JP2013519721A5 - - Google Patents

Claims (27)

1. （ｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外部分の全部または一部分と、
   （ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外部分の全部または一部分と
   を含む組換えＭＨＣクラスＩＩ分子であって、
   （ｉ）および（ｉｉ）が、機能的ペプチド結合ドメインを提供し、かつ（ｉ）および（ｉｉ）が、前記α鎖のα２ドメイン中に位置するシステイン残基と前記β鎖のβ２ドメイン中に位置するシステイン残基との間のジスルフィド結合により結合しており、前記システイン残基が、天然ＭＨＣクラスＩＩのα２およびβ２ドメイン中には存在せず、かつ前記組換え分子が繊維状ファージ表面に発現されている、組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
2. 前記ジスルフィド結合が、マウスＩ−ＥアイソタイプのＰｒｏ９６α ² −Ｓｅｒ１１９β ² （１位）、Ｓｅｒ９５α ² −Ｓｅｒ１２１β ² （２位）もしくはＡｒｇ９４α ² −Ａｓｎ１５１β ² （３位）または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプにおいて相当する位置のシステイン残基間にある、請求項１に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
3. 前記ジスルフィド結合が、マウスＩ−ＥアイソタイプのＳｅｒ９５α²−Ｓｅｒ１２１β²（２位）または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプにおいて相当する位置のシステイン残基間にある、請求項２に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
4. さらに参照配列Ｈ−２ＥＢ ^* ０１（配列番号２）の３８、４２もしくは１０６の位置に対応する１つ以上のシステイン残基または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプの相当する位置の１つ以上のシステイン残基が除去されている、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
5. 前記組換え分子が、ファージ表面タンパク質ｇｐＩＩＩ、ｇｐＶＩＩ、ｇｐＶＩＩＩまたはｇｐＩＸとの融合体として発現されている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
6. 前記ファージ表面タンパク質がｇｐＩＸである、請求項５に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
7. （ｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外部分の全部または一部分と、
   （ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外部分の全部または一部分と
   を含む組換えＭＨＣクラスＩＩ分子であって、
   （ｉ）および（ｉｉ）が、機能的ペプチド結合ドメインを提供し、かつ（ｉ）および（ｉｉ）が、前記α鎖のα２ドメイン中に位置するシステイン残基と前記β鎖のβ２ドメイン中に位置するシステイン残基との間のジスルフィド結合により結合しており、前記システイン残基が、天然ＭＨＣクラスＩＩのα２およびβ２ドメイン中には存在せず、かつ前記組換え分子がロイシンジッパーモチーフを含まない、組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
8. 前記ジスルフィド結合が、マウスＩ−ＥアイソタイプのＰｒｏ９６α ² −Ｓｅｒ１１９β ² （１位）、Ｓｅｒ９５α ² −Ｓｅｒ１２１β ² （２位）もしくはＡｒｇ９４α ² −Ａｓｎ１５１β ² （３位）または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプにおいて相当する位置のシステイン残基間にある、請求項７に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
9. 前記ジスルフィド結合が、マウスＩ−ＥアイソタイプのＳｅｒ９５α ² −Ｓｅｒ１２１β ² （２位）または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプにおいて相当する位置のシステイン残基間にある、請求項８に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
10. さらに参照配列Ｈ−２ＥＢ ^* ０１（配列番号２）の３８、４２もしくは１０６の位置に対応する１つ以上のシステイン残基または別のＭＨＣクラスＩＩアイソタイプの相当する位置の１つ以上のシステイン残基が除去されている、請求項７〜９のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
11. 前記分子が可溶性分子である、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
12. 前記分子の（ｉ）または（ｉｉ）が免疫グロブリンのＦｃ部分と融合している、請求項１１に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
13. 前記分子が多量体である、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
14. 前記分子の（ｉ）および（ｉｉ）が、マウスＭＨＣクラスＩＩ分子またはヒトＭＨＣクラスＩＩ分子に由来する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
15. 前記分子の（ｉ）および（ｉｉ）が、ヒトＭＨＣクラスＩＩ分子に由来する、請求項１４に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
16. 前記分子が細菌宿主により産生されている、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
17. 前記細菌宿主が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）である、請求項１６に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
18. 前記細菌宿主が、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）Ｋ１２派生物である、請求項１７に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
19. 前記細菌宿主が、ＢＬ２１表現型を有する大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）またはその派生物である、請求項１７に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
20. 前記ジスルフィド結合が、ＭＨＣクラスＩＩ分子安定化の唯一の手段を提供する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
21. 前記分子がＴ細胞を染色することができる、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
22. 前記分子が前記ペプチド結合ドメインと結合したペプチドをさらに含む、請求項１〜２１のいずれか１項に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
23. 原核宿主で発現させることができる組換えＭＨＣクラスＩＩ分子であって、
    （ｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外部分の全部または一部分と、
    （ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外部分の全部または一部分と
    を含み、
    （ｉ）および（ｉｉ）が、機能的ペプチド結合ドメインを提供し、かつ（ｉ）および（ｉｉ）が、前記α鎖のα２ドメイン中に位置するシステイン残基と前記β鎖のβ２ドメイン中に位置するシステイン残基との間のジスルフィド結合により結合しており、前記システイン残基が、天然ＭＨＣクラスＩＩのα２およびβ２ドメイン中には存在しない組換えＭＨＣクラスＩＩ分子。
24. （ｉ）ＭＨＣクラスＩＩα鎖の細胞外部分の全部または一部分と、
    （ｉｉ）ＭＨＣクラスＩＩβ鎖の細胞外部分の全部または一部分と
    を含む組換えＭＨＣクラスＩＩ分子の作製方法であって、
    （ｉ）および（ｉｉ）が、機能的ペプチド結合ドメインを提供し、かつ（ｉ）および（ｉｉ）が、前記α鎖のα２ドメイン中に位置するシステイン残基と前記β鎖のβ２ドメイン中に位置するシステイン残基との間のジスルフィド結合により結合しており、前記システイン残基が、天然ＭＨＣクラスＩＩのα２およびβ２ドメイン中には存在せず、
    前記組換え分子を原核宿主で発現させることを含む、方法。
25. Ｔ細胞により認識され得る抗原ペプチドエピトープを同定する方法であって、
    前記方法が、請求項２２に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子をＴ細胞受容体と接触させることと、
    前記組換えＭＨＣクラスＩＩ分子と前記Ｔ細胞受容体との結合を検出することと、
    を含む方法。
26. 試料中の抗原特異的Ｔ細胞を検出する方法であって、
    前記方法が、請求項２２に記載の組換えＭＨＣクラスＩＩ分子を前記試料と接触させることと、
    前記組換えＭＨＣクラスＩＩ分子と前記Ｔ細胞との結合を検出することと、
    を含む方法。
27. 前記方法が、インビトロで試料中の疾患特異的Ｔ細胞の存在を検出して疾患の有無を診断するために使用される、請求項２６に記載の方法。