JP2013516633A5 - - Google Patents
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Description
このような「高純度」粒子は、複数のVP1五量体、例えば少なくとも5、10、20、30、40、50、60、70、72個のVP1五量体、100個以下のVP1五量体を含有する。このような高純度粒子は、例えば二重ろ過を含む方法によって得ることができる。例えば、ある実施態様において、VLPの高純度標品は、例えばスクロースクッション法を通じて、遠心によって少なくとも2回粒子を精製することによって得られる。一般に、HPVLP標品は、指定の対照試料を用いてELISAアッセイにおいてその活性により同定することができる。ある場合においては、このような対照試料は、陰性対照及び/又は低レベルのJCV抗体を含有する対照試料である。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
a.対象から生体試料を得ることと;
b.高純度VP1粒子(HPVLP)と該試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合に適切な条件下で、HPVLPと該試料を接触させることと;
c.HPVLPに対する該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
d.参照用セットと検出レベルを相関させることと、
を含み、該参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、
方法。
(項目2)
前記偽陰性率が1%以下である、項目1に記載の方法。
(項目3)
HPVLPの少なくとも20%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、項目1に記載の方法。
(項目4)
HPVLPの少なくとも70%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、項目1に記載の方法。
(項目5)
前記HPVLPが固体基質上に固定化される、項目1に記載の方法。
(項目6)
HPVLPが基本的にVP1ポリペプチドからなる、項目1に記載の方法。
(項目7)
HPVLPが、VP2又はVP3のうち少なくとも1つをさらに含む、項目1に記載の方法。
(項目8)
前記HPVLP中のVP1が組み換えVP1である、項目1に記載の方法。
(項目9)
前記HPVLP中の少なくとも1つのVP1が突然変異体VP1である、項目1に記載の方法。
(項目10)
前記生体試料が血清である、項目1に記載の方法。
(項目11)
前記試料が、免疫調節物質を処方されている対象、免疫調節物質を摂取することを検討している対象又は進行性多巣性白室脳症(PML)に罹患している疑いのある対象由来である、項目1に記載の方法。
(項目12)
前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象においてPMLのリスクが上昇していることを示す、項目1に記載の方法。
(項目13)
前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補ではないことを示す、項目1に記載の方法。
(項目14)
HPVLPへのJCV抗体結合を検出できないことが、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であることを示す、項目1に記載の方法。
(項目15)
HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であり、免疫調節物質による治療時に有害症状について監視が強化されることを示す、項目1に記載の方法。
(項目16)
前記有害症状がPMLの発現を示す、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記免疫調節物質による治療を受けるものと認定された対象が、前記免疫調節物質をさらに投与される、項目14に記載の方法。
(項目18)
初回の検査で生体試料がJCV抗体を有しないと判定された対象が、該初回の検査後、JCV抗体の存在について少なくとも年に1回再検査を受ける、項目1に記載の方法。
(項目19)
生体試料がJCV抗体を有すると判定された対象が、続いて、後日、JCV抗体を有さないと判定される、項目1に記載の方法。
(項目20)
前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であると判定される、項目19に記載の方法。
(項目21)
前記対象が、免疫調節物質による治療時に有害症状について監視強化を受ける、項目20に記載の方法。
(項目22)
前記免疫調節物質がナタリズマブである、項目11又は13から15に記載の方法。
(項目23)
免疫調節物質を処方されているか又は免疫調節物質を摂取することを検討している対象が、前記免疫調節物質を以前投与されたことがない、項目11に記載の方法。
(項目24)
前記対象が、前記免疫調節物質の投与を以前に1回以上受けている、項目11に記載の方法。
(項目25)
e.段階(b)の前に、前記対象からの生体試料の一部を溶液中でHPVLPと接触させ、段階(b)のHPVLPが固体基質に結合され、それにより二次試料が得られ;
f.(b)と同じ条件下でHPVLPと該二次試料を接触させ;
g.該二次試料中でのHPVLPへのJCV抗体結合レベルを検出し;
h.該二次試料中のJCV抗体の検出レベルを、HPVLPなしで該溶液とインキュベーションした場合の該生体試料中の結合レベルと比較することをさらに含み、
溶液インキュベーション試料と比較して、HPVLPとともに予めインキュベーションした試料における検出レベルが低下していることが、該試料がJCV抗体陽性であることを示し、検出レベルが不変であることが、該試料中にJCV抗体がないことを示す、項目1に記載の方法。
(項目26)
MS及びCD患者における使用について検証された、項目25に記載の方法。
(項目27)
HPVLPと、JCV抗体レベルを特定するためにアッセイを行うための少なくとも1つの試薬と、を含む、キット。
(項目28)
基本的にVP1五量体よりもサイズが大きいVP1含有粒子からなる、VP1粒子を含む溶液。
(項目29)
VP1五量体以下のサイズであるVP1粒子を溶液から除去する方法を含む、VP1粒子の溶液を調製する方法。
(項目30)
a.対象から生体試料を得ることと;
b.HPVLPへの該試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合に対して適切な条件下で、高純度VP1粒子(HPVLP)と該生体試料を接触させることと;
c.HPVLPへの該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
d.参照用セットと検出レベルを相関させることと、を含み、JCV抗体結合が検出される場合は該対象のPMLのリスクが高い、
PMLを発現するリスクのある対象を特定する方法。
(項目31)
前記参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、項目29に記載の方法。
(項目32)
a.対象由来の試料中の抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.該試料中の抗JCV抗体レベルに従い、該対象に対するリスクレベルを判定することと、を含む、対象においてPMLリスクを特定する方法。
(項目33)
前記対象が、抗VLA4治療を受けているか又は抗VLA4治療を受けるための候補である、項目32に記載の方法。
(項目34)
前記抗VLA4治療がナタリズマブである、項目33に記載の方法。
(項目35)
前記対象が多発性硬化症又はクローン病と診断されている、項目32に記載の方法。
(項目36)
前記抗JCV抗体レベルが、1段階アッセイ又は2段階アッセイを用いて測定される、項目32に記載の方法。
(項目37)
前記1段階アッセイ又は前記2段階アッセイがELISAアッセイを含む、項目36に記載の方法。
(項目38)
c.段階(a)の初回試料の後の日付からの試料において、前記対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.段階(a)の初回試料からの試料中のレベルと後日からの試料中の抗JCV抗体レベルを比較することと;
e.段階(a)の初回試料の時間と比較して後の日付で該対象のPMLのリスクが上昇しているか否かを判定することと、をさらに含む、項目32に記載の方法。
(項目39)
a.第一の日付からの試料を用いて対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.第一の日付の対象の抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと;
c.第二の日付からの試料を用いて該対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.第二の日付の対象における抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと、を含む、対象においてPMLリスクを監視する方法。
(項目40)
a.VP1核酸を含む細胞を提供することと;
b.VP1を発現するための条件下で該細胞を培養することと;
c.該細胞を溶解することと;
d.該細胞溶解液をヌクレアーゼで処理することと;
e.該溶解液から細胞残屑を沈殿させることと;
f.塩析沈殿によって夾雑タンパク質を除去することと;
g.VP1含有上清を濃縮することと;
h.濃縮したVP1含有上清をダイアフィルトレーション処理することと;
iイオン交換精製によりVP1含有溶液を精製し、それによりHPVLPを含む標品を調製することと、
を含む、HPVLPを含む標品を調製する方法。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
a.対象から生体試料を得ることと;
b.高純度VP1粒子(HPVLP)と該試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合に適切な条件下で、HPVLPと該試料を接触させることと;
c.HPVLPに対する該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
d.参照用セットと検出レベルを相関させることと、
を含み、該参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、
方法。
(項目2)
前記偽陰性率が1%以下である、項目1に記載の方法。
(項目3)
HPVLPの少なくとも20%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、項目1に記載の方法。
(項目4)
HPVLPの少なくとも70%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、項目1に記載の方法。
(項目5)
前記HPVLPが固体基質上に固定化される、項目1に記載の方法。
(項目6)
HPVLPが基本的にVP1ポリペプチドからなる、項目1に記載の方法。
(項目7)
HPVLPが、VP2又はVP3のうち少なくとも1つをさらに含む、項目1に記載の方法。
(項目8)
前記HPVLP中のVP1が組み換えVP1である、項目1に記載の方法。
(項目9)
前記HPVLP中の少なくとも1つのVP1が突然変異体VP1である、項目1に記載の方法。
(項目10)
前記生体試料が血清である、項目1に記載の方法。
(項目11)
前記試料が、免疫調節物質を処方されている対象、免疫調節物質を摂取することを検討している対象又は進行性多巣性白室脳症(PML)に罹患している疑いのある対象由来である、項目1に記載の方法。
(項目12)
前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象においてPMLのリスクが上昇していることを示す、項目1に記載の方法。
(項目13)
前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補ではないことを示す、項目1に記載の方法。
(項目14)
HPVLPへのJCV抗体結合を検出できないことが、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であることを示す、項目1に記載の方法。
(項目15)
HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であり、免疫調節物質による治療時に有害症状について監視が強化されることを示す、項目1に記載の方法。
(項目16)
前記有害症状がPMLの発現を示す、項目15に記載の方法。
(項目17)
前記免疫調節物質による治療を受けるものと認定された対象が、前記免疫調節物質をさらに投与される、項目14に記載の方法。
(項目18)
初回の検査で生体試料がJCV抗体を有しないと判定された対象が、該初回の検査後、JCV抗体の存在について少なくとも年に1回再検査を受ける、項目1に記載の方法。
(項目19)
生体試料がJCV抗体を有すると判定された対象が、続いて、後日、JCV抗体を有さないと判定される、項目1に記載の方法。
(項目20)
前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であると判定される、項目19に記載の方法。
(項目21)
前記対象が、免疫調節物質による治療時に有害症状について監視強化を受ける、項目20に記載の方法。
(項目22)
前記免疫調節物質がナタリズマブである、項目11又は13から15に記載の方法。
(項目23)
免疫調節物質を処方されているか又は免疫調節物質を摂取することを検討している対象が、前記免疫調節物質を以前投与されたことがない、項目11に記載の方法。
(項目24)
前記対象が、前記免疫調節物質の投与を以前に1回以上受けている、項目11に記載の方法。
(項目25)
e.段階(b)の前に、前記対象からの生体試料の一部を溶液中でHPVLPと接触させ、段階(b)のHPVLPが固体基質に結合され、それにより二次試料が得られ;
f.(b)と同じ条件下でHPVLPと該二次試料を接触させ;
g.該二次試料中でのHPVLPへのJCV抗体結合レベルを検出し;
h.該二次試料中のJCV抗体の検出レベルを、HPVLPなしで該溶液とインキュベーションした場合の該生体試料中の結合レベルと比較することをさらに含み、
溶液インキュベーション試料と比較して、HPVLPとともに予めインキュベーションした試料における検出レベルが低下していることが、該試料がJCV抗体陽性であることを示し、検出レベルが不変であることが、該試料中にJCV抗体がないことを示す、項目1に記載の方法。
(項目26)
MS及びCD患者における使用について検証された、項目25に記載の方法。
(項目27)
HPVLPと、JCV抗体レベルを特定するためにアッセイを行うための少なくとも1つの試薬と、を含む、キット。
(項目28)
基本的にVP1五量体よりもサイズが大きいVP1含有粒子からなる、VP1粒子を含む溶液。
(項目29)
VP1五量体以下のサイズであるVP1粒子を溶液から除去する方法を含む、VP1粒子の溶液を調製する方法。
(項目30)
a.対象から生体試料を得ることと;
b.HPVLPへの該試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合に対して適切な条件下で、高純度VP1粒子(HPVLP)と該生体試料を接触させることと;
c.HPVLPへの該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
d.参照用セットと検出レベルを相関させることと、を含み、JCV抗体結合が検出される場合は該対象のPMLのリスクが高い、
PMLを発現するリスクのある対象を特定する方法。
(項目31)
前記参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、項目29に記載の方法。
(項目32)
a.対象由来の試料中の抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.該試料中の抗JCV抗体レベルに従い、該対象に対するリスクレベルを判定することと、を含む、対象においてPMLリスクを特定する方法。
(項目33)
前記対象が、抗VLA4治療を受けているか又は抗VLA4治療を受けるための候補である、項目32に記載の方法。
(項目34)
前記抗VLA4治療がナタリズマブである、項目33に記載の方法。
(項目35)
前記対象が多発性硬化症又はクローン病と診断されている、項目32に記載の方法。
(項目36)
前記抗JCV抗体レベルが、1段階アッセイ又は2段階アッセイを用いて測定される、項目32に記載の方法。
(項目37)
前記1段階アッセイ又は前記2段階アッセイがELISAアッセイを含む、項目36に記載の方法。
(項目38)
c.段階(a)の初回試料の後の日付からの試料において、前記対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.段階(a)の初回試料からの試料中のレベルと後日からの試料中の抗JCV抗体レベルを比較することと;
e.段階(a)の初回試料の時間と比較して後の日付で該対象のPMLのリスクが上昇しているか否かを判定することと、をさらに含む、項目32に記載の方法。
(項目39)
a.第一の日付からの試料を用いて対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.第一の日付の対象の抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと;
c.第二の日付からの試料を用いて該対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.第二の日付の対象における抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと、を含む、対象においてPMLリスクを監視する方法。
(項目40)
a.VP1核酸を含む細胞を提供することと;
b.VP1を発現するための条件下で該細胞を培養することと;
c.該細胞を溶解することと;
d.該細胞溶解液をヌクレアーゼで処理することと;
e.該溶解液から細胞残屑を沈殿させることと;
f.塩析沈殿によって夾雑タンパク質を除去することと;
g.VP1含有上清を濃縮することと;
h.濃縮したVP1含有上清をダイアフィルトレーション処理することと;
iイオン交換精製によりVP1含有溶液を精製し、それによりHPVLPを含む標品を調製することと、
を含む、HPVLPを含む標品を調製する方法。
Claims (40)
- a.高純度VP1粒子(HPVLP)と対象から得られた生体試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合に適切な条件下で、HPVLPと該試料を接触させることと;
b.HPVLPに対する該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
c.参照用セットと検出レベルを相関させることと、
を含み、該参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、
方法。 - 前記偽陰性率が1%以下である、請求項1に記載の方法。
- HPVLPの少なくとも20%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、請求項1に記載の方法。
- HPVLPの少なくとも70%が、HPVLP中に5個を超えるVP1ポリペプチドを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記HPVLPが固体基質上に固定化される、請求項1に記載の方法。
- HPVLPが基本的にVP1ポリペプチドからなる、請求項1に記載の方法。
- HPVLPが、VP2又はVP3のうち少なくとも1つをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記HPVLP中のVP1が組み換えVP1である、請求項1に記載の方法。
- 前記HPVLP中の少なくとも1つのVP1が突然変異体VP1である、請求項1に記載の方法。
- 前記生体試料が血清である、請求項1に記載の方法。
- 前記試料が、免疫調節物質を処方されている対象、免疫調節物質を摂取することを検討している対象又は進行性多巣性白室脳症(PML)に罹患している疑いのある対象由来である、請求項1に記載の方法。
- 前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象においてPMLのリスクが上昇していることを示す、請求項1に記載の方法。
- 前記HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補ではないことを示す、請求項1に記載の方法。
- HPVLPへのJCV抗体結合を検出できないことが、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であることを示す、請求項1に記載の方法。
- HPVLPへのJCV抗体結合の検出が、前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であり、免疫調節物質による治療時に有害症状について監視が強化されることを示す、請求項1に記載の方法。
- 前記有害症状がPMLの発現を示す、請求項15に記載の方法。
- 前記免疫調節物質による治療を受けるものと認定された対象に、前記免疫調節物質が投与されることを特徴とする、請求項14に記載の方法。
- 初回の検査で生体試料がJCV抗体を有しないと判定された対象に、該初回の検査後、JCV抗体の存在についての少なくとも年に1回の再検査が行われることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 生体試料がJCV抗体を有すると判定された対象が、続いて、後日、JCV抗体を有さないと判定されることを特徴とする、請求項1に記載の方法。
- 前記対象が免疫調節物質での治療を受ける候補であると判定されることを特徴とする、請求項19に記載の方法。
- 前記免疫調節物質による治療時に有害症状について、前記対象に監視強化が行われることを特徴とする、請求項20に記載の方法。
- 前記免疫調節物質がナタリズマブである、請求項11又は13から15に記載の方法。
- 免疫調節物質を処方されているか又は免疫調節物質を摂取することを検討している対象が、前記免疫調節物質を以前投与されたことがない、請求項11に記載の方法。
- 前記対象が、前記免疫調節物質の投与を以前に1回以上受けている、請求項11に記載の方法。
- d.段階(a)の前に、前記対象からの生体試料の一部を溶液中でHPVLPと接触させ、段階(a)のHPVLPが固体基質に結合され、それにより二次試料が得られ;
e.(a)と同じ条件下でHPVLPと該二次試料を接触させ;
f.該二次試料中でのHPVLPへのJCV抗体結合レベルを検出し;
g.該二次試料中のJCV抗体の検出レベルを、HPVLPなしで該溶液とインキュベーションした場合の該生体試料中の結合レベルと比較することをさらに含み、
溶液インキュベーション試料と比較して、HPVLPとともに予めインキュベーションした試料における検出レベルが低下していることが、該試料がJCV抗体陽性であることを示し、検出レベルが不変であることが、該試料中にJCV抗体がないことを示す、請求項1に記載の方法。 - MS及びCD患者における使用について検証された、請求項25に記載の方法。
- HPVLPと、JCV抗体レベルを特定するためにアッセイを行うための少なくとも1つの試薬と、を含む、キット。
- 基本的にVP1五量体よりもサイズが大きいVP1含有粒子からなる、VP1粒子を含む溶液。
- VP1五量体以下のサイズであるVP1粒子を溶液から除去する方法を含む、VP1粒子の溶液を調製する方法。
- 高純度VP1粒子(HPVLP)への生体試料中のJCウイルス(JCV)抗体の結合の検出されたレベルを、PMLを発現するリスクのある対象を特定する指標とする方法であって、
a.HPVLPへの対象から得られた該生体試料中のJCV抗体の結合に対して適切な条件下で、HPVLPと該生体試料を接触させることと;
b.HPVLPへの該試料中のJCV抗体の結合レベルを検出することと;
c.参照用セットと検出レベルを相関させることと、
を含み、JCV抗体結合が検出される場合は該対象のPMLのリスクが高い、方法。 - 前記参照用セットが、偽陰性率が3%以下となるように選択される、請求項29に記載の方法。
- 試料中の抗JCV抗体レベルを、対象におけるPMLリスクを特定する指標とする方法であって、
a.対象由来の該試料中の抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.該試料中の抗JCV抗体レベルに従い、該対象に対するリスクレベルを判定することと、
を含む、方法。 - 前記対象が、抗VLA4治療を受けているか又は抗VLA4治療を受けるための候補である、請求項32に記載の方法。
- 前記抗VLA4治療がナタリズマブである、請求項33に記載の方法。
- 前記対象が多発性硬化症又はクローン病と診断されている、請求項32に記載の方法。
- 前記抗JCV抗体レベルが、1段階アッセイ又は2段階アッセイを用いて測定される、請求項32に記載の方法。
- 前記1段階アッセイ又は前記2段階アッセイがELISAアッセイを含む、請求項36に記載の方法。
- c.段階(a)の初回試料の後の日付からの試料において、前記対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.段階(a)の初回試料からの試料中のレベルと後日からの試料中の抗JCV抗体レベルを比較することと;
e.段階(a)の初回試料の時間と比較して後の日付で該対象のPMLのリスクが上昇しているか否かを判定することと、をさらに含む、請求項32に記載の方法。 - 抗JCV抗体レベルを、対象におけるPMLリスクを監視する指標とする方法であって、
a.第一の日付からの試料を用いて対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
b.第一の日付の対象の抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと;
c.第二の日付からの試料を用いて該対象における抗JCV抗体レベルを測定することと;
d.第二の日付の対象における抗JCV抗体レベルに基づきPMLのリスクを判定することと、
を含む、方法。 - a.VP1核酸を含む細胞を提供することと;
b.VP1を発現するための条件下で該細胞を培養することと;
c.該細胞を溶解することと;
d.該細胞溶解液をヌクレアーゼで処理することと;
e.該溶解液から細胞残屑を沈殿させることと;
f.塩析沈殿によって夾雑タンパク質を除去することと;
g.VP1含有上清を濃縮することと;
h.濃縮したVP1含有上清をダイアフィルトレーション処理することと;
iイオン交換精製によりVP1含有溶液を精製し、それによりHPVLPを含む標品を調製することと、
を含む、HPVLPを含む標品を調製する方法。
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