JP2012522736A5 - - Google Patents

Claims (24)

1. 組換え卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）または組換えＦＳＨ変異型を精製する方法であって、
   前記ＦＳＨまたはＦＳＨ変異型を含有する液体を、
   − 陰イオン交換クロマトグラフィ、
   − 疎水性相互作用クロマトグラフィ、および
   − 色素アフィニティークロマトグラフィ
   にかける工程を含み、
   前記３つのクロマトグラフィはどの順序で行なってもよく、
   前記方法は、弱陰イオン交換クロマトグラフィも逆相クロマトグラフィも含まない方法。
2. 前記工程が、
   ａ）陰イオン交換クロマトグラフィ
   ｂ）疎水性相互作用クロマトグラフィ、および
   ｃ）色素アフィニティークロマトグラフィ
   の順に行なわれる請求項１に記載の方法。
3. 前記陰イオン交換クロマトグラフィは、−Ｎ⁺（ＣＨ₃）₃官能基を有する強陰イオン交換
   樹脂または同様の特性を有する樹脂を使用して行なわれる請求項１または２に記載の方法。
4. 前記疎水性相互作用クロマトグラフィは、フェニル基またはブチル基で誘導体化された架橋アガロースビーズから成る樹脂または同様の特性を有する樹脂を使用して行なわれる請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
5. 前記色素アフィニティークロマトグラフィは、任意のマトリックスに共有結合されたリガンドとしてシバクロンブルー３Ｇを用いて行なわれる請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
6. クロマトグラフィは、溶出液としてＴｒｉｓ−ＨＣｌ／塩化ナトリウム緩衝液を使用して７．０〜９．０の間の範囲のｐＨで行なわれる請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法
   。
7. 陽イオン交換クロマトグラフィをさらに含む請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記陽イオン交換クロマトグラフィが、膜に固定された強酸性の陽イオン交換体スルホン酸または同様の特性を有する交換体で行なわれる請求項７に記載の方法。
9. 前記工程が、
   ａ）陰イオン交換クロマトグラフィ、
   ｂ）疎水性相互作用クロマトグラフィ、
   ｃ）色素アフィニティークロマトグラフィ、および
   ｄ）陽イオン交換クロマトグラフィ
   の順に行われる請求項７または８に記載の方法。
10. さらなる陰イオン交換クロマトグラフィを含む請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
11. 前記陰イオン交換クロマトグラフィは、−Ｎ⁺（ＣＨ₃）₃官能基を有する強陰イオン交換
    樹脂または同様の特性を有する樹脂を使用して行なわれる請求項１０に記載の方法。
12. 前記陰イオン交換クロマトグラフィは、溶出液としてＴｒｉｓ−ＨＣｌ／塩化ナトリウム緩衝液を使用して７．０〜９．０の間の範囲のｐＨで行なわれる請求項１０または１１に記載の方法。
13. 前記工程が、
    ａ）第１の陰イオン交換クロマトグラフィ、
    ｂ）疎水性相互作用クロマトグラフィ、
    ｃ）色素アフィニティークロマトグラフィ、
    ｄ）任意選択の陽イオン交換クロマトグラフィ、および
    ｅ）第２の陰イオン交換クロマトグラフィ
    の順に行われる請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
14. サイズ排除クロマトグラフィをさらに含む請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
15. サイズ排除クロマトグラフィは、架橋アガロースとデキストランからなる球状複合体のマトリックスを使用して行なわれる請求項１４に記載の方法。
16. 前記工程が、
    ａ）第１の陰イオン交換クロマトグラフィ、
    ｂ）疎水性相互作用クロマトグラフィ、
    ｃ）色素アフィニティークロマトグラフィ、
    ｄ）任意選択の陽イオン交換クロマトグラフィ、
    ｅ）任意選択の第２の陰イオン交換クロマトグラフィ、および
    ｆ）サイズ排除クロマトグラフィ
    の順に行われる請求項１４または１５に記載の方法。
17. 前記工程が、
    ａ）第１の陰イオン交換クロマトグラフィ、
    ｂ）疎水性相互作用クロマトグラフィ、
    ｃ）色素アフィニティークロマトグラフィ、
    ｄ）膜陽イオン交換、
    ｅ）第２の陰イオン交換クロマトグラフィ、および
    ｆ）サイズ排除クロマトグラフィ
    の順に行われる請求項１４または１５に記載の方法。
18. １または複数の限外ろ過および／またはナノろ過工程をさらに含む請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
19. 金属イオンアフィニティークロマトグラフィは行なわれない請求項１〜１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 免疫親和性クロマトグラフィは行なわれない請求項１〜１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記ＦＳＨは配列番号１のαサブユニットと配列番号２のβサブユニットとを有する請求項１〜２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 請求項１〜２１のいずれか一項に記載の方法により得られたＦＳＨまたはＦＳＨ変異型。
23. 請求項２２に記載のＦＳＨまたはＦＳＨ変異型と、医薬として許容される賦形剤とを含有する医薬組成物。
24. 受胎障害の治療に使用するための医薬組成物であって、請求項２２に記載のＦＳＨもしくはＦＳＨ変異型を含む医薬組成物、または請求項２３に記載の医薬組成物。