JP2011530514A5 - - Google Patents
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Description
一実施形態において、本発明の抗体は、２５℃にてＳＰＲによって測定される場合、約１００ｎＭ未満、約５０ｎＭ未満、約２５ｎＭ未満、約１０ｎＭ未満、約５ｎＭ未満、約１ｎＭ未満、または約８００ｐＭ未満の、ヒトヘプシジン−２５（配列番号１）に対するＫＤを有する。好ましくは、本発明の抗体はまた、２５℃にてＳＰＲによって測定される場合、非ヒト哺乳動物種の少なくとも１つの成熟ヘプシジンポリペプチドに特異的に結合する。より好ましくは、抗体はまた、２５℃にてＳＰＲによって測定される場合、マウス、ラットおよびカニクイザルのヘプシジン−２５（それぞれ配列番号３、２および４）からなる群より選択される少なくとも１つのヘプシジン−２５ポリペプチドに特異的に結合する。さらにより好ましくは、抗体はまた、２５℃にてＳＰＲによって測定される場合、カニクイザルのヘプシジン−２５（配列番号４）に特異的に結合する。さらにより好ましくは、抗体はまた、２５℃にてＳＰＲによって測定される場合、マウスおよび／またはラットのヘプシジン−２５（それぞれ配列番号３および２）に特異的に結合する。
ヒト血清に加えられた合成ヘプシジン−２５タンパク質の回収を評価するために、合成ヘプシジン−２５タンパク質を４つの異なるヒト血清サンプル（各サンプルは、非常に低い濃度の内因性ヘプシジン−２５を含有する）に、それぞれ２５０、２５、２．５、および０．２５μｇ／Ｌの濃度にて加えた。これらのサンプルを、ＭＳＤサンドイッチ免疫アッセイを用いて分析した。平均（ＳＤ）結果は、試験されたヘプシジン−２５の全レベルにて８０〜１２０％の回収を示す、それぞれ２８７（６）μｇ／Ｌ、２４．２（０．２）μｇ／Ｌ、２．０（０．１）μｇ／Ｌ、および０．２３（０．０１）μｇ／Ｌであった。
Claims (12)
- 配列番号１に示すアミノ酸配列からなるヒトヘプシジン−２５に選択的に結合するモノクローナル抗体であって、
配列番号１７、１８、１９、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３
からなる６つのＣＤＲを含む、抗体。 - 配列番号１に示すアミノ酸配列からなるヒトヘプシジン−２５に選択的に結合するモノクローナル抗体であって、
（ｉ）配列番号２０、２１、２２、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３；
（ｉｉ）配列番号２０、２１、２３、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３；
（ｉｉｉ）配列番号２４、２５、２３、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３；
（ｉｖ）配列番号２６、２５、２７、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３；
（ｖ）配列番号２６、２５、２８、４２、４３および４４に示すアミノ酸配列をそれぞれ有するＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３、
からなる群より選択される６つのＣＤＲを含む、請求項１記載の抗体。 - 軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）ポリペプチドおよび重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）ポリペプチドを含む請求項１または２に記載の抗体であって、
（ｉ）前記ＬＣＶＲおよび前記ＨＣＶＲポリペプチドは、それぞれ配列番号５９および５８に示すアミノ酸配列を有するか；
（ｉｉ）前記ＬＣＶＲおよび前記ＨＣＶＲポリペプチドは、それぞれ配列番号６０および５８に示すアミノ酸配列を有するか；
（ｉｉｉ）前記ＬＣＶＲおよび前記ＨＣＶＲポリペプチドは、それぞれ配列番号６１および５８に示すアミノ酸配列を有するか；
（ｉｖ）前記ＬＣＶＲおよび前記ＨＣＶＲポリペプチドは、それぞれ配列番号６２および５８に示すアミノ酸配列を有するか；あるいは
（ｖ）前記ＬＣＶＲおよび前記ＨＣＶＲポリペプチドは、それぞれ配列番号６３および５８に示すアミノ酸配列を有する
、抗体。 - （ｉ）配列番号６７および６６にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｉｉ）配列番号６９および６８にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｉｉｉ）配列番号６９および７０にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｉｖ）配列番号７２および７１にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｖ）配列番号７４および７３にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｖｉ）配列番号７６および７７にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｖｉｉ）配列番号７６および７８にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｖｉｉｉ）配列番号７６および７９にそれぞれ示すアミノ酸配列；（ｉｘ）配列番号７６および８０にそれぞれ示すアミノ酸配列；または（ｘ）配列番号７６および８１にそれぞれ示すアミノ酸配列、を有する重鎖および軽鎖を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の抗体。
- 貧血を治療または予防するための請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体の使用。
- 貧血を治療または予防するための請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体を含む医薬組成物。
- 血清鉄濃度、網状赤血球数、赤血球数、ヘモグロビン、および／またはヘマトクリットを増加させる方法であって、ヒト対象に有効量の請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体を投与する工程を含む、方法。
- 組織または生体液のサンプル中のヘプシジン−２５の量を測定するための方法であって、
（ｉ）前記組織または生体液のサンプルを得る工程と、
（ｉｉ）前記サンプルを、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体と接触させる工程と、
（ｉｉｉ）定量的、半定量的または定性的に、前記サンプル中の前記抗体に結合するヘプシジン−２５の量を検出する工程と、
を含む、方法。 - 組織または生体液のサンプル中のヘプシジン−２５タンパク質の量を定量化するための方法であって、
（ｉ）固体支持体を、（ａ）請求項１〜４のいずれか一項に記載の一次抗体、または（ｂ）配列番号１を含むアミノ酸５〜２５内に含まれるエピトープに結合する一次抗体でコーティングする工程と、
（ｉｉ）前記サンプルを、前記抗体でコーティングされた固体支持体に付与する工程と、
（ｉｉｉ）未結合のサンプルを除去する工程と、
（ｉｖ）工程（ｉ）における前記一次抗体が（ａ）である場合、配列番号１を含むアミノ酸５〜２５内に含まれるエピトープに結合する二次抗体を前記固体支持体に付与する工程、または工程（ｉ）における前記一次抗体が（ｂ）である場合、請求項１〜４のいずれか一項に記載の二次抗体を前記固体支持体に付与する工程と、
（ｖ）未結合の二次抗体を除去する工程と、
（ｖｉ）定量的、半定量的または定性的に、前記サンプル中の前記二次抗体に結合されたヘプシジン−２５の量を検出する工程と、
を含む、方法。 - 前記一次抗体または前記二次抗体は、配列番号８２および８３に示すアミノ酸配列を有する軽鎖および重鎖を含む、請求項９に記載の方法。
- 前記サンプルは、血液、血漿、血清、尿、脳脊髄液（ＣＳＦ）、羊水、唾液、汗、腹水、リンパ液、嚢胞液、母乳、創傷液、またはそれらに由来し、前記サンプルは、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、ＥＬＩＳＡ、サンドイッチＥＬＩＳＡアッセイ、ラジオイムノアッセイ、沈澱反応または蛍光免疫測定法において、前記抗体と接触する、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の方法。
- 請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体を含む、ヘプシジン−２５を検出または定量化するためのキット。
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