JP2013509396A5

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Publication number: JP2013509396A5
Application number: JP2012536000A
Authority: JP
Filing date: 2010-10-28
Publication date: 2013-12-19
Anticipated expiration: 2030-10-28

Claims

式：
(III) X₁-X"-X₂
[式中、X₁及びX₂は、各々、ペプチドフラグメントを示し、X"は、チオール官能基を含むアミノ酸残基を示す。]
のポリペプチドを製造する方法であって、式：
(I) X₁-N(CH₂CH₂SH)₂
のポリペプチドと、式：
(II) H-X"-X₂
のポリペプチドとのライゲーション反応の少なくとも1つのステップを含む、方法。
前記ライゲーション反応が、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物の存在下で、式：

のポリペプチドを、式(II)のポリペプチドに接触させることによって行われ、式(I')のポリペプチドはライゲーション反応のための式(I)のポリペプチドにインサイシュで還元される、請求項１記載の方法。
X₂が、式：
(IV) X₂'-(X_i"-X_i')_{i=3・・・n}
のペプチドフラグメントを示し、
nが３以上の整数であり、
3〜nの整数のiについて、各X_i"はチオール官能基を有するアミノ酸残基を示し、
2〜nの整数のiについて、各X_i'はペプチドフラグメントを示し、
以下：
式(I)のポリペプチドと式(II)のポリペプチドとのライゲーション反応のステップの前に、ライゲーション反応のn-2ステップの連続、1〜n-2の整数jについてライゲーション反応のj番目ステップが、式：
(V) H-X_n-j ^"-X_n-j ^'-N（CH₂CH₂SH）₂
（式中、残基X_n-j ^"のアミン官能基及び/又はチオール官能基は保護されている）
のポリペプチドと、式：
(VI) H-（X_j ^"-X_j ^'）_{i=（n-j＋1)・・・n}
のポリペプチドとのライゲーション反応によって、当該ライゲーション反応の最後に残基X_n-j ^"のチオール官能基の脱保護を経る、式：
(VII) H-（X_j ^"-X_j ^'）_{i=（n-j)・・・n}
のポリペプチドを形成するステップを含む、請求項１又は２記載の方法。
式(V)のポリペプチドと式(VI)のポリペプチドとのライゲーション反応のn-2ステップの1以上が、式：

のポリペプチドを、式：
(VI) H-（X_j ^"-X_j ^'）_{i=（n-j＋1)・・・n}
（式中、jは、1〜n-2の整数である）
のポリペプチドと、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物の存在下で接触させることによって行われる、請求項３記載の方法。
式：

（式中、X₂はペプチドフラグメントを示し、X"はチオール官能基を含むアミノ酸残基を示す。）
の環状ポリペプチドを製造する方法であって、式：
(XI) H-X^"-X₂-N（CH₂CH₂SH）₂
のポリペプチドとそれ自体とのライゲーション反応の少なくとも1つのステップを含む、方法。
前記ライゲーション反応が、式：

のポリペプチドを、ジスルフィド結合を還元する少なくとも1つの化合物と接触させることによって行われ、式(XI')のポリペプチドはライゲーション反応のための式(XI)のポリペプチドにインサイシュで還元される、請求項５記載の方法。
前記ライゲーション反応又はライゲーション反応（複数）が、中性の水溶液中で行われる、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
前記ライゲーション反応又はライゲーション反応（複数）が、ジスルフィド結合を還元する、トリス（2-カルボキシエチル）ホスフィン、4-メルカプトフェニル酢酸、ジチオスレイトール、ベンジルメルカプタン及びそれらの混合物から選択される、少なくとも1つの化合物の存在下で行われる、請求項１〜７のいずれか１項記載の方法。
式：
(I) X₁-N（CH₂CH₂SH）₂
のポリペプチド、又は式：

のポリペプチド（X₁は、ペプチドフラグメントを示し、基-N（CH₂CH₂SH）₂又は

は、C-末端位にあるペプチドフラグメントX₁のアミノ酸残基のC=O末端に結合される。）。
X₁が、2〜300アミノ酸残基を含む、請求項９記載の方法。
式：
(I) X₁-N（CH₂CH₂SH）₂
（X₁は、ペプチドフラグメントを示し、基-N（CH₂CH₂SH）₂は、C-末端位にあるペプチドフラグメントX₁のアミノ酸残基のC=O末端に結合される。）
のポリペプチドの製造方法であって、ペプチド合成の少なくとも1ステップ及びC-末端官能基化の1ステップを含む、方法。
ペプチド合成のステップが官能基化のステップに先行し、ペプチド合成の当該ステップが、式：
（IX) X₁-OH
のポリペプチドを供給し；そして、官能基化の当該ステップが以下：
式(IX)のポリペプチドを、液相中で、式：
(VIII) NH（CH₂-CH₂-S-G₁）₂
（G₁は保護基である）
のアミン化合物と反応させて、式(I)のポリペプチドを形成し；
場合により式(I)のポリペプチドを脱保護すること、
を含む、請求項１１記載の方法。
主骨格及びNH-（CH₂CH₂-S-Trt-）₂官能基又はNH-（CH₂CH₂-S-Trt-CO-NH-）₂官能基を含む、ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体であって、Trtは、場合により1以上の置換基によって置換されたトリフェニルメチル基を示し；当該NH-（CH₂CH₂-S-Trt-）₂官能基は、2つのトリフェニルメチル基によって当該主骨格に結合されるか、又は当該NH-（CH₂CH₂-S-Trt-CO-NH-）₂官能基は、2つのアミン基によって当該主骨格に結合されている、支持体。
主骨格及びG₂-AA-N-（CH₂CH₂-S-Trt-）₂官能基又はG₂-AA-N-（CH₂CH₂-S-Trt-CO-NH-）₂官能基を含む、ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体であって、Trtは、場合により1以上の置換基によって置換されたトリフェニルメチル基を示し；AAは、場合により1以上の保護基を有するアミノ酸を示し；G₂は、水素原子又はアミン官能基を保護する基を示し；当該G₂-AA-N-（CH₂CH₂-S-Trt-）₂官能基は、2つのトリフェニルメチル基によって当該主骨格に結合されるか、又は当該G₂-AA-N-（CH₂CH₂-S-Trt-CO-NH-）₂官能基は、2つのアミン基によって当該主骨格に結合されている、支持体。
前記主骨格が、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、セルロース、ポリエチレン、ポリエステル、ラテックス、ポリアミド、ポリジメチルアクリルアミド、ポリエチレングリコールポリスチレンコポリマー、ポリエチレングリコール-ポリアクリルアミドコポリマー骨格、及びその誘導体から選択される、請求項１３又は１４記載の支持体。
ポリペプチドの固相合成のためのポリマー樹脂支持体の製造方法であって、
ポリマー樹脂を供給し；
当該ポリマー樹脂を、式：
(VIII') NH（CH₂-CH₂-S-H）₂
のアミン化合物との反応によって官能基化すること、
を含む、方法。
前記ポリマー樹脂の官能基化のステップの前に、
式：
(VIII) NH（CH₂-CH₂-S-G₁）₂
（G₁は、保護基を示す）
のアミン化合物を供給し；
当該アミン化合物を脱保護して、式(VIII')のアミン化合物を得ること、
を含む、請求項１６記載の方法。
前記官能基化のステップが、ペプチド合成のステップに先行し；
前記官能基化のステップが以下：
プライマー支持体を供給するために、アミノ酸を、請求項１３又は１５記載のポリマー樹脂支持体に結合し；又は
請求項１４記載のポリマー樹脂支持体であるプライマー支持体を供給すること
を含み、
ペプチド合成の当該ステップが、当該プライマー支持体上のアミノ酸の結合の連続を含む、請求項１１記載の方法。
アミノ酸の前記ポリマー樹脂支持体への結合が、当該ポリマー樹脂支持体をアミノ酸ハライド又はアミノ酸及び活性化剤に接触させることを含む、請求項１８記載の方法。
式：

（X₁は、ペプチドフラグメントを示し、

はC-末端位にあるペプチドフラグメントX₁のアミノ酸残基のC=O末端に結合される）
のポリペプチドの製造方法であって、
式：
(I) X₁-N（CH₂CH₂SH）₂
のポリペプチドの酸化ステップを含む、方法。
請求項１１、１２、１８又は１９に記載の方法に従って式(I)及び/又は(V)又は(XI)のポリペプチドを製造するステップ、又は請求項２０記載の方法に従って式(I')及び/又は(V')又は(XI')のポリペプチドを製造するステップを含む、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
医薬組成物の製造方法であって、以下：
請求項１〜８及び２１のいずれか１項記載の方法に従ってポリペプチドを製造し、及び
1以上の薬学的に許容されるアジュバントと一緒に当該ポリペプチドを製剤化すること、
を含む、方法。
診断装置の製造方法であって、以下：
請求項１〜８及び２１のいずれか１項記載の方法に従ってポリペプチドを製造し、及び
診断的使用のために好適な形態で当該ポリペプチドを製剤化すること、
を含む、方法。