JP2014224754A - 全血血球免疫測定装置 - Google Patents

Abstract

【課題】ＣＲＰセルの定期洗浄の間隔をより大きくし、該定期洗浄を無くすことも可能な、全血血球免疫測定装置を提供すること。【解決手段】検体の免疫測定処理を行った後に、毎回、免疫測定用セル１９の内壁面に希釈洗浄液を接触させる。そのために先に希釈液を注入し、次いで洗浄液を注入し、免疫測定用セル内で希釈洗浄液を作り出す。これによって、免疫測定用セルの内壁面が好ましい状態に維持され、定期洗浄の間隔をより長くすることが可能になった。。【選択図】図１

Description

本発明は、血液検体に対して、免疫測定を自動的に行う免疫測定部と、血球計数測定を自動的に行う血球計数測定部とを有する全血血球免疫測定装置に関する。

生体内において炎症反応や組織の破壊が生じる場合、いわゆる炎症マーカーの検出を指標に診断が行われている。当該マーカーの一つとして代表的なものがＣ反応性タンパク質（以下、ＣＲＰという）である。ＣＲＰは、関節リウマチ等の自己免疫疾患、悪性腫瘍、主に細菌性の感染症などに罹患すると、肝臓から血中に分泌される血清タンパク質であるため、これらの患者では高値を示すことが知られている。しかしながら、ＣＲＰ値は個人差が大きいため、標準値や他者のＣＲＰ値との比較ではなく、患者一人一人の病状経過を観察する際に特に有用な指標である。該ＣＲＰは、ＥＬＩＳＡなどの方法により免疫学的に測定されるのが一般的である。

一方、炎症早期には白血球の左方移動、白血球数が増加するため、ＣＲＰのみならず、白血球を同時に測定することも臨床上非常に重要である。
本発明者らは上記事項に着目し、白血球測定とＣＲＰ測定とを同時に可能にする全血血球免疫装置を初めて提供した（特許文献１）。
尚、該特許文献１に記載された装置は、白血球に関しては３分類を行なうよう構成された装置である。白血球は、好中球(neutrophil)、好酸球(eosinophil)、好塩基球(basophil)、単球(monocyte)、リンパ球(lymphocyte)の５種類の細胞に分けることができるが、これらのなかでも、好中球、好酸球、好塩基球は、一括して顆粒球(granulocyte)と称される場合がある。上記特許文献１の全血血球免疫測定装置では、白血球に関しては、顆粒球、単球、リンパ球をそれぞれに計数する（即ち、３分類する）構成となっている。

特許第３４７７３５２号公報

図５、図６に示すように、上記特許文献１の全血血球免疫測定装置には、検体を収容する検体容器４、ＣＲＰセル１９、ＣＲＰ測定用試薬を収容した試薬容器（２０、２１、２２）、血球計数測定用セル（白血球用のＷＢＣセル２７、赤血球用のＲＢＣセル２８）とが、水平方向に一線上に配置されている。そして、単一のサンプリングノズル３６が、水平方向の移動（各容器上やセル上への位置合わせの移動）と上下方向の移動（各容器やセルへの出入りの移動）とを所定の順番に従って行なうよう制御される構成となっている。サンプリングノズル３６は、「ニードル」とも呼ばれる細長い管である。
ＣＲＰ測定および血球計数測定のための処理ステップ、サンプリングノズルの順序動作は、図７のフローチャートに示したとおりである。
このような構成によって、〔ＣＲＰ用試薬と検体の吸引・吐出ステップ、ＣＲＰセル内でのＣＲＰ測定処理ステップ、ＷＢＣセル・ＲＢＣセル内での各血球計数測定ステップ、各セルの洗浄処理ステップ、各処理ステップ後の必要に応じたノズル外部の洗浄処理ステップ、最終ステップの後のノズル内外の最終洗浄処理〕といった、１つの検体に対する種々の処理ステップが、シーケンシャルに全自動で行なわれる。全処理ステップを完了するためには１検体あたり約４分を要する。

上記のような１つの検体に対する処理ステップに加えて、従来の全血血球免疫測定装置では、所定数の検体を処理する毎に、自動的にＣＲＰセル（ＣＲＰを測定し得るように構成された容器）の定期洗浄が行われるようにプログラムされている。
ＣＲＰセルの定期洗浄が必要である理由は、次のとおりである。
ＣＲＰの測定では、ラテックス免疫比濁ＲＡＴＥ法を実施するために、免疫測定用のラテックス試薬（例えば、抗ヒトＣＲＰ感作ラテックス免疫試薬）がセル内に分注される。該ラテックス試薬は、図５〜図７の例では、試薬容器２２内に収容されたＲ３試薬である。このとき、該ラテックス試薬に含まれるラテックス粒子がＣＲＰセルの内壁面にも付着する。該ラテックス粒子はＣＲＰをも伴って比較的頑固に内壁面に付着し、検体の処理数が増えるにつれて、内壁面上のラテックス粒子の堆積量が増加していく。その結果、ＣＲＰ測定のための照射光の透過が妨害されるようになり、正しい測定結果が得られなくなる。よって、ＣＲＰセルの定期洗浄が必要となる。

従来では、光学的測定の正確な結果を得るという観点から、安全を見て、検体数１５を以って定期洗浄の間隔としている。
ＣＲＰセルの定期洗浄には、上記のようにセルの内壁面に付着したラテックス粒子を除去し得るよう、ラテックス試薬用の洗浄剤を含有する洗浄液が用いられる。該洗浄液は、装置内の洗浄液タンクに収容されており、前記定期洗浄時には、専用の配管を通じてＣＲＰセル内に供給される。
定期洗浄が開始されると、毎回のＣＲＰ測定の最後にＣＲＰセル内をすすぐために該セル内に供給される希釈液が排出された後、次回のＣＲＰ測定が停止され、前記タンク内の洗浄液がそのまま（即ち、原液のまま）該セル内を満たすまで供給され、該セルの内壁面は洗浄液に浸漬される。この浸漬状態が１〜２分間保たれた後、洗浄液は排出され、該セル内に希釈液の注入と排出とが６〜７回繰り返されてすすぎ洗いが行われ、該洗浄液は残留がないように希釈液によって十分に除去される。尚、このとき、新しい希釈液が単純に注入されて排出されるという単純なすすぎ動作だけでなく、セル内に注入した希釈液を、セル外に吸引し、それを再びセル内に注入し、さらに再びセル外に吸引し、というように希釈液を往復させるという攪拌動作が加えられる場合もある。
以上のような一連の動作によって、一回の定期洗浄は６分程度の時間を要するものとなっている。

ＣＲＰセルの定期洗浄は、一般的な検査では何ら問題が無く好ましいものであるものの、多量の検体を測定する必要のある機関にとっては、１日の処理量を減少させる要因の１つとなっていた。
しかし、従来の全血血球免疫測定装置の構成では、ＣＲＰセルの定期洗浄の間隔（洗浄間の検体の処理数）や、１回の定期洗浄で行われる洗浄ステップはいずれも適切かつ必須であって、該定期洗浄の間隔を大きくしたり、１回の定期洗浄の時間を短縮できるような余地は無かった。

本発明の課題は、ＣＲＰセルの定期洗浄の間隔をより大きくし、該定期洗浄を無くすことも可能な、全血血球免疫測定装置を提供することにある。

本発明は、次の特徴を有するものである。
（１）免疫測定用セルでの免疫測定と、血球計数測定用セルでの血球計数測定が行なわれるように構成された全血血球免疫測定装置であって、
免疫測定用セルを有する免疫測定部と、免疫測定用のラテックス試薬を収容した試薬容器および免疫測定用の他の必要試薬を収容した試薬容器と、血球計数測定用セルを有する血球計数測定部とが、それぞれ所定位置に配置され、単一のサンプリングノズルが前記所定位置に移動して検体および試薬の吸引と吐出を行ない、免疫測定用セルでの免疫測定と、血球計数測定用セルでの血球計数測定が行なわれるように構成されており、
前記ラテックス試薬用の洗浄剤を含有する洗浄液を収容した洗浄液タンクが設けられており、
前記免疫測定用セルにおいて、１つの検体に関する免疫測定が完了し該検体が排出される毎に、該免疫測定用セルには、先に、希釈液が所定量だけ注入され、次に、前記洗浄液が所定量だけ注入され、それによって所定の濃度に希釈された前記洗浄液が該免疫測定用セルの内壁面に接触する状態とされ、その後、該希釈された前記洗浄液が排出される構成となっている、
前記全血血球免疫測定装置。
（２）免疫測定用セルの底部には、該セル中の液を排出するための排出口が設けられており、該排出口には電磁切替弁が接続され、該電磁切替弁の作動によって、該排出口を通じて、上記洗浄液が免疫測定用セル内に注入され得る構成となっている、上記（１）記載の全血血球免疫測定装置。
（３）上記洗浄液が免疫測定用セル内に注入される際に、全注入量が複数回に分けて注入される構成となっている、上記（２）記載の全血血球免疫測定装置。
（４）上記サンプリングノズルには、サンプリングノズル洗浄器が付帯しており、該サンプリングノズル洗浄器は希釈液を吐出し、該サンプリングノズルの外面を該希釈液で洗浄するよう構成されている、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の全血血球免疫測定装置。
（５）希釈液が所定量だけ注入された免疫測定用セルに、上記洗浄液が、３秒以下の時間で注入され、次いで、所定の濃度に希釈された上記洗浄液が免疫測定用セルの内壁面に接触する状態が、１〜５秒間維持され、次いで、前記の希釈された洗浄液が、３秒以下の時間で排出されるように構成されている、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の全血血球免疫測定装置。

図７のフローチャートのステップａ８、ａ９のように、従来では、各検体のＣＲＰ測定毎の処理ステップの最後に、希釈液によるＣＲＰセルのすすぎ洗いが行われている。
従来のＣＲＰ測定毎のすすぎ洗いの手順は、装置によっても異なるが、例えば、サンプリングノズルに付帯したノズル洗浄器（後述）から吐出される希釈液でＣＲＰセルを満たして排出することを繰り返すという単純なすすぎ洗いの手順や、ＣＲＰセルに満たされた希釈液をサンプリングノズルでセル外に吸引し、それを再びセル内に注入し、さらに再びセル外に吸引し、というように希釈液を往復させるという攪拌動作が加えられた手順などが挙げられる。

しかしながら、このような希釈液によるＣＲＰセルのすすぎ洗いでは、上記課題の説明で述べたとおり、検体の処理回数が増えるにつれて、内壁面上へのラテックス粒子の堆積量が増加していく。
そこで、本発明では、毎回の免疫測定（ＣＲＰ測定）の後で、即ち、各検体の免疫測定（ＣＲＰ測定）が完了し検体が排出された後に、ラテックス試薬用の洗浄剤を含んだ洗浄液（以下、単に「洗浄液」ともいう）を、免疫測定用セル（ＣＲＰセル）の内壁面に、所定の濃度に希釈して短時間だけ接触させることを発想するに至った。

ところで、本発明者の研究によれば、洗浄液によってＣＲＰセルの内壁面を過度に洗浄してラテックス粒子の残留を無くしてしまうと、その直後に行われる免疫測定でのＣＲＰ−ラテックス凝集反応において、凝集反応に寄与すべきラテックス粒子がＣＲＰセルの内壁面にも付着し、その結果、凝集反応が阻害され、ＣＲＰ測定値が低い値（偽低値）として表れる場合があることがわかった。
例えば、次の（ａ）、（ｂ）のような洗浄を行った場合、ＣＲＰセルの内壁面に付着したラテックス粒子が完全に除去されるかまたは大きく減少するので、その直後のＣＲＰ測定値が偽低値として表れる場合がある。
（ａ）従来より行われていたＣＲＰセルの内壁面の洗浄ステップにおいて、希釈液の代わりに定期洗浄で用いられている洗浄液（即ち、上記したラテックス試薬用洗浄液の原液）を用いて、同様の洗浄動作を行う洗浄。
（ｂ）希釈された洗浄液を用い、バブリングなどの攪拌を併用した長時間の洗浄。

上記した偽低値を生じさせず、１検体当たりの処理時間を過度に延長させることなく、かつ、ＣＲＰセルの定期洗浄の間隔をより大きくするためには、ＣＲＰセルの内壁面にラテックス粒子が適度に付着している状態を維持し、それによって、該内壁面の界面状態を安定させることが好ましいことが分かった。
本発明では、このような新たな知見に基づき、毎回のＣＲＰ測定においてＣＲＰセルの内壁面に付着するラテックス粒子を適度に除去すべく、上記洗浄液を原液のままで用いるのではなく、先ず、ＣＲＰセル内に希釈液を所定量だけ注入し、そこへ前記洗浄液（原液）を所定量だけ注入し、それによって所定の濃度に希釈された洗浄液（以下、「希釈洗浄液」とも呼ぶ）をＣＲＰセル内で作り出し、その希釈洗浄液がＣＲＰセルの内壁面に接触する状態とし、その接触状態を所定の短時間だけ維持した後、該希釈された洗浄液を排出している。ＣＲＰセル内への希釈液の注入には、サンプリングノズル洗浄器などの注入器を用いてよい。
希釈洗浄液をＣＲＰセル内で作り出すに際して、該ＣＲＰセルに先に希釈液を所定量だけ注入しておくことによって、ＣＲＰセルの内壁面に洗浄液の原液が接触することがない。よって、毎回のＣＲＰ測定毎にラテックス粒子の適度な除去が行われ、ＣＲＰセルの内壁面にラテックス粒子が適度に残留する。
適度に希釈された洗浄液がＣＲＰ測定毎にＣＲＰセルの内壁面に接触することによって、定期洗浄の間隔は飛躍的に長くなり、さらには、定期洗浄を無くすことも可能になり、しかも、ＣＲＰ測定値が偽低値を示すこともない。

図１は、本発明による全血血球免疫測定装置の主要部分の構成例を模式的に示す図である。 図２は、本発明による全血血球免疫測定装置の好ましい態様におけるサンプリングノズルの動きを示したフローチャートである。 図３は、本発明による全血血球免疫測定装置の外観の一例を示す図である。 図４は、ＣＲＰセルに洗浄液を注入した場合（本発明）と、希釈液によるすすぎ洗いだけの場合（従来例）との差異を示したグラフ図である。グラフの縦軸は、最初の検体の測定におけるプランク吸光度を１としたときの、それに対するその後の検体の測定におけるプランク吸光度の比率を示し、グラフの横軸は、検体数（測定の試行回数）を示している。 図５は、特許文献１に記載された装置の構成を示す図である。図５（ａ）は該文献の図２を示し、図５（ｂ）は該文献の図３を示す。 図６は、図５（ａ）に示された特許文献１の装置の主要部分の構成を抜き出して模式的に示した図である。 図７は、図５に示した装置におけるサンプリングノズルの動きを示したフローチャートである。

以下、実施例を挙げて、本発明の全血血球免疫測定装置の構成をより詳細に説明する。
図１は、本発明の全血血球免疫測定装置の好ましい態様における、特徴的な構成部分を示した部分拡大図である。同図に示すように、当該全血血球免疫測定装置では、免疫測定用セル１９を有する免疫測定部と、免疫測定用試薬（Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３）をそれぞれ収容した試薬容器（２０、２１、２２）と、血球計数やヘモグロビン濃度測定などを行なうための血球計数測定用セル（ＢＡＳＯセル２７ａ、ＬＭＮＥセル２７ｂ、ＲＢＣセル２７ｃ、ＷＢＣセル２７ｄ）を有する血球計数測定部とが、所定位置に配置されている。これらの血球計数測定用セルは、白血球５分類を含んだ詳細な分析を行なうための好ましい一例である。これらの測定用セルについては後述する。
図１の例では、検体を収容した検体容器４が当該装置の所定位置にセットされており、該検体容器４、試薬容器（２０、２１、２２）、免疫測定用セル１９、血球計数測定用セル（ＢＡＳＯセル２７ａ、ＬＭＮＥセル２７ｂ、ＲＢＣセル２７ｃ、ＷＢＣセル２７ｄ）の各所定位置は、水平方向に伸びる直線に沿って並んでいる。そして、プローブユニット１３によって水平方向・垂直方向に移動し得る単一のサンプリングノズル３６が、前記直線に沿って移動しかつ上下に移動して、各容器やセル内に対する進入と脱出を行い、検体および試薬の吸引と吐出を行なうように、コンピュータ制御される構成となっている。該サンプリングノズル３６には、サンプリングノズル洗浄器３９が付帯しており、該サンプリングノズル洗浄器３９は希釈液を吐出し、該サンプリングノズルの外面を該希釈液で洗浄するよう構成されている。そして、免疫測定用セル１９と制御部（図示せず）とによって免疫測定が自動的に行われ、血球計数測定用セル（２７ａ〜２７ｄ）と該制御部とによって、血球計数測定が自動的に行なわれるよう構成されている。
尚、図１は、略図のため、各セルやチャンバーなどの容器の底部を角部を有するように描いているが、実際には、液体のスムーズな流出、流入を考慮して適宜丸みを帯びたものであることが好ましい。
本発明の重要な特徴は、上記発明の効果の説明で述べたとおり、免疫測定用セル１９において１つの検体に関する免疫測定が完了し該検体が排出される毎に（即ち、毎回の免疫測定が終了する毎に）、該免疫測定用セル１９内において所定の濃度の希釈洗浄液を作り出し、その希釈洗浄液を該免疫測定用セル１９の内壁面に接触させる点にある。
本発明の装置には、前記ラテックス試薬用の洗浄剤を含有する洗浄液を原液の状態で収容した洗浄液タンク１９ｈが設けられており、また、希釈液を収容したタンクも設けられている。洗浄液の詳細については後述する。
免疫測定用セル１９には、先ず、希釈液が所定量だけ注入され、次に、該洗浄液タンクから洗浄液（原液）が所定量だけ注入されて、該免疫測定用セル内で希釈洗浄液が作りだされる。希釈液は、所定の注入器から専用の配管を通じて注入されてもよいが、サンプリングノズル洗浄器３９からの吐出を利用した注入（免疫測定用セルの上部開口からの注入）が好ましい態様である。該希釈洗浄液は、所定時間だけ該免疫測定用セル１９内に保持された後（即ち、希釈洗浄液を、該免疫測定用セルの内壁面に所定時間だけ接触させた後）排出される。この順序動作は、制御部によって制御される。
上記の手順によって免疫測定用セル内で希釈洗浄液を作り出し、それを免疫測定用セルの内壁面に免疫測定の終了ごとに接触させることによって、該内壁面は、ラテックス粒子が適度に付着した状態に保たれ、免疫測定結果が偽低値となることを防止しながらも、定期洗浄の間隔をより大きくすることが可能になり、最も適切な条件下では、定期洗浄が不要になる。さらに、希釈液を先に免疫測定用セルに注入するため、洗浄液（原液）が直接的にセルの内壁面に接触することがないので、該セルの内壁面の過度な洗浄を防止することができる。

当該全血血球免疫測定装置の全体的な外観は、特に限定はされないが、例えば、図３に示すものが挙げられる。図３の例では、検体を収容した検体容器（採血管とも呼ばれる）をセットするための検体容器セット部（採血管ホルダー）Ｃが前面に開閉可能に設けられている。また、側面には、免疫測定用の試薬容器の収容部が露出するよう扉Ｄが設けられており、試薬の補充や、免疫測定部のメンテナンスが可能になっている。

免疫測定部と血球計数測定部とを所定位置に配置し、サンプリングノズルを制御して移動させ、検体や試薬の吸引と吐出を行なわせ、さらに、各セル内で免疫測定と血球計数測定を自動的に行うための基本的な構成、機構、制御、計測の手法自体は、上記特許文献１など、従来公知の全血血球免疫測定装置、血球測定装置、免疫測定装置の技術を参照してよい。各部の機構を制御し、得られるデータを処理する制御部としては、コンピュータが適切である。

当該装置で行うべきラテックス免疫比濁ＲＡＴＥ法に従った免疫測定は、血しょう中成分の分析などの免疫学的な測定であればよく、特に限定はされないが、なかでもＣＲＰ値の測定は、代表的な炎症マーカーとして臨床検査（細菌感染症等）に繁用されており、全血血球免疫測定装置にとっては重要な測定項目である。
以下の説明では、免疫測定の実例としてＣＲＰ測定を挙げて本発明を説明する。

〔免疫測定部（ＣＲＰ測定部）〕
図１に示す例では、免疫測定用セル１９は、ＣＲＰを測定し得るように構成されたセルであり、ＣＲＰ測定用の光照射部１９ａおよび光検出部１９ｂをセルの下部壁面に備えるとともに、内部に収容される液を適宜攪拌できるように構成されている。以下、免疫測定用セルをＣＲＰセルとも呼ぶ。
ＣＲＰセルにおいて、ラテックス免疫比濁ＲＡＴＥ法に従ってＣＲＰを光学的に測定する技術や、光照射部、光検出部の素子の配置構造、セルの材料、ＣＲＰの測定に適したセルの形状・寸法などの構成自体は、従来技術を参照してよい。図１では、光照射部１９ａと光検出部１９ｂとが対向して設けられた構成を示唆している。

図１の例では、ＣＲＰセル１９の底部には、該セル中の液を排出するための排出口が設けられている。該排出口には破線で示す配管によって経路切替え用の電磁切替弁１９ｃが接続され、該電磁切替弁１９ｃの切替え動作によって、廃液が、該電磁切替弁１９ｃ、電磁弁装置１２を経て、ポンプＰによって、廃液容器１８へと送られる構成となっている。
また、該電磁切替弁１９ｃには、さらに第２の電磁切替弁１９ｄが接続され、該電磁切替弁１９ｄには、ＣＲＰセル内を攪拌するための定注器（シリンジ）１９ｅが接続されている。電磁切替弁１９ｃ、１９ｄの切替え動作による管路の形成と、定注器１９ｅの吸引と吐出の動作によって、ＣＲＰセル内の液体が攪拌される。
さらに、第２の電磁切替弁１９ｄには、第３の電磁切替弁１９ｆが接続され、該電磁切替弁１９ｆには、ＣＲＰセル内に洗浄液を注入するための定注器１９ｇと洗浄液タンク１９ｈとが接続されている。先ず、第３の電磁切替弁１９ｆの切替え動作による吸引管路の形成と定注器１９ｇの吸引動作とによって、洗浄液タンク１９ｈ内の洗浄液が定注器１９ｇ内に吸引され。次に、電磁切替弁１９ｃ、１９ｄ、１９ｆの切替え動作による注入管路の形成と定注器１９ｇの吐出動作とによって、該定注器内の洗浄液がＣＲＰセル内に注入される。

ＣＲＰ測定のための試薬容器２０には、溶血試薬（以下、Ｒ１試薬という）が収容されている。Ｒ１試薬は、公知のものを用いてよく、例えば、界面活性剤（合成物またはサポニンのような天然物のいずれの場合も含む）を主成分とする溶液などが挙げられる。
試薬容器２１には、緩衝液（以下、Ｒ２試薬という）が収容されている。Ｒ２試薬は、公知のものを用いてよく、例えば、Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（トリス塩酸）緩衝液、グリシン緩衝液などが挙げられる。
試薬容器２２には、ラテックス試薬（以下、Ｒ３試薬ともいう）が収容されている。Ｒ３試薬は、ラテックス粒子表面に抗ＣＲＰ抗体を固定化することによって作成されるものである。Ｒ３試薬は、ラテックス免疫比濁ＲＡＴＥ法に従って免疫測定（本例ではＣＲＰ測定）が可能な試薬であればよく、例えば、抗ヒトＣＲＰウサギポリクローナル抗体感作ラテックス懸濁液、抗ヒトＣＲＰマウスモノクローナル抗体感作ラテックス懸濁液、抗ヒトＣＲＰヤギポリクローナル抗体感作ラテックス懸濁液などが挙げられる。
ラテックス粒子の材料としては、例えば、ポリスチレンラテックスなどが挙げられる。ラテックス粒子の一般的な粒子径は、０．０１μｍ〜２μｍ程度である。

これら試薬容器は、ソレノイドやステッピングモータなどのアクチュエータによって上下方向に揺動する蓋によって一括して開閉されるように構成されることが好ましい態様である。
また、ペルチェ素子からなる電子冷却器を備えたクーラーボックスに試薬容器２１、２２を収容することが好ましい態様である。

〔血球計数測定部〕
血球計数測定部で行うべき血球の測定項目は、特に限定はされないが、例えば、特許文献１のように、赤血球の計数（体積と度数分布）、ヘモグロビン量の測定、白血球の３分類（単球、リンパ球、顆粒球の分画計数）であってもよいし、さらに、本発明の図１に示す実施例のように、白血球の５分類（リンパ球、単球、好中球、好酸球、好塩基球の分類と計数）を行ってもよい。これらの測定項目は、装置の目的、ユーザーの要求、製品の価格などに応じて適宜決定すればよい。

血球計数測定を行うための装置は、その測定項目に応じて、電気抵抗法（インピーダンス法とも呼ばれる）、光学的測定法を実施し得るように、各血球計数測定用セル内に必要な装置構成を設け、制御部によって作動する構成とすればよい。
例えば、特許文献１の装置のように、電気抵抗法によって、ＷＢＣ（白血球数）、ＲＢＣ（赤血球数）、ＰＬＴ（血小板数）、ＭＣＶ（赤血球容積）、Ｈｃｔ（ヘマトクリット値）を行い、比色法（ノンシアン法）における吸光光度法によりＨｇｂ（ヘモグロビン濃度）などをそれぞれ測定するように構成してもよい。
特許文献１の装置では、ＷＢＣ／Ｈｇｂ血球計数測定セルには、ＷＢＣを電気抵抗法に基いて測定するための測定電極対が設けられ、Ｈｇｂを測定するための光照射部と受光部とが設けられている。また、ＲＢＣ／ＰＬＴ血球計数測定セルには、ＲＢＣおよびＰＬＴを電気抵抗法に基いて測定するための測定電極対が設けられている。

本願の図１の例では、血球計数測定部として設けられた血球計数測定用セルは、ＢＡＳＯセル２７ａ、ＬＭＮＥセル２７ｂ、ＲＢＣセル２７ｃ、ＷＢＣセル２７ｄである。
ＢＡＳＯセル２７ａは、好塩基球を計数するためのセルであって、試薬の作用により、好塩基球以外の血球を溶血または収縮させることによって、好塩基球だけを計数可能とし、電気抵抗法に基いて、該好塩基球を計数し得るように構成された槽である。
ＬＭＮＥセル２７ｂは、後述の集光型フローインピーダンス法によって、リンパ球（Ｌ）、単球（Ｍ）、好中球（Ｎ）、好酸球（Ｅ）を計数するよう構成されたセルである。
ＲＢＣセル２７ｃは、赤血球および血小板を計数するためのセルであって、特許文献１の装置におけるＲＢＣ／ＰＬＴ血球計数測定セルと同様、セルの下部には電気抵抗法を実施し得るようアパーチャと電極とを持った装置が設けられている。
ＷＢＣセル２７ｄは、特許文献１の装置におけるＷＢＣ／Ｈｇｂ血球計数測定セルと同様のものであって、白血球の計数をより正確に行うために設けられたセルである。ＷＢＣセルでは、専用の試薬によって、リンパ球、単球、好中球、好酸球、好塩基球を含めた白血球全体の計数が可能となっており、電気抵抗法を実施し得るようアパーチャと電極とを持った測定装置が設けられている。このセルでは、白血球の計数に加えて、ヘモグロビン濃度の測定をも行なわれる。

電気抵抗法は、検体血液を希釈液中に分散させた試料液を流路に導入し、その流路の途中に、オリフィスのごとく流路の断面積が小さくなったアパーチャ（小孔）を設け、該アパーチャを間に置いてその両側に一対の電極を設けることによって、該アパーチャを通過する粒子の容積を、電極間の電気的な特性の変化に基いて測定する手法である。
一方、光学的な手法で血球を識別する好ましい手法として、フローサイトメトリーが挙げられる。この手法は、流路を進む試料液中の血液細胞に所定の照射光をビーム光として焦点を合わせて照射し、その結果得られる光散乱や光吸収度などの光学的特性から該血液細胞の識別を行なう手法である。
フローサイトメトリーを行いながら電気抵抗法をも行う方法（集光型フローインピーダンス法）は、白血球の４分類（ＬＭＮＥマトリクスの取得）を行なうためには、好ましい方法である。図１に示した本発明の実施例では、ＬＭＮＥセル２７ｂ内に集光型フローインピーダンス法を行うための流路やそれに対する光照射装置、受光装置、電極対が設けられ、白血球の４分類を行なうためのデータ（各血球毎の（容積、吸光度）のデータ対）の取得が可能となっている。
血球の計数結果は、制御部において適宜処理が施され、ＬＭＮＥマトリクスなどのスキャッターグラムやヒストグラムなどとして表示される。
電気抵抗法、フローサイトメトリー、集光型フローインピーダンス法を行うための装置構成については、従来公知の技術を参照してよい。

〔サンプリングノズルとその駆動機構〕
図１の例では、検体容器４、試薬容器２０、２２、２１、ＣＲＰセル１９、免疫測定用洗浄チャンバＡ、血球計数測定用セル（２７ａ、２７ｂ、２７ｃ、２７ｄ）は、所定の位置に配置されており、サンプリングノズル（以下、「ノズル」とも呼ぶ）が各所定位置に移動しかつ上下移動して検体および試薬の吸引と吐出を行なえるようになっている。よって、ノズルの移動経路やプローブユニットの機構を複雑にせず、素早く処理し得る点からは、各所定位置は、図４（ｂ）のように、一線上に整列していることが好ましい。

ノズルは、ニードルとも呼ばれ、その先端を各容器やセルに差し込んで検体・試薬の吸引と吐出を行なうための細長い管である。ノズルの後端部は、配管によって、電磁弁部を通じて吸引・吐出ポンプに接続されている。
ノズルを所定の経路に沿って水平移動させかつ上下移動させるためのプローブユニット部１３の機構は、特許文献１など従来公知の技術を参照すればよい。例えば、無端ベルト（ループ状のベルト）とされたタイミングベルトやＶベルトなどによる直進機構、ボールネジによる直進機構、シリンダーによる直進機構、その他のアクチュエータによる直進機構、これらを組み合わせた駆動アームによる移動機構などが挙げられる。
図１の例では、図４と同様に、水平方向のタイミングベルト３１と、上下方向のタイミングベルト３７によって、ノズルが水平方向・垂直方向に移動できるようになっている。
ノズルは、一直線上に配設された試薬容器および各セルのほぼ真上を往復移動しながら、所定位置で上下して、検体および試薬の吸引と吐出、洗浄を行なう。このような動作は、コンピュータによって制御され、プログラムされたとおりに行われる。

ノズル３６には、ノズル洗浄器３９が付帯している。
ノズル洗浄器は、環状の本体部分を有し、その中央孔内をノズルが通過している（該ノズルの先端部はノズル洗浄器の下方にある）。
ノズル洗浄器３９は、水平方向にはノズル３６に帯同して移動するが、上下方向については特定の高さに固定されている。よって、ノズル３６が上下移動すると、ノズル洗浄器３９の環状の本体部分は、相対的にノズルの外面を移動することになる。
好ましい態様例では、ノズルが最も下まで移動した状態で、ノズル洗浄器の環状の本体部分から希釈液が放出され、それによって、ノズルの外周面全体が洗い流されるようになっている。

〔希釈洗浄液によるＣＲＰセルの洗浄〕
希釈洗浄液によるＣＲＰセルの洗浄（希釈洗浄液の内壁面への接触）は、１つの検体に関するＣＲＰ測定毎に行う。
希釈洗浄液によるＣＲＰセルの洗浄のタイミングは、ＣＲＰセルの内壁面測定が完了し、検体液と試薬との混合液が排出された後のすすぎ洗浄の後、即ち、ＣＲＰセルでの全ての処理ステップが終了した後が好ましい。
図７に例示した従来のフローチャートでは、処理ステップの最後にステップａ９としてＣＲＰセルのすすぎ洗いが実行されている。このような処理ステップの場合には、希釈洗浄液によるＣＲＰセルの洗浄は、該ステップａ９の後に実行し、その後さらに、希釈液によるＣＲＰセルのすすぎ洗いを実行するのが好ましい態様である。

本発明において使用可能な洗浄液（原液）は、上記したラテックス試薬用の洗浄剤を含むものであればよい。該ラテックス試薬用の洗浄剤としては、例えば、次のものが挙げられる。
ブリッジ（Ｂｒｉｊ；ポリオキシエチレンラウリルエーテル系界面活性剤）、トリトン（Ｔｒｉｔｏｎ；ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル系界面活性剤）、ツイン（Ｔｗｅｅｎ；ポリオキシエチレンソルビタン系界面活性剤）などの界面活性剤。
エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などの有機キレート化剤。
クエン酸、リン酸、塩酸などの酸。
サビナーゼ（Novozymes社製）などのタンパク質分解酵素。
通常のラテックス試薬用の洗浄液（原液）の組成は、上記のような洗浄剤を純水やエタノールなどの溶媒に溶解させたものである。
洗浄液（原液）に占める洗浄剤の含有比率（即ち、原液の洗浄剤濃度）は、洗浄剤と希釈液の組み合わせによっても異なるが、０．０１重量％〜２．０重量％程度が好ましく、０．５重量％〜１．０重量％がより好ましい。
前記のような洗浄液は、例えば、ミノザイム５Ｄ、ミノザイムプラスなど、市販の洗浄液として入手可能である。

本発明では、毎回のＣＲＰ測定の後、サンプリングノズル洗浄器から希釈液を所定量だけＣＲＰセルに注入し、次に、洗浄液を所定量だけ注入するという手順によって、該セル内で所定の濃度に希釈した洗浄液を、該セルの内壁面に接触させることが重要である。
希釈洗浄液を得るために、先にＣＲＰセルに注入しておく希釈液の量、および、後から注入する洗浄液の量は、ＣＲＰセル内の満たすべき部分の容積と、目的の希釈洗浄液の濃度に応じて、適宜決定すればよい。
希釈洗浄液における洗浄液（原液）の含有比率は、３０重量％〜６０重量％が好ましく、４０重量％〜５０重量％がより好ましい。
洗浄液の種類に起因する洗浄効果の差異によって、ＣＲＰセルの内壁面にラテックス粒子が堆積する傾向（ＣＲＰ測定のための照射光の透過量が低下する傾向）があるならば、希釈の度合いを調節し、洗浄剤の濃度をより高くすればよい。逆に、ＣＲＰセルの内壁面のラテックス粒子を除去し過ぎる傾向（偽低値を示す傾向）があるならば、希釈の度合いを調節し、洗浄剤の濃度をより低くすればよい。

ＣＲＰセルに希釈洗浄液を注入する量（希釈液と洗浄液との合計の量）は、希釈洗浄液の液面がＣＲＰ測定のための照射光源から受光素子に至る光路の高さ以上となる量が好ましい。

本発明の好ましい態様では、既に希釈液が注入されたＣＲＰセルに対して、洗浄液が短時間で注入され、注入が完了した状態が所定維持され、次いで該洗浄液が短時間で排出される。これらの動作は、ポンプやバルブの制御によって行われる。
洗浄液を注入するときの時間は、３秒以下が好ましく、１〜２秒がより好ましい時間である。注入に要する時間が長すぎると、内壁面が過度に洗浄され、逆に、洗浄液を過度に強く噴射して注入に要する時間を短くすると、その洗浄液の強い噴射によって周囲に溢れ出すなどの問題が生じる。
洗浄液の注入が完了した後、その注入完了状態の維持時間は、１秒間〜５秒間が好ましく、１秒間〜２秒間がより好ましい時間である。ＣＲＰセルの内壁面に対する希釈洗浄液の接触時間は、この維持時間で調節することが好ましいが、注入時と排出時にも、希釈洗浄液がＣＲＰセルの内壁面に接触していることを考慮すべきである。
希釈洗浄液を排出する時間は、３秒以下が好ましく、２秒以下がより好ましい時間であり、できるだけ短い時間での排出が好ましい。
希釈洗浄液を上記のように極めて短い時間だけ、免疫測定用セルの内壁面に接触させることによって、該内壁面はラテックス粒子が適度に付着した状態が保たれ、免疫測定結果が偽低値となることを防止しながらも、定期洗浄の間隔をより大きくすることが可能になり、最も適切な条件下では、定期洗浄が不要になる。
洗浄液の注入時間、注入完了状態の維持時間、排出時間が、上記の範囲よりも長くなると、内壁面のラテックス粒子が過度に少なくなるので、偽低値が生じる場合があり、また、１検体当たりの処理時間も過度に長くなるので好ましくない。一方、注入完了状態の維持時間が上記の範囲よりも短いと、検体の測定を行うにつれて、内壁面にラテックス粒子が堆積し、従来ほど頻繁ではないが、ＣＲＰセルの内壁面の定期洗浄が必要となる。
洗浄液の種類や希釈濃度に起因する洗浄効果の差異によって、ＣＲＰセルの内壁面にラテックス粒子が堆積する傾向（ＣＲＰ測定のための照射光の透過量が低下する傾向）があるならば、内壁面への接触時間をより長くすればよい。逆に、ＣＲＰセルの内壁面のラテックス粒子を除去し過ぎる傾向（偽低値を示す傾向）があるならば、内壁面への接触時間をより短くすればよい。

上記のとおり、希釈洗浄液をＣＲＰセルの内壁面に接触させるときの重要な調整パラメータには、希釈洗浄液の濃度と、希釈洗浄液の接触時間がある。本発明の目的を達成するためには、これら２つのパラメータを互いに関連付けて調節する必要があり、濃度を高くすれば接触時間を短くすべきであり、濃度を低くすれば接触時間を長くすべきである。
本発明の重要な特徴は、毎回のＣＲＰ測定の後で所定濃度の希釈洗浄液をＣＲＰセルの内壁面に所定の微小時間だけ接触させることによって、毎回のＣＲＰ測定の後のＣＲＰセルの内壁面の状態（ラテックス粒子の堆積状態）を一定に維持することにある。内壁面の状態が一定に維持されるように、希釈洗浄液の上記濃度と、希釈洗浄液の上記接触時間とを適宜選択して組み合わせ、必要に応じて、上記した範囲の中で、濃度の増減、接触時間の増減の微調整を行えばよい。ただし、希釈洗浄液の濃度を高くすると、少しの接触時間の差でも結果が大きく変わるので、時間に関する動作制御が厳しくなる。一方、希釈洗浄液の濃度を低くすると、毎回の接触時間が長くなり、検体の処理数が減少する。濃度の増減、接触時間の増減の微調整の際には、これらの点も考慮すべきである。また、洗浄液の消費量、吐出量のばらつきによる洗浄効果のばらつき、洗浄に要する時間をも考慮して、適度な洗浄効果が得られかつ洗浄に要する時間が長くなり過ぎないように、濃度の増減量、接触時間の増減量を調整することが好ましい。

ＣＲＰセルにどのような経路にて洗浄液を注入するかは、特に限定はされないが、図１を用いて排出口について説明したように、ＣＲＰセル１９の排出口に電磁切替弁１９ｃ、１９ｄ、１９ｆを接続し、これら電磁切替弁の切替動作と定注器１９ｇとによって、洗浄液タンク１９ｈ内の洗浄液を排出口からＣＲＰセル１９内に注入され得る構成が好ましい。
ＣＲＰセルの下方から洗浄液を注入することによって、該ＣＲＰセルの排出口に接続した攪拌用の管路（電磁切替弁１９ｄから電磁切替弁１９ｃを経てＣＲＰセルに至るまでの管路）を洗浄液の原液で洗浄することができる。また、先に希釈液が注入されたＣＲＰセルの下方から洗浄液を注入することによって、洗浄液の注入と攪拌とを兼用することができる。

上記のように、洗浄液を下方の排出口からＣＲＰセルに注入する場合、全注入量を一度に短時間で注入しようとすると、圧損によって、洗浄液が上方に激しく噴出し、ＣＲＰセルの上部の開口から周囲に飛び散る場合がある。これは、ＣＲＰセル下部の攪拌ラインの配管の内径が洗浄液を注入する配管の内径に比べて小さいため、洗浄液の注入の際、攪拌ラインにより大きい圧力がかかり易くなるからである。よって、洗浄液の注入は、２〜４回程度（好ましくは３回程度）の複数回に分けて注入する構成が好ましい。

次に、１検体あたりに要する測定処理時間をより短縮することを可能とする好ましい態様について説明する。
ＣＲＰ測定を行うことによって、ラテックス粒子がＣＲＰセルの内壁面に付着するだけでなく、サンプリングノズルの外面、内面にも付着する。上記特許文献１には明記されていないが、従来では、ＣＲＰ測定が全て終わった後の、ラテックス粒子が固着したノズルの最終的な洗浄（ノズルの内面の洗浄をも含んだ十分な洗浄：以下、「ノズルの最終洗浄」ともいう）は、ＣＲＰセル１９を用いて行っていた。
従来、ノズルの最終洗浄にＣＲＰセルが用いられていた理由は、検体同士のコンタミネーションを避けるためである。
図５、図６の３つのセル（ＣＲＰセル１９、ＷＢＣセル２７、ＲＢＣセル２８）のなかで、ＣＲＰセルは、血球残存の可能性が最も少ないセルである。ＣＲＰセルには、溶血試薬Ｒ１によって全ての血球を溶解させた検体液が投入されるだけであるから、血球が存在する可能性はほとんど無い。しかし、ＲＢＣセルには赤血球が残存する可能性があり、また、廃液用チャンバを兼用するＷＢＣセルには、白血球が残存するだけでなく赤血球も残存する可能性がある。
よって、上記特許文献１の装置では、ＣＲＰ測定の終了後、ＣＲＰセル内を希釈液で洗い流した後で、ノズルの最終洗浄を行っている。このステップは、図７のフローチャートに、ステップａ６〜ａ８として示されたとおりであり、ＣＲＰ測定とノズルの最終洗浄とが直列的に行われている。
上記特許文献１の全血血球免疫測定装置に対して、さらに、白血球５分類を行なうことが可能なように専用の測定セルが加えられた装置が開発されてきたが、そのような免疫測定装置であっても、ノズルの最終洗浄では、清浄な希釈液をＣＲＰセルに吐出し吸引し吐出するというように希釈液の往復を行い、必要に応じて該希釈液を廃棄し再度希釈液の往復を繰り返すことが必要であり、その洗浄には約６０秒を要している。

図５、図６に示したような従来の全血血球免疫測定装置では、１検体あたりに要する処理時間は、約４分程度である。１検体あたり約４分という処理時間は、一般的な検査では何ら問題が無く好ましいものであるものの、１日に多量の検体を測定する必要のある機関では、たとえ数十秒でも時間短縮を行えば、１日の処理量は大きく増加する。
しかしながら、従来の全血血球免疫測定装置のサンプリングノズルの移動速度や吸引・吐出速度は適切であり、また、各処理ステップはいずれも必須であって、試薬による反応時間、測定時間、洗浄回数などには、削減できるような余地は無かった。

上記のような従来の構成に対して、本発明では、図１に示すように、ノズル３６の最終洗浄のための専用チャンバ（免疫測定用洗浄チャンバ）Ａを新たに設け、ＣＲＰセル内でＣＲＰ測定が行なわれている間に、該免疫測定用洗浄チャンバＡにおいてノズル３６の最終洗浄を同時進行させる構成を提案する。
この同時進行の構成によって、ノズルの最終洗浄に要していた約６０秒もの時間が短縮され、１検体あたりの処理時間は、従来の約４分から約３分となる。

免疫測定用洗浄チャンバＡの追加およびその使用（免疫測定との同時進行的なノズルの最終洗浄）によって、測定処理時間が大幅に短縮される。また、それだけでなく、血液（とりわけ血球）が付着したノズルの洗浄と、免疫測定のために溶血試薬と混合されて血液（とりわけ血球）が残存していない液体が付着したノズルの洗浄とを、完全に分離することができ、最終洗浄を免疫測定用洗浄チャンバＡで行うことによって、他の検体とのコンタミネーションをより厳密に排除することが可能になる。

また、免疫測定用洗浄チャンバＡを設けたことにより、ノズルの最終洗浄のみならず、免疫測定に関する種々の試薬の吸引の後にも、該免疫測定用洗浄チャンバを利用して、ノズルの外面の洗浄を適宜行うことが可能となる。
免疫測定用セル１９内において免疫測定が行われている間に、該免疫測定用洗浄チャンバ内において、該ノズル３６の外面および内面の洗浄が行われるようにコンピュータ制御される。

免疫測定用洗浄チャンバは、ノズルの全長のうち、試薬などに浸漬される部分を十分に受け入れる深さを有するものであればよい。そのような深さは、ノズルによっても異なるが、例えば、２０ｍｍ〜８０ｍｍ程度が好ましい深さである。
免疫測定用洗浄チャンバの胴体の形状は、特に限定はされないが、該チャンバ内に注入された液体が残存せず好ましく全て排出される点（廃液効率の点）からは円筒形が好ましい形状である。免疫測定用洗浄チャンバの胴体が円筒形である場合、その内径は、特に限定はされないが、１０ｍｍ〜２０ｍｍ程度が好ましい値である。免疫測定用洗浄チャンバの内径が過度に大きいと、洗浄液の消費量が多くなり、チャンバ内に洗浄のための希釈液などを所定のレベルまで満たす時間が長くなり、また、装置の小型化に不利となるなど好ましくない。
一方、該内径が過度に小さいと、ノズルを水平方向に移動させるためのキャリッジ（ベルトなどの移動機構）に求められる停止位置の精度が厳しくなり、チャンバのにノズルが降下しないことによる、ノズルおよび当該洗浄用チャンバの破損や、希釈液が飛散するリスクが高くなり好ましくない。

免疫測定用洗浄チャンバの材料は、耐薬品性や加工性を有するような材料であればよく、例えば、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリエチレンテレフタラート（ＰＥＴ）、ポリプロピレン（ＰＰ）などが挙げられ、コスト、加工性の点からは、ＰＶＣが好ましい材料として挙げられる。

免疫測定用洗浄チャンバの位置は、図１に示すように、免疫測定用セル（ＣＲＰセル）の隣であって、かつ、血球計数測定セルと免疫測定用セルとの間であることが、ノズルの移動を最小にする点で好ましい。

免疫測定用洗浄チャンバの下端部には、図１に破線で示すように、ＣＲＰセルと同様の排出管が接続され、廃液が電磁弁装置１２およびポンプＰを通じて廃液容器１８に送られる構成となっている。

免疫測定用洗浄チャンバでのノズルの最終洗浄の工程は、従来、ＣＲＰセルにおいて行っていた洗浄と同様である。即ち、清浄な希釈液を該チャンバに所定量吐出し、それを吸引し、再び吐出するというように希釈液の往復（好ましくは２〜３回程度の往復）を行うことによってノズルの内面の洗浄を行う。必要に応じて汚れた希釈液を廃棄し、新たな希釈液を供給して該往復を繰り返してもよい。好ましい態様では、希釈液の廃棄は、１〜２回程度である。このとき、ノズル洗浄器を作動させてもよい。
また、免疫測定用洗浄チャンバ内で、Ｒ１〜Ｒ３試薬を吸引した段階でノズルを洗浄することもできる。

希釈液は、生理食塩水やリン酸緩衝希釈液など、測定のための検体の希釈およびラテックス試薬（原液）の希釈に使用可能な液体であればよい。
ノズル洗浄器によるノズル外面の洗浄や、免疫測定用洗浄チャンバでのノズルの最終洗浄は、希釈液のみによるものであってよい。

免疫測定用洗浄チャンバは、ノズルの最終洗浄のみならず、ＣＲＰセルに対する各試薬の分注のステップにおいても、ノズル洗浄器によるノズル外面の洗浄の受け口として用いてよい。換言すると、免疫測定用の各試薬の分注のステップにおいて、ノズルを免疫測定用洗浄チャンバの直上に移動させ、そこでノズル洗浄器が作動するようにしてもよい。
免疫測定用洗浄チャンバを用いた前記のような構成によって、チャンバ廃液動作の並行動作化や、キャリッジ移動距離短縮による、動作時間の短縮の利点がある。

本発明の好ましい態様では、図１に示すように、検体洗浄用チャンバＢがさらに設けられる。該検体洗浄用チャンバは、血球計数測定のための分注を行い血液が付着している可能性のある状態となっているノズルを洗浄するための専用のチャンバである。
検体洗浄用チャンバの形状寸法、材料は、上記した免疫測定用洗浄チャンバと同様であってよい。検体洗浄用チャンバの下端部にも、図１に破線で示すように、排出管が接続され、廃液が電磁弁装置１２およびポンプＰを通じて廃液容器１８に送られる構成となっている。

図１に示すように、免疫測定用洗浄チャンバと検体洗浄用チャンバとを使い分け、血液が付着している可能性のない状態のノズルは免疫測定用洗浄チャンバで洗浄し、血液が付着している可能性のある状態のノズルは検体洗浄用チャンバで洗浄することで、検体間のコンタミナーションがより高度に防止され、また、並行動作化による１検体当たりの処理時間の短縮といった利点も得られる。

図２は、図１に示した免疫測定用洗浄チャンバＡおよび検体洗浄用チャンバＢを用いたノズルの洗浄の順序動作の一例を示したフローチャートである。
当該装置の各部の動作は、制御部（コンピュータ）の予め定められた命令に応じて、プローブユニットがノズルを水平・垂直に移動させ、電磁弁部が吸引と吐出を行う動作である。以下の説明では、ノズルの挙動については、重要な動きの場合を除いて、〔ある位置から上方に移動し、水平に移動し、下方に移動して次の位置に到達する〕などといった細かい動きの描写は省略し、単に〔ある位置から次の位置へと移動する〕と表現する。

先ず、ユーザーによるスタートスイッチの入力操作によって、処理ステップが開始されると、ノズルはステップｓ１の動作を開始する。スタートスイッチの入力操作は、押しボタンの押し込みや他のコンピュータとの通信による遠隔操作など、どのような態様であってもよく、例えば、図３における検体容器セット部Ｃのフタを閉じる操作がスタートスイッチＯＮを兼ねていてもよい。

（ステップｓ１）
先ず、ホームポジションにあったノズル３６が、ＣＲＰ測定のために動作し、Ｒ１試薬容器２０に移動し、Ｒ１試薬を吸引する。
該吸引の後、該ノズルは免疫測定用洗浄チャンバＡ上へと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される（ノズルは洗浄のために上下する）。
次に、ノズルは検体容器４に移動し、ＣＲＰ測定のために、検体容器４内の検体（全血）を吸引する。
次に、ノズルは、検体洗浄用チャンバＢへと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される（ノズルは洗浄のために上下する）。
次に、ノズルは、ＣＲＰセルへと移動し、吸引した検体とＲ１試薬とをＣＲＰセルに吐出する。その後、図１に好ましい態様として例示した定注器１９ｅにて、ＣＲＰセル内の液を、引き込み、押し出し、引き込むというように往復させて攪拌する（その管路を作り出すように電磁切替弁１９ｃ、１９ｄが切替え動作を行なう）。
次に、ノズルは、検体洗浄用チャンバＢへと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される。

（ステップｓ２）
ノズルは、検体容器４に移動し、血球計数測定のために、検体容器４内の検体（全血）を吸引する。
次に、ノズルは、検体洗浄用チャンバＢへと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される。
次に、ノズルは、ＷＢＣセル２７ｄへと移動し、吸引した検体を該セル内に分注する。同時に該セルの側面部に接続された配管（図示せず）から希釈液を該セル内に注入し、該セルの下部に接続された配管（図示せず）から、ポンプ（図示せず）にて空気を吐出して該セル内を攪拌する。
次に、ノズルは、ＢＡＳＯセル２７ａへと移動し、吸引した検体を該セル内に分注する。同時に該セルの側面部に接続された配管（図示せず）から好塩基球溶血剤を該セル内に注入し、該セルの下部に接続された配管（図示せず）から、ポンプ（図示せず）にて空気を吐出して該セル内を攪拌する。
次に、ノズルは、ＬＭＮＥセル２７ｂへと移動し、吸引した検体を該セル内に分注する。同時に該セルの側面部に接続された配管（図示せず）から好酸球測定試薬を該セル内に注入し、該セルの下部に接続された配管（図示せず）から、ポンプ（図示せず）にて空気を吐出して該セル内を攪拌する。
次に、ノズルは、検体洗浄用チャンバＢへと移動し、その内面および外面がノズル洗浄器によって洗浄される。

上記ステップｓ２においてＷＢＣセル２７ｄ内で希釈された検体液の一部をＲＢＣセル２７ｃへ移送し、該ＲＢＣセルに接続された配管（図示せず）から希釈液を該セルに注入し、上記と同様、空気を吐出して該セル内を攪拌して希釈を完了する。その後、ＷＢＣセルにヘモグロビン溶血試薬を注入し、上記と同様、空気を吐出して該セル内を攪拌し、検体を溶血する。また、ＬＭＮＥセルに接続された配管（図示せず）から希釈液を該セルに注入し、上記と同様、空気を吐出して該セル内を攪拌し、希釈を完了する。

（ステップｓ２１）
ＢＡＳＯセル２７ａでは、下部に設けられた電気抵抗法を行なう装置を検体液が通過し、好塩基球の計数が行なわれる。
ＬＭＮＥセル２７ｂでは、上部に設けられた集光型フローインピーダンス法を行う装置を検体液が通過し、リンパ球（Ｌ）、単球（Ｍ）、好中球（Ｎ）、好酸球（Ｅ）の各容積と吸光度が測定される。測定されタデータは、制御部に送られ、ＬＭＮＥマトリクスなどによる４分類のための計数処理が行われる。
ＲＢＣセル２７ｃでは、下部に設けられた電気抵抗法を行う装置を検体液が通過し、各赤血球や血小板数の数および容積が測定される。
ＷＢＣセル２７ｄでは、比色法（ノンシアン法）における吸光光度法を行うための光学装置により、ヘモグロビン濃度が測定される。また、下部に設けられた電気抵抗法を行なう装置を検体が通過し、白血球の数が測定される。測定されたデータは、制御部に送られ、度数分布の処理が行われる。

（ステップｓ２２）
ＢＡＳＯセル２７ａにおける測定の後処理のために、ノズルは該ＢＡＳＯセルに移動し、ノズル洗浄器から希釈液が該セル内に注入される。

（ステップｓ３）
ステップｓ２１での処理と並行して、ノズルは、ＣＲＰ測定のためにＲ２試薬容器に移動し、Ｒ２試薬を吸引する。
次に、ノズルは、免疫測定用洗浄チャンバＡ上へと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される。
次に、ノズルは、ＣＲＰセルへと移動し、吸引したＲ２試薬をＣＲＰセルに吐出する。
次に、ノズルは、免疫測定用洗浄チャンバＡ上へと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される。

（ステップｓ４）
次に、ノズルは、ＣＲＰ測定のためにＲ３試薬容器に移動し、Ｒ３試薬を吸引する。
次に、ノズルは、免疫測定用洗浄チャンバＡ上へと移動し、その外面がノズル洗浄器によって洗浄される。
次に、ノズルは、ＣＲＰセルへと移動し、吸引したＲ３試薬をＣＲＰセルに吐出する。
次に、ノズルは、下記ステップｓ３１における自体の洗浄のために、免疫測定用洗浄チャンバＡ上へと移動する。

（ステップｓ５）
ＣＲＰセルでのＣＲＰ測定が開始される。測定終了までの処理時間は、約６０秒である。

（ステップｓ３１）
ＣＲＰセルでのＣＲＰ測定が開始されると、ノズルは免疫測定用洗浄チャンバＡの内部へと移動し、希釈液で該ノズルの内面および外面が十分に洗浄される。ここでは、希釈液を免疫測定用洗浄チャンバＡに吐出し吸引し吐出するというように希釈液の往復を行い、必要に応じて該希釈液を廃棄し再度希釈液の往復が繰り返される。

（ステップｓ６）〜（ステップｓ７）
ノズルの最終洗浄が終了し、かつ、ステップｓ６におけるＣＲＰ測定が終了すると、ノズルはＣＲＰセルに移動し、ステップｓ７として、ＣＲＰセル内を希釈液で洗浄する。

（ステップｓ８）〜（ステップｓ９）〜処理ステップの終了
ＣＲＰセル内の希釈液による洗浄が終了すると、ステップｓ８として、ノズル洗浄器から希釈液がＣＲＰセルに所定量だけ注入される。次に、電磁切替弁が作動し、ＣＲＰセルに洗浄液が規定の液面高さまで注入されて希釈洗浄液が作り出され、その後、所定時間だけ維持された後、すみやかに排出される。
次に、ステップｓ９として、ＣＲＰセル内が希釈液ですすぎ洗いされ、処理ステップが完了する。

以上、図２のフローチャートに沿って説明を行ったとおり、本発明では、１つの検体についての免疫測定処理の最後に、ＣＲＰセルに希釈液の注入とそれに続く洗浄液の注入が行われ、そこで作り出された希釈洗浄液がＣＲＰセルの内壁面に接触するように制御されている。これによって、定期洗浄の間隔が大幅に伸び、好ましい態様では、定期洗浄が無用になる。
さらには、免疫測定用洗浄チャンバが新たに設けられ、さらには検体洗浄用チャンバが設けられ、これらが血液の付着の有無に応じて完全に使い分けられるように制御されている。よって、免疫測定用洗浄チャンバには血液の混入の可能性が十分に小さくなっている。また、免疫測定用洗浄チャンバ内での十分な時間をかけたノズルの最終洗浄が、全処理ステップに影響しないようになっている。

〔実験例〕
図１に示す構成の装置を用い、図２に示すフローに従って、１検体毎に測定の最後にＣＲＰセルの内壁面に洗浄液を作用させ、各検体毎のＣＲＰ測定におけるプランク吸光度を測定し、その変化の度合いを調べた。
用いたＲ３試薬は、ブロイムキットＣＲＰ（株式会社堀場製作所製）のＲ３試薬（抗ヒトＣＲＰポリクローナル抗体(ウサギ)感作ラテックス（ポリスチレン粒子）を含有する試薬）である。
用いた洗浄液は、主要界面活性剤としてブリッジ（ポリオキシエチレンラウリルエーテル）を０．２５重量％含有し、酵素としてサビナーゼを０．５重量％含有する洗浄液である。
洗浄液をＣＲＰセルに注入する際には、先に希釈液（ディルエント）を注入して希釈した。洗浄液と希釈液の混合比率は、体積比で４：５（希釈洗浄液に占める洗浄液の濃度は約４５重量％）である。
洗浄液の注入時間は１秒、維持時間は２秒、排出時間は１秒とした。
最初の検体の測定におけるプランク吸光度を１としたときの、その後の検体の測定におけるプランク吸光度の比率を図４のグラフに印「■」でプロットして示す。
同図のグラフから明らかなとおり、プランク吸光度は、最初の検体の測定におけるプランク吸光度と比べて著しい低下を示さず、検体数１００を越えても定期洗浄が必要無いことがわかった。
また、ラテックス粒子の過度の除去に起因する偽低値も生じないこともわかった。

〔比較例〕
１検体毎の測定の最後のＣＲＰセルの洗浄を、従来どおり希釈液だけで行ったこと以外は、上記の実験例と全く同じ条件にて、各検体毎のＣＲＰ測定におけるプランク吸光度を測定し、その変化の度合いを調べた。
希釈液によるＣＲＰセルの洗浄の仕方は、従来の一般的な洗浄法に従い、該セルの上方から希釈液を注入し排出する単純な洗浄を２回繰り返すというものである。。
上記実験例と同様、最初の検体の測定におけるプランク吸光度を１としたときの、その後の検体の測定におけるプランク吸光度の比率を図４のグラフに印「◇」でプロットして示す。
同図のグラフから明らかなとおり、プランク吸光度は、最初の検体の測定におけるプランク吸光度と比べて著しく低下し、定期洗浄が必要であった。

本発明によって、ラテックス粒子の過度の除去に起因する偽低値の発生を抑制しながらも、ラテックス粒子の堆積を抑制でき、よって、ＣＲＰセルの定期洗浄の間隔をより大きくすることができ、該定期洗浄を無くすことも可能になった。
また、本発明の好ましい態様である免疫測定用洗浄チャンバによるノズルの最終洗浄の並行処理によって、従来の処理ステップを全て維持しながらも、１検体あたりに要する測定処理時間を大幅に短縮することも可能となった。
これらによって、多量の検体を測定する医療機関等に対して、好ましい全血血球免疫測定装置を提供することが可能になった。

４ 検体容器
１９ 免疫測定用セル（ＣＲＰセル）
１９ｃ 電磁切替弁
１９ｄ 電磁切替弁
１９ｅ 攪拌用の定注器
１９ｆ 電磁切替弁
１９ｇ 洗浄液注入用の定注器
１９ｈ 洗浄液タンク
２０ 試薬容器（Ｒ１試薬）
２１ 試薬容器（Ｒ２試薬）
２２ 試薬容器（Ｒ３試薬）
２７ａ〜２７ｄ 血球計数測定用セル
３６ サンプリングノズル
３９ サンプリングノズル洗浄器
Ａ 免疫測定用洗浄チャンバ
Ｂ 検体洗浄用チャンバ

Claims (5)

1. 免疫測定用セルでの免疫測定と、血球計数測定用セルでの血球計数測定が行なわれるように構成された全血血球免疫測定装置であって、
   免疫測定用セルを有する免疫測定部と、免疫測定用のラテックス試薬を収容した試薬容器および免疫測定用の他の必要試薬を収容した試薬容器と、血球計数測定用セルを有する血球計数測定部とが、それぞれ所定位置に配置され、単一のサンプリングノズルが前記所定位置に移動して検体および試薬の吸引と吐出を行ない、免疫測定用セルでの免疫測定と、血球計数測定用セルでの血球計数測定が行なわれるように構成されており、
   前記ラテックス試薬用の洗浄剤を含有する洗浄液を収容した洗浄液タンクが設けられており、
   前記免疫測定用セルにおいて、１つの検体に関する免疫測定が完了し該検体が排出される毎に、該免疫測定用セルには、先に、希釈液が所定量だけ注入され、次に、前記洗浄液が所定量だけ注入され、それによって所定の濃度に希釈された前記洗浄液が該免疫測定用セルの内壁面に接触する状態とされ、その後、該希釈された前記洗浄液が排出される構成となっている、
   前記全血血球免疫測定装置。
2. 免疫測定用セルの底部には、該セル中の液を排出するための排出口が設けられており、該排出口には電磁切替弁が接続され、該電磁切替弁の作動によって、該排出口を通じて、上記洗浄液が免疫測定用セル内に注入され得る構成となっている、請求項１記載の全血血球免疫測定装置。
3. 上記洗浄液が免疫測定用セル内に注入される際に、全注入量が複数回に分けて注入される構成となっている、請求項２記載の全血血球免疫測定装置。
4. 上記サンプリングノズルには、サンプリングノズル洗浄器が付帯しており、該サンプリングノズル洗浄器は希釈液を吐出し、該サンプリングノズルの外面を該希釈液で洗浄するよう構成されている、請求項１〜３のいずれか１項に記載の全血血球免疫測定装置。
5. 希釈液が所定量だけ注入された免疫測定用セルに、上記洗浄液が、３秒以下の時間で注入され、次いで、所定の濃度に希釈された上記洗浄液が免疫測定用セルの内壁面に接触する状態が、１〜５秒間維持され、次いで、前記の希釈された洗浄液が、３秒以下の時間で排出されるように構成されている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の全血血球免疫測定装置。