JP2002355091A - 腸炎ビブリオ検出用培地 - Google Patents
腸炎ビブリオ検出用培地Info
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Abstract
(57)【要約】
【解決手段】 検出可能な遊離性基を有するβ−グルコ
シダーゼ基質及びグラム陽性菌抗菌物質を含有する腸炎
ビブリオ検出用培地。 【効果】 本発明培地を用いれば食中毒原因菌として重
要な腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できる。
シダーゼ基質及びグラム陽性菌抗菌物質を含有する腸炎
ビブリオ検出用培地。 【効果】 本発明培地を用いれば食中毒原因菌として重
要な腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、食中毒の原因菌と
して重要な腸炎ビブリオを高精度かつ簡便に検出するこ
とのできる培地及び腸炎ビブリオ検出法に関する。
して重要な腸炎ビブリオを高精度かつ簡便に検出するこ
とのできる培地及び腸炎ビブリオ検出法に関する。
【０００２】
【従来の技術】腸炎ビブリオ（Vibrio parahaemolyticu
s）による食中毒は、日本で年間に発生する細菌性食中
毒の大きな割合を占める。腸炎ビブリオは海水中に常在
し、魚介類を生食することにより中毒が発生する。この
食中毒は、急性胃腸炎であり、発熱、嘔吐、上腹部の腹
痛、下痢を特徴とする。
s）による食中毒は、日本で年間に発生する細菌性食中
毒の大きな割合を占める。腸炎ビブリオは海水中に常在
し、魚介類を生食することにより中毒が発生する。この
食中毒は、急性胃腸炎であり、発熱、嘔吐、上腹部の腹
痛、下痢を特徴とする。
【０００３】このような食中毒原因菌である腸炎ビブリ
オの検出培地としては、ＴＣＢＳ（Thiosulfate citrat
e bile salts sucrose）寒天培地が広く用いられてい
る。このＴＣＢＳ寒天培地は、白糖とpH指示薬を含むも
のであり、腸炎ビブリオが白糖を利用しないのに対し、
ビブリオ属に属し、かつ食中毒の原因菌であるビブリオ
・アルギノリティカス（Vibrio alginolyticus）やビブ
リオ・コレラ（Vibrio cholerae）等が白糖を利用して
酸を生成するという性質を利用するものである。すなわ
ち、発育してきた菌は菌体中にpH指示薬を取り込む。従
って白糖を利用しない腸炎ビブリオ等はpH指示薬の色調
変化がないため濃緑色のコロニーを形成するが、一方、
白糖を利用し酸を生成する菌はpH指示薬が黄色に変色す
るため黄色のコロニーとなる、というものである。
オの検出培地としては、ＴＣＢＳ（Thiosulfate citrat
e bile salts sucrose）寒天培地が広く用いられてい
る。このＴＣＢＳ寒天培地は、白糖とpH指示薬を含むも
のであり、腸炎ビブリオが白糖を利用しないのに対し、
ビブリオ属に属し、かつ食中毒の原因菌であるビブリオ
・アルギノリティカス（Vibrio alginolyticus）やビブ
リオ・コレラ（Vibrio cholerae）等が白糖を利用して
酸を生成するという性質を利用するものである。すなわ
ち、発育してきた菌は菌体中にpH指示薬を取り込む。従
って白糖を利用しない腸炎ビブリオ等はpH指示薬の色調
変化がないため濃緑色のコロニーを形成するが、一方、
白糖を利用し酸を生成する菌はpH指示薬が黄色に変色す
るため黄色のコロニーとなる、というものである。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、ＴＣＢＳ寒天
培地においては、検体中に腸炎ビブリオと上記の類縁菌
が共存した場合、腸炎ビブリオの濃緑色のコロニーが他
の色に変色してしまうため、正確な検出ができなかっ
た。従って、本発明の目的は腸炎ビブリオと同じビブリ
オ属に属する類縁菌が共存しても色の変化等を生じず
に、正確かつ簡便に腸炎ビブリオを検出できる培地を提
供することにある。
培地においては、検体中に腸炎ビブリオと上記の類縁菌
が共存した場合、腸炎ビブリオの濃緑色のコロニーが他
の色に変色してしまうため、正確な検出ができなかっ
た。従って、本発明の目的は腸炎ビブリオと同じビブリ
オ属に属する類縁菌が共存しても色の変化等を生じず
に、正確かつ簡便に腸炎ビブリオを検出できる培地を提
供することにある。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで本発明者は、腸炎
ビブリオを他の属に属する菌だけでなく、同じ属に属す
る類縁菌とも正確に区別して検出できる培地組成につい
て種々検討したところ、グラム陽性菌抗菌物質と検出可
能な遊離性基を有するβ−グルコシダーゼ基質とを含有
する培地を用いれば、グラム陽性菌は生育せず、かつビ
ブリオ・アルギノリティカスやビブリオ・コレラは白色
のコロニーを形成し、腸炎ビブリオが選択的にβ−グル
コシダーゼ基質由来の特性を有するコロニーを形成する
ので、腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できることを
見出し、本発明を完成するに至った。
ビブリオを他の属に属する菌だけでなく、同じ属に属す
る類縁菌とも正確に区別して検出できる培地組成につい
て種々検討したところ、グラム陽性菌抗菌物質と検出可
能な遊離性基を有するβ−グルコシダーゼ基質とを含有
する培地を用いれば、グラム陽性菌は生育せず、かつビ
ブリオ・アルギノリティカスやビブリオ・コレラは白色
のコロニーを形成し、腸炎ビブリオが選択的にβ−グル
コシダーゼ基質由来の特性を有するコロニーを形成する
ので、腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できることを
見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】すなわち、本発明は、検出可能な遊離性基
を有するβ−グルコシダーゼ基質及びグラム陽性菌抗菌
物質を含有する腸炎ビブリオ検出用培地を提供するもの
である。また、本発明は上記培地に、検体を接種して培
養した後、当該培地上の検出可能なコロニーの有無を検
出することを特徴とする腸炎ビブリオの検出法を提供す
るものである。
を有するβ−グルコシダーゼ基質及びグラム陽性菌抗菌
物質を含有する腸炎ビブリオ検出用培地を提供するもの
である。また、本発明は上記培地に、検体を接種して培
養した後、当該培地上の検出可能なコロニーの有無を検
出することを特徴とする腸炎ビブリオの検出法を提供す
るものである。
【０００７】
【発明の実施の形態】本発明の培地に用いられる検出可
能な遊離性基を有するβ−グルコシダーゼ基質とは、β
−グルコシダーゼの作用によって色原体化合物、蛍光性
化合物等の検出可能な化合物を培地中に遊離するもので
あり、例えば色原体化合物又は蛍光性化合物とβ−グル
コースとが結合した化合物すなわち、色原体化合物又は
蛍光性化合物を遊離し得るβ−グルコピラノシド又はそ
の塩であればよい。腸炎ビブリオの類縁菌であるビブリ
オ・アルギノリティカスやビブリオ・コレラは、β−グ
ルコシダーゼを分泌しないのに対し、腸炎ビブリオはβ
−グルコシダーゼを分泌するので、このβ−グルコシダ
ーゼ基質は、腸炎ビブリオによって分解され、色原体化
合物、蛍光性化合物等の検出可能な化合物を遊離するた
め、腸炎ビブリオは色原体化合物に基づく着色コロニ
ー、蛍光性化合物に基づく蛍光コロニー等の検出可能な
コロニーを形成する。具体的なβ−グルコシダーゼ基質
としては、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル
−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ−β−グルコシド、青
色）、５−ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−グルコピラノシド（ＭＡＧＥＮＴＡ−β−グルコ
ピラノシド、赤紫）、５−ブロモ−６−クロロ−３−イ
ンドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（赤紫）、６−ク
ロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（ピ
ンク）、５−ブロモ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、４−メチル−ウンベリフェリル−β−Ｄ−
グルコピラノシド、ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グル
コピラノシド、フェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、
３−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、４−
ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、３−イン
ドキシル−β−グルコピラノシドトリハイドレート、ｎ
−ヘプティル−β−Ｄ−グルコピラノシド、５−ブロモ
−４−クロロ−３−インドキシル−２−アセトアミド−
２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド等が挙げら
れ、このうち鑑別性の点から５−ブロモ−４−クロロ−
３−インドキシル−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ−β
−グルコシド）が好ましい。
能な遊離性基を有するβ−グルコシダーゼ基質とは、β
−グルコシダーゼの作用によって色原体化合物、蛍光性
化合物等の検出可能な化合物を培地中に遊離するもので
あり、例えば色原体化合物又は蛍光性化合物とβ−グル
コースとが結合した化合物すなわち、色原体化合物又は
蛍光性化合物を遊離し得るβ−グルコピラノシド又はそ
の塩であればよい。腸炎ビブリオの類縁菌であるビブリ
オ・アルギノリティカスやビブリオ・コレラは、β−グ
ルコシダーゼを分泌しないのに対し、腸炎ビブリオはβ
−グルコシダーゼを分泌するので、このβ−グルコシダ
ーゼ基質は、腸炎ビブリオによって分解され、色原体化
合物、蛍光性化合物等の検出可能な化合物を遊離するた
め、腸炎ビブリオは色原体化合物に基づく着色コロニ
ー、蛍光性化合物に基づく蛍光コロニー等の検出可能な
コロニーを形成する。具体的なβ−グルコシダーゼ基質
としては、５−ブロモ−４−クロロ−３−インドキシル
−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ−β−グルコシド、青
色）、５−ブロモ−６−クロロ−３−インドキシル−β
−Ｄ−グルコピラノシド（ＭＡＧＥＮＴＡ−β−グルコ
ピラノシド、赤紫）、５−ブロモ−６−クロロ−３−イ
ンドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（赤紫）、６−ク
ロロ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコピラノシド（ピ
ンク）、５−ブロモ−３−インドリル−β−Ｄ−グルコ
ピラノシド、４−メチル−ウンベリフェリル−β−Ｄ−
グルコピラノシド、ｏ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グル
コピラノシド、フェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、
３−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、４−
ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド、３−イン
ドキシル−β−グルコピラノシドトリハイドレート、ｎ
−ヘプティル−β−Ｄ−グルコピラノシド、５−ブロモ
−４−クロロ−３−インドキシル−２−アセトアミド−
２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシド等が挙げら
れ、このうち鑑別性の点から５−ブロモ−４−クロロ−
３−インドキシル−β−Ｄ−グルコピラノシド（Ｘ−β
−グルコシド）が好ましい。
【０００８】かかるβ−グルコシダーゼ基質の培地中の
含有量は、基質により異なるが、０．０１〜１０ｇ／
Ｌ、特に０．０１〜０．６ｇ／Ｌであるのが検出性の点
で好ましい。
含有量は、基質により異なるが、０．０１〜１０ｇ／
Ｌ、特に０．０１〜０．６ｇ／Ｌであるのが検出性の点
で好ましい。
【０００９】グラム陽性菌抗菌物質は、検体中のグラム
陽性菌の生育を阻害する目的で培地に添加される。これ
により、ビブリオ属等を含むグラム陰性菌のみが生育し
得ることとなる。当該グラム陽性菌抗菌物質としては、
バンコマイシン、リストセチン、及びこれらの塩等が挙
げられ、このうち、培地中における安定性の点からバン
コマイシン又はその塩が好ましい。
陽性菌の生育を阻害する目的で培地に添加される。これ
により、ビブリオ属等を含むグラム陰性菌のみが生育し
得ることとなる。当該グラム陽性菌抗菌物質としては、
バンコマイシン、リストセチン、及びこれらの塩等が挙
げられ、このうち、培地中における安定性の点からバン
コマイシン又はその塩が好ましい。
【００１０】グラム陽性菌抗菌物質の培地中の含有量
は、グラム陽性菌の生育が阻害される量であればよく、
用いる抗菌物質の種類によって異なるが、０．０００１
〜１ｇ／Ｌ、特に０．００１〜０．１ｇ／Ｌが好まし
い。
は、グラム陽性菌の生育が阻害される量であればよく、
用いる抗菌物質の種類によって異なるが、０．０００１
〜１ｇ／Ｌ、特に０．００１〜０．１ｇ／Ｌが好まし
い。
【００１１】本発明の培地には、腸炎ビブリオの生育を
促進し、他の菌の生育を抑制することによって、さらに
正確に腸炎ビブリオを検出する目的で、無機塩類及び／
又は糖類を含有させるのが好ましい。ここで無機塩類と
しては、塩化ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム等の無機
酸金属塩；クエン酸鉄アンモニウム、クエン酸ナトリウ
ム等の有機酸金属塩等が挙げられる。このうち、塩化ナ
トリウム等の無機酸金属塩は、腸炎ビブリオが好塩性細
菌であるため、生育を促進するうえで特に好ましい。ま
た、他の無機塩類は、胆汁末、コール酸ナトリウム、デ
オキシコール酸ナトリウム等の胆汁酸類と併用すること
によりビブリオ属以外のグラム陰性菌の生育を抑制する
ため好ましい。ここで、塩化ナトリウム等の無機酸金属
塩は本発明培地中に１．００〜５０．０ｇ／Ｌ、特に
５．００〜３０．０ｇ／Ｌ含有するのが好ましい。有機
酸金属塩は、本発明培地中に０．０１〜２０．０ｇ／
Ｌ、特に０．５０〜１０．０ｇ／Ｌ含有するのが好まし
い。また胆汁酸類は、本発明培地中に０．００１〜５．
００ｇ／Ｌ、特に０．１０〜１．００ｇ／Ｌ含有するの
が好ましい。
促進し、他の菌の生育を抑制することによって、さらに
正確に腸炎ビブリオを検出する目的で、無機塩類及び／
又は糖類を含有させるのが好ましい。ここで無機塩類と
しては、塩化ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム等の無機
酸金属塩；クエン酸鉄アンモニウム、クエン酸ナトリウ
ム等の有機酸金属塩等が挙げられる。このうち、塩化ナ
トリウム等の無機酸金属塩は、腸炎ビブリオが好塩性細
菌であるため、生育を促進するうえで特に好ましい。ま
た、他の無機塩類は、胆汁末、コール酸ナトリウム、デ
オキシコール酸ナトリウム等の胆汁酸類と併用すること
によりビブリオ属以外のグラム陰性菌の生育を抑制する
ため好ましい。ここで、塩化ナトリウム等の無機酸金属
塩は本発明培地中に１．００〜５０．０ｇ／Ｌ、特に
５．００〜３０．０ｇ／Ｌ含有するのが好ましい。有機
酸金属塩は、本発明培地中に０．０１〜２０．０ｇ／
Ｌ、特に０．５０〜１０．０ｇ／Ｌ含有するのが好まし
い。また胆汁酸類は、本発明培地中に０．００１〜５．
００ｇ／Ｌ、特に０．１０〜１．００ｇ／Ｌ含有するの
が好ましい。
【００１２】糖類としては、単糖類及びオリゴ糖類が使
用でき、例えばラクトース、シュークロース（白糖）、
キシロース、セロビオース、マルトース等が挙げられ
る。これらの糖類の添加により、腸炎ビブリオ以外の菌
によって前記β−グルコシダーゼ基質が利用されてしま
うのを防止でき、より正確な検出が可能となるため、好
ましい。これら糖類は、本発明培地中に１．００〜５０
ｇ／Ｌ、特に５〜３０ｇ／Ｌ含有させるのが好ましい。
用でき、例えばラクトース、シュークロース（白糖）、
キシロース、セロビオース、マルトース等が挙げられ
る。これらの糖類の添加により、腸炎ビブリオ以外の菌
によって前記β−グルコシダーゼ基質が利用されてしま
うのを防止でき、より正確な検出が可能となるため、好
ましい。これら糖類は、本発明培地中に１．００〜５０
ｇ／Ｌ、特に５〜３０ｇ／Ｌ含有させるのが好ましい。
【００１３】また、本発明の培地には、ペプトン、酵母
エキス、獣肉エキス、魚肉エキス等の栄養成分を含有さ
せるのが好ましい。さらに、ピルビン酸ナトリウム、硫
酸塩等を添加することもできる。また、腸炎ビブリオ
は、アルカリ条件下でよく生育するので、本発明培地に
はpHを８．０〜９．０にするためのアルカリ剤を含有す
るのが好ましい。アルカリ剤としては、炭酸ナトリウ
ム、水酸化ナトリウム、ほう酸ナトリウム、３−
［（１，１−ジメチル−２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］−２−ヒドロキシプロパン−スルホン酸、Ｎ，Ｎ−
ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ−シクロヘ
キシル−３−アミノプロパンスルホン酸、シクロヘキシ
ルアミノエタンスルホン酸、Ｎ−トリス（ヒドロキシメ
チル）メチル−３−アミノ−プロパンスルホン酸等が挙
げられる。
エキス、獣肉エキス、魚肉エキス等の栄養成分を含有さ
せるのが好ましい。さらに、ピルビン酸ナトリウム、硫
酸塩等を添加することもできる。また、腸炎ビブリオ
は、アルカリ条件下でよく生育するので、本発明培地に
はpHを８．０〜９．０にするためのアルカリ剤を含有す
るのが好ましい。アルカリ剤としては、炭酸ナトリウ
ム、水酸化ナトリウム、ほう酸ナトリウム、３−
［（１，１−ジメチル−２−ヒドロキシエチル）アミ
ノ］−２−ヒドロキシプロパン−スルホン酸、Ｎ，Ｎ−
ビス（２−ヒドロキシエチル）グリシン、Ｎ−シクロヘ
キシル−３−アミノプロパンスルホン酸、シクロヘキシ
ルアミノエタンスルホン酸、Ｎ−トリス（ヒドロキシメ
チル）メチル−３−アミノ−プロパンスルホン酸等が挙
げられる。
【００１４】本発明培地の形態は特に限定されず、通常
の寒天培地の他、シート状簡易培地（例えばメッシュを
有する繊維状吸水シートに担持させた構造（特開２００
０−３２５０７２））とすることもできる。
の寒天培地の他、シート状簡易培地（例えばメッシュを
有する繊維状吸水シートに担持させた構造（特開２００
０−３２５０７２））とすることもできる。
【００１５】本発明培地を用いて、被検体中の腸炎ビブ
リオを検出するには、当該培地に検体を添加して３０〜
４５℃で１８〜２４時間培養した後に、コロニーの着
色、蛍光等の特性を観察すればよい。
リオを検出するには、当該培地に検体を添加して３０〜
４５℃で１８〜２４時間培養した後に、コロニーの着
色、蛍光等の特性を観察すればよい。
【００１６】本発明培地に適用される検体としては、魚
介類等の生鮮食料品、海水、調理場などのふき取り検体
等が挙げられるが、これらの検体を予めトリプトソーヤ
ブイヨン培地で培養した培養液やさらにこれを増菌用培
地で培養した培養液も用いることができる。
介類等の生鮮食料品、海水、調理場などのふき取り検体
等が挙げられるが、これらの検体を予めトリプトソーヤ
ブイヨン培地で培養した培養液やさらにこれを増菌用培
地で培養した培養液も用いることができる。
【００１７】
【実施例】次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明する
が、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではな
い。
が、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではな
い。
【００１８】実施例１ ペプトン１０ｇ、酵母エキス５ｇ、塩化ナトリウム１０
ｇ、クエン酸ナトリウム１０ｇ、クエン酸鉄アンモニウ
ム１ｇ、チオ硫酸ナトリウム６．４ｇ、白糖末２０ｇ、
乳糖１０ｇ、ピルビン酸ナトリウム１ｇ、牛胆汁末０．
２５ｇ、Ｘ−β−グルコシド０．３ｇ、寒天１５ｇを１
リットルの精製水に加え２０％炭酸ナトリウム水溶液に
てpHを８．８に合わせた後、１００℃、２０分間加温溶
解する。溶解後培地が冷めたことを確認し、ろ過滅菌し
たバンコマイシン塩酸塩を０．０２ｇ／Ｌになるように
加え良く撹拌した後、プラスチックシャーレ（９０φm
m）に２０mLずつ分注して培地が固まるまで静置し、本
発明の腸炎ビブリオ検出用培地を作製した。
ｇ、クエン酸ナトリウム１０ｇ、クエン酸鉄アンモニウ
ム１ｇ、チオ硫酸ナトリウム６．４ｇ、白糖末２０ｇ、
乳糖１０ｇ、ピルビン酸ナトリウム１ｇ、牛胆汁末０．
２５ｇ、Ｘ−β−グルコシド０．３ｇ、寒天１５ｇを１
リットルの精製水に加え２０％炭酸ナトリウム水溶液に
てpHを８．８に合わせた後、１００℃、２０分間加温溶
解する。溶解後培地が冷めたことを確認し、ろ過滅菌し
たバンコマイシン塩酸塩を０．０２ｇ／Ｌになるように
加え良く撹拌した後、プラスチックシャーレ（９０φm
m）に２０mLずつ分注して培地が固まるまで静置し、本
発明の腸炎ビブリオ検出用培地を作製した。
【００１９】試験例１ 供試菌株はトリプトソイブイヨン（腸炎ビブリオ及びビ
ブリオ・アルギノリティカスは３％食塩加トリプトソイ
ブイヨン）で２４時間前培養したものを用い、これを滅
菌生理食塩水（腸炎ビブリオ及びビブリオ・アルギノリ
ティカスは滅菌３％食塩水）で希釈し本発明の腸炎ビブ
リオ検出用培地に接種した。接種後３５℃で２４時間培
養したところ、表１に示すように本発明培地上では腸炎
ビブリオは青色の発色コロニーを形成し、ビブリオ・ア
ルギノリティカス、ビブリオ・コレラ等は白色のコロニ
ーを形成し、グラム陽性球菌はその発育が阻止された。
これにより、本発明培地を用いれば、腸炎ビブリオが正
確かつ簡便に検出できることがわかる。
ブリオ・アルギノリティカスは３％食塩加トリプトソイ
ブイヨン）で２４時間前培養したものを用い、これを滅
菌生理食塩水（腸炎ビブリオ及びビブリオ・アルギノリ
ティカスは滅菌３％食塩水）で希釈し本発明の腸炎ビブ
リオ検出用培地に接種した。接種後３５℃で２４時間培
養したところ、表１に示すように本発明培地上では腸炎
ビブリオは青色の発色コロニーを形成し、ビブリオ・ア
ルギノリティカス、ビブリオ・コレラ等は白色のコロニ
ーを形成し、グラム陽性球菌はその発育が阻止された。
これにより、本発明培地を用いれば、腸炎ビブリオが正
確かつ簡便に検出できることがわかる。
【００２０】
【表１】
【００２１】実施例２ 実施例１の組成の培地成分を用いて、メッシュを有する
繊維状吸水シートに担持させた簡易培地（特開２０００
−３２５０７２公報）実施例１（ヒドロキシプロピルセ
ルロース０．１重量％におけるブドウ糖２ｇ／Ｌとテト
ラゾリウムクロライド０．０２ｇ／Ｌを塩化ナトリウム
１０ｇ／Ｌ、クエン酸鉄アンモニウム１ｇ／Ｌ、チオ硫
酸ナトリウム６．４ｇ／Ｌ、白糖末２０ｇ／Ｌ、乳糖１
０ｇ／Ｌ、ピルビン酸ナトリウム１ｇ／Ｌ、牛胆汁末
０．２５ｇ／Ｌ、Ｘ−β−グルコシド０．３ｇ／Ｌに代
えて調製）に試験例１と同様にして供試菌株を適用し
た。その結果、表２に示すように本発明簡易培地によっ
ても、腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できた。な
お、表２には実施例１の寒天培地による結果も併せて示
した。
繊維状吸水シートに担持させた簡易培地（特開２０００
−３２５０７２公報）実施例１（ヒドロキシプロピルセ
ルロース０．１重量％におけるブドウ糖２ｇ／Ｌとテト
ラゾリウムクロライド０．０２ｇ／Ｌを塩化ナトリウム
１０ｇ／Ｌ、クエン酸鉄アンモニウム１ｇ／Ｌ、チオ硫
酸ナトリウム６．４ｇ／Ｌ、白糖末２０ｇ／Ｌ、乳糖１
０ｇ／Ｌ、ピルビン酸ナトリウム１ｇ／Ｌ、牛胆汁末
０．２５ｇ／Ｌ、Ｘ−β−グルコシド０．３ｇ／Ｌに代
えて調製）に試験例１と同様にして供試菌株を適用し
た。その結果、表２に示すように本発明簡易培地によっ
ても、腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できた。な
お、表２には実施例１の寒天培地による結果も併せて示
した。
【００２２】
【表２】
【００２３】
【発明の効果】本発明培地を用いれば食中毒原因菌とし
て重要な腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できる。
て重要な腸炎ビブリオが正確かつ簡便に検出できる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 韮塚 貞宣 茨城県結城市北南茂呂1075−２ 日水製薬 株式会社診断薬研究部内 (72)発明者 小高 秀正 茨城県結城市北南茂呂1075−２ 日水製薬 株式会社診断薬研究部内 Ｆターム(参考） 4B063 QA01 QA19 QQ01 QQ06 QQ16 QR57 QR68 QR69 QX01
Claims (5)
- 【請求項１】 検出可能な遊離性基を有するβ−グルコ
シダーゼ基質及びグラム陽性菌抗菌物質を含有する腸炎
ビブリオ検出用培地。 - 【請求項２】 さらに、無機塩類及び／又は糖類を含有
するものである請求項１記載の腸炎ビブリオ検出用培
地。 - 【請求項３】 検出可能な遊離性基を有するβ−グルコ
シダーゼ基質が、色原体化合物又は蛍光性化合物を遊離
し得るβ−グルコピラノシド又はその塩である請求項１
又は２記載の腸炎ビブリオ検出用培地。 - 【請求項４】 グラム陽性菌抗菌物質が、バンコマイシ
ン、リストセチン及びこれらの塩から選ばれるものであ
る請求項１〜３のいずれか１項記載の腸炎ビブリオ検出
用培地。 - 【請求項５】 請求項１〜４のいずれか１項記載の培地
に、検体を接種して培養した後、当該培地上の検出可能
なコロニーの有無を検出することを特徴とする腸炎ビブ
リオの検出法。
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| JP2001165144A JP4886122B2 (ja) | 2001-05-31 | 2001-05-31 | 腸炎ビブリオ検出用培地 |
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