JP2009002709A - 蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の安定化方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】(1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を液状組成物中に共存させることを特徴とし、水溶性高分子化合物がポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドンから選ばれる少なくとも1種類であり、水溶性高分子化合物の重量平均分子量が200〜50000であり、水溶性高分子化合物の濃度が10mg/ml〜250mg/mlであることを特徴とする蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の優れた安定化方法。
【選択図】図2
Description
また、請求項2記載の方法は、請求項1記載の方法において、水溶性高分子化合物がポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドンから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする。
また、請求項3記載の方法は、請求項1記載の方法において、水溶性高分子化合物の重量平均分子量が200〜50000であることを特徴とする。
また、請求項4記載の方法は、請求項1記載の方法において、水溶性高分子化合物の濃度が10mg/ml〜250mg/mlであることを特徴とする。
また、請求項5記載の方法は、請求項1記載の方法において、アミノ酸又はその誘導体がグリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒスチジン、リジン、プロリン、グリシンメチルエステル、グリシンエチルエステル、アラニンメチルエステル、アルギニンメチルエステル、アルギニンエチルエステル、ヒスチジンメチルエステル、グルタミン酸ジメチルエステル、アスパラギン酸ジメチルエステル、リジンエチルエステル、プロリンメチルエステル、グリシンアミド、アラニンアミド、アルギニンアミド、アスパラギン酸アミド、グルタミン酸アミド、ヒスチジンアミド、リジンアミド、プロリンアミドから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする。
また、請求項6記載の方法は、請求項1記載の方法において、無機塩が塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸アンモニウム、チオシアン酸ナトリウム、チオシアン酸アンモニウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、酒石酸ナトリウムから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする。
また、請求項7記載の方法は、請求項1記載の方法において、アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩の濃度が10mM〜2Mであることを特徴とする。
また、本発明の蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の安定化剤は、請求項8記載の通り、(1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を有効成分とすることを特徴とする。
また、本発明の蛋白質を含む液状組成物は、請求項9記載の通り、(1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を蛋白質の安定化剤として共存させてなることを特徴とする。
また、本発明の生体成分測定用試薬は、請求項10記載の通り、請求項9記載の蛋白質を含む液状組成物からなることを特徴とする。
(実験方法)
50mMリン酸緩衝液(pH7.0)に卵白リゾチームを溶解し、卵白リゾチームの濃度が1.0mg/mlの溶液を調製した。この溶液に重量平均分子量が6000(平均重合度150)のポリエチレングリコール(和光純薬社製のPEG6000)を0mg/ml〜200mg/mlの濃度範囲で添加した。得られた液状組成物を98℃で10分間加熱し、15,000rpmで20分間遠心分離(株式会社日立ハイテクノロジーズ製のhimac CF15RXを使用)後、上清画分を取り分けた。次に0.5mg/mlのMicrococcus lysodeikticus溶液(Sigma社製)(50mMリン酸緩衝液、pH6.5)1480μlに、上記の上清画分20μlを添加し、分光光度計(日本分光社製のV−550)を用いて波長600nmによる吸光度にてリゾチームの活性測定を行った。
図1に、横軸を液状組成物のポリエチレングリコール濃度とし、縦軸をリゾチーム活性(加熱処理前の酵素活性を100%とした場合の加熱処理後の残存酵素活性)とするグラフを示す。図1から明らかなように、ポリエチレングリコールを添加しなかった場合には、リゾチーム活性はわずか1.5%であり、そのほとんどが熱失活してしまっていたが、ポリエチレングリコールを添加することで濃度依存的にリゾチーム活性は向上した。しかしながら、ポリエチレングリコールの濃度を200mg/mlにしても、リゾチーム活性は約60%どまりであり、ポリエチレングリコールの濃度を高濃度にしても熱失活を効果的に抑制することはできなかった。
(実験方法)
50mMリン酸緩衝液(pH7.0)に卵白リゾチームを溶解し、卵白リゾチームの濃度が1.0mg/mlの溶液を調製した。この溶液に重量平均分子量が6000(平均重合度150)のポリエチレングリコール(和光純薬社製のPEG6000)を0mg/ml、50mg/ml、100mg/mlの濃度で添加するとともにアミノ酸又はその誘導体を0mM〜300mMの濃度範囲で添加した。得られた液状組成物を98℃で10分間加熱し、15,000rpmで20分間遠心分離(株式会社日立ハイテクノロジーズ製のhimac CF15RXを使用)後、上清画分を取り分けた。次に0.5mg/mlのMicrococcus lysodeikticus溶液(Sigma社製)(50mMリン酸緩衝液、pH6.5)1480μlに、上記の上清画分20μlを添加し、分光光度計(日本分光社製のV−550)を用いて波長600nmによる吸光度にてリゾチームの活性測定を行った。
図2に、アミノ酸又はその誘導体としてアルギニン(和光純薬社製)を用いた場合の、横軸を液状組成物のアルギニン濃度とし、縦軸をリゾチーム活性(加熱処理前の酵素活性を100%とした場合の加熱処理後の残存酵素活性)とするグラフを示す。また、アミノ酸又はその誘導体としてアラニン(和光純薬社製)、グルタミン酸(和光純薬社製)、塩酸グアニジン(和光純薬社製)、アルギニンエチルエステル(Sigma社製)を用いた場合の図2と同様のグラフを、それぞれ図3〜図6に示す。図2〜図6から明らかなように、ポリエチレングリコールのみを100mg/mlの濃度で添加してもリゾチーム活性は20%以下であり、熱失活を効果的に抑制することはできなかった。しかしながら、アミノ酸又はその誘導体をさらに添加することで、熱失活の抑制効果は、ポリエチレングリコールとアミノ酸又はその誘導体をそれぞれ単独で添加した場合の熱失活の抑制効果に比較して格段に向上し、両者を併用することによる相乗効果が見られた。特に顕著な熱失活の抑制効果が得られたのはアルギニンとアルギニンエチルエステルを添加した場合であり、ポリエチレングリコールのみを100mg/mlの濃度で添加してもリゾチーム活性は10%程度であり、アルギニンのみを200mMの濃度で添加してもリゾチーム活性は25%程度であったのが、両者を併用することでリゾチーム活性は90%程度まで上昇し、熱失活を効果的に抑制することができた(図2)。同様に、ポリエチレングリコールのみを100mg/mlの濃度で添加してもリゾチーム活性は10%程度であり、アルギニンエチルエステルを15mMの濃度で添加してもリゾチーム活性は10%程度であったのが、両者を併用することでリゾチーム活性は85%程度まで上昇し、熱失活を効果的に抑制することができた(図6)。
(実験方法)
50mMリン酸緩衝液(pH7.0)に卵白リゾチームを溶解し、卵白リゾチームの濃度が1.0mg/mlの溶液を調製した。この溶液に重量平均分子量が6000(平均重合度150)のポリエチレングリコール(和光純薬社製のPEG6000)を0mg/ml、50mg/ml、100mg/mlの濃度で添加するとともに無機塩を0mM〜300mMの濃度範囲で添加した。得られた液状組成物を98℃で10分間加熱し、15,000rpmで20分間遠心分離(株式会社日立ハイテクノロジーズ製のhimac CF15RXを使用)後、上清画分を取り分けた。次に0.5mg/mlのMicrococcus lysodeikticus溶液(Sigma社製)(50mMリン酸緩衝液、pH6.5)1480μlに、上記の上清画分20μlを添加し、分光光度計(日本分光社製のV−550)を用いて波長600nmによる吸光度にてリゾチームの活性測定を行った。
図7に、無機塩として塩化ナトリウム(ナカライテスク社製)を用いた場合の、横軸を液状組成物の塩化ナトリウム濃度とし、縦軸をリゾチーム活性(加熱処理前の酵素活性を100%とした場合の加熱処理後の残存酵素活性)とするグラフを示す。また、無機塩として塩化アンモニウム(和光純薬社製)、硫酸アンモニウム(和光純薬社製)、ヨウ化アンモニウム(和光純薬社製)を用いた場合の図7と同様のグラフを、それぞれ図8〜図10に示す。図7〜図10から明らかなように、ポリエチレングリコールのみを100mg/mlの濃度で添加してもリゾチーム活性は10%程度であり、熱失活を効果的に抑制することはできなかった。しかしながら、無機塩をさらに添加することで、熱失活の抑制効果は、ポリエチレングリコールと無機塩をそれぞれ単独で添加した場合の熱失活の抑制効果に比較して格段に向上し、両者を併用することによる相乗効果が見られた。特に顕著な熱失活の抑制効果が得られたのは塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、ヨウ化アンモニウムを添加した場合であり、これらの無機塩を併用することで熱失活をほぼ完全に抑制することができた(図8〜図10)。
(実験方法)
50mMリン酸緩衝液(pH7.0)に卵白リゾチームを溶解し、卵白リゾチームの濃度が1.0mg/mlの溶液を調製した。この溶液に重量平均分子量が200(平均重合度5)、6000(平均重合度150)、20000(平均重合度500)のポリエチレングリコール(和光純薬社製のPEG200、PEG6000、PEG20000)を0mg/ml、50mg/mlの濃度で添加するとともにアミノ酸又はその誘導体としてアルギニンエチルエステル(Sigma社製)を0mM、25mMの濃度で添加した。得られた液状組成物を98℃で10分間加熱し、15,000rpmで20分間遠心分離(株式会社日立ハイテクノロジーズ製のhimac CF15RXを使用)後、上清画分を取り分けた。次に0.5mg/mlのMicrococcus lysodeikticus溶液(Sigma社製)(50mMリン酸緩衝液、pH6.5)1480μlに、上記の上清画分20μlを添加し、分光光度計(日本分光社製のV−550)を用いて波長600nmによる吸光度にてリゾチームの活性測定を行った。
図11に、ポリエチレングリコールの大きさとリゾチーム活性(加熱処理前の酵素活性を100%とした場合の加熱処理後の残存酵素活性)との関係を示す。図11から明らかなように、重量平均分子量が6000のポリエチレングリコールとアルギニンエチルエステルを併用した場合及び重量平均分子量が20000のポリエチレングリコールとアルギニンエチルエステルを併用した場合の熱失活の抑制効果は、重量平均分子量が200のポリエチレングリコールとアルギニンエチルエステルを併用した場合の熱失活の抑制効果に比較して優れていた。なお、アルギニンエチルエステルのかわりに、アルギニン(和光純薬社製)、アラニン(和光純薬社製)、塩酸グアニジン(和光純薬社製)、塩化ナトリウム(ナカライテスク社製)、塩化アンモニウム(和光純薬社製)を用いて同様の実験を行った場合でも、ポリエチレングリコールの大きさとリゾチーム活性との関係は、アルギニンエチルエステルを用いた場合と同じ傾向であった。
Claims (10)
- 蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の安定化方法であって、(1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を液状組成物中に共存させることを特徴とする方法。
- 水溶性高分子化合物がポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリビニルピロリドンから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 水溶性高分子化合物の重量平均分子量が200〜50000であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 水溶性高分子化合物の濃度が10mg/ml〜250mg/mlであることを特徴とする請求項1記載の方法。
- アミノ酸又はその誘導体がグリシン、アラニン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒスチジン、リジン、プロリン、グリシンメチルエステル、グリシンエチルエステル、アラニンメチルエステル、アルギニンメチルエステル、アルギニンエチルエステル、ヒスチジンメチルエステル、グルタミン酸ジメチルエステル、アスパラギン酸ジメチルエステル、リジンエチルエステル、プロリンメチルエステル、グリシンアミド、アラニンアミド、アルギニンアミド、アスパラギン酸アミド、グルタミン酸アミド、ヒスチジンアミド、リジンアミド、プロリンアミドから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- 無機塩が塩化ナトリウム、塩化アンモニウム、塩化カリウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化アンモニウム、硫酸ナトリウム、硫酸アンモニウム、チオシアン酸ナトリウム、チオシアン酸アンモニウム、クエン酸ナトリウム、クエン酸カリウム、酒石酸ナトリウムから選ばれる少なくとも1種類であることを特徴とする請求項1記載の方法。
- アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩の濃度が10mM〜2Mであることを特徴とする請求項1記載の方法。
- (1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を有効成分とすることを特徴とする蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の安定化剤。
- (1)水溶性高分子化合物と(2)アミノ酸又はその誘導体及び/又は無機塩を蛋白質の安定化剤として共存させてなることを特徴とする蛋白質を含む液状組成物。
- 請求項9記載の蛋白質を含む液状組成物からなることを特徴とする生体成分測定用試薬。
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013012022A1 (ja) * | 2011-07-19 | 2013-01-24 | 中外製薬株式会社 | アルギニンアミドまたはその類似化合物を含む安定なタンパク質含有製剤 |
JP2013199484A (ja) * | 2013-06-04 | 2013-10-03 | Sekisui Medical Co Ltd | 糖化アミノ酸及び/又は糖化ペプチドの製造方法 |
WO2019022094A1 (ja) * | 2017-07-24 | 2019-01-31 | テルモ株式会社 | 医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体の製造方法および医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体 |
CN117007791A (zh) * | 2023-07-18 | 2023-11-07 | 广州市进德生物科技有限公司 | 一种辣根过氧化物酶偶联物稀释保存液 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2015064591A1 (ja) | 2013-10-28 | 2015-05-07 | テルモ株式会社 | タンパク質水性懸濁剤 |
Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
JPH06273418A (ja) * | 1993-03-22 | 1994-09-30 | Tokuyama Soda Co Ltd | 保存安定剤 |
JPH09236603A (ja) * | 1995-12-26 | 1997-09-09 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 安定化方法 |
JP2001095563A (ja) * | 1999-08-06 | 2001-04-10 | Aventis Behring Gmbh | イオン交換クロマトグラフィーによって血液凝固第vii因子を活性化するプロテアーゼ、そのプロ酵素または両タンパク質の混合物を純粋形態で調製する方法 |
JP2004108850A (ja) * | 2002-09-17 | 2004-04-08 | Eiken Chem Co Ltd | 蛋白質の安定化方法 |
JP2005536452A (ja) * | 2002-02-05 | 2005-12-02 | デルタ バイオテクノロジー リミテッド | タンパク質調製物の安定化 |
WO2006072306A1 (de) * | 2004-12-24 | 2006-07-13 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Dreidimensionale nano- und mikrostrukturierte träger |
JP2007515397A (ja) * | 2003-11-08 | 2007-06-14 | プロセラ・バイオロジクス | 治療に使用するためのヒト血漿由来のインターα阻害タンパク質の調製方法及びその組成物 |
-
2007
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Patent Citations (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6197229A (ja) * | 1984-10-18 | 1986-05-15 | Chugai Pharmaceut Co Ltd | 安定なエリトロポエチン製剤 |
JPH06273418A (ja) * | 1993-03-22 | 1994-09-30 | Tokuyama Soda Co Ltd | 保存安定剤 |
JPH09236603A (ja) * | 1995-12-26 | 1997-09-09 | Wako Pure Chem Ind Ltd | 安定化方法 |
JP2001095563A (ja) * | 1999-08-06 | 2001-04-10 | Aventis Behring Gmbh | イオン交換クロマトグラフィーによって血液凝固第vii因子を活性化するプロテアーゼ、そのプロ酵素または両タンパク質の混合物を純粋形態で調製する方法 |
JP2005536452A (ja) * | 2002-02-05 | 2005-12-02 | デルタ バイオテクノロジー リミテッド | タンパク質調製物の安定化 |
JP2004108850A (ja) * | 2002-09-17 | 2004-04-08 | Eiken Chem Co Ltd | 蛋白質の安定化方法 |
JP2007515397A (ja) * | 2003-11-08 | 2007-06-14 | プロセラ・バイオロジクス | 治療に使用するためのヒト血漿由来のインターα阻害タンパク質の調製方法及びその組成物 |
WO2006072306A1 (de) * | 2004-12-24 | 2006-07-13 | Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der angewandten Forschung e.V. | Dreidimensionale nano- und mikrostrukturierte träger |
Cited By (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2013012022A1 (ja) * | 2011-07-19 | 2013-01-24 | 中外製薬株式会社 | アルギニンアミドまたはその類似化合物を含む安定なタンパク質含有製剤 |
JPWO2013012022A1 (ja) * | 2011-07-19 | 2015-02-23 | 中外製薬株式会社 | アルギニンアミドまたはその類似化合物を含む安定なタンパク質含有製剤 |
US9574005B2 (en) | 2011-07-19 | 2017-02-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stable Protein-containing preparation containing argininamide or analogous compound thereof |
JP2017222654A (ja) * | 2011-07-19 | 2017-12-21 | 中外製薬株式会社 | アルギニンアミドまたはその類似化合物を含む安定なタンパク質含有製剤 |
US10898572B2 (en) | 2011-07-19 | 2021-01-26 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Stable protein-containing preparation containing argininamide or analogous compound thereof |
JP2013199484A (ja) * | 2013-06-04 | 2013-10-03 | Sekisui Medical Co Ltd | 糖化アミノ酸及び/又は糖化ペプチドの製造方法 |
WO2019022094A1 (ja) * | 2017-07-24 | 2019-01-31 | テルモ株式会社 | 医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体の製造方法および医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体 |
JP2019023175A (ja) * | 2017-07-24 | 2019-02-14 | テルモ株式会社 | 医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体の製造方法および医療用タンパク質とポリアミノ酸とを含む複合体 |
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CN117007791A (zh) * | 2023-07-18 | 2023-11-07 | 广州市进德生物科技有限公司 | 一种辣根过氧化物酶偶联物稀释保存液 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
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