブロモフェノールパープル、ブロモチ
モールブルー、ブロモフェノールレッド、クロロフェノ
ールレッドよりなる群から選ばれるｐＨ指示薬が本発明
には適している。 （３)その中でもｐＨ指示薬としてはフェノールレッド
が最適である。 （４)酵素発色基質はグルコピラノシド誘導体またはガ
ラクトピラノシド誘導体より選ばれ、グルコピラノシド
誘導体はグルクロニダーゼにより分解され、ガラクトピ
ラノシド誘導体はガラクトシダーゼにより分解され、発
色が起こる。なお、本発明では発蛍光性の基質、例えば
ＭＵ−Ｇａｌ、ＭＵ−Ｇｌｃも酵素発色基質として取り
扱う。 （５)また酵素発色基質としてインドリル誘導体も本発
明には有用である。インドリル誘導体は酵素により分解
され酸化され、対応するインドリル色素、例えばＸ−Ｇ
ａｌ・Ｘ−Ｇｌｃであれば、青色のブロモクロロインジ
ゴを発生する。 （６）酵素発色基質はＸ−Ｇｌｃ、Ｘ−Ｇａｌ、Ｂｌｕ
ｏ−Ｇｌｃ、Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ、ＭＵ−Ｇｌｃ、ＭＵ−
Ｇａｌ、ＯＮＰ−Ｇｌｃ、ＯＮＰ−Ｇａｌ、Ｓａｌｍｏ
ｎ−Ｇｌｃ、Ｓａｌｍｏｎ−Ｇａｌよりなる群より選ば
れ、１種でも複数でも構わない。 （７)さらに本発明の培地に炭素数が１０〜３０のアニ
オン性界面活性剤を１種または２種以上を添加すると本
発明の選択性が増す。 （８)アニオン性界面活性剤としては胆汁酸塩類および
アルキル硫酸塩類より選ばれ、より具体的には胆汁末、
コール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム等が本発
明には好ましい。 （９)さらに選択剤として亜テルル酸塩を添加すると本
発明の選択性が増す。 （１０)さらに選択剤としてセフィキシムを添加すると
本発明の選択性が増す。 （１１)より具体的には本発明は、培地 １，０００ｍＬ
あたり、ペプトン５−１５ｇ、酵母エキス２−５ｇ、塩
化ナトリウム０．１−１０ｇ、ラウリル硫酸ナトリウム
０．０５−０．５ｇ、Ｘ−Ｇｌｃ０．０５−０．５ｇお
よび／またはＸ−Ｇａｌ０．０５−０．５ｇ、ラムノー
ス１−２０ｇ、亜テルル酸カリウム１−５ｍｇ、セフィ
キシム０．００５−０．１ｍｇ、フェノールレッド０．
０１−０．１ｇ、寒天１０−２０ｇを含有する大腸菌Ｏ
２６分離用培地である。Ｘ−Ｇｌｃ／Ｘ−Ｇａｌは単独
で使用しても良いし、両方を使用しても良い。
および酵素発色基質を含有する大腸菌Ｏ２６分離用培地
である。 （２)ｐＨ指示薬としては中性色と酸性色が異なる指示
薬が本発明に使用可能であり、フェノールレッド、ニュ
ートラルレッド、ブロモフェノールパープル、ブロモチ
モールブルー、ブロモフェノールレッド、クロロフェノ
ールレッドよりなる群から選ばれるｐＨ指示薬が本発明
には適している。 （３)その中でもｐＨ指示薬としてはフェノールレッド
が最適である。 （４)酵素発色基質はグルコピラノシド誘導体またはガ
ラクトピラノシド誘導体より選ばれ、グルコピラノシド
誘導体はグルクロニダーゼにより分解され、ガラクトピ
ラノシド誘導体はガラクトシダーゼにより分解され、発
色が起こる。なお、本発明では発蛍光性の基質、例えば
ＭＵ−Ｇａｌ、ＭＵ−Ｇｌｃも酵素発色基質として取り
扱う。 （５)また酵素発色基質としてインドリル誘導体も本発
明には有用である。インドリル誘導体は酵素により分解
され酸化され、対応するインドリル色素、例えばＸ−Ｇ
ａｌ・Ｘ−Ｇｌｃであれば、青色のブロモクロロインジ
ゴを発生する。 （６）酵素発色基質はＸ−Ｇｌｃ、Ｘ−Ｇａｌ、Ｂｌｕ
ｏ−Ｇｌｃ、Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ、ＭＵ−Ｇｌｃ、ＭＵ−
Ｇａｌ、ＯＮＰ−Ｇｌｃ、ＯＮＰ−Ｇａｌ、Ｓａｌｍｏ
ｎ−Ｇｌｃ、Ｓａｌｍｏｎ−Ｇａｌよりなる群より選ば
れ、１種でも複数でも構わない。 （７)さらに本発明の培地に炭素数が１０〜３０のアニ
オン性界面活性剤を１種または２種以上を添加すると本
発明の選択性が増す。 （８)アニオン性界面活性剤としては胆汁酸塩類および
アルキル硫酸塩類より選ばれ、より具体的には胆汁末、
コール酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム等が本発
明には好ましい。 （９)さらに選択剤として亜テルル酸塩を添加すると本
発明の選択性が増す。 （１０)さらに選択剤としてセフィキシムを添加すると
本発明の選択性が増す。 （１１)より具体的には本発明は、培地 １，０００ｍＬ
あたり、ペプトン５−１５ｇ、酵母エキス２−５ｇ、塩
化ナトリウム０．１−１０ｇ、ラウリル硫酸ナトリウム
０．０５−０．５ｇ、Ｘ−Ｇｌｃ０．０５−０．５ｇお
よび／またはＸ−Ｇａｌ０．０５−０．５ｇ、ラムノー
ス１−２０ｇ、亜テルル酸カリウム１−５ｍｇ、セフィ
キシム０．００５−０．１ｍｇ、フェノールレッド０．
０１−０．１ｇ、寒天１０−２０ｇを含有する大腸菌Ｏ
２６分離用培地である。Ｘ−Ｇｌｃ／Ｘ−Ｇａｌは単独
で使用しても良いし、両方を使用しても良い。
【００１０】
【作用】本発明の培地の作用を上記（１１）記載の培地
組成に従って説明する。本発明は大腸菌Ｏ２６の有する
ラムノース非分解能、ガラクトピラノシド分解能および
グルコピラノシド分解能を利用し、ｐＨ指示薬としてフ
ェノールレッドを用いることで暗緑色から暗紫色の集落
の有無により大腸菌Ｏ２６を鑑別すること原理としてい
る。
組成に従って説明する。本発明は大腸菌Ｏ２６の有する
ラムノース非分解能、ガラクトピラノシド分解能および
グルコピラノシド分解能を利用し、ｐＨ指示薬としてフ
ェノールレッドを用いることで暗緑色から暗紫色の集落
の有無により大腸菌Ｏ２６を鑑別すること原理としてい
る。
【００１１】血清型Ｏ２６以外の大腸菌の多くは培地に
添加したラムノースを分解して酸を産生する。通常使用
される培地のｐＨは中性（７）付近であり、ｐＨ指示薬
として添加したフェノールレッドにより培地色は朱〜赤
色を呈している。ラムノースを分解する大腸菌は培地中
のラムノースを分解し、培地のｐＨを低下させるため、
それらの菌の集落及び集落周辺部は黄色に変色する。し
かし、大腸菌Ｏ２６のようなラムノース非分解菌は酸を
産生しないため培地ｐＨの低下はなく、むしろ菌の発育
による培地中のペプトンの分解物によりｐＨが上昇する
ことから、集落はより赤色が強くなり、集落周囲の培地
色も赤色にとどまる。添加するラムノース量は培地１Ｌ
あたり１〜２０ｇが適当であり、フェノールレッド量は
０．０１〜０．１ｇが適当である。
添加したラムノースを分解して酸を産生する。通常使用
される培地のｐＨは中性（７）付近であり、ｐＨ指示薬
として添加したフェノールレッドにより培地色は朱〜赤
色を呈している。ラムノースを分解する大腸菌は培地中
のラムノースを分解し、培地のｐＨを低下させるため、
それらの菌の集落及び集落周辺部は黄色に変色する。し
かし、大腸菌Ｏ２６のようなラムノース非分解菌は酸を
産生しないため培地ｐＨの低下はなく、むしろ菌の発育
による培地中のペプトンの分解物によりｐＨが上昇する
ことから、集落はより赤色が強くなり、集落周囲の培地
色も赤色にとどまる。添加するラムノース量は培地１Ｌ
あたり１〜２０ｇが適当であり、フェノールレッド量は
０．０１〜０．１ｇが適当である。
【００１２】一般に血清型Ｏ２６を含む大腸菌は、ガラ
クトシダーゼおよびグルクロニダーゼを保有し、酵素発
色基質を分解し、色素を発生させる。本発明に用いるＸ
−Ｇａｌは、血清型Ｏ２６を含む大腸菌により特異的に
分解され、青色を呈する。同様にＸ−Ｇｌｃも血清型Ｏ
２６を含む大腸菌群の菌により特異的に分解され青色を
呈する。この場合、上述のように大腸菌Ｏ２６はラムノ
ースを分解しないため集落と集落周囲の培地色は赤色に
なり、この色の上にＸ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃの分
解による青色が重なり、集落色は暗緑色から暗紫色を呈
する。一方、大腸菌Ｏ２６以外のラムノース分解性大腸
菌の集落及び集落の周囲の色は黄色になり、この黄色に
Ｘ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃの分解による青色が重な
り淡緑色から緑色の集落を呈する。また、大腸菌以外の
Ｘ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃを分解できない菌はその
菌のラムノース分解能の有無により、黄色あるいは赤色
の集落になり、大腸菌Ｏ２６と容易に鑑別ができる。つ
まり、本発明の培地上では、大腸菌Ｏ２６、その他の大
腸菌、ラムノース分解菌、ラムノース非分解菌でそれぞ
れのコロニーの発色が異なるので、各菌の分離鑑別が容
易である。Ｘ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃは単独でも併用して
も良い。添加するＸ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃの量は培地１
Ｌあたり０．０５〜０．５ｇが適当である。
クトシダーゼおよびグルクロニダーゼを保有し、酵素発
色基質を分解し、色素を発生させる。本発明に用いるＸ
−Ｇａｌは、血清型Ｏ２６を含む大腸菌により特異的に
分解され、青色を呈する。同様にＸ−Ｇｌｃも血清型Ｏ
２６を含む大腸菌群の菌により特異的に分解され青色を
呈する。この場合、上述のように大腸菌Ｏ２６はラムノ
ースを分解しないため集落と集落周囲の培地色は赤色に
なり、この色の上にＸ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃの分
解による青色が重なり、集落色は暗緑色から暗紫色を呈
する。一方、大腸菌Ｏ２６以外のラムノース分解性大腸
菌の集落及び集落の周囲の色は黄色になり、この黄色に
Ｘ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃの分解による青色が重な
り淡緑色から緑色の集落を呈する。また、大腸菌以外の
Ｘ−ＧａｌあるいはＸ−Ｇｌｃを分解できない菌はその
菌のラムノース分解能の有無により、黄色あるいは赤色
の集落になり、大腸菌Ｏ２６と容易に鑑別ができる。つ
まり、本発明の培地上では、大腸菌Ｏ２６、その他の大
腸菌、ラムノース分解菌、ラムノース非分解菌でそれぞ
れのコロニーの発色が異なるので、各菌の分離鑑別が容
易である。Ｘ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃは単独でも併用して
も良い。添加するＸ−Ｇａｌ、Ｘ−Ｇｌｃの量は培地１
Ｌあたり０．０５〜０．５ｇが適当である。
【００１３】本発明では培地中にアニオン性界面活性剤
を添加することにより、バチラス等のグラム陽性菌の発
育を抑制している。本培地に有用なアニオン性界面活性
剤としては、デスオキシコール酸等の胆汁酸塩類、及び
ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩が挙げられ
る。
を添加することにより、バチラス等のグラム陽性菌の発
育を抑制している。本培地に有用なアニオン性界面活性
剤としては、デスオキシコール酸等の胆汁酸塩類、及び
ラウリル硫酸ナトリウム等のアルキル硫酸塩が挙げられ
る。
【００１４】本培地では選択剤亜テルル酸カリウムの添
加で、血清型Ｏ２６以外の大腸菌の発育を抑制してい
る。なお、本培地に添加する亜テルル酸カリウム量は培
地１Ｌあたり１〜５ｍｇが適当である。
加で、血清型Ｏ２６以外の大腸菌の発育を抑制してい
る。なお、本培地に添加する亜テルル酸カリウム量は培
地１Ｌあたり１〜５ｍｇが適当である。
【００１５】本培地では選択剤セフィキシムの添加で、
腸内細菌であるプロテウス属菌の発育を抑制している。
なお、本培地に添加するセフィキシム量は培地１Ｌあた
り０．００５〜０．１ｍｇが適当である。これ以下では
プロテウス属菌の発育を抑えられず、またこれ以上では
大腸菌Ｏ２６も抑制される。
腸内細菌であるプロテウス属菌の発育を抑制している。
なお、本培地に添加するセフィキシム量は培地１Ｌあた
り０．００５〜０．１ｍｇが適当である。これ以下では
プロテウス属菌の発育を抑えられず、またこれ以上では
大腸菌Ｏ２６も抑制される。
【００１６】以下、実施例に基づき本発明をさらに詳細
に説明する。なお、下記実施例は単に説明のためのもの
であり、本発明を何ら限定するものではない。
に説明する。なお、下記実施例は単に説明のためのもの
であり、本発明を何ら限定するものではない。
【００１７】実施例１ 本培地および従来培地の作成以
下に示す組成の本発明の培地（本培地）、デソキシコー
レイト寒天培地（ＤＥＳＯ）、ラムノース加マッコンキ
ー寒天培地（Ｒ−ＭＡＣ）を作成した。各組成に精製水
を加え全量を１０００ｍＬとした。加熱溶解後、約５０
℃に冷却しシャーレに２０ｍＬずつ分注し、平板を作成
した。
下に示す組成の本発明の培地（本培地）、デソキシコー
レイト寒天培地（ＤＥＳＯ）、ラムノース加マッコンキ
ー寒天培地（Ｒ−ＭＡＣ）を作成した。各組成に精製水
を加え全量を１０００ｍＬとした。加熱溶解後、約５０
℃に冷却しシャーレに２０ｍＬずつ分注し、平板を作成
した。
【００１８】
【組成１】 本培地の組成 (培地 １，０００ｍＬあたり) ─────────────────── ペプトン １２ｇ 酵母エキス ３ｇ 塩化ナトリウム ５ｇ ラウリル硫酸ナトリウム ０．１ｇ Ｘ−Ｇａｌ ０．１ｇ Ｘ−Ｇｌｃ ０．１ｇ ラムノース １０ｇ 亜テルル酸カリウム ２．５ｍｇ セフィキシム ０．０１ｍｇ フェノールレッド ０．０５ｇ 寒天 １５ｇ ─────────────────── ｐＨ７．２±０．２
【００１９】
【組成２】 ＤＥＳＯ培地組成 (培地 １，０００ｍＬあたり) ─────────────────── ペプトン １０ｇ 乳糖 １０ｇ デスオキシコール酸ナトリウム １ｇ 塩化ナトリウム ５ｇ リン酸二カリウム ２ｇ クエン酸塩鉄アンモニウム ２ｇ 中性紅 ０．０３３ｇ 寒天 １５ｇ ─────────────────── ｐＨ７．２±０．２
【００２０】
【組成３】 Ｒ−ＭＡＣ培地組成 (培地 １，０００ｍＬあたり) ─────────────────── ペプトン ２０ｇ ラムノース １０ｇ 胆汁酸塩Ｎｏ．２ １．５ｇ 塩化ナトリウム ５ｇ 中性紅 ０．０３ｇ クリスタルバイオレット ０．００１ｇ 寒天 １５ｇ ─────────────────── ｐＨ７．０±０．２
【００２１】実施例２ 本培地および従来培地による大
腸菌Ｏ２６の分離 （１）試験菌 社内保存の血清型Ｏ２６の大腸菌９菌株、その他の血清
型の大腸菌５菌株および大腸菌以外の腸内細菌８菌種１
０株を用いた。使用した菌種名と各培地での集落の発色
は「表１」に記載した。 （２）接種及び判定 ハートインフュジョンブイヨンで１夜培養した試験菌を
実施例１で作成した各培地に１白金耳量塗抹し、３７℃
で１６時間培養後、出現した集落を観察した。結果を表
１に示した。
腸菌Ｏ２６の分離 （１）試験菌 社内保存の血清型Ｏ２６の大腸菌９菌株、その他の血清
型の大腸菌５菌株および大腸菌以外の腸内細菌８菌種１
０株を用いた。使用した菌種名と各培地での集落の発色
は「表１」に記載した。 （２）接種及び判定 ハートインフュジョンブイヨンで１夜培養した試験菌を
実施例１で作成した各培地に１白金耳量塗抹し、３７℃
で１６時間培養後、出現した集落を観察した。結果を表
１に示した。
【００２２】（３）結果
【表１】 ─────────────────────────────────── 集落色 ─────────────────────────────────── 菌名（菌株番号） 本培地 ＤＥＳＯ Ｒ−ＭＡＣ ─────────────────────────────────── 大腸菌Ｏ２６ (4331) 暗紫色 赤色 透明 (4332) 暗紫色 赤色 透明 (4333) 暗紫色 赤色 透明 (4334) 暗紫色 赤色 透明 (4335) 暗紫色 赤色 透明 (4336) 暗紫色 赤色 透明 (4337) 暗紫色 赤色 透明 (4338) 暗紫色 赤色 透明 (4339) 暗紫色 赤色 透明 その他の大腸菌 (0645) 緑色 赤色 赤色 (0705) 緑色 赤色 赤色 (3087) 淡緑色 赤色 赤色 (3832) 緑色 赤色 赤色 (4038) 緑色 赤色 赤色 腸内細菌 Citrobacter freundii 黄色 赤色 赤色 C.freundii 黄色 赤色 赤色 Klebsiella oxytoca 黄色 赤色 赤色 K.pneumoniae 黄色 赤色 赤色 Serratia marcescens 赤色 透明 透明 Proteus mirabilis 発育せず 透明 透明 P.vulgaris 発育せず 透明 透明 Enterobacter cloacae 黄色 赤色 赤色 E.cloacae 黄色 赤色 赤色 E.aerogenes 黄色 赤色 赤色 ───────────────────────────────────
【００２３】表１より、試験した大腸菌Ｏ２６はすべて
本培地上で暗紫色の集落を形成し、Ｏ２６以外の血清型
の大腸菌および大腸菌以外の腸内細菌とはそれぞれ発色
が異なり、鑑別がついた。デソキシコーレイト寒天培地
（ＤＥＳＯ）では、乳糖非分解性のセラチア、プロテウ
ス以外の菌は全て赤色集落を形成し、大腸菌Ｏ２６の鑑
別はできなかった。ラムノース分解能を利用したラムノ
ース加マッコンキー寒天培地（Ｒ−ＭＡＣ）では、大腸
菌Ｏ２６とその他の大腸菌の鑑別はできたが、大腸菌以
外の腸内細菌のうちラムノース非分解菌（Serratia mar
cescens、Proteus mirabilis、P.vulgaris）は透明の集
落を形成し、大腸菌Ｏ２６との鑑別はできなかった。
本培地上で暗紫色の集落を形成し、Ｏ２６以外の血清型
の大腸菌および大腸菌以外の腸内細菌とはそれぞれ発色
が異なり、鑑別がついた。デソキシコーレイト寒天培地
（ＤＥＳＯ）では、乳糖非分解性のセラチア、プロテウ
ス以外の菌は全て赤色集落を形成し、大腸菌Ｏ２６の鑑
別はできなかった。ラムノース分解能を利用したラムノ
ース加マッコンキー寒天培地（Ｒ−ＭＡＣ）では、大腸
菌Ｏ２６とその他の大腸菌の鑑別はできたが、大腸菌以
外の腸内細菌のうちラムノース非分解菌（Serratia mar
cescens、Proteus mirabilis、P.vulgaris）は透明の集
落を形成し、大腸菌Ｏ２６との鑑別はできなかった。
【００２４】実施例３ 食材からの大腸菌Ｏ２６の検出 大腸菌Ｏ２６の汚染を想定した牛挽肉４検体を使用し
た。牛挽肉２５ｇをｍＥＣブロス２２５ｍＬと混和し、
３５℃１８時間前培養し、その培養液を本培地、デソキ
シコーレイト寒天培地、およびラムノース加マッコンキ
ー寒天培地に１白金耳量塗抹し、３７℃で１６時間培養
後、出現した集落を観察し、各培地で大腸菌Ｏ２６と思
われる集落を釣菌した。具体的には本培地では暗紫色の
集落を、デソキシコーレイト寒天培地では乳糖分解菌を
大腸菌として釣菌した。ラムノース加マッコンキー培地
ではラムノース非分解菌として透明の集落を釣菌した。
各培地から釣菌した１〜１０個の集落をそのまま用い
て、生化学性状検査および抗血清検査を行い、大腸菌Ｏ
２６の同定を行った。判定は釣菌した集落のほとんどが
大腸菌Ｏ２６であった場合をＡ、大腸菌Ｏ２６として同
定するのにいくつかの集落の試験が必要で、釣菌した集
落のうち一部が大腸菌Ｏ２６と確認されるように検出が
困難であった場合をＢ、大腸菌Ｏ２６を検出できなかっ
た場合をＣとして判定を行った。結果を表２に示す。
た。牛挽肉２５ｇをｍＥＣブロス２２５ｍＬと混和し、
３５℃１８時間前培養し、その培養液を本培地、デソキ
シコーレイト寒天培地、およびラムノース加マッコンキ
ー寒天培地に１白金耳量塗抹し、３７℃で１６時間培養
後、出現した集落を観察し、各培地で大腸菌Ｏ２６と思
われる集落を釣菌した。具体的には本培地では暗紫色の
集落を、デソキシコーレイト寒天培地では乳糖分解菌を
大腸菌として釣菌した。ラムノース加マッコンキー培地
ではラムノース非分解菌として透明の集落を釣菌した。
各培地から釣菌した１〜１０個の集落をそのまま用い
て、生化学性状検査および抗血清検査を行い、大腸菌Ｏ
２６の同定を行った。判定は釣菌した集落のほとんどが
大腸菌Ｏ２６であった場合をＡ、大腸菌Ｏ２６として同
定するのにいくつかの集落の試験が必要で、釣菌した集
落のうち一部が大腸菌Ｏ２６と確認されるように検出が
困難であった場合をＢ、大腸菌Ｏ２６を検出できなかっ
た場合をＣとして判定を行った。結果を表２に示す。
【００２５】
【表２】 ─────────────────────────────── 検体数 ──────────────────────── 判定 本培地 ＤＥＳＯ Ｒ−ＭＡＣ ─────────────────────────────── Ａ ４ ０ １ Ｂ ０ １ ３ Ｃ ０ ３ ０ ───────────────────────────────
【００２６】得られた集落を生化学性状検査および大腸
菌Ｏ２６抗血清で確認したところ、本培地で大腸菌Ｏ２
６と思われた集落から釣菌した菌株はすべて大腸菌Ｏ２
６であった。ラムノース加マッコンキー寒天培地（Ｒ−
ＭＡＣ）でもすべての検体から本菌を検出することがで
きたが、そのうち３検体は判定Ｂを示し、釣菌した菌の
大部分が大腸菌Ｏ２６以外の菌であった。デソキシコー
レイト寒天培地（ＤＥＳＯ）では１検体のみから大腸菌
Ｏ２６を検出でき（判定Ｂ）、この場合も釣菌した菌の
大部分が大腸菌Ｏ２６以外の菌であった。デソキシコー
レイト培地上で大腸菌Ｏ２６を疑って釣菌したにもかか
わらず大腸菌Ｏ２６ではなかった菌（判定Ｃ）は、その
後の確認試験の結果より、他の血清型の大腸菌であっ
た。従って、本発明の培地の使用により、１回の選択分
離培養で食材由来の大腸菌Ｏ２６が検出可能となった。
菌Ｏ２６抗血清で確認したところ、本培地で大腸菌Ｏ２
６と思われた集落から釣菌した菌株はすべて大腸菌Ｏ２
６であった。ラムノース加マッコンキー寒天培地（Ｒ−
ＭＡＣ）でもすべての検体から本菌を検出することがで
きたが、そのうち３検体は判定Ｂを示し、釣菌した菌の
大部分が大腸菌Ｏ２６以外の菌であった。デソキシコー
レイト寒天培地（ＤＥＳＯ）では１検体のみから大腸菌
Ｏ２６を検出でき（判定Ｂ）、この場合も釣菌した菌の
大部分が大腸菌Ｏ２６以外の菌であった。デソキシコー
レイト培地上で大腸菌Ｏ２６を疑って釣菌したにもかか
わらず大腸菌Ｏ２６ではなかった菌（判定Ｃ）は、その
後の確認試験の結果より、他の血清型の大腸菌であっ
た。従って、本発明の培地の使用により、１回の選択分
離培養で食材由来の大腸菌Ｏ２６が検出可能となった。
【００２７】
【発明の効果】従来の大腸菌Ｏ２６の検出は熟練された
技術と３〜５日間の長時間が必要であった。これは大腸
菌Ｏ２６用の選択分離培地はなく、一般の腸内細菌ある
いは大腸菌の検出を目的とした培地を使わざるを得な
く、このような培地では大腸菌Ｏ２６のみではなく、Ｏ
２６以外の大腸菌を含む多くの腸内細菌が発育するため
であった。そのため従来の選択分離培養では、疑わしい
集落を出来るだけ多く釣菌し、確認培地や同定キットあ
るいは抗血清試験により大腸菌Ｏ２６のスクリーニング
あるいは同定を行い、大腸菌Ｏ２６を疑う集落を鑑別す
るには多くの経験と熟練が必要であった。しかし、本培
地を用いることでそうした経験などを必要とせず非常に
高い確率で大腸菌Ｏ２６の検出が可能になり、また、大
腸菌Ｏ２６以外の菌の試験に要していた試薬類、操作の
手間と時間も削減できる。
技術と３〜５日間の長時間が必要であった。これは大腸
菌Ｏ２６用の選択分離培地はなく、一般の腸内細菌ある
いは大腸菌の検出を目的とした培地を使わざるを得な
く、このような培地では大腸菌Ｏ２６のみではなく、Ｏ
２６以外の大腸菌を含む多くの腸内細菌が発育するため
であった。そのため従来の選択分離培養では、疑わしい
集落を出来るだけ多く釣菌し、確認培地や同定キットあ
るいは抗血清試験により大腸菌Ｏ２６のスクリーニング
あるいは同定を行い、大腸菌Ｏ２６を疑う集落を鑑別す
るには多くの経験と熟練が必要であった。しかし、本培
地を用いることでそうした経験などを必要とせず非常に
高い確率で大腸菌Ｏ２６の検出が可能になり、また、大
腸菌Ｏ２６以外の菌の試験に要していた試薬類、操作の
手間と時間も削減できる。
【００２８】さらに本培地では一回の選択分離培養によ
り、暗緑色から暗紫色集落の有無で大腸菌Ｏ２６の存在
が簡単に判断できるので、汚染された食材や食品を早期
に排除でき、また品質管理期間の短縮により賞味期間も
延長可能で食品流通の経済性に大きく貢献できる。ま
た、糞便検査や嘔吐物の検査に用いれば、大腸菌Ｏ２６
による食中毒患者の早期診断が可能になることから、早
期に有効な治療の一助ともなる。
り、暗緑色から暗紫色集落の有無で大腸菌Ｏ２６の存在
が簡単に判断できるので、汚染された食材や食品を早期
に排除でき、また品質管理期間の短縮により賞味期間も
延長可能で食品流通の経済性に大きく貢献できる。ま
た、糞便検査や嘔吐物の検査に用いれば、大腸菌Ｏ２６
による食中毒患者の早期診断が可能になることから、早
期に有効な治療の一助ともなる。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｒ 1:19）
Claims (11)
- 【請求項１】 ラムノース、ｐＨ指示薬、および酵素発
色基質を含有する大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項２】 ｐＨ指示薬がフェノールレッド、ニュー
トラルレッド、ブロモフェノールパープル、ブロモチモ
ールブルー、ブロモフェノールレッド、クロロフェノー
ルレッドより選ばれるｐＨ指示薬である請求項１記載の
大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項３】 ｐＨ指示薬がフェノールレッドである請
求項１〜２記載の大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項４】 酵素発色基質がグルコピラノシド誘導体
またはガラクトピラノシド誘導体である請求項１〜３記
載の大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項５】 酵素発色基質がインドリル誘導体である
請求項１〜３記載の大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項６】 酵素発色基質がＸ−Ｇｌｃ、Ｘ−Ｇａ
ｌ、Ｂｌｕｏ−Ｇｌｃ、Ｂｌｕｏ−Ｇａｌ、ＭＵ−Ｇｌ
ｃ、ＭＵ−Ｇａｌ、ＯＮＰ−Ｇｌｃ、ＯＮＰ−Ｇａｌ、
Ｓａｌｍｏｎ−Ｇｌｃ、Ｓａｌｍｏｎ−Ｇａｌよりなる
群より選ばれる１種以上の酵素発色基質である請求項１
〜５記載の大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項７】 さらに炭素数が１０〜３０のアニオン性
界面活性剤を１種以上含有する請求項１〜６記載の大腸
菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項８】 アニオン性界面活性剤が胆汁酸塩類およ
びアルキル硫酸塩類より選ばれることを特徴とする請求
項７記載の大腸菌Ｏ２６分離用培地 - 【請求項９】 さらに選択剤として亜テルル酸塩含有す
ることを特徴とする請求項１〜８記載の大腸菌Ｏ２６分
離用培地 - 【請求項１０】 さらに選択剤としてセフィキシムを含
有することを特徴とする請求項１〜９記載の大腸菌Ｏ２
６分離用培地 - 【請求項１１】 培地 １，０００ｍＬあたり、ペプト
ン５−１５ｇ、酵母エキス２−５ｇ、塩化ナトリウム
０．１−１０ｇ、ラウリル硫酸ナトリウム０．０５−
０．５ｇ、Ｘ−Ｇｌｃ０．０５−０．５ｇおよび／また
はＸ−Ｇａｌ０．０５−０．５ｇ、ラムノース１−２０
ｇ、亜テルル酸カリウム１−５ｍｇ、セフィキシム０．
００５−０．１ｍｇ、フェノールレッド０．０１−０．
１ｇ、寒天１０−２０ｇを含有する大腸菌Ｏ２６分離用
培地
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18601099A JP4334067B2 (ja) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | 大腸菌ｏ２６分離用培地 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18601099A JP4334067B2 (ja) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | 大腸菌ｏ２６分離用培地 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2001008679A true JP2001008679A (ja) | 2001-01-16 |
| JP4334067B2 JP4334067B2 (ja) | 2009-09-16 |
Family
ID=16180807
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP18601099A Expired - Lifetime JP4334067B2 (ja) | 1999-06-30 | 1999-06-30 | 大腸菌ｏ２６分離用培地 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4334067B2 (ja) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002355091A (ja) * | 2001-05-31 | 2002-12-10 | Nissui Pharm Co Ltd | 腸炎ビブリオ検出用培地 |
| US7198907B2 (en) * | 2000-06-27 | 2007-04-03 | Alain Rambach | Vibrio bacteria detection and differentiation |
| JP2009225729A (ja) * | 2008-03-24 | 2009-10-08 | Shizuoka Prefecture | 大腸菌ｏ２６およびｏ１５７の同時検出培地ならびにその検出法 |
| JP2011019462A (ja) * | 2009-07-17 | 2011-02-03 | Eiken Chemical Co Ltd | 腸管出血性大腸菌ｏ１５７、ｏ２６、ｏ１１１選択分離培地 |
| JP2013517790A (ja) * | 2010-01-27 | 2013-05-20 | イー・エム・デイー・ミリポア・コーポレイシヨン | 蛍光原基質とｐＨ−感受性フルオロフォアとの組合せを使用する蛍光による微生物検出用増殖培地 |
| JP2013116087A (ja) * | 2011-12-05 | 2013-06-13 | Nissui Pharm Co Ltd | 腸管出血性大腸菌検出用培地 |
| JP2013116053A (ja) * | 2011-12-01 | 2013-06-13 | Nissui Pharm Co Ltd | 腸管出血性大腸菌検出用培地 |
| JP2014128264A (ja) * | 2012-11-29 | 2014-07-10 | Eiken Chemical Co Ltd | 腸管出血性大腸菌検出培地 |
| JP2019024418A (ja) * | 2017-07-31 | 2019-02-21 | 公立大学法人大阪府立大学 | 選択分離用培地 |
| CN117887642A (zh) * | 2024-03-14 | 2024-04-16 | 山东格研生物技术有限公司 | 一种可辐照灭菌的麦康凯琼脂培养基平板及其制备方法 |
-
1999
- 1999-06-30 JP JP18601099A patent/JP4334067B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| CN117887642A (zh) * | 2024-03-14 | 2024-04-16 | 山东格研生物技术有限公司 | 一种可辐照灭菌的麦康凯琼脂培养基平板及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4334067B2 (ja) | 2009-09-16 |
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