KR20220139079A - 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 - Google Patents
세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20220139079A KR20220139079A KR1020210045245A KR20210045245A KR20220139079A KR 20220139079 A KR20220139079 A KR 20220139079A KR 1020210045245 A KR1020210045245 A KR 1020210045245A KR 20210045245 A KR20210045245 A KR 20210045245A KR 20220139079 A KR20220139079 A KR 20220139079A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- cell
- peptide
- seq
- lys
- amino acid
- Prior art date
Links
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 title claims description 39
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 title claims description 39
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 161
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 claims abstract description 47
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims abstract description 43
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 claims abstract description 34
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 claims abstract description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 45
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 33
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 21
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 claims description 20
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 15
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 12
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 claims description 9
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 9
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 8
- 230000035876 healing Effects 0.000 claims description 7
- 208000034656 Contusions Diseases 0.000 claims description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 6
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims description 5
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims description 5
- 208000004210 Pressure Ulcer Diseases 0.000 claims description 4
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 claims description 4
- 208000023589 ischemic disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010056340 Diabetic ulcer Diseases 0.000 claims description 3
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000034526 bruise Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 3
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 3
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 3
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 claims description 2
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010002383 Angina Pectoris Diseases 0.000 claims description 2
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 claims description 2
- 206010009895 Colitis ischaemic Diseases 0.000 claims description 2
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010012504 Dermatophytosis Diseases 0.000 claims description 2
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 claims description 2
- 206010013786 Dry skin Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001034 Frostbite Diseases 0.000 claims description 2
- 206010017711 Gangrene Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010412 Glaucoma Diseases 0.000 claims description 2
- 208000023329 Gun shot wound Diseases 0.000 claims description 2
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 claims description 2
- 208000001126 Keratosis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000034693 Laceration Diseases 0.000 claims description 2
- 241001460074 Microsporum distortum Species 0.000 claims description 2
- 206010050081 Neonatal hypoxia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 claims description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 claims description 2
- 206010038933 Retinopathy of prematurity Diseases 0.000 claims description 2
- 206010040943 Skin Ulcer Diseases 0.000 claims description 2
- 206010040840 Skin erosion Diseases 0.000 claims description 2
- 208000020339 Spinal injury Diseases 0.000 claims description 2
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002474 Tinea Diseases 0.000 claims description 2
- 208000030886 Traumatic Brain injury Diseases 0.000 claims description 2
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 claims description 2
- 206010000496 acne Diseases 0.000 claims description 2
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 claims description 2
- 208000012998 acute renal failure Diseases 0.000 claims description 2
- 206010064930 age-related macular degeneration Diseases 0.000 claims description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 claims description 2
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims description 2
- 208000013677 cerebrovascular dementia Diseases 0.000 claims description 2
- 230000009519 contusion Effects 0.000 claims description 2
- 230000037336 dry skin Effects 0.000 claims description 2
- 208000024963 hair loss Diseases 0.000 claims description 2
- 230000003676 hair loss Effects 0.000 claims description 2
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 claims description 2
- 201000008222 ischemic colitis Diseases 0.000 claims description 2
- 208000002780 macular degeneration Diseases 0.000 claims description 2
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 claims description 2
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000032253 retinal ischemia Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000019 skin ulcer Toxicity 0.000 claims description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 claims description 2
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 claims description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 8
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 claims 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 claims 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 claims 1
- 238000002316 cosmetic surgery Methods 0.000 claims 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 claims 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 66
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 48
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 abstract description 28
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 abstract description 8
- 230000007998 vessel formation Effects 0.000 abstract description 4
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 65
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 28
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 27
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 25
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 23
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 22
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 21
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 18
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 17
- DYJOORGDQIGZAS-DCAQKATOSA-N Lys-Ser-Met Chemical compound CSCC[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)N DYJOORGDQIGZAS-DCAQKATOSA-N 0.000 description 16
- ABSSTGUCBCDKMU-UWVGGRQHSA-N Pro-Lys-Gly Chemical compound NCCCC[C@@H](C(=O)NCC(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 ABSSTGUCBCDKMU-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 16
- QQJSJIBESHAJPM-IHRRRGAJSA-N Arg-Cys-Tyr Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 QQJSJIBESHAJPM-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 14
- YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N Gly-Leu-Asp Chemical compound [H]NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O YTSVAIMKVLZUDU-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 14
- GPJGFSFYBJGYRX-YUMQZZPRSA-N Lys-Gly-Asp Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC(O)=O GPJGFSFYBJGYRX-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 14
- MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N Ala-Lys-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O MFMDKJIPHSWSBM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 13
- RRVBEKYEFMCDIF-WHFBIAKZSA-N Asn-Cys-Gly Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)O)N)C(=O)N RRVBEKYEFMCDIF-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 13
- WYOSXGYAKZQPGF-SRVKXCTJSA-N Asp-His-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC2=CN=CN2)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N WYOSXGYAKZQPGF-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 13
- ISXJHXGYMJKXOI-GUBZILKMSA-N Glu-Cys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O ISXJHXGYMJKXOI-GUBZILKMSA-N 0.000 description 13
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 13
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 description 12
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 11
- OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N Arg-Arg-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N)C(=O)O OVVUNXXROOFSIM-SDDRHHMPSA-N 0.000 description 11
- XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N Gly-Gly-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)CN XPJBQTCXPJNIFE-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 11
- VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N His-Ala-Lys Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N VCDNHBNNPCDBKV-DLOVCJGASA-N 0.000 description 11
- CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N Lys-Arg-Arg Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O CLBGMWIYPYAZPR-AVGNSLFASA-N 0.000 description 11
- NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N Lys-Gly-Lys Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN NKKFVJRLCCUJNA-QWRGUYRKSA-N 0.000 description 11
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 description 11
- ZGFRMNZZTOVBOU-CIUDSAMLSA-N Ser-Met-Gln Chemical compound N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)O ZGFRMNZZTOVBOU-CIUDSAMLSA-N 0.000 description 11
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 description 11
- 108010073472 leucyl-prolyl-proline Proteins 0.000 description 11
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 10
- 108010009298 lysylglutamic acid Proteins 0.000 description 10
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 10
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 10
- JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N Arg-Ser-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)N JOTRDIXZHNQYGP-DCAQKATOSA-N 0.000 description 9
- ICAYWNTWHRRAQP-FXQIFTODSA-N Asp-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC(=O)O)N)CN=C(N)N ICAYWNTWHRRAQP-FXQIFTODSA-N 0.000 description 9
- GURIQZQSTBBHRV-SRVKXCTJSA-N Gln-Lys-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O GURIQZQSTBBHRV-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 9
- WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N Glu-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O WOMUDRVDJMHTCV-DCAQKATOSA-N 0.000 description 9
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 description 9
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 9
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 9
- 108010064235 lysylglycine Proteins 0.000 description 9
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 9
- 101100512078 Caenorhabditis elegans lys-1 gene Proteins 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- PDSUIXMZYNURGI-AVGNSLFASA-N His-Arg-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 PDSUIXMZYNURGI-AVGNSLFASA-N 0.000 description 8
- KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N His-His-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)N KWBISLAEQZUYIC-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 8
- 108010069495 cysteinyltyrosine Proteins 0.000 description 8
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 8
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 8
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 8
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Ser Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UISQLSIBJKEJSS-GUBZILKMSA-N 0.000 description 7
- FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N Gly-Ser-Glu Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O FGPLUIQCSKGLTI-WDSKDSINSA-N 0.000 description 7
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- DWJQKEZKLQCHKO-SRVKXCTJSA-N Tyr-Asn-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O DWJQKEZKLQCHKO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 238000013118 diabetic mouse model Methods 0.000 description 7
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 7
- KJGNDQCYBNBXDA-GUBZILKMSA-N Arg-Arg-Cys Chemical compound C(C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)CN=C(N)N KJGNDQCYBNBXDA-GUBZILKMSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- MFORDNZDKAVNSR-SRVKXCTJSA-N Gln-Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O MFORDNZDKAVNSR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N Leu-Pro-Pro Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(O)=O)CCC1 DPURXCQCHSQPAN-AVGNSLFASA-N 0.000 description 6
- QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N Lys-Cys-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CCCCN)N QQYRCUXKLDGCQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 6
- 108010037389 glutamyl-cysteinyl-lysine Proteins 0.000 description 6
- 108010054155 lysyllysine Proteins 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N Lys-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ATIPDCIQTUXABX-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 5
- AHFOKDZWPPGJAZ-SRVKXCTJSA-N Lys-Lys-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N AHFOKDZWPPGJAZ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- FYKUEXMZYFIZKA-DCAQKATOSA-N Pro-Pro-Gln Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O FYKUEXMZYFIZKA-DCAQKATOSA-N 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 5
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 5
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SHVFUCSSACPBTF-VGDYDELISA-N Ile-Ser-His Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N SHVFUCSSACPBTF-VGDYDELISA-N 0.000 description 4
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 4
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 4
- -1 cationic lipid Chemical class 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 4
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 4
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 4
- QVVDVENEPNODSI-BTNSXGMBSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]-5-(diaminomethylidene Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O QVVDVENEPNODSI-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 3
- VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N (3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CC=O VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N 0.000 description 3
- FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoisobutyric acid Chemical compound CC(C)(N)C(O)=O FUOOLUPWFVMBKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100021277 Beta-secretase 2 Human genes 0.000 description 3
- 101710150190 Beta-secretase 2 Proteins 0.000 description 3
- HHABWQIFXZPZCK-ACZMJKKPSA-N Cys-Gln-Ser Chemical compound C(CC(=O)N)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N HHABWQIFXZPZCK-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 3
- XIZWKXATMJODQW-KKUMJFAQSA-N Cys-His-Phe Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CN=CN2)NC(=O)[C@H](CS)N XIZWKXATMJODQW-KKUMJFAQSA-N 0.000 description 3
- IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N Cys-Lys-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O IDFVDSBJNMPBSX-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N H-Lys-Trp-OH Natural products C1=CC=C2C(CC(NC(=O)C(N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108700003968 Human immunodeficiency virus 1 tat peptide (49-57) Proteins 0.000 description 3
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- ZDSNOSQHMJBRQN-SRVKXCTJSA-N Leu-Asp-His Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CC1=CN=CN1)C(=O)O)N ZDSNOSQHMJBRQN-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 3
- CRNNMTHBMRFQNG-GUBZILKMSA-N Lys-Glu-Cys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N CRNNMTHBMRFQNG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- YPLVCBKEPJPBDQ-MELADBBJSA-N Lys-Leu-Pro Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCCCN)N YPLVCBKEPJPBDQ-MELADBBJSA-N 0.000 description 3
- RVKIPWVMZANZLI-ZFWWWQNUSA-N Lys-Trp Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)C(O)=O)=CNC2=C1 RVKIPWVMZANZLI-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 3
- YGNUDKAPJARTEM-GUBZILKMSA-N Met-Val-Ala Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O YGNUDKAPJARTEM-GUBZILKMSA-N 0.000 description 3
- 108010087066 N2-tryptophyllysine Proteins 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- SKICPQLTOXGWGO-GARJFASQSA-N Pro-Gln-Pro Chemical compound C1C[C@H](NC1)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)O SKICPQLTOXGWGO-GARJFASQSA-N 0.000 description 3
- DWGFLKQSGRUQTI-IHRRRGAJSA-N Pro-Lys-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 DWGFLKQSGRUQTI-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 3
- OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N Ser-Lys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(O)=O OWCVUSJMEBGMOK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 3
- ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N Streptozotocin Natural products O=NN(C)C(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O ZSJLQEPLLKMAKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 3
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 3
- 108010028295 histidylhistidine Proteins 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 201000001421 hyperglycemia Diseases 0.000 description 3
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 3
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 3
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 3
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 2
- IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N Arg-Arg-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(O)=O IASNWHAGGYTEKX-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- HJAICMSAKODKRF-GUBZILKMSA-N Arg-Cys-Arg Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(O)=O HJAICMSAKODKRF-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- YUGFLWBWAJFGKY-BQBZGAKWSA-N Arg-Cys-Gly Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O YUGFLWBWAJFGKY-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- 101100505161 Caenorhabditis elegans mel-32 gene Proteins 0.000 description 2
- DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N Cys-Gly-Gly Chemical compound SC[C@H](N)C(=O)NCC(=O)NCC(O)=O DZLQXIFVQFTFJY-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- DQUWSUWXPWGTQT-DCAQKATOSA-N Cys-Pro-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](N)CS DQUWSUWXPWGTQT-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- IWVNIQXKTIQXCT-SRVKXCTJSA-N Cys-Tyr-Asn Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CS)N)O IWVNIQXKTIQXCT-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N Glu-Leu-Asp Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N PJBVXVBTTFZPHJ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 2
- IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N Gly-Asp-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N IWAXHBCACVWNHT-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 2
- YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N Gly-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)CN YYPFZVIXAVDHIK-IUCAKERBSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 2
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 108091093037 Peptide nucleic acid Proteins 0.000 description 2
- FSPGBMWPNMRWDB-AVGNSLFASA-N Phe-Cys-Gln Chemical compound C1=CC=C(C=C1)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)N)C(=O)O)N FSPGBMWPNMRWDB-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- 102220492046 Phospholipid scramblase 1_H12A_mutation Human genes 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 2
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 2
- RFBKULCUBJAQFT-BIIVOSGPSA-N Ser-Cys-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CO)N)C(=O)O RFBKULCUBJAQFT-BIIVOSGPSA-N 0.000 description 2
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 description 2
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N Val-Ala-Ser Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O AZSHAZJLOZQYAY-FXQIFTODSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N alpha-D-ara-dHexp Natural products OCC1OC(O)CC(O)C1O PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- VYXSBFYARXAAKO-WTKGSRSZSA-N chembl402140 Chemical compound Cl.C1=2C=C(C)C(NCC)=CC=2OC2=C\C(=N/CC)C(C)=CC2=C1C1=CC=CC=C1C(=O)OCC VYXSBFYARXAAKO-WTKGSRSZSA-N 0.000 description 2
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 2
- ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N coumarin Chemical compound C1=CC=C2OC(=O)C=CC2=C1 ZYGHJZDHTFUPRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 2
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 2
- 238000002866 fluorescence resonance energy transfer Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 2
- 108010026364 glycyl-glycyl-leucine Proteins 0.000 description 2
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010092114 histidylphenylalanine Proteins 0.000 description 2
- 238000010191 image analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 2
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 2
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- 229940024999 proteolytic enzymes for treatment of wounds and ulcers Drugs 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940043267 rhodamine b Drugs 0.000 description 2
- 102220042837 rs12944167 Human genes 0.000 description 2
- 102220210025 rs149016283 Human genes 0.000 description 2
- 102220046326 rs587782837 Human genes 0.000 description 2
- 102220278881 rs749263651 Human genes 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N (1r,4s,5e,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,16s,18r,19s,20r,21e,25s,26r,27s,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trio Polymers O([C@@H]1CC[C@@H](/C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)O[C@H]([C@H]2C)[C@H]1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](C[C@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-WMBHJXFZSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N (1s,4r,5z,5'r,6'r,7e,10s,11r,12s,14r,15s,18r,19r,20s,21e,26r,27s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers O([C@H]1CC[C@H](\C=C/C=C/C[C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)C(C)C(=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]2C)C1C)CC)[C@]12CC[C@@H](C)[C@@H](CC(C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-DJRUDOHVSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N (4Z,18Z,20Z)-22-ethyl-7,11,14,15-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',6,8,10,12,14,16,28,29-nonamethylspiro[2,26-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-4,18,20-triene-27,2'-oxane]-3,9,13-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)\C=C/C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)C\C=C/C=C\C(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-YNZHUHFTSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N (5e,5'r,7e,10s,11r,12s,14s,15r,16r,18r,19s,20r,21e,26r,29s)-4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-[(2s)-2-hydroxypropyl]-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers C([C@H](C)[C@@H](O)[C@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)/C=C/C(=O)OC([C@H]1C)[C@H]2C)\C=C\C=C\C(CC)CCC2OC21CC[C@@H](C)C(C[C@H](C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-VVXVDZGXSA-N 0.000 description 1
- BUOYTFVLNZIELF-UHFFFAOYSA-N 2-phenyl-1h-indole-4,6-dicarboximidamide Chemical compound N1C2=CC(C(=N)N)=CC(C(N)=N)=C2C=C1C1=CC=CC=C1 BUOYTFVLNZIELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 4',6-Diamino-2-phenylindol Chemical compound C1=CC(C(=N)N)=CC=C1C1=CC2=CC=C(C(N)=N)C=C2N1 FWBHETKCLVMNFS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COCMHKNAGZHBDZ-UHFFFAOYSA-N 4-carboxy-3-[3-(dimethylamino)-6-dimethylazaniumylidenexanthen-9-yl]benzoate Chemical compound C=12C=CC(=[N+](C)C)C=C2OC2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC(C([O-])=O)=CC=C1C(O)=O COCMHKNAGZHBDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-11,12,15,19-tetrahydroxy-6'-(2-hydroxypropyl)-5',10,12,14,16,18,20,26,29-nonamethylspiro[24,28-dioxabicyclo[23.3.1]nonacosa-5,7,21-triene-27,2'-oxane]-13,17,23-trione Polymers CC1C(C2C)OC(=O)C=CC(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)C(O)C(C)C(=O)C(C)(O)C(O)C(C)CC=CC=CC(CC)CCC2OC21CCC(C)C(CC(C)O)O2 MNULEGDCPYONBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000215068 Acacia senegal Species 0.000 description 1
- 206010000349 Acanthosis Diseases 0.000 description 1
- JDIQCVUDDFENPU-ZKWXMUAHSA-N Ala-His-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C)CC1=CNC=N1 JDIQCVUDDFENPU-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 1
- AOAKQKVICDWCLB-UWJYBYFXSA-N Ala-Tyr-Asn Chemical compound C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(C=C1)O)C(=O)N[C@@H](CC(=O)N)C(=O)O)N AOAKQKVICDWCLB-UWJYBYFXSA-N 0.000 description 1
- 239000012099 Alexa Fluor family Substances 0.000 description 1
- 101001007348 Arachis hypogaea Galactose-binding lectin Proteins 0.000 description 1
- RWWPBOUMKFBHAL-FXQIFTODSA-N Arg-Asn-Cys Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O RWWPBOUMKFBHAL-FXQIFTODSA-N 0.000 description 1
- OSASDIVHOSJVII-WDSKDSINSA-N Arg-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N OSASDIVHOSJVII-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- HZPSDHRYYIORKR-WHFBIAKZSA-N Asn-Ala-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O HZPSDHRYYIORKR-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- QQXOYLWJQUPXJU-WHFBIAKZSA-N Asp-Cys-Gly Chemical compound OC(=O)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O QQXOYLWJQUPXJU-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000180278 Copernicia prunifera Species 0.000 description 1
- 235000010919 Copernicia prunifera Nutrition 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 108010051219 Cre recombinase Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- 108010013369 Enteropeptidase Proteins 0.000 description 1
- 102100029727 Enteropeptidase Human genes 0.000 description 1
- 206010015866 Extravasation Diseases 0.000 description 1
- 108010074860 Factor Xa Proteins 0.000 description 1
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N Gln-Gln-Lys Chemical compound C(CCN)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)NC(=O)[C@H](CCC(=O)N)N MADFVRSKEIEZHZ-DCAQKATOSA-N 0.000 description 1
- JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Lys Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O JJKKWYQVHRUSDG-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001559542 Hippocampus hippocampus Species 0.000 description 1
- MWAJSVTZZOUOBU-IHRRRGAJSA-N His-Arg-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 MWAJSVTZZOUOBU-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- 101001060274 Homo sapiens Fibroblast growth factor 4 Proteins 0.000 description 1
- 108090000144 Human Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000003839 Human Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N Hydroxylamine Chemical compound ON AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N Leu-Lys-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O ZRHDPZAAWLXXIR-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000232 Lipid Bilayer Substances 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- JCFYLFOCALSNLQ-GUBZILKMSA-N Lys-Ala-Gln Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O JCFYLFOCALSNLQ-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N N-Vinyl-2-pyrrolidone Chemical compound C=CN1CCCC1=O WHNWPMSKXPGLAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N N-[3-oxo-3-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)propyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C(CCNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F)N1CC2=C(CC1)NN=N2 AFCARXCZXQIEQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028851 Necrosis Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 1
- 208000005775 Parakeratosis Diseases 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Ser Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O UIPXCLNLUUAMJU-JBDRJPRFSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150045565 Socs1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010041660 Splenomegaly Diseases 0.000 description 1
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 102000058018 Suppressor of Cytokine Signaling 1 Human genes 0.000 description 1
- 108700027336 Suppressor of Cytokine Signaling 1 Proteins 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SEFNTZYRPGBDCY-IHRRRGAJSA-N Tyr-Arg-Cys Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)N)O SEFNTZYRPGBDCY-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] Chemical compound [O--].[Al+3].[Al+3].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] YKTSYUJCYHOUJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000010933 acylation Effects 0.000 description 1
- 238000005917 acylation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 108010076324 alanyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 1
- 108010044940 alanylglutamine Proteins 0.000 description 1
- CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K aluminium tristearate Chemical compound [Al+3].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CEGOLXSVJUTHNZ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940063655 aluminum stearate Drugs 0.000 description 1
- 230000002491 angiogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003178 anti-diabetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L calcium hydrogenphosphate Chemical compound [Ca+2].OP([O-])([O-])=O FUFJGUQYACFECW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L calcium stearate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O CJZGTCYPCWQAJB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000008116 calcium stearate Substances 0.000 description 1
- 235000013539 calcium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 229940075614 colloidal silicon dioxide Drugs 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000008602 contraction Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 229960000956 coumarin Drugs 0.000 description 1
- 235000001671 coumarin Nutrition 0.000 description 1
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 229940124447 delivery agent Drugs 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 235000019700 dicalcium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000002900 effect on cell Effects 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 210000005175 epidermal keratinocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006718 epigenetic regulation Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000006539 extracellular acidification Effects 0.000 description 1
- 230000036251 extravasation Effects 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 238000007446 glucose tolerance test Methods 0.000 description 1
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 102000057231 human FGF4 Human genes 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011503 in vivo imaging Methods 0.000 description 1
- 210000003000 inclusion body Anatomy 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000010189 intracellular transport Effects 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 229960001375 lactose Drugs 0.000 description 1
- 108010034529 leucyl-lysine Proteins 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000034701 macropinocytosis Effects 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 210000002901 mesenchymal stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930191479 oligomycin Natural products 0.000 description 1
- MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N oligomycin A Polymers O([C@H]1CC[C@H](/C=C/C=C/C[C@@H](C)[C@H](O)[C@@](C)(O)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)/C=C/C(=O)O[C@@H]([C@@H]2C)[C@@H]1C)CC)[C@@]12CC[C@H](C)[C@H](C[C@@H](C)O)O1 MNULEGDCPYONBU-AWJDAWNUSA-N 0.000 description 1
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 229940069328 povidone Drugs 0.000 description 1
- 235000019814 powdered cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003124 powdered cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006916 protein interaction Effects 0.000 description 1
- 230000029983 protein stabilization Effects 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 208000002815 pulmonary hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 102200163576 rs28929478 Human genes 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010048818 seryl-histidine Proteins 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 description 1
- 238000002603 single-photon emission computed tomography Methods 0.000 description 1
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 description 1
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 1
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 1
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine Chemical compound C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C([O-])=O ABZLKHKQJHEPAX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012049 topical pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000034512 ubiquitination Effects 0.000 description 1
- 238000010798 ubiquitination Methods 0.000 description 1
- 210000003606 umbilical vein Anatomy 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/06—Antipsoriatics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
- C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
- C07K2319/80—Fusion polypeptide containing a DNA binding domain, e.g. Lacl or Tet-repressor
- C07K2319/81—Fusion polypeptide containing a DNA binding domain, e.g. Lacl or Tet-repressor containing a Zn-finger domain for DNA binding
Abstract
본 발명은 세포 투과성 펩타이드 변이체들의 상처 치유 용도에 관한 것으로, 본 발명에 따른 세포 투과성 펩타이드들은 세포 투과, 세포 증식, 세포 이동 및 혈관 형성을 향상시키는 효과가 있어, 이를 세포 투과 전달, 상처 치유 및 혈관 신생 촉진 용도로 이용할 수 있으며, 특히, 난치성인 당뇨병성 상처 (궤양)의 치료 효과가 우수하므로, 상처 치유 용도로 유용하게 이용할 수 있다.
Description
본 발명은 세포 투과성 펩타이드 변이체들의 상처 치유 용도에 관한 것이다.
고등동물의 세포는 세포 안과 그 밖을 구분하는 세포막(plasma membrane)이 있으며, 세포 간의 물질이동을 철저하게 구분하는 역할을 한다. 세포막은 인지질 이중층(phospholipid bilayer)으로 구성되어 있으며, 이들 지질이중층(lipid bilayer)이 가지고 있는 소수성으로 인하여 대부분의 펩타이드, 단백질, 뉴클리오타이드, 리포좀 등이 세포 내로 이동하는 것은 거의 불가능하다. 따라서, 세포막은 펩타이드나 단백질, 혹은 화합믈 제제 약물이나 유전자 치료제를 세포 내로 이동시키는데 있어서 장애물 역할을 한다고 할 수 있다. 이를 극복하기 위하여, 양이온성 지질(cationic lipid) 혹은 PEI(polyethyleneimine)을 사용하거나, 바이러스성 벡터(viral vector) 또는 전기천공법(electroporation)을 사용하는 방법 등이 많이 사용되고 있다. 그러나, 이들 방법은 낮은 효율, 적용 가능한 세포의 제한, 세포 내의 독성 등으로 그 한계가 있다고 할 수 있다 (Lindsay MA (2002) Peptide-mediated cell delivery: application in protein target validation. Curr Opin Pharmacol 2: 587-594, Green I, Christison R, Voyce CJ, Bundell KR, Lindsay MA (2003) Protein transduction domains: are they delivering Trends Pharmacol Sci 24: 213-215). 또한, 질병의 발생 및 진행에 중요한 역할을 하는 주요단백질의 기능이 밝혀지면서 세포 내 질환 관련 단백질을 조절할 수 있는 물질로 저분자 화합물이 주요 약물로 이용되고 있으나, 넓은 면적의 단백질 간 상호작용 부위는 저분자 약물이 결합하여 표적단백질의 활성을 조절하기에는 한계가 있음이 알려져 있었다. 이를 극복하기 위하여, 단백질과 단백질간의 상호작용을 조절하기에 적합한 펩타이드나 단백질 기반의 약물 개발이 시도되고 있다. 세포 내 존재하는 표적단백질의 활성 조절을 목적으로 하는 단백질 약물의 성공적인 개발을 위해서는 단백질의 세포 내 전달 및 수송이 필수적으로 요구되는데, 일반적으로 단백질의 세포 내 수송은 어려운 것으로 알려져 있었다.
이러한 단점과 한계를 극복하기 위하여 단백질 전달 도메인(protein transduction domain, PTD), 즉 세포-투과 펩타이드(cell-penetrating peptide, CPP)를 사용하는 시도가 이루어지고 있다. CPP는 단백질 전달 도메인(protein transduction domain, PTD)이라고도 불린다. CPP는 translocatory protein의 일부분인데 대표적으로 손꼽히는 것이 인간 섬유아세포 성장인자(human fibroblast growth factor) 4의 signal sequence에 존재하는 소수성 부분(hydrophobic region)인 MTS(membrane translocating sequence)와 HIV의 viral protein 중의 하나인 Tat 단백질의 Tat-PTD(basic amino acid domain)를 들 수 있다 (Mann DA, Frankel AD (1991) Endocytosis and targeting of exogenous HIV-1 Tat protein. EMBO J 10: 1733-1739, Rojas M, Donahue JP, Tan Z, Lin YZ (1998) Genetic engineering of proteins with cell membrane permeability. Nat Biotechnol 16: 370-375).
하지만, MTS의 경우, 세포 내로 들어가는 효율이 매우 뛰어나 좋은 후보로 인정되고는 있지만, 아미노산 서열 대부분이 소수성을 띠는 소수성 도메인(hydrophobic domain)이기 때문에 생산을 위한 발현과정에서 불용체(inclusion body)가 생성될 가능성이 있으며 발현 및 정제를 위해 좀 더 복잡한 단계를 거쳐야 하는 단점이 있고 정제를 거친 단백질이더라도 보관 중에 소수성 작용(hydrophobic interaction)에 의해 단백질들이 응집(aggregation)되어 그 활성이 떨어질 수 있는 단점이 있다 (Jo D, Nashabi A, Doxsee C, Lin Q, Unutmaz D, Chen J, Ruley HE (2001) Epigenetic regulation of gene structure and function with a cell-permeable Cre recombinase. Nat Biotechnol 19:929-933, DiGiandomenico A, Wylezinski LS, Hawiger J (2009) Intracellular delivery of a cell-penetrating SOCS1 that targets IFN-gamma signaling. Sci Signal 2: ra37). 반면, 염기성 아미노산들이 주로 존재하는 Tat-PTD 같은 기본 도메인(basic domain) 같은 경우, 친수성이기 때문에 생산을 위한 발현과정에서 불용체가 형성될 가능성이 낮으며 세포질에서 비교적 쉬운 방법으로 정제가 가능하고 보관 과정에서도 그 활성을 상대적으로 오랜 기간 동안 유지시킬 수 있는 장점이 있다. 이 외에도 지금까지 수많은 PTD가 보고되고 있다 (Lindgren M, Langel U (2011) Classes and prediction of cell-penetrating peptides. Methods Mol Biol 683: 3-19).
이렇게 여러 개의 세포투과 펩타이드들을 찾아내고 그 서열들을 밝히는 연구가 세계적으로 활발히 진행되고 있고 Tat-PTD 계열과 MTS 계열 모두 직접 치료 목적의 세포투과 약물(drug)로 사용되고 있으나, 유전자 치료 등의 다른 치료 방법들과 비교하면 그 효과가 미미한 상황이다.
본 발명의 목적은 세포 투과성 펩타이드를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 세포 증식 및 이동 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 세포 투과 전달체를 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 조직 재생용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 혈관신생 촉진용 조성물을 제공하는 것이다.
또한, 본 발명의 목적은 상처 치유용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
아울러, 본 발명의 목적은 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 제공한다.
또한, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 세포 증식 및 이동 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 세포 투과 전달체를 제공한다.
또한, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 조직 재생용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 혈관 신생 촉진용 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 상처 치유용 약학적 조성물을 제공한다.
아울러, 본 발명은 세포 투과성 펩타이드를 포함하는 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 세포 투과성 펩타이드들은 세포 투과, 세포 증식, 세포 이동 및 혈관 형성을 향상시키는 효과가 있어, 이를 세포 투과 전달, 상처 치유 및 혈관 신생 촉진 용도로 이용할 수 있으며, 특히, 난치성인 당뇨병성 상처 (궤양)의 치료 효과가 우수하므로, 상처 치유 용도로 유용하게 이용할 수 있다.
도 1은 세포 침투 펩타이드 LPX의 구조를 나타낸 도이다.
도 2는 LPX101 펩타이드의 세포 투과 특성을 확인한 도이다.
도 3은 LPX102 및 LPX103 펩타이드의 세포 투과 특성을 확인한 도이다.
도 4는 LPX101 펩타이드의 세포 생장 및 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 5는 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 세포 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 6은 LPX101 펩타이드의 혈관 형성 효과를 확인한 도이다.
도 7은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의한 글루코스 흡수능 향상을 확인한 도이다.
도 8은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의해 향상된 글루코스 대사를 확인한 도이다.
도 9는 LPX101 펩타이드에 의한 당뇨병 모델 마우스의 상처 치유 효과를 확인한 도이다.
도 10은 LPX101 펩타이드에 의한 당뇨병성 상처 치유 효과를 조직학적으로 분석한 도이다.
도 11은 당뇨병성 상처에서 LPX101 펩타이드에 의한 재생된 피질의 리모델링 가속화를 확인한 도이다.
도 12는 STZ-유발 당뇨병 마우스 모델에서 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 상처 치유능 향상 효과를 확인한 도이다.
도 13은 당뇨병 마우스 모델 (db/db)에서 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 상처 재생 활성을 비교한 도이다.
도 14는 LPX 103 또는 EGF 처리된 당뇨병 마우스 모델에서 상처 치유 및 혈관 형성 효과를 조직학적으로 평가한 도이다.
도 15는 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의한 재-상피화의 조직학적 평가를 나타낸 도이다.
도 16은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드, 및 EGF의 병용 처리에 의한 효과를 확인한 도이다.
도 17은 당뇨병성 상처에서 재생 효과를 향상시키기위한 LPX 펩타이드들의 작용 방식을 요약한 도이다.
도 18은 LPX 펩타이드의 변이체들에 대한 아미노산 서열을 나타낸 도이다.
도 19는 LPX 펩타이드의 변이체들에 대한 아미노산 서열을 나타낸 도이다.
도 20은 본 발명의 LPX 펩타이드 변이체들의 서열을 나타낸 도이다.
도 21은 in-vitro 배양된 세포 내 펩타이드의 안정성, 세포의 이동 및 세포의 생장에 대한 LPX 펩타이드 변이체들 (CPP 영역 변이체들)의 효과를 나타낸 도이다.
도 22는 엔도솜 탈출을 위한 LPX 펩타이드 변이체 (His 택 추가 변이체)의 세포 내 펩타이드의 안정성, 세포의 이동 및 세포의 생장에 대한 효과를 확인한 도이다.
도 23은 LPX 펩타이드 변이체들 (RNA 결합 부위 및 징크 핑거 서열 변이)의 세포 내 안정성을 확인한 도이다.
도 24는 스크리닝된 LPX103 펩타이드의 잔기의 변이에 따른 안정화를 확인한 도이다.
도 25는 단백질 안정성에 대해 스크리닝된 LPX103 펩타이드의 변이체들의 세포 증식 및 이동에 대한 효과를 확인한 도이다.
도 26은 LPX 펩타이드의 변이에 따른 활성 변화를 모식도로 나타낸 도이다.
도 27은 생물학적 활성이 향상된 것으로 선별한 LPX105 펩타이드들을 나타낸 도이다.
도 28은 LPX105 펩타이드의 변이에 따른 세포 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 29는 LPX105 펩타이드의 변이에 따른, 당뇨병성 상처 치유 효과를 확인한 도이다(A: 당뇨병성 상처 구역 감소 확인, B: 8일차 상처 구역 감소 확인).
도 2는 LPX101 펩타이드의 세포 투과 특성을 확인한 도이다.
도 3은 LPX102 및 LPX103 펩타이드의 세포 투과 특성을 확인한 도이다.
도 4는 LPX101 펩타이드의 세포 생장 및 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 5는 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 세포 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 6은 LPX101 펩타이드의 혈관 형성 효과를 확인한 도이다.
도 7은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의한 글루코스 흡수능 향상을 확인한 도이다.
도 8은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의해 향상된 글루코스 대사를 확인한 도이다.
도 9는 LPX101 펩타이드에 의한 당뇨병 모델 마우스의 상처 치유 효과를 확인한 도이다.
도 10은 LPX101 펩타이드에 의한 당뇨병성 상처 치유 효과를 조직학적으로 분석한 도이다.
도 11은 당뇨병성 상처에서 LPX101 펩타이드에 의한 재생된 피질의 리모델링 가속화를 확인한 도이다.
도 12는 STZ-유발 당뇨병 마우스 모델에서 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 상처 치유능 향상 효과를 확인한 도이다.
도 13은 당뇨병 마우스 모델 (db/db)에서 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드의 상처 재생 활성을 비교한 도이다.
도 14는 LPX 103 또는 EGF 처리된 당뇨병 마우스 모델에서 상처 치유 및 혈관 형성 효과를 조직학적으로 평가한 도이다.
도 15는 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드에 의한 재-상피화의 조직학적 평가를 나타낸 도이다.
도 16은 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드, 및 EGF의 병용 처리에 의한 효과를 확인한 도이다.
도 17은 당뇨병성 상처에서 재생 효과를 향상시키기위한 LPX 펩타이드들의 작용 방식을 요약한 도이다.
도 18은 LPX 펩타이드의 변이체들에 대한 아미노산 서열을 나타낸 도이다.
도 19는 LPX 펩타이드의 변이체들에 대한 아미노산 서열을 나타낸 도이다.
도 20은 본 발명의 LPX 펩타이드 변이체들의 서열을 나타낸 도이다.
도 21은 in-vitro 배양된 세포 내 펩타이드의 안정성, 세포의 이동 및 세포의 생장에 대한 LPX 펩타이드 변이체들 (CPP 영역 변이체들)의 효과를 나타낸 도이다.
도 22는 엔도솜 탈출을 위한 LPX 펩타이드 변이체 (His 택 추가 변이체)의 세포 내 펩타이드의 안정성, 세포의 이동 및 세포의 생장에 대한 효과를 확인한 도이다.
도 23은 LPX 펩타이드 변이체들 (RNA 결합 부위 및 징크 핑거 서열 변이)의 세포 내 안정성을 확인한 도이다.
도 24는 스크리닝된 LPX103 펩타이드의 잔기의 변이에 따른 안정화를 확인한 도이다.
도 25는 단백질 안정성에 대해 스크리닝된 LPX103 펩타이드의 변이체들의 세포 증식 및 이동에 대한 효과를 확인한 도이다.
도 26은 LPX 펩타이드의 변이에 따른 활성 변화를 모식도로 나타낸 도이다.
도 27은 생물학적 활성이 향상된 것으로 선별한 LPX105 펩타이드들을 나타낸 도이다.
도 28은 LPX105 펩타이드의 변이에 따른 세포 이동 촉진 효과를 확인한 도이다.
도 29는 LPX105 펩타이드의 변이에 따른, 당뇨병성 상처 치유 효과를 확인한 도이다(A: 당뇨병성 상처 구역 감소 확인, B: 8일차 상처 구역 감소 확인).
이하, 본 발명의 구현예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않으며 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에서 사용된 모든 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 본원에 기술된 것들과 유사하거나 등가인 임의의 방법 및 재료가 본 발명을 테스트하기 위한 실행에서 사용될 수 있지만, 바람직한 재료 및 방법이 본원에서 기술된다.
본 명세서 전반을 통하여, 천연적으로 존재하는 아미노산에 대한 통상의 1문자 및 3문자 코드가 사용될 뿐만 아니라 Aib(α-아미노이소부티르산), Sar(N-methylglycine) 등과 같은 다른 아미노산에 대해 일반적으로 허용되는 3문자 코드가 사용된다. 또한 본 발명에서 약어로 언급된 아미노산은 하기와 같이 IUPAC-IUB 명명법에 따라 기재되었다:
알라닌: A, 아르기닌: R, 아스파라긴: N, 아스파르트산: D, 시스테인: C, 글루탐산: E, 글루타민: Q, 글리신: G, 히스티딘: H, 이소류신: I, 류신: L, 리신: K, 메티오닌: M, 페닐알라닌: F, 프롤린: P, 세린: S, 트레오닌: T, 트립토판: W, 티로신: Y 및 발린: V.
일 측면에서, 본 발명은 세포 투과성 도메인 및 징크 핑거 도메인을 포함하는 세포 투과성 펩타이드에 관한 것이다.
상기 징크 핑거 도메인은 일반식 1의 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
X1-X2-X3-X4-G-X5-L-D-X6-H-A-K-E-X7 (일반식 1, 서열번호 1)
상기 식에서,
X1은 C 또는 A이며;
X2는 Y 또는 R이고;
X3는 N, R 또는 D이며;
X4는 C 또는 A이고;
X5는 G 또는 E이며;
X6는 H 또는 A이고; 및
X7은 C 또는 A이다.
일 구현예에서, 상기 펩타이드는 제 1 징크 핑거일 수 있으며, X1은 C, X3는 N, X4는 C, X6는 H 및 X7은 C인 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, X2는 R 및 X5는 E인 경우 안정성이 향상될 수 있다.
일 구현예에서, 상기 펩타이드는 CYNCGGLDHHAKEC에서 안정성이 향상되도록 변형된 CRNCGELDHHAKEC일 수 있다.
일 구현예에서, 본 발명의 펩타이드는 하기 일반식 2의 아미노산 서열을 포함할 수 있다:
G-X8-R-C-X2-N-C-G-X5-L-D-H-H-A-K-E-C-K-X9 (일반식 2, 서열번호 2)
상기 식에서,
X8이 D 또는 R이며;
X2는 Y 또는 R이고;
X5는 G 또는 E이며; 및
X9이 L 또는 W이다.
일 구현예에서, 상기 일반식 2에서의 X8이 R이고, X5가 E이며, X9이 W이면 세포 내에서 안정성이 향상될 수 있다.
일 구현예에서, 상기 일반식 2의 펩타이드는 서열번호 3의 GDRCYNCGGLDHHAKECKL 펩타이드일 수 있으며, 여기서, D2R, C4A, Y5R, N6R, N6D, C7A, G9E, H12A, C17A 및 L19W의 변이가 있을 수 있고, 변이 D2R, Y5R, G9E, L19W는 안정성을 향상시키나, 변이 C4A, N6R, N6D, C7A, H12A 및 C17A는 안정성이 감소될 수 있다.
일 구현예에서, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드에서 X8, X5 및 X9은 안정성 잔기이며; 4번째 C, 7번째 C, 12번째 H 및 17번째 C는 징크 핑거이고; 3번째 R, X2 및 15번째 K는 친화성 잔기이며; 및 6번째 N은 RNA 결합 잔기일 수 있다.
일 구현예에서, N-말단(아미노 말단)에 서열번호 4의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 N-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다. 상기 서열번호 4의 아미노산은 CPP 도메인일 수 있으며, 이를 서열번호 5 또는 6으로 변경할 수 있다.
일 구현예에서, N-말단에 서열번호 5의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 N-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, N-말단에 서열번호 6의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 N-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, N-말단에 아미노산 E 또는 GSE를 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 N-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, N-말단에 히스택을 추가로 포함할 수 있으며, 히스 택은 6반복된 6XHis일 수 있고, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 N-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, C-말단(카르복시 말단)에 서열번호 7의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 C-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, C-말단에 서열번호 8의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 C-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다. 상기 서열번호 8의 아미노산 서열은 징크 핑거 (제 2 징크 핑거)일 수 있다.
일 구현예에서, C-말단에 서열번호 9의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 C-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, C-말단에 서열번호 10의 아미노산 서열을 추가로 포함할 수 있으며, 일반식 2 및 서열번호 2의 펩타이드의 C-말단에 추가되는 것이 더욱 바람직하다.
일 구현예에서, 상기 펩타이드는 생체 내의 단백질 절단 효소들로부터 보호하고 안정성을 증가시키기 위해서 펩타이드의 아미노 말단 및 카르복시 말단을 변형하거나 여러 유기단으로 보호시킬 수 있으며, 그 예로 C-말단이 아미드화된 것일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 펩타이드는 서열번호 37 내지 40 중 어느 하나의 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있다(LPX105 및 이의 변이체).
일 구현예에서, 상기 펩타이드는 서열번호 11의 아미노산 서열로 이루어진 LPX101, 서열번호 12의 아미노산 서열로 이루어진 LPX102, 서열번호 13의 아미노산 서열로 이루어진 LPX103 및 서열번호 14의 아미노산 서열로 이루어진 LPX104로 이루어진 군에서 1이상 선택된 펩타이드 변이체일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 LPX103 펩타이드 변이체는 서열번호 19, 서열번호 24, 서열번호 25, 서열번호 26, 서열번호 27, 서열번호 28, 서열번호 29, 서열번호 30, 서열번호 31, 서열번호 32, 서열번호 33, 서열번호 34, 서열번호 35 및 서열번호 36으로 이루어진 군에서 선택된 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 변이체일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 LPX104 펩타이드 변이체는, 서열번호 15, 서열번호 16, 서열번호 17, 서열번호 18, 서열번호 20, 서열번호 21, 서열번호 22 및 서열번호 23으로 이루어진 군에서 1이상 선택된 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드 변이체일 수 있다.
일 구현예에서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 37의 아미노산 서열로 이루어진 것일 수 있으며, 서열번호 38의 아미노산 서열, 서열번호 39의 아미노산 서열 및 서열번호 40의 아미노산 서열을 더 포함할 수 있다.
상술한 보호기는 생체 내의 단백질 절단효소의 공격으로부터 본 발명의 펩타이드를 보호하는 작용을 한다. 또한, 상기 변형된 펩타이드는 보호기로 인해 우수한 열안정성을 나타내며, 또한 산과 알칼리 등의 물리화학적 인자에 대한 안정성을 우수하다. 따라서, 본 발명의 펩타이드는 장기 보존성이 뛰어나게 변형될 수 있으므로, 의약품, 의약외품, 화장품 및 구강용품과 같은 장기간 저장이 요구되는 제품에 유리하게 적용될 수 있다.
상술한 아미노산의 변형(또는 변이 또는 돌연변이)은 본 발명의 펩타이드 안정성을 크게 개선하는 작용을 하고, 본 발명에서 언급되는 용어 "안정성"은 인 비보 안정성 뿐만 아니라, 저장 안정성(예컨대, 상온 저장 안정성)도 의미한다.
본 발명에서 '특정 서열번호로 구성되는 펩타이드'라고 기재되어 있다 하더라도, 해당 서열번호의 아미노산 서열로 이루어진 펩타이드와 동일 혹은 상응하는 활성을 가지는 경우라면 해당 서열번호의 아미노산 서열 앞뒤의 무의미한 서열 추가 또는 자연적으로 발생할 수 있는 돌연변이, 혹은 이의 잠재성 돌연변이 (silent mutation)를 제외하는 것이 아니며, 이러한 서열 추가 혹은 돌연변이를 가지는 경우에도 본원의 범위 내에 속하는 것이 자명하다.
본 발명에서, 펩타이드 서열의 변형은 일부 아미노산이 치환(substitution), 추가(addition), 제거(deletion) 및 수식(modification) 중 어느 하나의 방법 또는 이러한 방법들의 조합을 통하여 변형된 것일 수 있다. 이러한 변형은 L-형 혹은 D-형 아미노산, 및/또는 비-천연형 아미노산을 이용한 변형; 및/또는 천연형 서열을 개질, 예를 들어 측쇄 작용기의 변형, 분자 내 공유결합, 예컨대, 측쇄 간 고리 형성, 메틸화, 아실화, 유비퀴틴화, 인산화, 아미노헥산화, 바이오틴화 등과 같이 개질함으로써 변형하는 것을 모두 포함한다. 상기 치환되거나 추가되는 아미노산은 인간 단백질에서 통상적으로 관찰되는 20개의 아미노산뿐만 아니라 비정형 또는 비-자연적 발생 아미노산을 사용할 수 있다. 비정형 아미노산의 상업적 출처에는 Sigma-Aldrich, ChemPep과 Genzyme pharmaceuticals가 포함된다. 이러한 아미노산이 포함된 펩타이드와 정형적인 펩타이드 서열은 상업화된 펩타이드 합성 회사, 예를 들어 미국의 American peptide company나 Bachem, 또는 한국의 Anygen을 통해 합성 및 구매 가능하다.
본 발명에서 사용되는 용어 "펩타이드"는 펩타이드 결합에 의해 아미노산 잔기들이 서로 결합되어 형성된 선형의 분자를 의미한다. 본 발명의 펩타이드는 당업계에 공지된 화학적 합성 방법, 특히 고상 합성 기술 (solid-phase synthesis techniques)에 따라 제조될 수 있으며 (Merrifield, J. Amer. Chem. Soc. 85:2149-54(1963); Stewart, et al., Solid Phase Peptide Synthesis, 2nd. ed., Pierce Chem. Co.: Rockford, 111(1984)), 유전자 조작 기술에 의하여 생산할 수도 있다.
구체적으로, 본 발명의 펩타이드는 표준 합성 방법, 재조합 발현 시스템, 또는 임의의 다른 당해 분야의 방법에 의해 제조될 수 있다. 따라서, 본 발명에 따른 펩타이드들은, 예를 들어 하기를 포함하는 방법을 포함하는 다수의 방법으로 합성될 수 있다:
(a) 펩타이드를 고체상 또는 액체상 방법의 수단으로 단계적으로 또는 단편 조립에 의해 합성하고, 최종 펩타이드 생성물을 분리 및 정제하는 방법; 또는
(b) 펩타이드를 인코딩하는 핵산 작제물을 숙주세포 내에서 발현시키고, 발현 생성물을 숙주 세포 배양물로부터 회수하는 방법; 또는
(c) 펩타이드를 인코딩하는 핵산 작제물의 무세포 시험관 내 발현을 수행하고, 발현 생성물을 회수하는 방법; 또는
(a), (b) 및 (c)의 임의의 조합으로 펩타이드의 단편을 수득하고, 이어서 단편을 연결시켜 펩타이드를 수득하고, 당해 펩타이드를 회수하는 방법.
보다 구체적인 예로, 유전자 조작을 통하여, 융합파트너 및 본 발명의 펩타이드를 포함하는 융합 단백질을 코딩하는 융합 유전자를 제조하고 이를 숙주 세포에 형질전환시킨 후, 융합 단백질 형태로 발현하고, 단백질 분해효소 또는 화합물을 이용하여 융합 단백질로부터 본 발명의 펩타이드를 절단, 분리하여 원하는 본 발명의 펩타이드를 생산할 수 있다. 이를 위하여 예를 들어 Factor Xa나 엔테로키나제와 같은 단백질 분해효소, CNBr 또는 하이드록실 아민과 같은 화합물에 의해 절단될 수 있는 아미노산 잔기를 코딩하는 DNA 서열을 융합파트너와 본 발명의 펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 사이에 삽입할 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드, 상기 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터 또는 상기 벡터로 형질전환된 숙주세포에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 용어 "뉴클레오타이드"는 단일가닥 또는 이중가닥 형태로 존재하는 디옥시리보뉴클레오타이드 또는 리보뉴클레오타이드이며, 다르게 특별하게 언급되어 있지 않은 한 자연의 뉴클레오타이드의 유사체를 포함한다(Scheit, Nucleotide Analogs , John Wiley, New York(1980); Uhlman 및 Peyman, Chemical Reviews , 90:543-584(1990)).
본 발명에서 사용되는 용어 "벡터"는 숙주 세포에 삽입되어 숙주 세포 게놈과 재조합되고 이에 삽입되거나, 또는 에피좀으로서 자발적으로 복제하는 컴피턴트 뉴클레오티드 서열을 포함하는 임의의 핵산을 의미한다. 이러한 벡터로는 선형 핵산, 플라스미드, 파지미드, 코스미드, RNA 벡터, 바이러스 벡터 등이 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "숙주 세포"는 하나 이상의 DNA 또는 벡터가 도입되는 진핵 또는 원핵 세포를 가리키며, 특정 대상 세포만이 아니라 그 자손 혹은 잠재적 자손까지도 가리키는 것으로 이해되어야 한다. 어떤 변형이 돌연변이 혹은 환경적 영향 때문에 후속 세대에 일어날 수 있기 때문에 사실 상기 자손은 부모 세포와 동일하지는 않지만, 본 발명에서 사용된 바와 같이 상기 용어의 범주 내에서 여전히 포함된다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 포함하는 세포 증식 및 이동 촉진용 조성물에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 포함하는 세포 투과 전달체에 관한 것이다.
일 구현예에서, 본 발명의 세포 투과 전달체는 약물전달체로 사용될 수 있다.
통상적으로, 세포투과성 펩타이드는 목적 카르고와 비공유결합 또는 공유결합을 통해 연결되어 구성될 수 있다. 특히, 세포투과성 펩타이드와 목적 카르고가 화학적 교차-연결(cross-linking)을 통해 공유결합 컨쥬게이트를 형성하는 것이 바람직하다(Zatsepin, TS, et al. , Curr. Pharm. Des. , 11: 3639-3654(2005)). 따라서, 본 발명의 펩타이드는 목적 카르고와 공유결합 또는 비공유결합적으로 연결되어 세포 또는 조직 내로 전달시키는 기능을 할 수 있다.
본 발명에서 사용되는 용어 "목적 카르고(cargo of interest)"는 공유결합 또는 비공유결합을 통해 본 발명의 펩타이드와 컨쥬게이트를 이루어 세포 내로 운반되고자 하는 물질을 의미하며, 예를 들어, 화학물질, 나노입자, 펩타이드, 폴리펩타이드, 안티센스 올리고뉴클레오타이드, siRNA, shRNA, miRNA 및 PNA(peptide-nucleic acid)를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 목적 카르고가 폴리펩타이드인 경우, 본 발명의 약물전달체는 본 발명의 펩타이드를 포함하는 세포 투과 전달체와 목적 카르고 사이에 링커를 추가적으로 포함할 수 있다. 본 발명에서 이용되는 링커로는 당업계에 공지된 다양한 링커를 이용할 수 있다. 상기 링커는 본 발명 펩타이드의 활성, 즉 세포투과 활성을 최대화하기 위하여 특별하게 선택된 길이 및/또는 서열을 가질 수 있다. 구체적으로는, 상기 링커는 복수의 아미노산 잔기로 이루어진 링커이다. 아미노산 서열로 이루어진 링커는 Huston, et al., Methods in Enzymology , 203:46-88(1991), 및 Whitlow, et al.,Protein Eng. , 6:989(1993))에 개시되어 있으며, 상기 문헌은 본 발명에 참조로서 삽입된다.
본 발명의 약물전달체는 다양한 목적으로 이용될 수 있다. 구체적으로는, 본 발명의 약물전달체는 화학물질, 핵산, 나노입자, 등의 물질의 운반에 이용될 수 있으며, 상기 핵산은 안티센스 올리고뉴클레오타이드, siRNA, shRNA, miRNA 및 PNA를 포함하지만, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 본 발명의 약물전달체는 운반 대상의 카르고에 따라, 질병 또는 질환의 치료, 특정 세포의 검출, 질병(예컨대, 암)의 진단, 특정 세포의 위치 추적 및 인 비보 이미징 등에 이용될 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어 "핵산 분자"는 DNA(gDNA 및 cDNA) 그리고 RNA 분자를 포괄적으로 포함하는 의미를 갖으며, 핵산 분자에서 기본 구성 단위인 뉴클레오타이드는 자연의 뉴클레오타이드 뿐만 아니라, 당 또는 염기 부위가 변형된 유사체 (analogue)도 포함할 수 있다(Scheit, Nucleotide Analogs , John Wiley, New York(1980); Uhlman 및 Peyman, Chemical Reviews , 90:543-584(1990)).
또한, 본 발명의 약물전달체를 구성하는 펩타이드 및 목적 카르고에 대해 다양한 표지 물질이 이용될 수 있으며, 예를 들어 형광물질[예컨대, 플루오레신, FITC(fluoresein Isothiocyanate), 로다민 6G(rhodamine 6G), 로다민 B(rhodamine B), TAMRA(6-carboxy-tetramethyl-rhodamine), Cy-3, Cy-5, Texas Red, Alexa Fluor, DAPI(4,6-diamidino-2-phenylindole) 및 Coumarin], 형광 단백질(fluorescence protein; GFP, RFP, CFP, YFP, BFP, 루시퍼라제 또는 이의 변이체), 방사능동위원소(예컨대, C14, I125, P32 및 S35), 화학물질(예컨대, 바이오틴), 발광물질, 화학발광물질(chemiluminescent) 및 FRET(fluorescence resonance energy transfer)을 포함한다. 본 발명의 약물전달체가 방사능동위원소를 포함하여 구성되는 경우 (예컨대, 본 발명의 펩타이드 및 나노입자 구성), 단일 광자 방출 컴퓨터 단층촬영(SPECT, Single Photon Emission Computed Tomography) 또는 양전자 방출 단층촬영(PET, Positron Emission Tomography)에 적용되어 조직의 이미징에 이용될 수도 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 포함하는 조직 재생용 조성물에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 혈관신생 촉진용 조성물에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 상처 치유용 약학적 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 상처는 비-치유 외상성 상처, 방사선조사에 의한 조직의 파괴, 찰과상 (abrasion), 골괴저, 열상 (laceration), 결출상 (avulsion), 관통상 (penetrated wound), 총상 (gunshot wound), 절상, 동상, 타박상 (contusion or bruise), 피부궤양, 피부건조, 피부 각화증, 갈라짐, 터짐, 피부염, 피부 사상균증에 의한 통증, 수술상, 혈관질환 상처, 각막상처 등의 상처, 욕창, 와창, 당뇨성피부 미란과 같은 당뇨병 및 순환불량에 관련된 상태, 만성궤양, 성형수술 후 봉합부위, 척추상해성 상처, 부인과적 상처, 화학적 상처 또는 여드름일 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
일 구현예에서, 혈관 신생 의존성 질환은 허혈성 질환, 상처, 화상, 건선, 만성궤양, 심근경색, 협심증, 욕창, 탈모, 당뇨망막증, 미숙아 망막증, 연령관련 황반변성증, 녹내장, 당뇨성 궤양, 폐고혈압 및 뇌혈관성 치매로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
일 구현예에서, 허혈성 질환은 뇌허혈, 심장허혈, 당뇨병성 혈관심장질환, 심부전, 심근비대증, 망막허혈, 허혈성 대장염, 허혈성 급성 신부전증, 뇌졸중, 뇌외상 및 신생아 저산소증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 단백질 또는 이의 단편, 또는 이를 포함하는 조성물의 투여에 의해 혈관 신생 의존성 질환의 발생, 확산 및 재발을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명의 조성물의 치료적으로 유효한 양은 여러 요소, 예를 들면 투여방법, 목적부위, 환자의 상태 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 인체에 사용 시 투여량은 안전성 및 효율성을 함께 고려하여 적정량으로 결정되어야 한다. 동물실험을 통해 결정한 유효량으로부터 인간에 사용되는 양을 추정하는 것도 가능하다. 유효한 양의 결정시 고려할 이러한 사항은, 예를 들면 Hardman and Limbird, eds., Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th ed.(2001), Pergamon Press; 및 E.W. Martin ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th ed.(1990), Mack Publishing Co.에 기술되어있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효용량 수준은 환자의 건강상태, 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 배합 또는 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여, 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 본 발명에서 사용되는 용어, "약학적으로 허용가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
일 구현예에서, 상기 약학 조성물은 경구형 제형, 외용제, 좌제, 멸균 주사용액 및 분무제를 포함하는 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제형일 수 있다.
본 발명의 조성물은 또한 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 둘 이상의 이들의 조합을 포함할 수 있다. 약학적으로 허용 가능한 담체는 조성물을 생체 내 전달에 적합한 것이면 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면, Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc. 에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 덱스트로스 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 이용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한, 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주이용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 당 분야의 적정한 방법으로 또는 Remington's Pharmaceutical Science(Mack Publishing Company, Easton PA, 18th, 1990)에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화할 수 있다.
본 발명의 조성물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다. 본 발명의 조성물은, 조성물 총 중량에 대하여 상기 단백질을 0.0001 내지 10 중량 %로, 바람직하게는 0.001 내지 1 중량 %를 포함한다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제를 더 포함할 수 있으며, 이때 약제학적으로 허용 가능한 첨가제로는 전분, 젤라틴화 전분, 미결정셀룰로오스, 유당, 포비돈, 콜로이달실리콘디옥사이드, 인산수소칼슘, 락토스, 만니톨, 엿, 아라비아고무, 전호화전분, 옥수수전분, 분말셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 오파드라이, 전분글리콜산나트륨, 카르나우바 납, 합성규산알루미늄, 스테아린산, 스테아린산마그네슘, 스테아린산알루미늄, 스테아린산칼슘, 백당, 덱스트로스, 소르비톨 및 탈크 등이 사용될 수 있다. 본 발명에 따른 약제학적으로 허용 가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1 중량부 내지 90 중량부 포함되는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 비 경구 투여(예를 들어 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)하거나 경구 투여할 수 있으며, 투여량은 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률 및 질환의 중증도 등에 따라 그 범위가 다양하다. 본 발명에 따른 조성물의 일일 투여량은 0.0001 ~ 10 ㎎/㎖이며, 바람직하게는 0.0001 ~ 5 ㎎/㎖이며, 하루 일 회 내지 수회에 나누어 투여하는 것이 더욱 바람직하다.
본 발명의 조성물의 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 통상적으로 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 다양한 부형제, 예컨대 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 함께 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제 등이 포함된다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
실시예 1.
LPX 펩타이드의 특성 확인
1-1. 세포 투과 효과
신호 펩타이드, RNA 결합 친화성 잔기(affinity residue) 및 RNA 결합 잔기를 포함하며 (도 1) 2개의 징크 핑거 모티프를 가지는 3 가지의 구조의 침투성 펩타이드 LPX101 (서열번호 11), LPX102 (서열번호 12) 및 LPX103 (서열번호 13)의 세포 투과 효과를 확인하였다. 구체적으로, 세포투과 효율을 측정하기 위해 NIH3T3 세포주 및 mMSCs(마우스 중간엽 줄기세포)에 Keplan group에서 사용한 Heparin & Trypsin washing method [Kaplan IM, Wadia JS, Dowdy SF (2005) Cationic TAT peptide transduction domain enters cells by macropinocytosis. J Controlled release 102: 247-253]를 적용하여 세포막 표면에 붙어 있을 수도 있는 각 펩타이드들을 없앴다. 그 후, LPX101 (20 μg/ml), LPX103 및 LPX102 (0, 0.1, 1, 2, 4 μg/ml) 펩타이드들을 각각 LifeTein(USA)에서 FITC를 붙인 형태로 합성한 뒤, 각 세포를 키우는 배지에 1μM의 농도로 각 펩타이드들을 넣고 1시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 그 후, PBS로 세포를 3번 세척하고 트립신(Trypsin)으로 세포를 떼어내어 FACS 분석을 수행하였다. 또한, 각각의 펩타이드가 실제로 세포 내의 핵 내 또는 세포질 내에 존재하는지를 펩타이드 처리 18시간 후에 공초점 현미경으로 확인하고, 막 결합에 대해 PKH로 표지하였다.
그 결과, LPX101의 경우 2μM 및 5μM 농도 모두에서 높은 세포 투과율을 나타냈으며, 대부분의 LPX101가 세포질 내에 존재하고 있음을 확인할 수 있었다 (도 2). 또한, LPX102 및 LPX103 모두 2μM 이상의 농도에서 LPX101 (2μM)과 유사한 정도로 높은 세포 투과율과 함께 유사한 세포 내 잔존을 확인할 수 있었다 (도 3).
1-2. 세포 생장 및 이동 촉진 효과
LPX101 펩타이드가 세포 생장에 미치는 영향을 NIH3T3 세포주에서 확인하였으며, LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드가 세포 이동에 미치는 영향을 당뇨병 세포주인 DHEK (Diabetic human epidermal keratinocyte)에서 확인하였다. 구체적으로, mMSC 또는 NIH3T3 세포에 LPX101 펩타이드를 처리하고 1시간 동안 배양한 후 세척하였다. 처리 3일 후 세포의 숫자를 측정하고 대조군 대비 상대적 증식 비율을 %로 계산함으로써 LPX 처리에 의한 세포 성장의 % 증가를 확인하였다 (n = 3). 또한, 세포 이동 효과를 확인하기 위해, DHEK 세포에 LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드를 각각 처리하고, 1시간 동안 배양한 후 세척하였다. 이 후 스크래치된 경계를 가로 지르는 세포의 이동을 처리 후 72 시간에 측정하였다. 스크래치 라인을 가로 질러 이동한 세포의 수는 ImageJ 를 사용한 이미지 분석으로 측정하였다.
그 결과, LPX101 펩타이드는 2μM 및 5μM 농도 모두에서 세포 생장을 촉진시켰고, DHEK 세포의 이동을 촉진시키는 것으로 나타났다 (도 4). 또한, LPX102 및 LPX103 펩타이드는 더 낮은 농도에서 LPX101와 유사한 정도로 세포의 이동을 촉진시키는 것으로 나타났다 (도 5).
1-3. 혈관 형성 촉진 효과
Huvec(Human umbilical vein endothelial cells)를 사이토카인-없는 마트리젤에 분주하고 LPX101를 하루 동안 처리하였다 (n=3, 1 expt). 그 후 19일 뒤에 혈관 형성을 현미경으로 확인하고, 결절(nodules)의 수, 혈관 내 연접(junctions)의 수 및 마스터 세그먼트(master segment)의 수를 포함하는 혈관 형성 변수(parameter)를 정량하였다.
그 결과, 내피 세포는 LPX101 펩타이드 처리에 의해 보다 성숙한 모세 혈관고리들을 형성하는 것으로 나타났다 (도 6).
실시예 2. LPX 펩타이드의 항-당뇨 효과 확인
2-1. 글루코스 흡수능 향상 효과
인간 피부 섬유아세포주 HDF(Human dermal fibroblasts) 및 당뇨병 세포주 DHEK를 글루코스가 없는 배지에서 24시간 동안 배양한 뒤 2μM(20㎍/ml)의 LPX101, 1μM의 LPX102 또는 1μM의 LPX103을 18시간 동안 처리한 후, 2DG (2-deoxyglucose)를 처리하였다. 흡수된 글루코스의 양을 luminiscemce kit (promega)로 반응시킨 뒤 Spectra MaxL 장비를 사용하여 470nm에서 측정함으로써 상대적인 글루코스 흡수량을 측정하였다 (평균 SEM, n=3, *;p<0.05, **: p<0.01).
그 결과, LPX 펩타이드들은 당뇨병 세포주를 포함한 여러 포유동물 세포에서 모두 글루코스 흡수를 향상시키는 것으로 나타났다 (도 7).
2-2. 해당(glycolysis) 향상 효과
NIH3T3 세포를 글루코스-없는 배지에서 1 일 동안 배양한 뒤 글루코스, 올리고 마이신 및 2-DG를 순차적으로 처리하고 XF(Seahorse extrqacellular flux) 분석기를 이용하여 락테이트 생산의 측정으로서 ECAR(extracellular acidification rate)를 측정하고, LPX 펩타이드가 처리된 세포에서 ECAR의 정량 및 프로파일을 확인하였다 (평균 SEM n = 3, *; p <0.05).
그 결과, LPX101, LPX102 및 LPX103 펩타이드들은 글루코스 대사 (해당)를 촉진하는 것으로 나타났다 (도 8).
2-4. 당뇨병성 상처 치유 효과
2-4-1. 당뇨병성 상처 치유 효과 확인
야생형(WT) 마우스 및 당뇨병 모델 마우스 (db/db) (각각 n = 14)의 피부를 8mm 직경의 펀처로 펀칭하고 14일 동안 매일 LPX101 (2mg/ml, 20ul) 또는 PBS를 처리하고 상처 드레싱을 실시하였다. 상처 치유 효과는 초기 상처 영역 및 재-상피화 영역을 ImageJ 를 사용하여 분석하여 확인하였다 (평균 SEM n = 3, *; p <0.05). 또한, LPX101가 처리된 상처에서의 상처 치유 효과를 조직학적으로 평가하였다. 구체적으로, 당뇨병 마우스 (db/db)를 상처 유도 7일 및 14일 후 H/E 또는 트리 크롬으로 염색한 뒤 현미경으로 확인하고, ImageJ 를 이용하여 재-상피화 및 과립화 조직을 정량하였다 (n=3, ***;p<0.001). 아울러, db/db 마우스의 상처에 LPX101 처리하고 14일 후의 조직 표피를 조직학적으로 분석하였다.
그 결과, LPX101 펩타이드는 WT 마우스의 상처 치유를 가속화시켰으며, db/db 마우스 모델에서 당뇨병성 상처의 치유를 현저히 더 가속화시키는 것으로 나타났다 (도 9). 또한, LPX101 펩타이드의 처리로 인해 당뇨병성 마우스 모델에 유도된 상처가 7일차 (치유 과정의 중간)에 과립화 조직의 조기 형성을 유발하고, 14일차 (치유 과정의 끝)에 과립화 조직의 조기 수축 (리모델링)을 유발하는 것으로 나타났다 (도 10). 아울러, 14일차의 표피를 조직학적으로 분석한 결과, LPX101 처리에 의해 과각화증(hyperkeratosis), 부전각화증(parakeratosis) 및 가시세포증(acanthosis)이 조기에 감소한 것으로 나타났으며, 재생된 상처 상피의 리모델링이 가속화되었다 (도 11).
2-4-2. STZ-유도 당뇨병 마우스 모델에서 상처 치유 효과
STZ-유도 당뇨병 마우스 모델에서 LPX101, LPX102 및 LPX103의 상처 치유 효과를 확인하였다. 구체적으로, 마우스에 STZ(streptozotocin)를 5일 동안 주사하여 당뇨병을 유발하였으며, 이로 인해 고혈당증이 발생하였다. 이 후, 도 12A에 나타낸 스캐줄로 PBS (음성 대조군), EGF (양성 대조군) 50μg/ml, LPX101 2mg/ml(20μl), LPX102 및 LPX103 (2mg/ml(20μl))을 각각 처리한 후 이미지, 재상피화 및 당뇨병 표현형(고혈당증 및 포도당 내성 검사 IPGTT(impaired glucose tolerance test))을 통해 당뇨병이 유발된 마우스 모델에서의 상처 치유 효과를 확인하였다 (각 군당 n=10, *; p<0.05). 또한, LPX 펩타이드들의 당뇨병 마우스 모델에 대한 재생 활성을 비교하기 위해, 초기 상처 영역에 대한 % 비-상피화 영역에 의해 측정된 상처 치유 동역학 (각 그룹에 대해 n = 8), 및 초기 상처 부위에 대한 재 상피화 면적의 %로 분석된 재-상피화의 정량화를 확인하였다.
그 결과, LPX 펩타이드들은 모두 STZ에 의해 유도된 당뇨병성 상처 모델 (명백한 고혈당증인 마우스 선별)에서 EGF보다도 상처 치유 효과가 향상된 것으로 나타났으며, 특히, LPX102 및 LPX103는 LPX101보다 더 우수한 효과를 나타냈다 (도 12). 또한, 상처 치유 동역학 및 재-상피화를 정량한 결과에서도 LPX101보다 LPX102 및 LPX103가 db/db 마우스 모델에서 당뇨병성 상처 치유 효과가 우수한 것으로 나타났다 (도 13).
2-4-3. 혈관 형성 촉진을 통한 당뇨병성 상처 치유 효과
당뇨병성 궤양은 혈관 신생 장애 및 허혈성 괴사로 인한 혈관 공급 부족 때문에 치료가 어렵기 때문에, LPX 펩타이드가 당뇨병성 상처 치유에서 혈관 형성에 기여하는지를 확인하였다. 구체적으로, 당뇨병 모델 마우스 (db/db)에 상처를 낸 뒤, LPX 103 또는 EGF를 매일 1회씩 처리하고 상처 발생 7 일차에 혈관 신생의 회복에 대해 분석하였으며, 조직 내 적혈구의 혈관 외 유출을 시각화하기 위해 각 그룹의 상처 및 입구 (적색 점선 박스)를 확대하여 이미지를 확인하였다.
그 결과, LPX103을 처리한 군은 EGF를 처리한 군보다 더욱 성숙한 모세혈관 형성을 나타냈으며, 더 적은 출혈(hemorrhage) (RBC의 혈관 외 유출)을 형성하였다 (도 14).
2-4-4. LPX 펩타이드에 의한 재-상피화의 조직학적 평가
LPX 펩타이드 101, 102 및 103에 의한 당뇨병 마우스의 상처 재-상피화를 조직학적으로 평가하기 위해, 각각의 LPX에 의해 치료 된 당뇨병 마우스 (db/db) 상처 조직을 초기 손상 후 10일차에 H/E 염색하여 현미경 (50X 및 100x)으로 확인하였다.
그 결과, 당뇨병성 상처의 재-상피화를 LPX 펩타이드 101, 102 및 103 모두가 현저히 향상시키는 것으로 나타났다 (도 15).
2-4-5. 병용 투여
LPX 펩타이드와 EGF와의 병용 처리에 의한 당뇨병성 상처 치유 효과를 확인하였다. 구체적으로, 당뇨병 마우스 모델 (db/db)을 8mm 직경으로 펀칭하여 상처를 내고 LPX 펩타이드 (101, 102 또는 103) 및/또는 EGF의 조합으로 도 15A에 나타낸 스캐줄로 처리하고, 이의 이미지를 현미경으로 관찰하였으며, 초기 상처 발생 후 재-상피화에 대한 효과를 확인하였다. 또한,
그 결과, 각각의 LPX101, LPX102 및 LPX103은 모두 EGF와의 병용 처리시 당뇨병성 상처 치유 효과가 향상되는 것으로 나타났다 (도 16).
이를 통해, LPX 펩타이드들이 기존에 치료가 어려웠던 당뇨병성 상처 (궤양)의 재생을 다층적으로 향상시키는 것을 알 수 있었다 (도 17).
실시예 3. LPX 펩타이드의 변형에 따른 활성 확인
3-1. 펩타이드 변이체 제작
상기 LPX 펩타이드들의 다양한 변이체들을 도 18과 같이 제작하였다. 구체적으로, 도 19의 LPX101의 구조에서 다양한 변이 (CPP 영역의 치환, RNA 결합 부분 및 징크 핑거 구조의 아미노산 변이, 및 히스택 추가)를 부가하여 다양한 컨스트럭트 (101 포함 26가지)를 제작하였다 (도 20). 추가로, LPX101, LPX102, LPX103 및 LPX104 (서열번호 14)의 NIH3T3 세포에 대한 세포 이동 효과를 비교한 결과 하기 표 1과 같이 서로 유사한 수준인 것으로 나타났다.
3-2. CPP 영역 치환에 따른 활성 변화 확인
CPP 영역 서열의 치환에 따른 생물학적 활성 변화를 확인하기 위해, 도 21A와 같이 징크 핑거 2 영역 중 RNA 결합 위치를 포함하는 서열번호 7을 포함하는 LPX104 (#4)에서 CPP 영역을 HIV의 TAT 또는 Arg 반복 (R9) 서열로 치환한 뒤 (각각 TAT-104 및 R9-104) NIH3T3 세포에 대한, 세포 투과 효과, 세포 투과 24시간 후의 펩타이드의 안정성, 세포 이동 효과 및 세포 생장 효과를 비교하였다.
그 결과, LPX 펩타이드에서 CPP 영역의 TAT 또는 Arg (9) 잔기로의 치환은 세포-침투, 세포 증식 및 세포 이동에 대해서는 원래의 LPX104와 유사한 효과를 나타냈으나 (도 21B), 펩타이드의 안정성은 기존의 LPX104에 비해 현저히 높게 나타났다 (도 21C).
3-3. HIS 택 삽입에 따른 활성 변화 확인
엔도솜 탈출을 통한 안정성이 향상된 돌연변이를 선별하기 위해, 도 22A와 같이 LPX 펩타이드의 CPP 영역의 N-말단에 HIS 태그가 반복된 서열 (6XHis)을 추가하고 (LPH103 또는 LPX104) 이의 세포 침투 후 24 시간 후의 안정성, 세포 이동 촉진 효과 및 세포 생장 촉진 효과를 비교하였다.
그 결과, LPX 펩타이드에 6XHis 태그를 추가하면 엔도솜 탈출을 도와 세포 내 안정성이 현저히 증가되는 것으로 나타났다 (도 22B). 또한, 세포 증식 및 세포 이동 효과도 증가시키는 것으로 나타났다 (도 22C 내지 도22D).
3-4. RNA 결합 영역 및 징크핑거 영역 변이에 따른 활성 변화 확인
RNA 결합 영역 및 징크 핑거 영역에서의 변이를 가진 변이체들의 단백질 안정성을 확인하였다. 구체적으로, 세포 이동시 RNA 결합을 위한 아미노산 잔기가 변이된 LPX103 변이체들을 각각 NIH3T3 세포에 1 일 동안 처리하고, 분자 모델링 프로그램에 기초하여 각 펩타이드의 세포 내 안정화 효과를 72 시간 후에 분석하였으며, 각 아미노산 잔기의 돌연변이 에너지를 확인하였으며, 치환으로 <-1 Kcal/mol를 야기할 수 있는 변이체들을 펩타이드의 안정성 및 활성을 증가시킬 수 있는 잠재적 돌연변이로서 선택하였다 (도 23 및 24). 선택한 변이체들의 세포 증식 및 세포 이동에 대한 효과를 NIH3T3 세포에서 확인하였으며(도 25), 이를 통해, 세포 내 펩타이드의 안정성을 향상시키거나 감소시키는 RNA 결합 영역 및 징크핑거 영역 상의 변이들을 확인할 수 있었다 (도 26). 이에, 안정성과 생물학적 활성이 높은 것으로 확인된 LPX103, LPH103 및 LPS1O3을 선정하였다.
상기 실시예들을 통해, LPX 펩타이드의 생물학적 활성을 유사하게 유지하거나 향상시킬 수 있는 잔기의 잠재적 치환들은 하기와 같다:
1) N-말단의 히스티딘 반복 서열 추가는 안정성 향상;
2) CPP의 TAT 또는 R9으로의 치환은 동등한 효과;
3) 단백질의 안정화를 야기하는 잔기 변이 (돌연변이 에너지<-1Kcal/mole)들은 D16R, Y19R, N20R, G23E, L33E 및 L33W이다 (도 26 참조); 및
4) 다른 카테고리 유래 잔기의 임의의 조합.
또한, 생물학적 활성의 감소를 야기할 수 있는 하기의 잔기들은 LPX 펩타이드 변이체들에서 보존되어야 한다:
1) 징크 핑거 모티프의 18C, 21C, 26H 및 31C (서열번호 11의 LPX101 기준); 및
2) RNA 결합 영역의 20N (서열번호 11의 LPX101 기준).
이를 통해, LPX 펩타이드의 안정성 및 생물학적 활성이 동등하거나 증가하기 때문에 대체(치환) 또는 추가될 수 있는 아미노산 잔기와, 안정성 및 생물학적 활성을 감소시키기 때문에 보존되어야할 잔기들을 확인할 수 있었다.
실시예 4. LPX105 펩타이드의 변형에 따른 활성 확인
4-1. LPX105 펩타이드 변이체 제작
상기 실시예 3에 기재된 방법을 이용하여, LPX105 변이체를 제작하였다. 구체적으로 서열번호 37의 LPX105의 징크핑거의 영역 변이 및 히스티딘택(Histidine tag) 삽입에 따른 효과를 확인하고자, LPX105의 징크핑거 영역 변이와, 히스택을 삽입하여, LPS105(서열번호 38), LPH105(서열번호 39) 및 LPHS105(서열번호 40)을 제작하였다(도 27).
4-2. LPX105 변이체의 세포이동 촉진 확인
상기 실시예 1-2에 기재된 방법을 이용하여, LPX105, LPH105 및 LPHS105의 세포이동 촉진을 확인하였다. 구체적으로 세포 이동 효과를 확인하기 위해, 섬유아세포인 3T3 세포에 LPX105, LPH105 및 LPHS105 펩타이드를 각각 처리하고, 1시간 동안 배양한 후 세척하였다. 이 후 스크래치된 경계를 가로 지르는 세포의 이동을 처리 후 72 시간에 측정하였다. 스크래치 라인을 가로 질러 이동한 세포의 수는 ImageJ를 사용한 이미지 분석으로 측정하였다.
그 결과, 대조군인 PBS와 비교하여, LPX105는 세포 이동을 유의적으로 촉진시키는 것을 확인하였으며, LPX105의 변이체인 LPH105 및 LPHS105가 LPX105보다 세포이동을 증가시키는 것을 확인하였다(도 28).
4-3. LPX105 변이체의 당뇨병성 상처 치유 효과
상기 실시예 2-4에 기재된 방법을 이용하여, LPX105, LPH105 및 LPHS105의 당뇨병성 상처 치유 효과를 평가하였다. 상세하게는, 당뇨병 모델 마우스 (db/db) (각각 n = 14)의 피부를 8mm 직경의 펀처로 펀칭하고 10일 동안 매일 LPX105, LPH105 및 LPHS105 (3 μg) 또는 PBS를 처리하고 상처 드레싱을 실시하였다. 상처 치유 효과는 초기 상처 영역 및 재-상피화 영역을 ImageJ를 사용하여 분석하여 확인하였다 (평균 SEM n = 3, *; p <0.05).
그 결과, 대조군인 PBS와 비교하여, LPX105가 db/db 마우스 모델에서 당뇨병성 상처의 치유를 더 가속화시키는 것으로 나타났다. 또한 LPX105 변이체인 LPH105 및 LPHS105가 LPX105보다 더욱 현저하게 당뇨병성 상처의 치유를 가속화 시키는 것을 확인하였다(도 29).
<110> Stem Meditech Co., Ltd.
<120> CELL PENETRATING PEPTIDE VARIANTS AND USES THEROF
<130> PN2104-160
<160> 40
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF1
<400> 1
Xaa Xaa Xaa Xaa Gly Xaa Leu Asp Xaa His Ala Lys Glu Xaa
1 5 10
<210> 2
<211> 16
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 2XR, 2XD, 4XY, 4XR, 9XG, 9XE, 19XL or 9XW
<400> 2
Gly Xaa Arg Cys Xaa Asn Cys Gly Xaa Leu Asp His His Ala Lys Glu
1 5 10 15
<210> 3
<211> 19
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF1 derivative
<400> 3
Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu
1 5 10 15
Cys Lys Leu
<210> 4
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> CPP region
<400> 4
Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys
1 5 10
<210> 5
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TAT
<400> 5
Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg
1 5
<210> 6
<211> 9
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> R9
<400> 6
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg
1 5
<210> 7
<211> 8
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF1 derivative
<400> 7
Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
1 5
<210> 8
<211> 14
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF2
<400> 8
Cys His Phe Cys Gln Ser Ile Ser His Met Val Ala Ser Cys
1 5 10
<210> 9
<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF2 derivative
<400> 9
Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His Phe Cys Gln Ser Ile Ser His Met
1 5 10 15
Val Ala Ser Cys Pro Leu
20
<210> 10
<211> 27
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> ZF2 derivative2
<400> 10
Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His Phe Cys Gln Ser Ile Ser His Met
1 5 10 15
Val Ala Ser Cys Pro Leu Lys Ala Gln Gln Lys
20 25
<210> 11
<211> 60
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPX101
<400> 11
Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly Asp
1 5 10 15
Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys Lys
20 25 30
Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His Phe Cys Gln Ser Ile Ser His
35 40 45
Met Val Ala Ser Cys Pro Leu Lys Ala Gln Gln Lys
50 55 60
<210> 12
<211> 58
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPX102
<400> 12
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His Phe Cys Gln Ser
35 40 45
Ile Ser His Met Val Ala Ser Cys Pro Leu
50 55
<210> 13
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPX103
<400> 13
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu
35
<210> 14
<211> 42
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPX104
<400> 14
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40
<210> 15
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> TAT104
<400> 15
Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys
1 5 10 15
Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Lys Cys His
35
<210> 16
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> R9-104
<400> 16
Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys
1 5 10 15
Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro
20 25 30
Lys Lys Cys His
35
<210> 17
<211> 42
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HTAT-104
<400> 17
His His His His His His Arg Lys Lys Arg Arg Gln Arg Arg Arg Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40
<210> 18
<211> 42
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HR9-104
<400> 18
His His His His His His Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Arg Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40
<210> 19
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPH-103
<400> 19
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu
35
<210> 20
<211> 47
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-104
<400> 20
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40 45
<210> 21
<211> 47
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-104-1
<400> 21
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Arg Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40 45
<210> 22
<211> 47
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-104-2
<400> 22
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Arg Asn Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40 45
<210> 23
<211> 47
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> H-104-3
<400> 23
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Arg Arg Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu Pro Pro Gln Pro Lys Lys Cys His
35 40 45
<210> 24
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-A1
<400> 24
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Arg Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu
<210> 25
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-A2
<400> 25
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Arg Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu
<210> 26
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-A3
<400> 26
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Arg Arg Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu
<210> 27
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-S1
<400> 27
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Arg Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu
<210> 28
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPS-103
<400> 28
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Glu Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Leu
<210> 29
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-S1 #19
<400> 29
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Trp
<210> 30
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-AS1
<400> 30
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Arg Arg Cys Arg Arg Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Trp
<210> 31
<211> 34
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-AS1 #21
<400> 31
Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly
1 5 10 15
Arg Arg Cys Arg Arg Cys Gly Glu Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys
20 25 30
Lys Trp
<210> 32
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-N1
<400> 32
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Ala Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu
35
<210> 33
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-N2
<400> 33
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Ala Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu
35
<210> 34
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-N3
<400> 34
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp Ala His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu
35
<210> 35
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-N4
<400> 35
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Ala Lys Leu
35
<210> 36
<211> 36
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 103-N5
<400> 36
Gly Ser Glu Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser
1 5 10 15
Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asp Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys
20 25 30
Glu Cys Lys Leu
35
<210> 37
<211> 33
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPX105
<400> 37
Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly Asp
1 5 10 15
Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys Lys
20 25 30
Leu
<210> 38
<211> 33
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPS105
<400> 38
Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys Arg Arg Ser Lys Gly Asp
1 5 10 15
Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Glu Leu Asp His His Ala Lys Glu Cys Lys
20 25 30
Leu
<210> 39
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPH105
<400> 39
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Gly Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu
35
<210> 40
<211> 39
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> LPHS105
<400> 40
His His His His His His Arg Arg Pro Lys Gly Lys Ser Met Gln Lys
1 5 10 15
Arg Arg Ser Lys Gly Asp Arg Cys Tyr Asn Cys Gly Glu Leu Asp His
20 25 30
His Ala Lys Glu Cys Lys Leu
35
Claims (20)
- 세포 투과성 도메인 및 징크 핑거 도메인을 포함하는 세포 투과성 펩타이드.
- 제 1항에 있어서, 상기 징크핑거 도메인은 하기 일반식 1의 아미노산 서열인 것인, 펩타이드:
X1-X2-X3-X4-G-X5-L-D-X6-H-A-K-E-X7 (일반식 1, 서열번호 1)
상기 식에서,
X1은 C 또는 A이며;
X2는 Y 또는 R이고;
X3는 N, R 또는 D이며;
X4는 C 또는 A이고;
X5는 G 또는 E이며;
X6는 H 또는 A이고; 및
X7은 C 또는 A이다. - 제 2항에 있어서, 징크 핑거 도메인의 N-말단에 G-X8-R이 추가되고, 상기 식에서 X8이 D 또는 R인, 세포 투과성 펩타이드.
- 제 2항에 있어서, 상기 징크 핑거 도메인의 C-말단에 K-X9이 추가되고, 상기 식에서 X9이 L 또는 W인, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 도메인은 서열번호 4 내지 6의 아미노산 서열 중 어느 하나의 서열인 것인, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 37의 아미노산 서열로 이루어진, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 38의 아미노산 서열로 이루어진, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 39의 아미노산 서열로 이루어진, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 40의 아미노산 서열로 이루어진, 세포 투과성 펩타이드.
- 제1항에 있어서, 상기 세포 투과성 펩타이드는 서열번호 11 내지 36의 아미노산 서열 중 어느 하나의 서열로 이루어진, 세포 투과성 펩타이드.
- 제 1항에 있어서, 상기 세포 투과성 도메인의 N-말단에 아미노산 E, GSE 또는 히스택를 추가로 포함하는, 세포 투과성 펩타이드.
- 제 1항에 있어서, 상기 징크핑거 도메인의 C-말단에 서열번호 7 내지 서열번호 10의 아미노산 서열 중 어느 하나의 서열을 포함하는, 세포 투과성 펩타이드.
- 제 1항의 펩타이드를 암호화하는 폴리뉴클레오타이드.
- 제 13항의 폴리뉴클레오타이드 서열을 포함하는 벡터.
- 제 14항의 벡터로 형질전환된 숙주세포.
- 제 1항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 상처 치유용 약학적 조성물.
- 제 16항에 있어서, 상처는 비-치유 외상성 상처, 방사선조사에 의한 조직의 파괴, 찰과상 (abrasion), 골괴저, 열상 (laceration), 결출상 (avulsion), 관통상 (penetrated wound), 총상 (gunshot wound), 절상, 동상, 타박상 (contusion or bruise), 피부궤양, 피부건조, 피부 각화증, 갈라짐, 터짐, 피부염, 피부 사상균증에 의한 통증, 수술상, 혈관질환 상처, 각막상처, 욕창, 와창, 당뇨성피부 미란과 같은 당뇨병 및 순환불량에 관련된 상태, 만성궤양, 성형수술 후 봉합부위, 척추상해성 상처, 부인과적 상처, 화학적 상처 및 여드름으로 이루어진 군에서 선택된 상처인, 상처 치유용 약학적 조성물.
- 제 1항의 펩타이드를 유효성분으로 포함하는 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제 18항에 있어서, 혈관 신생 의존성 질환은 허혈성 질환, 상처, 화상, 건선, 만성궤양, 심근경색, 협심증, 욕창, 탈모, 당뇨망막증, 미숙아 망막증, 연령관련 황반변성증, 녹내장, 당뇨성 궤양, 폐고혈압 및 뇌혈관성 치매로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인, 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
- 제 19항에 있어서, 허혈성 질환은 뇌허혈, 심장허혈, 당뇨병성 혈관심장질환, 심부전, 심근비대증, 망막허혈, 허혈성 대장염, 허혈성 급성 신부전증, 뇌졸중, 뇌외상 및 신생아 저산소증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인, 혈관 신생 의존성 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210045245A KR20220139079A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 |
| PCT/KR2022/004581 WO2022215946A1 (ko) | 2021-04-07 | 2022-03-31 | 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 |
| JP2023561799A JP2024515250A (ja) | 2021-04-07 | 2022-03-31 | 細胞透過性ペプチド変異体およびその用途 |
| EP22784856.1A EP4321527A1 (en) | 2021-04-07 | 2022-03-31 | Cell-penetrating peptide variant and use thereof |
| CN202280026463.8A CN117157308A (zh) | 2021-04-07 | 2022-03-31 | 细胞穿膜肽变体及其用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020210045245A KR20220139079A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20220139079A true KR20220139079A (ko) | 2022-10-14 |
Family
ID=83545463
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020210045245A KR20220139079A (ko) | 2021-04-07 | 2021-04-07 | 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 |
Country Status (5)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP4321527A1 (ko) |
| JP (1) | JP2024515250A (ko) |
| KR (1) | KR20220139079A (ko) |
| CN (1) | CN117157308A (ko) |
| WO (1) | WO2022215946A1 (ko) |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100817191B1 (ko) * | 2001-09-27 | 2008-03-27 | 주식회사 엘지생활건강 | Ｔａｔ 펩타이드가 결합된 아스코르브산 유도체, 그의제조방법 및 이를 포함하는 피부 미백용 화장료 조성물 |
| CN110139870B (zh) * | 2016-12-16 | 2023-12-01 | 爱维斯健有限公司 | 细胞膜穿透肽及包含其的细胞内输送载体 |
-
2021
- 2021-04-07 KR KR1020210045245A patent/KR20220139079A/ko not_active Application Discontinuation
-
2022
- 2022-03-31 WO PCT/KR2022/004581 patent/WO2022215946A1/ko active Application Filing
- 2022-03-31 EP EP22784856.1A patent/EP4321527A1/en active Pending
- 2022-03-31 CN CN202280026463.8A patent/CN117157308A/zh active Pending
- 2022-03-31 JP JP2023561799A patent/JP2024515250A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2024515250A (ja) | 2024-04-08 |
| EP4321527A1 (en) | 2024-02-14 |
| CN117157308A (zh) | 2023-12-01 |
| WO2022215946A1 (ko) | 2022-10-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10774124B2 (en) | Protease resistant mutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage | |
| CN102369220A (zh) | 用于不渗透化合物策略的靶向激活的细胞/组织转位肽及其应用 | |
| US6225444B1 (en) | Neuroprotective peptides and uses thereof | |
| JP2003514765A (ja) | 新規形質導入分子およびその使用方法 | |
| CN101426808A (zh) | 新颖的蛋白质转导结构域及其应用 | |
| CN109563151A (zh) | 用于治疗癌症的方法和组合物 | |
| US20200062811A1 (en) | Yap protein inhibiting polypeptide and application thereof | |
| US7863017B2 (en) | TAT-utrophin as a protein therapy for dystrophinopathies | |
| KR101064914B1 (ko) | 자가면역질환, 알러지성 질환 및 염증성 질환 치료용 약제 조성물 및 이의 전달 방법 | |
| US20110092422A1 (en) | Elastin based growth factor delivery platform for wound healing and regeneration | |
| KR20220139079A (ko) | 세포 투과성 펩타이드 변이체 및 이의 용도 | |
| US11267855B2 (en) | Engineered FGF1 and FGF2 compositions and methods of use thereof | |
| US10385113B2 (en) | Engineered FGF compositions and methods of use thereof | |
| CN114728038A (zh) | 抑制血管生成和血管功能的寡肽 | |
| WO2009116529A1 (ja) | ポリペプチドおよび当該ポリペプチドを含む医薬組成物 | |
| WO1991007982A1 (en) | Treatment of hsv | |
| US20240034752A1 (en) | Artificial short interfering peptide for the phosphorylation substrate of dapk1 and its pharmaceutical applications | |
| AU2013234365B2 (en) | Protease resistant mutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage | |
| AU2016216675A1 (en) | Protease resistant mmutants of stromal cell derived factor-1 in the repair of tissue damage | |
| Beerens | Intercellular spread of the transgene product to improve the efficiency of cancer gene therapy | |
| KR20170018225A (ko) | 세포투과성 열충격단백질 22 융합단백질을 포함하는 뇌허혈 예방 및 치료용 약학 조성물 | |
| KR20130032787A (ko) | 심혈관 질환 예방 및 치료용 펩타이드 및 이의 용도 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| E902 | Notification of reason for refusal |