JP2015057058A - 組織傷害の修復におけるストロマ細胞由来因子1のプロテアーゼ耐性変異体 - Google Patents
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Abstract
Description
本願は、2007年6月22日出願の米国仮出願第60/929,353号および2006年10月23日出願の第60/853,441号に基づく優先権および恩典を主張する。これらの先の出願の内容は、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。
本発明は、細胞を誘引する能力は保存するが、プロテアーゼ、特にマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)および/またはジペプチジルペプチダーゼIV(DPPIV/CD26)による不活化に対して耐性となる様式で変異を有しているストロマ細胞由来因子1(SDF-1)ペプチドに関する。傷害を受けた組織に輸送された場合、これらの変異体は、組織修復を促進する。ペプチドは、胃腸管またはその他の潰瘍、事故、手術、または疾患に起因する創傷;および心筋梗塞の結果として傷害を受けた心組織を含む多くの状態の処置においても有用であるはずである。ペプチドは、創傷、潰瘍、または病変により引き起こされた傷害に対する感受性を減ずるための糖尿病患者の処置においても有用であるはずである。特に好ましい態様において、SDF-1の変異型は、自己集合ペプチドにより形成された膜を使用して傷害を受けた組織へと輸送される。
ストロマ細胞由来因子1(SDF-1またはCXCL12)は、休止Tリンパ球、単球、およびCD34+幹細胞を誘引するケモカインファミリーの68アミノ酸のメンバーである。差次的なmRNAスプライシングの結果である二つの異なる型であるSDF-1αおよびSDF-1βとして一般に見出される(米国特許第5,563,048号(特許文献1))。これらの型は、SDF-1βがC末端において4アミノ酸(-Arg-Phe-Lys-Met)だけ延長されていることを除き、本質的に同一である。いずれの型のSDF-1も、最初、21アミノ酸長のシグナルペプチドを含んで作製され、それが切断されて活性ペプチドとなる(米国特許第5,563,048号(特許文献1))。本発明の目的のため、「SDF-1」という用語は、活性型のペプチド、即ち、シグナルペプチドの切断後のペプチドをさし、SDF-1αおよびSDF-1βの両方を包含することが理解されよう。
のN末端から4番目および/または5番目の変化を特徴とするSDF-1の変異型(mSDF-1)に関する。従って、4番目のアミノ酸がS以外のアミノ酸へと変化させられ、かつ/または5番目のアミノ酸がL以外のアミノ酸へと変化させられる。前述のように、全長SDF-1ペプチドの短縮型は、最初の8アミノ酸(上に示された配列において強調されている)が存在することを条件として生物学的活性を維持し、これらの短縮型も第4位および/または第5位を変異させることによりプロテアーゼ耐性にされ得る。本発明は、これらの生物学的に活性な短縮変異体も含む。換言すると、本発明は、SEQ ID NO:52の残りの配列の全部またはアミノ酸9〜68として示される任意の一部の分だけC末端において任意で延長されている、SEQ ID NO:52の少なくともアミノ酸1〜8のアミノ酸配列を含むペプチドを含む。いかなる場合にも、ペプチドは、4位にS以外のタンパク新生アミノ酸が存在し、かつ/または5位にL以外のタンパク新生アミノ酸が存在することを除き、SEQ ID NO:52に与えられたものに対応する配列を有するであろう。
を有し、ここで、XはS以外の20のタンパク新生アミノ酸のうちのいずれかである。これらのペプチドのうち最も好ましいものは、配列:
を有するSDF(S4V)である。SEQ ID NO:53および54は、SDF-1ペプチドの完全配列を示す。しかしながら、短縮された型のペプチドが、最初の8個のN末端アミノ酸が存在する限り、活性を維持するであろうことが理解されるであろう。これらも、本発明の一部であり、4位および/または5位のアミノ酸を変異させることによりプロテアーゼ耐性にされ得る。
を有し、ここで、XはL、W、またはE以外の20のタンパク新生アミノ酸のうちのいずれかである。これらのペプチドのうち最も好ましいものは、配列:
を有するSDF(L5P)である。この場合も上記と同様に、短縮されており、かつSEQ ID NO:55または56の少なくとも最初の8アミノ酸を有するペプチドは、本発明に含まれる。それらは、上に示された配列から付加的なアミノ酸によってC末端において延長されていてもよい。
からなる群より選択される自己集合ペプチドである。
であり;好ましいプロテアーゼ耐性SDF-1ペプチドは、SDF(S4V)およびXp-SDF(S4V)、特にp=1であるものである。接合された場合、得られる融合タンパク質は、簡便のため、SDF(S4V)-RADまたはXp-SDF(S4V)-RADと略記される。好ましいリンカー配列は、n=1であり、Lが
である場合に起こる。最後のものはMMP-2切断部位(「MCS」)を表す。
は、MCSのスクランブルされたバージョンを表し、「SCR」と略記される。驚くべきことに、この配列も、MCSより低い速度ではあるが、MMP-2切断を受けることが見出された。リンカー配列を含有する好ましい融合タンパク質は、
である。この場合も上記と同様に、pは好ましくは1である。
が特に好ましい。膜は、本明細書に記載の自己集合ペプチドが水中では凝集しないが、低濃度の単価金属カチオンの存在下では膜へと集合するという事実を利用することにより、融合タンパク質から(または自己集合ペプチドから)作製され得る。従って、例えば、融合タンパク質は、自己集合が起こらない条件の下で作製され、次いで膜形成を促進する条件、例えば、低い単価金属カチオン濃度へと曝され得る。最終的な結果は、患者へ移植され得、高度に集中したSDF-1生物学的活性を移植の部位において維持するであろうマトリックスである。または、融合タンパク質が、自己集合を誘導するには低すぎる単価カチオン濃度で、注射可能な薬学的組成物に組み入れられ、次いでインビボで膜形成を誘導するため患者へ投与されてもよい。
[請求項101]
Xp-SDF-1、mSDF-1、およびXp-mSDF-1からなる群より選択される式を有するペプチドを含む単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、
(a)Xがタンパク新生アミノ酸またはプロテアーゼ保護有機基であり;
(b)pが1〜4の整数であり;
(c)SDF-1が、SEQ ID NO:52の少なくともアミノ酸1〜8のアミノ酸配列を含み、かつSEQ ID NO:52の残りの配列の全部またはアミノ酸9〜68として示される任意の一部の分だけC末端において任意で延長されたペプチドであり;
(d)Xp-SDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でジペプチジルペプチダーゼIV(DPPIV)により不活化され;
(e)mSDF-1が、SDF-1のN末端から4番目および/または5番目のアミノ酸における変異を含むSDF-1の型であり;
(f)mSDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化され、
(g)Xp-mSDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でDPPIVにより不活化され、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でMMP-2により不活化される
単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
[請求項102]
mSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかを含む、単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、該mSDF-1が、
(a)SEQ ID NO:53のアミノ酸配列を含み;
(b)SDF-1の感度の少なくとも1/10の感度でT細胞に対する化学誘引物質活性を維持しており;かつ
(c)SDF-1の不活化の速度の四分の一未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化される
請求項101記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
[請求項103]
mSDF-1がSEQ ID NO:54のアミノ酸配列を特徴とするSDF(S4V)である、請求項102記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
[請求項104]
mSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかの式を含む、単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、該mSDF-1が、
(a)SEQ ID NO:55のアミノ酸配列を含み;
(b)SDF-1の感度の少なくとも1/10の感度でT細胞に対する化学誘引物質活性を維持しており;かつ
(c)SDF-1の不活化の速度の四分の一未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化される
請求項101記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
[請求項105]
mSDF-1が、SEQ ID NO:56のアミノ酸配列を特徴とするSDF(L5P)である、請求項104記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
[請求項106]
式:A-(L)n-(R)qを含む融合タンパク質であって、Aが請求項101記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であり、nが0〜3の整数であり;qが1〜3の整数であり;Lが3〜9アミノ酸のリンカー配列であり、かつRが
からなる群より選択される自己集合ペプチドである、融合タンパク質。
[請求項107]
AがmSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかであり;かつSEQ ID NO:53〜SEQ ID NO:56のいずれか一つのアミノ酸配列を含む、請求項106記載の融合タンパク質。
[請求項108]
n=1であり、かつLが
からなる群より選択される、請求項107記載の融合タンパク質。
[請求項109]
AがSEQ ID NO:54のmSDF-1ペプチドである、請求項108記載の融合タンパク質。
[請求項110]
q=1であり、かつRが
である、請求項109記載の融合タンパク質。
[請求項111]
請求項101記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1または請求項106記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
[請求項112]
SEQ ID NO:60〜63からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項111記載の核酸。
[請求項113]
SEQ ID NO:1〜SEQ ID NO:51からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する一つまたは複数の自己集合ペプチドを含み、かつ該自己集合ペプチドの0.1〜10%が請求項101記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1と結合している、生物学的に適合性のペプチド膜。
[請求項114]
前記の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1が、ビオチン/アビジン結合により、生物学的に適合性のペプチド膜中の自己集合ペプチドと結合している、請求項103記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
[請求項115]
前記の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1を、一つまたは複数の前記自己集合ペプチドから、少なくとも14オングストロームかつ250オングストローム以下だけ隔離するスペーサーが存在する、請求項113記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
[請求項116]
mSDF-1ペプチドがペプチド結合により生物学的に適合性のペプチド膜中の自己集合ペプチドと共有結合している、請求項103記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
[請求項117]
請求項101記載の変異体ストロマ細胞由来因子1を、傷害を受けた組織に局所投与することを含む、傷害を受けた組織の修復を補助するために患者を処置する方法。
[請求項118]
傷害を受けた組織への局所投与の後に、前記変異体ストロマ細胞由来因子1が、生物学的に適合性の膜に付着するか、または生物学的に適合性の膜を形成する自己集合ペプチドに付着する、請求項117記載の方法。
[請求項119]
患者が、発作;四肢虚血;外傷による組織傷害;および糖尿病性潰瘍からなる群より選択される疾患または状態のために処置される、請求項117記載の方法。
[請求項120]
患者が心組織の傷害のために処置される、生物学的に適合性のペプチド膜を該患者の心筋へ注射または移植することを含む、請求項117記載の方法。
本発明は、MMP-2および/またはDPPIV切断に対して耐性になるよう変異しており、かつ自発的に集合するペプチドにより形成された膜によって輸送されるSDF-1に、組織を曝すことにより、傷害を受けた組織、例えば傷害を受けた心組織の回復が促進されるという概念に基づく。自己集合ペプチドは、米国特許第5,670,483号および米国特許第6,548,630号(参照によりその全体が本明細書に組み入れられる)に記載されている。因子を膜に付着させる方法および治療剤の心組織への輸送における膜の使用も記載されている(参照によりその全体が本明細書に組み入れられる米国特許出願公開第20060148703号および第20060088510号を参照のこと)。膜を作製し使用するための同じ手法が、本発明に適用され得る。
自己集合のために使用されるペプチドは、少なくとも12残基長であり、疎水性アミノ酸および親水性アミノ酸を交互に含有しているべきである。約200アミノ酸より長いペプチドは、溶解度および膜安定性に関する問題を提示する傾向があり、従って回避されるべきである。理想的には、ペプチドは約12〜24アミノ酸長であるべきである。
本発明の自己集合ペプチドおよびプロテアーゼ耐性SDF-1ペプチドは、標準的なN-tert-ブトキシカルボニル(t-Boc)化学を使用した固相ペプチド合成およびn-メチルピロリドン化学を使用したサイクルにより作製され得る。ペプチドは、合成された後、逆相カラムでの高圧液体クロマトグラフィのような手法を使用して精製され得る。純度もHPLCにより査定され得、正確な組成の存在は、アミノ酸分析により決定され得る。mSDF-1ペプチドに適した精製手法は、実施例セクションに記載される。
いくつかの戦略が、プロテアーゼ耐性SDF-1を自己集合ペプチドに付着させるために使用され得る。一つの戦略は、増殖因子PDGF-BBの組織への輸送において有効であることが以前に示されている非共有結合性の結合である(Hsieh, et al., J. Clin. Invest. 116:237-248 (2006))。
本明細書に記載の自己集合ペプチドおよび融合タンパク質は、水中では膜を形成しないが、低濃度の単価金属カチオンの存在下では集合すると考えられる。これらのカチオンの有効性の順序は、Li+>Na+>K+>Cs+である(米国特許第6,548,630号)。5mMという単価カチオンの濃度が、ペプチドが集合するために十分であるはずであり、5Mもの高い濃度もやはり有効である。単価カチオンと会合したアニオンは、本発明にとって重要でなく、アセテート、クロリド、スルフェート、フォスフェート等であり得る。
プロテアーゼ耐性SDF-1ペプチドまたは融合ペプチドが付着した膜は、生理食塩水、リンゲル溶液、およびその他の薬剤または賦形剤のような担体を含有する薬学的組成物へと組み込まれ得る。剤形は、一般に、特に心組織への、移植または注射のために設計されるが、例えば創傷の処置においては、局所処置も有用であろう。全ての剤形が当技術分野において標準的な方法を使用して調製され得る(例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences, 16th ed. A. Oslo. ed., Easton, PA (1980)を参照のこと)。
SDF-1の精製および発現
成熟SDF-1αのDNA配列はヒトcDNAからpET-Sumoベクターへとクローニングされ得、Sumoプロテアーゼによる切断(69AAのSDF-1型を与える)を容易にするため追加のN末端セリン残基が組み込まれ得る。融合タンパク質は、RAD配列またはAP配列を逆方向プライマーに組み込むことにより作製され得る。Sumo-SDF-1融合タンパク質はRosetta DE3大腸菌において発現され、37℃で1.5(600nm)の光学密度にまで増殖される。細胞は0.25mMイソプロピルβ-D-チオガラクトシドで4時間誘導され、遠心分離により採集される。下記の通り、SDF-1αは3段階の手法により精製され得;全ての段階が21℃で実施される。
SDF-1融合構築物を次の三つの配列のうちの一つによる挿入変異誘発により修飾した:一つの配列は、MMP-2分解感受性であり(MMP分解部位またはMCS)、もう一つの配列はランダムな順序であるが同一アミノ酸を含有しており(スクランブル配列またはSCR)、第三の配列はリンカーとして6個のグリシンを含有している。
MMP-2によりSDF-1をN末端の活性部位において切断し、N末端テトラペプチドおよび不活性SDF-1(5-68)を得る。Netzel-Arnettら(Biochemistry 32:6427-6432 (1993))により記載されたMMP-2の基質配列に基づき、MMP-2切断に対してSDF-1を耐性にするために、4個の異なるアミノ酸の特異的変異誘発を実施した。4個の異なる構築物を発現させ、SDF-1について記載されたようにして精製した。4個の異なる変異のうち、SDF-1(L5W)およびSDF-1(L5E)はT細胞遊走に対する最小の活性を示した。対照的に、SDF-1(S4V)およびSDF-1(L5P)はネイティブSDF-1と同等の生物活性を示した。SDF-1(L5P)は精製がより困難であったため、SDF-1(S4V)をさらなる実験のため選択した。
SDF-1の変異型を、100nMの濃度で、ジャーカットT細胞の遊走のアッセイにおいて試験した。このアッセイは、SDF-1(S4V)およびSDF-1(L5P)の両方が、T細胞遊走の促進における非変異SDF-1の活性の大部分を保持していることを示した。この活性はSDF-1(L5W)変異体およびSDF-1(L5E)変異体においては大きく減少していた。
ラットにおける心筋梗塞後の心機能に対する異なるSDF-1型の効果を評価するため、盲検無作為化試験を実施した。心室内圧および心室容積の測定のため、Millarカテーテルシステムにより駆出率を測定した。SDF-1(S4V)-6G-RADおよびSDF-1(S4V)-MCS-RADの両方が、MIのみの群と比較して、ラットにおける心筋梗塞の4週間後の心機能を有意に増加させた。これは、MMP-2耐性(SDF-1(S4V))および膜への付着の両方が心臓修復治療の成功にとって必要であることを示している。
三つのSDF-1の短縮型を商業的に合成した;全てネイティブSDF-1の最初の17アミノ酸を含む。完全SDF-1タンパク質を用いた先の研究に基づき、MMP-2に対しより耐性にするために、SDF-1 17AAの二つの変種を設計した。
Claims (20)
- Xp-SDF-1、mSDF-1、およびXp-mSDF-1からなる群より選択される式を有するペプチドを含む単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、
(a)Xがタンパク新生アミノ酸またはプロテアーゼ保護有機基であり;
(b)pが1〜4の整数であり;
(c)SDF-1が、SEQ ID NO:52の少なくともアミノ酸1〜8のアミノ酸配列を含み、かつSEQ ID NO:52の残りの配列の全部またはアミノ酸9〜68として示される任意の一部の分だけC末端において任意で延長されたペプチドであり;
(d)Xp-SDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でジペプチジルペプチダーゼIV(DPPIV)により不活化され;
(e)mSDF-1が、SDF-1のN末端から4番目および/または5番目のアミノ酸における変異を含むSDF-1の型であり;
(f)mSDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化され、
(g)Xp-mSDF-1がT細胞に対する化学誘引物質活性を有しており、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でDPPIVにより不活化され、かつSDF-1が不活化される速度の半分未満の速度でMMP-2により不活化される
単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。 - mSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかを含む、単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、該mSDF-1が、
(a)SEQ ID NO:53のアミノ酸配列を含み;
(b)SDF-1の感度の少なくとも1/10の感度でT細胞に対する化学誘引物質活性を維持しており;かつ
(c)SDF-1の不活化の速度の四分の一未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化される
請求項1記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。 - mSDF-1がSEQ ID NO:54のアミノ酸配列を特徴とするSDF(S4V)である、請求項2記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
- mSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかの式を含む、単離された変異体ストロマ細胞由来因子1であって、該mSDF-1が、
(a)SEQ ID NO:55のアミノ酸配列を含み;
(b)SDF-1の感度の少なくとも1/10の感度でT細胞に対する化学誘引物質活性を維持しており;かつ
(c)SDF-1の不活化の速度の四分の一未満の速度でマトリックスメタロプロテイナーゼ2(MMP-2)により不活化される
請求項1記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。 - mSDF-1が、SEQ ID NO:56のアミノ酸配列を特徴とするSDF(L5P)である、請求項4記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1。
- AがmSDF-1またはXp-mSDF-1のいずれかであり;かつSEQ ID NO:53〜SEQ ID NO:56のいずれか一つのアミノ酸配列を含む、請求項6記載の融合タンパク質。
- AがSEQ ID NO:54のmSDF-1ペプチドである、請求項8記載の融合タンパク質。
- 請求項1記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1または請求項6記載の融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む核酸。
- SEQ ID NO:60〜63からなる群より選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項11記載の核酸。
- SEQ ID NO:1〜SEQ ID NO:51からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する一つまたは複数の自己集合ペプチドを含み、かつ該自己集合ペプチドの0.1〜10%が請求項1記載の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1と結合している、生物学的に適合性のペプチド膜。
- 前記の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1が、ビオチン/アビジン結合により、生物学的に適合性のペプチド膜中の自己集合ペプチドと結合している、請求項3記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
- 前記の単離された変異体ストロマ細胞由来因子1を、一つまたは複数の前記自己集合ペプチドから、少なくとも14オングストロームかつ250オングストローム以下だけ隔離するスペーサーが存在する、請求項13記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
- mSDF-1ペプチドがペプチド結合により生物学的に適合性のペプチド膜中の自己集合ペプチドと共有結合している、請求項3記載の生物学的に適合性のペプチド膜。
- 請求項1記載の変異体ストロマ細胞由来因子1を、傷害を受けた組織に局所投与することを含む、傷害を受けた組織の修復を補助するために患者を処置する方法。
- 傷害を受けた組織への局所投与の後に、前記変異体ストロマ細胞由来因子1が、生物学的に適合性の膜に付着するか、または生物学的に適合性の膜を形成する自己集合ペプチドに付着する、請求項17記載の方法。
- 患者が、発作;四肢虚血;外傷による組織傷害;および糖尿病性潰瘍からなる群より選択される疾患または状態のために処置される、請求項17記載の方法。
- 患者が心組織の傷害のために処置される、生物学的に適合性のペプチド膜を該患者の心筋へ注射または移植することを含む、請求項17記載の方法。
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---|---|---|---|---|
US20050260258A1 (en) * | 2003-12-18 | 2005-11-24 | The Texas A&M University System | Use of vitelline protein B as a microencapsulating additive |
US7696309B2 (en) | 2006-10-23 | 2010-04-13 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Protease resistant mutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage |
EP4032538A3 (en) | 2009-03-02 | 2022-10-26 | Massachusetts Institute of Technology | Methods and products for in vivo enzyme profiling |
WO2011106234A1 (en) * | 2010-02-25 | 2011-09-01 | Provasculon, Inc. | Protease-resistant mutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage |
US8741833B2 (en) * | 2010-07-16 | 2014-06-03 | Massachusetts Institute Of Technology | Self-assembling peptides incorporating modifications and methods of use thereof |
WO2012027170A1 (en) * | 2010-08-23 | 2012-03-01 | Provasculon, Inc. | Methods for repairing tissue damage using protease-resistant mutants of stromal cell derived factor-1 |
CA3214092A1 (en) * | 2011-03-15 | 2012-09-20 | Massachusetts Institute Of Technology | Multiplexed detection with isotope-coded reporters |
US10662234B2 (en) | 2011-06-07 | 2020-05-26 | Mesoblast International Sàrl | Methods for repairing tissue damage using protease-resistant mutants of stromal cell derived factor-1 |
CN103740662B (zh) * | 2012-05-10 | 2015-08-19 | 江南大学 | 一种提高酶热稳定性的方法 |
WO2014197840A1 (en) | 2013-06-07 | 2014-12-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Affinity-based detection of ligand-encoded synthetic biomarkers |
CN106029086A (zh) * | 2013-12-13 | 2016-10-12 | 美索布拉斯特国际有限公司 | 使用基质细胞来源的因子-1的抗蛋白酶突变体修复组织损伤的方法 |
CN104650192B (zh) * | 2015-03-26 | 2017-06-23 | 罗忠礼 | 一类能用于修复子宫和保护心肌的自组装短肽及其应用 |
CA3020324A1 (en) | 2016-04-08 | 2017-10-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods to specifically profile protease activity at lymph nodes |
US11428689B2 (en) | 2016-05-05 | 2022-08-30 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and uses for remotely triggered protease activity measurements |
WO2018187688A1 (en) | 2017-04-07 | 2018-10-11 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods to spatially profile protease activity in tissue and sections |
WO2019173332A1 (en) | 2018-03-05 | 2019-09-12 | Massachusetts Institute Of Technology | Inhalable nanosensors with volatile reporters and uses thereof |
CN109234339B (zh) * | 2018-11-22 | 2020-12-29 | 湖南汇升生物科技有限公司 | 一种高纯度结晶麦芽糖的生产方法 |
CN109486792B (zh) * | 2018-11-22 | 2019-12-10 | 湖南汇升生物科技有限公司 | 一种生麦芽糖淀粉酶突变体的制备及其应用 |
CN109321481B (zh) * | 2018-11-22 | 2020-12-29 | 湖南汇升生物科技有限公司 | 一种生麦芽糖淀粉酶生产菌株 |
CN109439641B (zh) * | 2018-11-22 | 2020-12-29 | 湖南汇升生物科技有限公司 | 一种生麦芽糖淀粉酶生产菌株的应用 |
JP7438975B2 (ja) * | 2018-12-04 | 2024-02-27 | 中外製薬株式会社 | Cxcr3リガンド |
EP3911753A1 (en) | 2019-01-17 | 2021-11-24 | Massachusetts Institute of Technology | Sensors for detecting and imaging of cancer metastasis |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07501217A (ja) * | 1991-11-13 | 1995-02-09 | ダールベツク,ビヨルン | 血液凝固疾患の診断方法 |
WO2006047315A2 (en) * | 2004-10-25 | 2006-05-04 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Targeted delivery of biological factors using self-assembling peptide nanofibers |
WO2006073889A2 (en) * | 2005-01-04 | 2006-07-13 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Sustained delivery of pdgf using self-assembling peptide nanofibers |
Family Cites Families (44)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5670483A (en) | 1992-12-28 | 1997-09-23 | Massachusetts Insititute Of Technology | Stable macroscopic membranes formed by self-assembly of amphiphilic peptides and uses therefor |
CA2117953C (en) | 1993-10-14 | 2001-12-11 | Tasuku Honjo | Human stromal derived factor 1 alpha and 1 beta and dnas encoding the same |
JP3329109B2 (ja) * | 1994-12-02 | 2002-09-30 | ソニー株式会社 | プラズマアドレス表示装置 |
US6852508B1 (en) | 1997-02-28 | 2005-02-08 | Genetics Institute, Llc | Chemokine with amino-terminal modifications |
US6214540B1 (en) * | 1997-03-26 | 2001-04-10 | University Of Maryland Biotechnology Institute | Chemokines that inhibit immunodeficiency virus infection and methods based thereon |
CA2305787A1 (en) * | 2000-05-09 | 2001-11-09 | The University Of British Columbia | Cxcr4 antagonist treatment of hematopoietic cells |
JP2002506830A (ja) | 1998-03-13 | 2002-03-05 | ザ ユニバーシティ オブ ブリティッシュ コロンビア | 治療的ケモカイン受容体アンタゴニスト |
CA2245224A1 (en) | 1998-08-14 | 2000-02-14 | Jiang-Hong Giong | Chemokine receptor antagonists and chemotherapeutics |
US20020107195A1 (en) | 1998-07-21 | 2002-08-08 | Smithkline Beecham Corporation | Method for inducing chemotaxis in endothelial cells by administering stromal cell derived factor-1alpha |
US6221856B1 (en) * | 1999-02-03 | 2001-04-24 | Inologic, Inc. | Inositol derivatives for inhibiting superoxide anion production |
US20050059584A1 (en) * | 2002-08-16 | 2005-03-17 | Ahmed Merzouk | Novel chemokine mimetics synthesis and their use |
CA2335109A1 (en) | 2000-04-12 | 2001-10-12 | Chemokine Therapeutics Corporation | Cxcr4 agonist treatment of hematopoietic cells |
US7378098B2 (en) | 2000-04-12 | 2008-05-27 | The University Of British Columbia | CXC chemokine receptor 4 agonist peptides |
US7368425B2 (en) | 2006-03-24 | 2008-05-06 | Chemokine Therapeutics Corp. | Cyclic peptides for modulating growth of neo-vessels and their use in therapeutic angiogenesis |
DE10027383A1 (de) | 2000-06-02 | 2001-12-20 | Rhein Biotech Proz & Prod Gmbh | Nukleinsäure-Molekül umfassend eine für ein Chemokin, einen Neuropeptid-Präkursor oder mindestens ein Neuropeptid kodierende Nukleinsäuresequenz |
CA2810249A1 (en) * | 2000-06-05 | 2001-12-13 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Identification and use of human bone marrow-derived endothelial progenitor cell to improve myocardial function after ischemic injury |
US7547674B2 (en) * | 2001-06-06 | 2009-06-16 | New York Medical College | Methods and compositions for the repair and/or regeneration of damaged myocardium |
AU2002235168A1 (en) | 2000-11-05 | 2002-05-15 | University Of Florida | Targeting pluripotent stem cells to tissues |
WO2002038172A2 (en) | 2000-11-09 | 2002-05-16 | Genetics Institute, Llc | Sdf-1 beta expressing tumor cells as tumor vaccines |
WO2002043758A2 (en) * | 2000-12-01 | 2002-06-06 | Schering Corporation | Uses of mammalian genes and related reagents |
US20020156023A1 (en) * | 2000-12-06 | 2002-10-24 | Tularik Inc. | Lometrexol combination therapy |
AU2002348241A1 (en) * | 2001-11-24 | 2003-06-10 | Image Analysis, Inc. | Automatic detection and quantification of coronary and aortic calcium |
US20030199464A1 (en) * | 2002-04-23 | 2003-10-23 | Silviu Itescu | Regeneration of endogenous myocardial tissue by induction of neovascularization |
US7485141B2 (en) * | 2002-05-10 | 2009-02-03 | Cordis Corporation | Method of placing a tubular membrane on a structural frame |
WO2003094950A2 (en) | 2002-05-10 | 2003-11-20 | Ipf Pharmaceuticals Gmbh | A method of inhibiting the emigration of cells from the intravascular compartment into tissues |
US20050271639A1 (en) | 2002-08-22 | 2005-12-08 | Penn Marc S | Genetically engineered cells for therapeutic applications |
US20040037811A1 (en) | 2002-08-22 | 2004-02-26 | The Cleveland Clinic Foundation | Stromal cell-derived factor-1 mediates stem cell homing and tissue regeneration in ischemic cardiomyopathy |
CN100366257C (zh) * | 2002-08-22 | 2008-02-06 | 克里夫兰诊所基金会 | 基质细胞衍生因子-1介导缺血性心肌病中干细胞归巢及组织再生 |
JP2006502142A (ja) * | 2002-08-23 | 2006-01-19 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | 虚血性損傷を減少させる方法 |
US20070060512A1 (en) | 2003-03-04 | 2007-03-15 | Homayoun Sadeghi | Dipeptidyl-peptidase protected protein |
WO2004094465A2 (en) | 2003-04-23 | 2004-11-04 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Office Of Technology Management University Of Illinois At Urbana-Champaign | Synthetic molecules that mimic chemokines |
CN1252089C (zh) * | 2003-09-16 | 2006-04-19 | 广州润兴生物科技有限公司 | 基质细胞衍生因子-1α重组突变体的构建和制备 |
WO2006124013A2 (en) | 2004-04-30 | 2006-11-23 | Five Prime Therapeutics, Inc. | Novel stromal cell-derived factor-1 polypeptides, polynucleotides, modulators thereof, and method of use |
EP1803464A4 (en) * | 2004-09-17 | 2009-09-09 | Cellgentech Inc | TOPICAL PREPARATION FOR THE TREATMENT OF SKIN DISEASES |
US20090029912A1 (en) * | 2004-09-24 | 2009-01-29 | Stan Gronthos | Method of enhancing proliferation and/or survival of mesenchymal precursor cells (mpc) |
US20060110374A1 (en) * | 2004-11-24 | 2006-05-25 | Dudy Czeiger | Method to accelerate stem cell recruitment and homing |
WO2006074464A2 (en) | 2005-01-10 | 2006-07-13 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Modulating toll-like receptor activity |
ES2427565T3 (es) * | 2005-04-25 | 2013-10-31 | Massachusetts Institute Of Technology | Péptidos autoensambladores para promover la hemostasia |
JP2009513689A (ja) | 2005-10-31 | 2009-04-02 | ラボラトワール セローノ ソシエテ アノニム | 神経学的疾患の治療、及び/又は予防のためのsdf−1の使用 |
WO2007079460A2 (en) | 2006-01-04 | 2007-07-12 | Chemokine Therapeutics Corporation | Design of cxc chemokine analogs for the treatment of human diseases |
US7696309B2 (en) | 2006-10-23 | 2010-04-13 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Protease resistant mutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage |
US20080194478A1 (en) * | 2007-02-09 | 2008-08-14 | Gene Signal International Sa | Wound healing agent and composition |
WO2010024300A1 (ja) * | 2008-08-26 | 2010-03-04 | 国立大学法人 北海道大学 | 骨充填型軟骨組織再生誘導剤 |
JP2012527478A (ja) * | 2009-05-20 | 2012-11-08 | ボード・オブ・リージエンツ,ザ・ユニバーシテイ・オブ・テキサス・システム | 心筋梗塞後のリモデリングおよび心不全に関与するマイクロrnaの同定 |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07501217A (ja) * | 1991-11-13 | 1995-02-09 | ダールベツク,ビヨルン | 血液凝固疾患の診断方法 |
WO2006047315A2 (en) * | 2004-10-25 | 2006-05-04 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Targeted delivery of biological factors using self-assembling peptide nanofibers |
WO2006073889A2 (en) * | 2005-01-04 | 2006-07-13 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Sustained delivery of pdgf using self-assembling peptide nanofibers |
Non-Patent Citations (8)
Title |
---|
JPN6013019815; J Biol Chem. 2001 Nov 23;276(47):43503-8. * |
JPN6013019817; Proc Natl Acad Sci U S A. 1998 May 26;95(11):6331-6. * |
JPN6013019820; Blood. 2004 Apr 1;103(7):2452-9. * |
JPN6013019822; Cardiovasc Res. 2000 May;46(2):307-15. * |
JPN6013019825; Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2004 Dec;287(6):H2861-70. * |
JPN6013019828; J Biol Chem. 2001 Aug 10;276(32):29839-45. * |
JPN6013019830; Blood. 2004 Apr 1;103(7):2452-9. * |
JPN6013019832; J Biol Chem. 2002 May 3;277(18):15677-89. * |
Also Published As
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---|---|---|
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MX2011003788A (es) | Mutantes fgf21 y uso de los mismos. | |
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