JP2010513506A5

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Publication number: JP2010513506A5
Application number: JP2009542880A
Authority: JP
Filing date: 2007-12-18
Publication date: 2012-02-09
Anticipated expiration: 2027-12-18

Description

ＡｃｔＲＩＩａ−ｈＦｃおよびＡｃｔＲＩＩａ−ｍＦｃは共に、組換え発現にとって際立って扱いやすかった。図１に示されるように、タンパク質は、単一の十分に画定されたタンパク質のピークとして精製された。Ｎ末端の配列決定は、−ＩＬＧＲＳＥＴＱＥ（配列番号１１）の単一の配列を明らかにした。精製は、例えば、以下のうちの３またはそれ以上を任意の順序で含む一連のカラムクロマトグラフィー工程によって達成され得る：プロテインＡクロマトグラフィー、Ｑセファロースクロマトグラフィー、フェニルセファロースクロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィーおよびカチオン交換クロマトグラフィー。精製は、ウイルス濾過およびバッファの交換により完了され得る。ＡｃｔＲＩＩａ−ｈＦｃタンパク質は、サイズ排除クロマトグラフィーによって決定すると、９８％を超える純度、そして、ＳＤＳＰＡＧＥによって決定すると、９５％を超える純度まで精製された。

Claims

ヒト患者における赤血球レベルを増加させるための組成物であって、該組成物は、以下：
ａ）配列番号２に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｂ）配列番号３に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｃ）配列番号２から選択される少なくとも５０の連続するアミノ酸を含むポリペプチド；
ｄ）配列番号１６に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｅ）配列番号１７に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；および
ｆ）配列番号１６から選択される少なくとも５０の連続するアミノ酸を含むポリペプチド
からなる群より選択される有効量のＡｃｔＲＩＩポリペプチドを含む、組成物。
前記ポリペプチドが、以下の特徴：
ｉ）少なくとも１０^−７のＫ_ＤでＡｃｔＲＩＩリガンドに結合する、および
ｉｉ）細胞内のＡｃｔＲＩＩシグナル伝達を阻害する
のうち１つ以上を有する、請求項１に記載の組成物。
前記ポリペプチドが、ＡｃｔＲＩＩポリペプチドドメインに加えて、インビボ安定性、インビボ半減期、取り込み／投与、組織局在化もしくは分布、タンパク質複合体の形成および／または精製のうちの１以上を増強する１以上のポリペプチド部分を含む融合タンパク質である、請求項１に記載の組成物。
前記融合タンパク質が、免疫グロブリンＦｃドメインおよび血清アルブミンからなる群より選択されるポリペプチド部分を含む、請求項１に記載の組成物。
前記ポリペプチドが、グリコシル化アミノ酸、ＰＥＧ化アミノ酸、ファルネシル化アミノ酸、アセチル化アミノ酸、ビオチン化アミノ酸、脂質部分に結合されたアミノ酸または有機誘導体化因子に結合されたアミノ酸から選択される１以上の修飾されたアミノ酸残基を含む、請求項１に記載の組成物。
前記組成物が、血中のヘモグロビンレベルを増加させる、請求項１に記載の組成物。
貧血を処置するための組成物であって、該組成物は、有効量のアクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストを含む、組成物。
前記アクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストが、アクチビンまたはＡｃｔＲＩＩのアンタゴニストポリペプチドである、請求項７に記載の組成物。
前記アクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストポリペプチドが、以下：
ａ）配列番号２に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｂ）配列番号３に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｃ）配列番号２から選択される少なくとも５０の連続するアミノ酸を含むポリペプチド；
ｄ）配列番号１６に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；
ｅ）配列番号１７に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列を含むポリペプチド；および
ｆ）配列番号１６から選択される少なくとも５０の連続するアミノ酸を含むポリペプチド
からなる群より選択される、請求項８に記載の組成物。
前記アクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストポリペプチドが、以下の特徴：
ｉ）少なくとも１０^−７のＫ_ＤでＡｃｔＲＩＩリガンドに結合する、および
ｉｉ）細胞内のＡｃｔＲＩＩシグナル伝達を阻害する
のうち１つ以上を有する、請求項９に記載の組成物。
前記アクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストポリペプチドが、該アクチビン−ＡｃｔＲＩＩアンタゴニストポリペプチドに加えて、インビボ安定性、インビボ半減期、取り込み／投与、組織局在化もしくは分布、タンパク質複合体の形成および／または精製のうちの１以上を増強する１以上のポリペプチド部分を含む融合タンパク質である、請求項９に記載の組成物。
前記融合タンパク質が、免疫グロブリンＦｃドメインおよび血清アルブミンからなる群より選択されるポリペプチド部分を含む、請求項１１に記載の組成物。
前記アクチビンまたはＡｃｔＲＩＩのアンタゴニストポリペプチドが、グリコシル化アミノ酸、ＰＥＧ化アミノ酸、ファルネシル化アミノ酸、アセチル化アミノ酸、ビオチン化アミノ酸、脂質部分に結合されたアミノ酸または有機誘導体化因子に結合されたアミノ酸から選択される１以上の修飾されたアミノ酸残基を含む、請求項８に記載の組成物。
赤血球レベルを増加させる因子を同定する方法であって、該方法は、以下：
ａ）ＡｃｔＲＩＩポリペプチドのリガンド結合ドメインに対して、ＡｃｔＲＩＩリガンドと競合的に結合する試験因子を同定する工程；および
ｂ）非ヒト動物における赤血球レベルに対する該因子の効果を評価する工程
を包含する、方法。
ヒト患者における赤血球レベルを増加させるための医薬を作製するための、アクチビンまたはＡｃｔＲＩＩのアンタゴニストポリペプチドの使用。
ヒト患者における赤血球レベルを増加させるための組成物であって、該組成物は、有効量のＡｃｔＲＩＩ−Ｆｃ融合タンパク質を含み、該ＡｃｔＲＩＩ−Ｆｃ融合タンパク質は、以下：
ａ）配列番号３のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、
ｂ）配列番号３のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一なアミノ酸配列、
ｃ）配列番号３のアミノ酸配列、
ｄ）配列番号２のアミノ酸配列、
ｅ）配列番号７のアミノ酸配列、
ｆ）配列番号１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％同一なアミノ酸配列、
ｇ）配列番号１７のアミノ酸配列に対して少なくとも９５％同一なアミノ酸配列、
ｈ）配列番号１７のアミノ酸配列、
ｉ）配列番号１６のアミノ酸配列、
ｊ）配列番号２０のアミノ酸配列、および
ｋ）配列番号２１のアミノ酸配列
からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、組成物。
前記患者の骨格筋量の１５％未満の増加をもたらす、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、約２０〜３０日の期間にわたって、前記患者において少なくとも１００ｎｇ／ｍｌの血清濃度に達するように投与されるものであることを特徴とする、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、前記患者において、１００ｎｇ／ｍｌ〜１０００ｎｇ／ｍｌの範囲の血清濃度に達するように投与されるものであることを特徴とする、請求項１６に記載の組成物。
前記ＡｃｔＲＩＩ−Ｆｃ融合タンパク質が、１５日と３０日との間の血清半減期を有する、請求項１６に記載の組成物。
前記組成物が、週に１回以下の頻度で前記患者に投与されるものであることを特徴とする、請求項２０に記載の組成物。
前記組成物が、月に１回以下の頻度で前記患者に投与されるものであることを特徴とする、請求項２０に記載の組成物。