JP2013059346A - ワクチン及び遺伝子治療のための高力価組換えインフルエンザ・ウイルス - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、例えば、高力価インフルエンザ・ウイルスからの配列を含む、ヘルパー・ウイルスの不存在下で、高力価インフルエンザ・ウイルスを製造するための方法を提供する。
【選択図】なし
Description
本出願は、米国特許出願第60/473,798(2003年5月28日提出)(この記載内容は、参照により本明細書中で援用される)の出願日の35U.S.C.§ 119(e)下での利益を主張する。
政府権利の陳述
本発明は、アメリカ合衆国政府からの補助金を用いてなされた(国立アレルギーおよび感染性疾患研究所・公衆衛生総局からの補助金AI-47446)。アメリカ合衆国政府は、本発明に一定の権利を有する。
ネガティブ・センスRNAウイルスは、一般的ヒト病原体、例えば呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザ・ウイルス、麻疹ウイルスおよびエボラウイルス、ならびに家禽および畜牛産業に及ぼす大きな経済的影響を有する動物ウイルス(例えばニューカッスル病ウイルスおよび牛疫ウイルス)を含む7つの科(ラブドウイルス科、パラミクソウイルス科、フィロウイルス科、ボルナウイルス科、オルソミクソウイルス科、ブンヤウイルス科およびアレナウイルス科)に分類される。はじめの4つの科は非セグメント化ゲノムにより特性化され、一方、後者3つはそれぞれ6〜8、3または2つのネガティブ・センスRNAセグメントから成るゲノムを有する。ネガティブ・センスRNAウイルスの共通の特徴は、それらのRNAゲノムの負極性である;即ちウイルスRNA(vRNA)はmRNAと相補的であり、したがってそれ自体感染性でない。ウイルス転写および複製を開始するために、vRNAは、ウイルスポリメラーゼ複合体および核タンパク質により、それぞれプラスセンスmRNAまたはcRNAに転写されなければならない;A型インフルエンザウイルスに関しては、ウイルスポリメラーゼ複合体は3つのポリメラーゼタンパク質PB2、PB1およびPAで構成される。ウイルス複製中、cRNAは新しいvRNA分子の合成のための鋳型として役立つ。全てのネガティブ鎖RNAウイルスに関して、vRNAおよびcRNAの5’および3’末端の両方の非コード領域は、ウイルスゲノムの転写および複製に重要である。細胞またはウイルスmRNA転写体と違って、cRNAおよびvRNAはともに、5’末端にキャップ形成されず、あるいはまさに3’末端でポリアデニル化されない。
したがって必要とされるのは、完全にクローン化cDNAからのセグメント化ネイティブ鎖RNAウイルス、例えばオルソミクソウイルス、例えばA型インフルエンザウイルスを調製するための改良型方法である。
本発明は、高力価、例えば、109/mlより高い力価、例えば、1010/mlより高い、インフルエンザ・ウイルスのタンパク質をコードする単離及び/又は精製核酸分子(ポリヌクレオチド)、又はその部分、又は当該核酸分子の相補体を提供する。一実施態様では、当該単離及び/又は精製核酸分子は、HA、NA、PB1、PB2、PA、NP、M、又はNS、又は配列番号1〜8の内の1つによりコードされる対応のポリペプチドと実質的に同じ活性を有するその部分をコードする。本明細書中に使用するとき、「実質的に同じ活性」とは、対応の全長ポリペプチドの、約0.1%、1%、10%、30%、50%、90%、例えば、100%までの又はそれを超える活性、又は約80%、90%又はそれを超える検出可能なタンパク質レベルである、それぞれ、活性又はタンパク質レベルを含む。一実施態様では、前記単離及び/又は精製核酸分子は、配列番号1〜8のいずれか1によりコードされるポリペプチドと実質的に同じ、例えば、少なくとも80%、例えば、90%、92%、95%、97%又は99%のそれに対する連続アミノ酸配列同一性を有するポリペプチドをコードする。一実施態様では、前記単離及び/又は精製核酸分子は、配列番号1〜8のいずれか1と実質的に同じ、例えば、少なくとも50%、例えば、60%、70%、80%又は90%又はそれを超える、それに対する連続核酸配列同一性を有するヌクレオチド配列、又はその相補体を含み、そして一実施態様では、配列番号1〜8のいずれか1によりコードされるポリペプチドに、少なくとも80%、例えば、90%、92%、95%、97%又は99%の連続アミノ酸配列同一性を有するポリペプチドをコードする。一実施態様では、前記単離及び/又は精製核酸分子は、配列番号1〜8のいずれか1によりコードされるポリペプチドに対し、残基の、1以上の、例えば、2、5、10、15、20又はそれを超える、保存的アミノ酸置換、例えば、10%又は20%までの保存的置換をもつポリペプチドをコードする。「保存的アミノ酸置換」とは、類似の側鎖をもつ残基の交換可能性をいう。例えば、脂肪族側鎖をもつアミノ酸群は、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、及びソロイシンであり;脂肪族−水酸基側鎖をもつアミノ酸群は、セリンとトレオニンであり;アミド含有側鎖をもつアミノ酸群は、アスパラギンとグルタミンであり;芳香族側鎖をもつアミノ酸群は、フェニルアラニン、チロシン、及びトリプトファンであり;塩基性側鎖をもつアミノ酸群は、リジン、アルギニン、及びヒスチジンであり;そして硫黄含有側鎖をもつアミノ酸群は、システインとメチオニンである。好ましい保存的アミノ酸置換群は:バリン−ロイシン−イソロイシン;フェニルアラニン−チロシン;リジン−アルギニン;アラニン−バリン;グルタミン−アスパラギン;及びアスパラギン−グルタミンである。
定義
本明細書中で用いる場合、「単離されたおよび/または精製された」という用語は、それがin vivo物質に関連しない、あるいは実質的にin vitro物質から精製されるような本発明のベクター、プラスミドまたはウイルスのin vitro調製、単離および/または精製を指す。単離ウイルス調製物は一般にin vitro培養および増殖により得られ、そして他の感染性作因を実質的に含有しない。
A型インフルエンザウイルスは、10個のタンパク質の全体をコードする8つの一本鎖ネガティブ・センスウイルスRNA(vRNA)のゲノムを保有する。インフルエンザ・ウイルス生活環は、宿主細胞の表面のシアル酸含有受容体へのヘマグルチニン(HA)の結合と、その後の受容体媒介性エンドサイトーシスにより開始する。後期エンドソーム中の低pHがHAの立体配座シフトを誘発し、それによりHA2サブユニット(いわゆる融合ペプチド)のN末端を曝露する。融合ペプチドは、ウイルスおよびエンドソーム膜の融合を開始し、そしてマトリックスタンパク質(M1)およびRNP複合体が細胞質中に放出される。RNPは、vRNAをキャプシド形成する核タンパク質(NP)ならびにPA、PB1およびPB2タンパク質により形成されるウイルスポリメラーゼ複合体からなる。RNPは核中に輸送され、ここで転写および複製が起こる。RNAポリメラーゼ複合体は、3つの異なる反応を触媒する:5’キャップおよび3’ポリA構造を有するmRNAの合成、全長相補的RNA(cRNA)の合成、ならびに鋳型としてcDNAを用いたゲノムvRNAの合成。新規に合成されたvRNA、NPおよびポリメラーゼタンパク質は次に、RNPに集合され、核から輸出され、そして形質膜に輸送され、ここで子孫ウイルス粒子の出芽が起こる。ノイラミニダーゼ(NA)タンパク質は、シアリルオリゴ糖からシアル酸を除去し、したがって細胞表面から新規集合ビリオンを放出して、ウイルス粒子の自己凝集を防止することにより、感染において後期に重要な役割を演じる。ウイルス集合体はタンパク質−タンパク質およびタンパク質−vRNA相互作用を包含するが、しかしこれらの相互作用の性質はほとんど未知である。
本発明によれば、インフルエンザ・ウイルスの効率的複製を支持する任意の細胞、例えばインフルエンザウイルスの受容体である1つまたは複数のシアル酸のレベル低減または減少を発現する突然変異体細胞が本発明で用いられ得る。本方法により得られるウイルスは、再集合株ウイルスに作製され得る。
本発明のワクチンは、免疫原性タンパク質、例えば任意の病原体の糖タンパク質、例えば1つまたは複数の細菌、ウイルス、酵母または真菌からの免疫原性タンパク質を含み得る。したがって一実施形態では、本発明のインフルエンザ・ウイルスは、インフルエンザ・ウイルスまたはその他のウイルス性病原体、例えばレンチウイルス、例えばHIV、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、ヘルペスウイルス、例えばCMVまたはHSV、あるいは手足口病ウイルス(これらに限定されない)のためのワクチンベクターであり得る。
接種に、あるいは非経口または経口投与に適した本発明の製剤組成物は、弱毒化または不活性化インフルエンザ・ウイルスを含み、任意に滅菌水性または非水性溶液、懸濁液および乳濁液をさらに含む。組成物は、当該技術分野で既知のような助剤または賦形剤をさらに含み得る(例えばBerkow et al., 1987; Goodman et al., 1990; Avery’s Drug Treatment, 1987; Osol, 1980; Katzung, 1992参照)。本発明の組成物は一般に、個々の用量(単位用量)の形態で存在する。
組成物(またはそれが引き出す抗血清)の投与は、「予防的」または「治療的」目的のためであり得る。予防的に提供される場合、ワクチンである本発明の組成物は、病原体感染の任意の症候が症状発現するようになる前に提供される。組成物の予防的投与は、任意のその後の感染を防止するかまたは弱毒化するために役立つ。予防的に提供される場合、本発明の遺伝子療法組成物は、疾患の任意の症候が症状発現するようになる前に提供される。組成物の予防的投与は、疾患に関連した1つまたは複数の症候を防止するかまたは弱毒化するために役立つ。
本発明の組成物は、受動免疫法または能動免疫法により、1つまたは複数の病原体、例えば、1つまたは複数のインフルエンザ・ウイルス株に耐性を付与し得る。能動免疫法では、不活性化または弱毒化生ワクチン組成物が宿主(例えば哺乳類)に予防的に投与され、そして投与に対する宿主の免疫応答が感染および/または疾患に対して防御する。受動免疫法に関しては、引き指された抗血清が回収され、そして少なくとも1つのインフルエンザ・ウイルス株により引き起こされる感染を有することが疑われるレシピエントに投与される。本発明の遺伝子療法(治療)組成物は、能動免疫法により、予防的または治療的レベルの所望の遺伝子産物を産生し得る。
実施例1
材料および方法
細胞およびウイルス。293Tヒト胚腎細胞およびマディン・ダービーイヌ腎細胞(MDCK)を、それぞれ10%ウシ胎仔血清を補足したダルベッコ変法イーグル培地(DMEM)中、および5%ウシ新生仔血清を含有する変法イーグル培地(MEM)中に保持した。全ての細胞を、37℃で5%CO2中に保持した。インフルエンザ・ウイルスA/WSN/33(H1N1)およびA/PR/8/34(H1N1)を、10日齢卵中で増殖させた。
ウイルスRNAセグメント、3つのポリメラーゼサブユニットおよびNPタンパク質のプラスミド駆動発現による感染性ウイルスの生成。精製ビリオンから抽出されたRNPの混合物を用いた細胞のトランスフェクションは感染性インフルエンザ粒子を生じるが、しかしこの戦略は、8つの異なるin vitro生成RNPとともに用いられる場合、効率的であるとは思われない。完全にcDNAから感染性インフルエンザ・ウイルスを産生するために、8つのウイルスRNPをin vivoで生成した。したがって、ヒトRNAポリメラーゼIプロモーターおよびマウスRNAポリメラーゼIターミネーターに隣接されたA/WSN/33ウイルスの全長ウイルスRNAに関するcDNAを含有するプラスミドを調製した。原則として、真核生物細胞中へのこれら8つのプラスミドのトランスフェクションは、8つのインフルエンザvRNA全ての合成を生じるべきである。タンパク質発現プラスミドの同時トランスフェクションにより生成されるPB2、PB1、PAおよびNPタンパク質は次に、機能性vRNP中にvRNAを集合させ、これらは複製され、転写されて、最終的に感染性インフルエンザ・ウイルスを生成する(図3)。1×106個の293T細胞をタンパク質発現プラスミド(pcDNA762(PB2)1 μg、pcDNA774(PB1)1 μg、pcDNA787(PA)0.1 μg、およびpCAGGS−WSN−NP0/141 μg)、ならびに以下のRNAポリメラーゼIプラスミドの各々1 μg(pPolI−WSN−PB2、pPolI−WSN−PB1、pPolI−WSN−PA、pPolI−WSN−HA、pPolI−WSN−NP、pPolI−WSN−NA、pPolI−WSN−MおよびpPolI−WSN−NS)でトランスフェクトした。低減量のpcDNA787(PA)を用いることの決定は、過去の観察(Mena et al., 1996)、ならびにウイルス様粒子(VLP)の生成に関する最適条件に関するデータ(示されていない)を基礎にした。293T細胞のトランスフェクション後24時間目に、7×103 pfuのウイルス/mlが上清中に見出された(実験1、表1)が、これは、完全にプラスミドからA型インフルエンザ・ウイルスを産生する逆遺伝子学の能力を初めて実証した。
本明細書中に記載した逆遺伝学系は、完全にクローン化cDNAからA型インフルエンザウイルスを効率的に産生するのを可能にする。BridgenとElliott(1996)も、逆遺伝学を用いて、ブンヤムウエラウイルス(ブンヤウイルス科)を生成しているが、しかしそれは、ネガティブ・センスRNAの3つのセグメントのみを含有し、そしてその産生効率は低く、102 pfu/107細胞であった。ウイルス収率は実験間で異なったが、しかし8つのセグメントを含有するインフルエンザウイルスに関して、一貫して>103 pfu/106細胞を得た。本明細書中に上記した逆遺伝学系の高効率に関しては、いくつかの解釈がある。in vitroでRNPを産生する(Luytjes et al., 1989)代わりに、RNAポリメラーゼIを用いたvRNAの細胞内合成により、そしてウイルスポリメラーゼタンパク質およびNPのプラスミド駆動性発現により、RNPをin vivoで生成した。さらにまた、プラスミドで容易にトランスフェクトされる293T細胞の使用(Goto et al., 1997)は、細胞の大集団がウイルス産生のために必要なプラスミドの全てを受容することを保証した。さらに、増殖中の細胞中で最も豊富に発現される酵素の1つであるRNAポリメラーゼIにより産生される多数の転写体は、当該系の全体的効率に寄与すると思われた。これらの特徴は、vRNAのキャプシド形成、核中のRNPの生成、ならびに新規のウイルスが集合され、放出される細胞膜へのこれらの複合体の輸出のための、それ相当に多数のvRNA転写体および適量のウイルスタンパク質をもたらした。
インフルエンザA/Puerto Rico/8/34のための逆遺伝学系を開発するために、製造者のプロトコールに従って、RNeasy Mini kit (Qiagen)を用いて、A/Puerto Rico/8/34(H1N1)、Madison高増殖変種(PR8HG)の尿膜液からウイルスRNAを抽出した。cDNAを、MMLV-RTase(Promega)とUni12プライマーを用いて合成した。このcDNAを以下を用いて、PCRにより一晩増幅した:
上記PCR産物を、ゲル電気泳動により分離し、そしてゲル抽出キット(Qiagen)を用いてアガロース・ゲルから抽出した。抽出した遺伝子をTakaraライゲーション・キットver.II(Takara)を用いてpT7Blueブラント・ベクター(Novagen)内にライゲートした。5時間後、ライゲートされた遺伝子を、JM109(PB2, M,及びNS遺伝子)又はDH5alpha(PA, PB1,及びNP)内に遺伝子移入した。各遺伝子について6つのコロニーを、8時間TB中で培養した。プラスミドを、細菌コロニーから抽出し、そして遺伝子当り4つのコロニーを配列決定した。
Claims (15)
- インビトロにおいて、細胞を、感染性インフルエンザ・ウイルスを産生するために有効な量の、複数のインフルエンザ・ウイルス・ベクターを含む高力価再集合株組換えインフルエンザ・ウイルス生産のための組成物であって、該組成物は、以下の:
a)vRNA生産用ベクターであって、転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB1 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB2 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスHA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNP cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスM cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;及び転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNS cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクターを含むもの、ここで、前記PB1のためのcDNAは配列番号2によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記PB2のためのcDNAは配列番号3によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記PAのためのcDNAは配列番号1によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NPのためのcDNAは配列番号4によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記MのためのcDNAは配列番号5によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NSのためのcDNAは配列番号6によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NAのためのcDNAは配列番号8によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含まず、前記HAのためのcDNAはH5 HAであり、そして該a)のベクターは、RNAポリメラーゼIプロモーターとRNAポリメラーゼIターミネーターを含む;並びに
b)mRNA生産用ベクターであって、インフルエンザ・ウイルスPAをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;インフルエンザ・ウイルスPB1をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;インフルエンザ・ウイルスPB2をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;及びインフルエンザ・ウイルスNPをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクターを含むもの、
を含む、前記組成物と接触させるステップを含む、インフルエンザ・ウイルスの生産方法。 - 前記ウイルスを単離するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- インビトロにおいて、細胞を、インフルエンザ・ウイルスを産生するために有効な量の、
以下の:
転写終結配列に連結された3’インフルエンザ・ウイルス非コーディング配列を含む3’インフルエンザ・ウイルス配列に連結された着目のcDNAに連結された5’インフルエンザ・ウイルス非コーディング配列を含む5’インフルエンザ・ウイルス配列に連結されたプロモーターを含むベクターをさらに含む請求項1に記載の組成物、又は
前記着目のcDNAがセンス配向で存在する前記組成物、又は
前記着目のcDNAがアンチセンス配向で存在する前記組成物、又は
前記着目のcDNAが、病原体の免疫原性ポリペプチド又はペプチド、あるいは治療用ポリペプチド又はペプチドをコードするオープン・リーディング・フレームを含む前記組成物、
と接触させて前記着目のcDNAに相当する配列を含むインフルエンザ・ウイルスを生成するステップ、及び該ウイルスを単離するステップを含む、遺伝子デリバリー・ビヒクルの製造方法。 - インフルエンザ・ウイルスの生産方法であって、インビトロにおいて、細胞を、転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB1 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB2 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスHA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNP cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスM cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNS cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPAをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPB1をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPB2をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;及びインフルエンザ・ウイルスNPをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクターと、接触させて、感染性再集合株ウイルスを産生するステップを含み、
ここで、前記PB1のためのcDNAは配列番号2によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記PB2のためのcDNAは配列番号3によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記PAのためのcDNAは配列番号1によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NPのためのcDNAは配列番号4によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記MのためのcDNAは配列番号5によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NSのためのcDNAは配列番号6によりコードされるポリペプチドに少なくとも99%同一なアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする配列を含み、前記NAのためのcDNAは配列番号8によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含まず、前記HAのためのcDNAはH5 HAであり、そして前記vRNA生産用ベクターは、RNAポリメラーゼIプロモーターとRNAポリメラーゼIターミネーターを含む、前記生産方法。 - インフルエンザ・ウイルスHAをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;インフルエンザ・ウイルスNAをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;インフルエンザ・ウイルスM1をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;インフルエンザ・ウイルスM2をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクター;及びインフルエンザ・ウイルスNS2をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むベクターをさらに含む、請求項4に記載の方法。
- 転写終結配列に連結された3’インフルエンザ・ウイルス非コーディング配列を含む3’インフルエンザ・ウイルス配列に連結された着目のcDNAに連結された5’インフルエンザ・ウイルス非コーディング配列を含む5’インフルエンザ・ウイルス配列に連結されたプロモーターを含むベクターをさらに含む、請求項4に記載の方法。
- 前記着目のcDNAが、病原体の免疫原性ポリペプチド又はペプチド、あるいは治療用ポリペプチド又はペプチドをコードするオープン・リーディング・フレームを含む、請求項6に記載の方法。
- 前記着目のcDNAがセンス配向で存在する、請求項6に記載の方法。
- 前記着目のcDNAがアンチセンス配向で存在する、請求項6に記載の方法。
- 前記ウイルスを単離するステップをさらに含む、請求項6に記載の方法。
- 前記PB1、PB2、PA、NP、M、及びNSのためのcDNAが、配列番号1〜6のいずれか又はその相補鎖に少なくとも90%のヌクレオチド配列同一性をもつ、請求項4に記載の方法。
- 前記PB1、PB2、PA、NP、M、及びNSのためのcDNAが、配列番号1〜6をもつ、請求項4に記載の方法。
- 前記H5 HAのためのcDNAが、非病原性解裂部位をもつ突然変異体H5である、請求項1、3又は4に記載の方法。
- 前記再集合株の力価が、少なくとも1010EID50/mlである、請求項13に記載の方法。
- インフルエンザ・ウイルスの生産方法であって、インビトロにおいて、細胞を、転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB1 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスPB2 cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスHA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNP cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNA cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスM cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;転写終結配列に連結されたインフルエンザ・ウイルスNS cDNAに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むvRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPAをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPB1をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;インフルエンザ・ウイルスPB2をコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクター;及びインフルエンザ・ウイルスNPをコードするDNAセグメントに作用可能な状態で連結されたプロモーターを含むmRNA生産用ベクターと、接触させて、感染性再集合株ウイルスを産生するステップを含み、
ここで、前記PB1のためのcDNAは配列番号2によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記PB2のためのcDNAは配列番号3によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記PAのためのcDNAは配列番号1によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記NPのためのcDNAは配列番号4によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記MのためのcDNAは配列番号5によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記NSのためのcDNAは配列番号6によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含み、前記NAのためのcDNAは配列番号8によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含まず、そして前記HAのためのcDNAは配列番号7によりコードされるポリペプチドをコードする配列を含まない、前記生産方法。
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US8715940B2 (en) | 1999-04-06 | 2014-05-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of making recombinant influenza virus |
ES2217967B1 (es) * | 2003-03-31 | 2006-01-01 | Consejo Sup. Investig. Cientificas | Procedimiento de produccion de particulas virales vacias (vlps) del virus inductor de la bursitis infecciosa (ibdv), composiciones necesarias para su puesta a punto y su uso en la elaboracion de vacunas frente al ibdv. |
KR100908757B1 (ko) | 2003-05-28 | 2009-07-22 | 위스콘신 얼럼나이 리서어치 화운데이션 | 백신 및 유전자 요법을 위한 고 역가 재조합 인플루엔자바이러스 |
ES2307345B1 (es) * | 2004-01-21 | 2009-11-13 | Consejo Sup. Investig. Cientificas | Capsidas vacias quimericas del virus causante de la enfermedad de la bursitis infecciosa (ibdv), su procedimiento de obtencion y aplicaciones. |
ES2307346B1 (es) * | 2004-01-21 | 2009-11-13 | Consejo Sup. Investig. Cientificas | Capsidas vacias (vlps(-vp4)) del virus causante de la enfermedad de la bursitis infecciosa (ibdv), su procedimiento de obtencion y aplicaciones. |
CN101103103A (zh) | 2004-11-19 | 2008-01-09 | 威斯康星旧生研究基金会 | 具有串联转录单位的重组流感病毒载体 |
US7572620B2 (en) | 2005-01-11 | 2009-08-11 | Wisconsin Alumni Research Foundation | H3 equine influenza A virus |
US20060286591A1 (en) * | 2005-06-21 | 2006-12-21 | Medimmune Vaccines, Inc. | Methods and compositions for expressing negative-sense viral RNA in canine cells |
US7790434B2 (en) * | 2005-06-21 | 2010-09-07 | Medimmune, Llc | Methods and compositions for expressing negative-sense viral RNA in canine cells |
ES2310062B1 (es) * | 2005-07-15 | 2009-11-13 | Bionostra, S.L. | Particulas pseudovirales vacias quimericas derivadas del virus causante de la enfermedad de la bursitis infecciosa (ibdv), procedimiento de obtencion y aplicaciones. |
US7871626B2 (en) | 2005-08-04 | 2011-01-18 | St. Jude Children's Research Hospital | Modified influenza virus for monitoring and improving vaccine efficiency |
DK1951296T4 (da) * | 2005-11-01 | 2014-09-01 | Novartis Vaccines & Diagnostic | Celleafledte viral vacciner med lave niveauer af restcelle-DNA |
KR101484305B1 (ko) * | 2006-03-10 | 2015-01-19 | 위스콘신 얼럼나이 리서어치 화운데이션 | H3 말 인플루엔자 a 바이러스 |
JP2007259758A (ja) * | 2006-03-28 | 2007-10-11 | Wisconsin Alumni Research Foundation | H3型ウマa型インフルエンザウイルス |
JP2009532352A (ja) * | 2006-03-31 | 2009-09-10 | ダブリュエーアールエフ−ウィスコンシン アラムナイ リサーチ ファウンデーション | ワクチンのための高力価組み換えインフルエンザ・ウィルス |
ES2539514T3 (es) | 2006-04-19 | 2015-07-01 | Medimmune, Llc | Métodos y composiciones para expresar ARN viral de sentido negativo en células de canino |
AU2013204811B2 (en) * | 2006-04-19 | 2015-01-22 | Medimmune, Llc | Methods and compositions for expressing negative-sense viral rna in canine cells |
US20090017444A1 (en) * | 2006-06-09 | 2009-01-15 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Screening method for modulators of viral transcription or replication |
AU2007297801A1 (en) | 2006-07-14 | 2008-03-27 | Sanofi Pasteur Biologics Co. | Construction of recombinant virus vaccines by direct transposon-mediated insertion of foreign immunologic determinants into vector virus proteins |
JP2010504760A (ja) | 2006-09-29 | 2010-02-18 | サノフィ パスツール バイオロジクス カンパニー | 組換え型ライノウイルスベクター |
WO2008128176A1 (en) * | 2007-04-12 | 2008-10-23 | Nucleonics, Inc. | Influenza polynucleotides, expression constructs, compositions, and methods of use |
US9474798B2 (en) | 2007-06-18 | 2016-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines |
US9109013B2 (en) * | 2009-10-26 | 2015-08-18 | Wisconsin Alumni Research Foundation | High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in vero cells |
US10130697B2 (en) | 2010-03-23 | 2018-11-20 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses |
US20120015346A1 (en) * | 2010-07-08 | 2012-01-19 | New York Medical College | Influenza virus detection and diagnosis |
DK3447131T3 (da) * | 2011-06-24 | 2021-09-13 | Flugen Inc | Influenza a-virusmutanter |
CN103608453B (zh) * | 2012-03-02 | 2018-07-24 | 思齐乐 | 流感病毒重配 |
JP2013099339A (ja) * | 2013-01-04 | 2013-05-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation | H3型ウマa型インフルエンザウイルス |
US9950057B2 (en) | 2013-07-15 | 2018-04-24 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | High titer recombinant influenza viruses with enhanced replication in MDCK or vero cells or eggs |
KR101493613B1 (ko) * | 2013-10-25 | 2015-02-13 | 위스콘신 얼럼나이 리서어치 화운데이션 | H3 말 인플루엔자 a 바이러스 |
EP3119883A4 (en) * | 2014-03-17 | 2018-01-10 | Flugen, Inc. | Influenza virus vectors and uses therefor |
WO2015196150A2 (en) | 2014-06-20 | 2015-12-23 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses |
US10633422B2 (en) | 2015-06-01 | 2020-04-28 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA |
US10927151B2 (en) | 2015-06-09 | 2021-02-23 | Sanofi Pasteur Inc. | Methods of optimizing nucleotide sequences encoding engineered influenza proteins |
US9890363B2 (en) | 2015-07-06 | 2018-02-13 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication for vaccine development |
US10912864B2 (en) | 2015-07-24 | 2021-02-09 | Musculoskeletal Transplant Foundation | Acellular soft tissue-derived matrices and methods for preparing same |
JP6560056B2 (ja) * | 2015-08-07 | 2019-08-14 | ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション | H3型ウマa型インフルエンザウイルス |
RU2660562C2 (ru) * | 2016-03-30 | 2018-07-06 | Общество с ограниченной ответственностью "ФАРМИНТЕРПРАЙСЕЗ БИОТЕХ" | Аттенуированный гриппозный вектор и мукозальная универсальная гриппозная вакцина на его основе |
JP2019510481A (ja) * | 2016-02-19 | 2019-04-18 | ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション | ワクチン開発のための改善されたb型インフルエンザウイルス複製 |
JP2017038622A (ja) * | 2016-11-21 | 2017-02-23 | ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション | H3型ウマa型インフルエンザウイルス |
JP2022527235A (ja) | 2019-01-23 | 2022-06-01 | 義裕 河岡 | インフルエンザウイルスにおける付加的遺伝子に遺伝的安定性を付与する突然変異 |
US11851648B2 (en) | 2019-02-08 | 2023-12-26 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Humanized cell line |
US11390649B2 (en) | 2019-05-01 | 2022-07-19 | Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) | Influenza virus replication for vaccine development |
EP4022046A2 (en) | 2019-08-27 | 2022-07-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) | Recombinant influenza viruses with stabilized ha for replication in eggs |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999028445A1 (en) * | 1997-11-29 | 1999-06-10 | Cheil Jedang Corporation | Live attenuated influenza vaccine |
Family Cites Families (22)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4071618A (en) | 1974-09-03 | 1978-01-31 | Research Foundation For Microbial Diseases Of Osaka University | Process for preparing virus disease live vaccines |
JPS57136528A (en) | 1981-02-09 | 1982-08-23 | Hayashibara Biochem Lab Inc | Preparation of viral vaccine |
US5854037A (en) | 1989-08-28 | 1998-12-29 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Recombinant negative strand RNA virus expression systems and vaccines |
US5166057A (en) | 1989-08-28 | 1992-11-24 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Recombinant negative strand rna virus expression-systems |
US5840520A (en) | 1989-08-28 | 1998-11-24 | Aviron | Recombinant negative strand RNA virus expression systems |
PT702085E (pt) | 1994-07-18 | 2004-04-30 | Karl Klaus Conzelmann | Virus de arn de cadeia negativa nao segmentada infeccioso recombinante |
US5789229A (en) | 1994-09-30 | 1998-08-04 | Uab Research Foundation | Stranded RNA virus particles |
US5716821A (en) | 1994-09-30 | 1998-02-10 | Uab Research Foundation | Prevention and treatment of respiratory tract disease |
CA2257823A1 (en) | 1996-07-15 | 1998-01-22 | Government Of The United States Of America As Represented By The Secreta Ry Of The Department Of Health And Human Services National Institutes Of | Production of attenuated respiratory syncytial virus vaccines from cloned nucleotide sequences |
CA2291216A1 (en) | 1997-05-23 | 1998-11-26 | Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services National Institutes Of Health | Production of attenuated parainfluenza virus vaccines from cloned nucleotide sequences |
US6146642A (en) | 1998-09-14 | 2000-11-14 | Mount Sinai School Of Medicine, Of The City University Of New York | Recombinant new castle disease virus RNA expression systems and vaccines |
US8715940B2 (en) | 1999-04-06 | 2014-05-06 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Method of making recombinant influenza virus |
MXPA01010082A (es) * | 1999-04-06 | 2002-04-24 | Wisconsin Alumni Res Found | Virus recombinantes de influenza para vacunas y terapia de genes. |
WO2001079273A2 (en) | 2000-04-14 | 2001-10-25 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Viruses comprising mutated ion channel protein |
KR100848719B1 (ko) * | 2000-04-28 | 2008-07-25 | 세인트 쥬드 칠드런즈 리써치 호스피탈 | 감염성 인플루엔자 바이러스 생성용 dna 트랜스펙션시스템 |
EP1201760A1 (en) * | 2000-10-30 | 2002-05-02 | ARTEMIS Pharmaceuticals GmbH | Influenza virus vector for human dendritic cells |
ES2563402T3 (es) | 2002-02-13 | 2016-03-15 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Señal para el empaquetamiento de vectores del virus de la gripe |
JP2007525175A (ja) | 2003-04-23 | 2007-09-06 | ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファウンデイション | 突然変異した膜タンパク質をその機能性の一部ウイルス |
EP1631673A2 (en) | 2003-05-28 | 2006-03-08 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Recombinant influenza vectors with a polii promoter and ribozymes |
KR100908757B1 (ko) | 2003-05-28 | 2009-07-22 | 위스콘신 얼럼나이 리서어치 화운데이션 | 백신 및 유전자 요법을 위한 고 역가 재조합 인플루엔자바이러스 |
CN101103103A (zh) | 2004-11-19 | 2008-01-09 | 威斯康星旧生研究基金会 | 具有串联转录单位的重组流感病毒载体 |
JP2009532352A (ja) * | 2006-03-31 | 2009-09-10 | ダブリュエーアールエフ−ウィスコンシン アラムナイ リサーチ ファウンデーション | ワクチンのための高力価組み換えインフルエンザ・ウィルス |
-
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2006
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-
2012
- 2012-12-14 JP JP2012273898A patent/JP5695020B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
2015
- 2015-05-03 IL IL238584A patent/IL238584B/en active IP Right Grant
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO1999028445A1 (en) * | 1997-11-29 | 1999-06-10 | Cheil Jedang Corporation | Live attenuated influenza vaccine |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
JPN6010012194; Virology Vol.305, 200301, p.192-200 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ZA200510309B (en) | 2006-08-30 |
JP5215561B2 (ja) | 2013-06-19 |
IL171831A (en) | 2015-05-31 |
AU2004249133A1 (en) | 2004-12-29 |
JP5695020B2 (ja) | 2015-04-01 |
CN1826407B (zh) | 2013-09-11 |
NZ543446A (en) | 2008-06-30 |
EA012965B1 (ru) | 2010-02-26 |
HK1082769A1 (zh) | 2006-06-16 |
EP1631663B1 (en) | 2016-08-24 |
EP1631663A2 (en) | 2006-03-08 |
NO341506B1 (no) | 2017-11-27 |
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US8475806B2 (en) | 2013-07-02 |
ES2593082T3 (es) | 2016-12-05 |
CA2525953C (en) | 2023-10-10 |
CN1826407A (zh) | 2006-08-30 |
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WO2004112831A2 (en) | 2004-12-29 |
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US20050003349A1 (en) | 2005-01-06 |
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